Professional Documents
Culture Documents
COLOMBIANA 235-2
2002-04-30
I.C.S.: 67.200.10
ICONTEC es una entidad de carácter privado, sin ánimo de lucro, cuya Misión es fundamental
para brindar soporte y desarrollo al productor y protección al consumidor. Colabora con el
sector gubernamental y apoya al sector privado del país, para lograr ventajas competitivas en
los mercados interno y externo.
Esta norma está sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en
todo momento a las necesidades y exigencias actuales.
ICONTEC cuenta con un Centro de Información que pone a disposición de los interesados
normas internacionales, regionales y nacionales.
DIRECCIÓN DE NORMALIZACIÓN
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA NTC 235-2
1. OBJETO
La presente norma especifica un método que usa una extracción con hexano para la
determinación del contenido de materia insaponificable en las grasas y aceites animales y
vegetales.
Este método se aplica a todas las grasas y aceites pero no a las ceras.
2. REFERENCIAS NORMATIVAS
La siguiente norma contiene disposiciones que, mediante la referencia dentro de este texto,
constituyen la integridad del mismo. En el momento de la publicación eran válidas las ediciones
indicadas. Todas las normas están sujetas a actualización; los participantes, mediante
acuerdos basados en esta norma, deben investigar la posibilidad de aplicar la última versión de
la norma mencionada a continuación:
NTC 5033: 2002, Grasas y aceites animales y vegetales. Preparación de la muestra para
ensayo.
3. DEFINICIONES
3.1 Materia insaponificable: todas las sustancias presentes en el producto, que, después de
saponificación de éste por hidróxido de potasio y extracción por hexano, no son volátiles bajo
las condiciones especificadas.
Nota. El material insaponificable incluye lípidos de origen natural, como esteroles, hidrocarburos y alcoholes superiores,
alcoholes alifáticos y terpénicos, al igual que cualquier material extraño extraído por el solvente, y no volátil a 103 °C
(por ejemplo: aceites minerales) que pueden estar presentes.
1
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA NTC 235-2
4. PRINCIPIO
Saponificación de la grasa o aceite por ebullición bajo reflujo con una solución de hidróxido de
potasio etanólica. Extracción de la materia insaponificable de la solución de jabón con hexano,
o en ausencia de éste, éter de petróleo liviano. Evaporación del solvente y pesaje del residuo
después de secado.
5. REACTIVOS
Todos los reactivos deben ser de grado analítico reconocido. El agua usada debe ser agua
destilada o agua de pureza al menos equivalente.
5.1 n-Hexano, o en ausencia de éste, éter de petróleo liviano, destilado entre 40 °C y 60 °C,
número de bromo menor de 1. Ambos solventes deben estar libres de residuos.
6. EQUIPO
6.2 Condensador de reflujo con junta esmerilada para unión a los balones (véase el numeral 6.1).
6.3 Embudos de separación con capacidad de 250 ml, con llaves y tapones de
politetrafluoroetileno (PTF).
7. MUESTREO
Es importante que el laboratorio reciba una muestra representativa y que no haya sido dañada
o alterada durante el almacenamiento o transporte.
2
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA NTC 235-2
9. PROCEDIMIENTO
9.2 SAPONIFICACIÓN
Se deja reposar hasta que haya separación completa de las dos fases, y luego se separa la
capa inferior (capa acuosa) en un segundo embudo de separación.
Se extrae la solución jabonosa etanólica acuosa dos veces más, cada una de ellas en la misma
forma con 50 ml de hexano. Se recogen los tres extractos de n-hexano en el embudo de
separación.
Se lavan los extractos combinados tres veces con porciones de 25 ml de solución de etanol
(véase el numeral 5.2), agitando vigorosamente y decantando la solución etanólica acuosa
después de cada lavada. Se decanta cada solución de lavado, dejando 2 ml, luego se gira el
embudo alrededor de su eje. Se espera algunos minutos para recolectar la capa etanólica
acuosa restante. Al decantar, se cierra la llave cuando la solución de hexano alcanza el
diámetro interior de la misma.
Se continúa lavando con la solución de etanol hasta que los enjuagues no presenten color
rosado al agregar una gota de solución de fenolftaleína (véase el numeral 5.3).
3
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA NTC 235-2
9.6.1 Se seca el residuo durante 15 min en el horno (véase el numeral 6.5) a 103 °C ± 2 °C,
con el balón en posición casi horizontal. Se deja enfriar en un desecador y se pesa con
aproximación a 0,1 mg.
Como alternativa, se conecta el balón al aparato para secado en vacío (véase el numeral 6.5) y se
seca sobre el baño de agua hirviendo con el máximo de vacío de la bomba de agua,
aproximadamente durante 15 min. Se deja enfriar a temperatura ambiente con el máximo de vacío
de la bomba de agua, se seca cuidadosamente el balón y se pesa con aproximación a 0,1 mg.
