UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE

MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES

CUAUTITLÁN - CAMPO 1

Química Industrial

Cinetica Quimica

Profesora: Juana Cabrera Hernandez

Reporte de la práctica #6:

“DESCOMPOSICIÓN DE UREA POR
UREASA”

Grupo:2551

Equipo #3:
● Chávez Abad Julian
● Hoyos Garcia Sophia Daniela
● Huerta Reyes Jonathan
● Torres Rafael Giovanni
● Valladares Hoppe Mabel Carmen
OBJETIVO.

Conocer mediante la experimentación la cinética de descomposición de urea por

ureasa, utilizando a la enzima ureasa extraída de soya experimentalmente.
Observar el efecto de la temperatura sobre la rapidez de reacción en la catálisis
enzimática, obteniendo de esta forma la temperatura de máxima actividad de un
biocatalizador siendo el caso de la ureasa, logrando determinar la energía de
activación de esta reacción.

OBJETIVOS ACADÉMICOS:

-Investigar la cinética de descomposición de urea por uresa

-Utilizar a la enzima ureasa extraída de soya
-Estudiar el mecanismo de reacción para reacciones biocataliticas
-Obtener los parámetros cinéticos: constante de Michaelis (K​m​) y rápidez máxima
(r​máx​) mediante la ecuación de Lineweaver-Burk
-Seguir el avance de reacción por medidas de conductividad
-Investigar el efecto de la temperatura sobre la rapidez de reacción en la catálisis
enzimática
-Obtener la temperatura de máxima actividad de un biocatalizador (ureasa)
-Determinar la energía de activación de una reacción
-Calcular energía interna, entalpia, entropía y energía de Gibbs de activación de la
hidrolisis biocatalitica de la urea

INTRODUCCIÓN.
La observación de la descomposición enzimática de la urea mediante ureasas es
muy interesante pues permite tener varios puntos de vista. En primer lugar, esta
reacción puede servir como ejemplo para una reacción de orden cero. Este orden de
reacción es mostrado en el aumento lineal de la concentración del producto.
En ella se puede observar la cinética de la catálisis: en primer lugar el sustrato y la
enzima se encuentran en equilibrio con un complejo de enzima-sustrato. Este
equilibrio ya puede ser comparado con la acumulación de un sustrato, determinado
por la difusión, en una superficie catalíticamente activa. En un segundo paso, el
complejo enzima-substrato es transformado rápidamente en los productos.
Además, la reacción puede ser utilizada como introducción a la cinética de enzimas:
a partir de varias mediciones se puede determinar la velocidad máxima de reacción,
la constante de Michaelis y la concentración de enzimas.
Como en el curso de la hidrólisis de la urea

se produce carbonato de amonio disociado en varios iones, la reacción puede ser

seguida mediante mediciones de conductividad. La concentración de los productos y
la velocidad de la reacción se calcula a partir de los datos obtenidos.
Desarrollo Experimental.

​Diagrama de Flujo.
 RESULTADOS.

Tabla 1.​Resultados de conductividad en función del tiempo.

TEMPERATURA (​°​C)
TIEMPO (s)
30 °C 40 °C 50 °C 60 °C

10 19.49 25.9 29.2 37.6

20 19.48 24.8 28.5 37.9

30 19.45 24.7 28.7 37.9

40 20.5 23.9 28.8 34.9

50 21 25.1 28.5 34.9

60 21.3 25.1 29.4 33.8

70 21.4 25.1 28.5 33.7

80 21.4 24.8 28.4 33.5

90 21.3 27.1 28.5 33.7

100 22.4 26.9 29.4 33.7

110 22.4 27.3 29.2 33.7

120 22.5 27.6 29.3 33.7

Gráfica 1

b=0.0298
Gráfica 2

b=0.0251

Gráfica 3

b=0.0034
Gráfica 4

b=-0.0421

Tabla 2. R0 vs Temperatura
Temperatura r0

30 0.0298

40 0.0251

50 0.0034

60 -0.0421

Gráfica 5. R0 vs Temperatura
Con base en el gráfico 5 al graficar r0 vs temperatura pudimos determinar la
velocidad máxima de la reacción, obteniendo un valor de 0.0298.

