Universidad Nacional 1 Escuela de Química

Universidad Nacional
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Escuela de Química
Ingeniería en Bioprocesos Industriales
Prof. Ligia Dina Solís Torres

Actividad en clase 02
MACROMOLÉCULAS: ENZIMAS

Propiedades de
las proteínas

Desnaturalización Capacidad
Solubilidad Especificidad
y renaturalización amortiguadora

De función De especie

Solubilidad
• Las proteínas globulares poseen un
elevado tamaño molecular, por lo que al
disolverse, dan lugar a disoluciones
coloidales.
• La solubilidad de estas moléculas se
debe a los radicales R que, al ionizarse,
establecen puentes de hidrógeno con las
moléculas de agua. Así, la proteína
queda recubierta de una capa de
moléculas de agua que impide que se
pueda unir a otras proteínas, lo que
provocaría su precipitación.
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• La solubilidad depende del pH, temperatura, concentración iónica... A
pesar de ser solubles, la mayoría de las membranas biológicas son
impermeables al paso de proteínas.

Desnaturalización y renaturalización
● Consiste en la pérdida de todas las estructuras de orden superior
(secundaria, terciaria y
cuaternaria) quedando la proteína
reducida a un polímero con
estructura primaria.
● Consecuencias inmediatas son:
● Disminución drástica de la
solubilidad de la proteína,
● acompañada frecuentemente
de precipitación
● Pérdida de todas sus
funciones biológicas
● Alteración de sus
propiedades hidrodinámicas

Agentes desnaturalizantes
● I. Físicos
● 1. Calor. La mayor parte de las proteínas experimentan
desnaturalizaciones cuando se calientan entre 50 y 60 ºC; otras
se desnaturalizan también cuando se enfrían por debajo de los
10 a 15 ºC.
● 2. Radiaciones
● II. Químicos: todos los agentes que rompen interacciones o enlaces
presentes en la estructura nativa de la proteína:
● 1. Detergentes
● 2. Urea y guanidina a altas concentraciones
● 3. Altas concentraciones de sal y extremos de pH
● 4. Reactivos de grupos -SH

Desnaturalizacion de proteínas
● La Desnaturalización envuelve:
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● La ruptura de los enlaces de la estructuras cuaternaria, terciaria y
secundaria
● El calor y los compuestos orgánicos rompen los puentes de H e
interrumpen las interacciones hidrofóbicas.
● Ácidos y bases rompen los puentes de H entre grupos R polares
y perturban los enlaces iónicos.
● Los iones de metales pesados reacciones con los enlaces
disulfuro (-S-S-) formando solidos o productos insolubles.
● La agitacion brusca (batido) tensa las candenas peptidicas
rompiendo sus enlaces.

Capacidad amortiguadora
● Las proteínas, al estar constituidas por aminoácidos, tienen un
comportamiento anfótero. Tienden a neutralizar las variaciones de pH
del medio, ya que pueden comportarse como un ácido o una base y,
por tanto, liberar o retirar protones (H+) del medio

Especificidad
● La especificidad es doble:
• de especie
• de función.
● Especificidad de especie:
• En su secuencia de aminoácidos, las proteínas presentan dos
tipos de sectores:
• Sectores estables
• Sectores variables: Algunos aminoácidos pueden ser
sustituidos por otros distintos sin que se altere la
funcionalidad de la molécula.
• Ello ha dado lugar, durante la evolución, a una gran variabilidad
de proteínas, lo que permite que cada especie tenga sus
proteínas específicas y que, incluso, aparezcan diferencias entre
individuos de la misma especie (rechazo en trasplantes de
tejidos).
• Las diferencias entre proteínas homologas, es decir, con la
misma función, son grandes entre especies alejadas
evolutivamente y escasas entre especies emparentadas.
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● Especificidad de función.
• La especificidad también se refiere a la función.
• Cada proteína realiza una determinada función
exclusivamente, por ejemplo, catalizar cierta reacción
química sobre cierto substrato y no sobre otro.
• La especificidad se debe a que su actuación se realiza
mediante interacciones selectivas con otras moléculas, para
lo que necesitan una determinada secuencia de aa y una
conformación concreta.
• Un cambio en la secuencia o conformación puede impedir la
unión y por lo tanto dificultar la función.

