LABORATORIO DE BIOQUÍMICA PH Y SISTEMAS AMORTIGUADORES

LABORATORY OF BIOCHEMISTRY PH AND SHOCK ABSORBING SYSTEMS

Giovanny Gomajoa Ruiz Cod: 100200412018; Astrid Valentina Molina Cod: 100200512018; Mary Alejandra
Ramírez Cod: 100200332018; Lina María Mejía Cod: 100250172017; Sara Sofía Ramírez (Curso Libre)

UNIVERSIDAD DEL TOLIMA

FACULTDAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
INFORME DE LABORATORIO DE BIOQUIMICA N° 1
MEDICINA PRIMER SEMESTRE
1 DE MAYO DE 2018

INTRODUCCIÓN

Un aspecto fundamental en la fisiología de todos los organismos es la

homeostasis o capacidad para mantener una situación de equilibrio dinámico
favorable. En este fenómeno tiene gran importancia los sistemas
amortiguadores que equilibran la presencia de sustancias ácidas y básicas para
mantener el pH dentro de los límites fisiológicos.
La molécula de agua tiene capacidad limitada para disociarse en ion hidrógeno
(H+), llamado protón, y en ion hidroxilo (OH-).

H2O H+ + OH−

Un protón en solución acuosa se combina inmediatamente con una molécula

de agua para formar el ion hidronio o hidrogenión

H+ + H2O H3O+

Sin embargo, por convención se utiliza la representación del protón en lugar del
hidrogenión en las reacciones de ionización del agua. Las concentraciones de
protones y de iones hidroxilo, en el agua pura, son de 1 x 10 -7 M para cada uno
de ellos, como se muestra en la siguiente expresión:

[H+] = [OH−] = 1 x 10-7 M

Las concentraciones de ambos iones exponen una relación recíproca: cuando la

concentración de iones hidrógeno aumenta, la concentración de hidroxilos
disminuye y viceversa. El producto de sus concentraciones es una constante
conocida como producto iónico del agua (Kw) cuyo valor es de 1 x 10-14 M.

(Kw) = [H+] + [OH−] = 1 x 10-14 M

Con el fin de facilitar los cálculos para determinar la concentración de H+, así
como su interpretación, se definió el potencial de hidrógeno (pH) como el
logaritmo negativo de la actividad de iones hidrógeno.
pH= -log 10 [H+]
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En la práctica, las disoluciones acuosas se clasifican en ácidas si presentan un

pH menor a 7.0, básicas si el pH es mayor a 7.0 y neutras si el pH es igual a 7.0

SOLUCIONES BUFFER

Un buffer es una o varias sustancias químicas que afectan la concentración de

los iones de hidrógeno (o hidrogeniones) en el agua. Siendo que el pH no
significa otra cosa que potencial de hidrogeniones (o peso de hidrógeno), un
“buffer” (o amortiguador) regula el pH. Cuando un buffer es adicionado al agua,
se observa un pH relativamente constante en el agua. De esta manera, ácidos
o bases adicionales no podrán tener efecto alguno sobre el agua, ya que esta
siempre se estabilizará de inmediato.

La función de una solución amortiguadora es la de resistir los cambios de pH

cuando se le agregan ligeras cantidades de ácido o de base. Esta propiedad es
muy importante en los sistemas químicos y biológicos y los procesos que
requieran un valor de pH específico que no sea modificable con facilidad. Ya
sea para el funcionamiento adecuado de las enzimas en el sistema digestivo o
los glóbulos blancos en el torrente sanguíneo. El funcionamiento de una solución
buffer se fundamenta en el principio de Le Châtelier, en el equilibrio químico. El
ácido o base utilizada, siendo débil, se disocia parcialmente en la solución, por
lo que hay una proporción según su constante de equilibrio tanto de producto
como de reactivo. Es decir, poniendo como ejemplo una solución amortiguadora
hecha con un ácido débil, al momento de agregarle más ácido, este se disociará
y aumentará la concentración de iones H+ , pero el ión común (en este caso la
base conjugada de la solución creada) que se encuentre en la solución por
contrarrestar el efecto de desbalance en la reacción, se asociará con los iones
liberados y reducirá su concentración, de esta forma reduciendo su pH, que no
aumentará tan notablemente a como lo haría en una solución que no es
amortiguadora.

