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 CUARTA EDICIÓN

ECKERT
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FISIOLOGIA
ANIMAL
MECANISMOS Y ADAPTACIONES
 CUARTA EDICIÓN

ECKERT

MECANISMOS Y ADAPTACIONES

DA V I:D RANDALL
UNJVBRSIDAD DE CüLUMBJA BRITÁNICA

W ARREN BURGGREN
UNIVERSIDAD DE NEVADA, LAS VEGAS

KATHLEEN FRENCH
UNIVERSIDAD DE CAL!FO!lNJA, SAN DIEGO

CON LA COLABORAClÓN DE

RUSSELL FERNALD
UNIVERSIDAD DE STANfORD

• • •
McGRAW- Hlll • INTERAMERICANA
MADRID • BUENOS AIRES • CARACAS • GUATEMALA • LISBOA • MÉXICO
NUEVA YORK • PANAMÁ • SAN JUAN • SANTAFÉ DE BOGOTÁ • SANTIAGO • SAO PAULO
AUCKLAND • HAMBURGO • LONDRES • MILÁN • MONTREAL • NUEVA DELHl • PARÍS
SAN FRANCISCO • SYDNEY • SINGAPUR • ST. LOUIS • TOKIO • TORONTO
Traducción:
Josefina Blasco Mínguez
Profesora Titular del Departamento de Fisiología
de la Universidad de Barcelona
Jaime Fernández Borrás
Profesor Titular del Departamento de Fisiología
de la Universidad de Barcelona
Teresa Pagés Costas
Profesora Titular del Departamento de Fisiología
de la Universidad de Barcelona
José Sánchez Carralero
Profesor Titular del Departamento de Fisiología
de la Universidad de Barcelona
Ginés Viscor Carrasco
Profesor Titular del Departamento de Fisiología
de la Universidad de Barcelona

FISIOLOGÍA ANIMAL
No está permitida la reproducción total o parcial de este libro, su tratamiento
informático, la transmisión de cualquier otra forma o por cualquier otro me­
dio electrónico, mecánico, por fotocopia, por registro u otros métodos, sin el
permiso previo y por escrito de los titulares del copyright.

Derechos reservados(!) 1998, respecto de la segunda edición en español, por

McGRAW-HILL/INTERAMERICANA DE ESPAÑA, S. A. U.
Edificio Valrealty, 1.• planta
Basauri, 17
28023 Aravaca (Madrid)
'Primera edición, 1989
Segunda edición, 1998
Primera reimpresión, 1999
Segunda reimpresión, 2002

ISBN: 84-486-0200-5
Depósito legal: M. 43.358-2002
Traducido de la cuarta edición en inglés de la obra:
ANIMAL PHYSIOLOGY de
D. Randall et al
ISBN: 0-7167-2414-6 {Edición original)
Copyright ro 1997 por W. H Freeman and Company
Preimpresión: MonoComp, S. A. Cartagena, 43. 28028 Madrid
Impreso en EDIGRAFOS, S. A. Volta, 2. Poi. Industrial San Marcos.
28906 Getafe (Madrid)
Impreso en España • Printed in Spain
Para nuestras familias, y, por supuesto,
para Roger
 LOS AUTORES
DAVID RANDALL
Destacado iciiofisiólogo y experto reconocido en fisiología res­
piratoria y circulatoria, David Randall, colaboró con el difunto
Roger Eckcrt en las anteriores ediciones dcAnim�I' Physiology y
continúa su contribución en esta cuarta. El Dr. Randall inició
sus labores docentes en la Universidad de la Columbia Británi­
ca en Vancouver. Canadá. en 1963. ganó una plaza como cate­
drático en 1973 y 1'1c nombrado viccdccano de Estudios de
Graduado en 1990. Elegido como miembro de la Royal Society
ofCanada en 1981, Randall ha formado parte de las fundacio­
nes Guggenheirn y Killam, y ha sido galardonado por la Cana­
dian Society nf Zooloqy en 1993 con la prestigiosa Fry Meda/
por sus contribuciones a la investigación zoológica. En 1995,
recibió el Award o] Excellence de la American Fisheries Society
WARREN BURGGREN
Warrcn Burggrcn ha impartido fisiología durante 23 años y es
profesor ele Ciencias Biológicas en la Universidad de Nevada
en Las Vegas desde 1992. Los cursos que ha impartido en la
UNLY y en la Universidad ele Massachuseus, donde fue profe­
sor de Zoología desde 1987 hasta 1991, comprenden Anatomía
y Fisiología Humana, Bioenergética, 1 ntroducción a la Zoolo­
gia y Fisiología Comparada. El interés investigador de Burg­
grcn incluye la Fisiología del Desarrollo, la Fisiología Animal
Comparada y la Fisiología Ambiental y Ecofisiologia­En parti­
cular, su trabajo investigador se centra en la ontogenia del siste­
ma respiratorio y cardiovascular, así como en los cambios de
KATHLEEN FRENCH
Neurobióloga en la Universidad de California en San Diego
desde 1985, Kathlccn Frcnch tiene I O años de experiencia en la
enseñanza superior, habiendo impartido cursos de Embriología
y Fisiología de Mamíferos a estudiantes de primer curso de Me­
dicina y Neurobiología Celular. Además.Frenen participa en un
programa de la UCSD para la capacitación de profesores ayu­
dantes de ciencias sobre filosofía y metodología docente. Tam­
bién participa en el curso de Neurociencia y Comportamiento
del Laboratorio de Biología Marina de Woods Hole, en Massa­
chusetts. un curso intensivo diseñado principalmente para estu­
diantes de posgrado y becarios posdoctorales. La pericia y de­
voción por la docencia, junto con su vocacional interés en los
por sus contribuciones en el campo ele la fisiología de peces,
tema sobre el que ha sido conferenciante en numerosos simpo­
sios, los más recientes en Brasil, Francia, Alemania, Italia, Re­
pública Popular de China, Rusia y Estados Unidos. Ha traba­
jado en el desarrollo ele los criterios ele control del amonio
tanto con la Organización Mundial de la Salud, como con la
Agencia de Protección Ambiental de Estados U nidos. Sus traba­
jos han sido ampliamente publicados en revistas de primera li­
nea. Randall es cocditor de la serie Fish Physioloqy (Acadcmic
Press) formada por 15 volúmenes ya impresos. Además de sus
otras obligaciones, Randall participa impartiendo cursos de ter­
cer afio sobre Fisiología de Vertebrados y Ambiental. Su campo
de interés en la investigación se centra en la interacción entre los
.intercambios de gases e iones en las branquias de los peces.
sus sistemas reguladores en el transcurso del desarrollo. Burg­
gren ha participado activamente en simposios, semanarios, y
actividades de divulgación. y formación de investigadores en
muchos p.aíses. Es coautor de The Euolution ofAir Breathinq i11
Vertebrales (Cambridge University Press, 1981). Desde 1980,
ha colaborado con frecuencia en algunas colecciones de Fisio­
logía, entre ellas Prosser's Comparatiue A ni mal Physiology
Fourth Edition (Wiley­Liss, 1991). Burggren es coeditor de E11-
vironme111a/ Physioíoqy o.f the Amphibia (University of Chicago
Press, 1992) y más recientemente de Deoelopment of Cardiouas-
cular Systems: Molecules to Orqanisms (Cambridge University
Press, 1997).
sistemas nerviosos de un amplio abanico de grupos de anima­
les, han conducido a Frcnch hasta su labor como coautora de
la presente edición de Fisiología Animal. El interés investiga­
dor de Frcnch, como Asociada Científica en la UCSD, se cen­
tra en el control del desarrollo neuronal, un tema que ha estu­
diado en varias especies de vertebrados, Su investigación
actual se centra en los acontecimientos celulares que contro­
lan la diferenciación de neuronas individuales de sanguijuela,
con especial énfasis en la fisiología celular de neuronas em­
brionarias y los efectos del contacto entre células. Ha sido
autora y coautora de numerosos artículos de revisión y traba­
jos publicados en revistas, entre ellas Journal of Neuroscience y
Journal o] Neurophysioloqy,
 . . . . .. . . . ................................ . . . . . ...... . . . . . . . . . .. . .... . . . . . . . . . . . . .

CONTENIDO ABREVIADO

. . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ... . . . .. . . . .. . .. . . . . . . . . . . . . . . ... . . . .. . . . .. ... . ...

. . __ ., t: l. PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA 1
l. EL ESTUDIO DE LA FISIOLOGÍA ANIMAL 3
2. MÉTODOS EXPERIMENTALES EN FISIOLOGÍA 17
3. MOLÉCULAS, ENERGÍA Y BIOSÍNTESIS 41
4. MEMBRANAS, CANALES Y TRANSPORTE 101

PARTE 11. PROCESOS FISIOLÓGICOS 137

5. BASES FÍSICAS DE LA FUNCIÓN NEURONAL 139
6. COMUNICACIÓN A LO LARGO DE Y ENTRE NEURONAS 177
7. SONDEANDO EL AMBIENTE 237
8. GLÁNDULAS: MECANISMOS Y COSTE DE LA SECRECIÓN 299
9. HORMONAS: REGULACIÓN Y ACCIÓN 329
10. MÚSCULOS Y MOVIMIENTO ANIMAL 381
l l. COMPORTAMIENTO: DESENCADENAMIENTO, PATRONES Y CONTROL 441

PARTE 111. INTEGRACIÓN DE, SISTEMAS FISIOLÓGICOS 505

12. CIRCULACIÓN 507
13. INTERCAMBIO DE GASES Y EQUILIBRIO ÁCIDO­BASE 563
14. EQUILIBRIO JÓNICO Y OSMÓTICO 623
15. ADQUISICIÓN DE ENERGÍA: ALIMENTACIÓN, DIGESTIÓN Y METABOLISMO 683
16. USO DE LA ENERGÍA: AFRONTANDO LOS DESAFÍOS DEL AMBIENTE 725

IX
 . . ..... . . .. . . . . ..... . . . . ... . . . ....... . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . ....... .

CONTENIDO

. . . . . . . . . . ... . . .......... . . . . . .. . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ... . . . . . . . . . . . .

Prefacio xix Ingeniería genética 21

Agradecimientos xxi TÉCNICAS CELULARES 24
Uso de microelcctrodos y micropipetas 24
Análisis estructural de células 26
PARTE l. , PRINCIPIOS DE Cultivo celular 30
FISIOLOGIA 1 ANÁLISIS BIOQUÍMICO 32
Midiendo la composición: ¿Qué hay? 32
CAPÍTULO 1. EL ESTUDIO DE LA Midiendo la concentración: ¿Cuánto hay? 35
FISIOLOGIA ANIMAL 3 EXPERIMENTOS CON ÓRGANOS AISLADOS Y
LAS SUBDISCIPLINAS DE LA FISIOLOGÍA SISTEMAS DE ÓRGANOS 36
ANIMAL 4 OBSERVANDO Y VALORANDO EL
¿POR QUÉ ESTUDIAR LA FISIOLOGÍA ANIMAL? 4 COMPORTAMIENTO ANIMAL 36
La curiosidad científica 4 La influencia de los experimentos de comportamiento 36
Aplicaciones agrícolas y comerciales 4 Métodos en la investigación del comportamiento 37
Percepción ampliada de la Fisiología Humana 4 LA IMPORTANCIA DEL ESTADO FISIOLÓGICO
TEMAS CAPITALES DE LA FISIOLOGÍA ANIMAL 5 E LA­l VESTIGACIÓN 38
Relaciones Estructura­Función 5 R5umen 39
Adaptación, ambientación y aclimatación 5 Preguntas de repaso 40
Homeosiasis 8 Lecturas recomendadas 40
Sistemas de retroalimentación 9
Conformismo y regu lación 9
BIBLIOGRAFÍA DE LAS ClENCJAS CAPÍTULO 3. MOLÉCULAS, ENERGÍA Y
FISIOLÓGICAS 10 BIOSÍNTESIS 41
DéST ACADO 1-1. EL CONCEPTO DE EL ORIGEN DE LAS MOLÉCULAS BIOQUÍMICAS
R F.TROALI M ENTACIÓN 13 CLAVE 41
LA EXPERIMENTACIÓN ANIMAL EN ÁTOMOS, ENLACES Y MOLÉCULAS 42
FISIOLOGÍA 14 LOS PAPELES ESPECIALES DEL H, O, N, Y C EN
Resumen 14 LOS PROCESOS VITALES 44
Preguntas de repaso 15 EL AGUA: UN SOLVENTE EXTRAORDINARIO 45
Lecturas recomendadas 15 La molécula de agua 46
Propiedades del agua 47
CAPÍTULO 2. MÉTODOS El agua como solvente 47
EXPERIMENTALES EN FISIOLOGÍA 17 PROPIEDADES DE LAS DISOLUCIONES 48
FORMULACIÓN Y ENSAYO DE HIPÓTESIS 17 Concentración, propiedades coligativas y actividad 48
El Principio de August Krogh 18 Ionización del agua 50
Diseño experimental y nivel fisiológico 18 Ácidos y bases 51
TÉCNICAS MOLECULARES 19 La importancia biológica del pH 52
Seguimiento de moléculas mediante radioisótopos 19 La ecuación de Hendcrson­Hasselbalch 53
Localización de moléculas con anticuerpos Sistemas tampón (amortiguadores) 53
monoclonales 20 Corriente eléctrica en disoluciones acuosas 54

XI
Xll CONTENIDO

DESTACADO 3·1 TERMINOLOGÍA ELÉCTRICA Y DESTACADO 4 2 MEMBRANAS ARTIFICIALES

CONVENCIONES 55 CON DOBLE CAPA 118
Unión de iones a macromoléculas 57 Transpone facilitado a través de las membranas 118
MOLÉCULAS BIOLÓGICAS 58 TRANSPORTE ACTIVO l 19
Lipidos 59 La bomba a ' /K • como modelo de transporte activo 119
Carbohidratos 60 Gradientes iónicos como fuente de energía celular 121
Proteínas 60 Transporte acoplado. 123
Ácidos nucleicos 66 SELECTIVIDAD DE LA MEMBRANA 124
ENERGÉTICA DE LA CÉLULA VIVA 66 Selectividad para los electrólitos 124
Energía: concepto y definiciones 68 Selectividad para los no electrólitos 125
Transferencia de energía por reacciones acopladas 71 ENDOCJTOSIS Y EXOCTTOSIS 126
ATP: el portador de energía de la célula 72 Mecanismos de cndociiosis 126
Temperatura y velocidad de reacción 74 Mecanismos de exocitosis 126
ENZIMAS: PROPIEDADES GEE\ERALES 76 UI\.IONES I Tl·RCELt;LARES 127
Especificidad enzimática y centros activos 76 Uniones hendidas 127
Mecanismos de catálisis enzimática 77 Uniones estrechas 129
Efecto de la temperatura y el pi I sobre las reacciones TRANSPORTF FPITELIAL 129
cn/imáticas 77 I'ransporte activo de sales a través del epitelio 130
Cofactores 77 Transporte de agua 132
Cinética enzimática 78 Resumen lJJ
Inhibición de enzimas 81 Preguntas de repaso 134
REGULACIÓN DE REACCIONES METABÓUCAS 82 Lecturas recomendadas 135
Control de la síntesis de enzimas 82
Control de la actividad enzimática 83
PRODUCCIÓN METABÓLICA DE ATP 85 PARTE ,11. PROCESOS
Oxidación, fosforilación y transferencia de energía 86 FISIOLOGICOS 137
G l ucól isis 91
Ciclo de los ácidos tricarboxilicos 94 CAPÍTULO 5. BASES FÍSICAS DE LA
Eficiencia del metabolismo energético 95 FUNCIÓN NEURONAL. 139
Deuda de oxigeno 96 VISIÓN GENERAL DE LA ESTRUCTURA.
Resumen 97 H,'.'ICIÓ Y ORGANIZACIÓN NEURONAL 139
Preguntas de repaso 98 Transmisión de señales en una neurona 141
Lecturas recomendadas 99 Transmisión de señales entre neuronas 142
Organización del sistema nervioso 142
CAPÍTULO 4. MEMBRANAS, CANALES Y EXCITACIÓ I Dí­ LA MEMBRANA 144
TRANSPORTE 101 Midiendo potenciales de membrana 144
ESTRUCTURA Y ORGANIZACIÓN DE LA Distinguiendo entre propiedades eléctricas pasivas y
MEMBRANA 102 activas de la membrana 147
Composición de la membrana 102 DE<; ACAD06· 1 E:L orSCUBRIMIENTO DE LA
Membranas de mosaico fluido 103 «ELECTRICIDAD ANIMAL» 46
DESTACADO 41 CL CASO DI LA MEMBRANA El papel de los canales iónicos 148
CON DOBLE CAPA LIPÍDICA 106 PROPIFDADES ELÉCTRICAS PASIV/\S OE LAS
Variación en la forma de la membrana 106 MEMBRA AS 149
ATRAVl2SAND0 LA MEMBRANA: UNA VISIÓN Resistencia y conductancia de la membrana 150
GENERAL 106 Capacitancia de la membrana 151
Difusión 107 POTENCIALES ELECTROQUÍMICOS 153
Flujo de membrana 107 La ecuación de Ncrnst: cálculo del potencial de
�mm� 100 cq uilibrio para irn ion 154
Osrnolaridad y tonicidad 110 DCSTACADO 5-2 UNA CONSIDERACIÓN
Influencias eléctricas en la distribución iónica 110 CUANTITATIVA DE LA SEPARACIÓN DE CARGAS
Equilibrio de Donnan 111 POR LAS MEMBRANAS 155
PROPIEDADES OSMÓTICAS DE LAS CÉLULAS 112 La ecuación de Goldman: cálculo del potencial de
Estado iónico estacionario 1 12 equilibrio para varios iones 155
Volumen celular l 13 EL POTENCIAL DE REPOSO 156
MOVIMIENTOS PASIVOS A TRAVÉS DE LA El papel de los gradientes iónicos y los canales 157
MEMBRANA 114 CI papel del transporte activo 157
Difusión simple a través de la bicapa lipídica l 15 POTENCIALES DE ACCIÓN 159
Difusión a través de canales de membrana 117 Propiedades generales de los potenciales de acción 159
 CONTENIDO X111

Base iónica del potencial de acción 161 CAPÍTULO 7. SONDEANDO

DESTACADO 5-3. EL MÉTODO DE FIJACIÓN DE EL AMBIENTE 237
VOLTAJE 165 PROPIEDADES GENERALES DE LA RECEPCIÓN
Cambios en la concentración iónica durante la SENSORIAL 238
cxci ración 171
Propiedades de las células receptoras 238
OTROS CANALES EXCITABLES Mecanismos y moléculas comunes de la transducción
ELÉCTRICAMENTE 173
sensorial 240
Resumen 174
De la transducción a la emisión de señales nerviosas 242
Preg"'1tas de repaso 175 Codificando la intensidad del estímulo 245
Lecturas recomendadas 175 Relaciones ele entrada­salida 246
Fraccionamiento de rango 247
Control de la sensibilidad sensorial 248
CAPÍTULO 6. COMUNICACIÓN A LO SENTIDOS QUÍMICOS: GUSTO Y OLFATO 253
LARGO DE Y ENTRE NEURONAS -, 177 Mecanismos de la recepción gustativa 254
TRANSMISIÓN DE SEÑALES EN EL SISTEMA Mecanismos de la recepción olfativa 257
NERVIOSO: UNA VISIÓN GENERAL 177 MECANORRECEPCIÓN 260
TRANSMISIÓN DE INFORMACJÓN DENTRO DE Células ciliadas 261
UNA MISMA NEURONA 179 Órganos del equilibrio 263
Propagación pasiva de las señales eléctricas 179 El oído de los vertebrados 264
Propagación de los potenciales de acción 181 Un oído del insecto 271
Vclocidad de propagación 184 ELECTRORRECEPCIÓN 271
Conducción saltatoria rápida en axones mielinizados 186 TERMORRECEPCIÓN 273
DESTACADO 6-1. SIGNOS EXTRACELULARES DE VISIÓN 274
LA CONDUCCIÓN DEL IMPULSO 186 Mecanismos ópticos: evolución y función 275
DESTACADO 6-2. DIÁMETRO DEL AXÓN Y Ojos compuestos 276
VELOCIDAD DE CONDUCCIÓN 188 DESTACADO 7-1. CORRELACIÓN ENTRE
TRANSMISIÓN DE 11 FORMACIÓN ENTRE FENÓMENOS SUBJETIVOS DE LA PERCEPCIÓN Y
NEURONAS: SINAPSIS 188 FOTORRESPUESTAS PRIMARIAS 279
Estructura y función sináptica: sinapsis eléctricas 190 El ojo de los vertebrados 280
Estructura y función sináptica: sinapsis quimicas 192 Fotorrcccpción: convirtiendo fotones en señales
Sinapsis químicas rápidas 194 neuronales 285
DESTACADO 6-3. AGENTES FARMACOLÓGICOS DESTACADO 7-2. EL ELECTRORRETINOGRAMA 263
ÚTILES EN EL ESTUDIO DE LA SINAPSIS 197
DESTACADO 6-4. CÁLCULO DEL POTENCIAL DE COLOR
­­
DESTACADO 7-3. LUZ, PINTURA Y VISIÓN DEL
291
INVERSION 201 LIMITACIONES EN LA RECEPCIÓN
LIBERACIÓN PRESI1 ÁPTICA DE SENSORIAL 293
NEUROTRANSMISORES 205 Resumen 295
Liberación cuántica de neurotransmisores 205 Preguntas de repaso 296
Acoplamiento despolarización­liberación 207 Lecturas recomendadas 296
Liberación sin potencial de acción 21 O
LA NATURALEZA QUÍMICA DE LOS
NEUROTRANSMISORES 210 CAPÍTULO 8. GLÁNDULAS: MECANISMOS
Neurotransmisión directa rápida 211 Y COSTE DE LA SECRECION 299
Ncurotransmisión indirecta lenta 212 SECRECIÓN CELULAR 299
MECANISMOS POSTSINÁPTICOS 216 Tipos y funciones de las secreciones 300
Receptores y canales en la neurotransmisión directa Secreciones superficiales: revestimiento celular y
rápida 216 mucus 301
Receptores en la neurotransrnisión indirecta lenta 220 DESTACADO 8-1. SUSTANCIAS CON
Ncuromodulación 221 ESTRUCTURAS Y FUNCIONES SIMILARES
INTEGRACIÓN EN LA SINAPSIS 224 SECRETADAS POR DIFERENTES. ORGANISMOS 302
PLASTICIDAD SINÁPTICA 228 Empaquetamiento y transporte del material de
Modulación homosináptica: facilitación 229 secreción 303
Modulación hornosináptica: potenciación postetánica 230 Almacenamiento de las sustancias de secreción 306
Modulación heterosináptica 231 Mecanismos de secreción 307
Potenciación a largo plazo 231 SECRECIONES GLANDULARES 308
Resumen 233 Tipos y propiedades generales de las glándulas 309
.Preguruas de repaso 234 Glándulas endocrinas 311
Lecturas recomendadas 235 Glándulas exocrinas 320
XIV CONTENIDO
. . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

COSTO ENERGÉTICO DE LA ACTIVIDAD Componentes elásticos en serie 407

GLANDULAR 324 Estado activo 408
Resumen 326 Contracción fásica y tetania 410
Preguntas de repaso 327 ENERGÉTICA DE LA CONTRACCIÓN
Lecturas recomendadas 327 MUSCULAR 410
Utilización de ATP por la miosín­ATPasa y la bomba
de calcio 41 O
CAPÍTULO 9. HORMONAS: REGULACIÓN Y Regeneración de ATP durante la actividad muscular 411
ACCIÓN 329 TIPOS DE FIBRAS EN LA MUSCULATURA
SISTEMAS ENDOCRCNOS: VNA VISIÓN ESQUELÉTICA DE LOS VERTEBRADOS 412
GENERAL 330 Clasificación de los tipos de fibras 412
Tipos químicos y funciones generales de las Base funcional de los diferente tipos de fibras 413
hormonas 330 ADAPTACIÓN DE LOS MÚSCULOS A
Regulación de la secreción hormonal 33:t ACTIVIDADES VARIADAS 415
SISTEMAS NEUROENDOCRINOS 332 Adaptación a la potencia: el salto de la rana 415
Control hipotalámico de la adenohipófisis 333 Diversidad funcional: la natación de los peces 418
Hormonas liberadas por la adenohipófisis 335 423
Adaptación a la velocidad: producción de sonidos
DESTACADO 9-1. HORMONAS PEPTÍDICAS 336 Músculos de gran potencia y alta frecuencia: músculos
Neurohormonas liberadas por la neurohipófisis 337 asincrónicos del vuelo 427
MECANISMOS CELULARES DE LA ACCIÓN CONTROL NERVIOSO DE LA CONTRACCIÓN
HORMONAL 338 MUSCULAR 429
Hormonas liposolubles y receptores Control motor en vertebrados 430
citoplasmáticos 340 Control motor en artrópodos 431
Hormonas Jipófobas y mensajeros intracelulares 342 MÚSCULO CARDÍACO 433
DESTACADO 9-2. AMPLIFICACIÓN MEDIANTE MÚSCULO LISO 435
CASCADAS ENZIMÁTICAS 346 Resumen 438
EFECTOS FISIOLÓGlCOS DE LAS HORMONAS 357 Preguntas de repaso 439
Hormonas del metabolismo y del desarrollo 357 Lecturas recomendadas 440
Hormonas que regulan el balance de agua y
electrólitos 366
Hormonas de la reproducción 367
Prosraglandinas 373 CAPÍTULO 11. COMPORTAMIENTO:
ACCIÓN HORJy.lONAL EN INVERTEBRADOS 373 DESENCADENAMIENTO, PATRONES Y
Resumen 377 CONTROL 441
Preguntas de repaso 379 DESTACADO 11-1 COMPORTAMIENTO EN
Lecturas recomendadas 380
ANIMALES CARENTES DE SISTEMA
NERVIOSO 443
CAPÍTULO 10. MÚSCULOS Y MOVIMIENTO EVOLUCIÓN DE LOS SISTEMAS NERVIOSOS 408
ANIMAL 381 ORGANIZA&IÓN .'
DEL SISTEMA NERVIOSO DE
BASE ESTRUCTURAL DE LA CONTRACClÓN LOS VERTEBRADOS 448
Principales divisiones del sistema nervioso central 449
MUSCULAR 381
El sistema nervioso autónomo 457
Subestructura de los miofilamentos 383
Contracción del sarcórnero: teoría de los filamentos COMPORTAMIENTO ANIMAL 459
deslizantes ''l? Conceptos básicos del comportamiento 461
Puentes cruzados y producción de fuerza J'7, Ejemplos de comportamiento 464
DESTACADO 10-1. DISPOSICIÓN EN SERIE Y EN PROPIEDADES DE LOS CIRCUITOS
PARALELO: GEOMETRÍA MUSCULAR 388 EURONALES 470
MECÁNICA DE LA CONTRACCIÓN MUSCULAR 393 Piezas del rompecabezas neuronal 471
Relación entre fuerza y velocidad de acortamiento 394 Redes sensoriales 474
DESTACADO 10-2. FIBRAS MUSCULARES DESTACADO 11-2. CURVAS DE AJUSTE: LA
AISLADAS 394 RESPUESTA DE UNA NEURONA FRENTE A LOS
Efecto de los puentes cruzados en la relación PARÁMETROS DE UN ESTIMULO 475
fuerza­velocidad 396 DESTACADO 11-3 ESPECIFICIDAD DE LAS
REGULACIÓN DE LA CONTRACCIÓN 397 CONEXIONES E INTERACCIONES NEURONALES 487
Redes motoras 493
Papel del calcio en la unión de los puentes cruzados 398
399 Resumen 501
Acoplamiento entre excitación y contracción
El ciclo de contracción­relajación 406 Preguntas de repaso 503
LA PRODUCCIÓN TRANSITORIA DE FUERZA 407 Lecturas recomendadas 503
 CONTENIDO XV
...............................................................................
,
Anatomía funcional del pulmón 584
PARTE 111. INTEGRACION DE
Circulación pulmonar 589
SISTEMAS FISIOLÓGICOS 505 DESlACADO 13-3. VOLÚMENES PULMONARES 588
Ventilación pulmonar 592
CAPÍTULO 12. CIRCULACIÓN 507 Surfactantcs pulmonares 596
PLAN GENERAL DEL SISTEMA CIRCULATORIO 507 Pérdidas de calor y agua por el pulmón 597
Sistemas circulatorios abiertos 508 Transferencia de gases en huevos de a ves 598
Sistemas circulatorios cerrados 509 Sistemas traqueales de insectos 599
EL CORAZÓN 510 TRANSFERENCIA DE GASES EN EL AGUA:
Actividad eléctrica cardijca 511 BRANQUIAS 601
Circulación coronaria 516 Flujo e intercambio de gases a través de las branquias 602
Propiedades mccán icas del corazón 516 Anatomía funcional de la branquia 603
DESTACADO 12-1. EL MECANISMO DI:: REGULACIÓN DE LA TRANSFERENCIA DE
fRANK-STARLING 517 GASES Y LA RESPIRACIÓN 605
El pericardio 520 Relaciones entre ventilación y perfusión 605
Corazones de vertebrados: morfología funcional Regulación nerviosa de la respiración 609
comparada 522 RESPUESTAS RESPIRATORIAS EN
HEMODINÁMICA 530 CONDICIONES EXTREMAS 613
Flujo turbulento y laminar 531 Niveles de oxígeno bajos (Hipoxia) 6J 3
Relación entre presión y flujo 532 Niveles de dióxido de carbono elevados
LA CIRCULACIÓN PERIFÉRICA 535 (Hipcrcapnia) 615
Sistema arterial 535 Buceo 61 S
Sistema venoso 541 Ejercicio 616
Capilares y rnicrocirculación 543 VEJIGA NATATORIA: ACUMULACIÓN �E
EL SISTEMA LINFÁTICO 547 OXÍGENO EN CONTRA DE FUERTES
CIRCULACIÓN Y RESPUESTA INMUNlTARIA 548 GRADIENTES 617
REGULAClÓN DE LA CIRCULACIÓN 549 La rete mirabile 618
Control central del sistema cardiovascular 549 Secreción de oxígeno 619
Control de la microcirculación 554 Resumen 621
RESPUESTA CARD!OVASCULAR EN Preguntas de repaso 622
CONDICIONES EXTREMAS 558 Lecturas recomendadas 622
Ejercicio 558
Buceo 559 CAPÍTULO 14. EQUILIBRIO IÓNICO Y
Hemorragia 560 OSMÓJ.ICO 623
Resumen 561 PROBLEMAS DE LA OSMORREGULACIÓN 623
Preguntas de repaso 562 INTERCAMBIO OBLIGATORlO DE IONES Y
Lecturas recomendadas 562 AGUA 627
Gradientes entre el animal y el ambiente 627
CAPÍTULO 13. INTERCAMBIO DE GASES Y Relación superficie/volumen 627
EQUILIBRIO ÁCIDO-BASE 563 Permeabilidad del tegumento 627
CONSIDERACIONES GENERALES 563 Alimentación, factores metabólicos y excreción 629
DES1ACADO 13-1. LOS EXPERIMENTOS Temperatura. ejercicio y res pi ración 630
INICIALES SOBRE INTERCAMBIO DE GASES EN OSMORREGULADORES Y
ANIMALES 564 OSMOCONFORMISTAS 633
OXÍGENO Y DIÓXIDO DE CARBONO EN LA OSMORREGULAC!ÓN EN AMBIENTE
SANGRE 566 ACUÁTICO Y TERRESTRE 634
Pigmentos respiratorios 567 Animales de respiración acuática 634
DESTACADO 13-2. LAS LEYES DE LOS GASES 565 Animales de respiración aérea 637
Transporte de oxígeno por la sangre 568 ÓRGANOS OSMOR.REGULADORES 640
Transporte de dióxido de carbono por la sangre 572 EL RIÑÓN DE MAMÍFERO 641
Transferencia de gases hacia y desde la sangre 573 Anatomía del riñón de mamífero 64]
REGULACIÓN DEL pH CORPORAL 577 Producción de orina 643
Producción y excreción de hidrogeniones 578 DESTACADO 14-1. ACLARAMIENTO RENAL 649
Distribución de hidrogeniones entre compartimientos 579 Regulación del pH por el riñón 655
Factores que afectan al pH intracelular 582 Mecanismo de concentración de la orina 657
Factores que afectan al pH corporal 582 DESTACADO 14-2. SISTEMAS CONTRÁCORRIENTE 659
TRANSFERENCJA DE GASES EN EL AIRE: Control de la reabsorción de agua 661
PULMONES Y OTROS SISTEMAS 583 RIÑONES DE OTROS VERTEBRADOS 662
XVI CONTENIDO

ÓRGANOS OSMORREGULADORES CAPÍTULO 16. USO DE LA ENERGÍA:

EXTRARRENALES DE VERTEBRADOS 663 AFRONTANDO LOS DESAFÍOS DEL
Glándulas de la sal 663 AMBIENTE 725
Branquias de peces 668 CONCEPTO DE METABOLISMO ENERGÉTICO 725
ÓRGANOS OSMORREGULADORES DE MEDIDA DE LA TASA METABÓLICA 726
INVERTEBRADOS 671 Tasas metabólicas basal y estándar 726
Sistemas de filtración y reabsorción 671 Alcance metabólico 727
Sistemas de secreción y reabsorción 673 Calorimetría directa 728
EXCRECIÓN DE PRODUCTOS NITROGENADOS 675 DESTACADO 16-1. UNIDADES DE ENERGÍA (O
Animales que excretan amoníaco (Amoniotélicos) 676 ¿CUÁNDO UNA CALORÍA NO ES UNA CALORÍA?) 729
Animales que excretan urea (Ureotélicos) 678 Calorimetría indirecta: medición a partir de la
Animales que excretan ácido úrico (Uricotélicos) 680 ingestión de alimento y la excreción de deshechos 728
Resumen 680 Medidas indirectas de la tasa metabólica 729
Prcgu ntas de repaso 681 Cociente respiratorio 731
Lecturas recomendadas 681 Almacenamiento ele energía 732
Acción dinámica específica 732
CAPÍTULO 15. ADQUISICIÓN DE ENERGÍA: TAMAÑO CORPORAL Y TASA METABÓLICA 733
ALIMENTACIÓN, DIGESTIÓN Y DESTACADO 16-2. EL NÚMERO DE REYNOLDS.
METABOLISMO 683 IMPLICACIONES EN ANIMALES GRANDES Y
TIPOS DE ALIMENTACIÓN 684 PEQUEÑOS 736
Absorción de alimento a través de la superficie TEMPERATURA Y ENERGÉTICA ANIMAL 738
oo�ral 684 Dependencia térmica de la tasa metabólica 738
Endocitosis 685 Determinantes del calor y la temperatura corporales 74 l
Alimentación por filtración 685 Clasificación térmica de los animales 744
Alimentación líquida 687 RELACIONES TÉRMICAS EN ECTOTERMOS 747
Retención de presas 687 Ectotermos en ambientes fríos y congelación 747
Herbívoros y ramoneadores 691 Ectotermos en climas templados y cálidos 748
VISIÓN GENERAL DE LOS SISTEMAS Beneficios y costes de la cctoterrnia: comparación con
DIGESTIVOS 691 la endotcrrnia 750
Tracto cefálico: recepción de alimento 693 RELACIONES TÉRMICAS EN HETEROTERMOS 751
Tracto anterior: conducción, almacenamiento y RELACIONF'.S TÉRM!CAS EN ENDOTERMOS 754
digestión 694 Mecanismos de regulación de la temperatura corporal 755
Tracto medio; digestión química y absorción 698 Regulación termostática de la temperatura corporal 762
Tracto posterior: absorción de iones y de agua y Fiebre 765
defecación 701 LETARGO: ESTADOS METABÓLICOS
Dinámica de la estructura del tubo digestivo ESPECIALES 768
Influencia de la dieta 702 Sueño 768
MOTILIDAD DEL TUBO DIGESTIVO 702 Torpor 769
Motilidad muscular y ciliar 702 Hibernacióa v sueño invernal 769
> -
Peristalsis 703 Estivación 770
Control de la motilidad 704 ENERGÉTICA DE LA LOCOMOCIÓN 771
SECRECIONES GASTROINTESTINALES 707 Tamaño corporal, velocidad y coste de la locomoción 771
Secreciones exocrinas del tubo digestivo 707 Factores ñsicos que afectan a la locomoción 772
Control de las secreciones digestivas 712 Locomoción acuática, aérea y terrestre 774
DESTACADO 15-1. COMPORTAMIENTO RITMOS CORPORALES Y ENERGÉTICA 778
CONDICIONADO EN LA ALIMENTACIÓN Y LA Ritmos circadianos 778
DIGESTIÓN 713 Ritmos endógenos o circadianot 780
ABSORCIÓN 716 Regulación térmica, metabolismo y ritmos biológicos 780
Captación de nutrientes en el intestino 716 ENERGÉTICA DE LA REPRODUCCIÓN 783
Transporte de nutrientes por la sangre 717 Patrones de aplicación de energía en la reproducción 784
Balance de agua y electrólitos en el tracto digestivo 718 El «precio» de la garnetogénesis 785
REQUERIMIENTOS NUTRITIVOS 720 El cuidado parental como coste energético de la
Balance energético 720 reproducción 785
Moléculas nutrientes 721 ENERGÍA, AMBIENTE Y EVOLUCIÓN 786
Resumen 723 Resumen 787
Preguntas de repaso 724 Preguntas de repaso 789
Lecturas recomendadas 724 Lecturas recomendadas 789
 CONTENIDO XVII

Apéndice l: Unidades SI 791 Referencias citadas R-1

Apéndice 2: Loqaritmos y exponenciales 792 Glosario G­1
Apéndice J: Conversiones, fórmulas, constantes físicas y Índice 1­ l
químicas y definiciones 793
. . . . . . . . ...........................
. . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . .. . .
an pasado cerca de diez años desde que se publicó
H por primera vez la tercera edición de Fisiología
Animal, escrita por Rogcr Eckert con la ayuda de David
Randall. Roger murió en 1986 mientras revisaba la ter­
cera edición, que fue finalizada por George Augustine y
David Randall. Ese libro estableció la base de la cuarta
edición, que se titula merecidamente Eckert Fisiología
Animal. Aunque esta nueva edición se ha revisado y reor­
ganizado ampliamente, se ha mantenido el enfoque, que
con éxito caracterizó las primeras ediciones: el uso de
ejemplos comparados para ilustrar principios generales,
apoyados a menudo por datos experimentales. Además,
hemos resaltado el principio de homeostasis y se han ac­
tualizado los aspectos celulares y moleculares. Se ha
conservado en esta edición un amplio espacio dedicado
a tejidos, órganos y sistemas. Los temas moleculares y
celulares se integran al principio del libro, así que se han
desarrollado hilos conductores comunes para explicar y
comparar las interacciones entre los sistemas fisiológi­
cos regulados que producen respuestas coortíinadas a
las alteraciones ambientales en una amplia variedad de
grupos animales. Los mecanismos y principios básicos
de la fisiología animal, y las adaptaciones de los anima­
les que les capacitan para existir en ambientes tan dife­
rentes, constituyen el tema central de este libro.
La diversidad y las adaptaciones de los varios millo­
nes de especies que forman el Reino Animal constituyen
un motivo de fascinación para aquellos que aman la Na­
turaleza. Una parte de este gozo se deriva de la observa­
ción del funcionamiento de los organismos animales. En
un principio podría· parecer que con tantos tipos de ani­
males adaptados a una gran variedad de ambientes y
estilos de vida, la tarea de entender y apreciar la fisiolo­
gía de los animales sería abrumadora. Afortunadamente
(para los científicos y también para los estudiantes), los
conceptos y principios que constituyen la base del cono­
cimiento de la función animal son relativamente escasos,
ya que la evolución ha sido conservadora a la vez que
innovadora.
. . . .................. . . . .. . .. .. . . . .. . ... ... .
PREFACIO
. . . . . . . . ...... . . . . . . .. . . . . . .. . . . . . . . .. . . ....... . . . . . .
Un curso de iniciación a la fisiología es un reto para el
profesor y el estudiante a causa de la naturaleza interdis­
ciplinaria de la materia, que integra a la química, la física
y la biología. La mayoría de los estudiantes están deseo­
sos de enfrentarse con la asignatura y de eonocer los ni­
veles más excitantes de la ciencia moderna. Por esta ra­
zón, este libro se ha organizado para presentar los temas
esenciales de una forma que permita a los estudiantes
revisarlo por su propia cuenta y continuar rápidamente
a considerar la función animal, y a comprender su diluci­
dación experimental.
Eckert Fisiología Animal desarrolla los principales
conceptos de una forma sencilla y directa, subrayando
los principios y mecanismos e ilustrando las estrategias
funcionales que han desarrollado los animales dentro de
los límites que las leyes físicas y químicas establecen. Se
hace hincapié en los principios comunes más que en las
excepciones. Se han seleccionado ejemplos del amplio
espectro de la vida animal, ilustrando conscientemente
similitudes entre los organismos; por ejemplo, compues­
tos similares están asociados con la reproducción tanto
en humanos como en levaduras. Por eso, los detalles
más esotéricos y periféricos reciben sólo una atención de
pasada, de forma que no interfieran con las ideas centra­
les. Hemos usado un estilo narrativo, describiendo los
experimentos para poder apreciar bien los métodos de
investigación, a la par que se presenta la información.
ORGANIZACIÓN DEL LIBRO
Por primera vez, los capítulos se han organizado en tres
partes, que creemos favorecerá una comprensión de los
animales como sistemas integrados en cada nivel de or­
ganización. Cada parte se introduce con una exposición
abierta que ofrece a los estudiantes una visión general
del bloque siguiente. La Parte T comprende cuatro capí­
tulos y trata de los principios centrales de la fisiologia,
La Parte U (Capítulos 5-11) se ocupa de los procesos
XIX
XX PREFACIO
fisiológicos, mientras que en la Parte III (Capítulos 12­16),
se discute cómo estos procesos básicos se integran en los
animales que viven en una variedad de ambientes. Los
16 Capítulos se han revisado ampliamente y reorganiza­
do para actualizarlos con los nuevos avances científicos.
NOVEDAÓES DE ESTA EDICIÓN
• Un nuevo capítulo de metodología (Capítulo 2) en la
Parte l, en el que se exponen e ilustran, junto con los
métodos tradicionales, algunas de las más recientes
técnicas moleculares.
• Este énfasis en el aspecto molecular continúa a lo lar­
go del libro; los Capítulos 5, 6 y 7, por ejemplo, están
actualizados con las percepciones recientes de las ba­
ses celulares y moleculares de la excitación de la mem­
brana, la transmisión sináptica y la transducción sen­
sorial.
• La Parte lI ofrece un nuevo capítulo (Capítulo 8,
Glándulas: Mecanismos y coste de la secreción), que
reúne información de un importante, aunque frecuen­
temente olvidado, sistema efector.
• En la Parte II, el Capítulo 11 (Comportamiento: De­
sencadenamiento, patrones y control) conserva y am­
plía las descripciones de los sistemas nerviosos de ver­
tebrados e invertebrados de las ediciones anteriores,
presentando una visión actualizada de la neurobiolo­
gía de sistemas, una de las áreas de la neurobiología
que más se ha desarrollado. Se introducen diversos
conceptos de neuroetología, que sirven de conexión
entre el estudio puro del comportamiento y el de la
función celular en el sistema nervioso, junto con ejem­
plos de importantes y recientes estudios neuroetoló­
gicos.
• La función del sistema nervioso en el mantenimiento
de la homeostasis, mediante la modulación de todos
los sistemas, se ha incorporado en la Parte III, que
avanza un poco más en el enfoque integrador del libro.
• A lo largo de la obra se subrayan las adaptaciones am­
bientales y los ejemplos específicos de las mismas
(como el balance hídrico de los elefantes marinos en el
Capítulo 14) ilustran los principios generales de la fi­
siología comparada.
• Algunos de los nuevos temas introducidos en esta edi­
ción incluyen una sección sobre la respuesta inmunita­
ria en el Capítulo 12 (Circulación), y una sección de
biorritmos en el Capítulo 13 (Uso de la energía: Afron­
tando los desafíos del ambiente).
PEDAGOGÍA
• Las ideas desarrolladas en el texto están apoyadas por
el uso abundante de ilustraciones y pies de figuras. El
color que se ha añadido a esta edición ha dado como
resultado un texto de alta calidad visual con la inten­
ción de motivar aún más a los estudiantes.
• Los Destacados proporcionan información en profun­
didad sobre los experimentos y personajes asociados
con avances importantes de la materia correspondien­
te, la deducción de algunas ecuaciones, o simplemente
la recopilación histórica de un tema en discusión.
• Las Preguntas de Repaso dentro del texto de los capí­
tulos (señaladas por el J) fomentan el aprendizaje ba­
sado en problemas y estimulan la discusión de diver­
sos aspectos de la materia presentada.
El estilq narrativo facilita la inclusión de ejemplos úti­
les e integradores para apoyar los principios, de modo
que mientras se presenta la información, se desarrolla la
temática de forma lógica y se presentan los métodos de
investigación. Las referencias bibliográficas dentro del
texto y en los pies de figura son discretas en número,
pero suficientemente frecuentes, para que los estudian­
tes puedan darse cuenta del papel de los científicos y de
sus publicaciones en el desarrollo de un tema. Como
ayuda pedagógica complementaria se incluyen térmi­
nos clave, que son explicados y resaltados en negrita la
primera vez que aparecen en el texto, y que están defini­
dos formalmente en un glosario útil y extenso. Al final
de cada capítulo, se incluye un resumen, que suministra
al estudiante una revisión rápida de los aspectos im­
portantes tratados en el ºcapítulo, unas Preguntas de
Repaso y una lista comentada de Lecturas Recomenda­
das. Los estudiantes encontrarán al final del libro los
recursos siguientes: Apéndices, que proporcionan in­
formación sobre unidades, ecuaciones y fórmulas; el
Glosario y una Bibliografía que incluye las citas com­
pletas de to.gas las referencias citadas en los capítulos.
Nuestro objetivo ha sido conseguir un tratamiento
equilibrado y actualizado de la función animal que se
caracteriza por su claridad de exposición. Esperamos
que los lectores de Eckert Fisiología Animal lo conside­
ren un libro valioso, y agradecemos sus posibles suge­
rencias y críticas constructivas.
Se pi iembre 1996 DA VID RANDALL
WARREN BURGGRE
KA THLEEN FRENCH
 AGRADECIMIENTOS
E ckert Fisioloqia A11i111al se ha beneficiado conside­
rablemente de las contribuciones de varias pcrso­
nas cuyos esfuerzos agradecemos enormemente. Ruscll
Fernald. de la Universidad de Stanford, participó en el
planteamiento y en la reorganización del libro y en la
revisión inicial de muchos de los capítulos. Lawrencc C.
Romc. de la Universidad de Pcnnsylvania, escribió el
borrador inicial del Capítulo 10 (Músculos y movimien­
to animal). que contenía la mayor parte del material ac-
tuali/ado, a excepción de las secciones sobre el músculo
cardíaco y liso, y el control neural. Harold Atwood, de la
Universidad de Toronlo, se implicó en algunas de las
discusiones iniciales de la revisión. Además, agradece­
mos todos los comentarios de asociados de todo el mun­
do. así como la revisión formal del texto realizada por
los siguientes colegas de todo el país:
Joscph Bastian, Unioersity of Oklahoma
Roben B. Barlow, Instiuu e for Sensory Research,
Svracuse Unirersity
Francisco Bezanilla, UCV. School of Medicine
Ccut er for the Health Sciences
Phi JI ip Browncll, Oreqon Stat e Unioersity
Richard Bruch, Louisiana Sta/e Unirersitv
Wayne W. Carley, National Association of Bioloqy
Teachers
Ingrith Deyrup­Olsen, Unicersity of Washington
Dale Erskine, Lebanon Va/ley Colleqe
A. Vcrdi Farrnanfarmaian, Rutqers Uniuersity
Roben Full, Unioersity of California at Berkeley
Car! Gans, Unitersity of Michiqan
Edwin R, GrifT. Unicersity of Cincinnati
Kimberly Hammond, Unioersity o.f California aL
Rirerside
David F. Hanes, Sonoma State Unicersity
M ichacl Hedrick, California Sta/e Unioersity=Hayward
James W. Hicks, Unioersity of California al Iroine
Sara M. Hicbcrt, Swarthmore Colleqe
William H. Karosov. University of Wisconsin at Madison
M a rk K onishi, California Institut e of Technoiooy
'
Bill Kristan, University of California at San Diego
Paul Lennard, Emorv Uniuersit y
Jon E. Levinc, Northwesteru Unicersity
Harvey B. Lillywhite, Unioersitv of Florida. Gainesiil!e
Duane R. McPherson, SUNY at Geneseo
Duncan S. MacKenzie, Texas A & M Uniuersity
Eric M undall, fallecido, Unicersity of California al
Los Angeles
Kcnneth Nagy, Uniuersity of California al Los Anqeles
Richard A. yhoff, Calcin Colleqe
Richard W. Olsen. UCV. Sc/100/ o.f Medicine
C. Leo Ortiz, Unioersity of California al Santa Cruz
Harry Pecry, Unioersity o{ Toro1110
J. Larry Renfro, Unicersity of Connecticut
Marc M. Roy, Beloit Colleqe
Roland­Roy, Brain Researcli Insiitute, UCLA School <d'
Medicine
Jonathon Scholey. Unicersity of California at Dauis
C. Eugene Scttle, Uniuersity of Arizona
M ichael P. Shcctz, Washington University School of
Medicine
G regory Snyder. Unioersity o.f Colorado at Boulder
Joc Henry Steinbach, Washington Unioersity School of
Medicine
Curt Swanson, Wayne State Unicersity
Malcolm H. Taylor, Uuioersity of Delaware Schoo! of
Liue and Health Sciences
Ulrich A. Walker. Col11111bia Unicersity-r Colleqe of
Physicia11s
Eric P. Widrnaier, Boston Uniuersity
Andrea H. Worthington, Siena Colleqe
Erncsr M. Wright, UCV. School ofMedicine=Center for
the Hea/1'1 Sciences
En último término, la sensatez y amabilidad de Kay
Ucno y Katc Ahr, nuestros editores, han mejorado mu­
cho el libro y han asegurado su publicación.
DAVID RA'JOALL
WARREN 8URGGREN
KATHLEEN fRENCH

. . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . .
.......................
PRINCIPIOS
DE FISIOLOGÍA
a Fisiología Animal estudia cómo funcionan los
L animales vivos. Tanto el guepardo corriendo tras
una gacela, como la serpiente de cascabel al atacar a una
rata del desierto coordinan características anatómicas
especializadas y procesos fisiológicos para capturar a
sus presas y, a su vez, eludir depredadores y prolongar la
vida. El zorro ártico de la portada de este libro 'posee un
espléndido abrigo de piel, a la vez que mecanismos fisio­
lógicos exquisitamente ajustados que le protegen del pe­
netrante frío ambiental. Hasta los animales que viven en
un ambiente aparentemente ideal, con temperaturas be­
nignas a lo largo de todo el año, abundantes recursos
alimenticios y ciclos día­noche regulares, se enfrentan a
desafíos. que incluyen las presiones de compartir su há­
bitat con individuos de su misma especie y de otras. La
necesidad de cubrir las demandas de la supervivencia ha
causado numerosas variaciones evolutivas del patrón
básico de la vida, y los ambientes en que la propia vida
se expresa son igualmente variados. Como resultado, los
fisiólogos animales disponen de una vasta combinación
de animales y ambientes en la que investigar cómo fun­
cionan los animales. (Actualmente existen algunos indi­
cios de que pudo haber vida sobre Marte, de modo que
los ambientes abiertos al estudio fisiológico pueden no
hallarse limitados al planeta Tierra.) Aun así, el extenso
PARTE
I
..... . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . ...... .. . . . . . . . . . . . . . . . .
. ....... . . . . . . . . . . . . ... .. . ..
abanico­de enfoques tecnológicos y filosóficos en el estu­
dio de la Fisiología Animal se basa en un número relati­
vamente pequeño de conceptos fundamentales, que se
presentan en la Parle J de este libro. Estos conceptos son
esenciales para la comprensión de los procesos fisiológi­
cos que son la base del comportamiento de depredado­
res como el guepardo y la serpiente de cascabel, y de los
mecanismos de control fisiológico que permiten a ani­
males, como Ja rata del desierto y el zorro ártico, mante­
ner condiciones corporales internas que les permiten so­
brevivir hasta en los ambientes más hostiles.
El Capitulo l explora los temas capitales de la Fisio­
logía Animal incluyendo la estrecha relación entre es­
tructura y función, los procesos de adaptación y aclima­
tación y el concepto de horneostasis y su mantenimiento
mediante sistemas de control por retroalimentación.
En ciencia, todo conocimiento se basa en experimen­
tos; por consiguiente, en el Capítulo 2 discutimos la na­
turaleza de la experimentación y las diferentes perspec­
tivas que los fisiólogos animales adoptan en el diseño
de hipótesis y en su comprobación. Describimos breve­
mente algunos de los principales métodos experimenta­
les usados actualmente por los fisiólogos, incluyendo
las nuevas técnicas moleculares que evolucionan rápi­
damente.
2 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
...............................................................................
Desde su inicio, la Fisiología se ha fundamentado en
la Física y la Química, por tanto, en el Capítulo 3 se
revisan los principios ñsícos y químicos elementales en
los que se fundamentan los mecanismos fisiológicos dis­
cutidos en el resto del libro. Este capítulo se centra parti­
cularmente en los procesos del metabolismo, las reaccio­
nes bioquímicas que son la base de todos los procesos
fisiológicos. Las membranas que envuelven a las células
y sus orgánulos internos proporcionan un importante
ejemplo de cómo se combinan los mecanismos Iisicos y
químicos en las células vivas para generar los procesos
vitales, En el Capítulo 4 investigamos la naturaleza de
las membranas celulares. Ponemos especial atención en
este capítulo en cómo la membrana celular colabora en
la estabilidad del medio interno de la célula. Se trata en
detalle el transporte activo de materiales a través de las
membranas celulares, ya que este fenómeno es crucial
para numerosos procesos fisiológicos tan diversos
como la conducción del impulso nervioso, la regula­
ción de los líquidos corporales o la captación de nu­
trientes, todos ellos estudiados en secciones posterio­
res. En las Partes Il y III de este libro se discute cómo
la combinación de procesos fundamentales a nivel bio­
químico, molecular y celular, da lugar a una regulación
integrada de los sistemas fisiológicos en todo el cuerpo
del animal.
. . . . . . . . .......... . . . . . . . . . . . . . . . .. . . .. . . ........... . . . ................... . . . . .

