ENZIMAS

ENZIMAS
 Son moléculas de naturaleza proteínica que
aceleran las reacciones bioquímicas.

 Son catalizadores biológicos que disminuyen

la energía de activación de las reacciones que
catalizan, de forma que se aceleran
sustancialmente la tasa de reacción.
¿QUÉ ES UN CATALIZADOR?

Es una molécula inorgánica u orgánica que

incrementa notablemente la velocidad de las
reacciones químicas sin ser modificada o
consumida en la reacción.
Reacción enzimática simple
E+S ES EP E+P
E : enzima libre
S : sustrato
ES : complejo enzima-sustrato
EP: complejo enzima producto
P : producto
 Cinética vs termodinámica
Las reacciones proceden espontáneamente si hay un
descenso en la energía libre cuando la temperatura y la
presión se mantienen constantes.

Muchas reacciones bioquímicas, que son

termodinámicamente posibles, ocurren a velocidades
despreciables, es decir son cinéticamente imposibles.

De aquí la necesidad de la catálisis para incrementar sus

velocidades.

La catálisis en las células la llevan a cabo las enzimas.

 Cinética vs termodinámica

• Lo que determina si una reacción es

termodinámicamente posible es el valor del cambio
en energía libre (ΔG).

• Lo que determina si una reacción es cinéticamente

posible es el valor de su energía de activación
(ΔG‡).
El cambio negativo en energía libre (ΔG) , o lo que es lo mismo el valor
mayor de uno de la constante de equilibrio (Keq), nos dice que la reacción
procede espontáneamente de S a P.
Relación entre la energía libre
y la constante de equilibrio

ΔG o´ = -RT ln Keq
Las enzimas, como cualquier catalizador incrementan
notablemente la velocidad de las reacciones químicas al
disminuir su energía de activación sin ser modificadas o
consumidas en la reacción.
 Reacción no catalizada

Reacción catalizada
 Necesidad de la biocatálisis

¿Por qué la gran mayoría de las reacciones en los seres

vivos necesitan ser catalizadas para que ocurran a una
velocidad apreciable?

Porque de lo contrario estarían todas en el equilibrio.

Porque así la célula puede regular en forma diferencial su

velocidad, regulando la actividad de los catalizadores de cada
una de ellas.
Ventajas de las enzimas sobre los catalizadores
inorgánicos

Velocidades de reacción más elevadas, son más eficientes.

(105- 1017)

Condiciones de reacción más suaves,

(T<100 °C, Presión atmosférica, pH fisiológico)

Mayor especificidad de reacción, y

(sustratos, reactivos, no subproductos)

Capacidad para la regulación

control alostérico, modificación covalente,  [enzima]
 ¿QUÉ TANTO ACELERAN LAS ENZIMAS LAS
VELOCIDADES DE LAS REACCIONES?

La reacción en que una molécula de orotidina monofosfato

(ácido orotidílico) pierde un CO2 ocurre 1017 veces más rápida
cuando es catalizada por la enzima orotidina monofosfato
descarboxilasa que cuando no es catalizada
1017 = 100 000 000 000 000 000

CIEN MIL BILLONES DE VECES MÁS RÁPIDA

Ácido orotidílico Ácido uridílico

(UMP)
*Ejercicio 1. Aumento de la tasa de hidrólisis
La ureasa aumenta la tasa de hidrólisis de la urea
a pH 8.0 y 20°C por un factor de 1014.
Una cantidad de ureasa puede hidrolizar
completamente una cantidad dada de urea en
5.0 min a 20°C y pH 8.0. ¿Cuánto tardará en
hidrolizarse esta misma cantidad de urea en
ausencia de la enzima y bajo las mismas
condiciones?

9.5 x 108 años

 Especificidad de la catálisis enzimática

•La catálisis enzimática requiere:

Unión específica a la proteína de las moléculas de sustrato y

de moléculas reguladoras.

Reactividad específica de la proteína con el (los) sustrato (s).

Unión específica

Las moléculas que van a

reaccionar, llamadas
sustratos, se unen a una
región en la superficie
llamada sitio activo.
 Teorías de unión específica del sustrato

•Existen dos teorías para explicar la unión específica

Teoría de la llave y la cerradura

Teoría del ajuste inducido

Teoría de la llave y la cerradura
Teoría del ajuste inducido
Cambio conformacional de la hexocinasa
inducido por su sustrato
 ENZIMAS
Apoenzima: Parte proteínica.

