INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
U.D.A. BIOQUÍMICA
GONZÁLEZ MEDRANO JUAN CARLOS - TÉLLEZ SANDOVAL LUIS DIONEY
GRUPO 2OV1
PRÁCTICA: “AISLAMIENTO DEL DNA DE ORIGEN VEGETAL Y SU CARACTERIZACIÓN
ESPECTROFOTOMÉTRICA”
INTRODUCCIÓN
Los ácidos nucleicos son polímeros de
nucleótidos unidos por enlaces fosfodiéster. Por
su composición química, se han clasificado en
dos tipos: ácido desoxirribonucleico (DNA) y
ácido ribonucleico (RNA). Los nucleótidos que
forman al DNA están constituido por el azúcar 2′-
desoxirribosa unido mediante enlace éster a
ácido fosfórico y mediante enlace N-glucosídico
a una de las cuatro bases nitrogenadas (adenina,
guanina, timina o citosina). Los nucleótidos del
DNA forman una hélice constituida por dos
hebras antiparalelas que se mantienen unidas
mediante puentes de hidrógeno. Para
empaquetarse, el DNA se une a nucleoproteínas,
denominadas histonas; y cuando se quieren
separar estos componentes, se aplica
tratamiento con ácidos o con concentraciones
altas de sales. Los nucleótidos del RNA se
encuentran formados por el azúcar ribosa, unida
mediante enlace glucosídico a una de cuatro
bases nitrogenadas (adenina, guanina, uracilo o
citosina), formando moléculas de una sola
cadena. La función del DNA es la de almacenar y
transferir la información genética que conforma
a un organismo y a su descendencia. El genoma
de un individuo comprende la totalidad de la
información genética contenida en el DNA. El
DNA junto con los tres tipos de RNA (rRNA, tRNA
y mRNA) participa en la biosíntesis ordenada de
los componentes de la célula, codificando la
expresión espacio temporal de las proteínas y
SECCIÓN II
respondiendo a los estímulos del medio
ambiente.
OBJETIVO
Aislar, purificar y caracterizar el DNA de
espinaca.
METODOLOGÍA
Se toman 15 del material biológico en un
mortero, al cual se le añade Tris/EDTA/NaCl, esto
con la finalidad de romper efectivamente las
paredes celulares de las hojas de espinaca.
Se adicionaron 0.3 mL de amilasa para dejar en
incubación, la amilasa actúa sobre el almidón (lo
rompe).
Posteriormente se centrifugó para separar las
macromoléculas más pesadas y recuperamos el
sobrenadante.
Agregamos 15 mL de cloroformo: alcohol (24:1)
y se llevó de nuevo a centrifugar obteniendo 3
fases, de las cuales la menos densa era la de
interés, por lo que la recuperamos con ayuda de
una pipeta procurando evitar el contacto con las
otras fases, principalmente la que contenía
proteínas.
Se colocó esta fase a un frasco con 30 mL de
alcohol 96° frio para poder precipitar al DNA ya
que no es soluble en alcohol.
 Abs. 3 -0.921 3 3 0.24 0.21 0.855 0.7 0.454 0.24 0.121
nm 200 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300

alcohol de 96° pudieron ser más evidentes por su

coloración blanquecina. Estas contaminaciones
pueden causar inconvenientes al momento de
realizar la medición espectrofotométrica, y a su
vez disminuyen la pureza del producto obtenido.

RESULTADOS
𝐴260
𝐶= (𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑢𝑐𝑖𝑜𝑛)
280
. 855
𝐶= (50) = 0.0019𝑔/𝑚𝐿
22500
C= concentracion de DNA
260 .855
Abs280 = 𝑃𝑢𝑟𝑒𝑧𝑎=.454 = 1.88

DISCUSIÓN

El proceso de obtención de Ácido

desoxirribonucleico en organismos vegetales
resulta muy específico y requiere del trabajo
preciso de tiempos, reactivos y condiciones,
pues estos son los factores de los que dependerá
tener un buen producto en calidad y cantidad. El
resultado obtenido correspondía a lo esperado,
una cantidad no muy grande de DNA extraído,
aunque presentaba ligeras contaminaciones por
proteínas que se mezclaron en la recuperación
del sobrenadante que contenía el DNA, pues
estas se encontraban suspendidas en una
segunda fase, y al suspender con el DNA en
CONCLUSION

La pureza obtenida en la extracción fue bastante

alta, ya que esta result de 1.88 y de acuerdo con
la literature el grado mayor de pureza
corresponde a 2, de acuerdo con estos
resultados podemos concluir que el método
utilizado para la extracción de DNA fue muy
eficaz, teniendo una ligera contaminación de
proteínas que afectaron la pureza.

BIBLIOGRAFÍA

http://learn.genetics.utah.edu/es/units/activiti
es/extraction/

Estruch, J. J., Antun4a, C., & Ferrer, S. Ramo! n,

D.(1989) Aislamiento de DNA geno! mico de
Trichophyton mentagrophytes. Revista
Iberoamericana de MicologıTa, 6, 62-66.