Manual 1

HOSPITAL REGIONAL DOCENTE CLINICO QUIRURGICO
CODIGO: DPCYAP-AI / MTI-001

“DANIEL ALCIDES CARRION”
DEPARTAMENTO PATOLOGIA CLINICA Y ANATOMIA PATOLOGICA – AREA DE
INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS PÁGINA: 1 de 145
HOSPITAL REGIONAL DOCENTE CLINICO

QUIRURGICO “DANIEL ALCIDES CARRION”
DEPARTAMENTO DE PATOLOGIA CLINICA Y

ANATOMIA PATOLOGICA
AREA DE INMUNOLOGIA
MANUAL DE TECNICAS INMUNOLOGICAS
Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:
Coordinador de Inmunología Coordinadora del SGC Jefe de Laboratorio

Documento para uso excl considera copia no controlada a toda copia impresa que no lleve el sello de COPIA CONTROLADA
DEPARTAMENTO PATOLOGIA CLINICA Y ANATOMIA PATOLOGICA
AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
BASE LEGAL
 Ley N° 27444, Ley del Procedimiento Administrativo General.

 Ley N° 27657, Ley del Ministerio de Salud.
 Ley N° 29158, Ley Orgánica del Poder Ejecutivo. Decreto Supremo N° 013-2002-SA, que
aprueba el Reglamento de la Ley del Ministerio de Salud.
 Decreto Supremo N° 013-2006-SA, que aprueba el Reglamento de Establecimientos de Salud y
Servicios Médicos de Apoyo.
 Resolución Ministerial N° 588-2005/MINSA que aprueba los Listados de Equipos Biomédicos
Básicos para Establecimientos de Salud.
 Resolución Ministerial N° 970-2005/MINSA, que aprueba la NTS N° 038- MINSA/DGFSP-V.01
Norma Técnica de Salud para Proyectos de Arquitectura, Equipamiento y Mobiliario de
Establecimientos de Salud del Primer Nivel de Atención.
 Resolución Ministerial N° 859-2006/MINSA que modifica la R.M. N° 588-2005/MINSA
adicionando Equipamiento Básico.
Coordinador de Inmunología Coordinadora del SGC Jefe de Departamento

Documento para uso excel considera copia no controlada a toda copia impresa que no lleve el sello de COPIA CONTROLADA
AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
INDICE PÁGINA
Contenido 2
Introducción 4
Criterios de pre validación 5
Análisis de Inmunología Básica
Prueba Rápida Antígeno de Superficie (Hepatitis B) 8

Prueba Rápida Anti Core (Hepatitis B) 10
Prueba Rápido Hepatitis C 12
Prueba Rápida HIV 15
Prueba Rápida Sífilis 18
Prueba Rápida Chlamydia 20
Prueba Rápida para Dengue 22
Proteína C Reactiva 25
Factor Reumatoide 27
Aglutinaciones 29
Regina Plasmática Rápida (RPR) 32
Proteína C Reactiva – Cuantitativa 34
Complemento C4 36
Complemento C3 38
Factor Reumatoide Cuantitativo 40
Microalbuminuria 42
Inmunoglobulina IgA 44
Inmunoglobulina IgG 46
Inmunoglobulina IgM 48
Análisis de Inmunología Especial
CMIA Perfil de Hormonas Tiroideas - TSH 52

CMIA Perfil de Hormonas Tiroideas – T3 55
CMIA Perfil de Hormonas Tiroideas – T4LIBRE 58
ELFA HIV 63
ELFA Anti- Core 67
ELFA Antígeno de Superficie 70
ELFA Hepatitis C 73
ELFA Perfil de Hormonas Femeninas- PROLACTINA 76
ELFA Perfil de Hormonas Femeninas- FSH 79
ELFA Perfil de Hormonas Femeninas- LH 82

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
INDICE PÁGINA
ELFA Perfil de Hormonas Femeninas-ESTRADIOL 84
ELFA Antígeno Prostático Total 88
ELFA Antígeno Prostático Libre 91
ELFA Antígeno Carcino Embrionario (CEA) 94
ELFA CA - 125 97
ELFA Hormona Gonadotropina Coriónica (β-HCG) 100
ELFA Procalcitonina 103
ELFA Troponina 106
LIA TORCH IgM/ IgG 108