Enzima Parte no proteínica:

(holoenzima) Cofactores y coenzimas Grupo prostético: unión fuerte
Resaltar que
es covalente
Cofactores: Uno o mas iones inorgánicos.
Coenzimas: Moléculas orgánica o metaloorgánicas complejas

Hemoglobina
 COFACTORES

Cofactores: Uno o mas iones inorgánicos.

Coenzimas: Moléculas orgánica o metaloorgánicas
complejas
 CLASIFICACIÓN DE LAS ENZIMAS

1. Deshidrogenasas,
oxidasas, peroxidasas.

2. Transaminasas,
cinasas, transacetilasas,
metiltransferasas,
aciltransferasas,
glucosiltransferasas.

3. Esterasas, fosfatasas,
glicosidasas, proteasas.

4. Descarboxilasas, aldehído liasas, cetoácido liasas.

5. Racemasas, epimerasas.
6.Sintetasas.
 ALCOHOL DESHIDROGENASA
EC 1.1.1.1

• Clase: 1 (oxidorreductasa)

• Subclase: 1 (actúa sobre un sustrato que posee un grupo

CH-OH como donador de electrones)

• Subsubclase: 1 (NAD+ o NADP+ es la coenzima aceptor)

• Orden dentro de la subsubclase: 1 (primera enzima de este

grupo)
 CARACTERÍSTICAS DE LAS ENZIMAS
Estereoespecificidad: sustratos quirales, las enzimas actúan sobre
sustratos L o D, pero no sobre ambos. Las enzimas son
estereoespecíficas porque forman varias interacciones entre
aminoácidos del centro activo y los distintos grupos del sustrato.

Especificidad geométrica: las enzimas son selectivas hacia la

identidad de los grupos químicos situados en los sustratos.

Sitio activo vacío Sitio activo ocupado

Sitio activo: lugar donde se lleva a cabo la catálisis enzimática.

 CARACTERÍSTICAS DE LAS ENZIMAS

Sitio activo: lugar

donde se lleva a cabo
la catálisis enzimática.

Sitio de unión a sustrato: Sitios químicos capaces de unirse al

sustrato.
Sitio alostérico: Lugar de unión a moléculas pequeñas, cuyo
efecto es un cambio en el sitio activo o en el sitio de unión a
sustrato, que modulan la actividad enzimática.
Ejercicio 2. Requerimiento del sitio activo
La carboxipeptidasa, la cual remueve residuos de aminoácidos
del extremo carboxilo de sus sustratos peptídicos, es un
polipéptido de 307 aminoácidos. Los dos residuos de
aminoácidos catalíticos son Arg145 y Glu270.
a) Si la carboxipeptidasa fuera una α hélice, ¿Qué tan lejos
estarían los residuos Arg145 y Glu270?
b) Explique cómo los dos residuos de aminoácidos pueden
catalizar una reacción que ocurre en un espacio de pocos Å.

a) 190 Å
b) El plegamiento tridimensional de la enzima hace
que los aminoácidos Arg145 y Glu270 queden cerca.
 Unidades de actividad enzimática

Actividad
1 unidad internacional (U) = 1 µmol de producto
formado/min
1 katal = 1 mol de producto formado/s

Actividad específica
U/mg de proteína
katal / mg proteína
Reacción catalizada enzimáticamente
Reversible

Irreversible simplificada
 Parámetros enzimáticos
Km
(constante para cada enzima) = concentración de S a la que V0
es ½ Vmax. Es una medida de la afinidad de la enzima por S.
Cuanto menor es Km, mayor es la afinidad de la enzima por S.

Kcat
(constante para cada enzima) = número de recambio =
número de moléculas de sustrato convertidas en producto por
molécula de enzima y unidad de tiempo, en condiciones
saturantes del sustrato.

