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ACTIVACIÓN DE
LINFOCITOS
PATRICIA MÉNDEZ ARAGÓN, SEPTIEMBRE 2018

TIME

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Célula
NK

Timocitos Selección positiva Selección negativa células

precursores se hacen por la interacción autorreactivas se eliminan
DP, las células CD4 + con MHC-I o MHC- como resultado de su
CD8 + expresan II , se produce en el interacción con los
niveles bajos de las epitelio cortical. La autoantígenos, con las APC
cadenas a y b del mayoría de las en la unión corticomedular y
TCR. células no están la médula del timo.
seleccionadas y
sufren apoptosis

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 Cada linfocito posee un solo tipo de receptor de especificidad única.

 La interacción Ag y TCR, conduce a la activación del linfocito.
 Las células efectoras diferenciadas derivadas de un linfocito activado tendrán receptores con
especificidad idéntica a los de la célula progenitora que les dio origen.
 Los linfocitos autoreactivos para moléculas propias son eliminados en las etapas tempranas del
desarrollo de las células linfoides.

GENERALIDADES
• Los linfocitos T vírgenes se activan en los tejidos
linfáticos periféricos.
• Los LT efectores reconocen a los antígenos en los
tejidos linfáticos o en tejidos periféricos no linfáticos.
• La activación de los LT requiere el reconocimiento del
antígeno presentado por la APC, señales de co-
estimulación y citocinas.
• Los LT vírgenes son activados por células dendríticas,
los LT efectores pueden ser activados por otras APC.

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FASES DE LA RESPUESTA DEL

LINFOCITO T

• Reconocimiento antigénico
• Activación
• Expansión clonal
• Diferenciación
• Ejecución de funciones efectoras
FASES DE LA
RESPUESTA
DEL LT

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SEÑALES DE ACTIVACIÓN
1ª. la unión del complejo
péptido‐HLA al TCR. Esta
señal está potenciada por la
participación de moléculas
CD4 y CD8
2ª. por moléculas de
adhesión: CD2, LFA‐1, CD26
y CD28, algunas con
capacidad coestimulatoria
como es el caso del CD28.
3ª. proveniente de los
receptores de las
citocinas que conjuntamente
con las señales anteriores
hará posible la activación
completa de los linfocitos T.

ICAM-1

Sin embargo si se produce una estimulación incompleta, por

ejemplo con la actuación de uno solo de los elementos, el
linfocito T no solo no se estimula sino en que muchos casos
muere por apoptosis

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1ª SEÑAL: INTERACCIÓN INTERCELULAR

La unión de CD4 a MCH II, La unión de CD8 al MHC de clase I, que

asegura que las células Th asegura que las células Tc puedan
solo interactúan con APC interactuar con las células diana

LFA = Leukocyte Function-associated Antigen

ICAM = Intercellular Adhesion Molecule

2ª SEÑAL

La interacción entre las CD4 une MHC II TCR = especificidad. La

moléculas de TCR y expresión de moléculas
MHC no es muy fuerte. CD8 une MHC I accesorias puede
Las moléculas incrementarse en respuesta
accesorias son CD2 une LFA-3 a la citocina, así la citocina,
necesarias para ayudar modula la respuesta
a estabilizar la LFA-1 une ICAM-1 inmune.
interacción, no
contribuyen a la
especificidad.

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2ª. SEÑAL. POR MOLÉCULAS DE ADHESIÓN

SINAPSIS INMUNOLÓGICA
CD 28 (coestimulatoria) une a:
B7.1 (CD80) o
B7.2 (CD86) en APC

CD2 es una glucoproteína presente

en más del 90% de los linfocitos T
maduros, en el 50 a 70% de los
timocitos y en NK.
La molécula contiene dos dominios
de Ig extracelulares, una región
hidrófoba transmembranaria y una
cola citoplásmica larga (116
aminoácidos).
El principal ligando del CD2 en los
seres humanos es una molécula
llamada antígeno 3 asociado a la
función del leucocito (LFA-3

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La activación de las células T solo ocurre

cuando tanto el TCR como las moléculas
coestimuladoras se relacionan con sus
respectivos ligandos.