Tabla 3.​ ​Resultados de conductividad a diferentes concentraciones. Temp.= 40°C

TIEMPO (s) CONCENTRACIONES
0.004 M 0.008 M 0.012 M 0.016 M 0.02 M
10 28.3 44.2 44.8 41.1 33.9
20 28.5 44.8 45.1 41.3 34.3
30 28.5 45.2 45.2 42 34.8
40 28.6 45.6 45.4 43.6 35.4
50 28.7 46.1 45.6 44 36.3
60 28.9 46.5 45.7 44.5 36.8
70 29.1 47 45.8 45.3 37.2
80 29.2 47.3 46 45.7 37.5
90 29.4 47.7 46.1 46.2 37.8
100 30.8 48.3 46.1 46.7 38.3
110 31.9 48.5 46.2 47.3 38.5
120 32.1 48.7 46.4 47.6 38.9

Gráficos de variación de la conductividad Vs tiempo, a diferentes concentraciones.

Gráfico 6.
Gráfico 7.

Gráfico 8.
Gráfico 9.

Gráfico 10.

Con los datos de conductividad a diferentes concentraciones obtenidos

experimentalmente se realizaron los gráficos anteriormente presentados (6-9), con
los cuales se pudo obtener la velocidad inicial (rₒ) a cada concentración. Los cuales
se pueden observar en la siguiente tabla (tabla 4).

Tabla 4.​ Concentración de Urea y velocidad inicial (rₒ).

Concentración de Urea (M) Rapidez Inicial (r​₀​)

0.004 0.0329

0.008 0.0416
 0.012 0.0135

0.016 0.062

0.02 0.0466

Gráfica 11.

Gráfica 12.​ Diagrama de Lineweaver-Burk

Tabla 5.​ Constante de rapidez de las diferentes temperaturas
Temperatura Constante de rapidez

30°C 1.49

40°C 1.255

50°C 0.17

60°C -2.105

Análisis de resultados.
La reacción se lleva a cabo bajo catálisis de la enzima ureasas. El mecanismo
puede ser descrito de la siguiente manera (E: Enzima ureasas, S: Sustrato urea, ES:
Complejo enzima-sustrato, P: Productos):

La velocidad de reacción de la descomposición de la urea se rige de acuerdo a la

ley de velocidad:

La reacción es pues de primer orden respecto a [ES].

Como la enzima E actúa como catalizador, su concentración total permanece igual
en el curso de la reacción. Cuando la concentración del sustrato es suficiente se
establece un estado estacionario, en el cual la velocidad de formación y la velocidad
de descomposición del complejo enzima-sustrato tienen el mismo valor:

Por esta razón la concentración [ES] es constante durante la reacción, en donde su

valor absoluto se orienta según cuan grandes sean las constantes de velocidad. Tal
caso es denominado equilibrio dinámico. En la formación de los productos de la
reacción P esto se traduce en la constancia de la velocidad de reacción y por ello, la
curva de la concentración de urea tiene un curso lineal. De esta manera, la
descomposición de la urea mediante ureasas sigue la ley de velocidad de orden
cero:

Debido a que la velocidad de la reacción depende realmente de [ES] y esta

dependencia no sale a la luz por la constancia de [ES], se habla de una reacción de
seudo-orden cero.
Para determinar la constante de velocidad de tal reacción se debe determinar la
pendiente de la recta en el diagrama de concentración de la urea en función del
tiempo.
Que las ureasas se descomponen a temperatura ambiente se muestra en la
reducción de la velocidad de la reacción cuanto mayor es el tiempo que dura el
ensayo. La linealidad de la curva para la concentración de la urea sólo se da al inicio
de la reacción.

CONCLUSIONES.