Vmax
Velocidad máxima teórica = la velocidad cuando todos los
centros activos están ocupados con sustrato.
 REPRESENTACIÓN GRÁFICA DE LA
ECUACIÓN DE MICHAELIS-MENTEN
 *Ejercicio 3
Una enzima que cataliza la reacción
X Y se aisló de dos especies
bacterianas diferentes. Las enzimas Enzima B
tienen el mismo valor de Vmax, pero
diferente valor de Km para el
sustrato X. La enzima A tiene un Enzima A
valor de Km de 2.0 mM, mientras
que le enzima B tiene un valor de Km
de 0.5 mM. En la siguiente gráfica se
presenta la cinética de la reacción a
la misma concentración de ambas
enzimas ¿Qué curva corresponde a
la enzima A y cual a la enzima B?
ECUACIÓN DE MICHAELIS-MENTEN
La Vmax se alcanza cuando todos los centros activos
están ocupados con el sustrato.
Unidades de los parámetros cinéticos
 Velocidad máxima (Vmax)

• Es la velocidad límite a la que tiende la reacción

catalizada por enzimas a concentraciones saturantes
del sustrato, es decir cuando toda la enzima está
como ES.
Vmax = kcat[E]total

• Su valor cambia durante el proceso de purificación

porque cambia la [E]
 Constante catalítica (kcat)
• Sólo puede conocerse cuando se tiene a la enzima pura y
por tanto se conoce su concentración.

kcat = Vmax / [E]total o kcat = Vmax / [sitios activos]

• Si uno de los pasos es limitante de la velocidad, kcat es la

constante de velocidad de este paso.

• A kcat también se le conoce como número de recambio,

porque indica el número máximo de ciclos catalíticos por sitio
activo y por unidad de tiempo.
 *Ejercicio 4. Número de recambio
La anhidrasa carbónica de los eritrocitos (Mr 30,000) cataliza la
hidratación de CO2 y tiene uno de los mayores números de
recambio que se conocen.
H2O + CO2 H2CO3

Este es un proceso importante en el transporte de CO2 de los

tejidos a los pulmones. Si 10.0 µg de anhidrasa carbónica
cataliza la hidratación de 0.3 g de CO2 en un minuto a 37C a
Vmax. ¿Cuál es el número de recambio (Kcat) de la anhidrasa
carbónica? Expresarlo en min-1

Kcat ≈ 2.0x107 min-1

 Constante de Michaelis Menten
(Km)

• En todos los casos es la concentración de sustrato a la que

v = Vmax / 2
 Constante de especificidad
(Vmax/Km o kcat/Km)
• Indica cuál es el mejor sustrato de una enzima (aquél que
tenga la mayor constante de especificidad).

• Indica la eficiencia catalítica de la enzima a concentraciones

de sustrato por debajo de los niveles de saturación.

• Representa el paso de unión de la enzima y el sustrato

(cualquier factor que afecte esta constante está afectando el
paso de unión).
Ejercicio 5. Constante de especificidad

La enzima acetilcolinesterasa tiene un valor de Km

para la acetilcolina de 9.5x10-5 M y un valor de Kcat
de 1.4x104 s-1, mientras que la enzima catalasa tiene
un valor de Km para el H2O2 de 2.5x10-2 M y un valor
de Kcat de 1.0x107 s-1 ¿Cuál de las dos enzimas está
más próxima a la perfección catalítica
(más específica)?
CINÉTICA ENZIMÁTICA
 Transformaciones de la ecuación de velocidad
de Michaelis Menten

Lineal

1/v vs 1/[S] (Dobles recíprocos o Lineweaver-Burk)

Sigmoidal

v versus log S (semilogarítmica)

ECUACIÓN DE LINEWEAVER Y BURK
REPRESENTACIÓN GRÁFICA DE LINEWEAVER Y BURK

Forma lineal de la ecuación de Michaelis-Menten, gráfica de dobles recíprocos.

 Gráfica sigmoidal
(velocidad inicial vs log [S])
*Ejercicio 6. Estimación de Vmax y Km por inspección
Aunque los métodos gráficos [S] V0
dan una determinación (M) (µmol/mL min)
exacta de la Vmax y Km de
una reacción catalizada por 2.5 X 10-6 28
una enzima, a veces estos 4 X 10-6 40
valores pueden estimarse
1 X 10-5 70
rápidamente inspeccionando
los valores de Vo al 2 X 10-5 95
incrementar [S]. Estimar 4 X 10-5 112
Vmax y Km de la reacción
catalizada enzimáticamente 1 X 10-4 128
con los siguientes datos 2 X 10-3 139
obtenidos:
1 X 10-2 140

Vmax = 140 μmol/mL min

Km = 1 x 10-5 M
Ejercicio 7. Relación entre la velocidad de reacción y la
concentración del sustrato. Ecuación de Michaelis-
Menten.
Determina la fracción de Vmax que podría ser obtenida a
las siguientes concentraciones de sustrato: 0.5 Km, 2 Km y
10 Km.

