ENZIMAS

DEFINICIÓN

Polímeros biológicos que catalizan

las reacciones bioquímicas

http://eluniversobajoelmicroscopio.blogspot.com.co/2016/09/enzimas.html
 Estudio de
Enfermedades
causadas por
deficiencias
enzimáticas

¿Para que se
utilizan las
enzimas?
Medición
alimentos y de la
agricultura actividad
enzimática
 CARACTERÍSTICAS DE LAS
ENZIMAS
•PROTEÍNAS (excepto por las moléculas de RNA catalítico)
•MASA MOLECULAR (12.000 -1 .000.000 U)
• CATALIZADORES
• ÁLTAMENTE ESPECÍFICAS
• REQUIEREN CONDICIONES ESPECÍFICAS DE
REACCIÓN (T° Y pH)
• SON REGULABLES
 PODER CATALIZADOR DE LAS ENZIMAS

Las enzimas modifican la velocidad de la reacción, en su

ausencia las reacciones bioquímicas se efectuarían muy
lentamente
 ESQUEMA GENERAL DE UNA
REACCIÓN ENZIMÁTICA

https://www.slideshare.net/JeanLoayza93/8-enzimas-1

Una enzima no modifica el equilibrio de la reacción

 SITIO ACTIVO

 Lugar de la enzima donde ocurre la catálisis

 Se caracteriza por:

 Establecer interacciones débiles entre la enzima y el sustrato

 Tener un ambiente cuya polaridad, hidrofobicidad, acidez o
alcalinidad difieren del citoplasma circundante

http://personalpages.manchester.ac.uk/staff/T.Wallace/20421tw2/20421_lect3.html
MODELO DEL COMPLEJO
ENZIMA-SUSTRATO
 PERFIL DE REACCIONES
ENZIMÁTICAS Y NO ENZIMÁTICAS

 ΔG= Variación de la
energía libre para
realizar un trabajo
 Energía de activación:
Energía necesaria para
una reacción tenga
lugar
 Estado de transición:
Momento molecular
que permite la
conversión de sustrato
a producto
 MECANISMO DE CATÁLISIS
ENZIMÁTICA

1. Proximidad.

1. Ácido básica
 MECANISMO DE CATÁLISIS
ENZIMÁTICA

3. Por tensión: estado de transición

4. Covalente
MOLÉCULAS ASOCIADAS A LAS ENZIMAS
COFACTORES
Iones metálicos que se unen a la enzima de manera transitoria
y disociable
 MOLÉCULAS ASOCIADAS A LAS ENZIMAS
COENZIMAS
 Actúan como portadores transitorios de átomos y
grupos funcionales

Cuando una coenzima o un ión metálicos están permanentemente

asociados a la enzima se definen como Grupos prostéticos
COENZIMA – FOSFATO DE PIRIDOXAL

https://es.slideshare.net/GabrielaGarcia22/vitaminas-y-coenzimas
MOLÉCULAS ASOCIADAS A LAS ENZIMAS

HOLOENZIMA: Enzima catalíticamente completa. (Activa)

APOENZIMA: Parte proteica de la enzima. (Inactiva)
 LAS ENZIMAS REQUIEREN CONDICIONES
ESPECÍFICAS PARA LA REACCIÓN

 pH
 Algunas cadenas laterales de
aminoácidos pueden actuar como ácidos
o bases débiles

 Temperatura
 La mayoría de las enzimas funcionan a
una temperatura aproximada a los 37°C
 Temperaturas mayores >37°C pueden
causar la desnaturalización de las
enzimas
PH REQUERIDO POR ALGUNAS
ENZIMAS
 CLASIFICACIÓN ENZIMÁTICA
 Se clasifican por su función en:
1. Oxido reductasas
Catalizan la reacción de oxido-reducción al
adicionar o sustraer H+
2. Transferasas
Transferencia de diferentes grupos: Carbono,
aminoácidos, nitrógeno fósforo
3. Hidrolasas
Cataliza la división hidrolítica de enlaces C-C,
C-O, C-N, P-O.
4. Liasas
Catalizan la ruptura de un enlace covalente (C-C, C-
O, C-N) o su formación
5. Ligasas