Mediante la experimentación cinética logramos observar la descomposición de urea

por ureasa, donde utilizamos a la enzima ureasa que extrajimos de soya
experimentalmente.
Fue posible observar el efecto de la temperatura sobre la rapidez de reacción en la
catálisis enzimática, obteniendo de esta forma la temperatura de máxima actividad
sobre un biocatalizador siendo el caso de la ureasa.
Sin embargo hay bastantes deficiencias ya que nuestros graficos no son muy
lineales y resultan algo extraños esto lo atribuimos a que no se prepapro de manera
correcta la urea, por lo tanto no fue posible determinar la energía de activación de
esta reacción.

Actividades complementarias.

1. Investiga la diferencia entre conductividad equivalente y conductividad molar

R=La conductividad equivalente de una solución es la conductancia específica de un equivalente de
soluto. La conductividad equivalente varía con la concentración, siendo mayor en soluciones más
diluidas, porque en las soluciones concentradas, las interacciones ion-ion y ion-solvente reducen la
movilidad de los iones que transportan la corriente.

En una disolución iónica la conductividad específica l medida, depende de la concentración (nº de

iones presentes) y es en definitiva, la conductancia de 1cm​3 de disolución y por tanto dependerá del
nº de iones (cationes y aniones), es decir, de la concentración.

2. Investiga por qué se utiliza corriente alterna en las mediciones de conductividad de iones
en solución
R=EI paso de la corriente a través de la solución se efectúa, como ya vimos, por el movimiento de los
iones. La capacidad de los iones para moverse en la disolución y la propiedad que tiene una solución
de conducir la corriente, debido a la carga asociada a los iones, este desplazamiento constituye una
corriente eléctrica (movimiento de carga), ya que finalmente se traducirá, en el circuito externo, en
una intensidad i de corriente, lo cual es evidencia de la propiedad conductora del electrolito.

3. Realiza una revisión hemerográfica de las enzimas más utilizadas en la industria química.
R=
1. LA AMILASA DE HONGOS Y PLANTAS cataliza la degradación del almidón en azúcares
sencillos.
2. PROTEASAS: Los fabricantes de galletas las utilizan para reducir la cantidad de proteínas en
la harina
3. TRIPSINA: Para pre-digerir el alimento digerido a bebés
4. CELULASAS, PECTINASAS: Aclarador de zumos de frutos
 5. RENINA, derivado del estomago de animales rumiantes jóvenes(terneros y ovejas):
Producción de queso, usada para hidrolizar proteínas.
6. ENZIMAS PRODUCIDAS POR BACTERIAS:Actualmente, cada vez más usadas en la
industria láctea.
7. LIPASAS: Se introduce durante el proceso de producción del queso roquefort para favorecer
la maduración
8. LACTASAS: Rotura de la lactosa en glucosa y galactosa
9. PAPAINA: Ablandamiento de la carne utilizada para cocinar
10. AMILASAS, AMILOGLUCOSIDASAS Y GLUCOAMILASAS: Conversión del almidón en
glucosa y diversos azúcares invertidos
11. GLUCOSAS ISOMERASA:Conversión de ​glucosa en ​fructosa durante la producción de
jarabe de maíz partiendo de sustancias ricas en almidón. Estos jarabes potencian las
propiedades edulcorantes y reducen las calorías mejor que la ​sacarosa y manteniendo el
mismo nivel de dulzor.
12. CELULASAS: Utilizadas para degradar la celulosas en azúcares que pueden ser
fermentados
13. LIGNINASAS: Utilizada para eliminar residuos de ​lignina

4. Investiga ¿Qué características presentan las enzimas termófilas?

R=Las bacterias termófilas son aquellas que se desarrollan a temperaturas superiores a 45ºC,
pudiendo superar incluso los 100ºC (hipertermófilos) siempre que exista agua en estado líquido, lo
que se consigue si la presión es elevada como ocurre en las profundidades oceánicas

5. Investiga los diversos mecanismos de inhibición enzimática

R=Inhibición competitiva:

Inhibición no competitiva:
Inhibición acompetitiva:

6.​ ​Investiga en qué consiste la cinética de relajación y su aplicación en enzimas

R=​Cinéticas de relajación
Sea la reacción elemental A​⇌​B , en equilibrio. Introducimos una perturbación que cambia la constante
de equilibrio, el sistema se relaja y alcanza una nueva posición de equilibrio. Dicha perturbación
puede consistir en un cambio brusco de presión o temperatura.

