GUIA de Biologia Molecular v.2018-2

UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
SEMESTRE 2018- II
I – CICLO
GUÍA DE PRÁCTICA DE BIOLOGÍA

MOLECULAR
PROFESOR COORDINADOR:
Mg. EDITH RODRIGUEZ QUISPE
1
CURSO DE BIOLOGÍA MOLECULAR
PRÁCTICA N° 1
APLICACIÓN DEL MÉTODO CIENTÍFICO
I. OBJETIVOS
 Dar a conocer los lineamientos básicos del método científico y su aplicación

 Adiestrar al estudiante en el uso del método científico en el campo de la medicina
II. MATERIALES
 Lectura seleccionada a partir de una revista científica especializada
III. PROCEDIMIENTO
 Hacer una descripción de las diferentes etapas que comprende el Método Científico.
 Leer el artículo seleccionado rápidamente para tener una idea general del mismo.
 Proceder a leer el artículo cuidadosamente y analizarlo con el propósito de establecer lo
siguiente:
1. Reconocimiento del problema planteado

2. Formulación de la Hipótesis o de la pregunta principal
3. Formulación de Objetivos
4. Materiales y Métodos: la experimentación que demuestra la hipótesis o resuelve la
pregunta
5. Resultados y análisis de los resultados (discusión)
6. Conclusiones
IV. RESULTADOS
Entregar el reporte del artículo evaluado considerando todos los pasos del método científico.
 Cárdenas D, Lozano C, Castillo Z, et al. Frecuencia anticuerpos anti Toxoplasma gondii en gestantes de
Cúcuta. Colombia. Rev Med Hered. 2015; 26(4):230-237.
 Samamé LM, Samalvides F. Eficacia del proceso de limpieza y desinfección de los endoscopios de un
hospital de nivel III. Rev Med Hered. 2014; 25(4):208-214.
2
PRÁCTICA N° 2
RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS
I. OBJETIVO
 Reconocer las unidades monoméricas y macromoleculares en los carbohidratos como

componentes fundamentales de todos los seres vivos
II. MATERIALES
 Solución de Glucosa 1% (monosacárido)

 Solución de Fructosa 1% (monosacárido)
 Solución de Sacarosa 1% (disacárido, azúcar común)
 Solución de Maltosa 1% (disacárido)
 Solución de Almidón 1% (polisacárido)
 Reactivo de Molisch
 Ácido sulfúrico (H2SO4) concentrado
 Reactivo de Benedict
 Solución de Lugol
 Tubos de 13x100 mm
 Gradillas
 Pipeta de vidrio graduada de 5 mL
 Pipetas Pasteur
 Propipeta
 Pinzas de madera
 Mecheros, trípode, rejilla de asbesto
 Guantes
 Plumón marcador
III. PROCEDIMIENTO
3.1. Determinación General de Glúcidos (reacción de Molisch)
Los Glúcidos o Hidratos de carbono por acción deshidratante del ácido sulfúrico originan compuestos
derivados del furfural, los que en presencia del alfa-naftol presente en el reactivo de Molisch, formarán
un anillo de color púrpura.
3
Preparación:
1. En tubos rotulados de 13x100 mm colocar 1 mL de cada solución del glúcido 1%: Glucosa,
Fructosa, Sacarosa, Maltosa y Almidón.
2. Añadir a cada tubo 2 gotas del Reactivo de Molisch y agitar suavemente.
3. Agregar lentamente por la pared del tubo, sin agitar, 1 mL de ácido sulfúrico (H2SO4)
concentrado.
4. Observar la formación de un anillo color púrpura en la zona de interfase si la reacción es
positiva.
5. Determinar si la reacción de Molisch es positiva o negativa para cada uno de los glúcidos.
3.2. Determinación de Azúcares Reductores (reacción de Benedict)
Un azúcar reductor es aquel que en su forma cíclica tiene el grupo OH del carbono anomérico libre y
por tanto puede convertirse en su forma lineal abierta que contiene (potencialmente) el grupo aldehído
con capacidad reductora. El azúcar reductor al ser sometido a la acción del calor en el medio alcalino del
reactivo de Benedict, se isomeriza formando cuerpos fuertemente reductores para el ion cúprico (Cu+2)
del reactivo que es reducido a ion cuproso (Cu+1) el que reaccionará con los iones OH- del medio
precipitando como óxido cuproso (Cu2O) que es de color rojo ladrillo.
Preparación
1. En tubos rotulados de 16x150 mm colocar 2 mL de cada solución de glúcido 1%: Glucosa,

Fructosa, Sacarosa, Maltosa y Almidón.
2. Añadir a cada tubo 1 mL de Reactivo de Benedict.
3. Someter los tubos a ebullición en agua hirviendo en un beaker por 5 min. Retirarlos con ayuda
de una pinza.
4. Observar la formación del óxido cuproso que es color anaranjado hasta rojo ladrillo si la
reacción es positiva.
5. Determinar si la reacción de Benedict es positiva o negativa para cada uno de los glúcidos.
3.3. Determinación de Almidón (reacción de Lugol)
El ion triyoduro ( I3 --) del Lugol es adsorbido por el almidón a nivel de las hélices de la amilosa formando
complejos de color azul negruzco (yoduro de almidón).
Preparación
1. En un tubo de 16x150 mm colocar 2 mL de solución de Almidón al 1%.

2. Agregar 3 gotas de Lugol y agitar.
3. Observar la formación de color azul negruzco si la reacción es positiva.
4. Calentar el tubo hasta observar algún cambio de color y luego dejar enfriar el tubo.
5. Observar los cambios de color e interprete el efecto del calor y enfriamiento en el proceso.
IV. CUESTIONARIO P#2
1. Diga cuáles son las principales fuentes de carbohidratos en nuestra dieta y cuál es el
requerimiento diario.
2. Explique por qué la lactosa es un azúcar reductor. Esquematice la molécula de lactosa
señalando el grupo OH del carbono anomérico libre que reduce al cobre en la reacción de
4
Benedict.
3. Explique brevemente por qué se produce la intolerancia la lactosa.

4. Establezca las semejanzas y diferencias (estructurales y funcionales) entre el almidón y el
glucógeno.
V. INFORME
Carátula
Introducción
Marco teórico: 2pp: Carbohidratos y fundamentos de las 3 reacciones
Resultados: Esquemas y tablas simples de la reacción (+) o (-) para
cada glúcido evaluado en cada una de las 3 pruebas.
Conclusiones: Interpretación de los resultados explicando por qué el glúcido da una reacción (+)
o (-)
Cuestionario
Referencias bibliográficas (estilo Vancouver)
5
PRÁCTICA N° 3
RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS Y PROTEÍNAS EN MATERIAL BIOLÓGICO
I. OBJETIVO
 Reconocer compuestos orgánicos como los lípidos y las proteínas que son constituyentes
importantes en todos los seres vivos
II. MATERIALES
 Aceite comestible ←
 Albúmina al 2%
 Leche ←
 Alcohol
 Cloroformo
 Éter etílico
 Solución alcohólica de Sudán III
 Tinta roja
 Hidróxido de sodio NaOH 20%
 Hidróxido de sodio NaOH 40%
 Sulfato de cobre CuSO4 1%
 Ácido nítrico HNO3 concentrado
 Beakers de 50 mL
 Mechero
 Pipetas Pasteur de plástico de 2,5 mL
 Guantes
 Pinza de madera
 Gradilla para tubos
III. PROCEDIMIENTO
3.1 DETERMINACIÓN DE LÍPIDOS
3.1.1 Solubilidad de los Lípidos
Los lípidos son insolubles en agua y solubles en solventes orgánicos como el éter y
cloroformo.
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Preparación:
1. En cuatro tubos rotulados de 13x100 mm colocar 1 mL de aceite.