CAPÍTULO

1
EL ESTUDIO
DE LA FISIOLOGÍA ANIMAL
. . . . . . . .. . . . .. . . . ...... . . . . . . . . .. . . . .. . . . . ... . . . . . . . . . . . . . . . . ..................

L a Fisiología Animal se ocupa de la función de los te de su pelaje; y muchas otras variables fisiológicas y
tejidos, órganos y sistemas de órganos de los ani­ anatómicas. Este planteamiento integrador aparta a la
males pluricelulares. El fisiólogo animal intenta com­ fisiología de otras ciencias, añadiéndole complejidad a la
prender, en términos físicos y químicos, los mecanismos vez que fascinación.
que operan en los animales vivos a todos los niveles, des­ La Fisiología está firmemente enraizada en las leyes y
de el subcelular hasta el organismo integrado. Compren­ conceptos de la química y la física. Una adecuada for­
der como funcionan los animales requiere un conoci­ mación en estas disciplinas ayudará enormemente a
miento detallado de las interacciones moleculares que aprender y comprender la Fisiología Animal. Considé­
ofrecen el escenario para los procesos celulares. Dotados rense las siguientes leyes y conceptos físico­químicos que
de este conocimiento, los fisiólogos animales diseñan ex­ relacionan varios procesos fisiológicos:
perimentos y comprueban hipótesis para aprender acer­ • Ley de Ohm: presión y flujo sanguíneo; corrientes
ca del control y la regulación de los procesos en grupos iónicas; capacitancia de membrana.
de células, y también cómo afecta la actividad conjunta • Leyes de los gases perfectos y de Boyle: respiración.
de estos grupos celulares a la función global del animal. • Gravedad:
Las actividades coordinadas de las células, agrupadas en -� flujo sanguíneo.
• Energía cinética y potencial: contracción muscular;
órganos especializados, proporcionan la base para las movimientos torácicos durante la respiración.
capacidades de conducta y los procesos fisiológicos que • Inercia, momento, velocidad y resistencia al avance:
diferencian a los animales de las plantas. Estas caracte­ locomoción animal.
rísticas distintivas incluyen el movimiento, la indepen­
dencia relativa de las condiciones ambientales, í.111a sofis­ Éstos son sólo unos pocos de los numerosos concep­
ticada información sensorial acerca del mundo' que les tos y leyes químicas y físicas que se usarán a lo largo de
rodea y complejas interacciones sociales, por destacar este libro.
unas pocas. Los principios de la evolución ­selección natural y
Por encima de todo, la Fisiología Animal es una cien- especiación­ subyacen en la fisiología animal, del mis­
cia integradora. Los fisiólogos examinan e intentan com­ mo modo que en cualquier otra área de las ciencias de la
prender cómo los sistemas fisiológicos clasifican y dife­ vida. Por ejemplo, la selección natural ha determinado
rencian (normalmente en el sistema nervioso central) las que los enzimas de mamíferos y aves presenten toleran­
ingentes cantidades de información que típicamente re­ cia a una temperatura corporal elevada; al uso de bran­
cibe un animal tanto desde el medio interno como del quias modificadas para la respiración aérea en cangrejos
ambiente. Por ejemplo, el aparentemente sencillo caso terrestres, y a la tolerancia del salmón frente al agua dul­
de un mamífero que mantiene una temperatura corporal ce y la marina durante su migración. La combinación de
estable, requiere un sistema cerebral de control térmico todas las adaptaciones fisiológicas posibles a todos los
para integrar la información de multitud de factores que ambientes distintos disponibles en más de un millón de
afectan a la temperatura corporal: las ganancias o pérdi­ especies animales descritas es asombrosa. La historia de
das de calor frente al ambiente externo; la tasa de pro­ la fisiología animal es rica en el estudio de adaptaciones
ducción de calor por tejidos metabólicamente activos; el de especies individuales a las demandas y limitaciones de
transporte de calor asociado al flujo sanguíneo desde el un ambiente particular; tales estudios han producido
centro del cuerpo a la periferia; la contribución del en­ una gran «matriz de conocimiento» de ambientes y
friamiento por evapotranspiración; la naturaleza aislan­ adaptaciones. Sin embargo, más recientemente, los fisió­

3
 4 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
.............................. -
logos animales se esfuerzan por identificar patrones en
esta serie impresionante de datos fisiológicos, incorpo­
rando nuevas y potentes herramientas de la biología
evolutiva y la biología molecular en sus estudios. Uno
de los objetivos fundamentales de este libro es describir
los patrones generales en la fisiología animal, si bien uti­
lizaremos ejemplos específicos para ilustrar los princi­
pios fisiológicos.
LAS SUBDISCIPLINAS
DE LA FISIOLOGÍA ANIMAL
La disciplina global de la fisiología animal comprende
varias importantes subdisciplinas o campos. La fisiolo­
gía comparada abarca el área de la fisiología que utiliza
la comparación entre especies para discriminar patrones
fisiológicos y evolutivos; este «enfoque comparado» se
describe más adelante. También se utiliza normalmente
para referirse a estudios fisiológicos en animales distin­
tos de los que típicamente se utilizan en la investigación
de la fisiología médica (p. ej., ratas, ratones, gatos, cone­
jos). Así, un fisiólogo que trabaje en la función renal de
la rata quizá no se considere asi mismo como un fisiólo­
go comparado, mientras que quien trabaje en la función
renal del armadillo o la trucha sí podría escoger esta
denominación. La fisiología ambiental examina a los
animales en el contexto del medio ambiente en el que
habitan. La fisiología animal se concentra en las adapta­
ciones .evolutivas (p. ej., el grueso pelaje de los animales
árticos, el elevado volumen sanguíneo de las focas bu­
ceadoras, la cutícula impermeable de las cucarachas) a
ambientes que pueden oscilar entre benignos hasta ex­
tremadamente hostiles, La fisiología evolutiva, relativa­
.mente reciente en el bloque de la fisiología, utiliza méto­
dos. y técnicas de la biología evolutiva y la sistemática
(p. ej., la construcción de árboles taxonómicos o clade­
gramas) para comprender la evolución de los animales
desde un punto de vista fisiológico utilizando caracte­
res fisiológicos (p. ej., el mantenimiento de la tempera­
tura corporal constante) en lugar de caracteres anató­
micos (p. ej., plumas).
¿POR.QUÉ ESTUDIAR FISIOLOGÍA
ANIMAL?
El estudio de la fisiología animal puede reconocerse
ya en los· primeros textos de antiguas civilizaciones.
Aristóteles describió el ritmo del latido cardiaco du­
rante el desarrollo de un embrión de pollo. Los quími­
cos renacentistas europeos examinaron con frecuencia
el metabolismo de animales y plantas para compren­
der las· reacciones de producción y consumo de oxíge­
no.' Son varias las razones que justifican la gran fascina­
ción que la fisiología animal ha ejercido a lo largo de
milenios.
­ .
La curiosidad científica
Como base de todo estudio en fisiología animal, incluso
en los diseñados con propósitos muy prácticos y aplica­
dos, se halla la curiosidad por saber cómo funcionan los
animales.
¿Cómo puede un colibrí hacer latir su corazón 20 veces
en un segundo durante su vuelo estacionario?
¿ Cómo ven los insectos en la banda ultravioleta?
¿ Cómo sobrevive la rata canguro en el desierto sin ac-
ceso al agua de bebida?
Tales cuestiones alimentan la curiosidad de los fisiólo­
gos animales. No hay límites a esta curiosidad, la opi­
nión general entre los fisiólogos animales es que cuanto
más aprendemos, más nos damos cuenta de lo poco que
conocemos de los sistemas fisiológicos de los animales.
Aplicaciones comerciales y agrícolas
La fisiología animal ha proporcionado conocimientos
básicos para realizar avances comerciales y agrícolas du­
rante las últimas décadas. Los veterinarios, por ejemplo,
pueden ofrecer ahora cuidados clínicos que en muchos
casos rivalizan con el tratamiento médico disponible
para los seres humanos. Los granjeros han sido capaces
de mejorar la calidad y la producción de leche, huevos y
carne, y ya se ha generalizado el uso de la inseminación
artificial, entre las mejoras técnicas en la cría de animales.
Percepción ampliada
de la Fisiología Humana
Finalmente, Ja fisiología animal puede enseñarnos mu­
cho acerca de los procesos fisiológicos en el ser humano.
Esto no puede sorprendernos, pues los humanos com­
parten con otras especies animales: a) los mismos proce­
sos biológicos fundamentales, que en su totalidad deno­
minamos «vida»; b) un conjunto común de leyes físicas y
químicas; e) los mismos principios y mecanismos de la
genética mendeliana y molecular, y d) una historia evo­
lutiva muy vinculada. Así, el latido del corazón en un
cuerpo humano es el resultado de mecanismos fisiológi­
cos que no difieren fundamentalmente de los que subya­
cen en la función cardíaca de peces, ranas, serpientes,
aves o monos. Igualmente los fenómenos moleculares
que producen un impulso eléctrico en el cerebro huma­
no son los mismos que producen un impulso en el siste­
ma nervioso de un calamar, un cangrejo o una rata. Por
estas razones, la fisiología animal ha realizado innume­
rables contribuciones al conocimiento de la fisiología
humana. De hecho, la mayor parte de lo que hemos
aprendido sobre las funciones de células, tejidos y órga­
nos humanos se conoció primero (o se conoce sólo aún)
 EL ESTUDIO DE LA FISIOLOGÍA ANIMAL 5
...............................................................................
a través de estudios en diferentes especies animales de
vertebrados e invertebrados.
La fisiología animal, por su aplicación al cuerpo hu­
mano, es la piedra angular de la práctica médica científi­
ca. La comprensión del funcionamiento y las disfuncio­
nes de los tejidos vivos proporciona los cimientos para el
desarrollo efectivo de tratamientos científicamente fun­
dados de las enfermedades humanas. Las contribuciones
de la fisiología animal a la medicina han aumentado
enormemente mediante nuevas técnicas basadas en la
creación de modelos animales exclusivos para .enferme­
dades humanas específicas (p. ej., ratones diabéticos, ra­
tas con obesidad congénita, embriones de tilapia con de­
fectos cardíacos) estos modelos facilitan un amplio
rango de experimentos que hasta hace poco eran impen­
sables. Las perspectivas proporcionadas por tales mode­
los animales articulan una comprensión fundamental de
los procesos fisiológicos subyacentes. Un investigador
médico y clínico que comprenda la fisiología animal, con
sus potenciales contribuciones y limitaciones, está mejor
preparado para realizar un uso inteligente y perspicaz de
la información proporcionada por tales modelos.
TEMAS CAPITALES DE LA FISIOLOGÍA
ANIMAL
Nuestros objetivos en este libro son explorar los proce­
sos fisiológicos básicos para todos los grupos animales y
mostrar cómo la presión selectiva los ha ido modelando
durante la evolución. Comparar y contrastar el modo en
que diferentes organismos se han adaptado para sobre­
vivir frente a similares retos ambientales proporciona
una mejor comprensión de los patrones de la evolución
fisiológica y del valor adaptativo de los procesos fisioló­
gicos. Al estudiar la fisiología animal y las adaptacio­
nes fisiológicas aparecen varios dogmas básicos, o
grandes temas, que emergen de forma recurrente. Dis­
cutiremos aquí brevemente algunos de ellos, mientras
que otros resultarán evidentes a lo largo de los siguien­
tes capítulos.
Relaciones estructura-función
La función se basa en la estructura. Podemos ilustrar este
principio central de la fisiología animal con un ejemplo
que nos resultará familiar. Una rana salta sobre una
mosca que pasa delante de ella, contrayendo los poten·
tes músculos esqueléticos que están unidos a los huesos
de sus patas traseras. Una vez que se ha tragado la mos­
ca, las lentas contracciones del músculo liso del estóma­
go de la rana mezclan su contenido. Los nutrientes deri­
vados de la digestión de la mosca son absorbidos por la
sangre, donde la energía proporcionada por el latido re­
gular del músculo cardíaco del corazón impulsa a la san­
gre hacia todo el cuerpo. A través de este acontecimiento
cotidiano en la vida de una rana, podemos ver cómo tres
'
formas musculares estructuralmente distintas llevan a
cabo tres funciones también distintas. Tales relaciones
entre la estructura del tejido y su función no se dan sólo
en elmúsculo sino también en otros tejidos (p. ej., hueso,
epitelios, tejido glandular), de hecho, f.:11 cada tejido del
cuerpo de un animal. ·
Puede 'demostrarse que la función depende de .Ja es­
tructura a todos los· niveles de la organización biológica.
Como se muestra en la Figura 1­1, las relaciones entre
estructura y función resultan claramente evidentes al ni­
vel moleculardel tejido muscular. En efecto, la maquina­
ria contráctil del músculo esquelético es uno de los ejem­
plos más profundamente estudiados de la dependencia
estructural de la función a nivel molecular y bioquímico.
Como estudiaremos en el Capítulo 10, el movimiento de
la pata de la rana es la culminación de una cadena dé
acontecimientos bioquímicos que dependen de forma
crítica de la interacción entre millares de estructuras fila­
. mentosas compuestas por las proteínas contráctiles acti­
na y rniosina que se hallan en el interior de cada célula
muscular. Cada una de estas proteínas presenta una es­
tructura molecular que le permite una interacción tem­
poral, de modo que una proteína se mueve con respecto
a la otra. Estos movimientos de las proteínas causan la
contracción (acortamiento) de las células musculares in-
dividuales que se hayan activado. Considerando los mi­
llares de células musculares que forman cada uno de los
músculos de la pata, la contracción de la célula muscular
provoca el acortamiento global del músculo de la pata.
A causa de la relación estructural entre el potente
músculo en contracción y los largos huesos de la pata de
la rana, el acortamiento muscular mueve la pata. Esto
produce un movimiento de salto, causando el desplaza­
miento de todo el cuerpo de la rana.
El principio de que la función depende de la estructu­
ra resulta cierto en toda la gama de procesos fisiológi­
cos. Efectivamente, veremos que la consideración de las
relaciones entre estructura y función es prácticamente
inevitable en cada uno de los procesos fisiológicos exa­
minados en este libro.
Adaptación, ambientación y aclimatación
Por lo general, la fisiología de un animal está muy bien
sintonizada al ambiente que éste ocupa, asegurando de
esta manera su supervivencia, La evolución por selec­
ción natural constituye la explicación generalmente
aceptada de esta condición, denominada adaptación. La
adaptación ocurre de forma extremadamente lenta en
una especie, a través de millares de generaciones y gene­
ralmente, es un proceso irreversible. La adaptación se
confunde frecuentemente con otros dos procesos, la am­
bientación y la aclimatación .. La ambientación es un
cambio fisiológico, bioquímico o anatómico en un indi­
viduo, como resultado de la exposición­crónica del ani­
mal a una nueva condición ambiental causada por una
alteración de su ambiente natural. La aclimatación es el
6 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
. . . .. .. . . . . . . . . . . . . . . . ..... . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ... . . . . . . . . . . . . . . . .

Nivel de
organismo

Nivel de
sistema de

Niveles de
órganos y
de tejidos

Fibra muscular
esquelética

Nivel
celular

Modelo de los filamentos deslizantes de la contracción muscular

Nivel macromolecular

de actina

Nivel Molécula de miosina

molec�lar

Figura 1·1. (A Is izquierda) La función depende de la estructura
en todos los niveles de la organización biológica. La función bio-
lógica, en cada uno de los niveles de organización, depende de la
estructura de tal nivel, incluso en los tamaños microscópicos.
Empezando por el animal entero, este principio puede seguirse
desde sistemas fisiológicos estructuralmente complejos, pasan-
do por las células, hasta llegar a los ensamblajes de macromolé-
culas. En el presente ejemplo, las docenas de sistemas muscula-
res de la rana adulta le permiten mover sus ojos, tragar, saltar y
desarrollar todas las numerosas actividades que las ranas reali-
zan. Algunos grupos de músculos esqueléticos forman un siste-
ma que mueve la pata de la rana. Los propios músculos están
compuestos por células musculares, que, a su vez, están forma·
das por millares de ensamblajes macromoleculares constituidos
por un par de proteínas contráctiles, la actina y la miosina. Tales
ensamblajes de macromoléculas forman la unidad básica para la
contracción muscular.
mismo proceso de ambientación, sólo que los cambios
son inducidos experimentalmente por el investigador, ya
sea en condiciones de laboratorio o de campo.
Generalmente, tanto la aclimatación como la ambien­
tación son procesos reversibles. Por ejemplo, si un ani­
mal migra voluntariamente desde un valle hasta las la­
deras altas de una gran montaña (un cambio voluntario
del ambiente natural), típicamente su ventilación pulmo­
nar se verá incrementada inicialmente para adquirir el
oxígeno adecuado. Sin embargo, al cabo de unos pocos
días o semanas la ventilación pulmonar comienza a dis­
minuir hacia los valores que tenía al nivel del mar, mien­
tras empiezan a operar otros mecanismos fisiológicos
que facilitan el intercambio de gases a gran altitud. Tras
varios días este animal se dice que se ha ambientado a las
nuevas condiciones de gran altitud. Sin embargo si un
fisiólogo animal coloca al mismo animal en una cámara
hipobárica, simulando de esta manera unas condiciones
de gran altitud, el animal se habrá aclimatado a las con­
diciones experimentales en unos pocos días. Compare­
mos estas respuestas a corto plazo con el ánsar indio que
es capaz de sobrevolar las cimas del monte Everest, Esta
especie se ha adaptado a la gran altitud a causa de la
selección natural.
Hasta aproximadamente el último decenio, los fisiólo­
gos animales actuaban asumiendo que los animales se
hallan adaptados óptimamente y que cada uno de los
procesos fisiológicos observados estaban perfeccionados
al límite para asegurar la supervivencia del animal. Apo­
yados en las observaciones y teorías desarrolladas por los
biólogos evolucionistas, los fisiólogos animales están aho­
ra convencidos de que si bien la evolución natural condu­
ce a cambios en los procesos fisiológicos, muchos de ellos,
aunque son suficientes para asegurar la supervivencia del
animal, no están necesariamente ajustados con perfección
a su tarea. Por ejemplo, los mamíferos controlan típica­
mente su temperatura corporal entre 1­2 ºC. Dada la pre­
cisión de algunos sistemas fisiológicos de control actual­
mente bien conocidos, es concebible que podría existir un
sistema de control térmico bastante más preciso, pero no
ha sido fijado así por la selección. Es decir, que un rango
de oscilación de temperatura de 1­2 ºCes tolerable y ya
resulta suficiente para la supervivencia.
EL ESTUDIO DE LA FISIOLQGÍA. MltMAL
. . . . .. . . . . . . .. . . ... . ......... . ...
Claramente, la adaptación es un concepto centra] de
la fisiología animal, pero establecer si alguna caracterís­
tica de un animal tiene realmente valor adaptativo pue­
de ser dificil en la práctica. Un proceso fisiológico es
adaptativo si se presenta con una elevada frecuencia en
la población porque ofrece una mayor probabilidad de
supervivencia y reproducción que los estados alternati­
vos. La prueba definitiva del valor adaptativo de un pro­
ceso fisiológico puede ser difícil de obtener, pero un en­
foque comparado puede proporcionar pruebas que
apoyen el valor adaptativo de un proceso. En este tipo
de enfoque, el investigador examina un proceso fisiológi­
co en especies distantes que vivan en ambientes idénticos
o en especies estrechamente relacionadas que vivan en
ambientes notablemente distintos o en ambas situaciones.
Un proceso fisiológico similar, basado en una estruc­
tura anatómica semejante que se presente en varias espe­
cies animales poco relacionadas, pero que ocupen un
mismo ambiente, sugiere que tal combinación de estruc­
tura­proceso es adaptativa. Tales estudios comparados
son­más potentes si se combinan con el examen de espe­
cies estrechamente relacionadas en diferentes ambientes.
Un clásico ejemplo de la potencia de este enfoque invo­
lucra a la llama y su pariente cercano el camello. Origi­
nariamente, los investigadores estaban convencidos de
que la inusualmente alta afinidad de la sangre de la lla­
ma hacia el oxígeno era una adaptación al aire enrareci­
do de las grandes altitudes a las que viven las llamas.
Para su sorpresa, los fisiólogos animales descubrieron
que los camellos, que viven a baja altitud, también tie­
nen una elevada afinidad sanguínea. Así pues, la elevada
afinidad por el oxígeno de la sangre de la llama no es una
adaptación específica a la gran altitud. Es decir, las ca­
racterísticas de la sangre de llamas y camelios no guarda
relación con la altitud a la que viven, pero tiene mucho
que ver con su pertenenciaa la familia de los camélidos.
Se acepta comúnmente este criterio indirecto sobre el
valor adaptativo de un aspecto fisiológico particular, es­
pecialmente cuando se encuadra en un estudio compara­
tivo cuidadosamente diseñado.
Las adaptaciones fisiológicas y anatómicas al ambien­
te tienen una base genética, pasan de generación en ge­
neración y son constantemente moldeadas y sostenidas
por la selección natural. Los animales heredan esta in­
8 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
.... ­
formación genética de sus padres en forma de moléculas
de ácido desoxirribonucleico (ADN). Pueden ocurrir alte­
raciones espontáneas (mutaciones) en la secuencia de nu­
cleótidos del ADN, que son potencialmente causa de
cambios en las propiedades de los ácidos ribonucleicos
(ARN) o en las proteínas codificadas. Las mutaciones en
el ADN de células germinatívas que incrementan la su­
pervivencia de los organismos, y por ende, sus posibili­
dades de reproducirse, son conservadas por selección e
incrementan su frecuencia: en la población de organis­
mos a lo largo del tiempo. Al revés, aquellas mutaciones
que empeoran la adaptación de los organismos a su am­
biente, reducirán sus posibilidades de reproducción; y si
son suficientemente perjudiciales, tales mutaciones gene­
ralmente se eliminan con el tiempo. Una pequeña pro­
porción de mutaciones «neutras» no parecen mejorar ni
empeorar las posibilidades de supervivencia.
El material genético en forma de ADN pasa de un me­
tazoo progenitor a su descendencia. Este ADN lo con­
tiene una línea de células germinales que, en cada gene­
ración, se derivan directamente de las células germinales
paternas, creando así un linaje.ininterrumpido. El proce­
so ciego y no dirigido de la evolución se centra en la
supervivencia del ADN de esta línea germinal, puesto
que la información que éste codifica, defíne a las especies
y la incapacidad para reproducir esta información gené­
tica conduce a la extinción irreversible e inmediata de la
especie. Desde un punto de vista biológico, el objetivo
principal en la vida de un animal es reproducir y propa­
gar $U ADN, y todo su comportamiento, procesos fisio­
lógicos y estructuras anatómicas están en último térmi­
no al servicio de la supervivencia de la línea germinal. La
adaptación a.las limitaciones y demandas del ambiente
se aprecia y comprende mejor en este contexto de la lu­
cha de un animal para mantener y reproducir su ADN.
Homeostasis
A pesar del hecho de que la mayor parte de los animales
parecen vivir confortablemente en su ambiente, la mayo­
ría de hábitat son realmente bastante hostiles para las
células animales. Para la mayor parte de animales acuá­
ticos, por ejemplo, -el agua que les rodea es más diluida
(agua dulce) o más salada (agua de mar) que sus propios
líquidos corporales. Tanto los animales acuáticos como
los terrestres pueden vivir en ambientes que son dema­
siado cálidos o demasiado fríos. Más aún, con sólo unas
pocas excepciones (p. ej, las profundidades abisales de
los océanos) la mayor parte de ambientes se caracterizan
por sufrir, como mínimo, pequeñas fluctuaciones en sus
propiedades físicas y químicas (especialmente la tempe­
ratura). Los violentos cambios ambientales en el exte­
rior del animal podrían suponer una importante fuerza
destructiva para el medio intracelular, los tejidos y la
función de los órganos, si no fuese porque los sistemas
fisiológicos de control están dirigidos hacia el manteni­
miento de condiciones relativamente estables en los teji-
- - - - - .
dos corporales del animal. Esta tendencia de los organis­
mos a mantener una relativa estabilidad interna se deno­
mina hoJUeostasis.
Claude Bernard, investigador francés del siglo pasado
y pionero de ]a fisiología moderna, fue el primero en
reconocer la importancia para la función animal del
mantenimiento de la estabilidad en el milieu intérieur o
medio interno. Bemard señaló la capacidad de los ma­
míferos para regular las condiciones de su ambiente in­
terno dentro de unos estrechos límites. Esta capacidad
es familiar para la mayoría de nosotros por la medida de
nuestra temperatura corporal, que en individuos sanos
se mantiene con un grado de desviación respecto a
37 ºC. Las células de nuestro propio cuerpo experimen­
tan un ambiente relativamente constante no sólo respec­
to a la temperatura, sino también a la concentración de
glucosa, el pH, la presión osmótica, la tensión de oxíge­
no, las concentraciones iónicas y así sucesivamente. Ber­
nard (1872) concluyó que «la constancia del medio inter­
no es la condición para la vida libre», argumentando
que la capacidad de los animales para sobrevivir en am­
bientes a menudo difíciles y variables refleja directamen­
te su capacidad para mantener un ambiente interno es­
table. A principios de este siglo, Walter Cannon amplió
el concepto de Bernard de la constancia interna a la fun­
ción y organización de células, tejidos y órganos. Fue
Cannon (1929) quien acuñó el término de homeostasis
para describir la tendencia a la estabilidad interna, y sus
investigaciones sobre cómo los sistemas fisiológicos
mantienen la homeostasis Je supusieron el Premio No­
bel (véase el Capítulo 9).
La horneostasis, uno de los conceptos más influyentes
en la historia de la biología, proporciona un marco con­
ceptual en el que interpretar un amplio rango de datos
fisiológicos. Este fenómeno es de alcance prácticamente
universal en los sistemas vivos, permitiendo a los anima­
les y a las plantas sobrevivir en ambientes hostiles y va­
riables (Fig. 1­2), Se cree que la evolución de la homeos­
tasis y de los sistemas fisiológicos que la mantienen han
sido los factores esenciales que han permitido a los ani­
males aventurarse, desde ambientes fisiológicamente fa­
vorables, a invadir ambientes hostiles al proceso vital.
Un aspecto fascinante de la fisiología es descubrir el
modo en que los distintos grupos animales se han adap­
tado a través de la selección natural para mantener la
homeostasis frente a determinados desafíos ambientales.
Aunque la homeostasis es comp1eja, ya que a menudo
están involucrados mecanismos fisiológicos pluriorgáni­
cos en su mantenimiento, resulta evidente a nivel celular.
De hecho, se da un grado variable de homeostasis en los
organismos unicelulares más simples. Los protozoos,
por ejemplo, han sido capaces de invadir el agua dulce y
otros ambientes osmóticamente difíciles porque las con­
centraciones de sales, azúcares, aminoácidos y otros so­
lutos en su citoplasma están regulados por la permeabi­
lidad selectiva de la membrana, el transporte activo y
otros mecanismos. Estos procesos mantienen las condi­
ciones intracelulares, bastante diferentes del ambiente

extracelular, dentro de límites que son favorables para
los requerimientos metabólicos de todas las células, in­
cluyendo a los protozoos unicelulares.
Sistemas de retroalimentación
Los procesos reguladores que mantienen la horneostasis
en las células y en organismos pluricelulares dependen
de la retroalimentación, que ocurre cuando la informa­
ción sensorial acerca de una determinada variable (p. ej.,
temperatura, salinidad, pH) se utiliza para controlar
procesos en células, tejidos y órganos que afectan al ni­
vel interno de esa variable. La regulación horneostática
requiere una monitorización continua de las variables
controladas y acciones correctoras, un proceso deno­
minado retroalimentación negativa. Por ejemplo, su­
pongamos que un conductor experimentado sitúa. su
automóvil en una autopista sin tráfico, en un tramo ab­
solutamente recto de unos 10 km de longitud; se le per­
mite situar el coche, y se Je vendan los ojos, y luego se le .
indica que conduzca a lo largo de esos 10 km sin desviar­
se de su carril. La más ligera asimetría en los sistemas
neuromusculares o sensoriales del conductor o en los
mecanismos de dirección del coche ­por no mencionar
el viento o las irregularidades en la superficie de la carre­
tera­ harán que esta tarea. sea imposible. Por otra par­
te, si se le quita la venda de los ojos, el conductor utiliza­
rá la información visual para permanecer en su carril. A
medida que observe una desviación gradual a un lado u
otro, debido a cualquier perturbación interna o externa,
el conductor la corregirá mediante· un movimiento de
compensación aplicado sobre el volante. El sistema vi­
sual del conductor actúa en este caso como el sensor, y el
sistema neuromuscular al aplicar un movimiento de co­
rrección en la dirección opuesta al error observado, ac­
túa como el amplificador invertido que corrige las des­
El ESTUDIO DE LA FISIOLOGÍA ANIMAL 9
Figura 1-2. Los sistemas fisiológicos de
regulación mantienen las condiciones in-
ternas dentro de un rango relativamente
e.strecho. Las grandes variaciones en el
medio ambiente exterior inducen igual-
mente amplias respuestas del sistema de
·control para paliar la perturbación. El
efecto neto es que, e� un animal, las fluc-
tuaciones linternas de una variable son
generalmente bastante menores que las
oscilaciones ambientales de esta misma
variab1e. En otras palabras. se mantiene
la homeostasis.
'
viacíones al punto de ajuste (p. ej., el centro del carril, en
este caso).
Otro ejemplo de regulación por retroalimentación ne­
gativa puede mostrarse con el sistema de termostatiza­
ción que mantiene la temperatura del agua caliente del
baño cercana al punto de ajuste (Fig. 1­3). Cuando la
temperatura del agua desciende por debajo del punto .de
ajuste, el sensor cierra un conmutador que mantiene en
funcionamiento al calentador. Tao pronto como se al­
canza la temperatura de ajuste, el conmutador del cale­
factor se abre y deja de calentar basta que la temperatu­
ra descienda de nuevo por debajo del punto de ajuste.
Este­ejemplo sugiere que la regulación de la temperatura
corporal requiere un «termostato» que proporcione su
iníormación a un sistema de control térmico, que enfríe
o caliente al cuerpo dependiendo de la señal de tempera­
tura. Las investigaciones fisiológicas han 'descubierto
muchísimo sobre regulación térmica, incluyendo la loca­
lización de este termostato, como discutiremos en el Ca­
pítulo 16.
Las características de la retroalimentación negativa
y positiva se resumen en el Destacado 1­1, de la página
13. Encontraremos casos de sistemas de control por re­
troalimentación a Jo largo de todo el texto, especial­
mente en nuestros comentarios al metabolismo inter­
mediario (Capítulo 3), control endocrino (Capítulo 9),
control nervioso del músculo (Capítulo 11), control
circulatorio y respiratorio (Capitulo 13), y regulación del
equilibrio iónico (Capítulo 14). Por tanto, el concepto de
retroalimentación es omnipresente en el estudio de siste­
mas fisiológicos.
Conformismo y regulación
Cuando un animal se enfrenta a cambios en su medio
ambiente (p, ej., alteraciones en la disponibilidad de oxí­
10 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
...............................................................................
Alimentador de corriente
Calentador
Figura 1-3. En un baño de agua termostatado, la temperatura se
mantiene gracias a un sistema de control por retroalimentación
negativa. La espiral bimetálica, que se halla fijada por-su parte
central a la pared del baño, se enrolla ligeramente a medida que
la temperatura desciende por debajo de la deseada (punto de
ajuste). Este arrollamiento causa la aproximación de los contac-
tos eléctricos hasta que se tocan, cerrando el circuito y permitien-
do que fluya la corriente eléctrica a través del calentador. Al
calentarse el agua, la espiral se desenrolla ligeramente y los con-
tactos se separan. La temperatura del agua, justo en el valor de
ajuste o un poco por encima, deja de subir. Cuando el baño co-
mienza a enfriarse de nuevo, el ciclo se repite. Muchos sistemas
de control físiológic,o operan conceptualmente de la misma ma-
nera que este baño termostatado.
geno o en la salinidad), puede mostrar una de las dos
grandes categorías de respuestas: conformismo o regula­
ción. En ciertas especies, estos desafíos inducen cambios
corporales internos paralelos a las condiciones externas
(Fig. 1­4). Tales animales, denominados conformistas,
son incapaces de mantener la homeostasis de paráme­
tros internos como la salinidad de sus fluidos corporales,
o la oxigenación de sus tejidos. Por ejemplo, los equino­
dennos como la estrella de mar Asterías son osmocon­
formistas, y sus líquidos corporales se hallan en equili­
brio con su ambiente, mostrando un incremento de la
salinidad del líquido corporal cuando se les expone a
agua de mar y un descenso cuando se les pone en agua
con bajo contenido en sales. Igualmente, el consumo de
oxígeno de oxigenoconformistas como los gusanos anéli­
dos aumenta y desciende conforme sube y baja la dispo­
nibilidad de oxígeno. El grado de éxito de los conformis­
tas para sobrevivir a esas fluctuaciones ambientales
depende de la tolerancia de sus tejidos corporales a las
alteraciones internas.
Los organismos reguladores, como su nombre indica,
utilizan mecanismos bioquímicos, fisiológicos, etiológi­
cos u otros, para regular su medio interno frente a am­
plios cambios del ambiente externo ­es decir, mantie­
nen la homeostasis­. Así pues, un osmorregulador man­
tiene las concentraciones iónicas de sus líquidos corpo­
rales por encima de los niveles externos cuando se le
pone en agua dulce, y por debajo si se le expone a agua
más concentrada. Los animales oxigeuorreguladores, en­
tre los que se incluyen el cangrejo, muchos moluscos y
casi todos los vertebrados, mantienen su nivel de consu­
mo de oxígeno aunque la disponibilidad de oxígeno am­
biental disminuya. En ocasiones, sin embargo, la canti­
dad de oxígeno puede llegar a ser tan baja que ya no
puede mantenerse el nivel de consumo de oxígeno basal,
y el animal pasa entonces a comportarse como confor­
mista.
Es tentador llevar a cabo generalizaciones amplias en
grupos taxonómicos, basándonos en si los animales son
conformistas o reguladores. Aunque la mayor parte de
invertebrados son conformistas, y casi todos los verte­
brados reguladores, existen algunas excepciones. Por
ejemplo, los crustáceos decápodos (p. ej., cangrejos, ca­
marones, langostas) tienden a comportarse como regu­
ladores, como lo son muchos moluscos y la mayoría de
insectos. Más aún, la zona de estabilidad en la que se
mantiene la homeostasis puede ser muy amplia o bas­
tante más estrecha dependiendo de la especie.
BIBLIOGRAFÍA DE LAS CIENCIAS
FISIOLÓGICAS
Toda la información descrita en este libro se basa en los
resultados experimentales de muchos científicos, según
fueron descritos por los propios autores en artículos e
informes publicados, y comúnmente conocidos como
pubücaciones científicas. Tales publicaciones, que inclu­
yen la descripción de los métodos experimentales, un re­
sumen de los resultados y la discusión de )os mismos, se
publican en revistas científicas, muchas de las cuales cen­
tran su atención en determinadas disciplinas o áreas de
investigación especializadas. Antes de su publicación, el
editor de la revista envía cada manuscrito presentado a
dos o más científicos diferentes, expertos en el tema estu­
diado, para su revisión y comentario crítico. Estos eva­
luadores recomiendan la aceptación o el rechazo para su
publicación, basándose en la calidad científica del estu­
dio, y a menudo ofrecen numerosas sugerencias para
mejorar los trabajos aceptables. Este proceso, denomi­
nado «peer review», contribuye a asegurar que los tra­
bajos publicados se basan en métodos de investigación
aceptados y que sus conclusiones son válidas. Una vez
publicado el trabajo, los miembros de la comunidad
científica son libres de comprobar sus conclusiones repi­
tiendo los experimentos fundamentales y de aceptar o
rechazar individualmente las conclusiones establecidas
por el trabajo. Un sano escepticismo, unido al deseo de
mejorar el trabajo de otros científicos, es de gran impor­
tancia para la naturaleza autocorrectora de una ciencia
experimental como la fisiología.
 EL ESTUDIO DE LA FISIOLOGiA ANIMAL 11

A B

Conformista Regulador

••
•
••
o
E.,
e
.2
.,
"O

¿
•
• Zona de estabilidad en
•
- Línea de conformidad •
•
que se mantiene la
• • homeostasis
• •
• •
Ambiente externo.

Figura 1-4. Los organismos conformistas ajustan sus condiciones internas reflejando la condiciones ambientales, mientras que los
reguladores mantienen su estabilidad interna aun cuando cambien las condiciones externas. (Al La representación gráfica del valor
ambiental externo de una variable (p. ej., salinidad, disponibilidad de oxígeno) frente a su valor interno en conformistas (línea roja) es
típicamente una línea recta con una pendiente de 1. Cuando un animal es incapaz de poner en marcha las respuestas fisiológicas, u otras,
necesarias para contrarrestar los cambios externos en una variable, su valor interno varía directamente con el externo, y la respuesta
mimetiza entonces la línea de conformidad (línea de puntos negros). (B) El gráfico de los valores externos frente a los internos de una
variable para reguladores (línea roja) muestra que son capaces de mantener una estabilidad interna en un amplio margen de cambios
externos. Se representa la línea de conformidad para-facihtar la comparación. Sin embargo, en condiciones ambientales extremas, los
reguladores no son capaces de regular sus condiciones internas y se convierten en conformistas. La amplitud de la zona de estabilidad de
un regulador depende de las especies y de la variable ambiental.

Numerosas revistas científicas publican trabajos de
investigación en fisiología animal. En el Cuadro 1­1 se
presenta una lista con muchas de las revistas de mayor
difusión. Algunas revistas aceptan trabajos dentro de un
amplio rango de temas, mientras que numerosas publi­
caciones especializadas cubren con mayor profundidad
unas áreas de interés más limitadas. Además, varias
revistas de revisión, que suelen aparecer anualmente,
publican artículos que resumen y evalúan los hallazgos
relacionados con determinados temas que se han publi­
cado previamente en otras publicaciones. Otra categoría
de revistas se dedican, desde una perspectiva taxonómi­
ca, a grupos de organismos, presentando artículos de
investigación en la fisiología, entre otros aspectos, de
grupos específicos de animales. Finalmente, algunos se­
manarios de noticias publican informes preliminares
de investigaciones fisiológicas cuando los editores esti­
man que captarán el interés de la comunidad científica
en general.
Conforme uno se familiariza con la bibliografía de in­
vestigación fisiológica, se aprecia que las revistas, como
los animales, no cesan de evolucionar desde su apari­
ción. Esto resulta especialmente evidente al considerar
los propios nombres de las revistas, que en algunos ca­
sos reflejan su contenido de forma sólo muy genérica.
Por ejemplo, el Journal of General Physioloqy publica
principalmente sobre biofísica y fisiología celular, mien­
tras que el Journal of Experimenta/ Bioloqy publica sólo
artículos sobre animales, excluyendo la fisiología vege­
tal. Igualmente, revistas como Proceedinqs of the New
York Academy of Sciences, Midland Naturalist, Canadian
Iournal ofZooioqy, Australian Journal ofZooloqy, o Israel
I
Journal of Zooloqy publican artículos de científicos de
todo el mundo aunque mantengan sus temas regionales.
El muestrario de publicaciones periódicas listado en
el Cuadro 1­1 representa sólo un porcentaje muy peque­
ño de los literalmente millares de revistas que en la ac­
tualidad publican artículos de investigación en biología
y bioquímica, con docenas de nuevas revistas cada año.
¿Cómo puede esperar una sola persona ­ya sea estu­
diante o investigador­ seguir el desarrollo de un área
específica de la biología? Afortunadamente.junto con la
explosión de información producida en las últimas déca­
das, la tecnología se ha desarrollado hasta el punto de
permitirnos sentarnos frente a un terminal informático
y, tras unas pocas pulsaciones, llevar a cabo una búsque­
da entre millares de documentos, vagando libremente
entre bibliotecas de universidades y centros de investiga­
ción de todo el mundo. Además, el uso en continua y
rápida expansiónde Internet en estos últimos años, está
conduciendo a un lento aunque inexorable cambio en la
forma en que se difunde la información científica. Las
tradicionales revistas distribuidas por correo a cada sus­
criptor, van siendo gradualmente suplementadas, o
reemplazadas, por revistas electrónicas que exponen sus
artículos tan pronto como se aceptan. Añadamos a esto
las páginas de.la World Wide Web que pregonan los
últimos hallazgos y los inmediatos proyectos de investi­
gación de los laboratorios, a los que cualquiera puede
tener acceso, y vemos una inminente revolución en la
forma en que se procesa y accede a la información.
Lo que todavía no ha sido reemplazado por la tecno­
logía es la necesidad de que el estudiante lea y compren­
da las descripciones de los experimentos originales, para
12 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA

Cuadro 1-1.
Muestra de revistas científicas que publican artículos de investigación fisiológica

Nombre Abreviatura* Temas que cubre

Revistas generales

American Journal of Physiology Am. J. Physíol.

Pflügers Archive für Physiologie (ahora
European Journal of PhysiologyJ
Pflugers Arch. Physiol.
(Eur. J. Physiol.J
} Amplias áreas de la fisiología desde células a sistemas de
órganos

Journal of General Physiology J. Gen. Physiol. Estudios fisiológicos y bioffsicos a nivel celular y subcelular

Journal of Physiology J. Physiol.

Comparative Physiology and Biocbemistrv Comp. Physiol. Biochem.
Áreas muy diversas con especial énfasis en vertebrados in-
Journal of Comperstive Physíology J. Comp. Physiol.
feriores e invertebrados
Journal of Experimental Biology J. Exp. Biol.
Physiologícal Zoology Physiol. Zoo/.
.�
Revistas especializadas

Brain, Behavior and Evotution Brain Behav. Evo/.

Ce//
Circulatiori Research Circ. Res.
Endocrinology
Gastroenterology
Journal of Ce// Physiology J. Ce/1 Physiol. Investigación relacionada con procesos o áreas específicas
Journal of Membrana Biology ·J. Membr. Res. indicados por el nombre de la revista
Journal of Neurophysiology J. Neurophysiol.
Journal of Neuroscience J. Neurosci.
Molecular Endocrinology Mol. Endocrino/.
Nephron
Respiration Physiology Respir. Physiol.

Revisiones anuales

)
Annual Review of Neuroscience Annu. Rev. Neurosci.
Annual Review of Physiology Annu. Rev. Physiol. Resúmenes y comentarios de artículos originales sobre te
Federatíon Proceedings Fed. Proc. mas determinados publicados en otras revistas
Physiological Reviews Physiol. Rev.

Revistas con orientación taxonómica

At1k }
Condor Fisiología y otros temas relacionados con las aves
Emu

Crustaceana Fisiología y otros temas relacionados con los crustáceos

Copeia }
Herpetologica Fisiología de anfibios y reptiles
Journst'ot Herpetology J. Herpetol.

Journal of Mammology J. Mammol. Fisiología y otros temas consagrados a mamíferos

Semanarios

Nsture
Science
} Informes preliminares sobre temas de interés general para
la comunidad científica

* Los nombres de revistas con una sola palabra no se abrevian.

entender los procesos que generan los datos fisiológicos.
.Por lo tanto, al final de cada capítulo del presente texto
se encuentra una sección de Lecturas Recomendadas, en
la que se relacionan unos pocos artículos clave que ofre­
cen mayores detalles de cada tema. Además las fuentes
originales de la mayor parte del material presentado en
el texto, las figuras y cuadros se relacionan en el aparta­
do de Referencias citadas al final del libro. Aunque reco­
nocemos que, como todo estudiante, el lector dispone de
un tiempo Limitado para dedicar a lo largo de todo el
curso, no podemos dejar de animarle a visitar la biblio­
teca y examinar atentamente algunos de tales artículos.

DESTACADO 1-1
1 #1
atl EL CONCEPTO
DE RETROALIMENTACIÓN
Cualquier sistema de control efectivo, ya sea el cerebro
humano, un computador o un termostato doméstico, es
tremendamente dependiente de la retroalimentación,
que es el retorno de una información sensorial a un con-
trolador que regula la variable controlada. La retroali-
mentación puede ser positiva o negativa, produciendo
cada una de ellas efectos muy diferentes. La retroalimen-
tación se utiliza ampliamente tanto por sistemas de con-
trol biológico, como en ingeniería para mantener un es-
tado preseleccionado de una variable controlada.
Retroalimentación negativa
Consideremos el modelo presentado en la parte A de la
figura adjunta. Asumiremos por el momento que el siste­
ma controlado experimenta una nueva perturbación
(p. ej., un cambio de longitud, temperatura, voltaje o con-
centración). la señal de salida de este sistema es detecta-
da por un sensor, que envía la señal a un amplificador.
Imaginemos ahora un amplificador que invierte la señal
que recibe, de modo que el «signo» de su señal de salida
es opuesto al de entrada (p. ej., más cambia a menos o
viceversa). Tal inversión de señal proporciona la base de
la retroalimentación negativa, que puede usarse para re-
gular la variable controlada (p. ej., longitud, temperatura,
voltaje o concentración) dentro de un rango limitado.
Cuando el sensor detecta un cambio en el estado del
sistema de control (p. ej., cambio de longitud, temperatu-
ra, voltaje o concentración), produce una señal de error
proporcional a la diferencia entre el punto de ajuste a que
debe fijarse el sistema y su estado actual. La señal de
error es entonces ampliada e invertida (o sea, cambia de
signo). La señal de salida invertida del amplificador, re-
troalimenta al sistema, contrarrestando la perturbación.
La inversión de signo es la característica fundamental del
control por retroalimentación negativa. La salida inverti-
da del amplificador, al contrarrestar la perturbación, re-
duce la señal de error, y el sistema tiende a estabilizarse
cerca del punto de ajuste.
Un hipotético circuito de retroalimentación negativa
con amplificación infinita mantendría al sistema exacta-
mente en el punto de ajuste, ya que la más mínima señal
de error produciría una masiva salida del amplificador
para contrarrestar la perturbación. Puesto que ningún
amplificador, electrónico o biológico, produce una am-
plificación infinita, la retroalimentación negativa sólo se
aproxima al punto de ajuste durante la perturbación.
Cuanta menor amplificación tenga un sistema, menos
preciso es su control.
Retroalimentación positiva
En el sistema modelo mostrado en la parte B de la figura,
se aplica una perturbación que actúa sobre el sistema de
control, igual que en la parte A. Sin embargo, suponga-
mos aquí que la señal de entrada es.amplificada pero que
su signo (más o menos) permanece inalterado. En tal
caso, la salida del amplificador al retroalimentar al siste-
ma de control, tiene el mismo efecto que la perturbación
original, reforzando la perturbación sobre el sistema de
control. Este sistema de retroalimentación positiva es ex-
tremadamente inestable, puesto que la señal de salida se
hace gradualmente más fuerte, conforme se la retroali-
menta y amplifica. Un ejernpto familiar sería un sistema
EL ESTUDIO DE LA FISIOLOGÍA ANIMAL 13
público de megafonía: cuando la señal del altavoz es re-
cogida y reamplificada por el micrófono, se genera un
potente chirrido. Así, una pequeña perturbación en la se-
ñal de entrada puede causar un efecto mucho mayor en
la señal de salida. La señal de salida del sistema suele
estar limitada de algún modo; por ejemplo, en el sistema
de megafonía la intensidad de salida está limitada por la
potencia del audioamplificador y los altavoces o por la
saturación de la señal del micrófono. En los sistemas bio-
lógicos, la respuesta puede estar limitada por la cantidad
de energía o de sustrato disponible.
En animales normales y sanos la retroalimentación po-
sitiva se utiliza para producir un efecto regenerativo, ex-
plosivo o autocatalítico. Este tipo de control se !,.ISa a me-
nudo para generar la fase creciente de un fenómeno
cíclico, como el disparo del impulso nervioso o el creci-
miento explosivo de un coágulo sanguíneo para prevenir
la pérdida de sangre. El vaciado rápido de una cavidad
corporal (p. ej., la expulsión del feto durante el parto, el
vómito o la deglución) se inicia a menudo con procesos
de retroalimentación positiva.
Sin embargo, la retroalimentación positiva se encuen-
tra mucho más frecuentemente en condiciones patológi-
cas que afectan al control normal por retroalimentaclón
negativa. Un ejemplo clásico lo proporciona la insufi-
ciencia cardíaca congestiva. En este desorden, la incapa-
cidad del corazón para bombear la sangre, causa que
ésta se acumule en los ventrículos, lo que empeora la ca-
pacidad de bombeo, y así sucesivamente. A menos que
se interrumpan, estos círculos viciosos de la retroalirnen-
tación positiva conducirán rápidamente a· un colapso
completo del sistema de control.
A Perturbación
Retroalimentación negativa
Sistema Sensor Señal de
de control --- error
Salida
Punto de ajuste
B Perturbación
Retroalimentación positiva
..
Sistema Señal
de control Sensor
Salida
Los sistemas de control biológicos dependen de la retroalimeota-
ción negativa o positiva. Las características particulares de los
sistemas de retroalimentación negativa (Al consisten en la gene-
ración de una señal de error con inversión de signo por parte del
amplificador. Los sistemas de retroalimentación positiva IBI, que
amplifican la señal sin invertir su signo, conducen a un vertiqino-
so incremento de la variable controlada. Los elemeñtos básicos
aquí ilustrados se dan en gran número de variantes en los siste-
mas biológicos. En algunos casos, las funciones de sensor y am-
plificador son realizadas por un mismo elemento (p. ej .• la res·
puesta de una sola célula a perturbaciones de· su medio). Otra
variante se da en la mitad del ciclo estrual de las hembras de
mamíferos, cuando la inversión de signo se desplaza del arnphfi-
cador al sensor, lo que tiene como efecto convertir un sistema de
retroalimentación negativa en uno. de retroaümentaciónpositiva.
. .
 14 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
LA EXPERIMENTACIÓN ANIMAL
EN FISIOLOGÍA
La mayor parte de la información que se presenta en
este libro, procede de experimentos en los que se usaron
animales para poder responder a cuestiones específicas
acerca de cómo funciona determinado proceso fisiológi­
co. Dado que las propiedades fisiológicas básicas son si­
milares entre diferentes especies animales, los resultados
de la experimentación animal son aplica bles, en térmi­
nos generales, a otras especies incluyendo la humana.
Así pues, la mayor parte de los tratamientos médicos im­
portantes que hoy se usan se basan directamente en la
experimentación animal. Aunque los datos experi­
mentales obtenidos en humanos serian científicamen­
te más fiables, en la mayoría de los casos tal investiga­
ción sería éticamente inaceptable. Por consiguiente, la
experimentación animal es de importancia capital en la
investigación médica así como también en su propio
provecho.
Las tres primeras ediciones de este libro se basaban en
el supuesto de que los beneficios de la experimentación
animal eran comprendidos por todo el mundo, pero di­
cha suposición ya no puede seguir haciéndose. A pesar
de los beneficios generales que la experimentación ani­
mal ha producido al género humano, se ha generado
u!1a controversia de tipo ético acerca de la conveniencia
del uso de animales de experimentación. Para describir
dicha controversia, es importante distinguir entre el bien-
estar animal («animal welfare» ) y los derechos de los ani-
males ( «animal riqhts» ). La primera denominación co­
rresponde al tratamiento que los humanos debemos
proporcionar a los animales para asegurar su comodi­
dad y bienestar. El segundo término se refiere a la idea
de que los animales poseen unos intrínsecos e irrebati­
bles «derechos a la vida, la libertad y la consecución de
su felicidad», más o menos como los inalienables dere­
cbos humanos consagrados en la Declaración de Jnde­
pendencia de los Estados Unidos de América. El con­
cepto de derechos de los animales, en su interpretación
más extrema, implicaría la prohibición de la domestica­
ción de especies animales para la producción de alimen­
tos y sólo permitiría su uso corno mascotas.
La comunidad científica apoya con fuerza el concepto
de bienestar animal. Los científicos reconocen su obliga­
ción profesional de salvaguardar y mejorar las condice­
nes de vida de los animales de laboratorio, De hecho, los
investigadores científicos que se ocupaban del cuidado y
tratamiento de los animales de laboratorio fueron los
primeros en establecer voluntariamente, a principios de
este siglo, unos modelos como pauta de cuidados mucho
antes de que se establecieran las normativas de alcance
federal en los Estados Unidos de América. En la actuali­
dad, hay una estricta regulación gubernamental de la in­
vestigación en animales, que obliga a las instalaciones y
estabularios a cumplir con escrupulosas normas de lim­
pieza y cuidado de los animales. Las sociedades profe­
sionales y las revistas científicas tienen rigurosas exigen­
cias con respecto a la experimentación animal, y la pu­
blicación de los resultados de una investigación requie­
ren las pruebas de que se hayan cumplido tales normas.
En Estados Unidos, todas las instituciones de investi­
gación que reciben fondos federales deben contar con un
Comité de Cuidados de Animales de Laboratorio, que
evalúan todas las propuestas de experimentos para ase­
gurar que éstos se lleven a cabo con las mínimas moles­
tias y dolor, y utilizando el mínimo número necesario de
animales para alcanzar resultados concluyentes. Estos
comités, están constituidos por científicos, veterinarios y
representantes de la sociedad. Estas personas tienen la
potestad de limitar o prohibir aquellos experimentos
que no aborden adecuadamente el asunto del dolor infli­
gido a los animales, y cualquier propuesta experimental
descabellada es rechazada rápidamente. Los propios
científicos se preocupan por el cuidado de los animales y
se dan cuenta de que los experimentos llevados a cabo
en animales que padezcan algún tipo de sufrimiento, no
ofrecen ninguna garantía de proporcionar resultados sa­
tisfactorios. Un cuidado apropiado de los animales es
esencial para obtener datos científicos precisos.
A pesar de estos efectivos controles internos y exter­
nos, algunas personas apelan a Jos «derechos» de los
animales y se oponen a cualquier forma de investigación
animal. La existencia de sanciones a estabularlos e insta­
laciones de animales y normativas aún más severas, no
satisfacen a quienes abogan por los derechos de los ani­
males, ni tampoco les con vencen las abrumadoras prue­
bas de los beneficios de la investigación en los animales.
El actual debate entre bienestar animal frente a derechos
de los animales es beneficioso, si los datos disponibles se
evalúan objetivamente y las intenciones de los partici­
pantes son claras. A través de dicho debate y evaluación,
debemos asegurarnos de que las necesidades de la expe­
rimentación animal estén equilibradas con las preocupa­
ciones por el bienestar de los animales, ampliamente
compartidas en términos generales.
RESUMEN
La fisiología animal se ocupa de las funciones de los teji­
dos, órganos y sistemas, y en particular, de cómo se con­
trolan y regulan estas funciones. Aunque este texto se
concentra en la presentación de las bases funcionales de
la fisiología animal, un tema importante es comprender
las limitaciones ambientales que hao modelado la evolu­
ción de los procesos fisiológicos mediante la selección
natural.
Los biólogos estudian la fisiología animal porque
sienten la curiosidad de conocer cómo funcionan los
animales, y también para aprender más de la propia fi-
siología humana observando otras especies de animales.
La fisiologia animal es la piedra angular de la práctica
médica científica y también de la veterinaria, y el estudio
de animales con características evolutivas y fisiológicas