0.5 Km V0= 0.33 Vmax

2.0 Km V0= 0.67 Vmax
10 Km V0= 0.91 Vmax
 Respuesta

0.5 Km V0= 0.33 Vmax

2.0 Km V0= 0.67 Vmax
10 Km V0= 0.91 Vmax
 Factores que afectan la velocidad de una
reacción catalizada por enzimas
• Concentración de sustrato o sustratos (cofactores)
• Concentración de enzima
• Inhibidores
• Activadores
• pH
• Temperatura
 Regulación de la actividad enzimática por unión
a la enzima de ligandos que no son sustrato

• INHIBIDOR : Molécula o ion que al unirse a la enzima

produce una disminución en la velocidad de la reacción
catalizada.

• ACTIVADOR: Molécula o ion que al unirse a la enzima

produce un aumento en la velocidad de la reacción
catalizada.
 TIPOS DE INHIBIDORES

• ISOSTÉRICO
El inhibidor se une al mismo sitio que el sustrato (sitio
activo).

• ALOSTÉRICO
El inhibidor se une a un sitio diferente al que se une
el sustrato (sitio alostérico).
 TIPOS DE INHIBIDORES
• COMPETITIVO – El inhibidor se une a la enzima
libre interfiriendo con la unión del sustrato.
• INCOMPETITIVO – El inhibidor se une al complejo
enzima-sustrato interfiriendo con la formación de
producto.
• MIXTO – El inhibidor se une tanto a la enzima libre
como al complejo enzimas sustrato, interfiriendo la
unión del sustrato y la formación del producto.
• NO COMPETITIVO – Es un tipo especial de
inhibidor mixto que se une con igual afinidad a la
enzima libre y al complejo enzima-sustrato.
 INHIBICIÓN COMPETITIVA
El inhibidor se une a la enzima libre interfiriendo con la
unión del sustrato

Su efecto se contrarresta cuando ↑[S].

Compiten con el sustrato por su sitio de unión.
Reduce la concentración de enzima libre disponible.
Patrones de inhibición competitiva
 INHIBICIÓN INCOMPETITIVA
El inhibidor se une al complejo enzima-sustrato interfiriendo
con la formación del producto)

Inhibidores cuyo
efecto NO se
contrarresta
incrementando
la concentración
del sustrato.
Patrones de inhibición incompetitiva
 INHIBICIÓN MIXTA
El inhibidor se une tanto a la enzima libre como al complejo
enzima-sustrato, por lo tanto interfiere en la unión del
sustrato y en la formación del producto
Patrones de inhibición mixta
 INHIBICIÓN NO COMPETITIVA
Es un tipo especial de inhibidor mixto que se une con igual
afinidad a la enzima libre y al complejo enzima-sustrato
Patrones de inhibición no competitiva
 EFECTO DE LOS INHIBIDORES SOBRE LOS
PARÁMETROS CINÉTICOS

Inhibidor competitivo Inhibidor incompetitivo

↑Km, no cambia Vmax Km, Vmax

Inhibidor mixto Inhibidor no competitivo

↑Km, Vmax No cambia Km, Vmax
*Ejercicio 9. Inhibidores

En la siguiente tabla se incluyen las velocidades iniciales

de una reacción catalizada por una enzima que sigue
cinética de Michaelis-Menten, medidas en ausencia
(control), y en presencia de dos inhibidores diferentes (1
y 2), ambos a una concentración de 10 mM. Se usó la
misma concentración de enzima en todas las
determinaciones.
 V0 (µmol/mL s)
[S] (mM) Control Inhibidor 1 Inhibidor 2
1 2.50 1.17 0.77
2 4.00 2.10 1.25
5 6.30 4.00 2.00
10 7.60 5.70 2.45
20 8.50 7.20 2.68

a) Presentar en un análisis gráfico de dobles recíprocos el patrón

de inhibición.
b) Determinar las constantes cinéticas (Km y Vmax) de la enzima en
ausencia y presencia de los inhibidores.
c) Para cada inhibidor determinar el tipo de inhibición.
 Efecto del pH sobre la actividad de las
enzimas
Cambio en la ionización de los residuos de aminoácidos
implicados en la unión del sustrato.

Cambio en la ionización de residuos de aminoácidos

implicados en la catálisis.

Cambio en la ionización de grupos del sustrato.