7.​ ​Explica la utilidad de la ecuación Eadie-Hofstee para la cinética enzimática

R=​El diagrama de Eadie-Hofstee, también llamado de Woolf-Eadie-Augustinsson-Hofstee o de

Eadie-Augustinsson, es una representación gráfica de la función matemática utilizada en ​bioquímica
en el estudio de la ​cinética de las reacciones enzimáticas​, por la que se relaciona la velocidad de una
reacción con la concentración del sustrato:

donde 'v' representa la velocidad de la reacción, 'K​m​' es la ​constante de Michaelis-Menten​, ​[​S​] es la

concentración del sustrato y 'v​max​' es el máximo de la velocidad de la reacción.

8.​ ​Investiga el concepto de número de recambio de una enzima

R=​En ​enzimología​, el término ​número de recambio (también conocido como k​cat ​o k2​​ ) se define como
el máximo número de ​moléculas de un ​sustrato que una molécula de​enzima puede convertir en
producto por unidad de tiempo. Se calcula del siguiente modo:

Por ejemplo, la ​anhidrasa carbónica posee un número de recambio de entre 400 000 y 600 000
moléculas de producto (iones ​bicarbonato​) por molécula de enzima por segundo.

9. Cuáles son las enzimas alostéricas

R=​Las enzimas alostéricas son ​enzimas que cambian su conformación al unirse un ​efector​, lo que
conduce a un cambio aparente en la ​afinidad de unión de otro ​ligando en un sitio distinto de la
molécula. Esta "acción a distancia" de la unión de un ligando que afecta a la unión de otro en un sitio
claramente diferente es la esencia del concepto de alostería o alosterismo.
10.​ ​Investigue el proceso de hidrólisis de urea para producción de amoníaco a nivel industrial
R=​Hay muchos tipos de bacterias. Algunas son dañinas, algunas son beneficiosas y otras no son ni
lo uno ni lo otro. La capacidad de distinguir entre estas bacterias es crucial para la prevención y el
tratamiento de enfermedades. A menudo, las bacterias pueden ser identificadas por su capacidad
para reaccionar con compuestos químicos. La urea es uno de tales compuestos y la prueba de
hidrólisis de la urea se utiliza para distinguir unos grupos de bacterias de los otros.
Muchas de las bacterias que se encuentran en el intestino contiene ureasa. Sin embargo, pocas
pueden descomponer la urea rápidamente. Por tanto, es posible reducir la identidad de una bacteria
basada en hidrólisis de la urea. Los grupos más comúnmente analizados que son positivos son:
Proteus, Morganella y Providencia.

Mientras que la prueba de hidrólisis de la urea proporciona información valiosa, no es definitiva. Hay
varias bacterias que pueden descomponer la urea y se necesitan pruebas adicionales para
distinguirlas. Estas pruebas proporcionan información sobre la morfología y la estructura de los
organismos, los requerimientos de oxígeno y su capacidad para reaccionar con peróxido de
hidrógeno, sacarosa y citrato. Toda esta información tomada en su conjunto suele ser suficiente para
clasificar y nombrar a una bacteria desconocida.

BIBLIOGRAFÍA.

● Chang, R. (2000) Fisicoquímica para las ciencias químicas y biológicas, Mc Graw Hill. 3a Ed,
México.
● Vargas, M. & Obaya A. (2005). Cálculo de parámetros de rapidez en cinética Química y
enzimática. (1a Ed.) Universidad Nacional Autónoma de México, México.
● Lehninger, A. L. (1982). Bioquímica: “Las Bases Moleculares de la Estructura y Función
Celular”.Segunda edición. Ediciones Omega, Barcelona.