CTLA-4 interactúa con B7:

CTLA-4 envía una señal inhibitoria

La unión de TCR y antígeno/MHC en

ausencia de coestimulación puede
conducir : anergia

La unión de moléculas de
coestimulación, en ausencia de TCR:
no respuesta.

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3ª. SEÑAL. PROVENIENTE DE LOS

RECEPTORES DE LAS CITOCINAS

RESPUESTAS DE LOS LT
 Secreción de citocinas y expresión
de receptores de citocinas
 Expansión clonal
 Diferenciación en células efectoras
 Desarrollo de linfocitos de memoria
 Declinación de la respuesta inmune

SEGUNDOS MENSAJEROS. Estos

mediadores inducen la transcripción
específica de un amplio número de genes.

MECANISMOS: mediante procesos de

1.- fosforilación: por cinasas, dos tipos:
a) fosforilando proteínas en
aminoácidos serin y treonin (serin/treon
in cinasas) y la otra
b)fosforilando aminoácidos tirosina (tir
osin cinasas)
2.- defosforilación: por fosfatasas, dos
tipos:
a) defosforilan específicamente
ITAM (Immunoreceptor Tyrosine‐based Activation Motifs) proteínas bien en serina/treonina
que se fosforilan por la acción de las tirosina cinasas o b) en tirosina.
c‐lck y c‐fyn.

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TRANSDUCCIÓN DE SEÑALES
SEÑALIZACIÓN
DEL TCR

INTERCAMBIO
ACTIVACIÓN
GTP/GDP
PLCg-1
En RAS

AUMENTO DE
DIACILGLICEROL
Ca++ RAS-GTP
(DAG)
CITOSOL

factor de factor de factor de transcripción

transcripción activador transcripción de activador de proteína
de células T (NF‐AT) células B (NF‐kB) (AP1)

ACTIVACIÓN DE LINFOCITOS T

 Sí solo hay TCR + Ag = Anergia

 Se requiere: (TCR + Ag) + (CD28 + B7)

 B7 puede ser : B7.1 (CD80) o B7.2 (CD86)

 B7.1 convierte a Th0 a ser Th1

 B7.2 convierte a Th0 a ser Th2

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El reconocimiento
de Ag presentado
en MHC, activa
subpoblaciones de
linfocitos que
desempeñan
diversas funciones.

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CLASES DE CÉLULAS T
Subtipos de células T COOPERADORAS (Th)
Moléculas CD
Clase Activación Funciones Subtipo Funciones
de superficie
Orquestar la Estimular células T citotóxicas y producir
inmunidad células T citotóxicas de memoria
APC presentando humoral y celular
Células T Estimular macrófagos y neutrófilos (PMN)
antígenos
cooperadoras CD4 Involucrado en la TH1 para una muerte intracelular más eficaz de
asociados con
MHC II activación de patógenos
macrófagos y
Estimular células NK para matar de manera
células NK
más efectiva
Involucrado en
Estimular la activación y diferenciación de
APC presentando tolerancia
células B en células plasmáticas y células B
Células T antígenos periférica y
CD4 TH2 de memoria
reguladoras asociados con prevención de
MHC II respuestas Conmutación directa de clases de
autoinmunes anticuerpos en células B

APC o células Estimular la inmunidad a infecciones

Destruye las T H 17 específicas tales como infecciones
nucleadas
células mucocutáneas crónicas
Células T infectadas que
CD8 infectadas con
citotóxicas presentan Ag’s "Recuerda" un patógeno específico y crea
patógenos
asociados con TH de memoria una respuesta secundaria fuerte y rápida al
intracelulares
MHC I volver a exponerse

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Cytokine networking of innate immunity

cells: a potential target of therapy
Ilja Striz, Eva Brabcova, Libor Kolesar, Ale
na Sekerkova
Clinical ScienceMay 01, 2014,126(9)593-
612;DOI: 10.1042/CS20130497

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LINFOCITOS B
 Maduran en médula ósea
(humanos), Bursa de Fabricio
(aves).

