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FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

PROCESO DE DISEÑO CURRICULAR


LABORATORIO DE PARASITOLOGÍA
Código: FCQ-P05-F06; Versión: 01; 15 de enero de 2017

Práctica Título de la
DIAGNÓSTICO DIRECTO DE TRIPANOSOMA spp.
Nº 10 Práctica:
Integrantes: Grupo Nº 01
Jiménez Saritama Fabricio Leonardo. Día: Jueves
Sisalema Yanzapanta Erick Damián Horario: (14:00-16:00) pm
Tapia Mañay Vanessa Aracely Fecha: 2018/ 12/ 20

INFORME DE LABORATORIO

1. INTRODUCCIÓN:

La familia Trypanosomatidae se caracterizan por poseer una estructura de ADN además


del núcleo, llamada cinetoplasto; de acuerdo al tamaño del parásito y a la localización
del cinetoplasto se diferencian cuatro formas parasitarias morfológicamente diferentes:
amastigote, promastigote, epimastigote y tripomastigote. El amastigote, carece de
flagelo y posee un cinetoplasto al lado del núcleo; el promastigote tiene forma alargada,
con el cinetoplasto en la parte anterior del parásito en donde sale el flagelo; el
epimastigote es más largo y tiene el cinetoplasto cerca del núcleo de donde sale el
flagelo; y el tripomastigote posee el cinetoplasto en la parte posterior del núcleo, además
tiene membrana ondulante y en la parte anterior del parásito sale el flagelo. (Botero D. &
Restrepo M., 2011)

La enfermedad de Chagas, también conocida como tripanosomiasis americana, es una


enfermedad potencialmente letal causada por un hemoparásito flagelado
llamado Tripanosoma cruzi, cuyo vector es el triatomino. Es una condición endémica
que representa un problema de salud pública en Latinoamérica, donde se reportan entre
7,7 y 10 millones de personas infectadas. Adicionalmente es una condición asociada a
alta morbilidad en la región, pues aproximadamente el 30 % de los individuos con
formas crónicas de la infección desarrolla condiciones discapacitantes como
cardiomiopatía, megacolon y megaesófago, lo que lleva a una pérdida anual de
aproximadamente 670 000 años de vida productiva ajustados por discapacidad.
(Jaramillo L. & Ruiz C., 2017)

La prevalencia en el Ecuador de la enfermedad de Chagas de acuerdo con las


investigaciones realizadas en el año 2003 es de 1.38% de la población en general (0,65
% en la Sierra, 1,99% en la Costa y 1,75% en la Amazonía) (24) . Lo que sugiere que
entre 176.400 personas son seropositivas en el país y unas 3 a 5 millones de personas
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viven vulnerables a contagio en áreas donde la transmisión vectorial se ha demostrado,


se describen como las principales zonas endémicas a 15 regiones que se encuentran en
Guayas, Manabí, El Oro, Loja (25). También se han descubierto focos de transmisión en
la Amazonia norte (Sucumbíos, Napo y Orellana); sin embargo, escasa información
documentada se tiene de la provincia de Pastaza. En cuanto a la incidencia de nuevos
casos, las estimaciones indican que puede esperarse unos 3000 nuevos casos de personas
que adquieran la infección cada año en ausencia de un control epidemiológico adecuado
de la enfermedad y más de 300 muertos por año. (Moreno Cintia, 2016)

2. OBJETIVOS:

2.1. Reconocer al microscopio protozoos tisulares del género Tripanosoma spp.


2.2. Familiarizarse con las pruebas diagnósticas de laboratorio para la investigación de
Tripanosoma spp.

3. MÉTODOS:

Figura 3.-1: Metodología del diagnóstico directo de Tripanosoma spp

Diagnóstico directo de Tripanosoma spp

Tripomastigote metacíclico

Colocar la placa preparada


sobre la platina
Enfocar con el lente de 100 X

Conocer las técnicas Preparar exposiciones en Identificar las partes que


que se emplean para el base a los artículos presenta el parásito
diagnóstico científicos Tripomastigote cruzi
Tripomastigote metacíclico Tripanosoma cruzi - Núcleo
- Cinetoplasto
- Flagelo

Elaborado por: Jiménez F.