................................................................ ­ ....
comunes, ha proporcionado un mejor conocimiento de
la fisiología humana.
Varios temas primordiales caracterizan a la fisiología
animal. Primero, la función depende de la estructura a
todos los niveles, desde el atómico hasta los organismos.
Con frecuencia, sólo estructuras especializadas permiten
funciones especializadas. Segundo, la selección natural
ha conducido a la adaptación fisiológica, es decir, a pro­
cesos bien ajustados que ayudan a los animales a sobre­
vivir en ambientes a menudo hostiles. Las funciones
adaptativas de células, tejidos y órganos que han ido
apareciendo durante la evolución, están determinadas
genéticamente y codificadas por el ADN. Tercero, mu­
chos animales exhiben homeostasis, la tendencia hacia
una estabilidad relativa del medio interno del organis­
mo. Sin homeostasis las fluctuaciones y los niveles ina­
decuados de temperatura, pH, oxígeno y otras caracte­
rísticas fisicoquímicas pueden trastornar las reacciones
químicas básicas en que se fundamentan la fisiología, la
anatomía y el comportamiento. Cuarto, los mecanismos
de control por retroalimentación son críticos para man­
tener la homeostasis. Finalmente, los animales pueden
responder a cambios en las condiciones del ambiente de
dos maneras diferentes. En los conformistas, el medio
interno se ajusta reflejando las condiciones externas; es
decir, no pueden mantener la homeostasis. Por el con­
trario, los reguladores pueden ajustar su medio interno
dentro de estrechos límites conforme cambien las condi­
ciones ambientales; es decir, pueden mantener la ho­
rneostasis.
Comprender las técnicas experimentales utilizadas en
la investigación fisiológica es esencial para apreciar
como avanza el conocimiento fisiológico. Los resultados
de las investigaciones se publican en revistas tras un pro­
ceso de evaluación ( «peer­review»). La mayoría de estas
publicaciones son accesibles actualmente por sistemas
de recuperación electrónica, que pueden llevarse a cabo
en las bibliotecas. La lectura de artículos originales en
los que se presentan resultados específicos puede ser de
ayuda para empezar a penetrar en la esencia de la inves­
tigación cien tífica.
Casi todos los datos sobre fisiología animal, y lama­
yor parte de lo que sabemos de la fisiología humana, se
derivan de estudios realizados en animales experimenta­
les y diseñados para responder aspectos específicos de
El ESTUDIO DE LA FISIOLOGÍA ANIMAL 15
cómo funcionan los procesos fisiológicos. Sólo pueden
obtenerse resultados significativos si los animales han
tenido un buen cuidado y se han evitado su incomodi­
dad y dolor. Se han adoptado numerosas normativas,
estrictamente impuestas por agencias locales, estatales y
federales, para asegurar que los investigadores siguen las
normas aceptadas en la experimentación animal.
PREGUNTAS DE REPASO
l. Dé un ejemplo de una relación estructura­función
sencilla en fisiología y describa sus condiciones de
funcionamiento.
2. ¿ Qué ventaja evolutiva confiere a un animal el man­
tenimiento de una relativa estabilidad interna?
3. Compare y contraste la retroalimentación negativa
y positiva., dando un ejemplo de cada una de ellas.
Explique porqué para el mantenimiento de la ho­
meostasis se requiere la retroalimentación negativa
en vez de la positiva.
4. Visite la biblioteca y utilice una base de datos elec­
trónica para buscar la palabra homeostasis en el ca­
tálogo de artículos y libros.
5. Distinga entre los conceptos de bienestar animal
(animal welfare) y derechos de los animales (animal
righ.ts). Pregúntele a tu profesor por la composición
del Comité de Cuidados de Animales de Laborato­
rio de tu facultad o universidad.
LECTURAS RECOMENDADAS
Benison, S. A., Barger, A. C., y Wolfe, E. L.: Walter B. Ca1111on:
The Life and Times of a Young Scienüst; Cambridge: Harvard
University Press, 1987. (Una seductora y penetrante biogra­
fía del eminente científico que introdujo el concepto de ho­
meostasis en 1929.)
Dworkin, B. R.: Learninq and Physiological Requlation. Chica­
go: University of Chicago Press, 1993. (Un minucioso trata­
do de la teoría y los mecanismos en que se basan la regula­
ción fisiológica y el comportamiento animal.)
Futuyama, D. J.: Eoolutionary Bioloqy. 2.0 ed. Ed. Sunderland,
Mass.: Sinauer Associates, 1986. (Uno de varios y completos tex­
tos para estudiantes que introduce conceptos básicos de la bio­
logía evolutiva tal y como se aplica a los procesos fisiológicos.)
 ....................................................
C A
MÉTODOS .EXPERIMENTALES
EN FISIOLOGÍA
. . . . .. .. . . . . .
" . . . ­ . . . . . . . . . . .
N uestro conocimiento de la Fisiología Animal se
basa en la información (datos) derivada de la ex­
perimentación. Puesto que el fin último de la Fisiología
Animal es la comprensión de cómo funciona un proce­
so en el organismo, los experimentos deben diseñarse
para permitir la medición de unas variables claves (p. ej.
tasa metabólica, flujo sanguíneo, producción de orina,
contracción muscular) en el animal (o en sus células o
tejidos) mientras se encuentra en un estado conocido
como, por ejemplo, en reposo, en ejercicio, durante la
digestión o durmiendo. Este tipo de experimentación
supone un reto especialmente difícil y requiere la utili­
zación de una gran variedad de técnicas y métodos.
Muchas de las técnicas experimentales y de Jos dispositi­
vos de medida comúnmente utilizados en la Fisiología.
Animal son clásicos. Esto incluye transductores de pre­
sión, implantación de catéteres para la extracción de
sangre o la inyección de muestras, respirómetros para la
determinación de la tasa metabólica, y muchos otros.
Una descripción de cada uno de ellos sobrepasaría el
objetivo de este capítulo, especialmente dado que las
técnicas fundamentales están muy bien descritas en tex­
tos como Principies of Physiological Measurement de J. N.
Cameron, En el presente capítulo nos centraremos en
unas pocas de las muchas técnicas moleculares y celula­
res que se han incorporado recientemente a las herra­
mientas al alcance de) fisiólogo, describiéndolas breve­
mente e ilustrando su uso en la investigación fisiológica.
Primero, sin embargo, consideraremos la naturaleza de
las hipótesis y de los principios generales que se aplican
en su ensayo.
Conociendo cómo y porqué se llevan a cabo los expe­
rimentos en Fisiología Animal, tanto si se emplean mé­
todos tradicionales o recientes, el lector será mucho más
capaz de evaluar el alcance y las limitaciones de la infor­
mación presentada en este libro.
P f T U
2
. . . . . . . . . .. . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . ..... . . . .. . .. ..
FORMULACIÓN Y ENSAYO
DE HIPÓTESIS
Los científicos utilizan los datos experimentales para
postular leyes generales de la fisiología, algunas de ellas
con una antigüedad de siglos y otras todavía en desarro­
llo. Estas leyes generales, a su vez, sirven como base para
formular nuevas hi1,ótesis, que son predicciones específi­
cas que deben ser comprobadas a posteriori mediante
la realización de experimentos. Un ejemplo de una «ley»
general, apoyada por muchísimos datos, es que los ani­
males que respiran en el agua regulan su equilibrio
ácido­base modificando la excreción de HC03 en el
agua expulsada, mientras que los animales que respiran
en el aire regulan su equilibrio ácido­base modificando
la eliminación de C02 en el aire exhalado. De esta ley
general se derivaría la siguiente hipótesis contrastable:
cuando los renacuajos que respiran en el agua sufren me-
tamorfosis hasta ranas adultas que respiran en el aire,
debe de existir una transición desde la eliminación de
HCO:; a la de C02• Aunque las hipótesis se presentan
como aseveraciones más que como preguntas, el objeti­
vo final de la experimentación es comprobar la validez
de estas hipótesis, y responder a los interrogantes implí­
citos. Los experimentos fisiológicos se inician con una
hipótesis específica y bien planteada que se restringe a
un determinado nivel de análisis y que se adapta a un
enfoque experimental verificable. Aunque una hipótesis
como las orcas tienen un gasto cardíaco muy elevado
mientras persiguen a las focas puede ser interesante, y de
hecho cierta, sugerir tal hipótesis es un mero ejercicio
intelectual, a menos que exista un enfoque experimental
factible que permita obtener los datos necesarios para
aceptarla o rechazarla. Sin embargo, la búsqueda de mé­
todos para comprobar hipótesis nuevas ha sido un im-
portante estímulo para el desarrollo de nuevas técnicas
17
 18 PRINCIPIOS DE FISIOLOGiA
experimentales y de modernos instrumentos de medi­
ción. Por ejemplo, los dispositivos de telemetría normal­
mente disponibles para la obtención de datos de flujo
sanguíneo en animales de pequeño o mediano tamaño
como los patos, los peces y las focas están siendo mo­
dificados para su uso en animales aún mayores.
El Principio de August Krogh
August Krogh fue un fisiólogo animal danés con intere­
ses extremadamente amplios en la fisiología comparada.
Publicó docenas de artículos de investigación que han
sido la base de áreas enteras de posterior experimenta­
ción en el campo de la respiración y del intercambio de
gases. El trabajo de Krogh, a finales del siglo pasado y
principios del presente, le llevó a ser galardonado con el
premio Nobel de Fisiología. Una de las razones del ex­
traordinario éxito de Krogh corno fisiólogo fue su insóli­
ta habilidad para escoger exactamente el animal experi­
mental adecuado en el que comprobar sus hipótesis. Su
punto de vista era que para cada problema fisiológico
definido había un animal con un ajuste óptimo en el que
se podía encontrar la respuesta de una manera más efi­
ciente.
El diseño de experimentos basados en las caracterís­
ticas inusuales de un animal se ha dado en llamar como
principio de August Krogh (Krebs, 1975). Abundan los
ejemplos ilustrativos de este principio en este libro y
a lo largo de la fisiología animal moderna. Por ejem­
plo, en los años setenta un grupo de fisiólogos anima­
les interesados en la evolución de la respiración aérea
de los crustáceos, estudiaban unos cangrejos de la zona
intermareal relativamente pequeños, pero estaban fra­
casando porque el pequeño tamaño de estos animales
no les permitía desvelar sus secretos fisiológicos. lnvo­
cando el principio de August Krogh, que sugería Ja
búsqueda de un animal ideal en el que llevar a cabo los
estudios, estos fisiólogos organizaron una expedición a
las Islas Palau en el Pacífico Sur. En estas islas vive el
cangrejo de los cocoteros, un cangrejo ermitaño terrestre
que pesa hasta más de 3 kg. El monstruoso tamaño de
estos animales (tratándose de un cangrejo terrestre) per­
mitió realizar numerosos experimentos que arrojaron
nuevos e importantes datos durante el mes que duró la
expedición.
Como otro ejemplo, los fisiólogos animales interesa­
dos en la capacidad cardíaca de los peces tienen a menu­
do la dificultad de medir la presión y el flujo y de extraer
muestras de sangre del corazón, a causa de su típica lo­
calización en los teleósteos. Pero resulta que, la trigla, un
teleósteo marino de fondo (bentónico) que es bastante
corriente en muchos aspectos (¡aunque es francamente
feol) tiene un corazón excepcionalmente grande, y que es
de mucho más fácil acceso que en los otros peces. Siguien­
do el principio de August Krogh, y utilizando la trigla en
sus experimentos, los fisiólogos cardiovasculares com­
parados saben ahora mucho más acerca de la función
cardíaca de los peces que si hubiesen continuado avan­
zando penosamente con la insufrible anatomía de la tru­
cha, el salmón o el siluro.
Diseño experimental y nivel fisiológico
Al diseñar un experimento, la primera y más importante
decisión que el fisiólogo debe tomar es acerca del nivel al
que será analizado el problema fisiológico. Esta elección
del nivel determina la metodología (y también la especie
animal) apropiada para medir las variables experimen­
tales de interés.
Las técnicas para enfrentarse a los problemas fisioló­
gicos a nivel de animal entero fueron, históricamente, las
primeras en desarrollarse; posteriormente, y con una ve­
locidad cada vez mayor en las décadas recientes, han IJe­
gado nuevas técnicas para la experimentación, primero
a nivel celular y en la actualidad a nivel molecular. Sin
embargo, desde un punto de vista conceptual, general­
mente operamos en orden inverso: partiendo del nivel
molecular y moviéndonos sucesivamente al celular, teji­
do, órgano y finalmente a nivel del animal entero, como
se esquematiza en la Figura 1­l. Por consiguiente, en las
próximas secciones, describiremos algunos métodos ex­
perimentales representativos para el estudio de procesos
fisiológicos, comenzando a nivel molecular. Gran parte
de la información presentada en el resto de capítulos de
este libro se basa en resultados experimentales obteni­
dos con estas distintas técnicas. Solamente aprendiendo
cómo y por qué funcionan estos métodos, y también al­
gunas de sus limitaciones, se puede valorar adecuada­
mente la información presentada.
Debe señalarse que ningún nivel de análisis es intrín­
secamente más valioso o importante que cualquier otro.
Todo lo contrario, la mejor comprensión de la fisiología
animal surge de la integración de los conocimientos de
todos los componentes que contribuyen, desde el nivel
molecular hasta el de los órganos o los sistemas. Dicho
esto, se debe reconocer que durante la última década
hay una fuerte tendencia en fisiología animal (como en
toda la biología) hacia un «reduccionismo», o sea, al
estudio de los mecanismos celulares y moleculares
como un intento de explicar procesos más complejos a
niveles de organización más elevados. Últimamente al­
gunos de los experimentos más valiosos son aquellos
realizados a un nivel de análisis tal que ofrecen nuevas
perspectivas acerca de procesos con niveles de organiza­
ción adyacentes.
Si bien los investigadores y estudiantes quedan a me­
nudo fascinados por las nuevas y frecuentemente costo­
sas metodologías, se pueden obtener resultados de gran
valor con experimentos bien diseñados utilizando técni­
cas e instrumentos relativamente sencillos. En otras pa­
labras, un diseño experimental bien concebido, puede
compensar a menudo la carencia de las últimas técnicas
y de los más flamantes equipos.
 MÉTODOS EXPERIMENTALES EN FISIOLOGÍA 19

TÉCNICAS MOLECULARES radioisótopo pueden utilizarse para detectar la presen­

cia de la molécula, incluso a muy bajas concentraciones.
En un primer tipo de experimento de rastreo, se admi­
Las recientes décadas han sido testigo de una verdadera
nistra. a un animal, a un órgano aislado o a células que
explosión en el número y en la sofisticación de las técni­
crecen en un cultivo in oitro, la molécula de interés o una
cas disponibles para estudiar fenómenos moleculares,
de sus precursoras marcada radioactivarnente y se obtie­
con una continua aparición de nuevos métodos y perfec­
nen muestras periódicamente para medir la emisión de
cionamientos. La variedad de técnicas moleculares dis­
partículas. Para detectar las partículas emitidas se utili­
ponibles han tenido implicaciones importantes para la
zan dos tipos de instrumentos. Un contador Geigcr de­
investigación biológica en general, y la fisiología animal
tecta la ionización producida en un gas por la energía
también ha disfrutado del beneficio de los enfoques mo­
emitida. Un contador de centelleo detecta y cuenta los
leculares. En esta sección describiremos sólo unas pocas
breves destellos de luz que estas partículas originan al
de las poderosas técnicas moleculares que han sido utili­
pasar a través de un «líquido de centelleo» especial. La
zadas para responder a interrogantes en fisiología ani-
cantidad de radiación detectada por cada instrumento
mal. Una discusión más detallada de éstas y de otras
está directamente relacionada con la cantidad de molé­
técnicas relacionadas puede encontrarse en textos como
cula marcada radiactivamente presente en la muestra.
Molecular Cell Bioloqy de H.D. Lodish et al.
En otro tipo de experimento se revela la localización
de las moléculas marcadas radiactivamente sobre una
sección de un tejido por autorradiografia. En esta técni­
Seguimiento de moléculas mediante ca, que realmente toma una fotografia de los radioisóto­
radioisótopos pos en los tejidos, se pone en contacto una delgada lámi­
na de tejido que contiene el isótopo radiactivo con una
Muchas veces, se puede obtener una mejor comprensión emulsión fotográfica. Transcurridos unos días o hasta
de los procesos fisiológicos, conociendo los movimien­ semanas, las partículas emitidas por el radioisótopo han
tos de las moléculas dentro de y entre las células. Por expuesto la placa fotográfica, produciendo granos neg­
ejemplo, podemos comprender mejor el papel de una de­ ros que corresponden a la localización de las moléculas
terminada neurohormona en la regulación de procesos marcadas en el tejido (Fig. 2­1). Este registro cualitativo
fisiológicos, si se puede seguir sus movimientos desde su puede ser cuantificado midiendo el grado de exposición
lugar de síntesis hasta el de liberación o hasta su punto de la emulsión en un densitómetro y comparándolo con
de acción. Muchos tipos de experimentos que siguen el las exposiciones de estándares de concentración conoci­
movimiento de moléculas importantes desde un punto da; de esta manera se puede determinar la concentración
de vista fisiológico emplean radioísétopos, isótopos ra­ real de una molécula marcada en el tejido o en sus por­
diactivos de los elementos químicos, relativamente ines­
tables y en continua desintegración. La desintegración
Caudado-putamen
natural de los radioisótopos está acompañada por la li­
beración de partículas de alta energía, que pueden ser
detectadas con los instrumentos apropiados. Con la ex­
cepción del 1251, que emite partículas y, los isótopos usa­
dos comúnmente en la investigación biológica emiten
partículas p.
Aunque los radioisótopos se dan de forma natural, los
que se utilizan normalmente en estudios experimentales
han sido producidos en reactores nucleares. Los isóto­
pos utilizados más comúnmente en la investigación
biológica son 32P, 1251, 35S, 14C, 45Ca y 3H. Se puede
incorporar un radioisótopo de un elemento presente
normalmente en la molécula de interés en condiciones in
oitro o in vivo bien sea directamente en la molécula o en
una molécula precursora que se convertirá, finalmente, Figura 2-1. Las autorradiografías pueden revelar detalles es·
en la molécula que nos interesa. La molécula marcada tructurales y bioquímicos que no pueden observarse con las téc-
nicas tradicionales de fijación y tinción de tejidos. Esta autorra-
radiactioamente tiene las mismas propiedades químicas diografía muestra una sección frontal a través del cerebro de rata
y bioquímicas que las moléculas sin marcar. Un impre­ después de que los receptores cannabioides se han unido a un
sionante surtido de moléculas biológicamente activas, cannabioide sintético (muy parecido al ingrediente activo de la
marcadas radiactivamente (p. ej., aminoácidos, azúcares, marihuana) marcado radiactivamente. Las áreas más radiactivas
(es decir, las áreas con más receptores cannabioides) han ex-
hormonas, proteínas), están disponibles en la actualidad
puesto más intensamente a la película fotográfica sobre la que se
(a un precio sustancial) por parte de compañías especia­ situó la sección de cerebro, y aparecen como las áreas oscuras en
lizadas en su producción. Una vez se ha marcado radiac­ el cuerpo estriado tcaucado-putemen). que interviene en las fun-
tivamente a una molécula, las partículas emitidas por el ciones motoras. (Cortesía de Miles Herkenham, NIMH.J
20 PRINCIPIOS OE FISIOLOGIA
............................ ­ -
cienes. La autorradiograña ha sido especialmente útil en
la neurobiología, la endocrinología, la inmunología y
otras áreas de la fisiología en las que está implicada la
comunicación célula a célula.
Localización .de moléculas con anticuerpos
monoclonales
El. examen microscópico de una estructura biológica en
una sección de tejido fijado puede resultar desalentador.
Aun cuando el tejido haya sido teñido de manera que los
núcleos celulares aparezcan de color púrpura oscuro y
las membranas celulares con una tonalidad más clara,
por ejemplo, sigue siendo dificil discriminar los detalles
del tejido. Es posible obtener una visualización mucho
mejor de los detalles estructurales de las células con una
tincián con anticuerpos. Esta notable técnica permite la
localización de moléculas presentes a unas concentra­
ciones tan extremadamente bajas que son difíciles de es­
tudiar por otras técnicas.
La tinción por anticuerpos generalmente supone la
unión covalente de un colorante fluorescente con un anti­
cuerpo que reconoce un determinante específico de una
molécula de antígeno. (Aunque a menudo pensamos en
los antígenos como microbios patógenos o materiales ex­
traños como polen, normalmente las moléculas activas
biológicamente como neurotransmisores y reguladores
del crecimiento celular, pueden actuar como antígenos e
inducir la producción de anticuerpos específicos cuando
se les inyecta en un animal apropiado.) Los anticuerpos
idénticos producidos en respuesta a un antígeno se deno­
minan anticuerpos monoclonales, sin embargo, la mayoría
de antígenos naturales tiene múltiples determinantes en
vez de uno sólo, así que la producción de varios anticuer­
pos diferentes es la más probable. Una mezcla de anti­
cuerpos que reconocen diferentes determinantes de un
mismoantígeno se denomina polidonal. Una vez que se
batí producido los anticuerpos que reconocen mios pun­
tosdeterminadosde una molécula de interés y se les ha
unido a un colorante fluorescente, deben serinyectados
en las células o tejidos bajo estudio. ­Durante la pasada
década 'los investigadores han ido utilizando, cada vez
más, combinaciones de anticuerpos monoclonales y po­
liclonales para lá tínción con anticuerpos, especialmente
en microscopia de irimunofluorescencia (Fig. 2­2).
Eri vez de esto, pueden utilizarse anticuerpos mono­
clonales marcados radiactivarnente y localizar los com­
plejos antígeno­anticuerpo formados en una muestra
por medio de autorradiograña, Este enfoque se ha utili­
zado para localizar las hormonas adrenalina.' y noradre­
nalina ea el interior de ciertas células de la médula adre­
nal, como se describe en el Capítulo 8. Los anticuerpos
monoclonales pueden utilizarse no sólo en el seguimien­
to de moléculas· específicas dentro de las células, sino
en
también en su purificación 'como se describe un apar­
tado posterior. Tales moléculas purificadas pueden utili­
zarse en estudios detallados de su estructura y función.
.
Figura 2-2. Tanto los anticuerpos monoclonales como los poli·
clonares se utilizan frecuentemente en la tinción con anticuerpos.
En esta micrografía de inmunofluorescencia de un cultivo de 10
días de médula espinal de rata, se han utilizado un anticuerpo
monoclonal de ratón (verde) y un anticuerpo potlclonal de conejo
(rojo) que es específico para una sola proteína, junto con un colo-
rante fluorescente azul que se une directamente al ADN. Pueden
observarse neuronas (en rojo), astrociros (en verde) y ADN (en
azul). [Cortesía de Nancy L. Kedersha/lmmuno Gen.)
El avance crucial que hizo factible la tinción por anti­
cuerpos fue el desarrollo de un método para la produc­
ción de grandes cantidades de anticuerpos monoclona­
les. El aislamiento y purificación de un sólo tipo de
anticuerpo monoclonal procedente del antisuero obteni­
do de animales expuestos al correspondiente antígeno
no es práctico, porque cada tipo de anticuerpo está pre­
sente sólo en cantidades muy pequeñas. Más aún, los
linfocitos B que producen los anticuerpos mueren nor­
malmente aJ cabo de unos pocos días, así que no pueden
ser cultivados durante largos períodos de tiempo. A me­
diados de los años setenta, G. Kohler y C. Milstein des­
cubrieron que los linfocitos B normales pueden fusio­
narse con linfocitos cancerosos denominados células de
mieloma, que crecen en cultivo de forma indefinida (o
sea, forman una línea celular «inmortal»). Las células hí­
bridas resultantes, llamadas bibridomas, se expanden so­
bre un medio de cultivo sólido en una placa de Petri,
Cada célula crece en un clon de células idénticas, cada
una de las cuáles secreta un único anticuerpo monoclo­
nal. Los clones son entonces inspeccionados para identi­
ficar cuales de ellos secretan el anticuerpo deseado; estas
líneas celulares se autoperpetúan, ya que pueden mante­
nerse en· cultivo indefinidamente y utilizarse para obte­
ner grandes cantidades de un anticuerpo monoclonal
homogéneo (Fig. 2­3). Aunque cualquier investigador
puede producir y mantener sus propias líneas celulares
de hibridoma, la mayoría prefieren obtener anticuerpos
monoclonales específicos preparados por compañías es­
pecializadas en su producción. (La próxima vez que va­
ya a la biblioteca de su facultad o colegio mayor, busque
la revista Science y échele un vistazo a los anuncios clasi­
 MÉTODOS EXPERIMENTALES EN FISIOLOGÍA 21
...............................................................................
Figura 2-3. Las líneas celulares de hibrt-
doma secretan anticuerpos monoclona-
les «puros» (homogéneos). Para prepa-

�,,,,.
rar anticuerpos monoclonales, primero
se fusionan células del bazo productoras
Cultivo celular de la de anticuerpos con células de rníeloma
línea de mieloma
derivadas originariamente de linfocitos
B. Después se separan las células híbri-
Fusión en das, o hibridomas, que secretan el anti-

i
polietilenglicol cuerpo específico para la proteína que in-

­­­­­···••
teresa. Se las puede mantener en cultivo
celular, donde secretan grandes cantida-
des de anticuerpo especifico, o se las

ºº
ººº
puede inyectar en un ratón huésped don-
de inducen la producción del anticuerpo.
Células del bazo Células de mieloma

. I Transferencia de �álulas
i a un medio selectivo

WilililiJ
i Selección de células híbridas

I Selección de células que producen

l el anticuerpo deseado

Crecimiento en
cultivo masivo
.. ��

'r ..(
>­
i
...
­( >­ ­( ).
�
­(
..(

... 'r

Anticuerpo Anticuerpo

ficados que vienen en la parte de atrás.) El desarrollo de
la tecnología de los anticuerpos monoclonales por Koh­
ler y Milstein, revolucionó la biología molecular de tal
modo que recibieron el premio Nobel por su investiga­
ción.
Ingeniería genética
La ingeniería genética abarca varias técnicas para lama­
nipulacióndel material genético de un organismo. Este
enfoque es cada vez más usado tanto en agricultura
como en medicina y resulta considerablemente promete­
dor para los investigadores en fisiología animal. Dichas
técnicas hacen posible producir grandes cantidades de
moléculas biológicamente importantes (p. ej., hormonas)
que normalmente se hallan a muy baja concentración,
obtener animales con mutaciones que afecten a procesos
biológicos específicos y conseguir animales que sinteti­
cen cantidades por encima o por debajo de lo normal de
un determinado producto génico.
La ingeniería genética comienza con la idee .ón
del gen estructural que codifica a una proteína específica
en el ADN aislado del organismo de interés. Por ejem­
plo, se puede identificar en el ADN aislado de células
humanas al gen que codifica la insulina. El fragmento de
ADN que contiene el gen para la insulina que nos intere­
sa puede ser «recortado» de las largas cadenas originales
del ADN humano e insertarse en un vector de clonaje,
que es un elemento de ADN que puede replicarse dentro
de células huésped apropiadas, independientemente del
ADN de estas células. La inserción de un fragmento de
ADN extraño (p. ej., e) gen de la insulina humana) en un
vector de clonaje da lugar a un ADN recembinante, que
es cualquier molécula de ADN que contenga ADN de
dos o más fuentes distintas.
Los plásmidos bacterianos son el tipo más común de
vector de clonaje. Se trata de moléculas de ADN circular
extracromosómico que se autorreplican en el interior de
las células bacterianas. Bajo determinadas condiciones,
un plásmido recombinante conteniendo un gen de inte­
rés es. incorporado por la bacteria, común Escherichia
 22 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
coli, un proceso denominado transformación (Fig. 2­4).
Normalmente, sólo una única molécula de plásmido es
absorbida por una célula bacteriana cualquiera. Dentro
de la célula transformada el plásmido incorporado pue­
de replicarse, y conforme la célula se divide en un grupo
de células idénticas, o clon, el plásmido se desarrolla. Así
cada célula del clon contiene al menos un plásmido con
el gen que interesa. Este procedimiento genera) de inge­
niería genética denominado clonaje de ADN o clonaje de
genes, puede usarse para obtener una «biblioteca» de
ADN que consiste en múltiples clones bacterianos, cada
uno de los cuales contiene un gen específico humano o
de otras especies. Se usan diversas variaciones del clona­
je de ADN dependiendo del tamaño y del número de
genes del organismo objeto de estudio.
Poblaciones clónicas en medicina e investigación
Bajo condiciones ambientales apropiadas, el ADN re­
combinante de un clon de E. coli transformado gené­
Plásmido vector
Fragmento
••
deADN
Plásmido vector
recombinante
Cromosoma bacteriano �
Figura 2-4. El clonaje de ADN es una forma de aislar y mantener
genes individuales. En el procedimiento de clona je que se ilustra,
se inserta un fragmento específico del ADN a clonar en un plás-
mido vector, que también contiene un gen que le confiere resis-
tencia al antibiótico ampicilina. Cuando los plásmídos recombi-
nantes resultantes se mezclan con células de E. coli, unas pocas
de ellas incorporan el plásmido, que puede replicarse en el inte-
rior de las células. Si éstas se colocan en un medio que contenga
ampicitina, sólo aquellas que han incorporado el vector crecerán.
Conforme cada célula seleccionada se multiplica, acaba final·
mente formando una colonia de célutes (clon) en el que todas
ellas contienen el plásmido recombinante. ·
ricamente se transcribe a ARN mensajero, que se uti­
liza para dirigir la síntesis de la proteína codificada.
Las compañías comerciales, por ejemplo, cultivan cé­
lulas de E. coli portadoras de ADN recombinant.e que
contiene el gen para la insulina humana, u otras hor­
monas, en fermentadores enormes; tras la recolección
de las células bacterianas, se pueden aislar de forma
relativamente fácil grandes cantidades de la hormo­ .
na humana. Anteriormente, las hormonas necesarias
para el tratamiento de personas con desarreglos endo­
crinos se extraían de los tejidos de otros mamíferos
como vacas y cerdos. Dado que las hormonas se encu­
entran en concentraciones bastante bajas, este es un
proceso largo y caro. La producción de estas hormo­
nas con bacterias manipuladas genéticamente ha de­
mostrado ser mucho mas barato y proporciona un pro­
dueto más puro. Más aún, las hormonas aisladas de
otras especies de mamíferos inducen con frecuencia
una respuesta inmune en las personas, una complica­
ción que no se produce con la propia hormona huma­
na obtenida a partir de bacterias manipuladas genéti­
camente.
La tecnología del ADN recombinante es también una
potente herramienta en la investigación básica de las al­
teraciones genéticas en humanos. Mediante el aislamien­
to y el estudio de los genes asociados a las enfermedades
hereditarias, los científicos pueden determinar la base
molecular de tales enfermedades. Esto, seguramente,
conducirá a disponer de mejores métodos para su con­
trol, o incluso para su curación. Durante los últimos
años numerosos laboratorios de todo el mundo han
puesto en marcha un proyecto global para obtener el
«mapa» con la localización de todos los genes humanos
en las largas cadenas de ADN de los cromosomas huma­
nos y determinar su secuencia de nucleótidos. El Proyec­
to Genoma Humano está proporcionando datos de in­
calculable valor a los investigadores que estudian las
enfermedades genéticas.
El clonaje de ADN y la tecnología del ADN recombi­
nante forman también la base de la terapia génica. En
esta estrategia de tratamiento de los individuos con alte­
raciones genéticas, se introduce en el paciente la forma
normal del gen que se ha perdido o que es defectuoso.
Por ejemplo, las personas que padecen Iibrosis quistica
tienen un gen CFTR defectuoso y no pueden producir la
proteína normaJ codificada por este gen. Un resultado
de este defecto es la producción de una gruesa mucosi­
dad en las vías aéreas pulmonares, lo que conduce a
problemas respiratorios potencialmente letales. Los bió­
logos moleculares ban transformado el virus del resfria­
do común con el gen CFTR normal. Cuando se infectó a
algunos pacientes con fibrosis quística con el virus del
resfriado transformado, las partículas víricas transpor­
taron el gen humano normal a las células pulmonares
del paciente, donde se establecieron. La síntesis subsi­
guiente del producto génico normal ayudó a aliviar la
mayoría de los síntomas de la fibrosis quística en los pa­
cientes tratados.

..... . . . . . . . . . ... . . . . . . . . . . . .
Se ha desencadenado. una considerable ,
controversia sobre el uso de ta ingenierla
genética para la producción de productos .
bioquímicos, principalmente por temor a
que microorganismos modificados gené-
ticamente pudieran escapa� al ambiente y
producir efectos inesperados como enfer-
medades a los humanos o a los animales
domésticos. Sin embargo, muchos mi-
croorganismos manipulados por ingenia-
rla genética han sido modificados para ha-
cerles Incapaces de vivir' fuera de la
factori.a química para la que han sido dise-
ñados. Asumiendo que no se pueda modi-
ficar nada acerca de la_bioqulmica o la ñsio-
logla de una bacteria (p. ej., �I rango de
temperatura que tolera o las sustancias
químicas que utiliza como sustratos meta-
bólicos), ¿cómo podría ase�urarse que
una bacteria manipulada por ingeniería
genética no pudiese sobrevivir e'n el am- · '
biente natural si se propagilse it él?
Mutantes «a medida»
Como se mencionó en el Capítulo 1, las mutaciones son
cambios permanentes en la secuencia de nucleótidos del
ADN. Las mutaciones, que pueden ocurrir espontánea­
mente o ser inducidas experimentalmente, se duplican y
pasan a células hijas en el momento de la división celu­
lar. Los genes mutantes pueden proporcionar muchisi­
ma información acerca de cómo funcionan los procesos
biológicos. La interrupción específica en un proceso fi­
siológico como resultado de un gen mutante individual
puede señalar las funciones controladas por determina­
dos genes, una información que no puede ser obtenida
con las técnicas fisiológicas convencionales.
Por ejemplo, los fisiólogos cardiovasculares están
produciendo y analizando los efectos de mutaciones en el
pez cebra para comprender el desarrollo del corazón. En
la investigación descrita por J. N. Chen y M. Fishman
(1997), se han producido docenas de mutaciones cardio­
vasculares específicas en esta especie. El proceso se inicia
cuando se expone un pez cebra adulto a poderosos mu-
táqenos, compuestos que producen mutaciones perma­
nentes en la línea celular germinal, Los emparejamientos
subsiguientes de las generaciones F 1 y F2 producen em­
briones con un gran número de mutaciones. Muy de vez
en cuando, aparece un embrión con la mutación específi­
ca en la estructura o proceso de interés. El grupo de
Fishman, por ejemplo, ha identificado mutaciones que
dan lugar a un corazón con paredes ventriculares anor­
malmente delgadas y otra con una constricción en el
conducto arterial de salida del corazón, ambas condicio­
nes mimetizan estados patológicos en seres humanos. ·
Las mutaciones producen a menudo efectos anorma­
les sólo en los homozigotos (es decir, cuando el indivi­
MÉTODOS EXPERIMENTALES EN FISIOLOGÍA 23
... . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . .. . . .. . . . . .
duo recibe una forma mutante del gen de cada uno de
sus padres). Aun cuando una mutación ca.usa una condi­
ción letal incompatible con la supervivencia a largo pla­
zo, debe de ser «preservada» en los padres, que son hete­
rozigotos para la mutación, es decir, que presentan una
forma normal y otra mutada de este gen. Cada vez que
estos padres se reproducen, algunos descendientes serán
homozigotos y mostrarán los efectos anormales. Así
pues, los padres heterozigotos son una «biblioteca gené­
tica viviente» de estas mutaciones.
Animales transqénicos
Los animales transgénicos son otro tipo de organismos,
producidos por ingeniería genética, con un gran poten­
cial para realizar contribuciones importantes a la fisiolo­
gía. Un animal transgénico es aquél cuya constitución
genética ha sido alterada experimentalmente por la adi­
ción o sustitución de genes de otros animales de la mis­
ma o de otras especies. Los animales transgénicos (espe­
cialmente los ratones) se hallan al frente del abanico de
modelos animales que están ayudando a los investiga­
dores a comprender procesos fisiológicos básicos y los
estados patológicos que son el resultado de su disfun­
ción.
Se han empleado numerosas técnicas para producir
animales transgénicos. En un método el ADN «extraño»
que contiene el gen de interés, denominado transqén, es
inyectado en el pronúcleo de huevos fertilizados (co­
múnmente de ratón), que son entonces implantados en
hembras en pseudogestación. Con una frecuencia relati­
vamente baja, el transgén es incorporado en el ADN
cromosómico en los embriones en desarrollo, propor­
cionando una descendencia que porta el transgén en to­
das sus células de la línea germinal y en las células somá­
ticas (Fig. 2­5). Los ratones que expresan el trausgén son
emparejados para producir una línea transgénica. Esta
estrategia se utiliza para añadir genes funcionales, tanto
si son copias adicionales de un gen que ya está presente
en el animal o de un gen ausente normalmente, causan­
do la sobreexpresión del producto génico. El ulterior
análisis de la morfología y de la fisiología de los anima­
les transgénicos puede proporcionar importantes datos
sobre procesos fisiológicos, que no podrían ser investi­
gados fácilmente de otra manera.
Los animales transgénicos caracterizados por una sub­
expresión o por la ausencia total de expresión de un gen
particular, pueden ser igualmente informativos. M. R.
Capecchi (1994) ha modificado una técnica para reem­
plazar un gen funcional por otro defectuoso, producien­
do de esta manera lo que se conoce como ratones «knoc-
kout». Estos ratones no pueden expresar la proteína
codificada inicialmente por el gen reemplazado, y care­
cen así de las funciones correspondientes a la proteína
perdida. Mediante el examen del efecto de tal ablación
funcional de genes, puede determinarse la base molecu­
lar y genética de procesos fisiológicos. Los ratones
«knockout» están siendo utilizados ampliamente para
24 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
X rán tres técnicas celulares muy comunes y productivas:
!
Huevos fertilizados recogidos
de una hembra
Inyección del ADN
clonado en uno de
los pron úcleos
Un 10-30% de la prole contiene el transgén
!
X la micropipeta (o el microelectrodo) en un micromanipu-
­ a los transgénicos para mantener
Se cruza
el ADN en la línea germinal
Figu�a 2-5. Un animal transgénico se produce por adición o sus-
tiWción de genes procedentes de otro anirnat de la misma o de
diferente especie. Para introducir un transgé'n en un ratón, se in-
yecta ADN clonado «extraño» en huevos fertilizados, que se im-
plantan en una hembra. Una proporción de la prole viable reten-
drá el transgén que puede mantenerse en· la línea germinal
mediante reproducción selectiva.
desentrañar procesos fisiológicos humanos, ya que los
genes de ratones y humanos son idénticos en más de un
98 %. Por citar un par de ejemplos, los investigadores
q_ue estudian los genes normales que regulan el desarro­
llo temprano del corazón en el embrión y los oocogeoes
responsables de algunos tipos de cáncer utilizan en sus
estudios ratones «knockout»,
TÉCNICAS CELULARES
La comprensión de las células y del comportamiento ce­
lular es un objetivo importante en muchos experimentos
de fisiología. Con el conocimiento de la comunicación y
del comportamiento celular, se puede comenzar a enten­
der cómo funcionan las comunidades de células como
un tejido, y los tejidos como órganos. El análisis fisioló­
gico a nivel celular se ha desarrollado mucho más vigo­
rosamente con la puesta a punto de varias técnicas que
hoy en día son de uso común. En esta sección se estudia­
el registro con microelectrodos, la microscopía y el culti­
vo celular.
Uso de microelectrodos y micropipetas
En muchos experimentos de fisiología celular se usan
micropipetas o varios tipos de microelectrodos. Estas fi.
nas «agujas» de vidrio, que pueden insertarse en los tejí­
dos o incluso en células individuales, se utilizan para me­
dir diversas propiedades de las células o inyectar
materiales en su interior. Aunque los fisiólogos celulares
emplean estos instrumentos con diversos fines, la tecno­
logía para su fabricación se desarrolló hace ya unas dé­
cadas. En esencia, se calienta la región del centro de un
capilar de vidrio hasta el punto de fusión. Entonces se
estiran los extremos de] tubo en dirección opuesta, lo
que hace que la parte central fundida del vidrio se adel­
gace hasta un diámetro inapreciable a simple vista, justo
antes de que se rompa y se separe. Como resultado de
este proceso, se obtienen dos micropipetas cada una de
ellas con un extremo tan fino que puede llegar a ser has­
ta de sólo una micra de diámetro. Cuando se llena una
micropipeta con una disolución apropiada, puede fun­
cionar como un microelectrodo. Típicamente, se monta
lador, un dispositivo mecánico en el que se fija la pipeta
y que permite desplazar gradualmente su punta en los
tres planos del espacio.
Medición de las propiedades eléctricas
Puesto que las neuronas se comunican por medio de se­
ñales eléctricas, se pueden utilizar microelectrodos para
«fisgonear» su comunicación, midiendo las señales eléc­
tricas a través de la membrana celular y los cambios en
estas señales bajo diferentes condiciones. Los microelec­
trodos utilizados para medir el potencial eléctrico (vol­
taje) a través de la membrana celular, no generan prácti­
camente ninguna corriente entre la célula y el propio
electrodo. Así pues, en la célula nerviosa no hay ninguna
interrupción, o es inapreciable, cuando se intercepta su
comunicación con las células vecinas.
Se puede fabricar un microelectrodo para el registro
de señales eléctricas de las neuronas, o de las células
musculares, llenando una micropipeta con una solución
iónica conductora (típicamente KCI) y conectándola a
un amplificador apropiado. Un segundo electrodo, co­
nectado también al amplificador, se coloca en el líquido
o en el organismo en la proximidad del primer electrodo.
Cuando la punta del primer electrodo es empujada has­
ta atravesar la membrana celular, y penetra en el cito­
plasma, completa un circuito eléctrico, cuyas propieda­
des (voltaje, tlujo de corriente) pueden medirse. Nuestra
comprensión de la actividad eléctrica de la célula se ha
incrementado espectacularmente desde que empezaron

a utilizarse en los años cincuenta las técnicas de registro
con microelectrodos,
Uno de los avances más revolucionarios en la meto­
dología del registro con microelectrodos es el «patch­
clamp». Con esta técnica se puede registrar in situ el
comportamiento de una sola molécula proteica que for­
ma un canal iónico, como se ilustra en la Figura 2­6.
Este método constituye el núcleo de la reciente explo­
sión de conocimiento acerca de las membranas, de sus
A Micropipeta de vidrio
Líquido conductor
de corriente
Sellado hermético
Membrana
­��......_;....
plasmática
Célula
B microelectrodo. Los microelectrodos selectivos para
figura 2-6. El registro de «patch-ctarnp» permite determinar el
movimiento de iones a través de un pequeño parche de la mem-
brana que contiene canales iónicos transmembrana, (Al Diagra-
ma del «patch-ctamp». Cuando se aplica a la superficie celular un
microelectrodo con la punta redondeada al fuego, se forma un
sellado de alta resistencia entre la punta del electrodo y la rnem-
brana. Este sellado hermético permite la medición directa de las
características del trozo de la membrana adherido bajo la punta.
Usualmente, tan sólo quedan debajo de la punta unos pocos ca-
nales iónicos transmembrane. lo que permite medir directamen-
te el flujo de corriente a través de ellos. (BI Microfotografía mos-
trando la punta de una micropipeta apoyada sobre el soma
celular de una neurona. La punta tiene un diámetro de alrededor
de 0.5 ¡,m. [Parte.B de Sakmann, 1992.J
MÉT'ODOS EXPERIMENT'ALES EN FISIOLOGÍA 25
canales y de cómo éstos regulan el movimiento de mate­
riales a través de la membrana (véanse los Capítulos 4­6).
Medición de las concentraciones de iones y de gas
Pueden utilizarse microelectrodos especialmente cons­
truidos para medir la concentración intracelular de
iones inorgánicos comunes incluyendo H+, Na ", K +,
Cl ­ , Ca 2·+ y Mg2 +. Dado que las células usan los movi­
mientos de iones a través de las membranas celulares
para comunicarse .Y realizar trabajo, la magnitud, la di­
rección y la secuencia temporal de los movimientos ióni­
cos proporcionan importante información sobre deter­
minados procesos. Actualmente también se dispone de
microelectrodos que miden las presiones parciales de los
gases (p. ej., 02 y C02) disueltos en un líquido. Para me­
dir la concentración de un ion determinado (p. ej., Na+)
se obtura la punta de un microelectrodo con una resina
de intercambio ióoico permeable sólo a este ion. El resto
del electrodo (el «barril») se llena con una concentración
conocida del mismo ion. El potencial eléctrico medido
con el microelectrodo cuando no hay flujo de corriente
refleja la relación entre las concentraciones iónicas a am­
bos lados de la barrera de intercambio en la punta del
protones son particularmente útiles para la medición del
pH sanguíneo y de otros líquidos corporales.
Medición de la presion intracelular y sanguínea
Actualmente se están utilizando microelectrodos para la
medición de presiones hidrostáticas dentro de células
individuales y de vasos ­sanguineos microscópicos (de
hecho, en cualquier espacio lleno de líquido en el que
pueda insertarse la punta del microelectrodo). Para
comprender el principio de estos sistemas de micropre­
sión consideremos un pequeño vaso sanguíneo. Se inser­
ta en el vaso a estudiar un microelectrodo montado en
un micromanipulador y lleno de una solución con una
concentración de al menos 0.5 M NaCI. La mayor pre­
sión en el interior del vaso hace que la interfase entre el
plasma y la solución que llena el electrodo se mueva ha­
cia el interior del mismo. Como resultado de este despla­
zamiento, aumenta la resistencia a través de la punta del
electrodo, ya que la resistencia del plasma es mayor que
la de la solución de NaCI. Se mide el cambió de resisten­
cia que es proporcional al cambio en la presión sanguí­
nea. Una bomba asociada automáticamente con el siste­
ma de micropresión produce una presión en el interior
del microelectrodo que compensa exactamente la pre­
sión en el interior del vaso. Esta presión opuesta man­
tiene la interfase en una posición estacionaría; por esta
razón se Je denomina servosistema regulador. La pre­
sión requerida para mantener el equilibrio, que es gene­
rada porel sistema de micropresión, se registra conti­
nuamente con un transductor de presión convencional
como los que se utilizan para medir la presión sanguínea
en vasos mucho mayores.
26 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
.. .. .. . . . . .. . . .
. . . - . . . . . . . . . . . . . .
Los sistemas de micropresión han ampliado enorme­
mente nuestro conocimiento de la ontogenia de la fun­
ción cardiovascular en larvas y embriones en desarrollo.
Estas técnicas han permitido también mediciones car­
diovasculares directas en individuos adultos de animales
muy pequeños como los insectos.
Microinyeccion de materiales en las células
Además de su uso como microelectrodos, las micropipe­
tas pueden usarse también para inyectar sustancias den­
tro de células individuales. Estas sustancias pueden ser
moléculas activas que producen un cambio mensurable
en la función de la célula o del tejido. Por ejemplo, se
pueden inyectar fármacos que afectan a la presión san­
guínea y a la frecuencia cardíaca en vasos sanguíneos
muy pequeños (p. ej., los que tapizan la cáscara de un
huevo de ave) o en el corazón microscópico de un em­
brión de rana.
Opcionalmente la sustancia inyectada puede tratarse
de un colorante para marcar las células inyectadas, ayu­
dando así a revelar procesos celulares ­o al seguimiento
de las células cuando se dividen. Una variación clásica
de esta técnica utiliza peroxidasa de rábano picante, un
enzima derivado de la planta de rábano picante que for­
ma un producto coloreado a partir de sustratos específi­
cos incoloros. Cuando se inyecta este enzima mediante
una micropipeta en las expansiones de las neuronas (es­
pecialmente en los axones), sufre transporte retrógrado
hacia el soma neuronal; la subsiguiente inyección del
sustrato genera una traza coloreada entre el punto de
inyección y el soma celular. Por medio de esta técnica se
pueden destacar los nervios periféricos en sentido retró­
grado hasta su origen en el sistema nervioso central, una
tarea que se había resistido hasta a los más experimenta­
dos neuroanatomistas usando las técnicas tradicionales.
Análisis estructural de células
La función celular es dependiente de su estructura, rea­
firmando así el tema central comentado en el Capítulo 1
de que una fuerte relación entre estructura y función go­
bierna la fisiología animal. Los fisiólogos utilizan comú­
nmente el análisis estructural a nivel celular para com­
pletar las mediciones fisiológicas con objetó de descubrir
como funcionan los animales. Tales análisis dependen
de diferentes tipos de microscopia, puesto que las células
animales tienen generalmente entre 10­30 µm de diáme­
tro, lo cual está muy por debajo de la partícula más pe­
queña visible para el ojo humano.
Microscopia óptica
La microscopia óptica, como su propio nombre indica,
utiliza los fotones de luz visible, o cerca del espectro de
luz visible, para iluminar células especialmente prepara­
das. Bajo condiciones óptimas, la resolución, o mejor di­
.........................................
. . ­ . .
cho, el poder de resolución, de los microscopios ópticos
es de unas pocas micras; dos objetos que estén más pró­
ximos que el poder de resolución de un microscopio
aparecerán como uno solo. Conforme ha ido mejorando
la resolución de los microscopios, ha crecido nuestra
comprensión de la estructura de las células y de sus com­
ponentes.
Dado que las células extraídas de un animal mueren
rápidamente, los tejidos deben ser preparados con cele­
ridad para evitar la degradación de los constituyentes
celulares. La fijación consiste en la adición de sustancias
químicas especiales (p. ej., formol), que matan a las célu­
las e inmovilizan sus constituyentes, entrelazando los
grupos amino de las proteínas con enlaces covalentes.
Las células fijadas pueden entonces tratarse con colo­
rantes u otros reactivos que tiñen determinadas caracte­
rísticas celulares, lo que permite la visualización de las
células, que de otra manera resultan incoloras y translú­
cidas.
La fijación y tinción de grandes bloques de tejido no
es factible y no permite la visualización de las células
individuales. Generalmente se cortan pequeños bloques
de tejido en secciones o rebanadas ultrafinas con un gro­
sor de 1­10 µm utilizando una cuchilla especial denomi­
nada micrótomo. Dado que la mayor parte de los tejidos
son frágiles, incluso cuando están fijados, se les incluye
en algún medio de soporte (p. ej., cera, plástico, gelatina)
mientras se les secciona. Tales medios rodean y se infil­
tran en el tejido endureciéndolo para que pueda ser cor­
tado. Las secciones de tejido se colocan sobre portaobje­
tos de vidrio para su tinción y posterior examen en el
microscopio (Fig. 2­7A). En algunos casos la inclu­
sión del tejido compromete la estructura d.e la célula o
de su contenido, de manera que no pueden ser teñidas o
marcadas con compuestos especiales antes de su exa­
men. Un método alternativo es congelar el tejido en
lugar de incluirlo, lo que hace que el hielo actue como
soporte del tejido para su ulterior sección. Una vez pre­
parado el tejido, se examina en un microscopio óptico
compuesto, el tipo más sencillo de microscopio óptico
(Fig. 2­ 78).
A la vez que se bao desarrollado mejoras en los siste­
mas ópticos disponibles, también se han perfeccionado
las técnicas de tinción. Muchos colorantes orgánicos,
originariamente desarrollados para su uso en la indus­
tria textil, se utilizaron a través del sistema de acierto o
error hasta descubrir que teñían selectivamente constitu­
yentes celulares determinados. Algunos de estos colo­
rantes tiñen de acuerdo con la carga eléctrica, como la
hematoxilina que se une a moléculas cargadas negativa­
mente como el ADN, el ARN y las proteínas ácidas. Sin
embargo, la base de la especificidad de muchos coloran­
tes es desconocida.
La tinción con reactivos marcados con fluorescencia,
e11 vez de los colorantes tradicionales, incrementa la sen­
sibilidad de visualización. Las moléculas fluorescentes
trazadoras absorben la luz de una longitud de onda y
emiten en otra longitud de onda más larga. Cuando una