2. Agregar los solventes en el siguiente orden:
tubo N° 1: agua destilada 1 mL

tubo N° 2: alcohol 1 mL
tubo N° 3: cloroformo 1 mL
tubo N° 4: éter etílico 1 mL
1. Agitar cada uno de los tubos con la misma intensidad.

2. Observar cada tubo y determinar el grado de solubilidad de mayor a menor.
3. Interpretar la diferencia de solubilidad del lípido en los diferentes solventes.
3.1.2 Solubilidad y Tinción en Sudán III
El Sudán III es colorante preparado en una solución alcohólica. Es un tinte diazo altamente
soluble en lípidos tiñéndolos en la gama del rojo cereza al anaranjado.
Preparación:
1. En dos tubos de 13x100 mm colocar 1 mL de aceite.

2. Agregar a un tubo 1 mL de Sudán III y al otro tubo agregar 1 mL de tinta roja, agitar y dejar
reposar.
3. Observar la coloración producida en la zona del aceite en uno de los tubos e interpretar los
resultados.
3.1.3 Saponificación
Las grasas (acilglicéridos, especialmente los triglicéridos) reaccionan en caliente con hidróxido
sódico descomponiéndose en ácidos grasos y glicerina. La saponificación se produce cuando
los ácidos grasos libres se combinan con los iones sodio del hidróxido para dar jabones, que
son por ende las sales sódicas de los ácidos grasos.
Preparación
1. En un tubo 16x150 mm colocar 2 mL de aceite y 2 mL de hidróxido de sodio NaOH 20%.

2. Agitar enérgicamente y colocar el tubo en baño maría en ebullición por 20 a 25 min.
3. Observar la formación de 3 fases en el tubo: una inferior, que contiene la solución de soda
sobrante junto con la glicerina formada; otra intermedia, semisólida, que es el jabón
formado; y la superior, que contiene el aceite inalterado.
3.2 DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS
3.2.1 Reacción de Biuret
Los compuestos que contienen dos o más enlaces peptídicos forman un complejo con las
sales de cobre en un medio fuertemente alcalino, dando un color púrpura o violeta, debido a la
formación de un complejo de coordinación entre los iones del Cu+2 y los pares de electrones
no compartidos del nitrógeno que forma parte de los enlaces peptídicos.
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Preparación
1. En dos tubos 16x150 mm colocar por separado 2 mL de la solución de albúmina 2% (o

solución de clara de huevo al 10%) y 2 mL de leche.
2. Agregar a cada tubo 2mL de hidróxido de sodio NaOH 40% y mezclar.
3. Añadir a cada tubo 6 gotas de sulfato de cobre CuSO4 1%.
4. Incubar los tubos a 37º C por 10 min.
5. Observar la coloración producida y determinar si la reacción es positiva o negativa.
6. Interpretar los resultados.
3.2.2 Reacción Xantoproteica
Se emplea para determinar la presencia de proteínas solubles en una solución, empleando

ácido nítrico (HNO3) concentrado. Las proteínas solubles que presentan aminoácidos
aromáticos (fenilalanina, tirosina y triptófano), dan derivados nitrogenados que se colorean de
amarillo.
Preparación
1. En un tubo de 16x150 mm colocar 2 mL de la solución de albúmina al 2% o clara de huevo

al 10%.
2. Agregar 2 mL de ácido nítrico (HNO3) concentrado.
3. Observar la formación de un precipitado blanco y hervir por 3 min.
4. Observar la coloración producida y determinar si la reacción es positiva o negativa.
1. Defina emulsión y micela.

2. ¿Cuál es la semejanza y diferencia química entre el ácido araquídico y el ácido
araquidónico?
3. Desarrolle la reacción de saponificación entre el ácido oleico y el hidróxido de sodio.
4. ¿Qué aminoácidos presentan anillos bencénicos? Esquematice cada uno de ellos.
5. ¿Qué supone la desnaturalización de una proteína?
6. ¿Qué es la proteinuria?
V. INFORME
Carátula- Introducción- Marco teórico- Resultados y Fundamentos- Conclusiones- Cuestionario-

Referencias bibliográficas (estilo Vancouver).
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PRÁCTICA N° 4
EXTRACCIÓN DE ÁCIDO DESOXIRRIBONUCLEICO (ADN)
I. OBJETIVOS
 Utilizar un método sencillo de extracción de ADN a partir de células eucariotas poniendo

de manifiesto la estructura fibrilar del ácido nucleico
 Reconocer algunos componentes estructurales del ADN
II. MATERIALES
 Muestras de origen vegetal y animal

 Solución salina de NaCl 0,9% --- mantener a 4°C
 Solución de lisis (EDTA, SDS, NaCl) --- mantener en frío
 Acetato de sodio 3M
 Etanol 96° --- mantener en frío
 Solución salina citratada
 Azul de metileno
 ADN extraído en la práctica
 Reactivo de Bial
 Tubos de ensayo 16x150 mm
 Beakers de 20 mL
 Beaker de 500 mL
 Baguetas
 Mortero y pilón
 Embudos
 Mechero
 Pinzas de madera
 Pipetas de 5mL
 Propipeta
 Gasa de 10x15cm (3)
 Gradilla para tubos
 Tijeras
III. PROCEDIMIENTO
3.1 Extracción de ADN
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Las moléculas de ADN en una célula eucariota se encuentran dispersas en el núcleo y enrolladas
alrededor de moléculas de proteínas para formar la cromatina. Para la extracción del ADN de una
célula se requiere homogenizar la muestra del tejido para proceder al lisado de membrana, la
liberación del ADN, la separación de proteínas asociadas a dicha macromolécula y su posterior
obtención bajo la forma de fibras.
Preparación
1. En un mortero colocar la muestra (3 fresas sin hojas y/o un trozo de plátano de 3 cm) e
incorporar 2 mL de NaCl 0,9% triturando por 1 min.
2. Añadir 10 mL de la solución de lisis y seguir triturando (~5 min) hasta obtener una masa
homogénea y semilíquida.
3. Agregar 2 mL de acetato de sodio a la preparación, mezclar, para luego dejar reposar por 5
min.
4. Filtrar la preparación en un tubo de 16x150mm con la ayuda de un embudo cubierto con
gasa.
5. Trasvasar 5-8 mL del filtrado a un beaker pequeño e incorporar por las paredes 2 volúmenes
de etanol frio e introducir rápidamente una bagueta delgada y girar sobre su mismo eje a fin
de recuperar el ADN bajo la forma de fibras.
6. Colocar la bagueta con el ADN extraído en un tubo 16x150 mm conteniendo 1 mL de solución
salina citratada para resuspenderlo y reservarlo para su uso en el siguiente experimento.
7. Obtener más fibra de ADN para reconocer su carácter ácido. Para ello dejar caer en las
hebras un colorante básico como el azul de metileno.
3.2 Identificación de Pentosas (reacción de Bial)
Las pentosas se deshidratan en una solución ácida dando furfural que al reaccionar con el orcinol
del reactivo de Bial y en presencia de FeCl3, dan un producto de condensación de color verde-
azulado.
Preparación
1. En un tubo 16x150 mm colocar 1 mL de ADN extraído en el experimento anterior y en otro

tubo colocar 1 mL agua destilada.
2. Agregar a cada tubo 3 mL de Reactivo de Bial.
3. Calentar cuidadosamente cada tubo en la llama de un mechero hasta que la solución
comience a hervir.
4. Observar y anotar el color que aparece en cada tubo de ensayo determinando si la reacción
es positiva o negativa.
5. Interpretar el resultado señalando el nombre de la pentosa presente en el ADN.
1. ¿Cuál es la composición básica del ADN?