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4. RESULTADOS:

4.1. Dibujar y rotular los elementos observados en la observación microscópica.


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5. DISCUSIÓN DE RESULTADOS:

La morfología y ciclo de vida de Trypanosoma cruzi, depende del ambiente del cual se
encuentra, presentando distintas formas: amastigotes, epimastigotes y trypomastigotes. El
amastigote es esférico u ovalado de 2 – 4 µm de diámetr, constituye la forma de división
intracelular en los tejidos del huésped mamífero, formando los llamos pseudiquistes. En
epimastigotes, el cinetoplasto es localizado anterior al núcleo. Son alargados de
aproximadamente 20 µm de longitud, tienen un flagelo libre, siendo la forma de división
encontradas en el tracto digestivo del vector también como en los cultivos en medios
artificiales. En los tripomastigotes, el cinetoplasto es posterior al núcleo. Se encuentra en la
sangre del vertebrado y es la forma infectante presente en el vector, su longitud es de 20
µm, tiene un flagelo y una membrana ondulante a lo largo de su cuerpo. El trypomastigote
del vector se le ha conocido como la forma metacíclica, infectante de los vertebrados. El
trypomastigote encontrado en la sangre del mamífero infectado, es responsable para
establecer la infección intracelular en el mamífero (trypomastigote delgado) y para infectar
(tryppomastigote grueso) al vector al ser chupado con la sangre del huésped vertebrado. La
forma trypomastigote no se divide (Urribarren, 2018). Durante la práctica se apreció las
características de la forma trypomastigote metacíclico, el cual contaba con un flajelo cuyo
cinetoplasto es posterior al núcleo, tal como lo menciona el autor anterior.

Dependiendo el estadio de la enfermedad, el diagnóstico de la enfermedad de chagas se


puede hacer mediante: Detección directa del parásito por medio de su visualización
microscópica en una extención de sangre periférica, microhematocrito, hemocultivo en
medio especializado, xenodiagnóstico, PCR. Estas técnicas sólo son válidas en a fase aguda
de la infección, cuando hay una gran cantidad de trypomastigotes circulando. En formas
crónicas hay un grado de parasitemia bajo e intermitente. Detección indirecta con técnicas
serológicas (ELISA, IFI, IHA), se utiliza en fase crónica, en la que el título de anticuerpos
IgG anti-T cruzi es elevada (Solano, 2011). Asi como menciona al autor, la extensión
sanguínea periférica permite encontrar al trypomastigote metacíclico, demostrando la
presencia del parásito en el huésped.

En la práctica se examinaron los protozoos tisulares del género Trypanosoma spp,


responsable de la enfermedad de chagas, que por zoonosis participa en un gran número de
reservorios vertebrados y transmisores triatóminos que se alimentan de sangre y durante la
picadura defecan en la piel del hospedero. En las heces del insecto se encuentran los
trypomastigotes metacíclicos, que penetran por rascado del mismo hospedero. También por
vía oral a través de ingesta de los triatóminos en alimentos infectados con las heces de los
artrópodos, con secreciones de reservoriosUna vez en el organismo de mamífero, el
parásito invade las céulas cercanas del sitio de inoculación adquiriendo la forma
intracelular (amastigote) que provocará daño directo e indirecto a los tejidos. Al
multiplicarse el amastigote, genera tripomastogotes que se liberan a la circulación
sanguínea, para continuar infectando células de tejidos diferentes (Uribarren, 2018).
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6. CONCLUSIONES:
Se logró reconocer en el microscopio el protozoo tisular del genero Trypanosoma spp,
gracias a las características que este presenta, principalmente los tripomastigotes, cuyo
cinetoplasto es posterior al núcleo, siendo la forma infectante presente en el vector con
una longitud de 20 µm, además cuenta con un flagelo y una membrana ondulante a lo
largo de su cuerpo.

Se familiarizo con las pruebas de diagnóstico de laboratorio, donde el diagnostico


principalmente se realiza mediante un frotis directo coloreado, tomado de la lesión.
Otros tipos de pruebas pueden ser una biopsia, cultivos y PCR siendo esta de alta
especificidad y sensibilidad.

7. CUESTIONARIO:

7.1. Dibujar todos los estadios morfológicos de Tripanosoma spp. con sus elementos
rotulados y la localización.

Tabla N° 1: Estadios morfológicos de tripanosoma.


