INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

Practica No. “Verificación del funcionamiento

de un espectrofotómetro”.

Grupo 5QM2
Sección 3

Autor: Suarez Gómez Alexis Gabriel

Profesor: QFI Francisco C. Fernández López

Ciclo escolar 2019

Ciudad de México, entrega 29 de marzo de 2018

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OBJETIVOS

 Evaluar el rendimiento instrumental de un espectrofotómetro

 Verificar la exactitud de la escala de la longitud de onda , la presencia de radiación
dispersa, el ancho de banda , la exactitud fotométrica , la proporcionalidad de
respuesta y el rendimiento global del instrumento.
RESULTADOS
Tabla 1 .Espectro de transmisión del filtro de didimio .
Longitud de onda
%T
(nm)
400 84.8

410 84.1

420 75.5

430 32.4

440 10.0
450 8.9
460 12.5
470 7.4
480 11.5
490 38.7
500 33.6
510 4.9
520 4.4
530 2.2
540 37.6
550 69.3
560 63.4
570 3.2
580 1.0
590 1.1
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80

70

60

50
%T

40

30

20

10

0
0 200 400 600 800
longitud de onda (nm)

Gráfica 1. Espectro de trasmisión del filtro de Didimio.

Tabla 2 . Espectro de transmisión de la solución de sulfato de níquel(NiSO4.6H2O. al
20%)

Longitud de onda (nm) %T

380 0.5

390 0.2

400 0.3

410 0.6

420 2.3

430 11.9

440 31.7
450 46.3
460 55.8
470 67.2
480 80.1
490 88.7
500 91.9
510 90.8
520 87.9
530 84.1
540 80.7
550 77.7
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560 73.2
570 65.8
580 56.7
590 46.1

Gráfica 2. Espectro de transmisión de la solución de sulfato de níquel al 20%.

100

90

80

70

60
%T

50

40

30

20

10

0
0 200 400 600 800
Longitud de onda (nm)

TABLA 3.Proporcionalidad entre A y λ para el sulfato de níquel al 20 %.

Longitud Absorbancia %T
de onda
(nm)
530 0.086 82
540 0.107 78
550 0.130 74
560 0.1611 69
570 0.214 61
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0.25

Absorbancia 0.2

0.15
y = 0.0031x - 1.5659
R² = 0.9592
0.1 R=0.9793

0.05

0
520 530 540 550 560 570 580

Gráfica longitud de onda (nm)

3.Proporcionalidad para el sulfato de níquel al 20 % .

Intervalo dinámico lineal de concentración

Tabla 4.Intervalo dinamico de concentración .

Tubo A400
Concentración de
NiSO4·6H2O (M)
a a' Serie a Serie b
1 1' 0 - -
2 2' 9.5x10-3 0.043 0.047
3 3' 0.0285 0.149 0.140
4 4' 0.0665 0.339 0.335
5 5' 0.1045 0.521 0.525
6 6' 0.1425 0.718 0.703
7 7' 0.152 0.764 0.752
8 8' 0.171 0.853 0.844
9 9' 0.1805 0.896 0.892

10 10' 0.19 0.943 0.939

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0.9

0.8

0.7

0.6
Absorbancia

0.5
y = 4.4274x + 0.0051
0.4 R² = 0.9739

0.3

0.2

0.1

0
0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 0.14 0.16 0.18 0.2

concentracion sultafo de niquel (M)

Gráfico 4.Intervalo dinámico lineal de concentración .

Tabla 5.Resumen de resultados de evalucion del funcionamiento del

espectrofotómetro.

Parámetro estudiado Valores de referencia Valores experimentales

Exactitud de la escala de longitud de onda

Filtro de Didimio
420,490,550
Máximos (λ,nm )
Mínimo (λ,nm) 400,470,520,590

Solucion de NiSO4.6H2O al 20%

Máximos (λ,nm ) 500

Mínimo (λ,nm) 600

Proporcionalidad fotométrica
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Datos de regresión de 530 R= 0.97-0.98

a 570 nm
Luz dispersa

% T a 400 nm(Solución de 0 a 1 %T
NiSO4.6H2O)
%T a 450 nm

%T a 500 nm

Ancho de banda

% T A 500 nm
Exactitud fotométrica

Método de la solución de NiSO4.6H20 al 20 %

1.8-2.3
Absorbancia a 400nm
Absorbancia a 500 nm 0..03-0.06
Intervalo dinámico lineal de concentración

Datos de la regresión 9.5x103----0.19

lineal

Intervalo de r=0.99
concentración

ANÁLISIS DE RESULTADOS

Obtuvimos los espectros de trasmisión característicos del filtro de Didimio y de una solución
de sulfato de níquel. En la gráfica 1, perteneciente a el espectro de absorción para el filtro
de Didimio, obtuvimos picos a 420,460,520,590 nm y valles a 400,460,520,590. En cuanto
al los resultados obtenidos con solución de NiSO4.6H2O al 20% obtuvimos máximos a
longitud de onda de 500 nm y mínimos a 390,590 nm , mismo valores que se encuentran
dentro del intervalo de tolerancia comparado con el valor de referencia .Esto demuestra que
nuestro espectrofotómetro tiene una escala exacta y que las determinaciones que se
realicen en ese equipo van a ser confiables ya que con esto nos aseguramos que al
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ajustarlo a la longitud de onda deseada, el equipo realmente selecciona esa

longitud de onda.

Dentro de los valor de luz dispersa en la solución de NiSO4.6H2O a a 400 nm un valor de

3 % de T, por lo cual nos indica que se encuentra afectada porqué, no toda la luz que emite
la fuente luminosa llega al detector por lo cual genera lecturas de transmitancia mayores a
las esperadas y esto provoca desviaciones a la ley de Beer.

Del parámetro de ancho de banda se obtuvó un valor de 87 % este valor se encuentra

dentro de la tolerancia de +-3 % T.En la determinación de la exactitud fotométrica por el
método de la solución de NiSO4.6H20 al 20 % los valores que se obtuvieron a absorbancia
a 400nm y 500nm fueron 1.39 y 0.04 respectivamente los cuales no entran dentro de los
valores de tolerancia, provocado por que el espectrofotómetro no nos indica exactamente
las medidas de las absorbancias o del % de la transmitancia por lo cual se ven afectadas
los valores.

Otro parámetro que se evaluó fue la proporcionalidad fotométrica en el se obtuvó un

coeficiente de correlación de 0.9793 el cual indica que está por debajo del valor de
referencia de 0.989, a pesar de que se obtiene una gráfica línea, la R nos indica lo contrario,
pues no hay una proporcionalidad a pesar de que el valor se acerca mucho al esperado.
Por lo que podemos decir que este parámetro puede haberse afectado por que puede haber
una falla en la fuente de radiación del monocromador , el detector o bien por que puede
estar presente la luz parasita .

CONCLUSIONES
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 El espectrofotómetro no está en óptimas condiciones para tomar las

lecturas de absorbancia y trasmitancia de diferentes muestras.
 Se debe hacer una revisión para calibrar y ajustar el espectrofotómetro para
corregir los errores .

REFERENCIAS
 Skoog. Principios de Análisis Instrumental. Ed. Mac Graw Hill. 2002. Pp.182, 201.
 Torres Cartas Sagrario, Gómez Benito Carmen. “Técnicas instrumentales. Manual
de Laboratorio”. Editorial Universidad Politécnica de Valencia. pp. 60-61