2. ¿Qué proteína está asociada al ADN, cuáles son sus características?
3. ¿Por qué el ADN absorbe luz UV a 260 nm de longitud de onda?
V. INFORME:
Carátula- Introducción- Marco teórico- Resultados y Fundamentos- Conclusiones-

Cuestionario- Referencias bibliográficas (estilo Vancouver).
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PRÁCTICA Nº 5
MICROSCOPÍA: ESTUDIO Y MANEJO DEL MICROSCOPIO
I. OBJETIVOS
 Conocer e identificar correctamente las partes ópticas y mecánicas del microscopio

óptico compuesto
 Familiarizar al alumno con el uso correcto, cuidado y conservación del microscopio
 Calcular la magnificación (aumento) total de la imagen del objeto observado
II. MATERIALES
 Microscopios
 Láminas portaobjetos
 Láminas cubreobjetos
 Láminas preparadas de artrópodo (Pulex irritans “pulga” o Pediculus humanus “ piojo”)
 Suero fisiológico
 Pipeta Pasteur
 Plumón indeleble
 Papel lente
 Hebra de algodón
 Letra “e” en papel
.
III. PARTES DEL MICROSCOPIO
Reconocer cada una de las siguientes partes del microscopio:
PARTE MECÁNICA PARTE ÓPTICA
 Brazo y Pie  Ocular

 Tubo portalentes o cabezal  Objetivos
 Carro o cremallera  Diafragma
 Tornillos macrométrico y micrométrico  Condensador
 Revólver  Foco
 Platina
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IV. SISTEMAS QUE COMPRENDE EL MICROSCOPIO
1. Sistema de Soporte: comprende el brazo, el pie, el tubo ocular, el revólver y la platina.

2. Sistema de Iluminación: comprende el foco, el condensador y el diafragma.
3. Sistema de Ajuste: comprende el tornillo macrométrico, el tornillo micrométrico y la
cremallera.
4. Sistema de Aumento: comprende el ocular generalmente de 10x ó 15x y los objetivos de 4x,
10x, 40x, y 100x (objetivo de inmersión).
VI. PROCEDIMIENTO
1. Preparar láminas húmedas (una gota de suero fisiológico más la muestra) con una hebra de
algodón y una letra “e” en posición de lectura.
2. Observar dichas muestras con los objetivos 4x, 10x y 40x.
3. Verificar con la lámina de la letra “e”, que los movimientos en estos sistemas son invertidos.
4. Observar la lámina preparada de artrópodo con los objetivos de 4x y 10x.
5. Calcular el aumento total de acuerdo al objetivo utilizado multiplicando el aumento del ocular
por el aumento del objetivo. Ejm: para un ocular de 10x y un objetivo de 40x el aumento total
es de 400x (es decir, 400 veces).
VII. CUESTIONARIO P#5
1. Defina qué es una imagen real y qué es una imagen virtual.

2. ¿Cuáles son las unidades de medida de longitud empleadas en microscopía?
3. Defina aumento y resolución del microscopio.
4. ¿Cuáles son las diferencias entre un microscopio óptico y un microscopio electrónico?
VIII. INFORME
Carátula- Introducción- Marco teórico- Resultados: observaciones (esquemas) con su descripción-

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Conclusiones- Cuestionario- Referencias bibliográficas (estilo Vancouver).

PRÁCTICA N° 6
OBSERVACIONES CELULARES: PROCARIOTAS (BACTERIAS)
Existen dos tipos de células, las procariotas y las eucariotas, que difieren principalmente en la
organización de su material genético. Las procariotas no poseen envoltura nuclear, su ADN circular
ocupa dentro de la célula un lugar llamado nucleoide y se halla en contacto directo con el
protoplasma.
I. OBJETIVOS
 Identificar distintos tipos de bacterias de acuerdo a su forma y tinción

 Comprender el principio de la Coloración de Gram
II. MATERIALES
 Palitos mondadientes
 Solución salina fisiológica (NaCl 0,9%)
 Solución de Mercurio cromo
 Solución de Violeta de genciana
 Colorante Azul de metileno
 Yogurt probiótico Laive o yogurt natural artesanal (casa naturista)←
 Lamillas cubreobjetos
 Varilla de coloración
 Láminas con tinción de Gram de Escherichia coli (bacilos) y Streptococcus (cocos)
 Láminas con tinción de Ziehl-Neelsen de Mycobacterium tuberculosis
 Aceite de inmersión
 Alcohol isopropílico
 Papel lente
 Microscopios
 Guantes
 Recipiente para descarte
III. PROCEDIMIENTO
Para observar las láminas a 100x usando el aceite de inmersión siga las instrucciones del profesor.
3.1 Observación de Microbiota en cavidad bucal (Tinción de Vagó)
1. Colocar una gota de solución fisiológica sobre una lámina.

2. Con el mondadientes obtener una muestra de sarro dental, colocarla sobre la gota de
solución fisiológica y esparcir con movimientos circulares.
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3. Dejar secar a temperatura ambiente y luego cubrir con colorante mercurio de cromo, dejar
reposar por 5 min.
4. Enjuagar y aplicar inmediatamente el colorante violeta de genciana, dejar reposar por 3
min para luego lavar con agua de caño.
5. Dejar secar la muestra preparada por acción del calor o al medio ambiente.
6. Observar la preparación con el objetivo de 100x y una gota de aceite de inmersión.
7. Identificar las diferentes formas bacterianas (véase la figura).
3.2 Observación de Estreptococos en una muestra de yogurt
1. Con la ayuda de un palillo mondadientes colocar una gota de yogurt en el centro de

una lámina y extender la muestra formando una capa muy delgada y translúcida.
2. Inclinando la lámina deje caer una gota de alcohol.
2. Dejar secar la lámina, colocar una gota de azul de metileno y cubrir con una
laminilla.
3. Observar la preparación con los objetivos de 40x y 100x.
Formas Bacterianas: coco, bacilo, vibrión y espirilo
3.3 Observación de Bacterias con Coloración diferencial de Gram
Las bacterias se pueden clasificar de acuerdo a la coloración de Gram de acuerdo al color

final que toman en Bacterias Gram Positivas (azul púrpura) y Bacterias Gram Negativas
(rojas). Para observar cada lámina preparada con la tinción Gram agregue una gota de aceite
de inmersión a la lámina y observe con el objetivo de 100x.
1. Lámina de la bacteria Escherichia coli, procesada con la tinción Gram. Reconocer la

forma de bacilo y el color rojo de esta bacteria Gram negativa.
2. Lámina de la bacteria Streptococcus sp. procesada con tinción Gram. Reconocer la

forma de coco, la agrupación en cadenas y el color violeta de esta bacteria Gram
positiva.
3.4 Observación de Bacterias con Coloración diferencial de Ziehl-Neelsen.