LIA ANA/ENA 114
LIA ANCA 118
LIA VIH 121
LIA SIFILIS 125
ELISA TORCH IgG 130

ELISA TORCH IgM 135
ELISA Helicobacter Pylori IgG e IgM 140
ELISA HTLV I-II (Virus Linfotrópico Humano) 143

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
INTRODUCCIÓN
La Inmunología es la ciencia que estudia los procesos moleculares y celulares propios del sistema
inmune en su acción defensiva. El sistema inmune se ubica en los órganos linfoides entre los que
destacan el timo, médula ósea, bazo, ganglios linfáticos y tejidos linfoides asociados a mucosas. En
estos órganos es donde se agrupan las células inmunocompetentes, entre las que destacan los
linfocitos, monocitos y células dendríticas. A su vez las células inmunocompetentes interactúan entre
sí y con las sustancias extrañas (antígenos) a través de múltiples moléculas, como son las
inmunoglobulinas (anticuerpos), citocinas, sistema de complemento, moléculas de histocompatibilidad
y de adherencia y otras.
El área de Inmunología es responsable de las pruebas asistenciales para la prevención, diagnóstico y

seguimiento de las enfermedades de origen inmunológico. Aplicando para ello los últimos avances
científicos y un amplio espectro de técnicas avanzadas de alta complejidad
El presente manual será de mucha utilidad como recurso informativo en el área de Inmunología. El
aspecto valioso de la información es que tiene un enfoque actual de los procesos habituales del área
de Inmunología como la tendencia tecnológica de la automatización, lo que permite enfrentar el reto
de manejar pruebas más sensibles, específicas y efectivas en el monitoreo de la salud y la
enfermedad. Además, la posibilidad de otorgar resultados a tiempo y confiables

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
CRITERIOS DE PRE VALIDACIÓN
Tener en cuenta los criterios de pre-validación antes de reportar los resultados, estos criterios
se aplican para todas las pruebas del área de Inmunología.
Verificar y cumplir con los controles de los reactivos.

Mantenimiento Preventivo de Equipos de Laboratorio.
 Manual de Técnicas de Inmunología.
 Revisar la correlación clínica de los resultados.
 Revisar el reporte histórico del paciente en el EXCEL.
Revisar los antecedentes del paciente en la orden de proceso o caso contrario en la
ficha de datos del paciente.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
PRUEBAS DE
INMUNOLOGIA BÁSICA

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
PRUEBA RÁPIDA PARA ANTIGENO DE SUPERFICIE (Hepatitis B)
1. MARCADOR:
ANTIGENO DE SUPERFICIE
2. MÉTODO:
INMUNOCROMATOGRAFIA
3. FUNDAMENTO:
El casete de prueba contiene una tira de membrana que está pre-impregnada con anticuerpos
de captura de ratones monoclonales anti- HBs en la región de la banda de prueba. El
conjugado de oro coloidal de ratones monoclonales anti-HBs y la muestra de suero se mueve
cromatográficamente a lo largo de la membrana a la región (T) y forma una línea visible como
una forma compleja de partículas de oro de anticuerpo- antígeno- anticuerpo.
4. TIPO DE MUESTRA:
Suero o Plasma
5. MATERIALES:
 Contenedor para desechos peligrosos desde el punto de vista biológico.
 Puntas estériles
Cronometro.
Dispositivo de prueba (casete)
Micropipetas de 20- 200 ul.
Gradilla
Guantes
6. PROCEDIMIENTO:
1º. Remueva el dispositivo de prueba de la bolsa de papel de aluminio y colóquelo sobre

una superficie plana y seca.
2º. Añada 100ul de la muestra en el pozo de muestra
3º. Interpretar los resultados a los 20 minutos.
7. Interpretación:
1. Una banda de color aparecerá en la sección izquierda de la ventana de resultados

para mostrar que la prueba está funcionando apropiadamente.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
Esta banda es la banda de control.