OBJETIVOS

 Entender mediante la práctica los conocimientos teóricos adquiridos sobre

soluciones de sistemas amortiguadores.
 Determinar los valores de pKa de un ácido poliprótico.
 Determinar la capacidad antiácida de un producto comercial.
 Determinar la capacidad amortiguadora de soluciones y/o sustancias
ácidas o básicas

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1. Curva de titulación del ácido fosfórico (H3PO4)

El ácido fosfórico, H3PO4, es un ácido poliprótico, es decir, tiene tres protones

que potencialmente pueden disociarse. Mediante una titulación se pueden
determinar los tres valores de pKa de este compuesto.
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La titulación de un ácido débil consiste en agregar cantidades pequeñas de una

base fuerte que permita desplazar el equilibrio hacia la formación de una base
conjugada. Después de cada adición de la base se determina el pH mediante
potenciometría, cuyo valor se registra en una gráfica para determinar el
comportamiento del ácido débil. De la misma forma se puede titular una base
débil empleando un ácido fuerte.

A lo largo de la titulación se presenta una modificación del pH. Esto se puede

hacer evidente mediante cambios de color si se agrega a la reacción una mezcla
de indicadores de pH, conocida como reactivo de Yamada.

Materiales y equipo

 Bureta de 25 mL
 Vaso de precipitados de 50 mL.
 Erlenmeyer de 250 mL
 Soporte universal
 Pinzas para bureta
 Potenciómetro
 Probeta de 50 mL
 H3PO4 0.1M
 NaOH 0.1 M

PROCEDIMIENTO:

A un vaso de precipitado de 250 ml depositamos 25 ml de una solución de

H3PO4 0.1M, después agregamos 4 gotas de reactivo de Yamada, procedemos
a medir el pH con el potenciómetro que debe ser previamente calibrado con
amortiguadores de referencia pH 4.0 y 7.0. obteniendo un resultado 1,63 como
pH inicial; para esta medición se contó con la ayuda de la auxiliar de laboratorio
Tatiana

Al mismo tiempo preparamos una bureta con 50 ml de una solución de NaOH

0,1M y agregamos al H3PO4 gotas de 3,0 ml NaOH 0.1M, mezclamos, agitamos
y medimos el pH después de cada adición hasta completar 75 ml de la base.
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NUESTROS RESULTADOS (TITULACIÓN ÁCIDO FOSFÓRICO VOLUMEN Y

PH)

Volumen de NaOH pH de la Color que toma

agregado solución
(mililitros)
0 1.75 Transparente
3 1.93 Transparente
6 2.20 Transparente
9 2.48 Transparente
12 3.15 Amarillo traslucido muy claro
15 6.17 Amarillo traslucido muy claro
18 6.69 Ligera tonalidad verde
21 7.07 Ligera tonalidad verde
24 7.63 Azul transparente claro
27 10.49 Azul de un tono más oscuro
30 11.21 Azul grisáceo
33 11.49 Azul grisáceo
36 11.66 Azul grisáceo
39 11.74 Morado transparente muy claro
42 11.91 Morado transparente muy claro
45 12.00 Morado un poco más notorio
48 12.11 Morado un poco más notorio
51 12.17 Morado un poco más notorio
54 12.20 Morado un poco más notorio
57 12.25 Morado un poco más notorio
60 12.26 Morado un poco más notorio
63 12.30 Morado un poco más notorio
66 12.33 Morado un poco más notorio
69 12.36 Morado un poco más notorio
72 12.37 Morado claro
75 12.39 Morado claro
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NUESTRAS IMÁGENES
pH