Muestra incluida en
parafina o resina
plástica y montada én
el brazo del micrótomo
Cuchilla de metal
o vidrio
Ttra de secciones finas
Tira de secciones sobre
el portaobjetos. teñidas
y montadas bajo
un cubreobjetos
Figura 2-7. Las muestras para observación en microscopía óptica se preparan mediante su corte en secciones y posterior tinción. (Al Las
células y tejidos extraídos de organismos vivos se fijan primero para preservar su estructura y se cortan después .en finas secciones con
una cuchilla de metal o vidrio. Estas secciones se montan sobre un portaobjetos, donde se las puede teñir para su posterior observación
en un microscopio óptico compuesto. (B) El microscopio óptico compuesto transmite la luz verticalmente a través de un condensador, la
propia muestra sobre el portaobjetos, un objetivo y, finalmente, un ocular, en el que se visualiza la imagen de la muestra. [Adaptado de
Lodish et al., 1995.J
muestra tratada con un reactivo fluorescente es exami­
nada a través de un microscopio de fluorescencia, ­sólo
son visibles aquellas células o componentes celulares
a las que se ha unido el reactivo (Fig. 2­8). Probablemen­
te la más común y útil de todos los tipos de microscopía
de fluorescencia es la microscopia de inmunofluorescencia
en la que las muestras se tratan con anticuerpos mono­
clonales y policlonales marcados con fluorescencia. Un
buen ejemplo de las imágenes obtenidas con esta técnica
se muestra en la Figura 2­2.
Como la microscopia de inmunofluorescencia pro­
porciona resultados pobres en secciones finas fijadas,
esta técnica se aplica normalmente a células enteras. Sin
embargo, las imágenes obtenidas por microscopia de
fluorescencia estándar de células enteras representa una
superposición de luz emitida que proviene de moléculas
marcadas localizadas a diferentes niveles de la célula.
Por esta razón, las imágenes frecuentemente son poco
nítidas. La microscopia de barrido confocal elimina este
problema proporcionando imágenes nítidas de muestras
marcadas con fluorescencia sin necesidad de realizar
cortes ultrafinos. En este tipo de microscopia, la muestra
es iluminada con la luz excitante de un haz láser enfoca­
do que recorre rápidamente las diferentes áreas de la
muestra en un solo plano. La luz emitida desde este pla­
MÉTODOS EXPERIMENTALES EN FISIOLOGÍA 27
B
Lente ocular
Prisma
de reflexión
Lentes del
objetivo
Muestra
Lentes del
condensador
Base del
microscopio
con la fuente
de iluminación
no es reconstruida por un ordenador en una imagen
compuesta. El rastreo repetido de la muestra en diferen­
tes planos proporciona los datos necesarios para que el
ordenador pueda crear una serie de secciones de las imá­
genes fluorescentes. La Figura 2­9 compara las imágenes
obtenidas con los microscopios de fluorescencia conven­
cional y confocal.
La visualización mediante otros tipos de microscopia
depende de que la muestra cambie una o más propieda­
des de la luz que atraviesa el tejido preparado sobre el
portaobjetos, más que de su fijación y tinción, Como
que tales métodos no requieren tinción, pueden ser utili­
zados en tejidos vivos, con tal de que sean lo suficiente­
mente delgados para permitir el paso de luz suficiente.
La microscopia de campo claro (Fig. 2­lOA) revela pocos
detalles en comparación con la microscopia de contraste
de fases, en la que la imagen tiene ctiferentes clases de
brillo y direccionalidad debido a la refracción diferencial
de la luz por parte de los diferentes componentes de la
muestra (Fig. 2­lOB). En la microscopia Nomarski, tam­
bién denominada microscopia de contraste de fases inter-
ferencial, se ilumina con un haz de luz polarizada escin­
dido en haces casi paralelos antes de su paso a través de
la muestra de tejido, y los haces que salen se reúnen en
una sola imagen. Las ligeras diferencias en el índice de
28 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
. . . . ... .......................
. . . . .
A
�Ocular

Fuente de luz
incidente r: -�Segundo
t===ff filtro de
corte

Filtro
dicromático

Primer filtro
de corte

Figura 2-8. Una muestra teñida con un marcador fluorescente

es observada a través de un microscopio de fluorescencia, que
produce una imagen sólo con las estructuras que se han unido al
marcador. La fuente de luz incidente atraviesa un filtro de corte
que deja pasar la luz azul (450-490 nm) para proporcionar una
iluminación óptima de la muestra. La luz incidente se dirige ha·
cia la muestra mediante un espejo de ranuras ordenadas que
refleja hacia abajo la luz con longitud de onda inferior a 510 nrn.
pero que transmite hacia arriba la luz con longitud de onda ma-
yor de 510 nm. Las señales fluorescentes emitidas desde la
muestra marcada, pasan a través de un segundo filtro de corte
que elimina las señales fluorescentes no deseadas y que no co-
rresponden a la longitud de onda emitida por el marcador para
teñir la muestra.

refracción o en el grosor de las partes adyacentes de la

muestra, se convierte en una imagen brillante si los haces 40¡1m

están en fase cuando se recombinan. o en una imagen
oscura si están desfasados. La imagen final da sensación
de profundidad en la muestra (Fig. 2­JOC). En la micros-
copia de campo oscuro, la luz se dirige hacia la muestra
desde el lado del observador de modo que este recibe la
luz reflejada por los constituyentes celulares. La imagen
aparece como si la muestra tuviese numerosas fuentes de
luz en su interior.
Además de la visión directa a través del microscopio,
las imágenes pueden almacenarse electrónicamente tras
su captura mediante cámaras digitales o de vídeo. Con
una cámara digital, se puede recoger una imagen a todo
color por medio de una rejilla bidimensional de elemen­
tos fotosensibles. Aunque las cámaras digitales propor­
cionan una resolución muy alta, requieren una intensi­
dad de luz elevada. En cambio, la cámara de vídeo
puede usarse para captar imágenes de acuerdo con un
patrón de rastreo preestablecido, al tener menos requeri­
mientos luminosos. Además, la alta sensibilidad lumino­
sa de las cámaras de vídeo permite la observación de las
células durante períodos largos sin ningún daño asocia­
do a su iluminación. Tal intensificación de la imagen es
particularmente importante para la observación de célu­
las vivas que contengan moléculas marcadoras fluores­
centes, que pueden resultar tóxicas para las células a ele­
vadas intensidades luminosas.
Figura 2-9. La microscopia convencional proporciona imágenes
diferentes del material biológico que la microscopía confocal. Es·
tas microfotografías corresponden a un huevo fertilizado de erizo
de mar, lisado durante su primera mitosis. Se utilizó un anticuer-
po marcado con fluoresceína para unirse a la tubulina, un cornpo-
nente estructural mayoritario del huso rnitótico. (A) La rnicrosco-
pía de fluorescencia convencional ofrece una imagen difuminada
como consecuencia de que las moléculas de fluoresceína se ha·
llan por encima y por debajo del plano focal. (B) La microscopia
confocal, que detecta la fluorescencia sólo dentro del plano enfo-
cado, produce una imagen mucho más nítida del mismo huevo
de erizo de mar. (De White et al., 1987]
Microscopia electrónica
En todos los dispositivos de obtención de imágenes, el
límite de su resolución está relacionado directamente
con la longitud de onda de la luz incidente. Es decir,
cuanto más corta es la onda de iluminación, más peque­
ña es la distancia mínima entre dos objetos discernibles
(o sea, mayor es la resolución). En la microscopia elec­
trónica, en vez de luz visible se usa como fuente de ilumi­
nación un haz de electrones de alta velocidad. Como la
longitud de onda de los haces de electrones es mucho
más corta que la de la luz visible, los microscopios elec­
trónicos tienen una resolución mucho mejor. En efecto,
los microscopios electrónicos de transmisión modernos
 MÉTODOS EXPERIMENTALES EN FISIOLOG[A 29
. . . . . . . . . . . . . . ..... . . . ....... . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
A Campo claro B Contraste de fases C Nomarski

50µm 50µm 50µm

Figura 2-10. Las diferentes técnicas de microscopia óptica proporcionan imágenes notablemente diferentes. {A) Imagen en campo claro
de una célula obtenida con una muestra sin teñir, tal y como se observa a través de microscopio óptico compuesto, presenta bajo contras-
te y muestra pocos detalles. (B) La imagen en contraste de fases aumenta el contraste visual entre las diferentes regiones de la muestra.
(Cl La microscopia de contraste de fases interferencia! de Nomarski proporciona sensación de profundidad a la imagen. [Cortesía de
Mathew J. Footer.l

tienen normalmente un poder de resolución de 0.5 nm
(5 angstroms, Á), mientras que los microscopios ópticos
tienen una resolución que no es menor de aproximada­
mente 1000 nm (1 µm). Dado que la longitud de onda
efectiva de un haz de electrones disminuye al aumentar
su velocidad, el límite de resolución de un microscopio
electrónico depende del voltaje disponible para acelerar
los electrones de iluminación.
El microscopio electrónico de transmisión forma imáge­
nes enviando los electrones a través de una muestra y en­
focando la imagen resultante sobre una pantalla fluores­
cente sensible a los electrones, o sobre una película
fotográfica (Fig. 2­11 ). El haz de electrones se ajusta me­
diante imanes, que obligan a los electrones a alinearse y
enfocarse sobre la muestra, del mismo modo que actúa el
condensador en un microscopio óptico compuesto. La
formación de la imagen depende de la dispersión diferen­
cial de los electrones por las diferentes regiones de la
muestra; los electrones dispersados no pueden enfocarse
en la lente objetivo y, por tanto, no chocan sobre la pan­
talla de observación. Como el haz de electrones pasa a
través de una muestra sin teñir de manera casi uniforme,
puede apreciarse alguna diferenciación de sus componen­
tes. Los colorantes más comunes en microscopia electró­
nica son las sales de metales pesados (p. ej., osmio, plomo
o uranio), que incrementan la dispersión de los electrones.
En las fotografías de una imagen de microscopia electró­
nica, los componentes teñidos con tales materiales elec­
trodensos, aparecen en oscuro.
Como el aire podría desviar el haz de electrones enfo­
cado hacia la muestra, ésta debe mantenerse al vacío du­
rante su observación. Los especímenes a estudiar deben
ser muy bien fijados para preservar su estructura bioló­
gica durante la observación en el microscopio electróni­
co. Se utiliza glutaraldehído para mantener la unión co­
valente de las uniones entre cadenas de las proteínas, y el
tetróxido de osmio para estabilizar la bicapa lipídica.
Tras la fijación, las muestras se infiltran con una resina
plástica. Se cortan secciones ultrafinas del bloque de re­
sina que se tiñen y colocan finalmente sobre una rejilla
metálica en el microscopio óptico de transmisión. Las
mues tras deben ser seccionadas en cortes extremada­
mente delgados (50­100 nm de espesor) para permitir la
penetración del haz de electrones. Tan sólo las cuchillas
de diamante o de vidrio son lo suficientemente afiladas
para cortar las secciones de tejido en láminas tan delga­
das. Las cuchillas de vidrio se obtienen por rotura en
diagonal de un vidrio cuadrado de 2.5 cm que tiene un
grosor de aproximadamente 5 mm. Dado que el vidrio
es realmente un fluido con un lento movimiento, la aris­
ta formada es sólo lo bastante afilada para cortar el tejí-
do durante unas pocas horas antes de que el flujo mole­
cular interno del vidrio cause el desgaste del filo. Aunque
son extremadamente caras, las cuchillas de diamante no
sufren este problema, así que son la herramienta preferi­
da para el corte de secciones ultrafinas,
El exquisito detalle que se alcanza con la microscopia
electrónica de transmisión puede proporcionar impor­
tantes pruebas para comprender mejor la estructura del
tejido biológico (Fig. 2­J 2A). Desgraciadamente, el ta­
maño de la muestra que puede ser examinada es muy
pequeño, puesto que debe ser seccionado en un corte
muY. fino. En consecuencia, es difícil desarrollar una
comprensión de la estructura tridimensional sin el pro­
cedimiento, verdaderamente tedioso, de reconstruir una
imagen a partir de una serie de secciones individuales. El
desarroJlo de varias técnicas de preparación de muestras
para la microscopia electrónica de transmisión ha am­
pliado la gama de objetos que pueden visualizarse, y la
información disponible de sus imágenes.
30 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA

A.
/ Filamento ele tungsteno (cátodo)
,,,'

Haz de electrones

Lente condensador

-.._ Muestra

Lentes objetivo electromagnéticas

� Plano focal de la lente objetivo

»> B

,,. Lente ocular

V Pantalla o película fotográfica

Figura 2-11. Los microscopios electrónicos comparten algunas

características, como la existencia de lentes, con los microsco-
pios ópticos compuestos, pero utilizan un haz de electrones en
vez de un haz de luz para iluminar la muestra. En un microscopio
de transmisión como el mostrado en el esquema. se forma la
imagen por el paso de los electrones a través del objeto y se pro-
yecta sobre una pantalla fluorescente. En un microscopio electró-
nico de barrido. los electrones reflejados por la superficie de la
muestra revestida con una película metálica reflectante son reco-
gidos por lentes y visualizados en un tubo de ravos catódicos.

El microscopio elecirónico de barrido, al igual que el

microscopio electrónico de transmisión, utiliza electro­
nes en vez de fotones para formar las imágenes de las
muestras. Sin embargo, el microscopio electrónico de
barrido recoge los electrones dispersados desde la su­
perficie de una muestra preparada especialmente. Este
instrumento proporciona imágenes tridimensionales
excelentes de la superficie de las células y de los teji­
0.2.um
Figura 2-12. La microscopia electrónica de transmisión propor-
ciona una visión del interior de los tejidos biológicos, mientras
que la microscopia electrónica de barrido destaca las característi-
cas de la superficie. (Al Microqrafia electrónica de transmisión de
cilios en el oviducto de ratón. IBI Micrografía electrónica de barri-
do de los cilios del oviducto (le ratón. [Cortesía de E.A. Oirksen.l

dos, pero no puede revelar ninguna característica por

debajo de la superficie (Fig, 2­128). Antes del exá­
men al microscopio electrónico de barrido, se revis­
le la muestra con una película extraordinariamente del­
gada de un metal pesado como el platino. El tejido se
disuelve entonces con ácido, dejando una réplica metá­
lica de su superficie, la cual es observada al microsco­
pio. Los microscopios electrónicos de barrido tienen
una resolución de alrededor de 10 nm, considerable­
mente menor que la de los microscopios electrónicos de
transmisión.
Cultivo celular
El crecimiento y reproducción ele células in oitro, en pla­
cas o frascos ele vidrio o de plástico, se conoce como
cultivo celular. Esta técnica ha revolucionado nuestra
capacidad para el estudio ele las células y ele los procesos
fisiológicos a nivel de tejido y de órgano. Históricamen­
te, se obtuvieron explantes (pequeños fragmentos ele teji­
dos extraídos de un animal donante) que se mantenían
vivos y en crecimiento en un frasco lleno con una mezcla

apropiada de nutrientes y de otros productos químicos.
Hoy en día el procedimiento más común consiste en la
disociación de pequeños fragmentos de tejidos y en la
suspensión de las células disociadas en un calcio nutriti­
vo químico, en el cual las células crecen y se dividen
como entidades individuales.
El crecimiento satisfactorio de las células in. oitro re­
quiere un correcto medio de cultivo, el líquido en el cual
las células se hallan suspendidas. Hasta principios de los
años setenta las células de tocios los animales se cultiva­
ban de forma rutinaria en un medio liquido que estaba
constituido principalmente o bien por suero (un compo­
nente claro del plasma sanguíneo) de caballos o de fetos
de ternera; o bien por un extracto químico sin purificar
obtenido de embriones de pollo en crecimiento. Sin em­
bargo. tales medios estaban muy poco definidos quími­
camente, ya que contienen numerosos compuestos sin
identificar. Más aún, era dificil de predecir si las células
ele un determinado origen crecerían en uno de estos me­
dios, o que componentes deberían de añadirse si el pri­
mer intento era infructuoso. El crecimiento de las células
in vuro fue en gran parte una cuestión de ensayo y error
(y suene). En la actualidad se dispone para la investiga­
ción, de medios de cultivo definidos fabricados de acuer­
do a fórmulas químicas precisas. Sin embargo, el éxito
en el cultivo de muchos tipos celulares requiere la adi­
ción ele pequeñas cantidades (menos del 5 %) de suero de
caballo a estos medios definidos. Esta observación su­
giere que es necesario algún factor ele crecimiento pre­
sente en la sangre para el crecimiento y la división de las
células animales in oitro (Fig. 2­13).
Incluso disponiendo de medios de cultivos definidos,
el cultivo ele células animales in oitro es una técnica exi­
gente. Por Jo general, las células animales normales pue­
den crecer, en condiciones in oitro, sólo durante unos po­
cos días, después cesan de multiplicarse y finalmente
mueren. Una población relativamente homogénea de ta­
les células se denomina cepa celular. Estas cepas celula­
res en cultivo son útiles en muchas clases de experimen­
tos, pero su limitada vida útil las hace inadecuadas para
Medio completo
<J>
�­­­­­­­­­­­¿:__=
.'.':! 10
:::
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o propiedades inusuales en la secreción de H +, como los
"'
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o
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o
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"EGF ausente
del medio
t
Adición de EGF
E
-c
z o L_ _,_ _t_ ·­­­­'­­­­
2 4 6 f:
Días en cultivo
Fi911ra 2-13. Las células en cultivo, a menudo requieren factores
específicos para estimular al méxirno las velocidades de división
y de crecimiento. En el cultivo que se indica, sólo se alcanza un
número máximo de células en presencia de factor de crecimiento
epidérmico (EGF). La adición de EGF (flecha) al cultivo que cano:-
cía de dicha sustancia tiene como resultado un crecimiento inrne-
diato de la colonia celular. [Adaptado de Lodish er al.. 1995.l
MÉTODOS EXPERIMENTALES EN FISIOLOGÍA 3J
otros estudios. Además, muchos tipos de células anima­
les todavía no han sido cultivadas con éxito. Sin embar­
go, la lista de células cultivables va creciendo constan le­
men te, como res u I tado del ref namien to de las técnicas y
de los medios de cultivo. Por ejemplo, pueden crecer en
cultivo líneas celulares ele los siguientes tejidos y órga­
nos:
• Hueso y tejido conjuntivo.
• Músculo esquelético, cardíaco y liso.
• Tejidos epiteliales del hígado, pulmón, mama, piel, ve­
J1ga urinaria y riñón.
• Algunos tejidos neuronales.
• Ciertas glándulas endocrinas (p. ej., adrenal, hipófisis,
islotes pancreáticos de Langerhans).
En contraste con las células animales normales, las cé­
lulas cancerosas muestran normalmente un crecimiento
rápido y descontrolado en el cuerpo y son capaces de
crecer indefinidamente en cultivo. El tratamiento de al­
gunas células normales cultivadas con ciertos agentes
puede causar su transformación, un proceso que hace
que se comporten igual que las células cancerosas aisla­
das de tumores. Estas células transformadas pueden cul­
tivarse también de forma indefinida. Las poblaciones
homogéneas de estas células «inmortales» se denominan
líneas celulares. Aunque las células normales difieren de
las cancerosas y de las transformadas en varios aspectos,
el cultivo celular de estas últimas ha permitido ciertos
tipos de estudios que eran irrealizables con cultivos pri­
marios de células normales.
El cultivo celular tiene numerosos usos potenciales en
fisiología animal. Se han combinado nuevos dispositivos
como sensores ele obleas ele silicio para medir la acidez y
otras variables con técnicas de cultivo celular que han
proporcionado importantes y nuevos conocimientos de
la fisiología celular y de lo organismos. Por ejemplo, la
regulación hormonal de la. secreción de I·r· en diferentes
tipos celulares cultivados in nitro puede estudiarse esti­
mulando las células en cultivo con agonistas y antago­
nistas, a la par que se miden los cambios en la velocidad
de acidificación del medio. Esta estrategia se ha utiliza­
do también para estudiar tejidos y órganos con tasas o
tejidos de la vejiga natatoria de los peces.
,·;
''11
:!'
:! Las células musculares lisas, esqueléticas
t < y cardíacas pueden todas ellas cultivarse
,,_.._..1 en condiciones in vitro. ¿Cómo podría de-
terminarse si una célula muscular indivi-
dual, que está siendo observada al micros-
copio en una placa de Petri, es todavía
capaz de contraerse, o ha perdido esta ca-
pacidad de contracción corno consecuen-
cia de estar creciendo en un cultivo celu-
lar?
32 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
ANÁLISIS BIOQUÍMICO
La mayor parte de los procesos bioquímicos transcurren
en disolución acuosa y requieren del intercambio de ga­
ses. Por esta razón, los fisiólogos necesitan frecuente­
mente medir la composición química de los líquidos en
los diferentes compartimientos corporales o la concen­
tración de sus constituyentes, o ambas a la vez. Por
ejemplo, para averiguar si un cangrejo puede regular su
concentración interna de sales al nadar en las aguas sa­
lobres de un estuario, un fisiólogo necesitaría conocer la
concentración salina en el agua que circunda al cangre­
jo, en su hemolinía y en la orina producida por el ani­
mal. Con estos datos, se puede evaluar la capacidad del
cangrejo para mantener la homeostasis. Los análisis bio­
químicos de líquidos importanres desde el punto de vista
biológico, de los gases y de las estructuras, se basan ge­
neralmente en algunos atributos ñsicos o químicos de
los materiales de interés (p. ej., Na+ en la orina del can­
grejo). El incremento sustancial en la sensibilidad y en la
precisión ele tales medidas en estos últimos tiempos, ha
permitido a los fisiólogos hallar la respuesta a algunas
cuestiones acerca de funciones fisiológicas sutiles que
nunca habían podido medirse anteriormente.
Tanto el análisis cualitativo como el cuantitativo pue­
den tener importancia en los estudios fisiológicos. El ob-
jetivo del primero de ellos es determinar la composición
de un determinado líquido o estructura, esto es, los ele­
mentos, iones y compuestos que lo constituyen. El obje­
tivo del segundo modelo analítico es determinar la con-
centración de determinadas sustancias en el líquido o
estructura sometidos a estudio. Muchos instrumentos y
técnicas analíticas proporcionan datos tanto de compo­
sición como de concentración.
Midiendo la composición: ¿qué hay?
Pueden utilizarse numerosos métodos, tanto clásicos
como modernos, para determinar la composición quími­
ca. A veces, los fisiólogos animales están interesados
sólo en conocer si una determinada sustancia (p. ej.,
amoníaco o hemoglobina) está presente en una muestra.
Otras veces, deben identificar todas las diferentes proteí­
nas o carbohidratos u otros tipos de moléculas de una
muestra. En otras palabras, la naturaleza del problema
bajo estudio determina que datos de composición son
relevantes. Rara es la molécula biológica sometida a un
análisis completo de composición como los que se reali­
zan en un curso práctico de iniciación a la química.
Se ha desarrollado una gran variedad de ensayos colo-
rimétricos para la determinación de la presencia o ausen­
cia de una sustancia especifica en una disolución. Estos
ensayos dependen de que la sustancia a estudiar desa­
rrolle una reacción química que cambie su capacidad
para absorber la luz visible o la radiación ultravioleta
(UV) a diferentes longitudes de onda. Como resultado
de esta reacción, la transmisión de luz o de radiación
UV por parte de la solución cambia, lo cual puede ser
detectado por un espectrofotámetro. Muchos ensayos
biológicos emplean un enzima que cataliza una reac­
ción en la que interviene la sustancia de interés. Por
ejemplo, un ensayo corriente para la determinación de
lactato (un producto del metabolismo anaeróbico de la
glucosa) utiliza un enzima que convierte el lactato en
productos con diferentes propiedades de absorción
UV. Para realizar esta prueba, la solución de la que se
sospecha que contiene lactato, se coloca en un pequeño
vial de reacción junto con el enzima y otros componen­
tes de la reacción. Tras un breve periodo de tiempo, se
coloca el vial en el espccrrofotómetro, y se mide la trans­
misión UV de la solución. Se mide la transmisión tam­
bién de un vial que actúa como control al carecer del
enzima. La diferencia en la transmisión ele UV entre los
viales del control y de la muestra, indican que hay lacta­
to presente en la misma.
La cromatografía es una técnica ampliamente utili­
zada para la separación de proteínas, ácidos nucleicos,
azúcares y otras moléculas de una mezcla. En su forma
más simple, la cromatoqrafia en papel, los componentes
de la muestra se mueven a diferentes velocidades en
el papel cromatográfico, dependiendo de su solubili­
dad relativa en el eluyente, corno se ilustra en la Figu­
ra 2­14,4. Para visualizar los componentes separados,
se rocía al crornatograma con un reactivo colorimétri­
co que produce la aparición de un color visible en los
componentes que interesan. Las mezclas más comple­
jas pueden separarse por cromatoqrafla en col1111111a, en
la q ne la disolución con la muestra pasa a t ravés de una
columna empaquetada con una matriz porosa de esfe­
ras (Fig. 2­148). Los diferentes componentes de la
muestra pasan a través de la columna a diferentes velo­
cidades, y las fracciones resultantes se recogen en una
serie de tubos. Dependiendo de la naturaleza de la
muestra, se utilizan diferentes pruebas para. determinar
la presencia de los componentes separados en las frac­
ciones recogidas.
Se emplean muchas clases diferentes de materiales en
la crornarografia en columna dependiendo de la compo­
sición de la solución a separar. Por ejemplo, se dispone
de matrices porosas que ordenan a los componentes de
acuerdo con su carga, su tamaño, su insolubilidad en el
agua (carácter hidrófobo), o por la afinidad en la unión
con la matriz. El último tipo de material es el utilizado
en la cromatografía de afinidad, en la que las esterillas de
la matriz están recubiertas con moléculas (p. ej., anti­
cuerpos o receptores), que se unen. al componente que
interesa, Cuando se aplica. una mezcla con la muestra a
la columna, todos los componentes pasan a través de la
misma excepto aquél que es reconocido por su afinidad.
Esta es una técnica muy potente para la purificación de
proteínas y de otras moléculas biológicas que se encuen­
tran a concentraciones muy bajas.
La electroforesis es una técnica general para la sepa­
ración de moléculas de una mezcla que se basa en su
 MÉTODOS EXPERIMENTALES EN FISIOLOGÍA 33

A de ácidos nucleicos. En tal caso, la muestra se coloca en

t
Flujo del
un extremo de un gel de agarosa o de poliacrilamida,
una matriz inerte con diámetro de poros fijo que im­
Cromatografía disolvente pide o permite la migración de las moléculas cuando se
en papel
aplica un campo eléctrico. Las mezclas de proteínas
normalmente se exponen a la acción del SOS, un deter­
Muestra en, gente cargado negativamente, antes y durante la electro­
et origen
foresis. La tasa de migración de las proteínas cubiertas
por SDS en el seno del gel es proporcional a su peso
molecular; cuanto más bajo es el peso molecular de la
Depósito con Componentes proteína, más rápido se mueve a través del gel (Fig. 2­15).

·�
disolventes separados Cuando se aplica al gel un colorante que se une a las
Adición del disolvente proteínas, se visualizan las distintas bandas en las que
para �iluir la muestra éstas se han separado.
a tráves de la columna
Para separa, y detectar fragmentos específicos de
ADN, ARN mensajeros (ARNm) o proteínas, se usan
A��'­ tres procedimientos ligeramente distintos, pero similares
/ r:c __.

•••
Adición .•
de la ,� . A
muestra I
¡ ••
•
Matriz i • • • ·-- Proteínas
recubiertas
porosa : ·
e • • con SOS
(Mezcla
de proteínas aplicada al gel
y expuestas él un campo eléctrico

Gel de
potiacrilamida

!
Dirección de
Protefnas
migración de
separadas las proteínas
Fracciones recogidas; parcia t mente
los componentes
mayores pasan más
rápntamente
+
Figura 2­14. La cromatografía es una potente técnica de separa-
ción de los componentes de una mezcla en disolución. (Al En la Tinción para visualizar

l
cromatografía en papel, se aplica la muestra en seco en un extre- las bandas separadas
mo de un trozo de papel cromatoqráfico. Se coloca el papel en
una disolución que contiene dos o más solventes, los cuales as-
e
cienden por el papel por capitandad. Los diferentes componentes
de ta muestra se mueven a diferente velocidad en el papel porque

tienen diferentes solubilidades relativas en la mezcla de solven-
tes. Después de varias horas, se seca el papel y se le tiñe para
determinar la localización y las cantidades relativas ele los com-
ponentes separados. (BI En la cromatografía en columna, se apli-
c:a la muestra en el extremo superior de una columna que contie-
ne una matriz permeable de esferas a través de la que fluye un
solvente. El solvente es bombeado lenramente a través ele la co-
lumna y se le recoge en una serie ele tubos (denominados fraccio-
nes) al ir saliendo por el extremo inferior. los componentes de la
muestra se desplazan a través de la columna a diferentes veloci-
dades y así quedan separados en fracciones diferentes.
velocidad de desplazamiento al aplicar un campo eléc­
trico. La carga neta de una molécula, así como su ta­
maño y su forma, determinan su velocidad de migra­
ción durante la electroforesis. Las pequeñas moléculas
corno los aminoácidos y los nucleótidos se separan bien
mediante esta técnica, pero con mucho, el uso más co­
mún de la electroforesis es la separación de proteínas o
¡
1
Proteínas
separada�
portamano
Figura 2.·15_ La electroforesis en gel separa los componentes de
una mezcla basándose en su carga y en su masa. Las proteínas
normalmante se separan por electroforesis en gel ele potiacrita-
mida con SDS corno se ilustra en la figura. (Al Se añade SOS, un
detergente cargado negativamente, a la muestra para recubrir las
proteínas. IB) La muestra se coloca entonces en una muesca en el
gel de poliacrilamida y se aplica un campo eléctrico. Las proteí-
nas pequeñas se mueven más fácilmente y más rápido a lo largo
del gel que las mayores. (CI Un tiempo después, las proteínas ele
la mezcla están separadas en bandas compuestas por proteínas
ele diferente ramaúo. Éstas pueden visualizarse mediante su tín­
ción con varios reactivos [Adaptado de t.odish ·e1. al.. 1995.J
34 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
. . . . . . . . . . .. . . . . . . . ...... . . . . . . . . . . . ... . . . . . . . . . . . . . . .

----
'

...........
­...... -- Banda correspondiente
al com ponente A
­......
--
Corriente
eléctrica
Transferencia
electroforética ........ Baiío con un
reactivo marcado
ra di activa rnente
........... específico para el
� ­...... corn ponente A o B
........._ _..__ Banda correspondiente
al componente B

Después de la Hoja de polímero Autorradiografías

electroforesis en gel

Figura 2-16. Para separar e identificar fragmentos específicos de ADN, ARNrn y proteínas en una mezcla, se utilizan procedimientos
similares denominados transferencia Southern, transferencia Northern y transferencia Western, respectivamente. En cada método, los
componentes de la muestra se separan primero por electroforesis en gel; las bandas separadas se transfieren a una lámina polirnérica que
se empapa en un reactivo, marcado radiactivamente, específico para el componente que interesa. La presencia, y en alqunos casos la
cantidad del componente unido al marcador, puede determinarse por autorramoqrafia. Véase el Cuadro 2-1 para mayor detalle de cada
técnica.

en lo básico, que utilizan la electroforesis en gel. Cada tern también conocido como «immunotransfercncia».
uno de estos procedimientos requiere tres etapas (Fig. (Por ahora no hay Eastern, South­Western, etc., pero
2­16): probablemente es sólo cuestión de tiempo.) El Cua-
dro 2­1 resume las características particulares de estas
J. Separación de la mezcla de la muestra por electrofo­ tres técnicas de transferencia.
resis en gel. Muchos de los métodos comunes para determinar la
2. Transferencia de las bandas separadas a una hoja de composición son aplicables a las disoluciones pero no a
nitrocelulosa u otro tipo de polímero, un proceso los gases. Sin embargo, el espectrógrafo de masas puede
denominado «blottinq».
distinguir los diferentes gases que componen una mezcla
3. Tratamiento de la hoja con una «sonda» que reaccio­ gaseosa en base a su masa y a su carga. Los fisiólogos
na específicamente con el componente que interesa. animales utilizan principalmente este instrumento para
El primero en ser desarrollado de estos protocolos, determinar la composición ele los gases respiratorios,
denominado transferencia Southern en honor de su in­ mientras un animal se encuentra en reposo o en ejercicio
ventor Edward Southern, se utiliza para identificar frag­ durante un experimento. La Figura 2-17 ilustra el diseño
mentos de ADN que contengan secuencias específicas de básico de un espectrógrafo de masas. Primero, se ioniza
nucleótidos. La transferencia Northern se utiliza para de­ la muestra ele gas por medio de un intenso calentamien­
tectar un ARNm determinado en una mezcla de ARNm to y su paso a través de un haz ele electrones. Los iones
Se pueden detectar unas proteínas específicas dentro de cargados se enfocan y aceleran entonces por medio de
una mezcla compleja por medio de la transferencia Wes- un campo eléctrico hasta un analizador, donde se desvía

Cuadro 2··1
Técnicas de transferencia electroforética
-··--··-----·---,--------
Moléculas detectadas Procedimiento de separación y detección"
­­­­­·­­­­
Transferencia Southern Fragmentos de ADN producidos Electroforesis de la mezcla de fragmentos ele ADNcd en gel ele potiacri-
por rotura de
cadenas de ADN lamida o en agarosa; desnaturalizar los fragmentos separados en
con enzimas de restricción ADNcs y transferir las bandas a una hoja de polímero; utilizar sondas de
ADNcs o ARN marcadas radiooctivarnente para marcar el fragmento
que interesa; detectar las bandas marcadas con autorradioqrafía

Transferencia Nonhern ARNs mensajeros Desnaturalizar la mezcla de la muestra; elect.-oforesis en gel de poliacri-
lamida y transferencia de las bandas separadas a una hoja de polímero;
utilizar sondas de ADNcs para marcar el ARNm que interesa; detectar la
banda marcada con aurorradioqratla

Transferencia Western Proteínas Electroforesis lie la mezcla en la muestra en gel de poliacrllamida con
SDS y transferir las bandas separadas a una hoja de polímero: utilizar
anticuerpos monoclonales marcados radioactivamente para marcar la
proteína que interesa; detectar la banda marcada con autorradioqrafía 1·

• ADNccl = AON de cadena doble; AONcs = ADN de cadena s,mcilla.

t Si no se dispone de un anticuerpo monoclonal marcado rndioectlvamente, se puede detectar la banda que contlene los complejos anticuerpo proteína
añaoienuo un anticuerpo secundario que reconozca a cualquier anticuerpo monoclonal. Este anticuerpo secundario está unido covalentemente a un enzima.
corno la rostatasa alcalina, que cotaliza una reaccíón cotonmérríca. Cuando se añade un S\JSlra10, se íorma un prod . .icto cctcreado sobre la t.n111da que contiene la
proteína que nos ínteresu, generando una mancha visible coloreada en esta región.
 MÉTODOS EXPERIMENTALES EN FISIOLOGÍA 35

A Campo maqnético aplicado

Placas

Electrodo
repulsor

Ha1 de electrones causante

Al amplificador
de la ionización
y registrador
Muestra

B Panículas
más pesadas

Fuente Colector Fuente Colector

de iones de iones de iones de iones

Disminución del voltaje de ionización

Figura 2-17. La identidad de los gases de una mezcla y sus concentraciones puede determinarse por espectrografía de masas. (Al El
espectrógrafo de masa, que detecta lo desviación de una muestra ionizada en un campo magnético, tiene cuatro partes esenciales.
Primero, hay un disposuivo de inyección cuidadosamente construido ( 1) a través del cual se alimenta la muestra en el sistema con un flujo
de viscosidad constante. En segundo lugM, encontramos una cámara 11e ionización (2). mantenida al vacío y con una elevada temperatura
(alrededor de 190 ºCI donde fa muestra pasa a través de un haz de electrones y se le acelera mediante la aplicación de un campo eléctrico.
Las moléculas de gas abandonan esta cámara como iones cargados negativamente. En tercer lugar, se halla un tubo analizador en cuyo
interior el haz ele iones acelerado se ve sometido a un campo magnético que obliga a los iones a dibuiar una trayectoria curvada (3).
Finalmente, el haz de iones es detectado por un colector situado en el extremo del tubo analizador (4). El grado ele desviación de un ion por
el campo maqnético aplicado depende de la fuerza del campo y de la masa, c,,rga y velocidad del ion. Sólo aquellos iones que sean
desviados de manera Que sus trayectorias transcurran paralelamente a las paredes del tubo analizador alcanzarán, el colector de iones y
serán detectados. (BI En un campo magnético constante el pico específico de partículas detectado en el espectrógrafo de masas está
determinado por la intensidad del voltaje de ionización, que puede variarse. Cuanto mayor sea el voltaje de ionización, mayor será la
partícula detectada. [Adaptado de Fesscnden y Fessenden. 1982.1

el haz de iones, bien por la aplicación de un campo mag­
nético, o bien por el paso a través de rodillos sintoniza­
dos que emiten frecuencias ele radio especificas que cau­
san la de viación de los iones. 'Lmnto más ligera es la
masa del ion y más pequeña su carga. menor será la des­
viación de los iones con respecto a una trayectoria están­
dar cuando se dirigen hacia el analizador. 1 \1 grado de
desviación se determina por medio de una rejilla de detcc­
toros. que permiten determinar la pre encía y cantidad de
los gases en la muestra inyectada en el instrumento.
Las diferentes técnicas para medir la composición
química que se han descrito en esta sección son utiliza­
das ampliamente por los fisiólogos, pero en la investiga­
ción fisiológica se emplean también muchas otras. Para
conocer más acerca de los métodos adicionales y mayo­
res detalles sobre lo aquí descrito, pueden consultarse
los textos de química y bioquímica.
Midiendo la concentración: ¿cuánto hay?
La mayor parte de los instrumentos o de las técnicas
analíticas utilizadas para determinar la composición de
un líquido o de una mezcla de gases, también propor­
ciona datos de la concentración de los componentes
que se encuentran presentes. Por ejemplo. el grado de
cambio de color que se produce en un ensayo colorimé­
trice, depende de la cantidad de la sustancia a medir
que e halla presente en la muestra. Asimismo la señal
de salida de un espectrógrafo de masas depende no sólo
de los tipos de gases presentes en la mezcla, sino tam­
bién de la cantidad que hay de cada uno. Así pues, la
señal de salida proporcionada por un instrumento ana­
lítico, ya sea un cspcctrofotómctro de transmisión, un
densirómctro o un espectrógrafo de masas, está relacio­
nada directamente con la concentración de la sustancia
responsable de la señal.
Generalmente, la técnica analítica usada para valorar
la concent ración de una sustancia determinada se lleva a
cabo en varias muestras con diferentes concentraciones
conocidas de la sustancia; las señales de salida se repre­
sentan gráficamente frente a las concentraciones, resul­
tando una curva estándar. La concentración real de una
mucst ra experimental que corre ponde a la señal de sali­
da producida, se determina por comparación con e ta
curva estándar.
36 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
EXPERIMENTOS CON ÓRGANOS
AISLADOS V SISTEMAS DE ÓRGANOS
Todos los animales tienen varios sistemas principales de
órganos distintos que deben estar coordinados y contro­
lados para ayudar a mantener la horneostasis. Como ve­
remos en los próximos capítulos, las funciones de estos
sistemas de órganos están reguladas principalmente por
señales neuronales u hormonales o por ambas. Para
comprender los mecanismos de control fisiológico, de­
ben caracterizarse las señales clave de control y sus orí­
genes. En muchos casos es difícil, sino imposible, hacerlo
mediante el estudio de órganos intactos in situ; en vez de
ésto se llevan a cabo experimentos sobre órganos aisla­
dos extraídos del animal por cirugía y mantenidos en 1111
ambiente artificial in nitro. Dos ejemplos nos permiten
ilustrar la potencia de esta estrategia experimental.
Cuando se aísla el corazón de casi todo los vertebra­
do , incluyendo los mamíferos, y se le coloca en un baño
de solución salina, continúa latiendo y desarrollando uu
trabajo al bombear salino u otro líquido que se le sumi­
nistre. El corazón ai lado de un vertebrado continuará
latiendo en ausencia de una señal neuronal si se le man­
tiene a una temperatura adecuada y se Je perfunde con
una solución oxigenada con una composición iónica co­
rrecta y que contenga una fuente de energía corno la glu­
cosa. Con el corazón aislado, los fisiólogos pueden me­
dir el efecto de la cstirnulación química por parte de
fármacos y hormonas o ele la cstimulación eléctrica de
los nervios que inervan el corazón sobre la frecuencia
cardíaca. la amplitud, tasa de flujo y movimientos rnccá­
nicos. Los experimentos llevados a cabo en corazones
aislados han sido fundamentales en el avance de nuestro
conocimiento del sistema cardiovascular,
Un segundo ejemplo es la glándula pincal de los verte­
brados, un pequeño órgano que se encuentra en la parte
superior del cerebro de los vertebrados. La glándula pi­
neal, que juega un papel clave en la regulación de los
ritmo diarios (circadianos) de los procesos fisiológicos,
es sensible a los estímulos relacionados con la luz y libe­
ra diversas cantidades de productos reguladores al to-
rrente sanguíneo en función de la hora del día. Cuando
se aísla la glándula pineal y se la ubica en un sistema de
cultivo apropiado, continúa exhibiendo un ritmo circa­
diano. La experimentación directa con esta preparación
i11 oitro ha proporcionado la respuesta a cuestiones espe­
cíficas respecto a la regulación de los sistemas fisiológi­
cos por parte de la glándula pincal.
OBSERVANDO V VALORANDO
EL COMPORTAMIENTO ANIMAL
Los científicos que estudian la fisiología animal comple­
mentan frecuentemente sus experimentos con observa­
ciones del comportamiento animal. Sin embargo, es difí­
cil realizar experimentos de comportamiento realmente
útiles, ya que los animales deben de estar en un estado
fisiológico apropiado (p. ej., criando. cuidando de la pro­
le, digiriendo la comida, por citar unos pocos). Además,
el experimento debe explotar las tendencias naturales
del comportamiento del animal. A pesar de estas dificul­
tades, los métodos experimentales para el control y la
cstirnulación de estados de comportamientos específicos
pueden proporcionar una importante comprcnsió'.1 de
los procesos fisiológicos que no siempre son susceptibles
de obtenerse en una investigación fisiológica directa. U
prcrrequisito para tal tipo de investigación es u'.1 com­
pleto conocimiento de la conducta natural del animal en
su hábitat.
La influencia de los experimentos
de comportamiento
Las investigaciones desarrolladas en las décadas de los
cincuenta v sesenta sobre el comportamiento de recupe­
ración de aves que crían en el suelo ilustran cómo los
estudios del comportamiento pueden contribuir al cono­
cimiento fisiológico. K. z. Lorcnz y N. Tinbcrgen descu­
brieron que los gansos no sólo reconocían sus huevos y
los recuperaban si se los apartaba del nido, sino que
también recuperaban una amplia variedad de objetos (p.
ej., pomelos, bombillas o pelota de béisbol) que estuvie­
sen cerca de su nido. Tinbcrgcn y sus estudiantes lleva­
ron a cabo más tarde ingeniosos experimentos con ga­
viotas en los que ofrecían a las a ves pares de objetos Y se
anotaba cuál había sido recuperado primero. Analizan-
do el proceso de comparación de los pares. pudieron de­
finir las propiedades que las gaviotas toman en conside­
ración para escoger el objeto a recuperar. Aunque las
aves recuperaban objetos muy distintos, estos experi­
mentos demostraban que los huevos auténticos siempre
eran preferidos sobre los objetos artificiales. El tamaño
relativo, el color y el moteado de un huevo contribuían
independientemente a la probabilidad de que se recupe­
rase el huevo. Considerados en conjunto, estos expon­
montos revelaron que en las gaviotas. los huevos pro­
porcionan un potente estímulo natural que induce este
especializado comportamiento de recuperación. Dota­
dos del conocimiento de las propiedades exactas de los
estímulos que desencadenan este comportamiento, los
fisiólogos han estado mejor preparados para llevar a
cabo experimentos fisiológicos acerca de la naturaleza
de la visión en las aves.
Los experimentos de comportamiento analizan a me­
nudo el tiempo total que el animal bajo estudio consume
desarrollando cada comportamiento, asi como su se­
cuencia temporal. Estos datos, unidos a la información
acerca del comportamiento de otros animales y a unas
variables ambientales clave, revelan frecuentemente lo
estrechamente relacionado que está el comportamiento
al estado interno del animal. La mayor parte de la infor­
mación sobre el comportamiento animal recogida de
esta manera, corresponde a la reproducción y a la ali­
 MÉTODOS EXPERIMENTALES EN FISIOLOGÍA 37

mentación, dos de los más importantes comportamien­
tos desarrollados por cualquier animal, y tanto, el com­
portamiento reproductivo como el de alimentación es­
tán enormemente afectados por el estado fisiológico del
animal. Observaciones cuidadosas pueden revelar nor­
malmente que patrones de comportamiento de un indi­
viduo influyen a otros y pueden sugerir porque esto su­
cede así. Por ejemplo, en el pez espinoso la exhibición de
su librea roja por parte del macho señala a los otros ma­
chos de espinoso que está defendiendo un nido, y a las
hembras que está dispuesto para la freza. Así pues, el
significado de esta señal depende del sexo del animal re­
ceptor. La librea roja está originada por procesos fisio­
lógicos desencadenados por el inicio de la estación re­
prod ucrora, En esta especie se investigó la coordinación
entre comportamiento y fisiología utilizando el análisis
de la conducta para guiar la investigación fisiológica.
Métodos en la investigación
del comportamiento
Se utiliza una variada instrumentación para registrar y
analizar las bases fisiológicas de los actos de comporta­
miento específicos. En algunos experimentos se utilizan
cámaras de vídeo de alta velocidad junto con detectores
elecuofisiológicos de la actividad neuronal o muscular
para capturar simultáneamente tanto el comportamien­
to como sus fundamentos fisiológicos. Como que los ac­
tos de comportamiento a estudiar son frecuentemente
rápidos y fugaces, normalmente se graban estos aconte­
cimientos a alta velocidad y se estudia a baja velocidad
la cinta de vídeo registrada para realizar un mejor análi­
sis. El uso de cámaras de rayos X permite el examen de
la interacción ele componentes esqueléticos durante
comportamientos específicos (p. ej., alimentación, carre­
ra en una cinta rodante). Como en muchos otros aspec­
tos de la fisiología, la disponibilidad de ordenadores rá­
pidos y económicamente asequibles, y con capacidades
de almacenamiento de datos cada vez mayores, ha revo­
lucionado la adquisición y análisis de los datos.
La Figura 2­18 ilustra cuántas de las técnicas usadas
normalmente para estudiar el comportamiento animal y
sus procesos fisiológicos subyacentes, deben ponerse a
punto para estudiar un comportamiento simple, en este
caso el ataque d.e una serpiente venenosa a su presa.
Para descubrir como se produce el ataque, debe relacio­
narse el movimiento del cuerpo y de las fauces con las
fuerzas ejercidas por la contracción de los músculos de
las mandíbulas. El rápido ataque es recogido en dos per­
spectivas, dorsal y lateral utilizando una cámara de ví­
deo que enfoca al animal directamente y a un espejo
colocado a 45º por encima del animal. Es posible cuan­
tificar la posición de la serpiente gracias a que se incluye
en las imágenes de vídeo una cuadrícula en el fondo. La
serpiente se coloca sobre una plataforma que registra la
fuerza ejercida en los tres ejes ortogonales. Con la medi­
ción de todo este conjunto de parámetros externos el in­
vestigador puede registrar las fuerzas asociadas almo­
vimienro de la serpiente. La fuerza ejercida por las
mandí bulas se registra por medio de un transductor de
presión montado sobre la cabeza, y la actividad muscu­
lar se mide mediante electrodos aplicados sobre los
cuatro músculos laterales de la mandíbula. Todos estos

­
�""-""-"""".,..,""'_.VI Amplifi- Ordenador
cadores personal
Espejo
Elecu odo bipolar

Osciloscopio

D
Cámara de alta Registrador
velocidad (en papel)

Vídeo
(en cinta)