Cambio en la ionización de residuos de aminoácidos

implicados en la estabilidad de la enzima.
Efecto de la temperatura sobre la velocidad de las
reacciones catalizadas por enzimas

La temperatura afecta la constante de velocidad de una

reacción química como describe la ecuación de Arrhenius.
En las reacciones catalizadas por enzimas:

 La velocidad aumenta con la temperatura hasta

que la enzima comienza a desnaturalizarse.

No existe una temperatura óptima de reacción,

depende de las condiciones en que midamos la
reacción, especialmente del tiempo.
Mecanismos de regulación enzimática

Regulación de la cantidad de la enzima

Regulación de la actividad de la enzima

preexistente
Mecanismos de regulación de la cantidad de enzima

Regulación transcripcional
Síntesis del ARNm
Maduración y vida media del ARNm

Regulación traduccional
Síntesis de la proteína

Regulación postraduccional
Degradación de la proteína
Mecanismos de regulación de la actividad de la enzima

Regulación por moléculas o iones.

Sustratos, productos, cofactores.
Inhibidores, activadores, pH.

Regulación por modificación química

Irreversible
•Zimógenos

Reversible
•Adición de un grupo químico
•Oxidación-reducción de cisteínas

Regulación por localización intracelular

Isoenzimas
Regulación de la actividad enzimática
por proteólisis limitada
 Zimógenos
Formas inactivas de enzimas que son convertidas a formas
activas por proteólisis en sitios específicos.

En general son enzimas proteolíticas que de sintetizarse

activas producirían daños a la célula.

Se activan una vez fuera de la célula que las produce

(enzimas digestivas, enzimas implicadas en la coagulación
sanguínea) o cuando deben llevar a la muerte celular (caso
de las caspasa en la apoptosis).
Isoenzimas
Proteínas que en un organismo catalizan la misma
reacción pero están codificadas por genes diferentes.

Difieren en sus propiedades cinéticas.

Se expresan diferencialmente en diferentes tejidos,

organelos o estados fisiológicos o patológicos.
Modificación química reversible por
adición de un grupo
 Modificación química reversible por
oxidación-reducción de cisteínas vecinas
Cooperatividad enzimática
Enzimas con cooperatividad positiva

La unión del sustrato es cada vez más fácil a medida que la
enzima se satura más y más.

Dependencia sigmoidal de la velocidad inicial vs [S].

Enzimas con cooperatividad negativa

La unión del sustrato es cada vez más difícil a medida que la
enzima se satura más y más.

Dependencia hiperbólica de la velocidad inicial vs [S].

 Cooperatividad positiva entre los sitios
alostéricos

La unión del efector alostérico (inhibidor o activador) es

cada vez más fácil a medida que la enzima se satura más y
más por este ligando.

Dependencia sigmoidal de la velocidad inicial vs el efector

alostérico.
 MECANISMOS DE CATÁLISIS ENZIMÁTICA

OBJETIVO:
Disminución de la energía de activación de la reacción
catalizada con respecto a la no catalizada
Tipos de catálisis enzimática

• CATÁLISIS ÁCIDO-BASE

• CATÁLISIS ELECTROSTÁTICA

• CATÁLISIS COVALENTE
 Catálisis ácido-base
• La catálisis ácida general consiste en la transferencia de
un protón desde un residuo de la enzima, que se
comporta como un ácido de Brönsted, al sustrato o
intermediarios de la reacción, disminuyéndose así la
energía libre del estado de transición.

• La catálisis básica general consiste en la transferencia de

un protón desde el sustrato o intermediarios de la
reacción a un residuo de la enzima, que se comporta
como una base de Brönsted, disminuyéndose así la
energía libre del estado de transición.

• Si se dan ambos tipos de catálisis se tiene una catálisis

ácido-base concertada.
 Catálisis electrostática

• La enzima estabiliza intermediarios o estados

de transición de la reacción por neutralización de
cargas gracias a la disposición espacial en el sitio
activo de residuos con carga opuesta.

• En otros casos la distribución de cargas en el

sitio activo sirve para guiar a sustratos cargados o
polares a sus sitios de unión.
 Catálisis covalente
• La enzima forma transitoriamente un enlace covalente con
el sustrato.