14
Para observar la lámina preparada con la tinción Ziehl-Neelsen agregue una gota de aceite
de inmersión a la lámina y observe con el objetivo de 100x.
1. Lámina de la bacteria Mycobacterium turbeculosis, procesada con la tinción Ziehl-

Neelsen. Reconocer la forma de bacilo y el color fucsia de esta bacteria alcohol ácido
resistente (BAAR).
III. CUESTIONARIO P#6
1. ¿Cómo es la estructura de una célula bacteriana?

2. ¿Qué es la tinción o coloración de Gram y cómo se realiza?
3. Defina microbiota. Cite 1 ejemplo.
4. Describa a la bacteria que infecta el epitelio gástrico Helicobacter pylori.
IV. INFORME

15
PRÁCTICA N° 7
OBSERVACIONES CELULARES: EUCARIOTAS: animal, vegetal y fungi
Existen dos tipos de células, las procariotas y las eucariotas, que difieren principalmente en la
organización de su material genético. En las células eucariotas el ADN se asocia a proteínas
formando unas estructuras complejas denominadas cromosomas, los cuales se encuentran dentro de
un núcleo verdadero rodeado por una complicada envoltura nuclear, a través de la cual tienen lugar
los procesos de intercambio entre núcleo y citoplasma. En el citoplasma se encuentran las organelas
como las mitocondrias, lisosomas, aparato del Golgi, retículo endoplasmático, etc.
I. OBJETIVOS
 Observar células de diferentes organismos eucariontes unicelulares y pluricelulares.

 Diferenciar al microscopio las características que presentan la membrana celular de la célula
animal y la pared celular de la célula vegetal y de la célula fúngica.
II. MATERIALES
 Muestra de célula epitelial de la mucosa bucal

 Láminas preparadas de hongos Penicillium y Aspergillus teñidos con Azul de lactofenol
 Muestra de catáfila de cebolla Allium cepa ←
 Muestra de cultivo de levadura Saccharomyces ←
 Pinza fina ←
 Microscopios
 Láminas cubreobjetos o laminillas
 Bisturí
 Pinza de punta recta
 Mechero de alcohol
 Colorante Azul de metileno
 Colorante Lugol
 Alcohol yodado
 Solución fisiológica (NaCl 0,9%)
 Papel lente
III. PROCEDIMIENTO
3.1 Observación de célula animal (raspado de mucosa bucal)
1. Con la ayuda de un hisopo hacer un raspado de la mucosa bucal y colocar la muestra

obtenida sobre dos láminas.
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2. A una lámina agregar una gota de suero fisiológico y a la otra aplicar una gota del
colorante azul de metileno
3. Cubrir las preparaciones con una laminilla.
4. Observar las preparaciones con objetivos de 10x y 40x.
CÉLULA ANIMAL
1- Membrana plasmática 2- Mitocondria

3- Retículo endoplásmico rugoso 4- Ribosomas
5- Nucléolo 6- Cromatina
7- Citosol (=hialoplasma) 8- Diplosoma (= centriolos)
9- Retículo endoplásmico liso 10- Aparato de Golgi
3.2 Observación de célula vegetal (catáfila de cebolla)
1. Separar una de las catáfilas de la cebolla con una pinza fina y extenderla sobre una
lámina portaobjetos.
2. Con el bisturí cortar cuadritos de 0,5 cm de catáfila.
3. Disponer de 2 láminas y colocar en cada lámina un cuadradito de catáfila.
4. Agregar a una de las lámina 1 gota de suero fisiológico y a la otra agregar 1 gota del
colorante Lugol.
5. Cubrir las preparaciones con láminas cubreobjetos.
6. Observar las preparaciones con objetivos de 10x y 40x.
7. Reconocer la membrana celular, pared celular y el núcleo de esta célula vegetal.
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CÉLULA VEGETAL
3.3 Observación de célula fúngica en hongos unicelular y pluricelular
1. En una lámina colocar 2 gotas de cultivo de levadura Saccharomyces (hongo

unicelular), cubrir con una laminilla y observar con el objetivo de 40x.
2. Observar láminas procesadas de Penicillium y Aspergillus (hongos pluricelulares)

teñidas con Azul de Lactofenol usando los objetivos de 40x y 100x.
3. Reconocer la pared celular y morfológicamente las partes (conidios o esporas,

fiálides y conidióforo) de los hongos filamentosos.
Saccharomyces Aspergillus Penicillium
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1. ¿Cuáles son las diferencias entre una célula animal y una célula vegetal?
2. ¿Cuáles son los componentes y cómo están estructuradas las paredes celulares de las bacterias,
hongos y vegetales?
3. ¿Qué es el Lugol, cuál es su fórmula y cuáles son sus aplicaciones?
V. INFORME

19
PRÁCTICA N° 8
FENÓMENOS FÍSICOS DE LA CÉLULA: DIFUSIÓN- ÓSMOSIS
I. OBJETIVOS
 Observar los fenómenos de difusión y ósmosis y conocer su importancia para la célula

 Reconocer si una célula animal o vegetal se encuentra en un medio hipotónico, isotónico o
hipertónico y nombrar el fenómeno producido en la célula de acuerdo al medio
II. MATERIALES
 Bulbo de cebolla Allium cepa ←

 Hojas de Elodea ←
 Pinza fina ←
 Laminillas cubreobjetos
 Tubos de prueba
 Lancetas hematológicas estériles
 Alcohol yodado
 Algodón estéril
 Solución salina de NaCl 0,4% (medio hipotónico)
 Solución salina de NaCl 0,9% (medio isotónico)
 Solución salina de NaCl 2,0% (medio hipertónico)
 Agua destilada
 Pipetas Pasteur para cada solución
 Gradillas
 Microscopios
 Papel lente
 Recipiente para descarte
III. PROCEDIMIENTO
3.1 Experimento con eritrocitos (célula animal):
1. Recibir tubos de prueba rotulados conteniendo solución salina en diferentes

concentraciones:
tubo No 1: 3 mL de sol. NaCl 0,4 %

2. En láminas rotuladas colocar 1 gota de cada concentración de solución salina.

3. Desinfectar el dedo cordial (tercero) con algodón humedecido en alcohol yodado y con
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ayuda de una lanceta descartable realizar una punción en el pulpejo del dedo.
4. Dejar caer 1 gota de sangre a cada lámina y con la ayuda de una laminilla mezclar
suavemente la sangre con la solución salina, dejar en reposo por 2 min.
5. Colocar la laminilla y observar en el microscopio con objetivo de 40x.
6. Observar detenidamente la forma de los eritrocitos (glóbulos rojos) en vista frontal y lateral.
En condiciones normales los eritrocitos tienen forma de disco bicóncavo.
3.2 Experimento con la catáfila de cebolla (célula vegetal):
1. En láminas rotuladas colocar 1 gota de cada concentración de solución salina.

2. Con ayuda de una pinza colocar en cada lámina un trocito de catáfila de cebolla
embebiendo el tejido en la respectiva solución salina.
3. Dejar en reposo por 2 min para luego cubrir la lámina con una laminilla.
4. Observar al microscopio con objetivos de 10x y 40x.
5. Observe detalladamente la forma de la célula y la adherencia o separación entre la
membrana plasmática y la pared celular de la célula vegetal
.
IV. RESULTADOS:
MUESTRA CONCENTRACIÓN / TONICIDAD DEL MEDIO FENÓMENO CELULAR
1 eritrocitos NaCl 0,4 % /medio hipotónico
2 eritrocitos NaCl 0,9 % / medio isotónico
3 eritrocitos NaCl 2,0 % / medio hipertónico
4 célula vegetal NaCl 0,4 % / medio hipotónico
5 célula vegetal NaCl 0,9 % / medio isotónico
6 célula vegetal NaCl 2,0 % / medio hipertónico
VI. CUESTIONARIO
1. ¿Qué tipo de difusión es la ósmosis y qué es presión osmótica?