NaOH
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En la tabla se aprecia el pH (Eje Y) con respecto al volumen de NaOH (Eje X)

Se toman como puntos donde terminan las alzas de pH:
pKa1=6.17 a 15 ml de NaOH
pKa2=7.63 a 24 ml de NaOH
pKa3=11.21 a 30 ml de NaOH

Los cambios de color se generan debido al reactivo utilizado Yamada (4 gotas)

en el ácido fosfórico. De lo cual se puede decir que entre mayor NaOH utilizado
mayor es su pH y su la variabilidad de coloración.

EXPERIMENTO No. 2

2. TITULACIÓN DE UN ANTIÁCIDO

Cuando los alimentos son ingeridos y llegan al estómago se combinan con el

jugo gástrico segregado por las glándulas parietales. El jugo gástrico contiene
ácido clorhídrico (HCl) y una enzima llamada pepsina. Es un jugo
extremadamente ácido, con pH cercano a 0.8. Al mezclarse con los alimentos,
el pH se eleva hasta un valor de 2.0 y junto con la pepsina comienza a romper
las proteínas contenidas en los alimentos, liberando aminoácidos. Si el esfínter
entre el esófago y el estómago no se cierra durante la digestión, el jugo gástrico
puede entrar al esófago y causar acidez. El jugo gástrico también puede quemar
las paredes del estómago. Además, las glándulas parietales pueden generar un
exceso de jugo gástrico debido a la ingestión de ciertos alimentos como salsa de
tomate, productos cítricos, cafeína y alcohol. Adicionalmente, el estrés y ciertas
enfermedades pueden originar una producción excesiva de jugo gástrico. Si la
acidez no se trata rápidamente evoluciona, al cabo de cierto tiempo, en úlcera
duodenal.

Los antiácidos se utilizan frecuentemente en el tratamiento de la acidez. El

ingrediente activo en tales medicamentos es una base la cual neutraliza el
exceso de ácido. Las tabletas de diferentes tipos de antiácidos que se venden
en los supermercados contienen diferentes principios activos: el Alka-Seltzer
contiene bicarbonato de sodio NaHCO3; la Mylanta y el Malox contienen
hidróxido de magnesio, Mg(OH)2.

Se utilizará una técnica denominada valoración por retroceso que consiste en

añadir un exceso de ácido para titular el antiácido, y luego al ácido sobrante se
valora con una solución patrón de NaOH. La cantidad química de base presente
en la muestra de antiácido se calcula así:

nOH-= nHCl (que reaccionan)= VHCl x CHCl – VNaOH x CNaOH

La eficiencia se calcula como la masa (g) de HCl neutralizado dividida por la

masa de la tableta de antiácido:

𝑚 𝐻𝐶𝑙
𝐸=
𝑚 𝑇𝑎𝑏𝑙𝑒𝑡𝑎
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Donde:

mHCl = nHCl x MHCl = (VHCl x CHCl – VNaOH x CNaOH) x MHCl

Materiales y equipo

 Alka-Seltzer y Mylanta (en tabletas)

 NaOH 0.50 M
 HCl 0.5 M
 Naranja de metilo
 Bureta
 Erlenmeyer
 Mortero
 Probeta
 Vidrio de reloj
 Embudo
 Soporte universal

Procedimiento

En este procedimiento se analizará la eficiencia de dos tabletas de diferentes

antiácidos determinando la cantidad de HCl que es neutralizada por cada tableta.
Mientras más cantidad de ácido sea neutralizado, mayor es la eficiencia del
antiácido.

Obtener una bureta y enjuagarla con agua desionizada. A continuación se purga

con un pequeño volumen de solución de NaOH 0.5 M. Finalmente utilizando un
embudo, se llena con la solución de NaOH 0.5 M y se dispone para para la
valoración.