Catalizan la reacción que permite la unión de dos

moléculas con hidrólisis simultanea de ATP
6. Isomerasas
Cataliza cambios geométricos y estructurales
dentro de una molécula
GLUCÓLISIS

Cuál es la clasificación de
las enzimas presentes en
esta ruta?
GLUCÓLISIS

Cuál es la clasificación de
las enzimas presentes en
esta ruta?
 ISOENZIMAS

 Enzimas que catalizan la misma reacción

 Tienen una estructura primaria y/o subunitaria
diferente
 Presentan diferencias sutiles como diferente
afinidad por el sustrato (Ej: Hexoquinasa,
Glucoquinasa)
 ISOENZIMAS
GLUCOQUINASA Y HEXOQUINASA

 Glucocinasa  Hexoquinasa
 Órgano:  Órgano:
 Hígado  En todos los tejidos
 Páncreas

 Función fisiológica:  Función fisiológica:

 proporcionar Glc-6-P para
la síntesis de glucógeno
 Sensor de glucosa,
determina el umbral de
secreción de la insulina
 Cataliza el primer paso en
el metabolismo de la
glucosa.
 CINÉTICA ENZIMÁTICA

DETERMINA LA VELOCIDAD DE UNA REACCIÓN

CATALIZADA POR LAS ENZIMAS
 LA CONCENTRACIÓN DEL SUSTRATO AFECTA LA
REACCIÓN CATALIZADA POR LA ENZIMA

Km= Concentración del sustrato a la que la velocidad de la

reacción es la mitad de la velocidad máxima (Vmáx).
Vi = Velocidad de la reacción inicial
S= sustrato
 Ecuación de Michaelis-Menten

Km refleja la concentración del sustrato a la cual Vi

corresponde a la mitad de la velocidad alcanzada
por una concentración particular de enzima

Km nos indica la afinidad que tiene la enzima por el

sustrato

> Km: Menor afinidad de la enzima por el sustrato

< Km: Mayor afinidad de la enzima por el sustrato
DE LAS SIGUIENTES ISOENZIMAS CUAL
PRESENTA MAYOR AFINIDAD POR LA
GLUCOSA?
 GRÁFICO DE LINEWEAVER-BURK

• Linearización de la ecuación de Michaelis Menten

• Proporciona una muy buena ilustración de las inhibiciones
competitivas y no competitivas
 MECANISMOS DE INHIBICIÓN
ENZIMÁTICA
 Inhibidor enzimático: compuesto que disminuye la
velocidad de la reacción al unirse a la enzima

 Inhibición reversible:
 Inhibición competitiva
 Inhibición acompetitiva
 Inhibición no competitiva

 Inhibición irreversible
 Inhibición basada en el mecanismo o suicida
 Enzyme Inhibition (Mechanism)

I Competitive I Non-competitive I Uncompetitive

Substrate E
Cartoon Guide

S S E I
S

E S I I
I
Compete for S I
Inhibitor active site Different site

→ ES → E + P
E + S← E + S←→ ES → E + P → ES → E + P
E + S←
Equation and Description

+ + + +
I I I I
↓↑ ↓↑ ↓↑ ↓↑
EI EI + S →EIS EIS
[I] binds to free [E] only, [I] binds to free [E] or [ES] [I] binds to [ES] complex
and competes with [S]; complex; Increasing [S] can only, increasing [S] favors
increasing [S] overcomes
not overcome [I] inhibition. the inhibition by [I].
Inhibition by [I].