2. La sección derecha de la ventana de resultados indica los resultados de la prueba.
Si aparece otra banda de color en la sección derecha de la ventana de resultados,
esta es la banda de prueba.
a. RESULTADO NEGATIVO: La presencia de una sola banda (C) dentro de la
ventana de resultados negativo.
b. RESULTADO POSITIVO: La presencia de dos bandas de color “T” y “C”
dentro de la ventana de resultados, sin importar cual aparece primero
indica un resultado positivo.
8. REPORTE:
POSITIVO = REACTIVO
NEGATIVO = NO REACTIVO
9. CONTROL DE CALIDAD:
Control Interno: Esta prueba contiene un control incluido, la banda C, esta se

desarrolla después de adicionar la muestra. De lo contrario, revise el procedimiento y
repita la prueba con un nuevo dispositivo.
Control Externo: las buenas prácticas de laboratorio recomiendan el uso de controles

externos, positivos y negativos, para asegurar el funcionamiento adecuado de la
prueba, particularmente en las siguientes circunstancias:
a) Cuando un Nuevo operador utiliza el kit, antes de que procese muestras.
b) Cuando se inicia un nuevo kit.
c) Un nuevo envió de kits es utilizado.
d) Cuando la Temperatura de almacenamiento se sale del rango de 2°C – 30°C
e) Las temperatura del sitio de procesamiento esta por fuera de 15 °C- 30°C
f) Investigar la causa de resultados no válidos repetidos.
10. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

Inserto del producto

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
PRUEBA RÁPIDA ANTI CORE (HEPATITIS B)
1. MARCADOR:
 HEPATITIS B CORE
2. MÉTODO:
 INMUNOCROMATOGRAFIA
3. FUNDAMENTO:
La membrana es pre-recubierta con anticuerpos anti-HBc en la zona de la prueba (T). Durante

la prueba, la muestra de suero o plasma reacciona con el conjugado de oro colidal HBcAg. La
mezcla migra hacia arriba en la membrana cromatograficamente por acción capilar y el anti-
HBc en suero competirá con anticuerpos anti- HBc en la línea T.
4. TIPO DE MUESTRA:
 Suero o Plasma
5. MATERIALES:
 Contenedor para desechos peligrosos desde el punto de vista biológico.
 Puntas estériles
 Cronometro.
 Dispositivo de prueba (casete)
 Micropipetas de 20- 200 ul.
 Gradilla
 Guantes
6. PROCEDIMIENTO:

2º. Añada 0.2 ml de la muestra (alrededor de 3 -4 gotas) usando la pipeta, y dispensar en
el pocillo de muestra en el cassette.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
7. Interpretación:
a) RESULTADO NEGATIVO: dos bandas de colores aparecen tanto en la prueba (T) y en la

región de control (C). Resultado demuestra que la muestra no tiene anti-HBc.
b) RESULTADO POSITIVO: una sola línea de color rosa clara aparecerá en la región del
control (C). Ninguna banda de color rosa apareció en la región de prueba (T).
resultado de la prueba demuestra que la muestra tiene anti-HBc.
c) RESULTADO POSITIVO DEBIL: Además de una banda de control de color rosa (C),
habrá una banda de color rosa pálido que aparece en la región de la prueba (T).
Resultado de la prueba demuestra que la muestra tienes trazas de anti-HBc.
d) INVALIDO: ninguna banda aparece en la región de control (C), es un indicador de error
en procedimiento y / o el reactivo de ensayo se ha deteriorado. La muestra debe
analizarse de nuevo.
8. REPORTE:
POSITIVO = REACTIVO
Control Interno: Esta prueba contiene un control incluido, la banda C, esta se desarrolla
después de adicionar la muestra. De lo contrario, revise el procedimiento y repita la prueba
con un nuevo dispositivo.
externos, positivos y negativos, para asegurar el funcionamiento adecuado de la prueba,
particularmente en las siguientes circunstancias:
a. Cuando un Nuevo operador utiliza el kit, antes de que procese muestras.
b. Cuando se inicia un nuevo kit.
c. Un nuevo envió de kits es utilizado.
d. Cuando la Temperatura de almacenamiento se sale del rango de 2°C – 30°C
e. Las temperatura del sitio de procesamiento esta por fuera de 15 °C- 30°C
f. Investigar la causa de resultados no válidos repetidos.