Se toma cada una de las tabletas, se pesa y enseguida se macera en un mortero.

Luego se selecciona una porción determinada de antiácido (0.50g) y se deposita
en un Erlenmeyer de 250 mL previamente lavado con agua desionizada. Utilizar
un segundo Erlenmeyer para la otra muestra. Se añaden 25 mL de HCl 0.50 M
a cada Erlenmeyer y se agita durante tres minutos. Tenga en cuenta que
algunos componentes inertes, presentes en las tabletas no se disolverán. Se
añaden 2 gotas de naranja de metilo a la solución en cada frasco obteniéndose
un color rojo, lo cual indica que todo el antiácido ha sido neutralizado.

¿Puede usarse fenolftaleína en lugar de anaranjado de metilo?

El naranja de metilo es un colorante con cambio de color de rojo a

naranja-amarillo entre pH 3,1 y 4,4 lo que indica una sustancia acida
mientras que la fenolftaleína es un indicador con cambio de color rosa
intenso en soluciones con pH básico. Por lo tanto, sus indicadores
serán contrarios.
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Colocar el Erlenmeyer debajo de la bureta y añadir lentamente la

solución de NaOH agitando la mezcla (la solución se va tornado
temporalmente amarilla). Disponer un fondo blanco debajo del
Erlenmeyer para apreciar mejor el cambio de color. Continuar
adicionando la base hasta obtener un color amarillo que persista por
más de 30 segundos, momento en que se ha llegado al punto final.
Anotar el volumen de NaOH añadido y repetir el procedimiento para la
muestra en otro Erlenmeyer.

Datos y resultados

Alka-seltzer

Comprimido efervescente, redondo y de color blanco. Se presenta en

envases de 10 y 20 comprimidos efervescentes.
Pertenece al grupo de medicamentos denominados antiácidos que
actúan disminuyendo el exceso de acidez del estómago.
Este medicamento está indicado en el alivio sintomático de las
molestias gástricas ocasionales relacionadas con hiperacidez (acidez
de estómago, ardores).
Mientras que los comprimidos disuelven, la base (bicarbonato) y el
ácido (ácido cítrico) reaccionan para p roducir dióxido de carbono (de
ahí lo de “Seltzer“), que también produce bastante agitación para
permitir que los ingredientes activos se disuelvan lentamente.

MILANTA EN TABLETAS.

Pertenece al grupo de medicamentos denominados agentes contra el

reflujo gastroesofágico.
Actúa de dos maneras distintas:
1. El alginato de sodio junto con el hidrógeno carbonato (bicarbonato)
de sodio y el carbonato de calcio forman una barrera protectora en el
estómago para evitar el reflujo gástrico calmando el ardor en la bo ca
del estómago.
2. El hidrógeno carbonato (bicarbonato) de sodio y el carbonato de
calcio neutralizan adicionalmente el exceso de ácido en el estómago.

Volumen inicial añadido de HCl 0.50 M. 25mL

Datos de valoración de antiácidos (I)

Antiácido Masa tableta Masa muestra V NaOH (mL)

(g) (g)
Alka-Seltzer 5 0.50 18
MILANTA. 10 0.50 23
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Datos de valoración de los antiácidos (II)

Antiácido n HCl n HCl/tableta E=m HCl/ m

neutralizados Ec. tableta
Ec.1 Ec. 2
A. Alka- 0,08 0,016 0,005
Seltzer
B. Gaviscon 2,78 0,278 0,0025

 n HCl neutralizados
A. C NaOH=x
𝑉𝐻𝐶𝑙∗𝐶 𝐻𝐶𝑙
x=
𝑉 𝑁𝑎𝑂𝐻
25𝑚𝑙∗0,50 𝑁
x=
18𝑚𝑙
x= 0,69 M
 n HCl= 25ml*0,50 M – 18ml*0,69 M
n HCl= 12,5 – 12,42
n HCl= 0,08
25𝑚𝑙∗𝑜,50𝑁
B. x=
23𝑚𝑙
x= 0,54 M
 n HCl= 25ml*0,50 M – 18ml*0,54 M
n HCl= 12,5 – 9,72
n HCl= 2,78