Figura 2-18. Puede analizarse el ataque de una serpiente venenosa para determinar los músculos utilizados y el patrón con el que se
contrae. (A) Para reqistrar los potenciales eléctricos de la musculatura de las mandíbulas, se implantan quírúrgicamente, durante una
intervención realizada bajo anestesia, unos electrodos bipolares muy finos en los cuatro músculos laterales. Se fija también a la parte
superior de la cabeza de la serpiente un transductor de tensión para medir el movimiento de los huesos del cráneo. (8) La serpiente se
coloca sobre una plataforma que registra la fuerza y es grabada en vídeo cuando ataca a su presa. Los cables de los electrodos y del
transductor de tensión están conectados a amplificadores electrónicos que incrementan sus señales de bajo vottaje. Las señales am-
plificadas aparecen en la pantalla de un osciloscopio y en un .-egistrador y son almacenadas en un vídeo y en el ordenador.
 38 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
' ' . . . . . ' . . . . . . . . . .
datos se registran en una cinta y en un ordenador por
medio de un sistema informatizado de adquisición de
datos.
Los valores de las variables medidas se representan
normalmente en función del tiempo y se relacionan con
el análisis del comportamiento registrado en la cinta de
vídeo. Los datos obtenidos por tales experimentos reve­
lan que la contracción de los músculos causa el avance
de los colmillos y el cierre de las mandíbulas sobre la
presa.
Estas mediciones ex peri menta les pueden utilizarse
para comprobar hipótesis acerca de que músculos y es­
tructuras están implicados en el ataque y cómo cambian
sus relaciones temporales durante este comportamiento.
El experimento también sugiere cuántos sistemas fisioló­
gicos contribuyen e11 la producción de un acto complejo
de comportamiento. Es posible un análisis funcional
más completo de este comportamiento de captura y una
mejor comprensión de la capacidad y rendimiento deJ
animal, si se miden otras variables en experimentos su­
cesivos y desarrollados en condiciones idénticas. Este
montaje experimental puede utilizarse para medir dile­
rencias en el comportamiento de ataque en función del
tamaño y de la especie ofrecida como presa. Tales deter­
mi naciones también pueden constituir la base de formu­
lación de hipótesis acerca del control nervioso de la acti­
vidad muscular, la dirección por retroalimentación
visual del comportamiento y muchos otros aspectos in­
teresantes.
m
. corno durmiendo, en movimiento, digiriendo una comi­
Los humanos pueden recibir instrucciones
. para comportarse de una determinada
manera durante experimentos fisiológicos
(p. ej., respirar profundamente, correr o
flexionar algunos músculosl. Algunos ani-
males pueden ser entrenados para realizar
lo necesario de cara a un experimento en
particular (p. ej., correr sobre una cinta ro-
dante), mientras que otros sólo se dedican
al comportamiento de interés a intervalos
irregulares, y el investigador observa y es-
pera con optimismo capturar los datos en
el momento adecuado. ¿Cuál es la fortale-
za y la debilidad relativa de los datos obte-
nidos en experimentos en los que al sujeto
se le instruyó, se le entrenó o simplemente
se esperó a que se comportara así espon-
táneamente?
LA IMPORTANCIA DEL ESTADO
FISIOLÓGICO EN LA INVESTIGACIÓN
Los estudios de investigación a todos los niveles fisioló­
gicos, desde el molecular hasta el comportamiento, de­
ben tener en cuenta el estado fisiológico del animal en el
momento de la experimentación (o de la toma de mues­
.
tras de tejidos). Algunos estados fisiológicos son Jo bas­
tante obvios al investigador, como cuando un animal
está buceando (con la respiración contenida), moviéndo­
se activamente o hibernando. Otros estados fisiológicos
pueden ser mucho más sutiles, pero también pueden te­
ner una gran influencia en los procesos fisiológicos. Evi­
dentemente, la naturaleza obvia o sutil de un estado fi-
siológico depende del animal. Por ejemplo, un ratón
hecho un ovillo con los ojos cerrados y mostrando una
respiración relativamente regular sin ninguna otra acti­
vidad motora puede suponerse con mucha probabilidad
que esté durmiendo. Pero ¿y las especies de peces relati­
vamente inactivos que 110 se mueven? ¿Estará dormido
o simplemente no muestra actividad locomotora? El es­
tado fisiológico puede estar influenciado por variables
ambientales como la estación del año y la hora del día.
Como ejemplo, la estimulación del nervio vago causa un
enlentecimiento del corazón mucho mayor en ranas si se
realiza durante la noche en la primavera que si se realiza
el experimento por la tarde en otoño. Así pues, el resulta­
do de un experimento puede estar enormemente afecta­
do por la hora del día y la época del año en que son
llevados a cabo los experimentos.
Para caracterizar el estado fisiológico de un animal
deben medirse una o más variables mientras el animal
está en diferentes estados de comportamiento para po­
der comparar sus valores. Por ejemplo, la presión san­
guínea, la frecuencia cardíaca, y la actividad muscular
esq uelérica debe medirse todos ellos simultánearnen le
mientras el animal se halla en varios estados diferentes
da o hibernando. Tales mediciones normalmente no per-
miten identificar tas relaciones causa­efecto entre las va­
riables medidas. Sin embargo, en base a tales datos,
pueden realizarse inferencias y pueden formularse hipó­
tesis contrastables acerca de las relaciones entre las va­
ria bles medidas. Como que pueden existir simultánea­
mente estados fisiológicos múltiples (p. ej., sueño en
invierno, apnea durante la hibernación), los experimen­
tos para intentar determinar los estados fisiológicos son
a menudo complejos y largos. Sin embargo, si se planean
cuidadosamente con el fin de revelar las influencias del
estado fisiológico sobre los procesos fisiológicos básicos
ele un animal, tales experimentos pueden incrementar
enormemente nuestro conocimiento de los sistemas fi-
siológicos.
Un experimento típico, por ejemplo, requería medir
las variables fisiológicas clave durante las fases intermi­
tentes del despertar durante la hibernación de la ardilla
terrestre. La comparación de la temperatura corporal y
de la tasa metabólica registrada a lo largo del tiempo
junto con la actividad de comportamiento observada,
reveló que el aumento de actividad en el estado de vigi­
lia está correlacionado con un incremento de su ternpe­
ratura corporal y su tasa metabólica. Tales correlacio­
nes sugieren, que cuando el animal se vuelve activo, los
sistemas fisiológicos clave también se activan casi a la
vez.. Aunque es de sentido común que el animal necesi­

rará más circulación sanguínea cuando se encuentra
activo físicamente, de estos datos no se ha podido acla­
rar qué grado de incremento en el flujo sanguíneo se
produce, ni cómo se regula. ¿Precede el cambio fisioló­
gico a la actividad comporramental, o es el resultado de
la misma?
El distinguir entre éstas y otras explicaciones posibles
requiere ele nuevos experimentos enfocados hacia la re­
lación causal entre los comportamientos específicos y
los sistemas fisiológicos, que subyacen en los cambios en
el estado fisiológico. Normalmente, las observaciones de
las correlaciones entre fisiología y comportamiento
como las aquí comentadas, forman parte de la base para
diseñar experimentos subsiguientes. Y quizá más impor­
tante aún, pueden proporcionar una manera de caracte­
rizar los estados fisiológicos específicos. Por ejemplo, en
un estudio diseñado para comprobar la relación causal
entre flujo sanguíneo y frecuencia cardíaca durante la
hibernación, las variables como la temperatura corporal
o la tasa metabólica, pueden servir para asegurarse de
que el animal estaba efectivamente hibernando durante
los ensayos experimentales.
RESUMEN
La in vesrigación fisiológica debe iniciarse con una hipó­
tesis específica bien planteada, relacionada con un deter­
minado nivel de análisis y capaz de ser contrastada ex­
perimentalmente. La comprobación de las hipótesis
queda enormemente facilitada por el empleo del princi­
pio de August Krogh, es decir, la elección del animal que
mejor se ajuste para la realización de los experimentos
necesarios para responder a determinadas cuestiones.
Un aspecto clave en el diseño de los experimentos fisio­
lógicos es el del nivel al que debe ser analizado cada uno
de los problemas fisiológicos a estudiar. La elección del
nivel determina la metodología y el animal experimental
apropiado para la medición de las variables fisiológicas
de interés.
Las técnicas que detectan o analizan sucesos a nivel
molecular, han beneficiado enormemente a la fisiología
animal. Se pueden incorporar radioisótopos a moléculas
importantes desde el punto de vista fisiológico o a sus
precursores. Tras la inyección de una molécula marcada
radioacrivamente en el animal, pueden determinarse sus
movimientos mediante un sucesivo muestreo de tejidos
y midiendo las partículas emitidas por el radioisótopo
con un contador Geiger o un contador de centelleo. La
presencia y la localización de las moléculas marcadas ra­
dioactivamente en delgadas secciones de tejidos puede
determinarse por autorradiografia, Otras potentes he­
rramientas para el seguimiento de proteínas específicas en
los sistemas fisiológicos, son los anticuerpos monoclona­
les unidos covalentemente a un colorante fluorescente o
a un radioisótopo. A causa de su gran especificidad, los
anticuerpos monoclonales permiten la detección de
una sola proteína (p. ej., un factor de crecimiento ner­
MÉTODOS EXPERIMENTALES EN FISIOLOGÍA 39
vioso o un neurotransmisor), aunque se halle presente a
una concentración muy baja en las células o tejidos a
estudiar.
La ingeniería genética, que incluye a la tecnología del
ADN recombinante y al clonaje de genes, también está
revolucionando la fisiología animal. Los genes clonados
en células bacterianas fácilmente cultivables pueden u li­
lizarse para producir grandes cantidades de los produc­
tos que codifican estos genes (p. ej., insulina humana y
otras hormonas). Las técnicas de ingeniería genética per­
miten también la producción de animales transgénicos
(normalmente ratones) que contienen copias adicionales
de un gen interesante. En los ratones «knockout», se
reemplaza un gen normal con un mutante para este mis­
mo gen, de modo que, los animales 110 producen la pro­
teína. funcional. El análisis de los efectos tanto de la adi­
ción como de la delección de genes específicos, puede
proporcionar nuevos datos sobre el mecanismo y la re­
gulación ele un proceso fisiológico.
Los microelectrodos y las micropipetas son muy utili­
zados en fisiología celular. El uso más común de los mi­
croelectrodos es para. registrar las seriales eléctricas de
las neuronas o de las células musculares. La concentra­
ción de iones y de algunos gases y la presión hidrostá uca
en el interior de las células y de los vasos sanguíneos
puede determinarse con microelectrodos fabricados es­
pecialmente. Las micropipetas se utilizan para inyectar
materiales (p. ej., colorantes, compuestos marcados ra-
dioactivamente) en el interior de células individuales o
en los líquidos intersticiales de los tejidos.
El estudio estructural de las células, y de los procesos
fisiológicos que se derivan de ellas, dependen fuertemente
de la microscopia. La. microscopia óptica utiliza fotones
de luz visible o cerca del espectro visible para iluminar
muestras de tejidos especialmente preparados. Las mues­
tras se fijan primero (preservándolas), incluyéndolas en
plástico o cera, y entonces se las corta en rodajas extrema­
damente delgadas (secciones) con un micrótomo. Final­
mente, las secciones se tratan con colorantes orgánicos o
con anticuerpos marcados con moléculas fluorescentes,
que se unen diferencialmente y tiñen los diferentes com­
ponentes celulares. Una vez preparadas las muestras de
tejido, se observan generalmente en diferentes tipos de
microscopios ópticos. La irrupción de los microscopios
electrónicos, que utilizan electrones para formar las imá­
genes, ha incrementado enormemente la resolución del
análisis microscópico, permitiendo la visualización de de­
talles de la estructura intracelular que no eran observa­
bles con microscopios ópticos. En los microscopios elec­
trónicos de transmisión se dirige un haz de electrones
directamente a través de secciones nltrañnas de tejido
previamente teñidas con metales pesados electrodensos.
En los microscopios electrónicos ele barrido, los electro­
nes son reflejados por la superficie de la muestra, produ­
ciendo una imagen tridimensional de las características
superficiales de las células y de otras cstructu ras.
El cultivo celular, el crecimiento y reproducción de cé­
lulas in oitro, permite la propagación de cepas celulares
 40 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
con una vida relativamente corta y de líneas celulares
«inmortales», que pueden crecer indefinidamente. Las
células en cultivo, que normalmente son bastante homo­
géneas, son muy útiles en experimentos diseñados para
examinar las funciones, secreciones, respuestas y otras
propiedades de determinados tipos celulares. Tales ex­
perimentos dependen de un análisis bioquímico que de­
termine la composición de las mezclas de muestras deri­
vadas de las células así corno la concentración de sos
constituyentes. Entre las técnicas usadas más común­
mente en análisis bioquímicos están los ensayos colorí­
métricos, la espectroíotometria de transmisión, la cro­
matografía en papel y en columna, la electroforesis y la
espectrografía de masas.
A un nivel de organización estructural más alto, el
mantenimiento de órganos aislados o de sistemas ente­
ros de órganos in vitro permite el examen de la función
de tejidos intactos en un ambiente artificial y controla­
do. Deben controlarse variables importantes corno la
temperatura, la disponibilidad de oxígeno y los niveles
de nutrientes, imitando las condiciones de homeostasis,
aunque también pueden alterarse para comprobar de­
terminadas hipótesis.
Los fisiólogos animales completan frecuentemente sus
experimentos con observaciones del comportamiento
animal. Los métodos experimentales para el control y la
estimulación de comportamientos específicos pueden
proporcionar importantes y nuevas percepciones de los
procesos fisiológicos, que no siempre pueden obtenerse
en una investigación fisiológica directa. Así mismo, el
análisis del tiempo total consumido en el desarrollo de
cada comportamiento y su secuencia temporal, unido a
la información sobre el comportamiento ele otros ani­
males y de variables ambientales clave, puede revelar lo
estrechamente relacionado que está el comportamiento
al estado fisiológico interno del animal.
Finalmente, en todos los enfoques experimentales,
desde los realizados al nivel más simple (molecular) has­
ta el nivel más complejo (comportamiento), el estado fi­
siológico del animal en el momento de la experimenta­
ción (o del muestreo del tejido) es un aspecto importante
a considerar. El estado fisiológico puede depender tanto
de factores regulados internamente (sueño, hibernación,
actividad, etc.) como de influencias ambientales. Para
caracterizar el estado fisiológico de un animal, deben
medirse una o más variables y relacionarlas con los dife­
rentes estados de comportamiento.
PREGUNTAS DE REPASO
l. ¿ Cuál es la diferencia entre una pregunta científica,
una hipótesis, una teoría y una ley?
2. Un investigador lleva a cabo experimentos en gri­
llos, ranas toros, y serpientes de cascabel, pero está
comprobando una sola hipótesis relacionada con un
solo proceso fisiológico. Explique cómo este investi­
gador puede estar utilizando el principio de August
Krogh.
3. ¿ Qué son los radioisótopos y los anticuerpos mono­
clonales? ¿Qué característica común les hace utiliza­
bles por los fisiólogos?
4. ¿Qué es un clon y cómo se produce?
5. Si una mutación interesante y útil para un sistema
fisiológico resulta letal antes de que un animal al­
cance el estado reproductivo de su ciclo vital,
¿cómo puede perpetuarse en el laboratorio para
permitir la repetición de experimentos en estudios
a largo plazo?
6. ¿Por qué puede interrumpir el registro una burbuja
de aire dentro de un microelectrodo de los que se
usan en el estudio de los potenciales de acción de los
nervios?
7. i, Cuáles son las principales diferencias entre micros­
copia electrónica y óptica? ¿ Cuáles son las ventajas
y desventajas de cada una?
8. Describa las diferencias entre un experimento reali­
zado in oioo, in uitro e in situ. ¿ Cuáles son las venta­
jas y desventajas de cada enfoque experimental?
9. ¿Cómo puede determinarse si la frecuencia cardíaca
en reposo de un animal está influenciada por Jos rit­
mos diarios'>
LECTURAS RECOMENDADAS
Burggren, W. W. «Invasivo and noninvasive methodologies in
physiological ecology: a plea for íntegration». En: M. E. Fe­
der, A. F. Bennett, W.W . Burggren, y R. Huey, eds., New Di-
rections in Plrysiotoqical Ecoloqy. New York: Cambridge Uni­
versiry Press, págs. 251­272. (Descripción de los dos
principales enfoques en la experimentación animal) 1987.
Burggren, W. W., y Fritsche, R.: «Cardiovascular measurements
in animals in rhe milligram body mass range». Brazil. J. Me(i.
Biol. Res 28: 1291­1305. (Descripción de métodos para apli­
car técnicas cardiovasculares a animales microscópicos.)
1995.
Cameron, J. N.: Principies of pliysioloqica! 11'feas111·eme111. New
York: Academic Press. (Una breve, pero detallada, introduc­
ción a varios importantes métodos de mediciones fisiológi­
cas.) 1986
Hall, Z.: J\11 iniroduction to Molecular Neurobioloqy. Sunder­
land, Mass.: Sinauer Associates. (Una exposición exhaustiva
de cómo un enfoque molecular puede proporcionar una vi­
sión enriquecedora en un sistema de órganos de importancia
vital.) 1992.
Lodish, H., et al.: Molecular Cell Bioloqy. 3." ed. New York:
Scientific American Books. (Un texto bien escrito y muy ex­
tenso que describe muchas técnicas utilizadas para el análisis
molecular de la célula.) 1995.
Lorenz, K. Z.: Studies in Animal and Human Behaoior. Vol. l.
Cambridge, Mass.: Harvard University Press. (Recopilación
de artículos de investigación, traducidos del alemán original,
que describen la investigación inicial de Lorenz, que ganó el
premio Nobel de Fisiología en 1973.) J 970.
 . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . .

CAPiTlJLO

3
MOLÉCULAS, ENERGÍA
Y BIOSÍNTESIS
.. . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . " . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

L os organismos vivos que hay en nuestro planeta moléculas podrían haberse acumulado en los antiguos
forman un conjunto muy amplio y variado, que va mares someros, formando una «sopa orgánica» en la
desde los virus, bacterias y protozoos a las plantas con que la vida pudo dar sus primeros pasos en la evolución
ñores, los invertebrados y los animales «superiores». A de la organización. La combinación y recombinación de
pesar ele esta inmensa diversidad, todas las formas ele estas moléculas produjo finalmente las formas de vida
vida que conocemos constan de los mismos elementos más simples, capaces de producir y ordenar moléculas
químicos y de tipos similares de moléculas orgánicas. más complejas en conjuntos de información como áci­
Además, todos los procesos vitales se producen en un dos nucleicos y enzimas. Un paso crítico en el proceso de
medio acuoso y dependen de las propiedades ñsicas y formación de organismos unicelulares primitivos fue la
químicas de este disolvente universal y muy especial. formación de gotitas de líquido rodeadas por una mem­
Que todos los organismos vivos comparten una bioquí­ brana. Las moléculas lipídicas (grasas) formarán espon­
mica común es una ele las más poderosas evidencias en táneamente una doble capa. de «piel molecular» alrede­
apoyo de su parentesco evolutivo, el hilo común que dis­ dor ele las microscópicas gotas. Cuando estas «pieles»
curre por todas las áreas del estudio biológico. fueron incorporando otros materiales (nucleótidos sim­
ples, etc.), se estaban ciando los primeros pasos en el ca­
mino para formar una auténtica membrana celular: es­
EL ORIGEN DE LAS MOLÉCULAS tructuras delgadas que encierran el contenido de una
BIOQUÍMICAS CLAVE célula, controlan el movimiento de moléculas entre el in­
terior celular y el medio que la rodea y proporcionan
Los biólogos generalmente están de acuerdo en que la una estructura potencial para organizar su contenido.
vida empezó por fenómenos de azar y selección natural Muchísimos de estos pasos adicionales definieron la vía
en unas condiciones ambientales apropiadas de la Tierra al vasto conjunto actual de especies en los más de 35
primitiva. Los experimentos que llevó a cabo por prime­ tipos que hoy están presentes en la Tierra.
ra vez Stanley Miller, en 1953, demuestran que ciertas Este escenario hipotético de los primeros estadios de
moléculas esenciales para la vida primitiva (p. ej., ami­ la evolución de la vida genera muchas cuestiones. ¿Has­
noácidos, péptidos y ácidos nucleicos) se forman por la ta qué punto pudo depender el origen de la vida de las
acción ele descargas eléctricas semejantes a relámpagos condiciones «adecuadas»? ¿Podría haber aparecido
en una atmósfera de metano, amoníaco y agua. Esta at­ vicia de otra clase en la Tierra si el ambiente químico y
mósfera simple se considera similar en su composición a físico hubiese sido muy diferente? ¿ Y si suponemos que
la atmósfera primitiva ele la Tierra de hace unos 4 mil no hay átomos de carbono? Como veremos inmediata­
millones de arios. También se cree que la atmósfera ini­ mente, la presencia de la vida tal como la conocemos (y
cial se fue modificando durante los eones subsiguientes somos capaces de imaginar) depende sobre Lodo de la
por las plantas fotosintóricas, que añadieron las inmen­ naturaleza química del ambiente terrestre. Es decir, que
sas cantidades de oxígeno que hoy existen y que son ca­ la vida podría no haber existido o bien ser totalmente
paces de captar compuestos de nitrógeno para incorpo­ diferente, si alguna. de las propiedades fundamentales de
rarlos a compuestos biológicos nitrogenados. la materia hubiese sido distinta.
La formación experimental de moléculas orgánicas Hace algún tiempo hubo una controversia encarniza­
simples en condiciones similares a las que debieron pre­ da entre los vitalistas, que creyeron que la vida se basaba
valecer en la atmósfera primigenia sugiere que dichas en principios «vitales» especiales que no se observaban

41
42 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA

en el mundo inanimado, y los rnecanicistas, quemante­
nian que la vida puede explicarse en definitiva en térmi­
nos físicos y químicos. Hasta principios del siglo dieci­
nueve los que estudiaban el mundo natural suponían
que la composición química de la materia viva difería
fundamentalmente de la que presentan los seres inani­
mados. El punto de vista vitalista consideraba que las
sustancias «orgánicas» sólo pueden ser producidas por
los organismos vivos, lo cual los sitúa, no se sabe cómo,
aparte del mundo inorgánico. Esta concepción se de­
rrumbó en 1828, cuando Friedrich Wohler hizo reaccio­
nar cianato con amoniaco, ambos con un origen mineral
inanimado, para sintetizar la molécula orgánica simple
de orea:
o proporciona más complejidad funcional al conjunto
11
NH2-C-NH2
El éxito de su síntesis orgánica abrió la puerta a los mo­
dernos estudios químicos y físicos, que han ayudado en
la comprensión de los mecanismos de los procesos vita­
les. Los bioquímicos modernos pueden ahora duplicar
in nitro en sistemas 'libres de células prácticamente cual­
quier reacción de síntesis y metabólica que normalmente
realizan las células vivas.
Los procesos bioquímicos y fisiológicos de los orga­
nismos vivos se basan únicamente en las propiedades f'i-
sicas y químicas de los elementos y compuestos que con­
tienen. A primera vista parece que las propiedades de los
sistemas vivos son demasiado complejas y maravillosas
como para que puedan explicarse con una simple mezcla
de elementos y compuestos. Es más, los sistemas vivos
no son simples «sopas» químicas, sino estructuras alta­
mente organizadas formadas a menudo por moléculas
grandes y complejas denominadas macromoléculas. En
la regulación y dirección de las actividades químicas de
las células vivas participan macromoléculas de muchas
clases. Los orgánulos, como la membrana celular, Iisoso­
mas y mitocondrias, proporcionan organización estruc­
tural a la célula, unidad básica de los sistemas vivos, di·
ferenciándolos del ambiente que los rodea y separándolos
internamente en compartimientos y subcompartimien­
tos. También mantienen a las moléculas en una relación
espacial, importante desde el punto de vista funcional,
con otras moléculas. Las células están organizadas en
tejidos, y éstos en órganos, que a su vez lo están en siste­
mas que interaccionan. Así, el organismo presenta una
organización jerárquica, en la que cada nivel superior
(véase la Fig. 1-1). En este capítulo empezamos por el
nivel más básico, el nivel químico, y aprendemos cómo
los principios simples de las reacciones químicas se apli­
can al conjunto de macromoléculas y de orgánulos celu­
lares más complejos que constituyen la célula.
ÁTOMOS, ENLACES V MOLÉCULAS
Toda la materia se compone de elementos químicos, los
cuales podemos disponer en la conocida tabla periódi­
ca de elementos naturales y unas docenas de elementos
producidos artificialmente, que se han creado fugaz­
mente en el laboratorio (Fig. 3­1). De Lodos los elemen­
tos químicos, sólo un pequeñísimo grupo se encuentra
de manera natural en el tejido animal. El Cuadro 3­1
compara los principales componentes de la corteza mi­

Primera
­­
1 2
capa H He

Sequnda 3 4. 5 6 7 8 9 10
capa Li Be B e N o F Ne
Tercera 11 12 13 14 15 16 17 18
capa Na Mg Al Si p s CI Ar

Cuarta 19 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32
.
33 34
­ 35 36
20
capa K Ca Se Ti V Cr Mn Fe Co Ni Cu Zn Ga Ge As Se B,· Kr
­
Quinta 37 38 39 40 41 42 43 44. 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54
capa Rb Sr y Zr Nb Mo Te Ru Rh Pd Ag Cd In Sn Sb Te 1 Xe
Sexta 55 56 57 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86
capa Cs Bn la Hf Ta w Re Os Ir PI Au Hg TI Pb Bi Po At Rn
··-··
Séptima 87 88 89 104 105 106
capa Fr Ra Ac

58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71
Ce Pr Nd Pm Sm Eu Gd Tb Dy Ho fa Tm Yb Lu
­­­­
90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103
Th Pa u Np Pu Am Cm Bk Cf E3 Fm Md No Lw

Figura 3-1. En la tabla periódica de los elementos. cada fila corresponde a una capa orbital de electrones diferente. Los elementos de las
letras de color tienen importancia fisiológica en sus formas ionizadas.
 MOLÉCULAS, ENERGÍA Y BIOSÍNTESIS 43

Cuadro 3-1 igual al de protones del núcleo. La carga y la masa (en

Comparación de la composición química del cuerpo humano
daltons, Da) de las partículas atómicas es:
con la del agua de mar y de la corteza terrestre"
• Protón: + I; 1.672 Da
Cuerpo humano Agua de mar Corteza terrestre
• Neutrón: O; 1.674 Da
H 63 H 66 o 47 • Electrón: ­1; 0.001 Da
o 25.5 o 33 Sí 28
e 9.5 CI 0.33 Al 7.9 Como que los electrones, cargados negativamente,
N 1.4 Na 0.28 Fe 4.5 igualan en número a los protones, cargados positiva­
Ca 0.31 Mg 0.033 Ca 3.5 mente, cada átomo en su estado elemental no tiene carga
p 0.22 s 0.017 Na 2.5
eléctrica neta. Aunque el número de protones y neutro­
CI 0.03 Ca 0.006 K 2.5
K 0.06 K 0.006 Mg 2.2 nes del núcleo es el que determina principalmente la
s O.OS e 0.0014 Ti 0.46 masa de un átomo, su reactividad química depende de
Na 0.03 Br 0.0005 H 0.22 los electrones que lo rodean. los electrones no están en
Mg 0.01 e 0.19
órbitas fijas, aunque su distribución estadística es tal,
Todos los Todos los Todos los
demás <0.01 demás <0.1 demás <0.1
que ocupan algunas posiciones con mayores probabili­
dades que otras, Esta distribución es muy sistemática, de
• Los valores son porcentaies del número to1a1 de Momos. Debid<) a que tal manera que en un átomo con uno o dos electrones,
se han redondeado las <_;¡fras, los rotales no suman 100.
Fuente: Biology: An Aoorectouoo of Life, 1972.
las trayectorias orbitales están confinadas virtualmente
en una «capa» única alrededor del núcleo, como en los
átomos de hidrógeno y de helio (Fig. 3­2). En los átomos
neral de la Tierra y del agua de mar con los del cuerpo que tienen de 3 a 10 electrones (p. ej., carbono, nitrógeno
humano. Aproximadamente el 99 % del cuerpo huma­ y oxígeno) esta primera capa está ocupada por dos elec­
no está formado por sólo cuatro elementos: hidrógeno, trones; los restantes ocupan una segunda capa localiza­
oxígeno, nitrógeno y carbono; y es válido para todos da más lejos del núcleo, que puede contener hasta ocho
los organismos. La preponderancia de estos elementos electrones. En los átomos con 11 a 18 electrones (p. ej.,
en los sistemas vivos ¿es simple cuestión de azar, o hay sodio, fósforo y cloro) se forma una tercera capa, que
una explicación mecanicista para su predominio unifor­ puede contener hasta ocho electrones. La cuarta y quin­
me dentro de la gran diversidad de organismos que han ta capas pueden con tener hasta J 8 electrones cada una
evolucionado durante los últimos 3 mil millones de (Fig. 3­3).
años'? Cuando la capa más externa de un átomo contiene el
George Wald, un biólogo que ha contribuido enorme­ número máximo de electrones posible en esa capa (es
mente a nuestro conocimiento de la base química de la decir, que no puede acomodar más electrones), el átomo
visión, argumentaba que la predominancia biológica del es muy estable y se resiste a reaccionar con otros áto­
hidrógeno, oxígeno, nitrógeno y carbono no es en abso­ mos. Esto ocurre con todos los gases nobles, como el
luto una cuestión de azar, sino el resultado inevitable de helio y neón, que aparecen a la derecha de la tabla perió­
algunas propiedades atómicas fundamentales de estos dica. Sin embargo, la mayor parte de los elementos tie­
elementos (propiedades que los hacen especialmente nen las capas de electrones externas incompletas y, por
adecuados para la química de la vida). Vamos a hacer lo tanto, reaccionarán con otros átomos. El hidrógeno,
una breve revisión de los factores que influyen en el com­ por ejemplo, tiene un electrón en lugar de dos en su úni­
portamiento químico de los átomos, y volveremos a ca capa, y el oxígeno sólo tiene seis electrones, en lugar
considerar las ideas de Wald. de ocho, en su capa externa. Por ello los átomos de hi­
La estructura atómica es mucho más compleja y sutil drógeno y de oxígeno tienen tendencia a compartir elec­
de lo que se podría describir aquí; para nuestros propó­ trones hasta llenar sus capas externas respectivas y con­
sitos, sólo necesitamos considerar algunas característi­ seguir configuraciones más estables.
cas básicas que afectan a la formación de los enlaces quí­ Aunque el número de electrones de la. capa. externa
micos entre átomos y moléculas. Los bloques químicos tiene una gran influencia en las características físicas y
básicos de construcción de toda la materia, los elemen­ en la reactividad de un átomo, otros aspectos físicos
tos, están a su vez formados por partículas aún más pe­ también son importantes para determinar sus propieda­
queñas, cada una de las cuales tiene distintas propieda­ des químicas. Uno de ellos es el tamaño (o peso) del áto­
des. Es importante para la fisiología animal conocer el mo. Cuanto más pesado sea un átomo (es decir, más
comportamiento de tres de estas partículas (protones, neu- protones y neutrones tenga en su núcleo), más electrones
trones y electrones), porque rigen las interacciones entre rodearán al núcleo. Si el número de electrones excede de
los elementos centrales de la vida orgánica. Estas ínter­ diez y aparece una tercera capa de electrones, los electro-
acciones entre las tres partículas realmente dictan la nes de valencia (es decir, los de la capa más externa) esta­
atracción entre elementos, que es necesaria para la pro­ rán lógicamente a mayor distancia de] núcleo compacto
pia vida. y, por ello, menos fuertemente atraídos por él que los
Cada átomo posee un núcleo denso de protones y neu­ electrones de valencia de átomos con sólo dos capas; ello
trones rodeado por una «nube» de electrones en número es debido a que las interacciones electrostáticas entre los
44 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
electrones y protones de carga única (monopolos) dismi­
nuyen según el cuadrado de la distancia. Así, el cloro,
con siete electrones en la capa tercera y más externa, es
menos reactivo que el flúor, en el que los siete electrones
de la capa externa están en la segunda (véase Fig. 3­2).
Ambos átomos tienen tendencia a ganar un electrón
para completar su capa más externa, pero es más acusa­
da en el flúor, dado que su capa más externa experimen­
ta una atracción electrostática con su núcleo mayor que
el átomo de cloro, que es más grande. Como resultado, y
si otros aspectos son iguales, los enlaces con otros áto­
mos que forma un átomo pequeño son más fuertes, y por
Jo tanto más estables, que los de un átomo grande.
LAS FUNCIONES ESPECIALES
DEL H, O, N, V C EN LOS PROCESOS
VITALES
Podemos volver ahora a la tesis de Wald de que el hidró­
geno (H), el oxígeno (O), el carbono (C) y el nitrógeno (N)
dominan en la composición de los sistemas biológicos,
porque se prestan especialmente bien para la química de
los sistemas vivos. El examen de la tabla periódica revela
Número de electrones
por átomo
1ó2
Hidrógeno
3 ­ 10
Oxígeno
11 ­ 18
Fósforo
que estos cuatro elementos tienen una o dos capas de
electrones. De los otros elementos con una o dos capas de
electrones el helio v el neón son virtualmente t:>eases iner­
... 7 .,
tes y escasos, el boro y el flúor forman sales relativamente
raras, y los metales litio y berilio forman enlaces iónicos
fácilmente disociables. Por el contrario, 1­1, O, N y C for­
marán enlaces covalentes fuertes al compartir uno, dos,
tres y cuatro electrones, respectivamente, para completar
sus órbitas electrónicas más externas.
¿Por qué son importantes los enlaces fuertes en los sis­
temas vivos? Sin uniones fuertes, pequeños cambios de
temperatura, pH o de otras variables del medio que rodea
a una molécula causarían su rotura o una reordenación.
Se ha de considerar, por ejemplo, el caos biológico que se
produciría si los enlaces químicos del material hereditario
formado por el A.DN fueran fácilmente disociables y alte­
rables. De hecho, las mutaciones son muy raras (menos
de una por gen cada 1 O 000 replicaciones) debido a que
los átomos que componen el ADN están fuertemente uni­
dos unos con otros en un gran número de combinaciones.
La integridad a corto plazo de cada organismo y de cada
especie depende de los enlaces estables que mantienen
unidas las estructuras del ADN y otras macrornoléculas.
Tres de los cuatro elementos biológicamente más im­
portantes (O, N y C) son de los poquísimos que forman
Figura 3-2. Los electrones que ro-
dean al núcleo de cada átomo se dis-
tribuyen estadisncamante en capas
orbitales. Si la capa externa de un
átomo no contiene el número máxi-
mo de electrones, ese átomo tiende
a compartir electrones con otros for-
mando enlaces químicos. Por el con-
trario, los átomos con la capa externa
llena (p. ej.. helio) son químicamente
Helio inertes. La reactividad química tam­
bién depende del tamaño del átomo.
Si los demás aspectos son iguales,
un átomo pequeño (p. ej., fll'.11.11·) es
más reectivo y establece enlaces
químicos más fuertes y estables que
un átomo grande (p. ej., cloro).
Flúor
Cloro
 MOLÉCULAS, ENERGÍA Y BIOSÍNTESIS 45

H o
1 u
H·-C-01-1 C-OH
1 1
O=C O H-C-Ol-l HN-C-H
Dióxido de carbono 1
3 1
H-C-OH H-C-CH,
1 1 '
H CI-13
Glicerol Valina

Figura 3-3. Cada capa orbital de la estructura atómica puede
acomodar un número máximo de electrones cargados neqativa-
mente. como se muestra aquí para las cuatro primeras capas
orbitales (numeradas 1, 2, 3, 4). Los átomos con más electrones
ele los suficientes para llenar, por ejemplo, las capas 1 y 2 forma­
rán una capa o capas adicionales.
dobles o triples enlaces. Estos enlaces múltiples no sólo
incrementan la estabilidad de las moléculas que los
poseen, sino que también aumentan la variedad de las
configuraciones moleculares que pueden formarse por
reacción de estos elementos (Fig. 3­4). El oxígeno, por
ejemplo, puede reaccionar con el carbono para formar
dióxido de carbono, C02 Como los dos dobles enlaces
que unen los átomos de O al átomo de C satisfacen la
tendencia a reaccionar de los tres átomos, la molécula de
C02 es relativamente inerte. Por ello el C02 es capaz de
difundir fácilmente de su lugar de formación para estar
disponible para su reciclaje mediante el proceso Iotosinté­
tico de las plantas verdes. Debido a que el átomo de car-
bono tiene una valencia de cuatro, puede formar cuatro
enlaces simples, dos enlaces dobles y combinaciones ele
enlaces simples con dobles o triples enlaces, confiriéndole
la capacidad de formar una gran variedad de cornbinacio-
nes atómicas consigo mismo y con otros átomos, inclu­
yendo cadenas lineales, ramificadas y estructuras en ani­
llo (véase la Fig. 3­4).
El silicio (Si), que en la tabla periódica está en la misma
columna y justo debajo del carbono, tiene algunas pro­
piedades similares a las de este átomo. Sin embargo, a
diferencia del carbono, es más grande y no forma dobles
enlaces. Por lo tanto, se combina con dos átomos de oxí­
geno por sólo dos enlaces simples:
0-�i-Ó
1 1
Dado que las capas de electrones externas de los tres áto­
mos del dióxido de silicio (SiOi) no están completas, la
molécula de Si02 se une fácilmente con otras de su clase,
formando las enormes moléculas poliméricas que origi­
nan las arcillas y arenas. Por ello es evidente que el silicio,
aunque tenga algunas propiedades similares a las del car­
bono, es más adecuado para la formación de rocas que
NI-I2 H
I H I
,,,,e, H OH I .,,,,.C-S
H N' 'C-C-N' 1 1 1
1 1 JI 1 'C=C-C-C- I­1
I·I­C­C""­ ,,..CH H 1 1 l
I N. 1-l-C-H H H
H I
H
Tiamina (vitamina Bi)
Figura 3·4. La capacidad dt�I carbono, el oxígeno y el nitrógeno
para formar, además de los enlaces simples, dobles enlaces [en
rojo), incrementa en grnn manera la diversidad de las estructu-
ras moleculares con estos elementos. El gllcernl es un constitu-
yente de las grasas y la valina uno de los aminoácidos presentes
en las proteínas naturales.
para la participación a gran escala en la organización de
moléculas biológicas.
Además de su importante función de combinarse con el
hidrógeno para formar agua, el oxígeno actúa como
aceptor final de electrones en la. secuencia de reacciones
de oxidación mediante las cuales se libera la energía quí­
mica en el metabolismo celular. Esta importante capaci­
dad para oxidar a otros átomos y moléculas (aceptar elec­
trones) se debe a la capa de electrones externa incompleta
y al peso atómico relativamente bajo del oxigeno.
Además de los cuatro elementos biológicos principales,
muchos otros participan en la química de la célula, aun­
que en cantidades menores (véase el Cuadro 3­l). Entre
ellos están el fósforo (P) y el azufre (S), los iones de cuatro
elementos metálicos (Na ", K +, Mg2•1• y Ca2+) y el ion
cloruro (Cl­). Volveremos a hablar de ellos después.
EL AGUA: UN DISOLVENTE
EXTRAORDINARIO
Vivimos en el «planeta del agua». Debido a que el agua es
tan abundante, a menudo se la trata con indiferencia,
como una especie de relleno inerte ocupando espacio en
los sistemas vivos. La verdad es que el agua está relacio­
nada directa e íntimamente con todos los detalles de la
fisiología animal. El agua es una sustancia muy reactiva y
muy diferente tanto física como químicamente de la ma­
yoría de los otros líquidos. El agua posee varias propieda­
des inusuales y especiales de gran importancia para los
sistemas vivos. En realidad, la vida corno la conocemos
sería imposible si el agua no tuviese esas propiedades. Los
primeros sistemas vivos surgieron presumiblemente en el
medio acuático de mares poco profundos. No es por tan­
to sorprendente que los organismos vivos actuales estén
46 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
íntimamente adaptados, a nivel molecular, a las especiales
propiedades del agua. Hoy día, incluso los animales te­
rrestres contienen un 75 % o más de agua. Gran parle del
esfuerzo fisiológico se dedica a conservar el agua corporal
y a regular la composición química del medio acuoso in­
terno.
Las especiales propiedades del agua, tan importantes
para la vida, dependen directamente de su estructura mo­
lecular; por lo cual, empezaremos con una breve conside­
ración de la molécula del agua.
La molécula de agua
Las moléculas de agua e mantienen unidas por enlaces
cooalentes polares entre un átomo de O y dos de H. La
polaridad (es decir, la desigual distribución de cargas) de
los enlaces covalentes resulta de la gran tendencia del áto­
mo de O a adquirir electrones de otros átomos, en este
caso del H). Esta gran electronegatividad condiciona que
los electrones de los dos átomos de 11 de la molécula de
agua ocupen posiciones estadisucamente más próximas al
átomo de O que a sus propios átomos de H. El enlace 0-H,
es por lo tanto, cerca de un 40 % iónico en carácter, y la
molécula de agua tiene la siguiente distribución de cargas
parciales (ó representa la carga parcial local de cada átomo):
El ángulo entre los dos enlaces 0­H de la molécula de
agua en Jugar de ser de 90º, como sería un enlace pura­
mente covalcnte, se ha visto que es de 104.5º (Fig. 3­5).
El aumento del ángulo podría deberse a la repulsión
Radio de Van der Waals
del hidróqeno
� 1.2 A
Longitug del enlace
covalente
= 0.965 Á
Radio de Van der
Waals del oxígeno
1 ... = 1.4Á
Dirección del
momento del
dipolo
Figura 3-5. En la molécula de agua, la densidad electrónica es
mayor alrededor del átomo de oxígeno que alrededor de los áto-
mos de hidrógeno, dando un carácter semipolar al enlace 0-H.
La repulsión mutua entre las cargas parcialmente positivas de
los átomos de hidrógeno determina que el ángulo entre los dos
enlaces 0-H sea mayor que el característico de los enlaces pura-
mente covalentes. (.5�) y (J-) indican, respectivamente, cargas
parciales positivas y negativas.
mutua de los dos núcleos de H cargados posiiivamen­
te, que tienden a separarse. Por el contrario, los enlaces
S­11 del sulfuro de hidrógeno, H2S, son puramente cova-
lentes; no hay distribución asimétrica de cargas como en
el H20. Así, el ángulo de enlace en el H 2S es cercano
a 90º. Debido a In naturaleza scmipolar de los enlace
0-11, el l-120 difiere muchísimo, química y físicamente, del
H2S y de otros hidruros relacionados. ¿Por qué es así?
La distribución desigual de los electrones en la molé­
cula de agua determina que actúe como un dipolo. O sea,
se comporta de manera parecida a una barra imantada,
pero que en lugar de tener dos polos magnéticos opues­
tos, tiene dos polos eléctricos opuestos, positivo y nega­
tivo (véase la Fig. 3­5). En consecuencia, la molécula de
agua tiende a alinearse en un campo electrostático. El
momento del dipolo es la fuerza de giro ejercida sobre la
molécula por un campo externo. El elevado momento
del dipolo del agua (4.8 debyes) es la característica ñsica
más importante de la molécula y explica muchas de sus
especiales propiedades.
La característica química más importante del agua es
su capacidad para formar puentes de hidrógeno entre los
cercanos protones desprovistos de electrones y cargados
positivamente (los átomos de H) de una molécula de agua
y los átomos de oxígeno cargados negativamente y ricos
en electrones de la moléculas de agua vecinas (Fig. 3­6).
En cada molécula de agua, cuatro de los ocho electrones
de la capa externa del átomo de oxigeno están unidos
o···
t
=
.....
. ..
.•
•
�­­
Figura 3-6. Debido a la naturaleza semi polar de los enlaces 0-H
del agua, moléculas de agua adyacentes fonnan puentes de hi-
drógeno. Estos enlaces no covatentes (indicados por los puntos
negros) representan la interacción electrostática entre los hidró-
genos con carga parcial positiva de una molécula y los oxígenos
electronegativos de moléculas vecinas.

covalentemente con los dos átomos de hidrógeno. Esto
deja dos pares de electrones libres para actuar electros­
táticamente (es decir, formar puentes de hidrógeno) con
los átomos de H pobres en electrones de las moléculas
de agua próximas. Dado que el ángulo entre los dos en­
laces covalentcs del agua es de aproximadamente 105º,
grupos de moléculas de agua unidas por puentes de hi­
drógeno forman ordenaciones tetraédricas. Esta disposi­
ción es la base de la estructura cristalina de la forma más
común de hielo.
Propiedades del agua
La estructura de puentes de hidrógeno del agua es muy
lábil y temporal, pues el período de vida medio de 1111
puente de hidrógeno en el agua líquida es de sólo unos
10­ 10 a 10­11 segundos. Esta transitoriedad se debe a la
naturaleza relativamente débil del puente de hidrógeno.
Sólo se necesitan 4.5 x 10:1 calorías (4.5 kcal) de energía
para romper un mol de puentes de hidrógeno, mientras
que romper los enlaces covalentes 0­H de la molécula
de agua requiere una energía de 110 kcal · mol­ i_ Como
resultado de la debilidad de los puentes de hidrógeno,
no hay grupos específicos de moléculas de H20 que per­
manezcan unidos más de unos breves instantes. Sin em­
bargo, y desde una perspectiva estadística, una fracción
constante de la población está unida por puentes de hi­
drógeno en cualquier momento y a una temperatura
dada.
A pesar de su modesta fuerza, el puente de hidrógeno
aumenta la energía total (o sea, el calor) que se precisa
para separar moléculas individuales del resto de la po­
blación. Por esta razón, los puntos de fusión y de ebulli­
ción y el calor de vaporiz:tci(m del agua son mucho ma­
yores que los de otros hidruros comunes de elementos
relacionados al O (p. ej., NH3, HF y I­12S). De los hidru­
ros comunes, sólo el agua tiene un punto de ebullición
(100 ºC) muy por encima de las temperaturas típicas de
la superficie de la Tierra.
La unión difusa estadística entre las moléculas de
agua también le confiere al agua una tensión superficial y
una cohesión anormalmente elevadas, lo cual tiene gran­
des implicaciones en los sucesos tanto bioquímicos
como biológicos que se producen en las interfases
aire/agua, o que dependen de ellas. El hielo presenta una
red cristalina abierta, mientras que el agua tiene una or­
ganización molecular más aleatoria, que le da una orga­
nización molecular más apretada y densamente empa­
quetada. Como resultado, el agua es extraordinaria
porgue en su forma sólida, el hielo, es menos densa que
en su forma líquida. Si el hielo fuese más denso (pesado)
que el agua, una opinión ampliamente compartida es la
de que los océanos y lagos se habrían convertido en hie­
lo sólido, excepto en la superficie, puesto que el hielo se
formaría empezando por el fondo. Obviamente, esta
propiedad del agua ha tenido un gran impacto sobre la
vida en la Tierra.
MOLÉCULAS, ENERGÍA Y BIOSÍNTESIS 47
El agua como disolvente
Los alquimistas medievales, buscando el disolvente uni­
versal, no fueron capaces de encontrar uno mas efectivo
y «universal» que el agua. Las características de disol­
vente del agua se deben principalmente a su elevada
constante dieléctrica, una manifestación de su polaridad
electrostática. La constante dieléctrica. es una medida
del efecto que el agua o cualquier sustancia dieléctrica
polar tiene de disminuir la fuerza electrostática entre dos
cargas separadas por agua u otro medio dieléctrico '.
Esto lo ilustra especialmente bien el comportamiento de
los compuestos iónicos, o electrólitos, que se disocian
(ionizan) a] disolverse en agua, aumentando así la con­
ductividad de la disolución. Los electrólitos comunes in­
cluyen sales, ácidos y bases. Por el contrario, los solutos
que no experimentan disociación, y que por tanto no
aumentan la conductividad de una disolución, se deno­
minan no electrólitos. Los azúcares, alcoholes y aceites
son ejemplos comunes de no electrólitos.
La Figura 3­ 7/\ ilustra la disposición de los iones Na+
y Cl ­ en un cristal de cloruro de sodio. Esta disposición
tan estructurada se mantiene lírrnementc unida por la
atracción electrostática entre los iones sodio cargados po­
sitivamente y los iones cloruro cargados negativamente.
Un líquido apolar, como el hexano, no puede disolver el
cristal, porque no hay fuente de energía en el disolvente
apolar para arrancar a un ión del resto del cristal. Sin
embargo, el agua puede disolver el cristal de NaCl, igual
que puede disolver muchos otros compuestos iónicos.
La fuerza disolvente del agua se debe a que las moléculas
de agua dipolares pueden vencer a las interacciones elec­
trostáticas entre los iones individuales (Fig. 3­7B). Se
produce una unión electrostática débil entre la carga ne­
gativa parcial de los átomos de oxígeno y los cationes
cargados positivamente (Na·•· en este caso). Esta unión
también se produce entre la carga positiva parcial de los
átomos de hidrógeno y los aniones cargados negativa­
mente (CI- en este caso). La agregación de moléculas de
agua alrededor de iones individuales y de moléculas po­
lares se denomina solvatación o hidratación.
Las moléculas de agua que rodean los iones se orien­
tao de manera que sus polos positivos están dirigidos
hacia los aniones (iones con carga negativa) y los polos
negativos hacia los cationes (iones con carga positiva).
Esta orientación además reduce la atracción electrostá­
tica entre los cationes y los aniones disociados de un
compuesto iónico. En cierto sentido, las moléculas de
H20 actúan como «aislantes». La primera capa de mo­
léculas de agua que rodea a un ion atrae a una segunda
' La fuerza. electrostática entre dos cargas separadas por agua u otro
medio dieléctrico viene dada por la ley de Coulomb:
en donde les la fuerza (cu dinas) cutre las dos cargas clcctrostáucas q, y
'h (en unidades electrostáticas], d es la distancia (en centímetros) entre
las cargas y e es la constante dieléctrica.
48 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
•
Sodio
Figura 3-7. El agua rompe la estructura cristalina de las sales al
interactuar electrostáticamente con los iones que componen la
sal. IAI Representación de l,1 estructura cristalina altamente or­
qanizada del cloruro sódico, mostrando los tamaños iónicos re-
lativos del Na+ y del c1-. (B) Hidratación del cloruro de sodio. Los
átomos de oxígeno de las moléculas de agua se ven atraídos por
los cationes, mientras que los hidrógenos lo son por los amones.
capa de moléculas de agua menos firmemente unidas y
orientadas de forma inversa. La segunda capa puede in­
cluso atraer más agua a una tercera capa. Así, el ion pue­
de presentar una cantidad considerable de agua de hi-
dratación. El diámetro efectivo de los iones hidratados
de una carga determinada varia inversamente con sus
diámetros. Por ejemplo, los radios iónicos del Na" y el
K+ son 0.095 y 0.133 nrn, respectivamente, mientras que
sus radios hidratados efectivos son 0.24 y O. 17 rnn, res­
pectivamente. La razón de esta relación inversa es que la
fuerza electrostática entre el núcleo del ion y la molécula
dipolar del agua disminuye de forma marcada con la
distancia entre la molécula de agua. y el núcleo del ion
(Fig. 3­8). Así, el ion más pequeño se une más fuertemen­
te con el agua y por ello se rodea de un gran número de
moléculas de agua.
El agua también disuelve algunas sustancias orgáni­
cas (p. ej., alcoholes y azúcares) que en disolución no se
disocian en iones, pero han de tener propiedades pola­
res. Por el contrario, el agua no disuelve compuestos que
sean totalmente apelares (tales como grasas o aceites), ni
se disuelve en ellos, puesto que no puede formar puentes
de hidrógeno con dichas moléculas. No obstante, sí
reacciona parcialmente con los compuestos anfipáticos.
que tienen un grupo polar y un grupo apelar. Un buen
ejemplo es el olea to sódico, un constituyente común del
jabón, que tiene una cabeza polar hidrófila (atrae al
agua) y una cola apolar hidrófoba (repele al agua). Si se
agita una mezcla de agua y oleato sódico, el agua dis­
persará a este último en minúsculas gotitas, Las molé­
culas de oleato sódico de estas gotitas o micelas, se dis­
ponen con sus colas hidrófobas y apelares agrupadas
en el centro y sus cabezas hidrófilas y polares dispues­
tas en la periferia, cara al exterior, para interactuar con
el agua (Fig. 3­9/J). El mismo comportamiento presen­
tan las moléculas de fosfoiípidos, que también tienen
grupos hidrófobos e hidrófilos. Esta tendencia de las
moléculas anfipáricas a formar micelas en agua es im­
portante para la formación de las membranas biológi­
cas de las células vivas. La formación de micelas puede
haber constituido la base de la primera organización de
tipo celular de un sistema vivo en los mares de poca
profundidad y ricos en sustancias orgánicas, en los que
se considera que se produjeron los primeros pasos evo­
lutivos.
LAS PROPIEDADES
DE LAS DISOLUCIONES
Como ya se ha indicado, el agua desempeña una función
capital en los sistemas vivos, pues en realidad muchos de
los procesos físicos y químicos de las células se prod uccn
en disolución acuosa. Lo líquidos de células y tejidos
animales, así como el medio en el que viven los animales
acuáticos, dependen de los solutos (especialmente los
electrólitos) que contienen.
Concentración, propiedades coligativas
y actividad
Por convención, la cantidad de una sustancia pura se
expresa en moles (abreviado mol). Un mol es el número
de Avogadro de moléculas (6.022 x 1023) de un elemen­
to o compuesto; también equivale al peso molecular ex­
presado en gramos. Así, 1 mol de 12C son 12.00 g del
n úclido puro ºC, ó 6.022 x 1023 átomos de carbono.
Dicho de otra forma, hay 6.022 x 1023 moléculas en
2.00 g (l mol) de H2, en 28 g (1 mol) de N2 y en 32 g
(t mol) de 02.
En los procesos biológicos que impliquen moléculas
en disolución, la medida más relevante de la cantidad de
un soluto es su relación con la cantidad de disolvente (es
 MOLÉCULAS, ENERGÍA Y BIOSÍNTESIS 49

A B
d
U)
1.0 ­
-­
Carga ·� 0.8
Ion
O·­
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.. o / •··
2b­ :::,

-, � o 2 3 5
Ion Agu;i d (unidades arbitrarias)

Figura 3·8. Las interacciones entre iones y centros con carga se ven influidas por la distancia que los separa. La Fuerza electrostática, t.
entre un ion y un centro con carga opuesta varía inversamente con la distancia entre ellos, d. elevada a cierta potencia, a: t «: 1í<f'. (Al Para
una cargn puntual, o monopolo. el exponente a es igual a 2.0. por lo que la fuerza disminuye inversamente al cuadrado de la distancia.
Para un dipolo, corno la molécula de aqua, el valor de a puede ser hasta de 4.0. (BI Se representa la disminución de la fuerza electrostática
en función de la distancia para esos dos valores de ,i. En el caso del agua y una carga puntual positiva, el valor real es cercano a 3.0.

decir, la concentración). Algunas veces los fisiólogos ex­
presan la concentración de un sol u to en términos de mo­
lalidad (1n), el número de moles de soluto en 1000 g de
disolvente, no de disolución total. Por ejemplo, una diso­
lución uno mola! ele sacarosa se consigue disolviendo l
mol (342.3 g) de sacarosa en 1000 g de agua. Aunque 1
litro (L) de agua es igual a 1000 g, el volumen total de
1000 g de agua más J mol de soluto será algo mayor o
menor de I litro en una cantidad impredecible. Por ello,
la molalidad es una forma generalmente inconveniente
de expresar la concentración. Una medida más útil de
concentración en fisiología es la molaridad (M). Una di­
solución uno molar es aquella en la que un mol de sol u to
se disuelve en un volumen final total de 1 litro; se escribe
l mol/L, 1 mol· L ­ i 1 M. En el laboratorio, una diso­
ó
lución J M se hace añadiendo sencillamente suficiente
agua a 1 mol de soluto para conseguir que el volumen de
la disolución final llegue a 1 litro. Una disolución mili­
molar (mM) contiene l/1.000 moles por litro y una mi­
cromoiar (¡.1M') contiene 10­6 moles por litro. Si una di­
solución contiene concentraciones equimolares de dos
solutos, el número de moléculas de UJ1 soluto iguala al
del otro sol u to por unidad de volumen de la disolución.
Las propiedades coligativas de una disolución depen­
den del número de partículas de soluto que hay en un
volumen dado, independientemente de su naturaleza
química. Estas propiedades incluyen la presión osmóti­
ca, la disminución del punto ele congelación, el aumento
del pun Lo de ebullición y la disminución de la presión de
vapor de agua. Todas estas propiedades coligativas es­