2. Defina qué es Diálisis, Turgencia y Plasmólisis.
3. ¿Qué significa homeostasis?
4. ¿En qué consisten los fenómenos de crenación y citólisis en las células animales?
V. INFORME
Carátula- Introducción- Marco teórico- Resultados: tabla y observaciones (esquemas) con su

descripción e interpretación- Conclusiones- Cuestionario- Referencias bibliográficas (estilo
Vancouver)
21
PRÁCTICA Nº 9
ESTUDIO DE ORGANELAS CELULARES: MITOCONDRIAS, LISOSOMAS,

CLOROPLASTOS, PLÁSTIDOS Y VACUOLAS
I. OBJETIVOS:
 Mediante el empleo de la técnica de coloración vital se observarán las mitocondrias

presentes sólo en el citoplasma de las células eucariotas, que vienen a constituir las
“centrales de energía” porque producen y almacenan energía bajo la forma de ATP.
 Las células tienen vesículas membranosas que contienen enzimas hidrolíticas que
permiten la digestión intracelular y que corresponden a los lisosomas los cuales
pueden ser identificados en protozoarios con una tinción vital.
 Con el uso de suero fisiológico observar plástidos en las células eucariotas vegetales,
los que contienen pigmentos o pueden sintetizar y acumular diversas sustancias. Así
tenemos los Leucoplastos que son plástidos incoloros como los Amiloplastos que
acumulan almidón, los Proteinoplastos que acumulan proteínas, los Óleoplastos que
acumulan grasas y aceites esenciales. Los Cromoplastos son plástidos coloreados
pues en su estructura contienen pigmentos como el caroteno que es un pigmento de
color naranja, el licopeno de color rojo y la xantófila de color amarillo. Los
Cloroplastos son plástidos que presentan el pigmento de color verde clorofila cuya
función principal es realizar la fotosíntesis.
 Sin embargo, algunos pigmentos vegetales como la antocianina (color grosella) no

están confinados en cromoplastos sino más bien están disueltos en una vacuola del
citosol.
II. MATERIALES:
 Células de epitelio bucal (Mitocondrias)

 Hoja de Elodea (Cloroplastos) ←
 Ají amarillo (Cromoplastos con Xantófila) ←
 Zanahoria (Cromoplastos con Caroteno) ←
 Papa (Amiloplastos con Almidón) ←
 Betarraga (Vacuola con Antocianina) ←
 Cultivo de protozoarios (Lisosomas) ←
 Pinza en punta fina←
 Microscopios
 Bisturí
 Láminas y laminillas
 Colorante Rojo Neutro
 Solución Verde de Janus 1/10,000
 Colorante Lugol
 Hisopos
22
 Mecheros de alcohol ,
 Guantes
III. PROCEDIMIENTO:
3.1 Observación de mitocondrias en epitelio bucal
1. Con un hisopo obtener una muestra de la mucosa bucal mediante un raspado suave.
2. Realizar un frotis extendiendo la muestra sobre una lámina.
3. Dejar secar la lámina con la muestra al medio ambiente.
4. Cubrir la muestra con Verde de Janus durante 5 min.
5. Eliminar el exceso de colorante y dejar secar al medio ambiente.
6. Observar la preparación con objetivos de 10x y 40x.
7. Reconocer las mitocondrias teñidas de verde y refringentes al movimiento del tornillo
micrométrico
3.2 Observación de lisosomas en protozoarios
1. En una lámina colocar dos gotas de cultivo de protozoarios y una gota del colorante
rojo neutro, mezclar dejar reposar 2 min.
2. Cubrir con una laminilla y observar la preparación con objetivos de 10x y 40x.
3. Reconocer los lisosomas, teñidos de rojo, en el interior de los Paramecium.
3.3 Observación de plástidos en células vegetales:
 Cloroplastos: Son plástidos que localizan principalmente debajo de la epidermis

superior de las hojas.
1. Seleccionar una hoja joven de Elodea y colocarla sobre una gota de agua en una
lámina portaobjetos.
2. Cubrir la muestra con una laminilla.
3. Observar al microscopio con objetivos de 10x y 40x.
4. Reconocer los cloroplastos de color verde en el citosol de la célula.
 Amiloplastos: Tipo de leucoplastos que contienen almidón como sustancia de reserva.
1. Sobre una lámina portaobjetos colocar una gota de Lugol.

2. Agregar un corte transversal fino de papa.
3. Cubrir la lámina con una laminilla y observar con objetivos de 10x y 40x.
4. Observar los amiloplastos teñidos de violeta.
 Cromoplastos: Son plástidos coloreados por la presencia de pigmentos y presentan

formas variadas (redondas, elípticas o aciculares).
1. Realizar cortes finos de zanahoria y ají amarillo sobre láminas portaobjetos.

2. Colocar una gota de agua sobre cada corte.
3. Cubrir con una laminilla y observar con objetivos de 10x y 40x.
4. Reconocer los cromoplastos del color anaranjado o amarillo por el pigmento que
contienen
3.4 Observación de vacuolas en célula vegetal:
Las vacuolas pueden ocupar entre el 30-90% de la célula vegetal y en algunos casos
contienen pigmentos solubles en agua.
23
1. Sobre una lámina portaobjetos colocar una gota de agua.
2. Agregar un corte transversal fino de betarraga.
3. Cubrir con una laminilla y observar al microscopio con objetivos de 10x y 40x.
4. Observar la vacuola llena del pigmento disuelto betacianina de color grosella.
IV. PROTOCOLO:
OBSERVACIÓN DE MITOCONDRIAS, LISOSOMAS, CLOROPLASTOS,

MUESTRAS PLÁSTIDOS Y VACUOLAS
10x 40x ORGANELA
EPITELIO BUCAL
colorante:
PROTOZOARIO
colorante:
HOJA DE ELODEA
PAPA colorante:
AJÍ AMARILLO
ZANAHORIA
BETARRAGA
V. CUESTIONARIO P#9
1. ¿Qué son las patologías mitocondriales?

2. ¿Qué relación tienen los lisosomas y la autofagia? Esquematice el proceso de autofagia.
3. ¿Por qué las mitocondrias fijan el colorante Verde de Janus?
5. ¿Qué función cumplen los plástidos en la célula vegetal?
VI. INFORME

24
PRÁCTICA Nº 10
ACTIVIDAD CATALÍTICA: LAS ENZIMAS
Las Enzimas son proteínas con actividad de catalizador biológico que tienen como función
aumentar la velocidad de las cientos de reacciones químicas que se producen en la célula. El
mecanismo de acción se realiza de la siguiente manera:
Unión específica de un Sustrato(s) a la Enzima para formar un Complejo Enzima-Sustrato y

desdoblamiento del complejo formado para liberar los Productos.
E + S → E–S → E + P
I. OBJETIVOS
 Conocer el mecanismo de acción enzimática estudiando dos de las enzimas del hígado
de pollo: la catalasa y la succinato deshidrogenasa
 Conocer cómo actúan las enzimas reconociendo específicamente a su sustrato para
obtener los productos de la reacción
II. MATERIALES
 Gradilla
 Bisturí
 Mortero con pilón
 Hígado de pollo ←
 Solución salina de NaCl 0,9%
 Tubos de prueba de 16 x150 mm/13x100 mm
 Agua oxigenada = Peróxido de hidrógeno = H2O2
 Dióxido de manganeso (MnO2)
 Hisopos
 Fósforos
 Pipetas Pasteur
 Pipetas de 1mL
 Azul de metileno
 Aceite
 Succinato de sodio 0,1 M
 Buffer Fosfato pH 7.4
 Placas Petri
25
III. PROCEDIMIENTO
3.1 Comparación de la Actividad Catalítica entre un Catalizador Químico (MnO2) y un

Catalizador Biológico (enzima Catalasa)
MnO2 + 2 H2O2 → 2 H2O + O2 + MnO2
Catalasa + 2 H2O2 → 2 H2O + O2 + Catalasa

Preparación
1. En un mortero preparar un homogenizado de hígado con la solución salina de NaCl 0,9%.