PROTEINAS
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Enzimas
• Las enzimas son proteínas
que:
• Catalizan las
reacciones químicas
de las células del
cuerpo.
• Aceleran la velocidad
de reacción mediante
la disminución de la
energía de
activación.

• El nombre de una enzima:

• Por lo general termina en -asa.
• Identifica la sustancia de reacción. Por ejemplo,
sacarasa cataliza la reacción de la sacarosa.
• Describe la función de la enzima. Por ejemplo, oxidasas catalizan
la oxidación.
• Algunas tienen nombres asociados con su descubrimiento y
terminan en -ina, en particular para las enzimas de digestión,
como la pepsina y tripsina.

Clasificación

Clase Tipo de reacciones catalizadas

Oxido-reductasas De oxidación-reducción
Transferasas Transferencia de grupos de átomos
Hidrolasas Hidrólisis
Liasas Añadir o eliminar átomos o grupos a un doble enlace
sin hidrólisis
Isomerasas Reorganizar Átomos
Ligasas Uso ATP para combinar pequeñas moléculas
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Sitio Activo
● El sitio activo
● es una región dentro de una enzima que se adapta a la forma de la
molécula llamada sustrato (S).
● contiene grupos R de los aminoácidos que se unen al sustrato.
● libera productos (P) cuando la reacción es completa.

Catálisis Enzimática
● En la catálisis enzimática la reacción se inicia cuando un sustrato se
une al sitio activo.
● Se forma un complejo sustrato-enzima (ES).
● Luego la reacción se produce y los productos son liberados por falta
de afinidad con la enzima.
● La enzima queda libre nuevamente para ser utilizada una y otra vez.
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Modelos de Ajuste ES
● Modelo llave-cerradura
● El sitio activo es rígido y solo permite la entrada del sustrato que ajusta
perfectamente como una llave.
● Modelo de ajuste inducido
● El sitio acitvo es flexible y la entrada del sustrado ajusta el sitio,
permitiendo la catálisis solo con el S especifico.

Factores que afectan la actividad

● Las enzimas se ven afectadas en su actividad por los siguientes
factores:
● Temperatura
● pH
● Concentracion de sustrato
● Inhibidores
● Competitivos
● No competitivos
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La Temperatura
● Las enzimas son más activas a una cierta
temperatura óptima (usualmente 37 °C en
humanos).
● Muestran baja actividad a temperaturas
menores.
● Por encima del óptimo, el aumento de
temperatura causa la desnaturalización de
la enzima

El pH
● Las enzimas son mas activas a un cierto
pH optimo
● Contienen grupos R de los aminoacidos
con cargas adecuadas al pH optimo
● Pierden actividad en pH más altos o más
bajos debido a modificaciones en la
estructura terciaria.
● El pH promedio óptimo del cuerpo es 7,5
● Cada tipo de enzima tiene un pH óptimo
propio.
● El pH depende de su uso
● La pepsina del estómago tiene un pH óptimo de 2,0
● La arginasa actua en el higado, sobre la arginina, a un pH optimo
de 9,7

La Concentración de sustrato
● Al aumentar la cantidad o concentración del
sustrato (S), sobre una cantidad fija de
enzima, se produce un efecto de saturación:
● Todas las enzimas estan ocupadas
reaccionando.
● Sobra sustrato en espera.
● Esta es la situación de máxima velocidad.

Cofactores enzimáticos
● Existen tres tipos de enzimas activas:
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● Enzima simple: solo proteínas
● Enzima + ion metálico
● Enzima + molécula orgánica (o coenzima)
● Estos iones o pequeñas moléculas orgánicas adicionales para activar
la enzima se llaman: cofactores