A B

Figura 3-9. El oteare de sodio es un lipido antipático que forma

estructuras circulares denominadas rnicelas en un disolvente po-
lar como el agua. (Al Estructura química del oleato sódico con la
cabeza polar (hidrófila) en rojo y la larga cola apolar (hidról"oba)
en negro. (B) Esquema de una miceta con las moléculas lipídicas
antipáticos representadas por símbolos convencionales. Los ex-
tremos hidrófobos de la molécula tienden a evitar el contacto con
el disolvente polar agrupándose en el centro de la micela.
5() PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA

tán íntimamente relacionadas unas con las otras, puesto las otras propiedades coligativas de ese soluro. Esos va­
que se relacionan a su vez con el número de partículas de lores los proporciona el coeficiente osmótico, que debe
soluto disueltas en un volumen dado de disolvente. Así, medirse empíricamente para cada disolución.
1 mol de un soluto ideal (es decir, uno cuyas partículas
no se disocien ni se asocien) disuelto en 1000 g de agua a
la presión estándar (760 mrn Hg). disminuye el punto de Ionización del agua
congelación en 1.86 ºC, aumenta el punto de ebullición
en 0.54 ºC y presenta una presión osmótica de 22.4 atm Los enlaces entre las moléculas de agua son muy diná­
a la temperatura estándar (O ºC) si se mide con un apa­ micos, con enlaces covalentes y puentes de hidrógeno
rato ideal. La medida de cualquiera de estas propiedades que pueden intercambiar Jugares entre un instan le dado
coligativas puede usarse para determinar la suma de las y el siguiente. Debido a la naturaleza siempre cambiante
concentraciones de solutos en una disolución. Las con­ de las relaciones de unión entre las moléculas de agua
centraciones medidas de esta manera se expresan en os­ adyacentes, hay una probabilidad finita de que un áto­
moles por litro, o sea osmolaridad (osM). En teoría, os­ mo de hidrógeno de una. molécula de agua esté unido
molaridad y molaridad son equivalentes en disoluciones por un enlace covalente a un átomo de oxígeno de otra
de solutos ideales que no se disocien y que presenten las molécula, formando un ion hidronio, H 30 ­l'. La molécu­
mismas propiedades coligativas. la de agua que pierde un átomo de hidrógeno se convier­
La equivalencia teórica entre osmolaridad y molari­ te en un iou hidroxilo, OH­ (Fig. 3­1 OA). La probabili­
dad no se cumple en cambio en disoluciones de electróli­ dad de que se formen iones H3o·•· y OH- es en realidad
tos. Ello es debido a que una disolución de electrólito se muy pequeña. En un momento dado, un litro de agua
disocia en un mayor número de partículas individuales pura a 25 ºC contiene sólo LO x 10­7 moles de l-130 -l y
que una disolución de no electrólito de la misma molari­ un número equivalente de iones o»­.
las cargas positi­
dad. Como ejemplo, una disolución 10 mM de NaCI vas de los átomos de hidrógeno del ion hidronio forman
proporciona aproximadamen te el doble de partículas puentes de hidrógeno con los extremos electronegativos
que igual volumen de una disolución lOmM de glucosa, (oxigeno) de las moléculas de agua no disociadas que Jo
pues el NaCI es un electrólito altamente disociable. Por rodean, formando un ion hidronio hidratado y estable
ello las propiedades coligarivas, y por lo tanto la osrno­ (Fig. 3­10/J).
laridad, de una disolución de NaCI lO mM son casi La disociación del agua se indica por convención
equivalentes a las de una disolución de glucosa 20 m.M. como
Debido a la interacción electrostática entre los catio­
nes y aniones del elecrrólito disuelto, ha y u na pro babi li­
dad estadística de que en cualquier momento algunos
cationes estén asociados con aniones; por lo cual, el elec­ Ahora bien, se debe recordar que, de hecho, el protón
trólito se comporta como si no estuviese 100 %, disocia­
(H+) no está libre en disolución, sino formando parte del
do. La concentración libre efectiva de un electrólito, in­ ion hidronio. No obstante, un protón puede migrar a una
dicada por sus propiedades coligativas, ex presa su molécula de l-120 de alrededor, convirtiéndola por breve
actividad. El coeficiente de actividad, y, de un electrólito
plazo en un ion 1.130+, que a su vez cede uno de sus pro­
se define como la relación entre su actividad, a, y su con­ tones a otra molécula de agua (Fig, 3­11). Una secuencia
centración molal (no molar), m (y = aím). Sin embargo, y de dichas migraciones y desplazamientos puede actuar
como hemos señalado antes, la fuerza electrostática en­
sobre distancias relativamente largas, igual que una hilera
tre los iones disminuye con el cuadrado de la distancia de fichas de dómino que caen, aunque cada protón sólo
entre ellos (véase la Fig, 3­8A.). Por ello, si una disolución
viaje una distancia corta. Hay evidencias de que esta
de electrólito se diluye, aumentará su disociación. Dicho
de otra forma, la actividad y el coeficiente de actividad Cuadro 3-2
Coeficientes de actividad de electrólitos representativos
de un electrólito dependen de su tendencia a disociarse
a distintas concentraciones molales •
en disolución y de su concentración total. Cuanto menor
sea la concentración, mayor será el coeficiente de activi­ Concentración molal
dad. El Cuadro 3­2 indica los coeficientes de actividad
Electrólito 0.01 0.05 0.10 1.00 2.00
de algunos electrólitos comunes. Los que se disocian en
gran proporción (es decir, que tienen un elevado coefi­ KCI 0.899 0.815 0.764 0.597 0569
ciente de actividad) se denominan electrólitos fuertes NaCI 0.903 0.821 0.778 0.656 0670
(p. ej., KCI, NaCJ y HCI), y los que se disocian sólo ligera­ HCI 0.904 0.829 0.796 O 810 1.019
CaCl2 0.732 0.582 0.528 0.725 l.555
mente se denominan electrolitos débiles (p. ej., l\1gS04).
H2so. 0.617 0.397 0.313 1.150 0.147
Se ha de señalar que, aunque el coeficiente de actividad MgSO, 0.150 0.068 0.049
es útil como índice de la tendencia de una disolución a
lt· Los coeficientes de actividad se df!n a f}istinLas ccncoutracíones mola-
disociarse y por ello determinar las propiedades coligati­
les en lugar de molares. Sin eri"lb(ltHó, a conceruraciones bajas IQ tíH>Jo:1liclad
vas de esa disolución, el coeficiente de actividad no está y la molaridad son prácucamente iouales.
relacionado directamente con la presión osmótica o con Fuente: West, 1964.
 MOLÉCULAS, ENERGÍA Y BIOSÍNTESIS 5l

A
1­130· y el OH­ en el caso del agua). Se dice que el agua
1

es anfotérica, indicando que actúa corno ácido o bien

como base. También los aminoácidos tienen propieda­
des anfotéricas. Los ácidos comunes incluyen al ácido
clorhídrico, carbónico, al ion amonio y al agua:
B

Ácido clorhídrico HCl · ,,.I-r'· + c1-

Ácido carbónico HoC0
,. 1'
"'-;; M + I· neo;
3
Amonio NHl. ::::;;H+ + NH3
Agua I­120::::;;H+ + OH-

Las bases comunes incluyen amoníaco, hidróxido só­

dico, ion fosfato y agua:
Figura 3-10. La unión entre moléculas de agua adyacentes es
muy dinámica. (Al La resonancia puede provocar la separación Amoníaco NH3 + H+::::;; NH,t
de cargas, formando los iones hidronio. H:,o'·. e hidroxilo, OH-. Hidróxido sódico NaOI­1 + H+ .:::.,.Na+ + I­120
IBI El ion hidronio en disolución (en color) se asocia a tres molé- Ion fosfato HPO;- + H+ =:;H2PO¡
culas de agua por puentes de hidrógeno (líneas punteadas).
Agua 11 ¡() + 1-1 1 ::::;; H .o ·I·

conducción del protón puede tener una función impor­
tante en algunos procesos bioquímicos, como la fotosín­
tesis y la losforilación de la cadena respiratoria.
Ácidos y bases
La disociación del agua en los iones H+ y OH­ es un
proceso en equilibrio que puede describirse por la ley de
acción de masas, que dice, que la velocidad de una reac­
ción química es proporcional a las masas activas de las
sustancias que reaccionan. Por ejemplo, la constante de
equilibrio de la reacción

Cualquier sustancia que pueda ceder un protón se deno­

mina ácido, y cualquier sustancia que se coro bine con un
protón se denomina base. viene dada por la ecuación
Una reacción ácido­base siempre implica un par áci-
do-base conjuqado, el dador y el aceptor del protón (el [H''º][OH­]
(3­1)
[H20]

La concentración de agua permanece virtualmente

inalterada por su disociación parcial en H" y OH­,
dado que la concentración de cada uno de los produc­
tos disociados es de sólo 1.0­ 7 M (1.0­1 mol· L ­•), míen­
tras que la concentración de agua en un litro de agua
pura (igual a 1000 g) es 1000 g · L ­ 1 dividida por el peso
de la molécula gramo del agua (18 g · L ­ 1), 55.5 M
ó

(55.5 mol · L ­•). La ecuación 3­J puede simplificarse a

Hay que recordar que una consecuencia de la ley de

acción de masas es la relación recíproca entre las con­
centraciones de dos compuestos en un sistema en equili­
brio. Esta reciprocidad se aprecia en la constante
[H+][OH-], que puede englobarse junto con la molari­
dad del agua (55.5) en una constante que se denominará
el producto iónico del agua, Kw. A 25 ºC tiene un valor de
L x 10-H·:

figura 3-11. Los protones migran entre moléculas de agua. En

el proceso de transporte del protón, cada molécula de agua se
convierte brevemente en ion hidronio (arriba), pero répidamen-
te cede uno de sus protones a una molécula de agua vecina, Esta ecuación resulta del hecho, indicado anterior­
conviniéndola en ion hidronio. [Adaptada de Lehninger. 1975.1 mente, de que la [H·1·] y [OH­] son cada una igual a
 . . .
52 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
. . . . . . . . . . . . . . . . .........
10­7 mol· L ­1. Si la [l�i­1·] aumenta por alguna razón, Cuadro 3-3.
La escala de pH
como cuando se disuelve una sustancia ácida en agua, la
[OH­] disminuirá para mantener «; = 10­ 1'1·. Esta [H1I 1mr1
reacción es, naturalmente, la base de la escala de pH, el pH (mol· L- ')(mol· - ii Ejernplos
estándar de acidez y basicidad, medido corno la concen­ 1 o­·,.
o 101
tración de 1�1 + (realmente H /Y'") y definido corno 10­1 10 13
Jugos gáslricos hu-
manos
¡ Aumenta l,1 2 10­? rn- ,,
acidez 3 10 3 10-H Vinagre casero
4 10­· rn­10

Obsérvese que la escala de pfJ es logarítmica y que el 5 10­s 10-9 Interior de los liso-
sornas
rango típicamente va de LO M H + a 10­ H M H ,. (Cua­
6 10-0 10 o Citoptasma del
dro 3­3). Así, una disolución 10­3 M de un ácido fuerte, músculo activo
como el HCI, que en agua se disocia completamente, tie­ Neutralidad 7 10­7 10­1 Agu,1 pura a 25 C
ne un pl-1 de 3.0. Una disolución en la que [H +] = 8 10­s 10-G Agua de mar
[011­J = 10­� 1\1 tiene un pl­l de 7.0, y así sucesiva­ 9 10­9 ,o­,;
! Aumenta la 10 10­·10 10­• Lagos alcalinos
mente. Una disolución con un pll de 7 se dice que es
alcalinidad 11 10­11 ,o­" Amoniaco comer-
neutra (es decir, ni ácida ni básica). La relación entre cial
[J­l''] y [OH­] depende ele la temperatura, por Jo que el 12 10­12 10 2 Disolución saturada
verdadero <(pl­1 neutro» (denominado pN) en el que de cal
13 10­•3 10­1
[H ·1·] = (011 ­] de verdad es mayor de 7.0 a temperatu­
14 10­··· rnº
ras por debajo de 25 ºC y cae por debajo de 7.0 a tempe­
raturas superiores a 25 "C. El pH de una disolución pue-
de medirse adecuadamente como el voltaje producido
que contienen tanto grupos carboxilo (es decir, ­COO H),
por la difusión del 1­1 � a través de la envoltura ele un
como grupos amino (es decir, ­ NJ­1).
cristal selectivo para los protones de un electrodo su-
Los aminoácidos en disolución están normalmente en
mergido en la disolución (Fig. 3­12).
una configuración dipolar denominada zwit teriou (ion
doble):

m El pN (pH de neutralidad) aumenta al dis-

minuir ia ,temperatura. Muchos animales
que normalmente experimentan fluctua-
ciones de la temperatura de sus líquidos
corporales tienen mecanismos homeostá-
NH.,
1
R­Cª­COOH
1
1-1
­
R­c­coo­
Nl­1­ +
1

¡"
H
.,

ricos que mantienen el pH a una fracción No disociado Zwitterion

constante de una unidad de pH por encima
del pH neutral, en lugar de a un pH fijo per
se. Algunos tipos de operaciones a corazón
abierto en humanos requieren que se reba-
je la temperatura del cuerpo varios grados,
lo cual cambia el pH neutral de los líquidos
acuosos como la sangre. ¿Ha de mantener
el anestesista la sangre del paciente al pH
de 7.4, el valor normal de los seres huma-
nos, o debe permitir que el pH sanguíneo
aumente al bajar la temperatura corporal?
Cada aminoácido, como otras moléculas anfotéricas,
tiene un punl:o isoeléctrico característico, que es el pi I en
el que la carga neta de las formas 110 disociada y zwiuc­
rion es cero. Si el pll de una disolución de un aminoáci­
do disminuye, la concentración de H + de la disolución
incrementa. Corno resultado, la probabilidad de que un
protón neutralice a un grupo carboxilo. será mayor que
la probabilidad de que un ion hidroxilo capte el protón
extra del grupo amino. Una gran proporción de las mo­
léculas del aminoácido tendrán una carga positiva neta:

La importancia biológica del pH NH,'' Nl-1 3 º

1 .> 1

R-C,,-coo-+ H''� R­C"­COOl­1

Las concentraciones de los iones H.,. y OH­ son impor­
tantes en los sistemas biológicos porque los protones
son libres para moverse desde el H30+ y asociarse con
grupos cargados negativamente (y por tanto neutrali­
zándolos), y los iones OH- disponibles neutralizarán a
los grupos cargados positivamente. Esta capacidad de
neutralización es especialmente importante en los ami­
noácidos y las proteínas, que son moléculas aníoréricas
1 1
H H
El aumento del pll tendrá obviamente el electo
opuesto, y muchas moléculas de aminoácido tendrán
una carga negativa neta.
Los únicos grupos anforcncos de algunos aminoácidos
son el ­COO H y el - N H 3 unidos al átomo de ca rbo-
 MOLÉCULAS, ENERGÍA Y 610SÍNTESIS 53

en la que A - es el anión del ácido HA. La constante de

disociación que se deriva a partir de la ley de acción de
masas, viene determinada por:

[H.,.][A-]
K' ­ (3­2)
[HA]

Es conveniente utilizar la transformación Iogarirmica de

K', denominada pK', que es análoga al pl]. Así,

En consecuencia, si pK' = J 1 significa que K1 = 10-1 L.

Un pK' bajo indica un ácido fuerte y un pK' elevado, un
Alambre de ácido débil.
.,--·clorurn de plat.a
Los problemas de ácido­base pueden simplificarse
modificando la ecuación 3­2. Tornando los logaritmos
de ambos términos, obtenemos

log K' (3­3)

0.1 M HCI ' Cristal

. permeable
Que puede cambiarse asi
,1 los protones
Figura 3·12. Un elec1.rodo con una puma selectiva a los proto- (3­4)
nes es un aparato adecuado para medir el pH de las disolucio-
nes. El extremo <Je un electrodo ele pH contiene una disolución
de pH 7 (es decir, (H ,. J = 10 7 M). Cuando se sumerqe el electro- Sustituyendo ­log[H+J por pH y ­logK' por pK', se
do en una disolución de distinta [H+J. la diferencia de potencial obtiene
que se establece ti través de la envoltura del cristal selectivo a
los protones es proporcional al logaritmo de la relación de con-
centraciones de H + entre los dos lados del cristal. [A-]
pH = pK' + log (3­5)
'(HA]
no alfa (C.); estos grupos participan en los enlaces pepti­
dicos. Sin embargo, otros aminoácidos tienen grupos Así,
adicionales carboxilo o amino laterales que pueden ac­
tuar como ácido o base. Los grupos la torales disociables , [aceptor de protones]
pH pK + logi---------
de una macromolécula determinarán en gran medida las � [dador de protones]
propiedades eléctricas de la molécula. y la harán sensible
al pH del medio. Esta sensibilidad es evidente de forma Esta es la ecuación de Hcndcrson­Hasseíbalch, q uc
dramática en la influencia del pl­l sobre las propiedades permite el cálculo del pl­1 de un par conjugado ácido-
del centro activo ele un enzima. Dado que la unión de un base, conocido el pK' y la razón molar del par; y a la
sustrato al centro activo ele un enzima incluye general­ inversa. permite el cálculo del pK', si se conoce el pH de
mente interacciones electrostáticas, la formación de un una disolución de razón molar conocida.
complejo enzima­sustrato es altamente dependiente del
pl­l. La probabilidad de unión será máxima a un pH
particular, el pH óptimo. Sistemas tampón

Los cambios del pl­l afectan a la ionización de los grupos

La ecuación de Henderson-Hasselbalch
Algunos ácidos, como el HCI, se disocian completarnen­
te, mientras que otros, corno el ácido acético, se disocian
sólo parcialmente. La ecuación química general ele la di­
sociación de un ácido puede escribirse como
HA�H+ + A-
básicos y ácidos de los enzimas y otras moléculas biológi­
cas. Por ello. el pH de los líquidos intra y cxtracelular
debe mantenerse entre los límites estrechos en los que se
han formado los sistemas enzimáticos, si esos enzimas
han de cumplir con sus funciones normales. Desviaciones
de una unidad de pH o superiores generalmente destru­
yen la bioquímica de los organismos. Esta. sensibilidad a
la acidez del medio intracelular acuoso se debe en parte a
que las velocidades de reacción de los diferentes sistemas
54 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
enzimáticos llegan a desequilibrarse y descoordinarse, El
mantenimiento del pH de la sangre es un grao logro de
los mecanismos homeostáticos corporales, porque gran­
des cambios del pH sanguíneo pueden afectar rápidamen­
te a otros líquidos del cuerpo incluido el intracelular.
El pH de los líquidos corporales se mantiene dentro
del rango normal gracias a tampones de pH naturales.
Un sistema tamponado es aquel que tolera la adición de
cantidades relativamente grandes de un ácido o de una
base con cambios muy pequeños del pH dentro de cier­
tos valores. Un tampón ha de contener un ácido (HA),
que neutralice a las bases añadidas, y una base (A­), que
neutralice a los ácidos añadidos. (Ya hemos visto que HA
es un ácido porque actúa como un dador de 1­r1• y que A ­
es una base porque actúa como aceptor de H + .) Las pro­
piedades de los sistemas tampón se determinan añadien­
do pequeñas cantidades de un ácido o de una base y mi­
diendo el pH después de cada adición. La gráfica que
relaciona el pH y la cantidad de ácido o de base añadida
es una curva de titulación. La máxima capacidad tarnpo­
nadora de un par ácido­base conjugado de este tipo se
producirá cuando la [HA] y la [A-] sean elevadas e
iguales. Referido a la ecuación 3­5, vemos que esta situa­
ción se da cuando pH = pK' (pues el log,0 l = O). Este
punto corresponde a la parte de la curva de titulación a lo
largo de la cual el cambio de pH es menor (Fig, 3­13).
Los sistemas tampón más efectivos son combinacio­
nes de ácidos débiles y sus sales. Los primeros están muy
poco disociados, con lo que aseguran una gran reserva
de HA. Las sales de los ácidos débiles se disocian com­
pletamente, proporcionando una gran reserva de A-. El
JJ ·• que se afiada se combinará co11 el A ­ formando HA,
y el OH­ añadido se combinará con el H 1• para formar
H 20. A medida que se extraen H +, se reponen por diso­
ciación del HA. Los sistemas tampón inorgánicos más
importantes de )()S líquidos corporales son los bicarbo­
natos y los fosfatos. Los aminoácidos, péptidos y proteí­
nas, debido a sus grupos laterales de ácidos débiles, for-
14
12
10
8
pH
6
2 Ánodo
o 0.5 1.0
Equivalentes de OH-
Figura 3-13. La máxima capacidad tamponaoora de un sistema
ácido-base conjugado se obtiene cuando pH e pK'. En la gráfica.
este punto corresponde a la parte de la curva con la mínima pen-
diente (cambios pequeños de pH con grandes cantidades de
OH- añadidas).
man una clase importante de tampones orgánicos en el
citoplasma y en el plasma extracelular.
Corriente eléctrica en disoluciones acuosas
El agua conduce la corriente eléctrica, y es por ello que
normalmente se prohibe el uso de aparatos eléctricos en
condiciones de humedad. La conductivídad del agua, ve­
locidad de transferencia de carga producida por la mi­
gración de los iones bajo un potencial dado, es mucho
mayor que la de aceites u otros líquidos apelares. La
conductividad del agua depende totalmente de la pre­
sencia de átomos, o moléculas, cargados (iones) en diso­
lución. Los electrones, que llevan la corriente eléctrica
en los metales y semiconductores, no desempeñan un pa­
pel directo en el Oujo de corriente eléctrica en las disolu­
ciones acuosas.
Debido a que las concentraciones de H'1' y 01­C, los
iones presentes en el agua pura, son muy bajas (lo-� M
a 25 ºC), la conductividad eléctrica del agua pura es re­
lativamente baja, aunque sea mucho más elevada que la
de los liquidos apelares. La conductividad del agua in­
crementa enormemente por adición de electrólitos, que
se disocian en cationes (iones positivos) y aniones (iones
negativos) (véase la Fig. 3­7R). Por ello el agua de mar
conduce la corriente eléctrica más fácilmente que el agua
dulce. El Destacado 3­1 revisa algunos términos comu­
nes, unidades y convenciones que se aplican a las propie­
dades eléctricas.
En la Figura 3­14 se ilustra el papel de los iones en la
conducción de la corriente eléctrica. En este ejemplo se
muestran dos electrodos sumergidos en una disolución
de KCI y conectados por alambres a una fuente de fuer­
za electromotriz (fem) con los dos terminales marcados
+ y ­ . La km provoca, una corriente (o sea, un despla­
zamiento unidireccional de carga eléctrica positiva) que
fluye a través de la disolución del electrólito de un elec­
trodo al otro. ¿En qué consiste la corriente eléctrica? En
r
Cátodo
Figura 3·14. En disolución acuosa. la corriente eléctrica se debe
al movimiento de los iones disociados de los electrólitos. Las fle-
chas de color indican la dirección del flujo de corriente. Las fle-
chas en blanco indican la dirección del flujo de iones.
 MOLÉCULAS, ENERGÍA Y BIOSÍNTESIS 55
. ..­ . ....................

DESTACADO 3-1

TERMINOLOGIA
ELÉCTRICA
Y CONVENCIONES

Se definen aquí las propiedades eléctricas principales y • La conductividad es la inversa de la resistividad.

sus unidades, que pueden encontrarse en éste capítulo y
en posteriores. Los símbolos comunes utilizados para re-
presentar circuitos eléctricos se muestran en la figura ad-
junta.
• La carga eléctrica, q, se expresa en unidades de culom-
bios (C). Para convenir 1 g de peso equivalente de un
ion monovalente a su forma elemental (o viceversa) se
requiere una carga de 96 500 C (1 faradio, 1 A. Así, en
términos aproximados, un culombio es equivalente a
1/96 500 g equivalente de electrones. La carga de un
electrón es de ­1.6 x 10­19 C. Si este valor se multiplica
por el número de Avogadro, la carga total es de un fara-
dio (o sea, 96 487 C · mol 1).
• La intensidad, l. es el flujo de cargas, que se mide en
1
amperios (A). Una corriente de 1 C · s es igual a 1 am-
perio. Por convención, la dirección del flujo de corrien-
te es la dirección en la que se mueve una carga positiva
(es decir, del ánodo al cátodo).
• El voltaje, V o E, es la tuerza electromotriz (fem) o po-
tencial eléctrico expresado en voltios. Cuando el traba-
jo requerido para mover 1C de cargo de un punto a otro
con un potencial superior es de 1 julio (J), o de unas
0.24 calorías (cal), se dice que la diferencia de potencial
entre esos puntos es de 1 voltio (V).
• La resistencia, R. es la propiedad que se opone al flujo
de corriente y se mide en ohmios (Q). Una resistencia
de 1 f:l permite exactamente 1 A de intensidad de co-
rriente cuando existe una caída de potencial de 1 V a
través de la resistencia. Un ohmio equivale a la resis-
tencia de una columna de mercurio de 1 mm2 de área
en sección transversal, y de 106.3 cm de largo. R = re-
sistividad x longitud/área en sección transversal.
• La resistividad, p. es la resistencia de un conductor de 1
cm de longitud y 1 cm2 ele área transversal.
• La conductancia, g, es la inversa de la resistencia, g =
1/R. La unidad es el siemens (S) (antiguamente, el
mho).
La ley de Ohm establece que la intensidad es directa-
mente proporcional al voltaje e inversamente proporcio-
nal a la resistencia:
V
I= o V=lxR
R
Por ello, un potencial de 1 V a través de una resistencia
de 1 n produce una intensidad de corriente de 1A. Y a la
inversa, una intensidad de 1 A pasando por una resisten-
clo de 1 n produce una diferencia de potencial de 1 V a lo
largo de esa resistencia.
La capacitancia, C, es la propiedad de un elemento no
conductor de almacenar carga eléctrica. Un condensador
consta de dos placas separadas por un aislante. Si se co-
necta una batería en paralelo con las dos placas, las car-
gas se moverán acercándose a una placa y apartándose
de la otra hasta que la diferencia de potencial entre ellas
sea igual a la fem de la batería, o hasta que se destruya el
aislamiento. Las cargas no se mueven «corporalmente»
a través del aislamiento entre las placas de un condensa-
dor ideal, sino que las cargas de un signo que se acumu-
lan en una placa repelen electrostáticamente las cargas
similares de la placa opuesta. La capacidad de un con-
densador, o cantidad de carga que puede almacenar, se
mide en faradios (F). Si a un condensador se le aplica un
potencial de 1 V que hace acumular 1 C de carga positiva
en una placa y perderlo en la otra placa. se dice que ese
condensador tiene una capacidad de 1 F:
q 1 culombio (C)
e--= -- - 1 faradio (F)
1 voltio (V)
V

­­1·1­ Resistencia
Resistencia Condensador Batería
variable

Símbolos
J_
Torna do tierra Interruptor Medidor Arnplilicador

' . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ...............
un cable, consiste en el desplazamiento de electrones de carga eléctrica es transportada principalmente por el
la capa externa de un átomo de metal a otro, después a
K+ ely cr .
como que las concentraciones de OH-,
t­130" y 1­1 son tan bajas, su contribución a la corriente
1
otro y así. sucesivamente. En la disolución de KCI, la
56 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA

puede despreciarse. Cuando se aplica una diferencia de A

�­­­.!.;.
---·-----
Diferencia
potencial (voltaje) a una disolución de electrólito, los ca­
de potencial
tiones migran hacia el cátodo (electrodo con potencial
negativo) y los aniones hacia el :ínodo (electrodo con po­
tencial positivo).
La velocidad de desplazamiento de cada tipo de ion se
conoce como su movilidad eléctrica. Movilidad dcterrni­ Resistencia
nada por la masa hidratada del ion y la cantidad de car­ +
ga que lleva (monovalente, divalenrc o trivalente). La
movilidad del H + es muy superior a la de otros iones
comunes. El movimiento de los iones que constituye una
-
� Batería

corriente iónica es burdamente análogo a una hilera ele

- / 1--,;;_ _.
fichas de dominó que van cayendo, en la cual cada ficha
(ion) se desplaza sólo lo necesario para causar el despla­ Amperímetro
zamiento de la siguiente. En lugar de interaccionar me­ (carga • s-1)
cánicamente, como fichas de dominó que caen, los iones
se influyen unos a otros mediante interacciones electros­ B
.§1­­­­1.. ­
táticas, con cargas que se repelen unas a otras. (J) Diferencia
Por convención se dice que la corriente en una disolu­ "'�
e,
de presión

ción lluye en la dirección de la migración de cationes. Los

aniones fluyen en la dirección opuesta. La velocidad a que
se desplazan las cargas positivas en un punto dado de la
disolución más la velocidad a la que Jo hacen las cargas
negativas en la dirección opuesta, determina la intensi-
dad ele la corriente eléctrica; es decir, la cantidad de las
unidades de carga que fluyen por un punto en I segun­
do. Es por ello análoga al volumen de agua que fluye por
segundo en un punto dado de una tubería (Fig, 3­15).
Una corriente eléctrica siempre encuentra alguna re­
sistencia al flujo, igual que el agua a su paso por u na
tubería encuentra una. resistencia mecánica debida a fac­
tores como la fricción. Para que las cargas fluyan por
una resistencia eléctrica, debe actuar sobre ellas una
fuerza electrostática. Esta fuerza (análoga a la presión
hidrosiárica del agua en el sistema de tuberías) es la dife­
rencia en la presión eléctrica, o potencial V, entre los dos
extremos de la resistencia (véase la Fig. 3­15.4). Existe
una diferencia de potencial, o voltaje, entre las cargas
ncga ti vas ( ­ ) y positivas ( +) separada . Esta diferencia
de potencial, o lem, está relacionada con la intensidad.J,
y la resistencia, R, como describe la ley de Ohm (véase el
Destacado 3­1). Para que se produzca una misma inten­
sidad de corriente a través ele una vía con una resistencia
doble, se requiere el doble de voltaje (Fig. 3­ l6A.). De
igual forma, la intensidad se reducirá a la mitad cuando
la resistencia que encuentre sea el doble, si se mantiene
constante el voltaje (Fig. 3-168).
Los factores principales que determinan la resistencia
al flujo de corriente en una disolución son tres:
1 Los transportadores de carga disponibles en disolu­
ción (o sea, la concentración de iones): cuanto más
diluida sea una disolución de electrólito, mayor será
su resistencia, y por ello. menor será su conductivi­
dad (Destacado 3­1). Esto es lógico, pues habrá me­
nos iones disponibles para llevar la corriente.
2. El área en sección transversal de la disolución por
un plano perpendicular a la dirección del flujo de la
fr­­_J
Constricción
Tubería
Medidor de flujo
(L • s­1i
Figura 3-15. El flujo de electrones por un alumbre (A) puede
compararse cil flujo de agua por una tubería (BI. Una corriente
eléctrica siempre encuentra alguna resistencia, análoga a una
constricción en la tuberia.
corriente: cuanto menor sea ese área, mayor será la
resistencia que encontrará la corriente. Esto es, asi­
mismo, análogo al efecto del área en sección trans­
versal de una tuberia que lleve agua.
J. La distancia que la corriente recorre en la disolu­
ción: la resistencia total que encuentra una corriente
que pasa por una disolución ele electrólito es direc­
tamente proporcional a la distancia que la corriente
a tra vi esa.
Los iones que llevan la corriente se distribuyen unifor-
mernenre por toda la disolución. La corriente que fluye
entre los dos electrodos no sigue una vía recta, sino
que se ex tiende en vías curvas entre los dos eleci rodos
(Fig. 3­17). Ocurre así porque se ponen en juego más
iones de los que están en la vía directa entre los dos elec­
trodos, proporcionando así una resistencia efectiva me­
nor al flujo
'
de la corriente eléctrica (punto
. 1 anterior).
aunque la vía curva es más larga.
La importancia de los fenómenos eléctricos en fisiolo­
gía animal se demostrará ampliamente en posteriores

.. . .
A R 2R
i l T l
V 2V
- mática y la selectividad ele los canales ele membrana y
/ La base energética de la interacción entre un ion y un
/
B R 2R
V
T l V
i !
'­­­­1 / ¡......___,
Figura 3-16. La ley efe Ohm describe la relación entre ta intensi-
dad de corriente eléctrica. I (número de cargas que pasan por un
punto por unidad de tiempo). la diferencia de potencial, V. y la
resistencia. R. (AJ La intensidad de corriente. indicada por las
lecturas del amperímetro. no cambia si se duplican el voltaje y la
resistencia. (BI La intensidad se reduce a la mitad si sólo se du-
plica la resistencia.
capítulos, especialmente los relacionados con el sistema
nervioso. Familiarizarse con los conceptos básicos de
electricidad es además útil, para entender el uso de los
instrumentos de laboratorio.
Unión de iones a rnacrornoléculas
Los iones libres en disolución, dentro o fuera de las célu­
las vi vas, in tcractúa n electrostá ticamente unos con los
otros y con diversas partes ionizadas o parcialmente
ionizadas ele moléculas, especialmente proteínas. Estos
lugares de unión de iones ele macromoléculas tienen car­
gas eléctricas, y sus interacciones con los iones inorgáni­
cos libres se basan en los mismos principios que determi­
nan el intercambio iónico en centros de materiales no
biológicos. como partículas del suelo, vidrio y algunos
MOLÉCULAS. ENERGÍA Y BIOSÍNTESIS 57
plásticos. Las interacciones entre ion unido­centro de
unión y diferentes iones son muy importantes en algu­
nos mecanismos fisiológicos, como la activación enzi­
transportadores de dctcrm inados iones.
centro de unión del ion es la atracción electrostática en­
tre ambos y, en principio, es idéntica a las interacciones
que se producen entre aniones y cationes en disolución
libre . Por ello, un centro con una carga negativa o par­
cialmente negativa (recuérdese la carga parcial del áto­
mo de oxígeno de la molécula del agua) atrae a los catio­
nes, y un centro con una carga positiva atrae a los
aniones. Dos o más tipos de cationes en disolución com­
petirán unos con otros para unirse electrostáticamente
al centro amónico (es decir, electronegativo). El centro
cargado negativamente presentará 1111 orden de preferen­
cia de unión según los tipos de cationes, que irá de los
que se unen más fuertemente a los que lo hacen menos
enérgicamente. Este orden de preferencia se denomina se­
cuencia de afinidad, o secuencia de selecrividad, del centro.
Los centros de unión de cationes de las moléculas or­
gánicas generalmente son átomos de oxígeno de grupos
como los silicatos (­SiO­), carbonilos (R ­ C = 0),
carboxilatos (R ­­ coo-) y éteres (R., ­ O ­ R2).
Como se ha indicado anteriormente, el átomo de oxíge­
no tiene gran avidez por los electrones, y los atrae de los
átomos que le rodean en la molécula. Puede considerar­
se que los átomos de oxígeno de estos grupos neutros,
como los carbonilos o los éteres, tienen una carga nega­
tiva parcial debida al número estadisticarnente superior
de electrones a su alrededor (Fig. 3-L8). Como que el
grupo por sí mismo es neutro, lógicamente ha de haber
cargas positivas parciales en los otros átomos. Cuando
los silicatos y carboxilatos se ionizan, sus átomos de oxí­
geno presentan una carga negativa completa.
La energética de la interacción electrostática de un
centro con un ion se expresa en términos de energía po­
tencial (es decir, la energía U para unir dos cargas, q+ y
q" en el vacío desde una separación infinita �1 la nueva
distancia de separación d':

+
(3­6)

El exponente a es igual a J en el caso de dos monopolos

cada uno con carga completa (o sea, un anión y un catión
monovalentes). Para una molécula dipolar como el agua
en la que hay centros de carga negativa y positiva, pero
sin carga neta, la energía de interacción disminuye más
rápidamente con la distancia (es decir, a es mayor que 1
Ánodo ·Cátodo en la ecuación 3­6). Lo cual tiene un importante papel en
el tira y afloja electrostático que experimenta un ion di­
suelto en agua y atraído por un centro de carga opuesta.
Figura 3-17. El flujo de corriente a través de un volumen de di-
SOhJC ión de etectro I nos se extiende de manera que decrece la 2
La Ecuación 3-6 no debe confundirse con la ley de Coulombc, indi-
densidad de comente. cada en la nota al pie de 111 página 47.
58 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
. . . . . . . . . . . . . . . .
ó" � A
Carbonilo -- �.A
C-v
ó' ó-
Carboxuo -- C
,,..,.o
'OH
Silicato -- Si­O
ó"' 20- º­
Éter -- R-0-R
Figura 3­18. Muchas moléculas biológicas contienen grupos
que presentan una separación de cargas parciales. Los más co-
munes son los grupos que contienen oxiqeno. en los que los éto­
mos de oxigeno muy electroneqauvos atraen a los electrones de
los átomos vecinos. Se indica en sombreado las distribuciones
de la nube electrónica de los grupos laterales de varias molécu-
las. Aunque no está presente en los animales, el silicato es el
componente principat del esqueleto de las diatomeas.
En un medio acuoso (es decir, en disolución, por opo­
sición al vacío) la relación culómbica (ecuación 3­6) en­
tre el radio atómico de un catión y su afinidad por un
centro lijo electronegativo se ve modificada por la inte­
racción electrostática del catión con las moléculas di po­
lares de agua. El catión es atraído tanto por el átomo de
oxígeno rico en electrones del centro monopolar, como
por el de la molécula dipolar del agua. Por ello el agua y
el centro entran en competencia por unirse al catión.
Cuanto mayor sea el éxito en competir con el agua por
una especie iónica dada, mayor será la «selectividad» del
centro para esa especie iónica (Fig. 3­19). La secuencia
de selectividad de un centro para un grupo de iones dife­
rentes estará determinada por la fuerza de campo y por
la distribución polar/multipolar de los electrones cerca
del centro. Además, el núcleo de un átomo pequeño pue­
de estar situado más próximo a otro átomo de lo que
puede estarlo el núcleo de un átomo grande. En conse­
cuencia, los cationes monovalentes pequeños interactua­
rán más fuertemente COD un centro electronegativo dado
que los cationes monovalentes grandes, porque poseen
la misma carga unitaria pero tienen una distancia míni­
ma de aproximación más pequeña,
Además de los principios de la interacción electrostá-
tica descritos brevemente aquí, hay restricciones estéri­
cas en la unión de iones con algunos centros. Si, por
ejemplo, un centro está situado de tal forma que un ion
que interactúe, debe comprimirse en una. estrecha depre­
sión, o hacerse un hueco entre moléculas o dentro de
una molécula, el tamaño hidratado del ion tendrá tam­
bién un efecto en la energía total q uc se precisa para al­
canzar e interaccionar con el centro.
Discutidos ya algunos aspectos básicos de las interac­
ciones entre átomos, elementos y moléculas, centrare­
. .......... . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . ....
lit',,-0�.
"'­
Interacción
con agua
B
,,.,­e�)�
ln1eracción
con agua
Figura 3·19. La capacidad de un centro aniónico fijo para com-
petir con las moléculas de agtJa por un catión, depende de la tuer-
za de atracción del centro por el ion y del tamaño del catión, por-
que cationes más pequeños permiten una menor distancia de
aproximación mínima. IAI La fuerza de atracción de un catión
monovalente pequeño a un centro puntual amónico fuerte, es
mayor que su atracción por el agua (y viceversa para un catión
monovalente grande). IB) La fuerza de atracción de un catión mo-
novatente pequeño a un centro puntual débil, es menor que su
atracción por el agua (y viceversa paro un catión monovalente
grande).
mos nuestra atención en las moléculas de especial im­
portancia para los organismos.
MOLÉCULAS BIOLÓGICAS
Incluso un organismo unicelular «simple» tiene una
composición molecular tan compleja, que no puede des­
cribirse por completo. Esta complejidad se combina
además con el hecho de que no hay dos especies anima­
les que tengan la misma composición molecular. De he­
cho, la composición molecular de un individuo de una
especie es distinta de la de cualquier otro de la misma
especie, excepto los que se han reproducido por división
celular (p. ej., las dos células hijas de una ameba o los
gemelos univirelinos de un mamífero). Esta diversidad
bioquímica es un factor importantísimo de la evolución,
pues proporciona un enorme número de variables en
una población de organismos y actúa como la materia
prima, por así decir, con la que opera la selección natu­
ral. Esta diversidad es posible en parle por el gran po­
tencial de variabilidad estructural que presenta el átomo
de carbono, con su capacidad para formar cuatro enla­
ces muy estables. El carbono es el «esqueleto» molecular
de las cuatro grandes clases de compuestos orgánicos
que se encuentran en los organismos vivos: lipidos, car­
bohidratos, proteínas y ácidos nucleicos. Vamos a. revisar
brevemente las estructuras químicas de estas cuatro cla­
ses de sustancias y consideraremos algunas propiedades
importantes de sus funciones en fisiología. Para más in­
formación pueden consultarse libros de bioquímica más
especializados ( véanse las Lecturas Recomendadas).
 MOLÉCULAS, ENERGÍA Y BIOSÍNTESIS 59
.................................................................
Cuadro 3-4
Lípidos
Puntos de fusión de varios ácidos grasos
Los lipidos son un grupo diverso de moléculas biológi­ Punto de
N.º de N.0 de
cas insolubles en agua con estructuras quimicas relativa­ átomos dobles fusión
mente simples. Los diferentes lipidos cumplen una varie­ Ácidos grasos de carbono enlaces (ºCI
dad de funciones. Por ejemplo, las grasas sirven de
Saturados
reserva de energía, mientras que los tosfolipidos y los
Ácido láurico 11 o 44
esteroles son los principales componentes de las mem­ Ácido palmítico 16 o 63
branas (véase el Capítulo 4). Ácido araquídico 20 o 75
Las grasas están formadas por moléculas de triglicéri­ Ácido lignocérico 24 o 84
dos, cada una de ellas constituida por una molécula de lnsaturados
Ácido oleico 18 1 13
glicerol unida por enlaces éster a tres cadenas de ácidos
Ácido linoleico 18 2 -5
grasos. Cuando los triglicéridos se hidrolizan (o sea, se Ácido araquidónico 20 4 ­50
digieren) por la inserción de H+ y 01-C en los enlaces
éster, se separan en moléculas de glicerol y de tres ácidos
grasos (Fig. 3­20). Los tres ácidos grasos de un triglicéri­ Los rriglicéridos se acumulan típicamente en los ver­
do pueden ser iguales o no. pero tocios contienen un nú­ tebrados en las vacuolas grasas de células adiposas espe­
mero par de átomos de carbono. Si todos los átomos de cializadas. Debido a su poca solubilidad en agua, estas
carbono de la cadena del ácido graso están unidos por moléculas altamente energéticas pueden almacenarse en
enlaces simples (es decir, todos los carbonos excepto el del grandes concentraciones en el cuerpo sin que se precisen
grupo carboxilo llevarán dos hidrógenos) se dice que está grandes cantidades de agua como disolvente. Las reser­
saturado. Si la cadena de ácido graso contiene uno o más vas de energía en forma de rriglicéridos también son
dobles enlaces entre carbonos, se denomina ácido graso muy compactas, por las elevadas proporciones relativas
insaturado. El grado de saturación y la longitud de la ca­ de hidrógeno y carbono y la poca proporción de oxíge­
dena de los ácidos grasos (es decir, el número de átomos no en la molécula. Así, J g de trigíicérido proporcionará
de carbono) determinan las propiedades físicas de la. grasa. cerca del doble de energía al oxidarse que 1 g de carbohi­
Las grasas con ácidos grasos insarurados tienen nor­ drato (Cuadro 3­5).
malmente puntos de fusión bajos y forman aceites y gra­ En los fosfolípidos se reemplaza uno de los ácidos gra­
sas blandas a temperatura ambiente, mientras que las sos periféricos del triglicérido por un grupo que contiene
grasas con ácidos grasos saturados son sólidas a la tem­ fosfato (véase la Fig. 4­3). Los íosfolipidos son por ello
peratura ambiente (Cuadro 3­4). Por ello, el proceso de moléculas aníipáticas con una parte hidrófila (el grupo
hidrogenación (saturación de la cadena del ácido graso que contiene el fosfato) y una parte hidrófoba (las cade­
con hidrógenos y, por lo tanto, supresión de los dobles nas de ácidos grasos), que es soluble en lipidos (o lipófi­
enlaces) convierte, por ejemplo, a la mantequilla de caca­ la). Esta propiedad permite que las moléculas de losfoli­
huete aceitosa en una mantequilla de cacahuete suave y pidos de las membranas celulares formen una capa de
untuosa, Además, si el número de dobles enlaces es el transición entre una fase acuosa y una fase lipídica.
mismo, cuanto más corta sea la cadena de un ácido gra­ Como se discute en el siguiente capítulo, las membranas
so menor será su punto de fusión, como se muestra en los biológicas constan principalmente de dos capas de fosfo­
ácidos grasos saturados del Cuadro 3­4. Los procesos lipidos, con las «colas» apelares de cada capa orientadas
metabólicos convierten más fácilmente a los ácidos gra­ hacia el interior y las «cabezas» polares orientadas bacía
sos saturados en esteroles, como el colesterol. Dado que las foses acuosas (véase la Fig. 4­6).
el colesterol en exceso es, al parecer, un factor de riesgo de Otros tipos de lipidos que se encuentran en las mem­
enfermedades cardiovasculares, muchas normas dietéti­ branas son glucolípidos, que contienen uno o más gru­
cas recomiendan restringir el consumo de grasas satura­ pos de azúcares, y los esíingolipidos, que poseen una lar­
das. Sin embargo, el colesterol es un componente de las ga cadena de alcohol amino denominada esfingosina.
membranas celulares y también es el precursor para la Los esfiugolipidos son particularmente abundantes en el
síntesis de las hormonas esteroideas (véase la Fig. 9­23). cerebro y en el tejido nervioso. Las ceras forman otro

H O Figura 3-20. Las g rasas están formadas por

1 11 H moléculas ele triglicéridos, que se hidrotizan a
H-C-0-C-R 1 glicerol y ácidos orasos. La reacción está catali-
() 1
lI -C--OH zada por el enzima lipasa. R representa un radi-
1 11 3HO . 1 cal de ácido �¡raso. Los {Jrupos de ácidos grasos
11-C-0-C-R --2-, H -C- Ol·I + R1 COOH+ Ri COOH+ R� COOH
o de un trig hcérido determinado pueden ser igua-

I .,.,­.,.­.­­­­­­·­­­
2 1
les o diferentes -,
11
H -C--OH Ácidos grasos
H-c;;-O-C-R 1

1 3 H
H
• 'n triglicérido Glicerol
60 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
Cuadro 3-5
El contenido de energía de tos tres tipos principales de nutrientes
Sustrato
Contenido energético
(kcat · g- •¡
Carbchidratcs
Proteínas
4.0
4.5
Grasas 9.5
grupo de Iipidos, que forman una capa altamente imper­
meabilizante en algunos insectos (véase el Capítulo 14).
Carbohidratos
Los carbohidratos son aldchidos y coronas de poli hidro­
xilos con la fórmula química general (Cl­120).,. Los car­
bohidratos más simples son los azúcares mouosacáridos,
de los que los más comunes contienen seis carbonos (he­
xosas) o cinco carbonos (pentosas). Los monosacáridos
típicamente son estructuras cíclicas que contienen cua­
tro o cinco átomos de carbono y un oxígeno, y con uno
o más carbonos externos al anillo (Fig. 3­21'\). Las plan­
tas verdes producen la hexosa glucosa a partir de I L20
y de C02 por el proceso de la fotosíntesis. Toda la ener­
gía atrapada por la fotosíntesis y que se transmite
como energía química al mundo animado (es decir, a
los tejidos de todas las plantas y los animales) se canali­
za a través de azúcares de seis carbonos, como la gluco­
sa. Como se indica en el siguiente capítulo, la glucosa se
degrada total o parcialmente a H20 y C02 en la respi­
ración celular, liberando la energía química que se ha­
bía almacenado en su estructura molecular durante la
fotosíntesis. Los dos azúcares de tipo pentosa más im­
portantes son fa ribosa y la 2­desoxirribos:1 (véase la
Fig, 3­2 lA). Estas pentosas, que se encuentran en el es­
q uclcto de todas las moléculas de ácidos nucleicos, son
esenciales para la replicación del ADN y la síntesis de
proteínas.
Las células poseen enzimas para convertir la glucosa
en otros rnonosacáridos o unir dos moléculas de mono­
sacáridos y formar un azúcar disacáride como la sacaro­
sa o la lactosa (Fig. 3s21B). Las células también pueden
sintetizar diversos polímeros de carbohidratos con un
elevado número de unidades de monosacárido. Dos po­
lír.ncros ramificados de la u­glucosa constituyen la prin­
cipal forma de almacenar los carbohidratos, el almidón
en las células vegetales y el glucógeno en las animales
(Fig. 3­22). AJ igual que las grasas, estos carbohidratos
poliméricos de elevado peso molecular requieren un mí­
nimo de agua como disolvente, y constituyen una forma
concentrada de reserva alimenticia en la célula. El glucó­
geno se encuentra en los vertebrados en forma de minús-
culos gráoulos intracelulares, principalmente en las célu­
las del hígado y del músculo.
Los carbohidratos poliméricos forman sustancias es­
tructurales. Entre estas sustancias la principal en las
plantas es la celulosa, 1111 polímero no ramificado de la
A Azúcares monosacáridos
CH¡Ol·l
HOCHi
,Q,
O OH
H0(k:º�1H
H OH
11
OH 011
HHHOH 11
Glucosa Ribosa 2-DesoKirribosa
B Azúcares disacáridos
OH H
Sacarosa
M OM
Lactosa
Figura 3-21. Los azúcares simples son monosacárídos y disacá-
ridos. (A) Glucosa, la hexosa más abundante en las células, se
utiliza para proporcionar energía. Los grupos hidroxilo, en rojo,
pueden establecer un enlace covalente con otra molécula ele azú-
car y torrnar un disacárido. Dos pentosas, nbosa y 2-desoxirribo-
sa. forman parte de los ácidos nucleicos. (BI Disacáridos forma-
dos por condensación de dos unidades de moncsacártdos. Tanto
k1 sacarosa como la lactosa contienen una unidad ele glucosa (en
sombreado) y un segundo monosacartdo. El enlace \Jlucosídico
(en rojo) que une dos monosacáridos puede tener dos orientacio-
nes, designadas corno a y /J.
o­glucosa. La qaitina, constituyen te importan te de los
exoesqueletos de insectos y crustáceos. es un polímero
semejante a la celulosa y formado de N­acetíl glucosami­
na, un derivado amino de la o­glucosa (Fig. 3­23). Am­
bos polímeros, el vegetal celulosa y la quitina, son llexi­
bles, elásticos e insolubles en agua.
Proteínas
Las proteínas son las moléculas orgánicas más complejas y
abundantes de la célula viva, constituyendo más de la mi­
tad del peso de una célula expresado como peso seco. Aun­
que la estructura básica de todas las proteínas es similar,
en los sistemas biológicos encontramos un amplio aba­
nico de diferentes proteínas con diversas funciones. En el
Cuadro 3­6 se da una relación de los principales tipos de
funciones de las proteínas con varios ejemplos de cada
tipo. Los enzimas constituyen el principal grupo funcio­
nal de las proteínas, con más de 1000 ya identificados y
muchos otros aún presumiblemente por descubrir.