• La catálisis covalente consiste en tres pasos sucesivos:

– Ataque nucleofílico de la enzima sobre el sustrato
(formación del enlace covalente).
– Toma de electrones por el catalizador u otro sustrato
(formación del producto).
– Separación del producto de la enzima (ruptura del enlace
covalente, generalmente por hidrólisis).
Mecanismo catalítico de la quimotripsina
Liberación del extremo
amino de uno de los
fragmentos en que se
rompió la cadena
polpeptídica
Liberación del extremo
carboxilo del otro
fragmento en que se
rompió la cadena
polipeptídica
CINÉTICA ENZIMÁTICA
 Caracterización cinética de las enzimas
Determinar la velocidad inicial de la reacción catalizada

Variando la concentración de sustrato(s) y manteniendo la

concentración de enzima constante.

Variando la concentración de enzima y manteniendo la

concentración de sustrato(s) constante.

Determinar los parámetros o constantes cinéticas:

Vmax, kcat, Km, Vmax/Km, kcat/Km

 VELOCIDAD DE REACCIÓN

Velocidad de reacción: Cambio de concentración por unidad de tiempo.

 ¿Por qué medir la velocidad inicial?

En el caso de las reacciones catalizadas por enzimas, hay dos

razones que hacen muy conveniente medir velocidades iniciales:

El producto es un inhibidor de la reacción.

La enzima puede ser inestable en el medio de reacción.

INHIBICIÓN COMPETITIVA
Distribución de las especies de la enzima en
ausencia de cooperatividad
Distribución de las especies de la enzima en
caso de cooperatividad extrema
Cooperatividad de unión
Curvas de saturación sigmoidal por inhibidores y
activadores
Saturación sigmoidal por el sustrato
(cooperatividad positiva)
 Constantes o parámetros cinéticos

Son las constantes que aparecen en las ecuaciones

de velocidad.

Están formadas por constantes de velocidad de

los pasos que constituyen la reacción catalizada.
Efecto del pH sobre la estabilidad vs efectos sobre la
actividad de las enzimas
Interés del estudio de los efectos del pH sobre la
velocidad de las reacciones catalizadas
Los H+ son inhibidores y/o activadores
 Enzimas alostéricas con cooperatividad positiva de
unión
Son enzimas oligoméricas que poseen varios sitios activos y sitios
alostéricos y exhiben una cinética de saturación por sus sustratos y/o
efectores alostéricos de tipo sigmoidal, resultado de una unión
cooperativa de estos ligandos.

Cinética sigmoidal

Alosterismo

Cooperatividad
•De unión
•Cinética

Enzimas oligoméricas
 Ecuación de Arrhenius

k(T): constante cinética (dependiente de la temperatura)

A: factor preexponencial o factor de frecuencia. Refleja la frecuencia
de las colisiones.
Ea: energía de activación, expresada en kJ/mol.
R: constante universal de los gases. Su valor es 8,3143 J·K-1·mol-1
T: temperatura absoluta [K]
 Importancia fisiológica de las enzimas
alostéricas con cooperatividad positiva de
unión

Pueden ser reguladas por compuestos no análogos del

sustrato (retroinhibición y retroactivación).

La cooperatividad positiva de unión, tanto del sustrato como

de inhibidores o activadores, les permite responder a cambios
pequeños en la concentración de sus ligandos con cambios
grandes en la velocidad de la reacción catalizada (amplificación
de la señal).
Significado del número de Hill (nH)
 Especificidad vs afinidad

• Especificidad es la capacidad que tiene una enzima

de discriminar entre posibles sustratos (sustratos
alternos). Nos indica la velocidad relativa a la que se
llevará a cabo la reacción catalizada con estos sustratos
diferentes.
– Se mide por la constante de especificidad para cada
sustrato.
– Los mejores sustratos, es decir aquellos que producen
una reacción más rápida, son los que tienen una
constante de especificidad mayor.
 • Especificidad vs afinidad

Afinidad es la estabilidad del complejo ES. Nos

indica la capacidad que tiene la enzima de formar
un complejo con un determinado sustrato.
– Se mide por la constante de disociación (Kd) del
complejo ES, que en ocasiones es igual a la Km.
– Los sustratos con mayor afinidad son los que
tienen una menor Kd.
 EFECTO DE LOS INHIBIDORES SOBRE LOS
PARÁMETROS CINÉTICOS

Tipo de inhibidor Vmax Km

Competitivo Vmax aKm
Incompetitivo Vmax /a’ Km/a’
Mixto Vmax /a’ a Km/a’
No competitivo Vmax /a’ *Km

*Si a =’ a
a Km/a’ =Km
Patrones de inhibición
Ecuación de Hill
Parámetros cinéticos de la ecuación de Hill
Valores del número de Hill
Efecto del pH sobre los parámetros cinéticos