TOMADO DE : http://juang.bst.ntu.edu.tw/BCbasics/Animation.htm Juang RH (2004) BCbasics

 Enzyme Inhibition (Plots)

I Competitive I Non-competitive I Uncompetitive

Vmax Vmax Vmax
vo vo
Direct Plots

Vmax’ Vmax’
I I I

Km Km’ [S], mM Km = Km’ [S], mM Km’ Km [S], mM

Vmax unchanged Vmax decreased
Km increased Km unchanged Both Vmax & Km decreased
Double Reciprocal

1/vo I 1/vo I 1/vo

I

Two parallel
Intersect lines
at Y axis 1/ Vmax Intersect 1/ Vmax 1/ Vmax
at X axis

1/Km 1/[S] 1/Km 1/[S] 1/Km 1/[S]

TOMADO DE : http://juang.bst.ntu.edu.tw/BCbasics/Animation.htm Juang RH (2004) BCbasics

 INHIBICIÓN IRREVERSIBLE
 Causan modificación química de la enzima o no
permiten la unión de la enzima con el sustrato.

 Ejemplo: Ácido acetilsalisílico inhibe la actividad

de la ciclooxigenasa acetilando la Ser530,
bloqueando el acceso de la ciclooxigenasa al sitio
activo de la enzima.
 INHIBICIÓN BASADA EN EL
MECANISMO O INHIBICIÓN SUICIDA

 Son compuestos análogos del sustrato que se une al

sitio activo de la enzima

 Luegode unirse al sitio activo, la enzima transforma la

molécula en una especie química muy reactiva que
modifica la enzima y la inactiva.
 INHIBICIÓN BASADA EN EL
MECANISMO O INHIBICIÓN SUICIDA
 Ejemplo:
 La monoaminooxidasa (MAO)
cataliza la inactivación de
neurotransmisores
(serotonina, noradrenalina)
 Los inhibidores de la MAO
son utilizados en tratamientos
antidepresivos
 Inactiva la FAD que actúa
como coenzima de la MAO

https://es.slideshare.net/tango67/enzimas-46520584
 REGULACIÓN ENZIMÁTICA
Las enzimas pueden mostrar una actividad catalítica mayor o
menor en respuesta a ciertas señales. Existen diferentes
mecanismos:

 Expresión de la proteína enzimática de acuerdo a las

necesidades metabólicas
 Activación o inactivación de enzimas por enzimas
proteolíticas
 Activación o inactivación reversible por modificaciones
covalentes (fosforilación)
 Activación o inhibición alostérica
 Degradación de proteínas por proteasas intracelulares
 ACTIVACIÓN PROTEOLÍTICA DE
ENZIMAS
 Conversión de una proenzima (zimógeno) en una
enzima con actividad catalítica mediante proteólisis
selectiva

 Ejemplo

 La secreción de proenzimas protege al tejido de origen

contra la autodigestión
 MODIFICACIONES COVALENTES POR
FOSFORILACIÓN

 La fosforilación- desfosforilación influye sobre la eficiencia

catalítica de la enzima, ubicación dentro de la célula, la
susceptibilidad a la degradación proteolítica y la respuesta a
a la regulación alostérica
 Proteinas quinasas: unión de grupo fosforilo a residuos
aminoacídicos (serina, treonina o tirosina)
 Proteina fosfatasa: eliminación de grupo fosforilo
MODIFICACIONES COVALENTES POR
FOSFORILACIÓN
REGULACIÓN DE LA ACTIVIDAD
GLICONEGO FOSFORILASA
 REGULACIÓN ALOSTÉRICA

 Activadores o inhibidores
alostéricos se unen al sitio de
regulación y causan un cambio
conformacional que afecta la
afinidad de la enzima por el
sustrato
 Unión reversible

 No covalente
REGULACIÓN ALOSTÉRICA DE LA
PROTEÍNA CINASA A
 Mechanism and Example of Allosteric Effect
Kinetics Models Cooperation
Allosteric site
R = Relax
R Homotropic
(active) vo (+) S (+)
S

S
R Concerted
Allosteric site
[S]
R
(+) A
T Heterotropic
vo (+)
S S (+)
R Sequential
X [S]
T
T = Tense I
vo
T Heterotropic
(inactive)
(-) X
(-) X (-)
T Concerted
[S]
TOMADO DE : http://juang.bst.ntu.edu.tw/BCbasics/Animation.htm Juang RH (2004) BCbasics
 REGULACIÓN ALOSTÉRICA
HOMOTRÓPICA Y HETEROTRÓPICA