 Participan en inmunidad
humoral

 Diferencian a células
plasmáticas, productoras de Ab

CD40
Médula ósea:
Eliminan clonas
auto-reactivas

CÉLULA ESTROMAL LINFOCITO B SCF= stem cell factor

médula ósea Tdt = desoxinucleotidil transferasa terminal

IL-7
VCAM-1 VLA-4
SCF C-kit

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• Al igual que los linfos T,

presentan selección
clonal.
• Por lo que, sólo se
activaran las clonas
específicas para cada Ag.
• Células B inmaduras que
reconocen auto-antígenos
son eliminadas por Recombinación de segmentos de genes y
por las mutaciones que aparecen, pueden
apoptosis. generar el casi infinito repertorio de
anticuerpos, calculándose que, puede ser
de aprox. 109.

Los linfocitos B utilizan para su

activación sus mIgs, de tal manera que
cuando a ellas se unen los Ag’s, se
inicia el proceso de activación de estos
linfocitos.

No Ag específico, muere por apoptosis,

menos de un mes.

Sí Ag específico, se convierte
en linfocito B activado que se
expande clonalmente y se diferencia en
dos subclones:
a)células plasmáticas, productoras
de anticuerpos
b)células memoria (40 años).

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LOCALIZACIÓN FINAL DE LOS LINFOCITOS B.

a) Con respecto al resto de linfocitos
b) Con respecto a los LB (%
(T):
de LB repartido por órganos):
– Bazo (folículos primarios y secundarios de
– Bazo: 27%.
la pulpa blanca de la zona marginal): 50%.
– Ganglios linfáticos: 23%.
– Ganglios linfáticos (zona cortical).
– Sangre periférica: 20%.
– Médula ósea: 75%.
– Conducto torácico: 18%.
– Sangre periférica: 10-15%.
– Médula ósea: 6%.
– Amígdalas: 6%.

Células plasmáticas, son

las productoras de Acs
solubles, se caracterizan
porque pueden
permanecer años
produciendo anticuerpos
desde los lugares donde
normalmente se asientan,
que es la pulpa blanca del
bazo, ganglios linfáticos
y la propia médula ósea.

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EL RECEPTOR DEL LINFOCITO B

se compone:
IgM unida a la membrana y de
un heterodímero Iga e Igb unido
por enlaces disulfuro.
La Iga y la Igb contienen
estructuras ITAM en sus colas
citoplásmicas.

El correceptor para el BCR es el

CD21=CR2 (receptor para el
complemento del tipo 2) CD19 y CD 81

COMPLEJO DEL
RECEPTOR DE
LINFOCITOS B

(BCR COMPLETO)

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Los dos tipos de señales del linfocito TH (CD40L y

citocinas) van a provocar que el linfocito B sufra
una serie de cambios.

i) linfocito B salga de reposo y entre a ciclo celular

(señales de competencia).

ii) linfocito B progrese a lo largo del ciclo celular

(señales de progresión) y/o que se diferencie.

 CD40L del linfocito TH se unen al CD40 del linfocito B

 Provoca una señal de competencia. Así entra en G1
 IL-4 (junto con la IL-1 secretada por macrófagos) G0 pasa a G1
 IL-4 sirve ya como señal de progresión G1 a S a M), con lo que
empieza la proliferación clonal (IL-2)
 La diferenciación requiere IL-6, así como de nuevo IL-4, IL-5, IL-
10 e IFN-g

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 Presentación del Ag (proteína), por el Th

 Tener memoria inmunológica,
 Experimentar cambio de isotipo, así los linfocitos que
expresan en su membrana mIgM o mIgD, pasan a
sintetizar IgG, IgA ó IgE: maduración de la afinidad.