Estadios Morfológicos de Tripanosoma
Gráfico Localización

En el intestino posterior del


Tripomastigote
triatoma, se excreta mediante
metaciclico
las heces de este.

Células en los tejidos


Amastigote infectados multiplicándose
por fisión binaria
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Al reventas las células


pasando de amastigotes a
tripomastigotes en la especie
Tripomastigote
infectada y entran
posteriormente al torrente
sanguíneo.

Se encuentran en el intestino
Epimastigote medio del triatoma, aquí se
encuentran multiplicándose.

(Botero D. & Restrepo M., 2011) Elaborado por: Tapia V.

7.2. Completar la siguiente tabla para la detección de Tripanosoma spp.

Tabla N°2: Técnicas de identificaciones de tripanosomas


ELEMENTO
MUESTRAS PARASITARIO O
TÉCNICA FUNDAMENTO
EMPLEADAS MECANISMO
IDENTIFICADO
El objetivo es visualizar
tripomastigotes. El
movimiento de estos,
ayuda para su detección.
Examen en Se observan
En fase aguda se Gota de sangre
fresco tripomastigotes.
encuentran parásitos hasta
en un 90% y en crónica la
sensibilidad es menor del
10%.
Los frotis sanguíneos o de
Morfología del
plasma se colorean con -Extendidos
parasito
Extendido Giemsa, para identificar la delgados
(tripomastigote), para
coloreado morfología del parásito. -Frotis sanguíneo
identificación
Tiene una sensibilidad del o plasma
especifica.
60%.
Biopsia Se puede ver en los tejidos Tejidos Formas tisulares de
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los llamados nidos de T.cruzi


amastigotes en su interior
Presenta una efectividad
entre 85 – 100%. Se utiliza
insectos vectores limpios,
Se buscan
para picar a pacientes
Deyecciones de tripomastigotes en las
Xenodiagnstico sospechosos para que
triatomíneos deyecciones de
ingieran la sangre de estos.
triatomíneos.
Posteriormente se
examinan las deyecciones
de los triatomíneos.
(Botero D. & Restrepo M., 2011) Elaborado por: Tapia V.

Epidemiología de tripanosoma en Ecuador

En Ecuador, 3.8 millones de personas corren el riesgo de ser infectadas con T. cruzi y
200.000 personas actualmente padecen de esta enfermedad. (López, 2015)

Receptores que tiene el tripanosoma cruzi (factores de virulencia)

La enfermedad de Chagas se trasmite por las heces de los insectos triatominos de la familia
Reduviidae, conocidos en el Ecuador como chinchorros, chinche caballo o guaros. También
por transfusiones sanguíneas, trasplantes de órganos o de la madre al feto durante el
embarazo. (López, 2015)

8. BIBLIOGRAFÍA:

Botero D. & Restrepo M. (2011). Parasitosis humana: incluye animales venesosos y


ponzoñosos (Quinta ed.). Medellín, Colombia: CIB Fondo Editorial.
Jaramillo L. & Ruiz C. (2017). Enfermedad de Chagas: una mirada alternativa al
tratamiento. Recuperado el 19 de Diciembre de 2018, de scielo.sld.cu:
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0375-
07602017000200009&lng=es&tlng=es
López, M. (20 de Noviembre de 2015). Ecuador le hace frente a la enfermedad de Chagas.
Obtenido de Ecuados ama la vida:
http://prometeo.educacionsuperior.gob.ec/ecuador-le-hace-frente-a-la-enfermedad-
de-chagas/

Moreno Cintia. (2016). Prevalencia de Chagas en donantes del banco de sangre del
Hospital Carlos Andrade Marín . Universidad Central del Ecuador. Quito: UCE.
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Solano, M. (13 de marzo de 2011). http://www.infochagas.org. Recuperado el 19 de


diciembre de 2018, de http://www.infochagas.org/diagnostico
Uribarren, T. (2018). LEISHMANIOSIS o LEISHMANIASIS. Obtenido de
http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/leishmaniosis.html

9. ANEXOS:

Foto N° 1: Triatoma Foto N° 2: Tripomastigotes

Autor: Sisalema E. Autor: Sisalema E.

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