2. Rotular los tubos del 1 al 3.
3. Utilizando una pipeta plástica descartable cortada en la punta para darle más diámetro
agregar un volumen equivalente a:
tubo 1: ½ cucharadita de hígado de pollo entero
tubo 2: ½ cucharadita de hígado de pollo triturado
tubo 3: 2 g dióxido de manganeso (MnO2)
4. Colocar en cada tubo 2 mL de Peróxido de hidrógeno (H2O2).

5. Colocar a cada tubo el palito de ignición encendido en la boca del tubo.
6. Si el palito de ignición aumenta la intensidad del fuego, confirma que el gas liberado de la
reacción catalizada es el oxígeno.
3.2 Actividad de la Enzima Succinato Deshidrogenasa (SDH) o Deshidrogenasa

Succínica
1. En un mortero preparar un homogenizado de hígado con la solución de NaCl 0,9%.

2. Disponer de 2 tubos de 13x100 mm y roturarlos (tubo 1 y tubo 2).
3. Colocar en cada tubo 1 mL de succinato y luego 1 mL de buffer fosfato.
4. Añadir 2 gotas de azul de metileno, agitar y anotar el color observado.
5. Al tubo 1 incorporar 0,5 mL de aceite por las paredes y dejar en la gradilla- NO MOVER.
6. Al tubo 2 agregar 1mL de homogenizado de hígado e inmediatamente incorporar 0,5 mL
de aceite por las paredes- NO MOVER.
7. Hacer el seguimiento de la decoloración de los tubos por 20 min.

8. Interpretar los resultados comparando ambos tubos.
1. ¿Cuál es la diferencia entre enzima y ribozima?

2. ¿Qué se entiende por el sitio activo de una enzima?
3. Explique brevemente las 6 categorías en que se clasifican las enzimas.
4. ¿Qué es la enzima deshidrogenasa succínica, qué reacción cataliza y por qué se
relaciona con el síndrome de Leigh?
V. INFORME
Carátula- Introducción- Marco teórico- Resultados: observaciones (esquemas) con su descripción

señalando para cada reacción el sustrato(s) y el producto (s)- Conclusiones- Cuestionario-
Referencias bibliográficas (estilo Vancouver).
26
ESCUELA DE MEDICINA HUMANA
PRÁCTICA N° 11
OBSERVACIÓN DE ELEMENTOS FORMES DE LA SANGRE
I. OBJETIVOS
 Determinar la presencia de elementos figurados presentes en una muestra de sangre

periférica humana, mediante el uso de una coloración diferencial
 Reconocer los eritrocitos, los glóbulos blancos granulares (neutrófilos, basófilos y
eosinófilos), los glóbulos blancos agranulares (linfocitos y monocitos) y las plaquetas
 Aprender las diferentes funciones de los elementos formes de la sangre
II. MATERIALES
 Colorante Wright o Giemsa

 Láminas de sangre teñidas con colorante Wright
 Guantes
 Alcohol yodado
 Algodón estéril
 Láminas portaobjetos limpias y desengrasadas con alcohol
 Buffer fosfato pH 7.2
 Agua destilada
 Varillas de coloración
 Papel lente
 Microscopios
 Recipiente de descarte
III. PROCEDIMIENTO
3.1 Preparación del frotis de sangre capilar
1. Desinfectar el dedo anular con una torunda de algodón embebida en alcohol yodado
y con una lanceta estéril punzar el dedo.
2. Dejar caer una gota de sangre sobre un extremo de la lámina portaobjetos.
3. Inmediatamente con ayuda de otra lámina portaobjetos formar un ángulo de 45° y
realizar un frotis, tratando de extender homogéneamente la gota de sangre sobre la
superficie de la lámina.
4. Dejar secar la preparación y proceder luego a la coloración.
3.2 Coloración Wright o Giemsa

27
1. Cubrir el frotis con colorante Wright o Giemsa por 1 min.
2. Sin eliminar el colorante agregar agua destilada y dejar actuar por 10 min.
3. Eliminar luego el colorante y lavar suavemente con agua de caño.
4. Dejar secar la lámina coloreada.
5. Observar la preparación con el objetivo de 100x y aceite de inmersión
IV. PROTOCOLO
Reconocer y esquematizar los siguientes elementos formes que serán observados con ayuda del
microscopio:
1. LEUCOCITOS GRANULARES:
a) Neutrófilo segmentado: presenta un núcleo con varios lóbulos (2-5) unidos por
bandas de cromatina.
b) Neutrófilo en banda o abastonado: presenta un núcleo no dividido en forma de S o en

cayado.
c) Eosinófilo: redondo, voluminoso, con granulaciones acidófilas de color anaranjado,

núcleo con dos lóbulos.
d) Basófilo: es escaso, presenta un núcleo difícil de observar, pues se halla

cubierto por granulaciones basófilas gruesas de color violeta o morado
oscuro.
2. LEUCOCITOS AGRANULARES:
a) Linfocito: de forma redonda o irregular, su núcleo es morado, voluminoso y ocupa la

mayor parte de la célula, el citoplasma es azul y sin granulaciones. Su
número aumenta con las infecciones.
b) Monocito: de forma redonda u ovalada, núcleo variable generalmente en forma de

riñón, citoplasma sin gránulos. Presenta una gran actividad fagocitaria.
3. PLAQUETAS:
Son los elementos formes más pequeños de las células de la sangre, de forma redonda.
Son esenciales en la coagulación sanguínea.
4. HEMATÍES O ERITROCITOS O GLÓBULOS ROJOS:
De forma generalmente redonda, sin núcleo, de color rosa intenso, contiene

hemoglobina, que es la proteína que se encarga del transporte de oxígeno y anhídrido
carbónico.
28
Neutrófilos Eosinófilo
Linfocitos
Basófilo
Monocito
Plaquetas
29
1. ¿Cuál es la diferencia entre plasma y suero?