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MADURACIÓN DE LA AFINIDAD.
Se produce por HIPERMUTACIÓN SOMÁTICA en los genes recombinados de la
región variable (CDR).
El grado de maduración depende de la dosis de Ag suministrada,
a) [Ag] es baja, se va a producir una selección de los clones con Rc de superficie de
mayor afinidad por el Ag, y estos van a producir Ac de mayor afinidad.
b) [Ag] es alta, no hay esta selección, y la maduración y aumento de afinidad es
menor.
Intervienen dos procesos:
a) Producción de clones de LB con mayor afinidad por ligeras modificaciones en las
regiones CDR ocurridas tardíamente, en la respuesta primaria frente a un Ag T-
dependiente.
b) Expansión selectiva de los clones de alta afinidad (LB memoria) provocada por el
Ag.

Esta secuencia de aparición se cumple en las

Ig séricas del feto y recién nacidos:
· IgM es la primera que se sintetiza.
· IgA es la segunda en sintetizarse.
· IgG comienza a sintetizarse unas semanas
antes del parto y alcanza los niveles de adulto
después de 1-2 años de vida, mientras que la
IgA tarda más tiempo en alcanzar los valores
normales.
La IgG es la Ig con niveles más altos en el feto,
pero procede de la madre por vía
transplacentaria.

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 Antígenos timo-independientes (TI o Tind) son aquellos que inducen respuesta

humoral en ausencia de contactos con linfocitos TH
 Ag: se caracterizan por ser moléculas poliméricas: epítopos iguales muy
repetidos, principalmente hidratos de carbono
 presentes en bacterias , son reconocidos simultáneamente por muchos
receptores BCR, dando lugar a la activación.
 La mayoría son no proteicos (lipopolisacárido, polisacáridos), y por lo tanto
no pueden ser procesados y expuestos en el surco del MHC.
 Suelen ser resistentes a la degradación
 Solo inducen IgM,
 No células de memoria

LINFOCITOS B COMO CÉLULAS

PRESENTADORAS DE Ag’S

Segunda
señal

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Linfocito B activado
como CPA

La célula B es una magnífica presentadora de antígeno, que a diferencia del macrófago posee
la capacidad de internalizar y procesar solamente el antígeno específico para el cual está
preparada por su mIg. De hecho es capaz de procesar antígeno a concentraciones de 100 a
10,000 veces menores de las requeridas por el macrófago.

LAS CÉLULAS T CD8+

(CITOTÓXICAS):
• maduran en el timo
• TCR+, CD3+, CD8+.
• Reconocen péptidos unidos
a MHC de clase I.
• Linfocitos T citotóxicos,
o CTLs.
• Contra patógenos intracelulares,
como bacterias o virus, y para la
vigilancia de las células
tumorales, rechazo de
trasplantes.

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Requiere de 3 señales para su

activación y diferenciación

Linfocitos T citotóxicos (CTL), son los efectores de

la inmunidad celular

ACTIVACIÓN y
DIFRENCIACIÓN:
1.La señal específica: por la interacción
entre su complejo TCR-CD3-CD8 con el
MHC-I de una APC profesional infectada (p.
ej., una célula dendrítica interdigitante)
2. La señal coestimulatoria: unión entre
B7 y CD28.
3. IL-2 provoca la proliferación y
diferenciación del linfocito en reposo
(virgen o de memoria) linfocito T citotóxico
(CTL).

CTL se caracteriza por poseer algo más de

citoplasma que el TH, y sobre todo por
poseer gránulos densos a los electrones,
rodeados de unidad de membrana
(llamados a veces granulosomas) y un
aparato de Golgi.