Se repite el secado por períodos sucesivos de 15 min hasta que la pérdida de masa entre dos
pesajes sucesivos sea menor de 1,5 mg. Si no se obtiene masa constante después de tres
períodos de secado, la materia insaponificable probablemente está contaminada y, entonces,
se debe repetir la determinación.
9.6.2 Si se considera necesaria una corrección para ácidos grasos libres, después del pesaje
del residuo, se disuelve éste en 4 ml de hexano y luego se agregan 20 ml de etanol,
previamente neutralizado, hasta obtener un color rosado suave en presencia de fenolftaleína
(véase el numeral 5.3) como indicador. Se titula con solución etanólica volumétrica estándar de
hidróxido de potasio, c(KOH)=0,1 mol/l hasta obtener el mismo color final. La masa de los
ácidos grasos libres se calcula como ácido oléico y la masa del residuo se corrige de acuerdo
con esto (véase el numeral 10).
Se lleva a cabo un ensayo en blanco usando el mismo procedimiento y las mismas cantidades
de todos los reactivos, pero omitiendo la porción de ensayo. Si el residuo excede 1,5 mg, se
investigan la técnica y los reactivos.
100 ( m1 − m 2 − m 3 )
%
m0
Donde:
4
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA NTC 235-2
Donde:
11. PRECISIÓN
El Anexo A contiene los detalles de un ensayo interlaboratorio sobre la precisión del método.
Los valores derivados de este ensayo pueden no ser aplicables a rangos y matrices diferentes
a las que se dan.
- el método utilizado;
5
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA NTC 235-2
Anexo A (Informativo)
A1. PARTICIPACIÓN
En el estudio colaborativo organizado por “The Institut des Corps Gras Centre Technique
Industriel" tomaron parte cuarenta laboratorios de seis diferentes países (Francia, Alemania
Hungría, Malasia, Países Bajos y Gran Bretaña.
A2. MUESTRAS
A3. RESULTADOS
En la Tabla A1, A2 y A3 se registran los datos de los resultados obtenidos por los laboratorios
de las muestras A, B y C. En la Tabla A4 se registran los datos de los resultados muestra por
muestra.
Para la muestra A se eliminaron dos laboratorios sobre la base de los ensayos the Cochran
(Laboratorio 6) y Dixon (Laboratorio 9), un laboratorio para la muestra C sobre la base del
ensayo Dixon (Laboratorio 11). Para la muestra B no se eliminó ningún laboratorio.
El promedio del contenido de la materia insaponificable para las tres muestras estuvo entre
0,15 % y 0,58 % (en masa).
6
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA NTC 235-2
Resultado 1 Resultado 2
Laboratorio
% (en masa) % (en masa)
1 0,56 0,58
2 0,541 0,545
3 0,51 0,52
4 0,62 0,58
5 0,57 0,63
6 0,78 0,61
7 0,54 0,51
8 0,64 0,62
9 0,89 0,89
10 0,54 0,57
11 0,62 0,64
12 0,6 0,63
13 0,68 0,68
14 0,56 0,52
Nota. El laboratorio 6 fue eliminado con base en el ensayo de Cochran (5 %).
El laboratorio 9 fue eliminado con base en el ensayo de Dixon (5 %).
Resultado 1 Resultado 2
Laboratorio
% (en masa) % (en masa)
1 0,35 0,33
2 0,2625 0,2485
3 0,37 0,32
4 0,30 0,30
5 0,35 0,42
6 0,44 0,45
7 0,35 0,3
8 0,35 0,35
9 0,18 0,18
10 0,25 0,32
11 0,51 0,48
12 0,24 0,26
13 0,34 0,32
14 0,38 0,34
Resultado 1 Resultado 2
Laboratorio
% (en masa) % (en masa)
1 0,16 0,18
2 0,1337 0,106
3 0,18 0,17.
4 0,15 0,14
5 0,22 0,23
6 0,09 0,12
7 0,09 0,11
8 0,2 0,21
9 0,04 0,03
10 0,13 0,18
11 0,40 0,41
12 0,13 0,14
13 0,23 0,22
14 0,16 0,19
Nota. Laboratorio 11 fue eliminado con base en el ensayo de Dixon (5 %).
7
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA NTC 235-2
Aceite crudo de
Aceite crudo de girasol Sebo crudo
palma
Muestra A Muestra C
Muestra B
Numero de laboratorios 14 14 14
Número de laboratorios retenidos luego de 12 14 13
eliminar estadísticas falsas
Promedio, % (en masa) 0,58 0,33 0,15
Desviación estándar de repetibilidad, sr ,% 0,02 0,03 0,02
Coeficiente de variación de repetibilidad (%) 3,64 7,81 10,49
Desviación estándar de reproducibilidad, sR, % 0,05 0,08 0,05
Coeficiente de variación de reproducibilidad, (%) 8,99 24,63 36,32
Límite de repetibilidad, r, % 0,06 0,07 0,04
Límite de reproducibilidad, R, % 0,15 0,23 0,16
8
NORMA TÉCNICA COLOMBIANA NTC 235-2
DOCUMENTO DE REFERENCIA