2. Diga qué es la fórmula leucocitaria, cuáles son los valores normales en el adulto y qué
significado tienen los valores anormales.
3. ¿Qué es la histamina y cuál es su importancia?
4. ¿Qué es la anemia y cuál es su origen?
5. ¿Qué es el colorante Wright y cuál es su composición?
V. INFORME

30
PRÁCTICA Nº 12
GRUPO SANGUÍNEO Y FACTOR Rh
I. OBJETIVO:
 Al finalizar la práctica el alumno debe saber qué es el grupo sanguíneo, sus aplicaciones
en el campo de la medicina y el grupo sanguíneo al que pertenece.
 Entender el principio de la compatibilidad sanguínea como base para las transfusiones.
II. MATERIALES:
 Guantes
 Placas excavadas de porcelana
 Algodón
 Alcohol yodado
 Sueros comerciales Anti-A, Anti-B y Anti-D ( o Rh)
 Mondadientes
 Recipiente de descarte
III. GENERALIDADES:
Los glóbulos rojos tienen sobre su superficie celular estructuras que pueden ser reconocidas
como antígenos por el sistema inmune de individuos que carecen de tales estructuras. Los
individuos receptores de una transfusión sanguínea pueden producir anticuerpos contra una
estructura completa o contra parte de ella. En forma similar, una mujer embarazada puede
producir anticuerpos contra antígenos extraños expresados sobre los glóbulos rojos del feto
que alberga en su vientre. En los seres humanos se han identificado más de 600 antígenos
sobre los glóbulos rojos. La Sociedad Internacional de Transfusión Sanguínea ha tabulado 23
sistemas de grupos sanguíneos y cinco colecciones de grupos sanguíneos. El serólogo Karl
Landsteiner, en 1900-1901 fue el primero en demostrar la existencia de grupos sanguíneos y
en 1938 se adoptó definitivamente la clasificación de los grupos sanguíneos humanos
heredables, designados como A, B, AB y O.
31
GRUPOS SANGUÍNEOS
GRUPO SANGUÍNEO ANTÍGENO EN GLÓBULOS ANTICUERPOS EN PLASMA O

ROJOS SUERO SANGUÍNEO
(AGLUTINÓGENOS) (AGLUTININAS)
A A Anti-B
B B Anti-A
AB A,B Ninguno
(Receptor universal)
O Ninguno Anti-A + Anti-B

(Dador universal)
RECONOCIMIENTO DE GRUPOS SANGUÍNEOS Y FACTOR Rh
La técnica de reconocimiento de grupos sanguíneos se basa en la aglutinación de los

glóbulos rojos cuando se mezclan con aglutininas comerciales Anti-A, Anti-B y Anti-D.
IV. PROCEDIMIENTO
1. Limpiar la yema del dedo anular con algodón embebido en alcohol yodado.
2. Realizar la punción utilizando una lanceta de hematología estéril.
3. En una lámina #1 colocar 2 gotas de sangre y en la lámina #2 colocar 1 gota de sangre.
4. Agregar a la lámina #1 una gota de suero Anti-A y una gota de suero Anti-B sobre la
respectiva gota de sangre y mezclar usando palitos mondadientes separados.
5. Agregar a la lámina #2 una gota de suero Anti-D (Anti-Rh) y mezclar con la gota de sangre
usando otro palito mondadientes.
6. Observar la aglutinación e identificar a qué grupo sanguíneo y factor Rh pertenece.
32
MÉTODO DE RECONOCIMIENTO PRÁCTICO
GRUPO A GRUPO B
Anti-A Anti-B Anti-A Anti-B
GRUPO AB GRUPO O
Anti-A Anti-B Anti-A Anti-B
FACTOR Rh (+) FACTOR Rh (-)
Anti-D Anti-D
V. CUESTIONARIO P#12:
1. ¿A quiénes se les llama receptores y donadores universales de sangre? ¿Por qué?

2. Explique cómo se produce la Eritroblastosis fetal.
3. ¿En qué se basa la prueba de hemaglutinación para el reconocimiento de los grupos
sanguíneos?
4. Indique qué tipo de sangre pueden recibir y donar las personas de los grupos
sanguíneos A, B, AB y O con Rh + y Rh -.
VI. INFORME;

33
PRÁCTICA Nº 13
CICLO CELULAR: DIVISIÓN CELULAR: LA MITOSIS
I. OBJETIVO:
 Estudiar la mitosis y el ciclo de división celular en las células meristemáticas de la raíz de

Allium cepa (cebolla). En este sistema la población celular está en equilibrio dinámico y los
cromosomas son relativamente grandes, con un número diploide de 2n =16.
II. MATERIALES:
 Raíces de bulbo de cebolla Allium cepa ←

 Láminas fijadas de mitosis
 Placas Petri
 Estiletes y pinzas
 Papel de filtro
 Laminillas cubreobjetos
 Orceína acético-clorhídrica
 Papel lente
 Microscopios
III. PROCEDIMIENTO:
1. Cultivar los bulbos de cebolla en vasos pequeños conteniendo agua corriente, la que deberá
cambiarse cada 24 h, mantenidos en oscuridad, a 25°C y sometidos a aireación constante.
2. Después de 48 a 72 h, arrancar con ayuda de una pinza 2 a 3 raíces del bulbo, cortar 2 cm
de la parte apical y colocarla sobre una placa Petri que contenga Orceína.
3. Calentar la placa en la llama de un mechero de alcohol hasta aproximadamente los 60°C y
observar la emisión de vapores blancos evitando la ebullición del colorante.
4. Dejar enfriar y repetir esta operación cuatro veces.
5. Enfriar y dejar reposar durante 15 min.
6. Colocar la raicilla en la lámina portaobjeto, cortar 2 mm de la punta, añadir una gota de
Orceína fría, cubrir la preparación con laminilla.
7. Con la punta de un lápiz golpear suavemente la preparación describiendo círculos
concéntricos para permitir la extensión del tejido meristemático.
8. Eliminar el exceso de colorante usando una tira de papel filtro.
9. Observar la preparación con objetivo de 100x y aceite de inmersión.
34
IV. PROTOCOLO
V. Reconocer y esquematizar las diferentes fases del ciclo celular que se observan:
Interfase: Los cromosomas no se observan al microscopio debido a que son demasiados

delgados y no pueden absorber suficiente colorante para ser visibles.
Nota.- La interfase no es una fase de la mitosis.
Profase: Fase en la cual los cromosomas se observan con sus dos cromátides hermanas.
Metafase: Se observa el huso acromático, los cromosomas están más condensados y

cortos y se ubican en el centro de la célula.
Anafase: Los cromosomas (cromátides hermanas) se dirigen a los polos.
Telofase: Los cromosomas (cromátides hermanas) están en los polos, empieza la

formación de la envoltura nuclear.
FASE DE LA MITOSIS ESQUEMAS
ESQUEMA
INTERFASE
35
VI. CUESTIONARIO P#13:
1. ¿Qué diferencias existen entre la mitosis y la meiosis?

2. ¿Qué es índice mitótico e índice interfásico?
3. Defina cariocinesis y citocinesis.
VI. INFORME

36
PRÁCTICA N° 14
EL CÓDIGO GENÉTICO
I. OBJETIVOS:
 Comprender las bases moleculares del dogma de la biología molecular

 Usar el código genético y comprender el efecto de mutaciones y sus posibles causas
II. MATERIALES:
 Secuencias problemas entregadas por el docente