�g� �g�
�º� n -·6) punto de ramificación
ro� ·-o
;­­=­o�
CHOH CHOII �
OH2 H
·--�o-�
(1 -4) cadena
Figura 3-22. El glucógeno, un g.-an polfrner o de glucosa, es la íorma principal <le almacenar los carbohidratos en las células animales.
Una molécula de glucógeno es una larqa cadena de unidades de glucosa, en la que se unen los carbonos 1 y 4 de rnolécuías adyacentes,
con ramificaciones que se extienden del CM bono 6 cada ocho a diez unidades de �1lucosa. Sólo se ha representado una pequeña parte de
una molécula de glucógeno.
Estructura prirnaria
Las proteínas están formadas por cadenas lineales de
aminoácidos, que son moléculas anfotericas que contie­
nen como mínimo un grupo carboxilo y otro amino. Los
20 aminoácidos comunes que forman las proteínas son
todos alfa­aminoácidos, en los que el grupo amino está
unido al átomo del carbono alfa (CJ, es decir, al átomo
de carbono adyacente al grupo carboxilo, Los aminoáci­
dos difieren entre sí por la estructura de sus grupos la­
terales, generalmente indicados como grupos R (fig. 3­
24!­\). La maquinaria celular encargada de la síntesis pro­
teica une moléculas de aminoácidos por enlaces peptídi­
cos covalcntes, formando largas cadenas de flOlipép1·idos.
Los átomos C, adyacentes de una cadena polipeptldica
están separados por un grupo amida en un plano único
(Fig. 3-248). La secuencia lineal especifica de los ami­
noácidos de un polipéptido se dice que es su estructura
primaria. Dado que los aminoácidos de una cadena poli­
pcptidica difieren sólo en sus grupos laterales, estos gru­
pos son como letras de un alfabeto proteico que definen
la estructura primaria de una proteína (Cuadro 3­7).
Una molécula de proteína puede tener una, dos o varias
cadenas polipeptidicas, bien sea unidas covalentemenie
o bien se mantengan unidas por enlaces más débiles.
La secuencia de aminoácidos de un polipéptido (es de­
cir. su estructura primaria) viene codificada por el mate­
rial genético ele un organismo. En realidad, toda ta infor­
mación hereditaria contenida en el materia] genético se
transmite inicialmente a moléculas de proteínas: la se­
cuencia de aminoácidos que se establece en la síntesis
�·�� �­�� )­��­�� �� ;���1·6�
proteica expresa esa información, y es la principal deter­
­�'o�o�n�o.
NH NH NH Nl-1
1 1 l 1
C-0 C"-"-''Ü C=O C=O
1 1 1 1
CH, CH, CH, CH.,
MOLÉCULAS, ENERGÍA Y BIOSÍNTESIS 6J
I
CH l
o
minanre de las propiedades ele cualquier molécula protei­
ca. Es posible la existencia de u na variedad impresionante
de secuencias de aminoácidos diferentes. dado que hay
cerca de unos 20 aminoácidos distintos, que son las uni­
dades estructurales. Supongamos, por ejemplo, que que­
remos formar una molécula pclipeptidica que contenga
un aminoácido ele cada uno de los 20 tipos. ¿Cuántas or­
denaciones lineales distintas podríamos hacer sin repetir
una misma secuencia de aminoácidos? Se puede calcular
multiplicando 20 x 19 x 18 x 17 x 16 x ... x 2 x 1 (es
decir; 201), 1018• Pero incluso esta cifra sorprendente, que
ó
corresponde a una proteína relativamente pequeña (con un
peso molecular de aproximadamente 2400), no es nada en
comparación con las posibilidades de una proteína más lÍ·
pica con un peso molecular ele 35 000. Para una proteína
de este tamaño y que sólo contenga 12 tipos de aminoá­
cidos, el número ele secuencias posibles excede de 10300
Niveles superiores de estructura
La estructura primaria de una cadena polipcptidica de­
termina la conformación tridimensional, o forma, que
adoptará en un medio dado. Esta conformación depen­
de de la naturaleza y posición de los grupos laterales que
se proyectan desde el esqueleto peptidico. Además de la
estructura primaria (es decir, ele la secuencia de aminoá­
cidos), las proteínas tienen otros niveles de estructura,
denominados secundario, terciario y cuaternario. La es­
tructura secundaria se refiere a la organización local de
panes de la cadena polipepridica, que pueden asumir
disposiciones diferentes; la estructura terciaria indica los
Figura 3·23. La quitina, un carbohidruto
poi imérico estructural, consta de un ida des
de N-,icetilglucosarnina unidas por enla-
ces glucosídicos 1­, 4. En la N-acelilglu-
cosamina, un grupo acetarnida (som-
NH breado en color) reemplaza al grupo
1 hidroxilo del carbono 2 de la glucosa.
C=O
1
CH,,
62 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
. . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . ... . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ............... . . . . . . .
Cuadro 3-6
Clasificación de las proteínas de acuerdo con su función biológica

Tipo/ejemplos localización o función Tipo/ejem píos localización o función

Enzimas Proteínas de protección en

Cltocromo e Transfiere electrones sangre de vertebrados
Ribonucleasa Hidrohza ARN An ricuerpos Forman complejos con las pro-
Tripsma Hidroliza a ciertos pépridos teínas extrañas
Proteínas reguladoras Fibrinógeno Precursor de la fibrina en la coa-
Catmodutina Modulador i ntrace I u lar u nido a I gulación sanguínea
calcio Trombina Componente del mecanismo de
Tropomrosina Regulador de la contracción coagulación
muscular Toxinas
Troponina e Regulador de la contracción Bunqarotoxina Agente del veneno de cobra que
muscular u nido al calcio bloquea a los receptores del neu-
Proteínas de reserva rorra nsm isor
Caseína Proteína de la leche Toxina de Ctostridium Bloquea la liberación de neuro-
Ferritína Almacenamiento de hierro en botulinum transmisor
bazo Hormonas
Míoglobina Almacenamiento de 02 en Hormona adrenocorticotro-
músculo pa Re�¡ula la síntesis de corticoste-
Ovoalbúmina Proteína de la clara de huevo roides
Proteínas transportadoras Hormona del crecimiento Estimula el crecimiento de los
Hemocianina Transporta 0 en la hemolinfo de
2 huesos
algunos invertebrados tnsulina Regula el metabolismo de la glu-
Hemoglobina Transporta 02 en la sangre de los cosa
vertebrados Proteínas estructurales
Albúmina sérica Transporta ácidos grasos en san- Alfa-queratina Piel, plumas. u ñas y pez u ñas
gre Colágeno Tejido conectivo fibroso (tendo-
Proteínas contráctiles nes. hueso y cartílago)
Acuna Filamentos móviles de las miofi- Elastina Tejido conectivo elástico (lioa-
brillas msntos)
Dineína Cilios y flagelos Esclerotina Exoesqueletos de los insectos
Miosina Filamentos estáticos de las mio- Fibroí na (beta-queratina l Seda de capullos y de telarañas
ñbrillas Glucoproteínas Cubiertas y paredes celulares

pliegues de la cadena que forman moléculas globulares o
alargadas; y la estructura cuaternaria se refiere a las
uniones de dos o más cadenas polipeptidicas para for­
mar dímeros, trímeros e incluso, ocasionalmente, agre­
gados mayores.
El enlace peptidico C,, ­N, debido a su naturaleza de
enlace doble parcial, no es capaz de rotar; por tanto, los
átomos de los grupos amida están confinados en un
único plano (véase la Fig. 3­24B). Sin embargo, los res­
tantes enlaces del esqueleto peptidico tienen capacidad
de rotar. Linus Pauling y Robert Corey, usando mode­
los atómicos de las moléculas construidos con gran
precisión, encontraron que la estructura. secundaria es­
table más simple de una cadena polipeptidica es una
hélice denominada hélice alfa (o:) (Fig, 3­25). En esta
estructura, el plano de cada grupo amida es paralelo al
eje principal de la hélice y hay 3,6 aminoácidos por
giro. Los grupos laterales de cada aminoácido se ex­
tienden hacia el exterior del esqueleto helicoidal, libres
para interaccionar con otros grupos laterales o con
otras moléculas. La estabilidad de la hélice ex aumenta
principalmente por los puentes de hidrógeno que se es­
tablecen entre el átomo de oxígeno de un grupo carbo­
nilo y el átomo de hidrógeno del grupo amida que hay
cuatro· residuos más adelante. Debido a esta estabili­
dad de la hélice 1.1., una cadena polipeptidica adoptará
espontáneamente esta conformación, siempre que los
grupos laterales no interfieran. En el aminoácido proli­
na, por ejemplo, el grupo lateral es un anillo rígido que
incluye al átomo de nitrógeno alfa ( véase el Cuadro 3­ 7);
por ello el enlace C"'­N de la prolina (y de la hidroxipro­
lina) no puede rotar, y como resultado, cuando se en­
cuentra una prolina (o una hidroxiprolina) en la cadena
peptídica se interrumpe la hélice a y el esqueleto peptidi­
co se dobla en ángulo.
Otro tipo importante de estructura secundaria protei­
ca es en hoja 1•l<igada beta ({J) (Fig. 3­26). Está formada
por cadenas ji bastante cortas, unidas lateralmente y casi
completamente estiradas. Los puentes de hidrógeno en­
tre los átomos de oxígeno de los grupos carbonilo y los
átomos de hidrógeno de las amidas de cadenas /1 adya­
centes forman una hoja plegada con los grupos laterales
de los aminoácidos proyectándose por encima o por de­
bajo del plano de la hoja. La asociación entre cadenas fJ
de la misma cadena polipeptidica colabora en la estruc­
tura secundaria, mientras que esta unión entre cadenas {J
pero de diferentes moléculas polipeptídicas, participa en
la estructura cuaternaria.
Largas cadenas polipcptidicas con una conformación
de hélice 1.1. ininterrumpida son características de las pro­
teínas fibrilares, como las alfa­queratinas que forman los
pelos, las uñas y garras, la lana, los cuernos y las plumas.
Las beta­queratinas son una excepción, pues tienen una
estructura secundaria consistente en hojas plegadas /J
 MOLÉCULAS, ENERGÍA Y BIOSÍNTESIS 63

A Estructura general de los alfa-aminoácidos

Nli,
R­t _:_COOII
Ia
H

B Estructura de un 1etrapéptido

Esqueleto
r¡::¡¡¡,2
H-l:H
t=O
w
CH3-CH
1
Grupo
---- amida

1
C=O Enloce
1 pepudico
HN
HO---CH1-CH
1
C=O
1
HN
OC"2-�H

¿OOH
Figura 3­24. La estructura primaria de las proteínas es una se­
cuencia lineal de alfa-aminoácidos unidos por enlaces peptídi­
cos. (Al Todos los aminoácidos que se encuentran en las proteí-
nas tienen una estructura común. Cada uno tiene un grupo
lateral comúnmente representado por R (véase el Cuadro 3-7).
(BJ Los enlaces peptídicos (líneas rojas), que unen los aminoáci-
dos en noüpépndos, tienen un carácter parcial de doble enlace.
Como resultado, el grupo amida (sombreado en gris) es plano.
Aunque el esqueleto potípepttdlco es el mismo en todas las pro·
teínas, difiere en la secuencia de los grupos laterales. Esta se-
cuencia, la estructura primaria, es la propiedad que define a
cada proteína.

más que en hélices a. Las beta­querauaas son el principal

constituyente de la tela de araña y de la seda producida
por orugas. Las proteínas intracelulares sin función es­
tructural normalmente tienen una estructura secundaria
más o menos globular, aunque también pueden contener
cortos segmentos de hélices a o con conformación de
hoja plegada {l.
A menudo, las regiones de la cadena polipeptidica con
largas hélices ex loman una estructura terciaria en bas-
tón, mientras q111.: las partes sin esta característica adop­
tan una estructura terciaria globular. Dos tipos de enla­
ces no covalcntcs y relativamente débiles ayudan a
estabilizar la estructura terciaria: las interacciones cu­
lómbicas (electrostáticas) entre grupos laterales carga­
dos y las fuerzas de van der Waals entre grupos laterales
hidrofóbicos, Otra contribución importante a la confor­
mación de las proteínas se debe al grupo sulíhidrilo late­
ral (­SH) del aminoácido cisteina. La reacción de dos cis­
tcinas forma un enlace disulfuro (S­S), que los une
covalcntcmeruc (Fig. 3­27). Un puente disulfuro puede
unir covalentemente diferentes panes de una cadena poli­
pepridica, estabilizando así su cst ructura terciaria plcga­
Figura 3-25. La hélice ,:,; es un tipo de estructura secundaria co-
mún y muy estable de las proteínas. Esta disposición helicoidal.
que posee 3.6 aminoácidos por giro, está estabilizada por puen-
tes de hidrógeno (puntos negros) entre el átomo de oxigeno de
un grupo carbonilo y el átomo de hidrógeno del grupo amiela
separado por cuatro residuos en el esqueleto. Los grupos latera·
les (R) se extienden hacia el exterior del eje del esqueleto.
da, o puede conectar dos cadenas separadas. Dado que el
grupo sulfhidrilo es muy reactivo, no sorprende que una o
más cisteinas ocupen normalmente los centros activos
de los enzimas. La toxicidad del mercurio y otros mera­
les pesados se debe en parte a su reacción con el átomo
de azufre de la cisteina, que desplaza a los átomos de hi-
drógeno; esta. reacción puede envenenar (es decir, volver
cataliticamcntc inoperante) el centro activo de un enzima.
Algunas proteínas, aunque no todas. pueden autoen-
sambtarse, formando una estructura cuaternaria, La se­
64 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA

Cuadro 3-7
Grupos laterales o radicales de los 20 alfa-aminoácidos comunes

Glicina Cistema --¡.�·\.

(GlyJ -H (Cvs) -CHi-SH
)) o
­·�
SH
_/
Alanina Metionína
(Ala) (Met)

Valina
(Val)
-� �

·���
l.eucina Ácido glutámico
(Lcu) !Glu)

-�
lsoteucina
{lle) -c Asparagina
(Asn)

Fenilalamina Glutamina
(Phel .,....-Cl-1 CH,, (GluJ
-CI-12-C CH
. �CH3-CI-V

Prolina )
{Pro)

Tri ptótano
-CH2-C-C/
11 11
CH
' CH
1
Histidina
-Cll2-C=Cfl
1 1
(His) Nfl N
<TrpJ
"'NH
/"'CH/
CH C CH
"­ CH
I

Serina
(Ser)

CH3 NH,,
Treonina
(Thr)
-CH/ .
"01­1
-Cl·l,--CH
,.
Arginina
.-CH -NH -C .,....-
2 2 3
,�'NH2. --"
(Argl

Fuente: Ha99is, et ni., 1965.

cuencia de aminoácidos de la cadena polipeptidica (y interacciones no covalentes entre regiones complemen­

con ella, las posiciones de los distintos grupos laterales
de los diferentes aminoácidos) no sólo determina la es­
tructura secundaria y terciaria de la molécula, sino que
también condiciona la interacción con otras cadenas
proteicas; formando moléculas proteicas con dos o más
subunidades. La unión de estas subunidades entre sí
puede implicar a puentes disulfuro covalentes, así como
tarias en sus superficies. Por ejemplo, grupos cargados
negativamente de una subunidad encajan con grupos
cargados positivamente de otra subunidad; grupos late­
rales hidrofóbicos y apelares de las subunidades se unen
por la exclusión mutua de moléculas de agua; o residuos
de cada subunidad que se orientan de forma que puedan
formar puentes de hidrógeno. Algunos enzimas, el pig­
 MOLÉCULAS, ENERGÍA Y BIOSÍNTESIS 65

Vista frontal Figura 3-26. La hoja plegada /1 es un elemen-

to de la estructura secundaria de los hilos de la
seda y de otras proteínas fibrosas. Las hojas
plegadas se forman por la asociación lateral de
dos cadenas /J estabilizadas por puentes de hi-
drógeno (puntos negros). Los orupos laterales
se extienden por encima y por debajo del pla-
no de la hoja. Las flechas anchas representan
cadenas {J. [Adaptado ele Lodish et ,11., 1995.1

Vista lateral

mento respiratorio hemoglobina y muchas otras protci­
nas constan de más de una cadena pohpeptidica ensam-
bladas por enlaces no covalentes, En muchas proteínas
con múltiples subunidades, la unión se consigue con ho­
jas plegadas /J. Las tres subunidadcs del colágeno, la
principal proteína del tejido conjuntivo, están enrolla­
das en una superhclice característica (Fig. 3­28). Las sub­
unidades de todas estas proteínas se ensamblarán entre
si espontáneamente si se añaden a una disolución acuosa
H
1
2 -CH.,-C-COOH Cisteína
­ 1
y se mezclan. Pueden observarse las subunidades asocia­
das y disociadas de la hemoglobina en la Figura 13­2.4.
Aparte del puente disulfuro covalente entre las cisteí­
nas, la estructura secundaria, terciaria y cuaternaria de
las proteínas depende de interacciones culómbicas,
puentes de hidrógeno y fuerzas de van der Waals, Todas
estas interacciones no covalenies son relativamente dé-
biles y terrnolábiles. Al calentar una proteína se rompen
estas interacciones, produciéndose una alteración de su
conformación denominada desnaturalizacióu, Los riza­
dores del pelo actúan de esta forma, calentando durante
un momento la proteína de la hebra de pelo y dejándolo
enfriar después en una configuración nueva que altera la
oricnración de la hebra. Las temperaturas elevadas pue­

j NH, den de la misma manera cambiar la forma de los enzimas,

inactivarlos y destruir las células en que se encuentren.

NH
1
COOH-C-CH,,----CHo-C'-COOH
1

2
• ;

Puente
-
H
1
1

NH 2
Cistina
m '
·.
Las proteínas de muchos animales empie-
zan a desnaturalizarse a. temperaturas por
encima de 43­45 ºC. Algunas especies de
peces, insectos, algas y bacterias habitan
fuentes termales en el rango de 48 ºC, 1 Y
di sulfuro unas pocas especies de bacterias viven a
temperaturas de hasta 5"4 "CI ¿Qué espe- ·
Figura 3-27. Un puente di sulfuro contribuye a la estructura ter- cializaciones estructurales se cree quapue-
ciaria de una proteína al unir cisteínas presentes en diferentes
den intervenir en el mantenimiento de la
partes de la misma cadena ponpeptfdíca. t.os puentes dísutfuro
función de las proteínas a altas temperatu-
también pueden formarse entre cisteínas de cadenas polipepti­
dices diferentes, participando entonces en la estructura cuater- ras en esas especies tolerantes del calor?
naria.
66 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
Ácidos nucleicos
El ácido desoxirribonucleico (ADN) fue aislado por pri­
mera vez en 1869 de leucocitos y de esperma de pez por
Friedrich Miescher. Durante las siguientes décadas se
estudió la composición química del ADN, y lentamente
se acumularon evidencias que lo involucraban en los
mecanismos de la herencia. Ahora es de conocimiento
general que el ADN, que está asociado con los cromoso­
mas, lleva la información codificada (dispuesta en genes)
que pasa de cada célula a sus células hijas y de una gene­
ración de organismos a la siguiente. Posteriormente, se
descubrió un segundo grupo de ácidos nucleicos, el del
ácido ribonucleico (ARN). Hoy en día se sabe que el
ARN es un instrumento de traducción del mensaje codi­
ficado del ADN a las secuencias de aminoácidos en la
síntesis de moléculas proteicas.
Los ácidos nucleicos son polímeros de nuclcéñdos,
constituidos cada uno poi: una base de pirimidina o de
purina, un azúcar pentosa y un residuo de ácido fosfóri­
co (Fig. 3­29). Los nucleótidos que forman el ADN con­
tienen desoxirribosa, mientras que los que constituyen el
ARN contienen ribosa (véase la Fig. 3­21A). Los princi­
pales nucleótidos que se encuentran en los ácidos nuclei­
cos contienen las siguientes bases: adenina, tinnna, guani­
na, cítosína y uracilo. La timina se encuentra sólo en el
ADN, y el uracilo sólo en el ARN; las otras tres bases se
encuentran en ambos ácidos nucleicos. Pueden formarse
pares de bases estables, unidos por puentes de hidróge­
no, entre adenina y rimina (A­T), guanina y citosina (G­
C) y adenina y uracilo (A-U), como se muestra en la Fi­
gura 3­30. En la cadena de un polinucleórido, los enlaces
Iesíodiéster unen el carbono 3' de un anillo de pentosa y
el carbono 5' de la siguiente pentosa (Fig. 3­31). Las ba­
ses púricas y pirimidinicas se disponen hacia el exterior
del esqueleto del polinucleótido y no intervienen en la
parte constante y repetitiva de ese esqueleto.
El ADN nativo consta de dos cadenas (o hebras) con
secuencias de bases complementarias ( o sea, u na adeni­
Da en una cadena se empareja con una timina en la
otra). Cada cadena complementaria está arrollada en
escalera helicoidal, y las dos cadenas se entrelazan, for­
mando la conocida doble hélice del ADN, con los pa­
res de bases unidos por puentes de hidrógeno situados
en la parte interna de la molécula (Fig. 3­32). Duran­
te la replicación del ADN las cadenas se separan y cada
una actúa como molde para la formación de su cadena
complementaria, generando dos moléculas. de ADN de
doble cadena.
Hélice a 2
Hélice o 3
Figura 3-29. Los cuatro nucleóti-
dos que componen los ácidos nu-
cleicos tienen una estructura co-
mún formada por una base de pu-
rina o de pirimidina. un azúcar
pentosa y un residuo de ácido fos-
OH H
fórico P;. En el ADN la pentosa es ta
2-desoxirribosa. que tiene dos áto-
mos de hidrógeno unidos al átomo
C/; en el ARN un grupo hidroxilo
reemplaza a uno de estos hidróge-
nos, indicado por et sombreado.
La información genética de un organismo está codifi­
cada en la secuencia de bases de su ADN. En el proceso
conocido como transcripción, una cadena de ADN actúa
como molde para la síntesis de AUN mensajero (ARNm)
en el núcleo (véase la Fig. 3­32, abajo). La cadena del
ARNrn, que contiene la información de la secuencia del
molde del ADN, sale del núcleo y pasa al citoplasma
para ser descodificada por un ribosorna en la secuencia
de aminoácidos de una cadena polipeptidica. En este
proceso de traduccién, determinadas secuencias de tres
bases del ADN codifican determinados aminoácidos.
Por ejemplo, GGU, GGC, GGA y GGG codifican todas
el aminoácido glicina; y GCU, GCC, GCA y GCT codi­
fican el aminoácido alanina. Así, el código genético
consta de un alfabeto de cuatro letras (A, G, C y T) com­
binadas en palabras de tres letras.
Como se ha tratado en la anterior sección, la estructu-
ra primaria (la secuencia de aminoácidos) de un polipép-
tido determina su configuración tridimensional final.
Cuando se ha sintetizado la cadena polipeptidica, se en­
rolla y se pliega originando la estructura secunda ria y
terciaria característica de una molécula proteica, y en al­
gunos casos se une a otras cadenas para formar una pro­
teína constituida por varias subunidades.
Pueden encontrarse explicaciones más detalladas de
los principales pasos que relacionan la síntesis de proteí­
nas con los ácidos nucleicos en las referencias incluidas
en las Lecturas Recomendadas al final del capítulo.
ENERGÉTICA DE LA CÉLULA VIVA
Las reacciones bioquímicas de las células animales son
en muchos aspectos como las de una máquina química.
Al igual que en cualquier máquina, cada paso va acom­
panado de una transacción de energía. Para que una
máquina o una célula produzcan un trabajo, la energía
Figura 3-28. La estructura cuaternaria del colágeno es
una «superhélice» que consta (le tres cadenas poñpepn-
dicas, cada una en ta conformación de hélice z. Puentes
de hidróqeno (no mostrados) mantienen unidas las tres
cadenas.
 MOLÉCULAS, ENERGÍA Y BIOSÍNTESIS 67

PAR DE BASES ADENINA-TIMINA

Base,
Adenina limina
1

desoxirri bosa
PAR DE BASES GUANINA-CITOSINA H
Guanina Citosina

C- 1' de
desoxirribosa

ctesoxirri bosa

Figura 3·30. Los puentes de hidrógeno de los ácidos nucleicos

(puntos negros) entre las bases púricas y pirimidínicas forman
los pares de bases estables G-C, A-T (en el ADN) y A-U (en el
ARN). La estructura del uracilo (U) es la misma que la de la ti mina
excepto que el 9rupo metilo ( -CH3) del C5 se reemplaza por un
hidrógeno.

debe transferirse de una parle del sistema a otra, nor­

ma I mente con la conversión como mínimo de pa ne de la
energía de una forma en otra distinta. Ello es válido in­
cluso cuando las partes del sistema que reaccionan son
tan pequeñas corno moléculas.
Los animales obtienen su combustible al ingerir las
moléculas orgánicas del alimento y, posteriormente, de­
gradarlas por procesos digestivos y metabólicos. Con es­
J­1
Figura 3­31. El esqueleto estructural de las cadenas de polinu­
cteóttdos consta de pentosas unidas por enlaces fostodiéster.
Las bases se extienden hacia el exterior de la estructura. Este
esque rna rn uestra u na pequeñ a parte de u na nica cadena del
ú

tos procesos se libera la energía química inherente de las
estructuras moleculares de los alimentos, que se podrá
utilizar para las necesidades energéticas del organismo.
La energía se requiere para actividades tan manifiestas
como es la contracción muscular, el movimiento ciliar y
el transporte activo de moléculas por las membranas,
aunque también se precisa. energía química para la sínte­
sis de moléculas biológicas complejas a partir de unida­
des estructurales químicas simples y para la subsiguiente
organización de estas moléculas en orgánulos, células,
tejidos, sistemas ele órganos y organismos completos. Un
organismo vivo requiere un aporte de combustible fre­
cuente, y continuamente gastan energía para mantener
su función y estructura en todos los niveles de organiza­
ción. Si la consecución de energía disminuye por debajo
ADN. ll.ebninqer. 1975.]
de la cantidad que se precisa para el mautenimiento, el
organismo consumirá sus propias reservas energéticas,
Cuando las haya agotado, ya no tendrá más aporte de
energía. El organismo mucre porque no podrá evitar la
tendencia a desorganizarse, ni podrá continuar realizan­
do las necesarias funciones que requieren energía.
Las transacciones de material y energía que ocurren
en un organismo constituyen su metabolismo. Estos in­
tercambios, a nivel intracelular, se producen por intrin­
cadas secuencias de reacciones denominadas vías meta­
bélicas, que en una sola célula pueden incluir miles de
tipos distintos de reacciones. Estas reacciones no se pro­
ducen al azar, sino en secuencias ordenadas y reguladas
68 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
ADN AON
ADN ARNm AON
Figura 3-32. El ADN nativo contiene dos cadenas arroltadas en-
tre sí en una doble hélice. Los puentes de hidróoeno (puntos
negros) entre las bases complementarias estabilizan la estructu-
ra. L.a molécula se desenrolla durante la transcripción y una de
las cadenas actúa <le molde para la síntesis del ARNm comple-
mentario del ADN.
por una gran variedad de mecanismos de control genéti­
cos y químicos. La organización de átomos y moléculas
en estructuras altamente específicas, junto a la ca paci­
dad de llevar a cabo el mela bolismo celular, d istinguen a
los sistemas vivos de los inanimados.
Los procesos del metabolismo celular en los animales
son ele dos clases:
• La extraccion de la energía química de las moléculas
del alimento y el canalizar esa energía en funciones úti­
les.
• La alteracián y redistrioucion qui mica de las moléculas
de nutrientes en pequeños precursores de otras clases
de moléculas biológicas.
Un ejemplo de la extracción es la obtención ele ami­
noácidos durante la digestión de las proteínas del ali­
mento y su subsiguiente oxidación en las células, con lo
que se libera su energía química. Un ejemplo de la alte­
ración y redistribución es la incorporación de aminoáci-
dos en moléculas proteicas de nueva formación de
acuerdo con las especificaciones de la información gene-
tica de la célula. Aquí nos interesaremos menos por los
detalles bioquímicos del metabolismo celular, que por
los principios termodinámicos y químicos que subyacen
en la transferencia y utilización de la energía química en
el interior celular. Por ello consideraremos los mecanis­
mos gracias a los cuales se extrae la energía química de
las moléculas del alimento y la forma en que queda dis­
ponible para los procesos que requieren energía, los cua­
les se discutirán en capítulos posteriores.
Energía; concepto y definiciones
Puede definirse la energía como la capacidad de realizar
trabajo. A su vez, el trabajo puede decirse que es el pro­
ducto de la fuerza por la distancia (T = F x d). Por
ejemplo, cuando una fuerza levanta un peso de 1 kg a
una altura de I m, la fuerza es 1 kg y el trabajo mecánico
realizado será 1 m · kg. La energía gastada en realizar ese
trabajo (es decir, la energía útil, sin contar la gastada en
vencer la fricción, o la desprendida como calor) es tam­
bién I m · kg. Cuando se ha subido la masa del kilogra­
mo a la altura de I m, en virtud de su posición poseerá
una energía potencial de I m · kg. Esta energía puede
convertirse en energía cinética (energía de movimiento]
si se deja caer la masa. Vemos así que hay diferentes for-
mas de energía, incluyendo las siguientes:
• Energía potencial mecánica (p. ej., un muelle compri­
mido o un peso levantado).
• Energía potencial química (la gasolina y la glucosa).
• Energía cinética mecánica (un peso cayendo).
• Energía térmica (que en realidad es energía cinética a
nivel molecular).
• Energía eléctrica.
• Energía radiante.
Las diversas formas de la energía pueden servir para
diferentes tipos de trabajo, como se resume en el Cua­
dro 3­8. Nos interesaremos en este capítulo sobre todo
por la energía química, energía potencial almacenada en
la estructura de las moléculas. Antes de profundizar en
las relaciones energéticas implicadas en las reacciones
bioquímicas del metabolismo celular, sería de utilidad
recordar la primera y la segunda ley de la termodinámi­
ca y el concepto de energía libre.
Las leyes de la tertnodinemics
La prnnera ley de la h!rmodinámica dice que la energía,
en el Universo, ni se crea ni se destruye. Por ello, si que­

' . . . . .. . . . . . .. ' ' . . . . ...
mames leña o carbón como combustible de una máqui­
na de vapor no se crea nueva energía, sino que simple­
mente se convierte de una forma en la otra (en este ejem­
plo, la energía química en energía térmica, la térmica en
mecánica, y esta última en trabajo).
La segunda ley de la termodinámica dice que toda la
energía del Universo será degradada inevitablemente a
calor y que la organización de la materia se volverá to­
talmente aleatoria. En términos más formales, la segunda
ley especifica que la entropía (una medida de la aleatorie­
dad) de un sistema cerrado aumentará progresivamente y
que dentro del sistema disminuirá la cantidad de energía
capaz de realizar trabajo útil, Un sistema que esté ordena­
do (no aleatono) contiene energía en la forma de su orde­
namiento. porque al desordenarse (es decir, como resul­
tado de un aumento de la entropía) podrá realizar
trabajo. Esta situación se ilustra en la Figura 3­33!\, que
muestra el movimiento térmico de las moléculas de un
gas en un sistema hipotético que consta de dos compar­
timientos comunicados. Inicialmente el gas está casi to­
talmente confinado en el compartimiento 1, en cuyo caso
el sistema posee un cierto grado ele orden; obviamente,
esta situación tiene muy poca probabilidad de que se
produzca espontáneamente si en la condición inicial las
moléculas del gas est uviesen uniformemente distribuidas
por los dos compartimientos. Se puede forzar que las
moléculas del gas en tren en un com partim ien to ÍI nica­
mente gastando energía (p. ej .. un pistón que empuje al
gas de un compartimiento al otro). A medida que se
permite que el gas escape del compartimiento 1 al Il,
aumenta la entropía del sistema (o sea, se vuelve más
aleatorio). El movimiento de las moléculas del compar­
timiento J al 11 es una forma de energía útil que puede
aprovecharse para realizar trabajo en un aparato apro­
piado colocado cerca. de la abertura entre los dos com­
partimientos. Una vez que el sistema se haga totalmen­
te aleatorio (es decir, máxima entropía), no podrá
obtenerse más trabajo del sistema, incluso aunque las
moléculas del gas mantengan un movimiento térmico
constante (Fig. 3­33B).
El ordenamiento incrementa a medida que el organis­
mo se desarrolla desde un huevo fertilizado a un adulto.
Por ello se dice que los sistemas vivos desafían a la se­
gunda ley. Debe recordarse. no obstante, que la segunda
ley se refiere a un sistema cerrado (p. ej., el Universo), y
que los animales no son sistemas cerrados. Los organis­
Cuadro 3-8
Diversos tipos de trabajo
Fuerza directora
Traba jo de
expansión P (presión)
Trabajo mecánico F (fuerza)
Trabajo eléctrico E (potencial eléctrico)
Traba jo de
superficie r (tensión superticiatl
Trabajo químico ¡, (potencial quirnico)
MOLÉCULAS. ENERGÍA Y BIOSÍNTESIS 69
' ' . . . . . ... ' '
mos vivos mantienen una entropía relativamente baja a
expensas de obtener energía del ambiente. Así, un rino­
ceronte al comer, digerir y mctabolizar la hierba en can­
tidades que sean justo suficientes para mantener su peso
constante, lo que hace en último extremo es aumentar la
entropía de la materia que ingiere. Las moléculas de car­
bohidratos, proteínas y grasas de la hierba, con gran or­
denación, se convertirán en el animal en C02 y H20 y
compuestos nitrogenados de bajo peso molecular, libe­
rándose la energía atrapada en la organización de las
grandes moléculas (Fig. 3­34). Los átomos de carbono,
hidrógeno y oxígeno en la celulosa, por ejemplo, se en­
cuentran en un estado mucho más ordenado que el que
tienen en el C02 y H20, por lo que la degradación meta­
bólica de la celulosa de la hierba representará un incre­
mento de la entropía. Al mismo tiempo, las células de]
rinoceronte utilizarán para sus propios requerimientos
energéticos una parte de la energía química en un princi­
pio almacenada en la organización molecular de los ali­
mentos. Esto no está en conflicto con la segunda
v lev.. de­
bido a que la disminución de entropía que resulta de la
síntesis de moléculas complejas por parte del animal se
produce a expensas del aumento de entropía de las mo­
léculas del alimento ingerido; el cual había sido produci­
do por plantas con la energía del Sol. Como siempre
ocurre, al final el rinoceronte morirá y la entropía de su
cuerpo aumentará enormemente al degradarse o al ser
devorado por otros animales.
Energía libre
Los sistemas vivos deben funcionar a temperaturas y
presiones relativamente uniformes, por ello sólo pue­
den darse pequeños gradientes de temperatura y pre­
sión entre las distintas partes de un organismo. En con­
secuencia, los sistemas biológicos sólo pueden utilizar
de la energía química total disponible el componente
que sea capaz de realizar trabajo en condiciones isoter­
mas. Este componente se denomina energía libre, sim­
bolizado por la letra G. Los cambios de la energía libre
se relacionan con cambios de calor y entropía por la
ecuación
,':!. G = t.H ­ T,is (3­7)
en la que dH es el calor producido o captado por la reac­
ción (o entalpía), Tes la temperatura absoluta y (Ses el
cambió de entropía (en unidades de cal· mol· K-1). Se­
Variable del gún esta ecuación e:; evidente que en una reacción que
desplazamiento no se produzca cambio de temperatura (t,.H = O), dismi­
nuirá la energía libre (es decir, /lG será negativo) si hay
un aumento de la entropía (es decir, /lS será positivo), y
Volumen
Longitud viceversa. La dirección del flujo de energía es hacia el
Carga eléctrica incremento de entropía (segunda ley). por lo que las
reacciones químicas se producirán espontáneamente si
Área de la superficie causan un aumento de la entropía (y con ello, una dismi­
Número de moles
nución de la. energía libre). Dicho de otra forma, la fuer­
70 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
Compartimiento I Generador
Compartimientos
en equilibrio
za impulsora de las reacciones químicas es la disminu­
ción de energía libre.
La in evita ble tendencia al aumento de entropía, con la
ineludible degradación de la energía química útil a energía
térmica que no es utilizable, requiere que los sistemas vi­
vos han de atrapar o capturar nueva energía de vez en
cuando para poder mantener su status quo estructural y
funcional. De hecho, la capacidad de extraer energía útil
del ambiente es una de las características más notables que
distinguen a los sistemas vivos de la materia inanimada.
Con las excepciones de las bacterias y algas qnimioau­
totróficas, que obtienen energía oxidando compuestos
inorgánicos, y de aquellos animales que obtienen su ali­
mento de estos organismos, toda la vida en la Tierra de­
Figura 3-33. los estados de alta y baja entropía pueden ex-
plicarse mediante una analogía mecánica. En IA) casi todas
las moléculas de gas están en el compartimiento 1, un estado
organizado y de alta energía ..Al permitir que las moléculas
difundan al compartimiento 11, aumentará la entropía del sis-
tema y disminuirá la energía útil hasta que se alcance el
equilibrio (81. El cambio de un estado de baja entropía a otro
ele alta liberará energía útil, que en este modelo se aprove-
cha para mover la rueda de paletas. La capacidad de realizar
trabajo se aproxima a cero a medida que el sistema alcanza
el equilibrio. (Adaptado de Baker y Allen, 1965.)
pende en última instancia de la energía radiante del sol.
Esta energía electromagnética (que incluye la luz visible)
tiene su origen en la fusión nuclear, un proceso en el que
la energía de la estructura atómica se convierte en ener­
gía radiante. En ese fenómeno se fusionan cuatro nú­
cleos de hidrógeno para formar un núcleo de belio, libe­
rándosc una enorme cantidad de energía radiante. Una
fracción muy pequeña de esta energía radiante llega al
planeta Tierra, y una parte aún más pequeña es absorbi­
da por las moléculas de clorofila de las plantas y algas
verdes. La energía atrapada por las moléculas de clorofi­
la activadas por la luz se emplea en la síntesis de glucosa
a partir de H20 y C02, que precisa de energía. La ener­
gía química almacenada en la estructura de la glucosa la
Figura 3-34. La ingestión y digestión de
alimento (sombreado en color) por un
animal aumenta la entropía al romper las
moléculas alimenticias en moléculas
más pequeñas con menor contenido de
energía libre, que finalmente se pierde al
ambiente (sombreado en gris). Las cétu­
las del animal utilizan la energía liberada
en estas transformaciones para producir
las reacciones que requieren energía.
 MOLÉCULAS, ENERGÍA Y BIOSÍNTESIS 71

e
puede utilizar la planta controlando su liberación en los
procesos de la respiración celular. .
Todos los animales obtienen la energía que necesitan '

directa o indirectamente a partir de los carbohidratos, '

'

/j\
grasas y proteínas producidos por las plantas verdes.
Los herbívoros (p. ej., saltamontes y bóvidos) obtienen
estos compuestos ricos en energía alimentándose direc­
ramente de los materiales de las plantas, mientras que
los predadores (p. ej., arañas y gatos) y los detritivoros
(p. ej., langostas de mar y buitres) los obtienen de segun­ M. Vegetales
da, tercera o cuarta mano. En la Figura 3­35 se muestra
el esquema de la transferencia de energía química entre
los distintos nioeies tróficos del mundo vivo.
En este mismo capítulo considera remos más adelante
las vías químicas que usan las células animales para libe­
rar energía mediante la oxidación de las moléculas del

¡
alimento. Antes será útil examinar algunos principios
J-lerbívoros
generales de la transferencia de energía en las reacciones
bioquímicas y también algunas características de los en­
zimas, las proteínas celulares que permiten que las reac­
ciones bioquímicas se produzcan con rapidez a las tem­
peraturas biológicas.

r
Carnívoros
Transferencia de energía química Parásitos

por reacciones acopladas l

Hay varias categorias de reacciones bioquímicas, pero
las características ele las velocidades y cinéticas de reac­
ción pueden ilustrarse con una simple reacción de com­
binación en la que dos moléculas de sustrato., A. .,v B '
reaccionan formando dos nuevas moléculas de produc­
�.
L­­­'� tf'
Descomponedores
/­­­­­­­'
(bacteriasl
to, e y D:
Figura 3-35. Los niveles de energía trófica están estrechamente
relacionados por el flujo de energía (flechas). Obsérvese ta posi-
(3-8) ción central de los vegetales y herbívoros. Las bacterias descom-
(sustratos) (productos) ponedoras son importantes para reciclar la materia orqáruca.

Como indican las flechas, esta reacción es reversible. En

teoría, cualquier reacción química puede ocurrir en
ambas direcciones, siempre que de la disolución no se
extraigan los productos. Sin embargo, en algunos ca­
sos la tendencia a reaccionar en 1111 sentido (sustra­
tos­­> productos) es mucho mayor que en el otro, por
lo que a efectos prácticos debe considerarse la reac­
ción como irreversible.
Una reacción tiende a ir hacia adelante cuando pre­
senta un cambio de energía libre, L\G, que es negativo.
Dicho de otra manera, si la energía libre total de los sus­
traros excede la de los productos. Estas reacciones se de­
nominan exergénicas (o exotérmicas] y típicamente libe­
ran calor. La oxidación del hidrógeno a agua es una
reacción exergónica simple:
La reacción inversa que precisa de energía ocurre en el
proceso de la fotosíntesis con la energía de los quanta de
luz atrapados por la clorofila:
quamum de luz
Esta reacción, por requerir un aporte de energía, es un
ejemplo de reacción endergénica (o endotérmica). A ve­
ces nos referimos a las reacciones cxergónicas y cndergó­
nicas como «a favor de gradiente» y «en contra de gra­
diente», respectivamente.
La cantidad de energía que libera o capta una reac­
ción se relaciona con la constante de equilibrio de la
reacción, K�,r Es una constante de proporcionalidad que
relaciona las concentraciones de los productos con las
concentraciones ele los sustratos, cuando se ha alcanza­
do el equilibrio de la reacción (o sea, cuando la veloci­
dad en un sentido es igual a la velocidad en el sentido
contrario y la concentración de sustratos y productos se
ha estabilizado):
[C][D]
­ -·-·-- (3­8a)
[A][B]
72 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA

Donde LA]. [BJ, [CJ y [DJ son las concentraciones mo­

Poi Ni
laxes en equilibrio de los sustratos y productos de la
ecuación 3­8. Es evidente que cuanto mayor sea la ten­
dencia de la reacción de la ecuación 3­8 a ir hacia la
derecha, mayor será el valor de su K�<r Como ya se ha
indicado, esta tendencia depende de la diferencia de
energía libre, óG, entre los productos C y D y los sustra­
tos A y B. Cuanto mayor sea la disminución de energía
libre, más desplazada hacia la derecha estará la reacción 1m
y mayor será su K:w La constante de equilibrio se rela­
ciona con el cambio de energía libre estándar, JC°. del

•
sistema por la ecuación 3 kg

tlGº = ­ RT In K�" (3­9)

En esta ecuación se hace evidente que si K'..;, es mavor

1
"

que 1,0, el se: será negativo; y si K�q es menor que 1.0, el

!).Gº será positivo. Las reacciones exergónicas tienen un
fl.C" negativo y, por lo tanto, se producen espontánea­
mente sin precisar energía externa que las «empuje». Las
reacciones endergónicas tienen un i..\Gv positivo; es dcci r,
requieren que se incorpore energía de otra fuente que no
sean los sustratos. 3 kg
Algunos procesos bioquímicos de las células vivas son
exergónicos y otros son endcrgónicos. Los procesos 1m

exergónicos, dado que $e producen por sí mismos en

condiciones apropiadas, presentan relativamente pocos
problemas en la energética de la célula. Sin embargo, los
procesos endergónicos deben «impulsarse». Esto se con­
sigue normalmente en la célula por medio de reacciones
acopladas, en las que intermediarios comunes transfieren
energía química de una molécula de contenido energéti­
co relativamente elevado a un sustrato de menor conte­
nido energético. Como resultado, el sustrato se convierte
en una molécula ele mayor contenido energético y puede
experimentar la reacción que se precisaba, liberando
parte de esa energía.
En la Figura 3­36 se muestra una analogía mecánica
de una reacción acoplada. El peso de 1 O kg de la izquier­
da puede perder su energía potencial (10 rn · kg) cayendo
un espacio de I m, en cuyo caso levantará el peso de :i kg
de la derecha la misma distancia. Debido a que los dos
pesos están conectados por una cuerda y una polea, la
caída del peso de 10 kg se acopla al levantamiento del de
3 kg, que inicialmente no tenía energía potencial por sí
mismo. Es evidente que el peso que baja sólo puede le­
vantar a otro si pesa más. De la misma forma, una reac­
ción exergónica puede «impulsar» una reacción ender­
gónica sólo si la primera libera más energía libre de la
que requiere la segunda. En consecuencia, se pierde par­
te de la energía. y la eficiencia es obligadamenie menor
del 100 %.
ATP: el portador de energía de la célula
El intermediario, rico en energía, más común y universal
del metabolismo celular es el nucleótido adenosín trífos­
10 kg
Figura 3-36. En esta analogía mecánica de una reacción aco-
plada, ta caída <Jel peso (le 10 kg proporciona la energía que se
precisa para levantar el peso de 3 kg. La polea y la cuerda que
conecta los dos pesos son el mecanismo para acoptar la energí,1
del peso de 10 kg que hace bajar al otro peso.
fato (ATP), que puede ceder su grupo fosfato terminal,
de elevado contenido energético, a un gran número de
moléculas orgánicas aceptoras (p. ej., azúcares, arninoá­
cidos y nuclcóridos). La reacción de fosfo.-ilaciún aumen­
ta el nivel de energía libre de la molécula aceptora. pcr­
muiendo que interaccione cxergónicamente en reacciones
bioquímicas catalizadas por enzimas.
La molécula de ATP consta de un grupo adenosina.
formado por la base pirimidinica adenina y el residuo car­
bohidratado de cinco carbonos ribosa, y de tres grupos
fosfato unidos (Fig. 3­37). La mayor parle ele la energía
libre de la molécula reside en la repulsión elecrrostática
mutua de los tres unidades de Iosíato, por sus átomos de
fósforo cargados positivamente y sus átomos de oxígeno
cargados negativamente. La repulsión mutua de estos
grupos fosfato es análoga a la repulsión de dos barras
imantadas (Fig. 3­38), con sus polos norte y sur alineados,
que se mantengan unidas por una cera pegajosa. Si la
cera, que es análoga a los enlaces O-� P del ATP, se
reblandece calentándola, la energía (almacenada en
virtud de la proximidad de los imanes que se repelen mu­
tuamente) se liberar;', separando a los imanes. De igual
forma, la rotura de los enlaces entre las unidades ele
fosfato del ATP produce una liberación de energía libre
 MOLÉCULAS, ENERGÍA Y BIOSÍNTESIS 73

(Fig. 3­37/3). Una vez se ha retirado el grupo fosfato ter­ La energía libre rotal liberada en las dos reacciones
minal por hidrólisis, la repulsión mutua de los dos pro­ ( ­ 5.3 kca I · mol ­ 1) será igual a la suma de los Cí1 m bios
ductos, adenosina difosfaro (ADP) y el fosfato inorgáni­ de energía libre de las dos reacciones originales:
co (P¡), es tal, que la probabilidad de que se recombinen
es muy baja; es decir, que su recombinación es altamente
endergónica. El cambio de energía libre estándar. óG°, ATP + HOH::::::;;: ADP + P;
para la hidrólisis del ATP en condiciones estándar es de óGº = ­7.3 kcal·mol­1
­7.3 kcal·mol­1.
El papel del AlP como impulsor de diferentes reac­ X+Y:::;Z
ciones endergónicas mediante reacciones acopladas se + 2.0 kcal · 11101­ 1
ilustra con la condensación de los dos compuestos X e Y óGº = ­­­­­­­
­ 5.3 kcal · mol ­ 1
para producir Z:

X + ATP :::; X­fosfato + ADP Obsérvese que el .1Gº para condensar el X y el Y tiene un
valor positivo ( + 2.0 kcal · mol­ 1), y normalmente no se
L\Gº = - 3.0 kcal · mol - 1
produciría. En cambio, debido a que la hidrólisis del
X­fosfato + Y :::::;: Z + P¡ A'IP tiene un /J..Gº mayor y negativo(­· 7.3 kcal · mol­1),
el ,�Gº neto de la reacción acoplada es negativo, lo que
ilGº = - 2.3 kcal · mol" L permite que se produzca la reacción.
Aunque el ATP y otros nucleótidos trifosfa to (corno el
A
guanosín rriíosfaro, GTP) son los responsables de la
Grupo i'ldenosina
tra nsícrencia de energía en muchas reacciones acopla­
das, debe resaltarse que el mecanismo de un intermedia­
rio común es ampliamente utilizado en las secuencias de
Grupo tritosfnto reacciones bioquímicas. Así, se transfieren partes de las
moléculas (e incluso átomos, como el hidrógeno), junto
con la energía química, de una molécula a otra por in­
termediarios comunes en reacciones consecutivas. Los

Cera

.\
L_�
/
1

l Calor
(la cera se derrite)

!
ATP (forma cargada)

Ene,.gía
Enerqía fiberada

<;:1:) •
��­­­­®­® + ® + 7.3 kcal -rnot "
LJ
ADP (forma descargada)

Figura 3-37. El ATP, el transportador de enerqía más común en

las células, contiene dos enlaces fosfato ricos en enerqía (en
rojo -). IAI Fórmula estructural del ATP con los orupos adenosina
y trtíosfaro resaltados. (BI Representación esquemática de la inter-
conversión de las formas carqada y descarqada del ATP. La hidró-
lisis clet ATP ,1 ADP y fosfato inorgánico, P;, produce unos 7.3 kcal
de energía libre por mol de ATP. Esta reacción puede seguirse
apropiadamente midiendo la concentración de fosfato inorgánico.
Figura 3-38. El enlace fosfato rico en energía puede describirse
con una analogía magnética. La energía se almacena al colocar
los imanes juntos sujetándolos con cera, Cuando se derrite la
cera (o se rudrotiza el ATP) se separan los imanes. liberando la
energía. En es1a analogía, la llama suministra la enerqía de acti-
vación para derrcrir la cera.
74 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA

nucleótidos ricos en energía son especiales sólo porque tiene crea tina­fosfato, se produce la reacción de transfos­
actúan corno moneda de enerqia qeneral en un gran nú­ forilación siguiente:
mero de reacciones que requieren energía. En esta fun­
ción, el ADP es la forma «descargada» y el ATP es la enzima
Creatina l1'nosrosfi"'"i1:,.,n
forma «cargada» (véase la Fig. 3­37/J). En la célula hay + ADP creatina + A TP
muchos otros compuestos Iosíorilados ricos en energía. fosfato
algunos con energías libres de hidrólisis mayores que las
del ATP (Fig. 3­39). La célula usará estos compuestos l).Gº = ­ 3.0 kcal · mol ­ 1
en la formación de ATP. Como después veremos, hay
Tanto la crearina­Iosfato como la arginina-Iosfaro, se
otros mecanismos bioquímicos en la célula para canali­
encuentran por separado o ambas a la vez en músculos
zar la energía química en la formación de ATP.
de invertebrados.
La fosfoargínina y la fosfocrearina son reservas espe­
ciales de energía química para la rápida losforilación del
AOP, reconstituyendo el ATP, durante la contracción Temperatura y velocidad de reacción
muscular fuerte. A estos compuestos se los denomina
fosfágc.nos. En el músculo de vertebrados, que sólo con­ La velocidad a la que se produce una reacción química.
depende de la temperatura. No es sorprendente, pues la

Figura 3­39. La hidrólisis de compuestos que

contienen enlaces Iosíaro ricos en energía {en
rojo -) proporciona ,1 las células la enerqía para
las reacciones y procesos que la requieran. Aun·
que el ATP es la moneda energética más común
en los sistemas biológicos, otros compuestos
tosforilados tienen energías libres de hidrólisis
Ácido fosfoenolpirúvico ATP superiores. Las células pueden utilizar estos
compuestos, representados a la izquierda, para
L\G° = ­14.8 kcal • mor" .ó.G° = -7.3 kcal • mol" sintetizar ATP a partir de ADP y de fosfato ínorqá-
nico. Los valores de óG• son las energías libres
estándar a pH 7 de la hidrólisis de los enlaces in·
CHOH dicados por las flechas pequeñas.
1 2

H C O 11
1,3-difosfoglicerato ¿/�1 ""'¿
1, OH
HO ,¿ __ ¿
­­11.8 kcal • mor" H/1
1)G" =
ºT®
1 1
CH"
H OH
I o
Glucosa 1-fosfato
®­­ NH-C-N-CH,-coo·
11
­
ó.G' = ­5.0 kcal • mor"
'Nl­12
Creatina fosfato
H2C-Ol._®
�G° = -10.3 kcal • mol" 1
c­­o
¿/J.
1, OH H/(
""'J'.
HO ,1 1 OH
Acetil fosfato
e e
1 1
H OH
t.G° = -10.1 kcal • mor"
Glucosa 6-fosfato

NH .• �G° = -3.3 kcal • mor'