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FASE EFECTORA: ATAQUE Y

DESTRUCCIÓN DE LA CÉLULA DIANA
A) necesaria la unión del complejo
TCR/CD3 del CTL con sus ligandos
HLA I y el péptido en la célula diana.
B) Unión de CD28 y sus ligandos
CD80, es el coestímulo
necesario para el inicio de la
transducción de señales.
C) Moléculas de adhesión, tales como el
LFA-1 y su ligando, estabilizan el
contacto intercelular al unirse a sus
ligandos en la superficie de la célula
diana.
TNFa y TNFb = LINFOTOXINA D) Es necesario un incremento del
número de receptores de citocinas,
especialmente de la IL-2, favorecerá
la proliferación celular

CTL, PRESENTA VARIAS MODIFICACIONES AL INTERIOR.

1. La reorganización del citoesqueleto, con localización del centro
organizador de microtúbulos (MTOC) y de los centriolos próximos a la
zona de contacto intercelular.
2. La polarización del aparato de Golgi y de los gránulos de secreción en
la misma zona.
3. Fusión de los gránulos con la membrana plasmática, que permitirá la
posterior exocitosis de su contenido al espacio intercelular.
4. La secreción de ciertas citocinas, particularmente IFN-g y TNF-a que
son importantes mediadores de la citotoxicidad.
5. Expresión de la molécula Fas ligando (FasL) en las células efectoras.
Esto permitirá que después sea posible su unión con las moléculas Fas
presentes en las células diana.

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FASE LÍTICA
1.- Perforina, o proteína formadora de poros
(PFP) actúa produciendo poros en la
membrana de la célula blanco, entra en
contacto con el calcio intercelular y polimeriza.
Forma cilindros huecos (20 unidades) aprox 20
nm diámetro.
2.- Granzimas, inducen fragmentación del
ADN (proteasa)
Dentro de gránulos, son estructuras con un
núcleo electrodenso y poseen pH ácido.
Otra proteína: granulisina, puede alterar la
permeabilidad de la célula diana y de las
membranas microbianas.

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Acción del Fas y FasL

En el proceso citotóxico se
produce la activación de
endonucleasas de la propia
célula diana, por un
mecanismo
denominado apoptosis.
Este proceso de apoptosis
consta de dos fases:
TAREA: DIFERENCIAS ENTRE NECROSIS Y APOPTOSIS

1.-La célula se programa para morir,
activándose enzimas proteolíticas:
caspasas. Fas, unido su ligando FasL,
interactúa con un factor intermedio
denominado FADD (factor associated death
domain) activando el complejo cisteinil-
aspartato proteasas (caspasas). Algunas
caspasas son "iniciadoras" y otras son
"efectoras" del proceso catalítico
2.- la vía de las caspasas culmina con el
fraccionamiento del DNA y muerte celular
en un proceso que se denomina muerte
por apoptosis. En el núcleo se degrada el
ADN, observan condensaciones de
cromatina nuclear. La muerte celular se
produce después de grandes alteraciones
nucleares, de la membrana plasmática y de
las mitocondrias.

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CÉLULAS NK
 Células NK constituyen la tercera
estirpe de células de tipo linfoide.
 No presentan TCR ni BCR
 Expresan en su superficie las
moléculas CD16 y CD56.
 Se encuentran en sangre, bazo,
médula ósea y en muy baja
proporción en ganglios linfáticos.
 Existen grandes diferencias
funcionales entre las células NK y
los linfocitos Tc

son células grandes con abundantes gránulos contenedores de

sustancias citotóxicas

representan el 10% de las células mononucleares de sangre

periférica y no poseen marcadores, ni de los linfocitos T ni de los
linfocitos B. Fenotípicamente las células NK se definen como
linfocitos CD3-, CD56+, CD16+ y poseen receptores de varios tipos.

Tiene la capacidad para actuar frente al crecimiento de células

tumorales impidiendo su expansión así como destruir células
infectadas por virus.

alta capacidad destructora, que puede ser directa, citotoxicidad

celular directa o bien mediada por anticuerpos como citotoxicidad
celular mediada por anticuerpos (ADCC) CD16..