 n HCl/tableta
0,08
A. = 0,016
5
2,78
B. = 0,278
10

 E=m
HCl/m tableta
A. E= 25mL/ 5g
E= 0,005
B. E= 25mL/ 10g
E=0,0025

DISCUSIÓN Y ANÁLISIS DE RESULTADOS

 ¿Cuál de los antiácidos es más eficiente para controlar la acidez?

Incluya los cálculos estequiométricos según sea la composición
química del antiácido usado.

El Alka Seltzer es el medicamento que presenta mayor eficiencia a la hora de

ejercer su función, es decir, atacar la acidez. La muestra de 0,50g fue
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neutralizada con 18 ml de NaOH, por el contrario, el Gaviscon tardó más en su

reacción utilizando 23 ml de NaOH, creando una diferencia de 5ml de NaOH. En
conclusión, se puede decir que el bicarbonato de sodio resulta tener mayor
eficiencia.

 ¿La eficiencia de un antiácido depende de la naturaleza del principio

activo, de su cantidad o de ambos?

Un antiácido es una sustancia, generalmente una base, que actúa en contra de

la acidez estomacal, es decir, el antiácido alcaliniza el estómago aumentando el
PH. La eficiencia del antiácido depende de ambos. Depende de la naturaleza de
su principio activo porque no puede ser cualquier sustancia, esta tiene que ser
necesariamente una base para poder neutralizar el medio, también depende de
su cantidad porque estequiométricamente la cantidad de base debe ser
suficiente para neutralizar el exceso de ácido.

 ¿Qué es punto de equivalencia de una titulación? ¿En qué se diferencia

del denominado punto final?

El punto de equivalencia es la cantidad exacta de titulante para que exista la

reacción que se desea. Este punto no presenta cambios observables. Mientras
que el punto final sí es observable debido a que se añade un poco más de
titulante para poder generar la diferencia de color.

 Escriba la ecuación de la neutralización entre los antiácidos y el HCl

presente en el jugo gástrico.

Alka-Seltzer ®: NaHCO3 + HCl ---> NaCl + CO2 + H2O

Gaviscon ®: NaHCO3 + CH3COOH → NaCH3COO + H2O + CO2
El pH del jugo gástrico es aproximadamente de 1,5 que corresponde a una
concentración de ácido clorhídrico de 0,03M (3%).

CONCLUSIONES

Con la práctica de laboratorio, las conclusiones son:

1. Que el ácido es el que indica que una solución que tan acida, básica o
neutra se encuentra, dependiendo de la concentración y los indicadores
utilizados para estandarizar o titular.
2. El pH-metro es el instrumento utilizado para medir cual pH y fue el que
nos permitió saber el pH de cada una de las soluciones. 3. Se pudo
concluir que el pH es una sustancia colorida que cambia de color según
sea acido o básica.

Bibliografía

 Brown, Theodore. Antiácidos. En: Química. La Ciencia Central. Prentice

Hall. México. 1997. Pp. 128
 PH AND SHOCK ABSORBING SYSTEMS

 Devlin TM. Bioquímica. Libro de texto con aplicaciones clínicas. 4ª ed.

Barcelona; Editorial reverté; 2004.
 Lehninger AL, Nelson DL. Principios de bioquímica. 4ª ed. Barcelona:
Ediciones Omega; 2005.
 Mathews-Van Holde-Ahern (2002) Bioquímica 3ª ed. Editorial Pearson.
 Murray Robert K. (2010) Bioquímica Ilustrada 28ª ed. Editorial Mc Graw-
Hill.