1 3
®-' NH-C-(CH ) -CH-Coo- OH
11 2 3 1

+NH ®-O-CM2-CH-CH/>H
2
Fosfoarginina Glicerol 3-fosfato
D..G"' = -7.7 kcal • mot'
ti.G° = -2.2 kcal • mol"

temperatura es una expresión del movimiento de las mo­
léculas. Al aumentar la temperatura, también lo hace la
velocidad molecular promedio. Esta velocidad superior
incrementa el número de colisiones por unidad de tiem­
po, y por lo tanto, aumenta la probabilidad de que inte­
raccionen con éxito las moléculas de sustrato. Además,
como aumentan su velocidad, las moléculas poseen ma­
yores energías cinéticas y por ello tienen una probabili­
dad mayor de que reaccionen al colisionar. La energía
cinética que se requiere para que reaccionen dos molécu­
las que colisionan se denomina la energía libre de activa­
ción o energía <fo activación. Se expresa. como el número
de calorías que se precisan para que todas las moléculas
de un mol de sustrato a una temperatura dada pasen a
un estado reactivo (o activado).
La necesidad de activación se aplica ranto a las reaccio­
nes exotérmicas como a las endoiérmicas. Una reacción,
aunque puede tener el potencial para liberar energía libre,
no se producirá a menos que las moléculas de sustrato
posean la energía cinética necesaria. Se puede comparar
esta situación a aquella en que es necesario empujar un
objeto por encima de un pequeño reborde antes de que
ruede libremente por una gran pendiente (Fig. 3­40).
La curva en trazo discontinuo de la Figura 3­41 mues­
tra la relación entre la energía libre y el desarrollo de
una reacción en la que un sustrato (S) se con vierte en un
producto (P). El sustrato ha de conseguir primero un es­
tado energético suficientemente airo para activarse, lo
que le permitirá reaccionar. Dado que la reacción pro­
duce energía libre, el estado energético del producto es
menor que el del sustrato. Obsérvese que el cambio de
energía libre global de la reacción es independiente de la
energía de activación que se precisa para que ocurra la
reacción.
En mucho proce os industriales la velocidad y la
energía de activación (o sea, la temperatura) de la reac­
ción se reducen considera ble mente con el uso de catali-
zadores: sustancias que no se consumen ni se alteran en
la reacción. pero que facilitan la. interacción de las partí­
culas de sustratos. Las reacciones de las células vivas es­
tán auxiliadas igualmente por catalizadores biológicos
denominados enzimas. La curva de trazo continuo de la
Figura 3­41 muestra el electo de un enzima. en el proceso
de la reacción S -> P. Obsérvese que la presencia del
enzima no tiene efecto en el cambio de energía libre glo­
bal de la reacción (y por lo tanto, en la constante de
equilibrio); simplemente rebaja la energía de activación
y así aumenta la velocidad de la reacción.
El aumento de las velocidades de reacción que produ­
cen los enzimas es enormemente útil en biología porque
permite que las reacciones, que de otra manera se pro­
ducirían a velocidades imperceptibles, ocurran a veloci­
dados mucho mayores con temperaturas tolerables bio­
lógicamente. En cualquier conjunto de moléculas en
reacción a una temperatura dada, sólo reaccionarán las
que posean suficiente energía cinética para ser activadas.
Si se añade un enzima que disminuye la energía requerí­
da para la activación, un mayor número de moléculas
MOLÉCULAS, ENERGÍA Y BIOSÍNTESIS 75
Figura 3-40. La enerqía de activación es la energía que se preci-
sa para colocar a los susrraros en posición para que interactúen.
En esta anatoqia. la energía potencial de la roca no puede libe-
rarse hasta que se gastt: ,iluo de energía, denominada enerqía
de activación, para situarla en la cima de I¡¡ colina.
pueden reaccionar en un tiempo dado a la misma tempe­
ratura. Las velocidades de diferentes reacciones cataliza­
das por enzimas van de 108 a 1020 veces la velocidad de
las correspondientes reacciones sin catalizador, una ace­
leración enorme de las tasas de reacción.
Una ventaja extremadamente importante de las reac­
ciones catalizadas es la posibilidad de regular la veloci­
dad de la reacción variando la concentración del catali­
zador. Por ejemplo, cuando el J-12 y el 02 se queman de
forma no catalítica, explotan de manera incontrolada
debido a que el calor liberado por la rápida combustión
del H2 provoca una rápida ignición del 02 que queda
sin quemar. Sin embargo, cuando el H2 se oxida lenta­
mente a baja temperatura en presencia de pequeñas can­
tidades de platino como agente catalizador, la liberación
de calor se lentifica lo suficiente para que no ocurra nin­
guna explosión. La cantidad de platino en relación con
el combustible (H2) y el oxidante (02) regula la veloci­
S activado sin enzima;
-.
i\G* mucho mayor
,� - ¡
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I \
I I
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E+P
Tiempo�.
Figura 3-41. La acción catalítica de un enzima disminuve la
energía de activación, �G•·, d,� una reacción. Obsérvese que el
cambio global de energía libre, �G·. es el mismo en la reacción
sin enzima (línea discontinua) y en la reacción enzimática (línea
continua). E, enzima; S, sustrato; ES•·, complejo enzima-sustrato
activado: P, producto.
76 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
. .. . .
dad de la combustión. De la misma forma, la mayor par­
te de las reacciones biológicas se regulan modulando la
cantidad o la eficiencia catalitica de determinados enzi­
mas. En las dos secciones siguientes, comentaremos pri­
mero cómo actúan Jos enzimas y después cómo regulan
las células sus reacciones metabólicas controlando la
síntesis y la actividad catalítica de los enzimas.
ENZIMAS: PROPIEDADES GENERALES
Hace un siglo se aislaron por primera vez, mediante ex­
tracción acuosa 'de levaduras, sustancias de células vivas
que aumentaban la velocidad de las fermentaciones al­
cohólicas. Se vio que estas sustancias, ahora denomina­
das ­enzimas, eran inacuvadas calentándolas, mientras
que los sustratos de las reacciones de fermentación no
eran afectados por el calor. Este hallazgo fue la primera
indicación de que los enzimas eran moléculas proteicas.
En posteriores descubrimientos se observó que, sin ex­
cepción, cada tipo de molécula de enzima es una protei­
na con una composición y una secuencia de aminoáci­
dos específicas. Todas estas proteínas, o al menos sus
partes enzimáucamente activas, tienen una conforma­
ción globular. Cada célula de un organismo contiene ti­
teralrnente miles de tipos de moléculas enzimáticas, que
caralizan todas sus reacciones de síntesis y metabólicas.
El trabajo de los genéticos moleculares ha puesto de rna­
niíiesto que los enzimas son los productos primarios de
los genes de mayor significación. Al especificar la estruc­
tura de cada molécula de enzima que se sintetiza, el apa­
rato genético es responsable indirecto de todas las reac­
ciones enzimáticas de la célula.
Especificidad enzimática y centros activos
Cada enzima es, en cierto grado, específico de determi­
nado sustrato (molécula que reacciona). Algunos enzi­
mas actúan sobre determinados tipos de enlaces y por
ello pueden actuar sobre muchos sustratos diferentes
que tengan dichos enlaces. Por ejemplo, la tripsina, un
enzima proteolírico que se encuentra en el tubo digestivo,
cataliza la hidrólisis de cualquier enlace peptidico en el
que el grupo carbonilo forme parte de un residuo de ar-
ginina o de lisina, independientemente de la posición de
esos enlaces en la cadena polipeptidica de una proteína.
Otro enzima proteoliuco intestinal, la quimotripsina,
cataliza específicamente la hidrólisis del enlace peptidico
en el que el grupo carbonilo es de un residuo de fenilala­
nina, tirosina o de rriprófano (Fig. 3­42).
La mayor parte de los enzimas, por el contrario, son
mucho más específicos por sus sustratos que los enzimas
proteoliticos. Por ejemplo, el enzima sacarasa cataliza la
hidrólisis del disacárido sacarosa a glucosa y fructosa,
pero no puede actuar sobre otros disacáridos, como la
lactosa o la maltosa. Estos sustratos son hidrolizados
por enzimas específicos para ellos (respectivamente, lac­
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ' . . . . . �
tasa y maltasa). MucJ10s enzimas diferencian los isóme­
ros ópticos, es decir, moléculas que son química y cstruc­
ruralmente idénticas excepto que una es la imagen espe­
cular de la otra. Por ejemplo, el enzima L­aminooxidasa
cataliza la oxidación del isómero L de un «­cetoácido,
pero es totalmente ineficaz sobre el isómero D de estas
moléculas.
La naturaleza altamente específica de muchos enzi­
mas, que acabamos de señalar, concuerda con el concep­
to de que la molécula de sustrato «encaja» en una parte
especial de la superficie del enzima, que se denomina
centro activo. La molécula de enzima está formada por
una o más cadenas pcpridicas plegadas hasta conseguir
la estructura terciaría de una proteína más o menos glo­
bular y con una conformación especifica, Se cree que el
centro activo está formado por los grupos laterales de
determinados aminoácidos que se encuentran próximos
por la estructura terciaria, aunque puedan estar muy se­
parados en la secuencia de aminoácidos del enzima (Fig,
3­43). Debido a que la interacción del centro activo con
el sustrato implica a fuerzas de atracción relativamente
débiles (corno las uniones electrostáticas, las fuerzas de
van der Waals y los puentes de hidrógeno), la. molécula
del sustrato ha de tener una conformación que se ajuste
estrechamente al centro activo.
Está perfectamente establecida la especificidad estén­
ca del centro activo del enzima por experimentos con
análogos de sustrato (o sea, moléculas similares a la mo­
lécula de sustrato, aunque con ligeras diferencias). La ca­
pacidad del centro activo del enzima de interaccionar
con análogos disminuye con las distancias interatómi­
cas, con el número y la posición de grupos cargados, y a
medida que los ángulos de los enlaces de las moléculas
análogas se desvían más que los del sustrato normal.
. ··'í-l o ll o
H ''I, ,1 . I 11
-;"/,
>N1;:
·, · •:--·C:·"'-OH+H-N--C-C-OH
. . . 1 1
H_,·,6
·· ·
; . H R
:­ �
Figura 3-42. La quirnotripsina hidrolizn cualquier enlace peptí-
dico en el que el grupo carbonilo sea de fenilalanina, tirosina o
de rnptófano. Se muestra aquí su acción en un dipéptido que
contiene tenilalanina (en sombreado).

Mecanismos catalíticos de los enzimas
La actividad enzimáuca, potencia catalítica de un enzi­
ma, puede expresarse por el número de recambio, que es
el número de moléculas de sustrato por segundo con el
que reacciona una molécula de enzima para formar las
moléculas del producto. El sustrato o sustratos de una
reacción enzimática interactúan primero con el centro
activo del enzima para formar un complejo enzima­sus­
trato (ES). Como se ha indicado anteriormente, esta in­
teracción disminuye la energía de activación de la reac­
ción, por lo que aumenta la probabilidad y la velocidad
de esa reacción (véase la Fig. 3­41).
Varios mecanismos catalíticos contribuyen a acelerar
las velocidades de reacción de las reacciones enzimáti­
cas:
• Algunos enzimas sostendrían a las moléculas de sus­
trato con la orientación apropiada para que los gru-
pos reactivos estén lo suficientemente cerca uno del
otro como para aumentar la probabilidad de la reac­
cien.
• Un enzima puede reaccionar con la molécula de sus­
trato formando un compuesto intermedio inestable,
que experimenta fácilmente una segunda reacción que
formará los productos finales.
• Los grupos laterales del centro activo pueden actuar
como dadores o aceptores ele protones originando
reacciones generales ácidas o básicas,
• La unión del enzima al sustrato puede provocar que
éste sufra una tensión interna a nivel del enlace suscep­
tible, aumentando su probabilidad de escisión.
Cualquiera que sea el mecanismo catalítico preciso de
determinada reacción, una vez han reaccionado las mo­
Figura 3-43. Este modelo generado por computador del enzima
químotrtpslna ilustra cómo aminoácidos que están muy separa-
dos en la estructuro primaria se encuentran próximos al plegarse
la proteína para formar el centro activo. En la quimotnpsína, los
tres residuos que se muestran en rojo son necesarios para la acti-
vidad catalítica. Esta proteína globular contiene tres cadenas de
polipéptidos (A, B y C) y cinco puentes disutluro. que se mues-
tran en amarillo. [Adaptado de Tsukada y Blow, 1995; cortesía de
Gareth White.l
MOLÉCULAS, ENERGÍA Y BIOSÍNTESIS 77
leculas ele sustrato, el enzima se separa de los productos
liberándose para formar un complejo (ES) con una nue­
va molécula de sustrato. Puesto que el ES persiste du­
rante un tiempo finito, puede suceder que todo el enzima
esté unido en forma de ES si la concentración de susira-
to es suficientemente elevada en relación a la concentra­
ción de enzima.
Efecto de la temperatura y el pH sobre
las reacciones enzimáticas
Cualquier factor que influya en la conformación de un
enzima, y por ello en la disposición de los grupos latera­
les de los aminoácidos del centro activo, alterará su acti­
vidad. La temperatura y el pH son dos factores comunes
que afectan a las velocidades de las reacciones enzimáti­
cas de esa forma.
Corno hemos visto previamente, un incremento de la
temperatura aumenta la probabilidad de desnaturaliza­
ción proteica, que rompe la conformación de las cadenas
polipepridicas. En el caso de los enzimas, la desnaturali­
zación destruye la actividad catalítica. Por esta razón,
las reacciones catalizadas por enzimas presentan una
curva característica de velocidad de reacción respecto de
la temperatura (Fig. 3­44A). Al incrementar la tempera­
tura, la velocidad de reacción aumenta inicialmente de­
bido al aumento de energía cinética de las moléculas de
sustrato. Sin embargo, al aumentar más la temperatura,
también aumenta la tasa de inactivación del enzima de­
bida a la desnaturalización. A la temperatura óptima, la
tasa de destrucción del enzima por el calor justo com­
pensa el aumento de la reactividad enzima­sustrato, y
los dos electos de la temperatura elevada se anulan. A
esa temperatura la velocidad de la reacción es la máxi-
ma. A temperaturas superiores predomina la destruc­
ción del enzima, con lo que disminuye rápidamente la
velocidad de la reacción. La sensibilidad térmica de los
enzimas y otras moléculas proteicas contribuye a los
efectos letales de las temperaturas excesivamente altas.
A menudo los enlaces electrostáticos intervienen en la
formación de un ES. Dado que el H+ y el OH­ pueden
actuar como ion contrario de centros electrostáticos,
una disminución del pH expone más centros positivos
de un enzima para que interaccionen con los grupos ne­
gativos de una molécula de sustrato. Inversamente, un
aumento del pH facilita la unión de los grupos positivos
de un sustrato a los centros negativos del enzima. Por
ello, no es sorprendente que la actividad de los enzimas
varíe típicamente con el pH del medio y que cada enzi­
ma tenga un rango de pl­1 óptimo (Fig. 3­44B).
Cofactores
Algunos enzimas requieren la participación de pequeñas
moléculas, denominadas cofactores, para llevar a cabo
su función catalítica. En ese caso, la mitad proteica se
78 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA

A
principales iones que actúan como coíacrorcs.junro con
ejemplos de lo, enzimas que los precisan. De especial

(1)
t interés es el a 2 ... , cuya conccnt ración intraccl u lar
( < 10­6M) es mucho menor que la ele la mayor parte de
'O e:
'O ­o los otros iones comunes con interés ñsiológico. /1. dile-
·-"'·-
'O
..,o rcneia del Mg2 1• Na", K I y otros iones cofactorcs. que
o
� ..
<.J"'
(1)
normalmente están presente. en concentraciones no li­
mitantes, el Ca2 1 sí Jo está para dcrcrminados enzimas.
Como se comenta en el Capitulo 9, la membrana y cicr-
Temperatura- los orgánulos internos de la célula. como el retículo en­
doplasrnático, regulan la concentración de Ca2+ del ci­
B tosoí. De esta manera, la actividad de los e117.i mas
activados por el calcio puede ser regulada por la cclu!a.
Los proce os celulares regulados por la concentración
de iones calcio incluyen a la contracción muscular. la
Co1inestcrasa secreción de ncurotra nsm isorcs y de hormonas, la acti vi­
d ad ciliar, el ensamblaje ele los microt í1 bulos y el movi-
miento amcboide.
,.­,
/ \
/ \
I \
, 'T. .
1
1
1 npsrna
1
Cinética enzimática
1 1
I I
1 1
1 1 La velocidad a que se produce una reacción enzimática
1
I
I
1
I
depende de las concentraciones del sustrato. del produc­
I
I \
I
to y del enzima activo. Para simplificar, imaginemos que
I
I I
I se quita el producto a medida que se forma. En este caso.
I \
\ la velocidad de la reacción estará limitada por la con­
' \ centración del enzima o del sustrato. Si suponemos adc-
4 6 8 10 m{,s que el enzima está presente en exceso, la velocidad
pH a la que un sustrato simple. A. se convierte en el produc­
10. P, está determinada por la concentración de A:
Figura 3-44. Tanto la temperatura como el pH influyen en I¡, acu­
vidad de tos enzimas. (A) El efec:10 de la temperatura en la veloci-
k
dad de una reacción generalmente es similar para la mayor par-
te de enzimas. (B) El efecto del pH en la actividad catalítica varia
A--> p
según el enzima. pero casi todos tienen un pH óptimo distinto.

Cuadro 3­9
denomina apoenzima. Una clase de coíacrorcs consiste Iones metálicos que actúan como coractores
en pequeñas moléculas orgánicas denominadas coenzi­
Algunos enzimas que requieren el metal
mas. que activan a sus apoenzimas aceptando átomos de Ión metálico como cofactor
hidrógeno (protones) del sustrato. Por ejemplo, el enzi­
ma glutamato dcshidrogcnasa requiere del coenzima ni­ ea, 1
Fostooiasterasa
Proteincinasa C
cotinamida­adenm­dinucleótidó (NAD) para catalizar la
Troponina
dcsaminación oxidaiiva del aminoácido glutamaio: Cu2' (Cu ·) Citocromo oxidase
Tiro si nasa
Fe2 o Fe31• Caralasa
glurarnato + NAI) 1
·­<­:; Citocromos
«­cetoghnarato + NADH + NI 14 Ferredoxina
Peroxidasa
t<cdm.·1(1,,)
K' Piruvato fosfocinasa (también requiere Mg2 •)
Mg2+ Fostobidrotasos
Determinados cocuzimas contienen vitaminas como Fostotransferasas
Mn" Arginasa
parte de la molécula. No sorprende que las deficiencias Fosfotransferasas
vitaminicas puedan tener graves efectos patológicos por ATPasa de la membrana plasmática (también
su acción a nivel enzimático, puesto que un apocnzima requiere K·1 y Mg2 ... )
no puede funcionar sin su cocnzima. zn2 1 Alcohol deshidropenasa
Anhidrasa carbónica
Otro· enzimas precisan como cofactorcs de iones me­ Carboxipeptldasa
tálicos monovalentes o diva lentes, generalmente de una
forma muy selectiva. En el Cuadro 3­9 se indican los F11c11w: 1 ehnirigc,·, 1975.

en donde k es la constante de la velocidad de la reacción.
La tasa de conversión de A a P puede expresarse mate­
máticamenre corno
-d[AJ
- k[A] (3­10)
dt
en la que [AJ es la concentración instantánea del sustra­
to. k es la constante de la velocidad de la reacción, y
rl [A]/(/t es la lasa a la que A se convierte en P en función
del tiempo. En la Figura 3­45 se representa la desapari­
ción de A y la aparición de P en función del tiempo.
Obsérvese que la concentración de A decrece exponen­
cialmente, asi como la de P aumenta también exponen­
cialmente. Siempre se genera una función exponencial
respecto del tiempo cuando la velocidad de cambio de
una cantidad (d[A]/dt en este caso) es proporcional al
valor instantáneo de esa cantidad ([AJ en este ejemplo).
La relación que expresa la ecuación 3-1 O se puede pre­
sentar de forma más útil como
a kl I
log­­­ = --- (3- LOa)
a - X 2.303
en la que a es la concentración inicial de sustrato y x es
la cantidad de sustrato que reacciona en un tiempo dado
I Una representación gráfica del elemento izquierdo de
la ecuación 3­íüa frente al tiempo da una línea recta
cuya pendiente es proporcional a la constante de la velo­
cidad; k, (Fig. 3­46A). Una reacción que muestre este
comportamiento se dice que tiene una cinética de primer
orden. La constante de la velocidad de una reacción de
primer orden tiene la dimensión de inverso del tiempo, o
sea «por segundo» o s­1. Puede calcularse el inverso de
la constante de la velocidad para obtener la constante de
tiempo, que tendrá la dimensión de tiempo. Así; una
ecuación de primer orden con una tasa constante de
.1 O· s" 1 tiene una constante de tiempo de 0.1 segundos.
En una reacción con dos sustratos, A y B, en presencia
de un exceso del enzima, y en la que el producto, P, no se
acumule, la tasa de desaparición de A será proporcional
al producto [A][B].
k ko=-
A+ 8­­,P
Producto P
Figura 3-45. La concentración de sustrato A y de producto P
cambian de formo no lineal en In r eacción A __, P.
MOLÉCULAS, ENERGÍA Y BIOSÍNTESIS 79
Esta reacción se produce con una cinética de segundo
orden. Hay que destacar que el orden de la reacción no
está determinado por el número de especies de sustratos
que participan en la reacción, sino por el número de es­
pecies presentes en concentraciones iimitantes de la velo-
cidad. Así, si B estuviese presente en una cantidad mu­
cho mayor que A, la reacción A + B ­+ P sería de
primer orden, pues su velocidad sólo estaría limitada
por la concentración de un sustrato.
La velocidad de una reacción enzimática es indepen­
diente de las concentraciones de los sustratos si el enzima
está en cantidad limitan te y rodas las moléculas de enzi­
ma están formando complejos con el sustrato (es decir,
que el enzima está saturados. Este tipo de reacciones se
producen según una cinética de orden cero (Fig, 3­468).
La Figura 3­47 muestra las representaciones gráficas
de la velocidad inicial, v0, de una reacción enzimática
(S ­+ P) en función de la concentración de sustrato, [S],
a dos diferentes concentraciones del enzima. En los dos
niveles de enzima, la reacción es de primer orden (o sea,
v0 es proporcional a [S]) a concentraciones bajas del
sustrato. Sin embargo, a concentraciones de sustrato
mayores la reacción se hace de orden cero, porque todas
las moléculas del enzima esrán acomplejadas con sustra­
to: en esta situación, es la concentración del enzima, no
la del sustrato, la que limita v0. En la célula viva se pro­
ducen reacciones de todos los órdenes, así como reaccio­
nes de orden mixto.
La velocidad máxima de cualquier reacción enzimáti­
ca, V,0�,, se consigue cuando todas las moléculas del en­
A Primer orden
k __ 2.303 lag __E___
,- I' a-x
log-ª-
a- K
Unidades: mirr '
o
B Orden cero
X
x t
Unidades: mol • rnirr'
o
Figura 3-46. La representación gráfica revela el orden cinético
de las reacciones enzimáticas. En estas qráñcas, la x representa
la cantidad de sustrato A Que reacciona en el tiempo t. y a repre-
senta la cantidad inicial de A en el tiempo cero. La pendiente es
proporcional a la constante de la velocidad. IAI Debido a que la
reacción de primer orden tiene una cinética exponencial respec-
to del tiempo (véase la Figura 3-45), una r epresentaclón gráfica
de log (a/a - x) respecto de t da una línea recta. IBI Cuando la
concentración de enzima es limitante, In reacción presenta una
cinética de orden cero, produciendo una línea recta en las ¡iráfi-
cas de x respecto de t'.
80 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
zima que cataliza esa reacción están unidas al sustrato, o
saturado con él (esto es, cuando el sustrato está presente
en exceso y la concentración del enzima es limitantc de
la vclocidJI (Vig. J­47). Cada reacción enzimática tiene
una relación característica entre Ja Vm., . y la concentra­
t
ción de e zima. Aunque todos los enzimas pueden satu­
rarse, rm estran gran variación en la concentración de
-,
un sustrato­ ciado que les provoque la saturación. La
causa es que los enzimas difieren en la afinidad por sus
sustratos. Cuanto mayor sea la tendencia del enzima y
de su sustrato a formar un complejo, ES, mayor será el
porcentaje de enzima toral, E,, unido en forma de ES a
cualquier concentración dada del sustrato. AsL cuanto
mayor sea esta afinidad, menor concentración de sustra­
to se requerirá para saturar al enzima.
1 .a relación entre la cinética de una reacción cataliza­
da por enzima y la afinidad del enzima por el sustrato se
desarrolló a principios del siglo xx. La teoría general de
la acción y cinética enzimáticas fue propuesta por Leonor
M ichaclis y M aud L. Menten en 1913, y posteriormente
ampliada por George E. Briggs y John B. S. Haldanc, La
ecuación de Michaelis­Mentcn es la ecuación de la veloci­
dad de una reacción catalizada por un único enzima:
v,.,1i. LSJ
Vo = KM + [S]
en donde v0 es la velocidad inicial de la reacción a la
concentración de sustrato IS J, \lm," es la velocidad de la
reacción cuando el sustrato está en exceso. y la KM es la
constante de Michaelis­Mentcn. Consideremos el caso
especial en que v0 = \!"'"-" Sustituyendo o0, obtenernos
v.
ltl,1.lt V"'"' [S]
2 KM 1 (S]
­ ­ ­ ­ ­ ­ ­ ­ :..­ :.­;­.;­a.a­­­­­­
( E) atta
!El baja
f Concentración
KM de sustrato
Figura 3-47. Para una concentración dada de enzima, la veloci-
dad inicial. v0• de ta reacción S - aumenta linealmente al incro-
mentar la concentración de_ sustrato. Llega un momento en que
todo el enzima estará saturado, momento en que la [El será Iimi
tanta. La constante de Michaclis-Menten, KM, es igual a la con-
centración de sustrato a la que la velocidad de la reacción es la
mitad de la máxima. Las curvas en negro y rojo corresponden a
distintas concentraciones de enzima. Obsérvese que la KM es in-
dependiente de la concentración de enzima, [EL mientras que la
11,,,,, depende directamente de [EJ.
Dividiendo por V.,,., da
IS]
= --- (J-13)
2 K.,., + [SJ
Id redisponcr los términos. obtenemos
K�1 + 1 S.J = 2[SJ (3­14)
o
KM ­ [SJ (3-15)
Por lo tanto, la K�., es igual a la concentración de sustra­
to cuando la velocidad inicial de la reacción es la mitad
de la que sería si el sustrato estuviese presente a satura­
ción.
Por ello, la constante de Michaclis­Menten. KM (en
unidades de moles por lirro), depende de la afinidad del
enzima por un sustrato, Para un enzima y un sustrato
dados, K�.1 es igual a la concentración ele sustrato H la
que la reacción inicial sea 1/2 \/má,· Por inferencia, J,1 KM
representa la concentración de sustrato a la cual la mi­
tad de todo el enzima presente está combinado con el
sustrato en el CS: o sea, [C,]/íES] = 2. El valor de la
KM puede determinarse a partir de una representación
gráfica de 1)0 respecto de la [S], como muestra la Figu­
(3-11)
ra 3­47. Cuan lo mayor sen la afinidad entre un enzima y
su su. trato, menor será la KM de la interacción enzima-
sustrato. Dicho al revés, 1/KM es una medida de la afini­
dad del enzima por su sustrato. Como reflejan las gráfi­
cas para dos concentraciones de enzima de la Figura 3­47.
In KM es independiente: de la concentración del enzima,
mientras que la Vm"" es dependiente de ella.
La relación entre 1)0 y la concentrución de sustrato
descrita por la ecuación de Michaclis­Mcnten (ecua­
(3­12) ción 3­11) es una función hiperbólica, Por esta razón se
necesitan numerosos puntos para representar de forma
precisa 1;0 frente a la [S] como en la Figura 3­47. No
obstante, la ecuación de Michaelis­Mcntcn puede trans­
formarse algebraicamenie en la forma lineal denomina­
da ecuación de Lineweaver­Burk:
l K,\I 1
=- 1­­ (3-16)
Vo vm!a, [SI vm,"
De esta ecuación se deduce, q uc u na gráfica de 1 /r,0 res­
pecto de 1/(S] dará una linea recta con una pendiente de
K1,,./V,,,,h y que intcrsecciona en l/\1111,. con el eje vertical
y en -1/KM al eje horizontal (Fig. 3­48). Debido a la
naturaleza rcctilinea, sólo se necesitan clos puntos expe­
rimentales (es decir. v0 a dos valores de (S] l para cous­
truir una gráfica de Lincweaver­Burk, La Vma, y la K\1
pueden determinarse ele las dos intersecciones.
Debe señalarse que el análisis de Michaelis­Mcnten
no se limita a las interacciones enzima­sustrato, sino que
puede aplicarse (y se hace a menudo) a cualquier sistema
que siga una cinética de saturación hiperbólica como la
representada en la Figura '.\­47.

Inhibición enzimática
Determinadas moléculas pueden inhibir la actividad de
la mayor parte de los enzimas y, como veremos en la
próxima sección, las células vivas utilizan esta propie­
dad de los enzimas como un sistema de controlar las
reacciones enzimáticas. Mediante el estudio de los meca­
nismos moleculares de la inhibición, utilizando tanto in­
hibidores fisiológicos como los que no lo son, los enzi-
mólogos han descubierto detalles importantes del centro
activo de los enzimas
.
v' del mecanismo de la acción enzi­
mática. El efecto terapéutico de muchos medicamentos
se basa en su capacidad para inhibir enzimas específicos,
con lo que bloquean procesos metabólicos o lisio lógicos
implicados en la enfermedad. Por ejemplo, la saralasina
bloquea la acción del enzima angiotensina II y colabora
a disminuir la presión sanguínea en personas con hiper­
tensión severa.
Los enzimas pueden envenenarse con agentes que for­
men enlaces covalentes muy estables con los grupos del
interior del centro activo, interfiriendo así en la forma­
ción del complejo enzima­sustrato, ES. Estos agentes
pueden producir una inhibición irreversible, que no pue­
de desaparecer eliminando el inhibidor; o sea, el enzima
se ha vuelto inactivo de forma permanente. Sin embar­
go, tienen mucho más interés para la función celular
normal dos clases de inhibición reversible:
• La inhibici4'.m competitiva está causada por sustancias
que, al parecer, reaccionan directamente con el centro
activo del enzima; puede revertirse su acción con un
aumento de la concentración de sustrato.
• La inhibición 110 competitiva se debe a sustancias que
se unen a una parte o partes del enzima distintas del
centro activo; no puede revertirse por un aumento de
la concentración de sustrato, pero sí por dilución o eli­
minación del competidor.
. K
Pendiente = V "'
,ná)(
., 1 representación de Lineweaver­Burk (Fig. 3­50B). En
1 nrerseccion» V
rn,!i)(
1
Intersección= ­ 1
M
.K
[SI
Figura 3-48. En la gráfica de Lineweaver-Burk, el inverso de la
velocidad de reacción, 1/v0, se representa en función del inverso
de la concentración de sustrato, 1/[S]. En una reacción enzimáti-
ca con una cinética de primer orden, la linea intersecciona con el
eje horizontal en -1/KM, y al eje vertical en 1/11,,,,,.
MOLÉCULAS, ENERGÍA Y BJOSÍNTESIS 81
Muchos inhibidores competitivos son análogos del
sustrato y compiten con esas moléculas de sustrato por
el centro activo (Fig. 3­49). Por ello, el aumentar la con­
centración del sustrato reduce la probabilidad de unión
del inhibidor y determina que la inhibición sea reversi­
ble. Debido a que los inhibidores no competitivos no se
unen al centro activo, su estructura química normal­
mente es diferente de la del sustrato. Además, como un
inhibidor no competitivo y el sustrato interaccionan con
partes diferentes del enzima, no compiten directamente;
por ello la inhibición no competitiva no puede revertirse
por un aumento de la concentración de sustrato. Corno
muestra la Figura 3­50, la inhibición competitiva y la no
com petiti va son fáciles de distinguir en las gráficas de
Lineweaver­Burk. Aunque ambos tipos de inhibidores
incrementan la pendiente en una representación de Li­
neweaver­Burk, reflejando la disminución de la veloci­
dad de la reacción, tienen efectos opuestos en los puntos
de intersección.
Un inhibidor competitivo no cambia la V0"ü de una
reacción enzimática; esto es, cuando se extrapola a una
concentración de sustrato de forma que li[S] se apro­
xime a O, el sustrato desplazará del enzima a todas las
moléculas de inhibidor. Por ello la intersección con el
eje l/v0 de una representación de Lineweaver­Burk,
que es igual a I/V111á,• no es afectada por un inhibidor
competitivo (véase la Fig. 3­50A). Por otro lado, la in­
tersección con el eje 1/[S] estará desplazada. hacia una
mayor concentración de sustrato en presencia de un in­
hibidor competitivo. Es decir, la concentración de sus­
trato ha de aumentar en presencia de un inhibidor
competitivo para mantener la mitad de las moléculas
del enzima acomplejadas en todo momento con el sus­
trato. De hecho, un inhibidor competitivo aumenta la
KM «aparente» en proporción a la concentración de in­
hibidor, [I], y a la constante de disociación, K1, del
complejo inhibidor­enzima. Al aumentar la [I] o dismi­
nuir la K., o ambos efectos a la vez (o sea, cuanto más
firme sea la unión del inhibidor al enzima), más se des­
plazará la intersección con el eje 1/[S] hacia un valor
de [S] superior.
Debido a que un inhibidor no competitivo no interfie­
re directamente con la unión del sustrato a un enzima,
no tiene efecto en la intersección con el eje .lí[S] de una
otras palabras, la K"' de un enzima no es modificada por
un inhibidor no competitivo. Por otro lado, el valor de
la Vmax, , N1e
:1 viene indicado por la intersección con el eje
1/v0, aumenta en proporción con la. [I] y con la K1. Este
efecto se debe a la incapacidad del sustrato a elevadas
concentraciones para desplazar al inhibidor no competi­
tivo de su lugar de unión al enzima. Por ello el efecto
cinético de un inhibidor no competitivo es reducir lapo­
tencia catalítica, o número de recambio, de un enzima.
No sorprende pues, que la KM de un enzima no se vea
modificada por la adición de u.n inhibidor no competiti­
vo, pues como ya se ha indicado, la KM es independiente
de la concentración del enzima.
82 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .. '

Centro activo A Inhibición competitiva

/ t

'
Pendiente de la reacción [I]
inhibida

Enzima Sustrato lnhibidor

competitivo

Sin i nhibidor
Pendiente = V.n(I)(
KM

1
Intersección = (SI

Figura 3-49. La unión de un inhibidor competitivo con el centro

activo de un enzima interñere en su unión con el sustrato. Sin em-
bargo, si se aumenta la concentración de sustrato, éste puede des-
plazar a las moléculas del inhibidor que se habían unido. Por ello,
la inhibición competitiva es reversible. Las pequeñas flechas rojas
indican tas concentraciones relativas de sustrato y de inhibidor.

REGULACIÓN DE REACCIONES B Inhibición no competitiva

[I)

METABÓLICAS

Sin ninguna regulación ele las velocidades de las reaccio­

nes, el metabolismo celular no estaría. coordinado y diri­
gido. El crecimiento, la diferenciación y el mantenirnien­
Lo serían imposibles, por no mencionar las sutiles
respuestas compensatorias homeostáticas de la máquina
biológica al estrés impuesto desde el exterior, La mayor
parte del control metabólico se ejerce vía mecanismos
Sin inhibidor
Pendiente· = :M (!)�)(

que regulan la cantidad o la actividad de los distintos

enzimas que catalizan prácticamente todas las reaccio­ Intersección=
1
V,,,., \
l 1 + (IJ)
K,
nes bioquímicas. A continuación se describen los princi­
pales tipos de control metabólico. 1
Tsi

Control de la síntesis de enzimas Figura 3-50. Los inhibidores competitivos y no competitivos

La cantidad de un enzima presente en una célula es lun-
oión de la tasa de síntesis y de la tasa de degradación de
las moléculas enzimáticas. Como se ha discutido ante­
riormcnte, los enzimas se desnaturalizan al aumentar la
temperatura y son destruidos por la acción de enzimas
proteoliticos. La tasa de síntesis de un enzima puede Li-
mitarse en condiciones especiales (p. ej., como una dieta
inadecuada o la falla de disponibilidad de los aminoáci­
dos precursores) que generalmente reducen la síntesis
proteica. Ahora bien, normalmente la tasa de síntesis de
un enzima en particular se regula a. nivel molecular por
la modulación de la velocidad de transcripción del gen
que lo codifica.
producen efectos diferentes en tas gráficas de Lineweaver-Burk.
(Al un inhibidor competitivo aumenta la K,,,, pero no afecta a la
Vm•• de un enzima. tBI Por el contrario, un inhibidor no competiti-
vo no produce cambio en la KM. pero disminuye la V:ok Cinética-
mente, es similar a una disminución de la concentración de enzi-
ma. (l).concentración de inhibidor; lSJ. concentración de sustrato:
K,, constante de disociación del complejo inhibidor-enz.ima.
La Figura 3­51 muestra el modelo del control de la
síntesis de enzimas, que fue propuesto por Francois Ja­
cob y Jacques Monod en 1961 basado en estudios en
bacterias. Encontraron que los genes estructurales que
codifican algunos enzimas implicados en determinadas
vías metabólicas se localizan juntos en el ADN de la
célula. Junto al primero de estos genes unidos hay una

cadena corta de ADN denominada operador. Un ope­
rador y sus genes estructurales asociados constituyen un
operen. La transcripción de los genes estructurales en
ARNm, necesaria para la síntesis enzimática, se puede
«detener» o «poner en marcha» por la acción de una
¡,roteina represora, codificada por un gen regulador. La
unión de la proteína represora con el operador controla
la transcripción de todos los genes estructurales asocia­
dos. Por ello la síntesis de enzimas codificada por el ope­
rón está controlada colectivamente por la interacción de
la proteína represora con el operador. En el caso de al­
gunos operones, la combinación de la proteína represo­
ra con determinada molécula orgánica pequeña, denomi­
nada inductor, hace que no pueda unirse al operador
(como muestra la Fig. 3­51). En otros opcrones, la proteí­
na represora sólo puede unirse al operador si éste se aso­
cia con una molécula pequeña denominada cerrepresor,
Algunas células sintetizan determinados enzimas (como
los implicados en el metabolismo de la lactosa) sólo tras
su exposición al sustrato inicial ele la vía de reacción (o a
moléculas relacionadas), un fenómeno denominado in­
ducción enximárica. Puede explicarse este fenómeno en
términos del modelo de Jacob y Monod. En un caso así,
el sustrato actúa como un inductor, y la unión del sus­
trato a la proteína represora elimina la represión de los
genes estructurales. Como resultado, las células empie­
zan a sintetizar los enzimas necesarios para mcrabolizar
el sustrato, que anteriormente estaban reprimidos. Este
proceso es un ejemplo de economía metabólica, los enzi­
mas induciblcs se sintetizan sólo si se necesitan (es decir,
cuando está presente el sustrato).
La síntesis de los enzimas que intervienen en una se­
cuencia de reacciones biosintéticas puede regularse por
los productos finales de la vía. En esta. situación, la pro­
teína represora, denominada aporreprcsor, permanece
inactiva hasta que se combina con una pequeña molécu­
la orgánica. (el correpresor) producido al final de una se­
cuencia de reacción biosintética. La unión del represor
Represor inactivo
; yacentes. En presencia de un inductor, se elimina
'""""º'
Represor 1\1\/\1\J\/\
/
.-.ji�---------�------.;.------+-------.-------..
� SG' SG2
..,.
'-� �'-���--,�����-/
Gen Operador Genes
regulador estructurales
Operón
MOLÉCULAS, ENERGÍA Y BIOSÍNTESIS 83
activo (o sea, el complejo aporrepresor­correpresor) con
el operador impide la transcripción de los genes estruc­
turales del operón, y disminuye la síntesis de lodos de
todos los enzimas codificados. Algunas veces los genes
de todos los enzimas de una reacción de biosintesis no
están localizados juntos en un operón. Pero si se regula
la síntesis de un enzima que actúa al principio de la vía
biosintética, pues se mantendrá bajo control el funciona­
miento completo de la vía sintética y la tasa de forma­
ción de su producto final. Esto es otro ejemplo de econo­
mía metabólica. Si empieza a acumularse el producto
final por cualquier razón, como la reducción de su incor­
poración a estructuras de la célula, se en lentece la vía de
­
síntesis entera, disminuvendo la velocidad de. síntesis del
enzima regulado (Fig. 3­52).
Las células poseen otros mecanismos, además de los
citados, para regular la transcripción de genes que codi­
fican a los enzimas, y con ello, la cantidad presente de
diversos enzimas. Todos estos mecanismos tienen grao
importancia en el desarrollo de un organismo. Cada cé­
lula somática de un organismo contiene la misma infor­
mación codificada en su ADN. Distintos tipos celulares
de diferentes tejidos contienen, por el contrario, cantida­
des muy diferentes de los distintos enzimas codificados
por el material genético. Es evidente que eu un tejido
dado algunos genes están activos, mientras que otros no
lo están. Esta situación puede producirse, en pacte, por
los mecanismos de la inducción y represión enzimática
en respuesta a diferencias del medio químico local de las
distintas células y tejidos del organismo en desarrollo,
Control de la actividad enzimática
La actividad de algunos enzimas se puede regular me­
diante moléculas moduladoras (reguladoras), que interac-
cionan con una parte de la molécula de enzima distinta
del centro activo. Esta parte del enzima, denominada
Figura 3­51. El modelo del operón de Jacob­
Monod puede explicar la inducción y represión
de la síntesis de enzima. Como se ilustra aquí, la
unión de la proteína represora al operador impi-
de la transcripción de los genes estructurales ad·
esta represión y se forman los onzunas codifica-
dos por los genes estructurales. En algunos ope­
rones el represor es inactivo hasta que se com-
bi na con u na pequeña molécula de correpresor.
En ese caso, la síntesis de enzima se lleva a cabo
mientras que la concentración del correpresor
sea baja. Véase el texto para una discusión más
completa. [Adaprado de Goldsby, 1967 .1
../
84 PRINCIPIOS DE FISIOLOGÍA
centro alostérice, puede unirse a una molécula modula­
dora, provocando un cambio de la estructura terciaria
del enzima que modifica la conformación del centro acti­
vo (Fig. 3­5)). Como resultado, disminuye o aumenta la
afinidad del enzima por su sustrato. Los enzimas regula­
dos alostéricamente operan en puntos clave de las vías
metabólicas, y la modulación de sus actividades desem­
peña un gran papel en la regulación de estas vías. Obser­
varemos con mayor detalle varios de estos mecanismos
de control de la actividad enzimática.
Inhibición por producto final
(Retroinhibicián}
Algunas vías metabólicas tienen mecanismos incorpora­
dos para regular la velocidad de· la secuencia de reac­
ción, independientes de las cantidades presentes de enzi­
mas. En estas vías normalmente es el primer enzima de
la secuencia el que actúa como un enzima regulador.
Frecuentemente la interacción del producto final de la
vía con este enzima inhibe su actividad (Fig, 3­54). Dicha
inhibición por producto final limita la tasa de acumula­
ción de ese producto disminuyendo la vía entera. En
muchos casos, un enzima regulador cataliza una reac­
ción que es virtualmente irreversible en las condiciones
de la célula; por esta razón, la acumulación del producto
no cnlentcce la tasa de la reacción.
A s
8 Síntesis de E, inhíbída
E, E;,
A--.. B e
B &
Cor represor
e
­o
­
u
�
"'
e
oJ)
u
e
o
(.)
Tiempo
Figura 3-52. El prooucto final de una vía de síntesis puede tener
un efecto represor en la síntesis de un enzima inicial de la via. (Al
Ejemplo de un ciclo de retroalimentación negativa en el que ta
síntesis de E, está reprimida por la acumulación de un producto
(C) varios pasos más adelante en la vía. El producto final actúa
corno un correpresor que se une a la proteína represora (o apo-
rrepresor). t.a unión de este complejo al gen para E, inhibe la
transcripción del gen. (BJ Evolución en función del tiempo de E, y
concentración del correpresor. El nivel de E, disminuye a medida
que o u menta el producto final correpresor.
Se ha observado que la interacción de la molécula
del producto final de una vía biosintética con un enzi­
ma regulador se produce en un centro alosrérico. Por
ello el producto lío al actúa como un inhibidor alostéri­
co (véase la Fig. 3­53A). Un ejemplo de este mecanismo
de control se da en la biosíntcsis de la carecolamina
noradrenalina, que actúa corno neurotransmisor y
como hormona. Elevadas concentraciones de la cateco­
lamina inhiben al enzima tirosina hidroxilasa, un enzi­
ma esencial de la secuencia de reacciones de producción
de la noradrcnalina,
Activación enzimática
El requerimiento de cofactores que tienen algunos enzi­
mas proporciona a la célula otro sistema de regular
la actividad enzimática, y con ello, la velocidad de las
reacciones bioquímicas. Como se ha indicado anterior­
mente, el caz+ y algunos otros cationes actúan como
cofactores de diversos enzimas (véase el Cuadro 3­9).
En el caso de algunos enzimas, los cationes coíactores
parecen actuar como activadores alosréricos (véase la
Fig. 3­538). Sin embargo, ningún mecanismo único sirve
para explicar el efecto de iones cofactores en la actividad
enzimática.
La concentración libre intracelular de algunos iones
depende de la difusión y del transporte activo a través
A Inhibición alostérica
s T
B Activación aíostérica
s
••• s
.a. A
Figura 3-53. Las interacciones alostéricas pueden producir tan-
to activación como inhibición de la actividad enzimática. (Al La
unión de una molécula de inhibidor atostérico (1) a un centro alos-
térico puede alterar indirectamente la configuración del centro
activo de un enzima (El, produciendo la inactivación del enzima.
Los inhibidores no competitivos actúan por este mecanismo. (B)
Por el contrario. la unión de un activador atosténco (A) puede
modificar el centro activo, de manera que el enzima se convierta
en catatñícamente activo,

. . . . . . . ...... . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . .. . . . . . .
plo, la afinidad hemoglobina­oxígeno se reduce por los
siguientes factores:
• Temperatura elevada.
• Unión de fosfatos orgánicos incluyendo 2,3­difosfogli­
cerato (DPG), ATP o GTP.
• Descenso en el pH (incremento en la concentración de
H 4 ).
• Aumento en C02.
La molécula de hemoglobina tiene una afinidad mu­
cho mayor por los Jigandos cuando está en el estado T
desoxigenada.
Los aumentos en la concentración de H + (descenso de
pH) causan una reducción en la afinidad de la hemoglo­
bina por el oxígeno, un fenómeno denominado efecto
Bohr, o desplazamiento Bohr (Fig. 13­4). El dióxido de
carbono reacciona con el agua para formar ácido carbó­
nico y con los grupos ­ NH2 de las proteínas plasmáti­
cas y de la hemoglobina formando compuestos carbárni­
cos. Por tanto, un incremento en la P co, causa una
reducción de la afinidad de la hemoglobina por el oxíge­
no de dos­maneras: disminuyendo el pH sanguíneo (efec­
to Bohr) y facilitando la combinación directa del C02
con la hemoglobina para formar compuestos carbárni­
cos. Por consiguiente, cuando el C02 entra en la sangre
a nivel de los tejidos facilita la descarga de 02 de la he­
moglobina, mientras que cuando el C02 deja la sangre
en el pulmón o en las branquias, facilita la captación de
02 por la sangre. La curva de disociación de oxigeno de
la mioglobina, a diferencia de la de la hemoglobina, es
relativamente insensible a cambios en el pH.
Las hemocianinas del cangrejo de Dungcness, Cancer
magíster, y de otros invertebrados presentan efecto Bohr
100 • Arterial
80
i
o 60
"'
"O
e
·O
.,
·� 40
:::,
(f)
20
P02 (mm Hg)
Figura 13-4. La afinidad de la hemoglobina por el oxígeno de-
crece con el descenso de pH. A causa de este fenómeno, llamado
efecto Bohr, los cambios en la Peo2 sanguíneo, que influye en el
pH de la sangre, afecta indirectamente a la afinidad de la hemo-
globina por el oxígeno. Se muestran las curvas de disociación
experimentales del oxígeno de sangre humana a tres valores de
pH. Se indican los valores de P0, de la sangre venosa mezclada y
de la sangre arterial. [Adaptado de Bartels, 1971.J
570 INTEGRACIÓN DE SISTEMAS FISIOLÓGICOS
. . .. .............
75 pCO¡
Curva (mm Hg) pH
�
e 1 6.23 7.36
•O
·¡:; 2 3.98 7.50
� 3 1.58 7.75
"' 50
E 4 0.83 7.94
"'
(f)
T= 8ºC
25
P (mm Hg)
O¡
Figura 13-5. Algunas hemocianinas, al igual que la hemoglobi-
na, presentan un desplazamiento Bohr. Las curvas de disociación
del oxígeno de la sangre para el cangrejo Cancer magíster mos-
tradas aquí indican que la hemocianina de este cangrejo presenta
un desplazamiento de Bohr. [Datos inéditos facilitados por D. G.
McDonald.)
con una curva similar a la de la hemoglobina (Fig. 13­5).
Pero las hemocianinas de varios gasterópodos y la de la
cacerola de las Molucas, Limulus, muestran una mayor
afinidad por el oxígeno al disminuir el pH. Este fenóme­
no denominado efecto Bohr inverso, puede facilitar la
captación de oxígeno durante períodos de baja disponi­
bilidad de oxígeno cuando se producen prolongadas re­
ducciones en el pH sanguíneo en estos animales.
Como se ha señalado anteriormente, la unión de fosfa­
tos orgánicos a la hemoglobina reduce su afinidad por el
oxígeno en la mayor parte de vertebrados, excepto en las
de cicióstomos, cocodrilos y rumiantes. El fosfato orgá­
nico intraeritrocitario dominante difiere según las espe­
cies. Por ejemplo, los eritrocitos de los mamíferos con­
tienen grandes niveles de 2,3­difosfoglicerato (DPG); en
efecto, la hemoglobina y el DPG se encuentran a con­
centraciones casi equimolares en los eritrocitos huma­
nos. El DPG se une a restos de aminoácidos específicos
en las cadenas /3 de la desoxihemoglobina, pero la unión
del DPG disminuye al aumentar el pH. La reducción en
los niveles de 02 en sangre, o un aumento de pH, o un
descenso en la concentración de hemoglobina en sangre
van acompañados de un incremento en los niveles de
DPG. La ascensión a gran altitud ocasiona disminución
en los niveles de 02 en sangre, puesto que la presión
barométrica y la presión parcial de 02 en el aire se redu­
cen con la altitud. El aumento resultante en el nivel de
DPG que se produce como respuesta a la altitud se com­
pleta a las 24 horas, alcanzándose la mitad del incremen­
to final en un tiempo aproximado de 6 h. A altitudes de
3000 m, hay un incremento de un 10 % sobre la concen­
tración de DPG a nivel del mar. Los bajos niveles de 02
en altitud causan un descenso en los niveles de 02 en
574 INTEGRACIÓN DE SISTEMAS FISIOLÓGICOS

mente que los iones HC03. En los tejidos, el C02 entra
en la sangre y es hidratado para formar iones bicarboria­
(o o bien reacciona con los grupos ­ NH2 de la hemo­
globina y otras proteínas para formar compuestos car­
bámicos. Se da el proceso inverso cuando se descarga el
C02 de la sangre. El mayor cambio se da en las concen­
I raciones de HCO;; los cambios en los niveles de C02 y
de compuestos carbámicos representan normalmente
menos del 20 % de la eliminación de dióxido de carbono
total.
La reacción del CO 2 con OH- para formar HC03 es
lenta y si no está catalizada precisa del transcurso de
varios segundos. Pero en presencia del enzima anhidrasa
carbónica, esta reacción alcanza el equilibrio en un tiem­
po muy inferior a un segundo. Aunque el plasma tiene
un contenido total de CO, más elevado que los eritroci­
tos, la mayor parle del C02 que entra y sale del plasma
lo hace a través de los eritrocitos, ya que la anhidrasa
carbónica se encuentra en el eritrocito pero no en el
plasma. Por consiguiente, la formación de iones HC03
en los tejidos y de C02 en los pulmones, se produce pre­
dominantemente en los eritrocitos; una vez formados los
iones HC03 y C02 subsiguicntemcnte son transferidos
hacia o desde el plasma.
Al entrar en la sangre desde los tejidos, el C02 difunde ,
al interior de los eritrocitos, y se forma rápidamente
HC03 en presencia del enzima anhidrasa carbónica
(Fig. 13­1 IA}. Conforme aumentan los niveles de HC03
en el interior del eritrocito, estos iones se mueven desde
el interior ele la célula hacia el plasma. El equilibrio eléc­
trico en el interior de las células se mantiene por un in­
tercambio de aniones; al abandonar los iones HC03 el
interior de la célula, se produce una entrada neta de
iones cr desde el plasma, un proceso denominado des­

A
TEJIDO
Pared
=1l============================l=del capilar

H2 0 Plasma

l
H20 :
cr
� (Desplazamiento del cloruro}
H'
... (rápida) 1

1
C02+ OH- � HC03+1.f'°
(Anhi_dr_asa
carbónical W + HbO; ======.. HHb + �
C02 + HbOi ±=====:; HbCOi + 02 ­­­­�­­­­­­­'
(Grupos carba minos de la hemoglobina)

ERITROCITO

Figura 13­11, La mayor parte del dióxido de carbono que entra

C02 < • • HC03 en la sangre desde los tejidos y que sale de la sangre a los pulmo-

Epitelio pulmonar t Difusión

nes pasa a través de los eritrocitos. (A) El dióxido de carbono pro-
y endotelio I facilitada
ducido en los tejidos forma bicarbonato rápidamente (HC03) en
los eritrocitos debido a que la reacción de hidratación está catali-
HC03 zada por la anhidrasa carbónica presente en el citosol. El bicarbo-
nato deja el eritrocito al ser intercambiado por cloruro, y los proto-
nes excedentes se unen a la hemoglobina desoxigenada (Hb). (B)
HCO; Plasma
Estas reacciones se invierten en los pulmones. El oxígeno que pe-
netra en el interior del eritrocito desplaza los protones de la Hb y el
dióxido de carbono pasa al plasma. La anhidrasa carbónica (indi-
cada por círculos rellenos} en la membrana de las células endote-
/OW+C02 liales del pulmón convierte parte del bicarbonato del plasma a
H20 dióxido de carbono. El movimiento del dióxido ele carbono a tra-
"' H' ­t­ Hb02 ---HHb+02 vés de la superficie respiratoria está aumentado por la difusión del
bicarbonato y su reconversión a dióxido de carbono en la cara ex-
ERITROCITO terna, un proceso denominado difusión facilitada.