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MCM4 gene encodes the mini-chromosome maintenance complex member 4

Se cree que el proceso de maduración de las células NK se efectúa en parte

en el timo y en parte fuera del mismo en órganos linfoides periféricos.

Niveles de
expresión de
CD56

NKbright NKdim

secretora de función
citocinas citotóxica

célula activada por IL-2 (LAK).

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capacidad reguladora de la
citotoxicidad con: KIRs
(Killer immunoglobulins-
like receptors) y los
NCRs (Natural citotoxicity
receptors).

Esenciales Actúan esp Respetan Primera Producen

como parte ecialmente las células barrera INFg, que
de la RI frente a propias de defensiva, facilita la
innata y RI virus cada Mf, DC y RI
adaptativa individuo PMN adaptativa
MHC-I

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FUNCIONES:
CD16 (FcgR)

i)Citotóxica, mediante
1. Receptores del extremo Fc
de Igs conocido como
CD16 (FcgR)
2. Receptores de citotoxicidad
natural (NCRs)
3. Receptores NK de HLA
(NKRs).

ii)Secretora: citocinas y
quimiocinas

Las células NK siempre tienen gránulos en su citoplasma aunque éstos

poseen mayor actividad cuando estas células son activadas con IL-2, en
cuyo caso se les denomina célula activada por IL-2 (LAK).

Alta capacidad destructora, que

puede ser directa, citotoxicidad
celular directa o bien mediada
por anticuerpos como citotoxicidad
celular mediada por anticuerpos
(ADCC) CD16.

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HLA-G y HLA-E;
HLA I, no clásicas

T CD8 + destruyen las células célula NK mata a las células

diana mediante el diana, no específica de
reconocimiento del péptido antígeno, por una amplia gama
antígenico restringido por HLA de receptores de superficie:
de clase I. inhibidores y activadores.

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NK LINFOCITOS Tc
ACCIÓN EN EL Inmediata Retardada
TIEMPO

TIPO DE Inespecífico Específico

ESPECIFICIDAD

CLONALIDAD No clonal Clonal

MEMORIA No posee Con memoria
FRENTE A LO Se inhibe Se activa (+Ag)
PROPIO

CAPACIDAD DE Lo no propio Lo propio (+Ag)

LISAR

Células NKT
Las células NKT (Natural Killer T
cells) son un tipo especial de
linfocitos que desempeñan funciones
parecidas tanto a las células Th como
a las Tc y además, presentan
marcadores específicos de células NK
y de células T.
A diferencia de los linfocitos T, las
células NKT reconocen glicolípidos
presentados por la molécula CD1d.
Usan diferentes regiones V

33

IL-12 producida por DC y MF, en respuesta a morg, y el
IFN-g por NK, activan factores de transcripción (FT)
IFN-g amplifica esta respuesta e inhibe
el desarrollo de los linfocitos TH2 y TH17.
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La IL-2 estimula la supervivencia y la
proliferación de los linfocitos T, con lo que
actúa como un factor autocrino de
crecimiento.
La IL-2 también mantiene funcionales a
los linfocitos T reguladores, y así controla
las respuestas inmunitarias (p. ej., contra
antígenos propios).
IL-4 producida por los propios linfocitos T activados o por IL-1 y la IL-6 producidas por las APC y TGF-b producido
los mastocitos y los eosinófilos, especialmente en respuesta por varias células activan los FT.
a los helmintos, activan FT. IL-23 (APC) estabiliza Th17
IL-4 producida por los TH2 amplifica esta respuesta e inhibe IL-21 amplifica la respuesta
el desarrollo de los linfocitos TH1 y TH17.
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Cómo se conserva la memoria

inmunológica?

Reinfecciones, Estimulación
reinmunizaciones intermitente con
o infecciones Activación celular por Ag de reacción
persistentes medio de receptores cruzada
diferentes a los del
Ag (tipo Toll)

Homeostasis de sostén programada que involucre la

participación paracrina de citocinas y factores aún
NO identificados

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