ENZIMAS

Son proteínas biocatalizadores, capaces de acelerar las reacciones

celulares en el orden del millón de veces, permaneciendo
inalterables. Son los catalizadores mas eficientes conocidos por el
hombre, una molécula de catalasa en un segundo descompone cien
mil moléculas de peróxido de hidrogeno.
Las enzimas se caracterizan por ser específicas, la conversión de cada
sustrato a producto, esta catalizado por una enzima determinada.
En algunos casos esa especificidad es casi absoluta, por ejemplo la
aspartasa, posee una especificidad estricta, no es capaz de adicionar
amoniaco al maleato (isomero geométrico del fumarato) ni tampoco
desaminar al D-aspartato.
En el otro extremo se encuentran las enzimas con especificidad
relativamente amplia, que son capaces de actuar sobre diferentes
sustratos que tengan estructuras relacionadas, por ejemplo las
proteasas, catalizan la hidrólisis del enlace peptídico,
independientemente del orden de los aminoácidos o la longitud de la
cadena.
Otra característica de las enzimas es que están sometidas a regulación
intracelular o extracelular, por lo cual la actividad catalítica de una
enzima o un grupo de enzimas se reduce o aumenta dependiendo del
entrono. Esto contribuye a un control metabólico del organismo
entero.
 COFACTORES ENZIMÁTICOS

La actividad de algunas enzimas depende solamente se su estructura

proteica, pero otras, necesitan de uno o mas compuestos no proteicos
para realizar su actividad catalítica.

Estos componentes se conocen

como COFACTORES, estos
pueden ser: iones metálico
como; Zn++, Mg++, Mn++,
Fe++, Fe+++, Cu++, Na+ y K+ o
bien, una molécula orgánica
derivada generalmente de una
vitamina, la cual se conoce
como COENZIMA.
Las coenzimas mas utilizadas son: Nicotinamida Adenina
Dinucleótido (NAD+), Flavina Adenina Dinucleótido (FAD),
Pirofosfato de Tiamina (TPP) y Coenzima A (CoASH).

El complejo
PROTEINA-
COFACTOR se
conoce como
HALOENZIMA.
Cuando se separa
el cofactor, la
proteína restante,
que en si misma
es inactiva
cataliticamente
se conoce como
APOENZIMA.
SITIO O CENTRO ACTIVO
Pequeña parte de la enzima que se pone en contacto con el
sustrato durante la reacción catalizada. Esta parte de la
enzima se conoce como sitio activo. El concepto de sitio
activo no quiere decir que el resto de la enzima no tenga
función que cumplir, sino por el contrario, esta parte de la
enzima es necesaria para que el sitio activo se ajuste
adecuadamente al sustrato.
De modo que es el sitio activo es el que determina la
selectividad de la enzima por un sustrato.
CLASIFICACIÓN DE LAS ENZIMAS
Muchas enzimas se han designado añadiendo el sufijo –asa al nombre
del sustrato sobre el que actúan, por ejemplo la ureasa cataliza la
hidrólisis de la urea con producción de amoniaco y gas carbónico.
Esta nomenclatura sin embargo ha ocasionado que muchas enzimas
hayan recibido nombres que químicamente son poco informativos.
Por esta razón y principalmente porque el numero que enzimas que se
descubren esta aumentando rápidamente, se ha adoptado una
clasificación sistemática de las enzimas, este sistema divide las
enzimas en 6 clases principales, cada una de las cuales se divide a su
vez en subclases y estas en subsubclases de acuerdo a la reacción que
catalicen.
A continuación veamos las 6 clases principales de enzimas:
1. OXIDORREDUCTASAS: Estas enzimas catalizan las
reacciones de oxidorreducción en las cuales un sustrato actúa
como donador de hidrógenos y el otro como aceptor. Con
frecuencia emplean coenzimas del tipo del NAD+, NADP+,
FAD, ácido lipoico y CoASH como aceptores de hidrógeno;
otros aceptores incluyen al grupo hemo y al oxígeno molecular.
En este grupo se incluyen deshidrogenasas, oxidasas e
hidroxilasas de gran importancia en los procesos oxidativos de
la respiración celular.

La enzima involucrada en esta reacción es la deshidrogenasa

láctica LDH o L-lactato: NAD Oxido-reductasa y código
1.1.1.27
2. TRANSFERASAS: Catalizan la transferencia de grupos funcionales.
Muchos pasos importantes del metabolismo requieren la transferencia
de una molécula a otra de grupos ámino, carboxilo, carbonilo, metilo,
ácido, glucosilo, o fosforilo.
Las coenzimas utilizadas son el tetrahidrofolato (FH4) coenzima
A (CoA-SH) y fosfato de piridoxal (PLP).
Las aminotansferasas (transaminasas) (6) transfieren grupos amino de
un aminoácido a un cetoácido aceptor, dando lugar a la formación de
un nuevo aminoácido y un nuevo cetoácido.
Las cinasas (7) catalizan la transferencia de un fosfato del ATP a
grupos aceptores, alcohol o ámino, como ejemplo tenemos la
glucocinasa que forma glucosa-fosfato.
La síntesis de glucógeno depende de glucosiltransferasas (4)
3. HIDROLASAS: Catalizan el rompimiento de una molécula, con
participación de agua, entre enlaces carbono y cualquier otro átomo.