 Lápiz y borrador.
 Tabla de código genético
37
III. PROCEDIMIENTO
 Analice y complete las siguientes secuencias (en clase)
Ejemplo:
Pro
Reconocer:
38
Sitio de N-glicosilación: Asparragina-X-Serina o Asparragina-X-Serina-Treonina.
Sitio de O-glicosilación: Serina o Treonina
SECUENCIA I
Segmento A:
ADN 5’ a t g c g c t c a c g t g a C a c a a t G
ADN 3’
Mensajero
Aminoácido
Segmento B
ADN 5’ c c c g g t a c g t g t g c A c a a a t G
ADN 3’
Mensajero
Aminoácido
Segmento C
ADN 5’ g g t a t a c t a t c a t c T t a g a t A
ADN 3’
Mensajero
Aminoácido
 Analice y responda:
1. Número de codones:
2. Número de aminoácidos empleados:
3. Secuencia usada por la ARN polimerasa:
4. Sitios de glicosilación:
SECUENCIA II
Segmento A:
ADN 5’
ADN 3’ T a c g g c a t g g g g c a C c c a t t T
Mensajero
Aminoácido
Segmento B
ADN 5’
ADN 3’ g c c c c g t a g a t a c a T c a t g t T
Mensajero
Aminoácido
39
Segmento C
ADN 5’
ADN 3’ c g a c t t g g a a a a a t C c c g g a T
Mensajero
Aminoácido
 Analice y responda:
2. Número de aminoácidos empleados:
3. Secuencia usada por la ARN polimerasa:
4. Sitios de glicosilación:
SECUENCIA III
(para el informe: preste atención a las indicaciones que dará el profesor)
 A continuación se le entrega una secuencia de aminoácidos: Halle la posible secuencia

nucleotídica y responda lo siguiente:
FVNQHLCGSH LVEALYLVCG ERGFFYTPKS

 Analice y responda
1. Número de aminoácidos:
3. ¿Por qué el primer aminoácido no es la metionina?
4. ¿Cómo podríamos averiguar a qué proteína pertenece esta secuencia?
1. ¿Por qué el código genético es degenerado?

2. ¿Qué mutaciones son cruciales en el gen de hemoglobina y cómo atañe esto a la salud?
3. Explique por qué en el código genético se utilizan tres nucleótidos por codón.
4. ¿Por qué son importantes las mutaciones?
V. INFORME
Carátula- Introducción- Marco teórico- Resultados- Conclusiones- Cuestionario- Referencias

bibliográficas (estilo Vancouver).
* * * * *
40
MUTACIONES GÉNICAS POR SUSTITUCIÓN DE BASES
Adenina y Guanina son Bases Púricas

Timina, (Uracilo) y Citosina son Bases Pirimídicas
TRANSICIÓN= Púrica por Púrica o

Pírimídica por Pirimídica
TRANSVERSIÓN= Púrica por Pirimídica

Pirimídica por Púrica
41
ANEXO: PREPARACIÓN DE MATERIALES PARA PRÁCTICAS
P8 DIFUSIÓN-ÓSMOSIS 1 cebolla
 Células de epitelio bucal

 Hoja de Elodea: de acuarios
 Ají amarillo
 Zanahoria
P9  Papa
 Betarraga
 Cultivo de protozoarios:
Agua de florero (opcionalmente se le
coloca un hisopo pasado por una tapa del
lavadero de cocina o baño) u hojas
externas de hortalizas (lechuga, acelga,
coliflor, etc.) u hojarasca mantenida en
sitio oscuro por 7 días.
ORGANELAS
P 10 ACTIVIDAD Hígado de pollo

CATALÍTICA
(*) Raíces de cebolla:

DIVISIÓN:
P 11 MITOSIS
Mitosis en Células (de meristemo) de la Raíz de Cebolla

1. Llena un vaso con agua y coloca un bulbo de cebolla sujeto con dos o tres palillos de manera
que la parte inferior quede inmersa en el agua (véase la figura). Al cabo de 3-4 días
aparecerán numerosas raicillas en crecimiento de unos 3 o 4 cm de longitud.
2. El agua del vaso deberá cambiarse cada 24 h, ser mantenido en oscuridad, a temperatura
ambiente y sometido a aireación constante.
3. El día de la práctica transportar la cebolla manteniendo las raíces sumergidas en el agua.
* * *
42

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UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

GUÍA DE PRÁCTICA DE BIOLOGÍA

Mg. EDITH RODRIGUEZ QUISPE

APLICACIÓN DEL MÉTODO CIENTÍFICO

 Dar a conocer los lineamientos básicos del método científico y su aplicación

 Lectura seleccionada a partir de una revista científica especializada

1. Reconocimiento del problema planteado

 Reconocer las unidades monoméricas y macromoleculares en los carbohidratos como

 Solución de Glucosa 1% (monosacárido)

3.1. Determinación General de Glúcidos (reacción de Molisch)

3.2. Determinación de Azúcares Reductores (reacción de Benedict)

1. En tubos rotulados de 16x150 mm colocar 2 mL de cada solución de glúcido 1%: Glucosa,

3.3. Determinación de Almidón (reacción de Lugol)

1. En un tubo de 16x150 mm colocar 2 mL de solución de Almidón al 1%.

IV. CUESTIONARIO P#2

3. Explique brevemente por qué se produce la intolerancia la lactosa.

RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS Y PROTEÍNAS EN MATERIAL BIOLÓGICO

3.1 DETERMINACIÓN DE LÍPIDOS

3.1.1 Solubilidad de los Lípidos

1. En cuatro tubos rotulados de 13x100 mm colocar 1 mL de aceite.

tubo N° 1: agua destilada 1 mL

1. Agitar cada uno de los tubos con la misma intensidad.

3.1.2 Solubilidad y Tinción en Sudán III

1. En dos tubos de 13x100 mm colocar 1 mL de aceite.

1. En un tubo 16x150 mm colocar 2 mL de aceite y 2 mL de hidróxido de sodio NaOH 20%.

3.2 DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS

3.2.1 Reacción de Biuret

1. En dos tubos 16x150 mm colocar por separado 2 mL de la solución de albúmina 2% (o

3.2.2 Reacción Xantoproteica

Se emplea para determinar la presencia de proteínas solubles en una solución, empleando

1. En un tubo de 16x150 mm colocar 2 mL de la solución de albúmina al 2% o clara de huevo

IV. CUESTIONARIO P#3

1. Defina emulsión y micela.

Carátula- Introducción- Marco teórico- Resultados y Fundamentos- Conclusiones- Cuestionario-

EXTRACCIÓN DE ÁCIDO DESOXIRRIBONUCLEICO (ADN)

 Utilizar un método sencillo de extracción de ADN a partir de células eucariotas poniendo

 Muestras de origen vegetal y animal

3.1 Extracción de ADN

3.2 Identificación de Pentosas (reacción de Bial)

1. En un tubo 16x150 mm colocar 1 mL de ADN extraído en el experimento anterior y en otro

IV. CUESTIONARIO P#4

1. ¿Cuál es la composición básica del ADN?

Carátula- Introducción- Marco teórico- Resultados y Fundamentos- Conclusiones-

MICROSCOPÍA: ESTUDIO Y MANEJO DEL MICROSCOPIO

 Conocer e identificar correctamente las partes ópticas y mecánicas del microscopio

III. PARTES DEL MICROSCOPIO

Reconocer cada una de las siguientes partes del microscopio:

PARTE MECÁNICA PARTE ÓPTICA

 Brazo y Pie  Ocular

1. Sistema de Soporte: comprende el brazo, el pie, el tubo ocular, el revólver y la platina.

VII. CUESTIONARIO P#5

1. Defina qué es una imagen real y qué es una imagen virtual.

Carátula- Introducción- Marco teórico- Resultados: observaciones (esquemas) con su descripción-

UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

OBSERVACIONES CELULARES: PROCARIOTAS (BACTERIAS)

 Identificar distintos tipos de bacterias de acuerdo a su forma y tinción

3.1 Observación de Microbiota en cavidad bucal (Tinción de Vagó)

1. Colocar una gota de solución fisiológica sobre una lámina.

3.2 Observación de Estreptococos en una muestra de yogurt

1. Con la ayuda de un palillo mondadientes colocar una gota de yogurt en el centro de

Formas Bacterianas: coco, bacilo, vibrión y espirilo