CROMATOGRAFIA
estacionaria mientras que la fase móvil
La cromatografía es una técnica que permite
la separación de los componentes de una
mezcla debido a la influencia de dos efectos
contrapuestos.
a) Retención. Efecto producido sobre los
componentes de la mezcla por una fase
estacionaria, que puede ser un sólido o un
líquido anclado a un soporte sólido. b)
Desplazamiento. Efecto ejercido sobre los
componentes de la mezcla por una fase móvil,
que puede ser un líquido o un gas.
FUNDAMENTO TEORICO
Consiste en una serie de métodos que sirven
para la separación de una mezcla de solutos.
Se basa en la diferente velocidad con que se
mueve cada uno de los solutos a través de un
medio poroso, arrastrados por un disolvente
en movimiento.
CROMATOGRAFIA EN FASE INVERSA Y
NORMAL.
En cromatografía en fase normal, el
componente menos polar se eluye
primero, debido a que relativamente es el
más soluble en la fase móvil y un aumento de
la polaridad de la misma provoca una
disminución del tiempo de elución. Por el
contrario, en fase inversa, los componentes
más polares aparecen primero, y un aumento
de la polaridad de la fase móvil aumenta el
tiempo de elución.
FE – Sílica químicamente modificada con
grupos no-polares: hidrocarburos saturados:
C18 octadecil, C8 octil, C4 tetrametil, C2
dimetl FM – Mezclas: agua/disolventes
orgánicos H2O +(CH3OH, THF, CH3CN)
CROMATOGRAFIA EN COLUMNA
Es el método más utilizado para la separación
de compuestos orgánico a escala preparativa.
La fase estacionaria se deposita en el interior
de una columna de vidrio que termina con
una placa porosa que impide su paso y en un
estrechamiento con una llave. La mezcla se
deposita sobre la parte superior de la fase
atraviesa el sistema. Los compuestos van
saliendo por separado de la columna y se
recogen en fracciones, los más polares
quedan más retenidos y para que salgan
generalmente hace falta aumentar la
polaridad del disolvente. El tiempo necesario
para eluir un compuesto de la columna se
llama tiempo de retención
PARAMETROS CROMATOGRAFICOS
. TIEMPO MUERTO (to). Tiempo que tarda un
soluto idealmente no retenido, en salir del
sistema cromatográfico.
2. TIEMPO DE RETENCIÓN (tr). Tiempo que
tarda el 50 % de un soluto en eluir y
corresponde a la posición de máxima
concentración en un cromatograma. 3.
VELOCIDAD DE FLUJO DEL DISOLVENTE (F).
Rapidez de la fase móvil a través de la
columna dada en unidad de volumen sobre
unidad de tiempo. 4. VOLUMEN DE
RETENCIÓN (Vr): Volumen en el que eluye el
50 % de un soluto. Se calcula con la ecuación:
Vr = tr . F
CROMATOGRAFIA EN PAPEL
El método se basa en un mecanismo de
reparto, y consiste en depositar una pequeña
cantidad de muestra en el extremo de una tira
de papel de filtro, que se deja evaporar. Luego
se introduce la tira en una cubeta que
contenga el disolvente, de manera que éste
fluya por la tira por capilaridad.
La separación se realiza en función de la
afinidad de los solutos con las dos fases, las
más solubles en agua se quedarán cerca del
punto donde se aplicó la muestra, y las menos
solubles en agua y más solubles en el
disolvente llegarán más lejos.
 Orden polaridad: hidrocarburos <
éteres < ésteres < cetonas < aldehídos
< amidas < aminas < alcoholes <
agua