La rotura del enlace peptídico es buen ejemplo de esta reacción

llevada a cabo por peptidasas. Nombres triviales de algunas
peptidasas incluyen pepsina, tripsina, quimotripsina y dipeptidasa.
Otras subclases son las esterasas rompen enlaces ester, como la
lipasa, colinesterasa y colesterol esterasa. Las fosfatasas eliminan
grupos fosfatos, como la glucosa-6-fosfatasa
4. LIASAS: Catalizan el rompimiento no hidrolítico
entre carbono-carbono, carbono-azufre y algunas
carbono-hidrógeno. A este grupo pertenecen las
descarboxilasas y las aldehidonasas como la aldolasa,
hidroxilasas, deshidratasas y desaminasas.
5. ISOMERASAS: Catalizan reacciones de
isomerización, se altera la estructura pero no la
composición de los sustratos por el movimiento de
un grupo de una posición a otra dentro de la
molécula. Catalizan la interconversión de todo tipo
de isómeros ópticos, geométricos, de posición y
reacciones de oxidorreducción intramolecular. A este
grupo pertenecen las racémosos, epimerasas y
mutasas.
6. LIGASAS: Catalizan la formación de un producto que resulta
de la condensación de las moléculas diferentes, acopladas con la
ruptura del ATP. Catalizan la formación de enlaces entre carbono-
oxígeno, nitrógeno y otros átomos a expensas de un enlace fosfato
de alta energía del ATP. El término de sintetasas se reserva para
este grupo particular de enzimas. La piruvato carboxilasa es un
buen ejemplo de una ligasa. También la acetil-CoA sintetasa, la
aminoacil-RNAtsintetasa, enzimas activadoras de aminoácidos en
la síntesis de proteínas.
INHIBIDORES ENZIMÁTICOS
Los inhibidores enzimáticos reducen o eliminan la
actividad catalítica de la enzima. Existen 2 tipos de
inhibidores:

Inhibidores Irreversibles: Son los que se unen

covalentemente con un grupo a un resto de
aminoácido de la cadena polipeptídica de la
enzima.
Inhibidores reversibles: Solo tienen una asociación
transitoria con la enzima. Estos inhibidores pueden ser de tres tipos:

• Inhibidores Competitivos: Compiten con el sustrato por unirse

al sitio activo de la enzima. Esto se debe en gran medida al fuerte
parecido estructural entre el sustrato y el inhibidor.
• Inhibidores Incompetitivos: En este tipo de inhibición, el
inhibidor no se combina con la enzima libre, sino con el
complejo enzima-sustrato, para formar un complejo
inactivo enzima-sustrato-inhibidor.
Inhibidores No competitivos: Un inhibidor no competitivo
se puede combinar con la enzima libre o con el complejo
enzima- sustrato, interfiriendo con la acción de ambos.
Enzimas Alostéricas:
Algunas enzimas además de presentar la características comunes a todas,
también pueden actuar como reguladoras del metabolismo. Esta clase de
enzimas son las denominadas alostéricas.
Estas enzimas poseen un sitio regulador
especifico que esta separado
espacialmente del sitio activo de la
enzima. Este sitio regulador puede unir
una molécula efectora que cambia la
estructura tridimensional de la enzima de
tal forma que se alteran las cinéticas de la
reacción. Los efectores positivos
aumentan y los negativos disminuyen la
actividad de la enzima. Generalmente
están situadas al comienzo de una
secuencia de reacciones. En muchos
casos, el efector negativo de la enzima es
el producto final de la secuencia de
reacciones.
ISOENZIMAS
Las isoenzimas, también denominadas isozimas, son enzimas que
pueden existir en dos o mas formas dentro de un mismo organismo e
incluso dentro de una misma célula y catalizan la misma reacción.
El sistema isomatico mas conocido es el de la deshidrogenasa láctica,
LDH, que catalizan la oxidación del acido láctico en acido pirúvico.
Se han detectado 5 formas diferentes de LDH en los tejidos de los
vertebrados. Las cinco isozimas poseen el mismo peso molecular y
todas ellas contienen cuatro cadenas polipeptídicas.
PROENZIMAS
Ciertas enzimas, como otras proteínas, se sintetizan en una forma
denominada proenzima que tiene un tamaño mayor que la enzima
madura. La proenzima se corta en un sitio especifico, por acción de
una o mas proteinasas, para generar la enzima activa. De esta manera
se protege a la célula contra daños potenciales que puedan causar las
enzimas como las proteinasas.
CINETICA ENZIMATICA
ECUACION DE
MICHAELIS-
MENTEN
Para determinar gráficamente los valores de KM y Vmax es más
sencillo utilizar la representación doble recíproca (1/v0 frente a 1/[S]0),
ya que es una línea recta. Esta representación doble recíproca recibe
el nombre de representación de Lineweaver-Burk

Es una recta en la cual:

La pendiente es KM/Vmax
La abscisa en el origen
(1/v0 = 0) es -1/KM
La ordenada en el origen
(1/[S]0 = 0) es 1/Vmax
De esta forma, a partir de los
datos experimentales se
puede calcular gráficamente,
los valores de KM y Vmax de un
enzima para diversos
sustratos.