 Inserto del producto

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
PRUEBA RÁPIDA PARA HEPATITIS C
1. MARCADOR:
HEPATITIS C
2. MÉTODO:
3. FUNDAMENTO:
El casete de prueba contiene una tira de membrana que está pre recubierta con antígeno de
captura recombinante HCV (Core, NS3, NS4 Y NS5) en la región de la banda de prueba. La
proteína A el conjugado dorado coloidal y la muestra de suero que se desplaza a lo largo de la
membrana cromatograficamente hacia la región de la prueba T formando una línea visible en
la medida en que el complejo de partícula dorada –anticuerpo- proteína A se combinan con
alto grado de sensibilidad y especificidad.
Este dispositivo de ´prueba tiene la letra T y C como “línea de control” en la superficie de su

compartimiento. Tanto la línea de prueba como la de control en la ventana de resultados
ahora visibles antes de la aplicación de las muestras. La línea de control es utilizada para
procedimientos.
4. TIPO DE MUESTRA:
Suero o Plasma
5. MATERIALES:

Cronometro.
Micropipetas de 0.5- 10 ul.
Gradilla
Guantes

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
6. PROCEDIMIENTO:

2º. Añada 10ul de la muestra en el pozo de muestra
3º. Agregar 4 gotas de diluyente de ensayo al pozo de muestra
7. Interpretación:
1. Una banda de color aparecerá en la sección izquierda de la ventana de resultados para
mostrar que la prueba está funcionando apropiadamente.
Esta banda es la banda de control.
2. La sección derecha de la ventana de resultados indica los resultados de la prueba. Si
aparece otra banda de color en la sección derecha de la ventana de resultados, esta es la
banda de prueba.
a. RESULTADO NEGATIVO: La presencia de una sola banda (C) dentro de la
ventana de resultados negativo.
b. RESULTADO POSITIVO: La presencia de dos bandas de color “T” y “C” dentro de
la ventana de resultados, sin importar cual aparece primero indica un resultado
positivo.
8. REPORTE:
POSITIVO = REACTIVO

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
Control Externo: Las buenas prácticas de laboratorio recomiendan el uso de controles



AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
PRUEBA RAPIDA PARA HIV (VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA)
1. MARCADOR:
 VIH ½ 3.0
2. MÉTODO:
3. FUNDAMENTO:
El antígeno HIV ½ recombinante (gp41, p24 y gp 36), con el conjugado coloidal dorado y la
muestra de suero se desplazan a lo largo de la membrana cromatograficamente hasta llegar a
la región de prueba (T) y forman una línea visible del complejo antígeno - anticuerpo -
antígeno complejo coloidal dorado con un alto grado de sensibilidad y especificidad. Las líneas
de prueba y la línea control en la ventana de resultados han sido claramente etiquetadas: “1”
para la línea de prueba (HIV 1), “2” para la línea de prueba (HIV 2) y “C” para la “línea control”
tanto las líneas de prueba como la de control y la ventanilla de resultados no son visibles antes
de aplicar la muestra.
4. TIPO DE MUESTRA:
Suero o Plasma
5. MATERIALES:

Cronometro.
Micropipetas de 0.5 - 20 ul.
Gradilla
Guantes
6. PROCEDIMIENTO:
1º. Retirar el dispositivo de prueba de la bolsa que contiene el papel de aluminio y colocarla
sobre una superficie plana y seca.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
2º. Usando una micropipeta agregar 10 ul de muestra de plasma o suero (20 ul de muestra
de sangre).
3º. Colocar 4 gotas (aproximadamente 120 ul) de diluyente.
7. Interpretación:
1. Se observara una banda de color aparecerá en la sección izquierda de la ventana

de resultados que muestra que la prueba está funcionando apropiadamente.
Esta banda se denomina “línea control”.
2. Las bandas de color aparecerán en la mitad y sección derecha de la ventana de
resultados. Estas bandas son la línea de prueba 2 y línea de prueba 1 (2,1).
RESULTADO NEGATIVO: La presencia de una banda de control (C) dentro de la ventana de

resultados indicativos de un resultado negativo.
RESULTADOS POSITIVOS:
 La presencia de dos líneas tanto línea control (C) y la línea de prueba 1 (1) dentro
de la ventana de resultados indica un resultado positivo para HIV-1.
 La presencia de dos líneas tanto línea control (C) y la línea de prueba 2(2) dentro
de la ventana de resultados indica un resultado positivo para HIV-2.
 La presencia de tres líneas tanto línea control (C), la línea de prueba 1(1) y la línea
de prueba 2(2) dentro de la ventana de resultados indica un resultado positivo
para HIV-1 y/o HIV-2.
 Si la intensidad del color de la línea de prueba 1 es más oscura que la línea de
prueba 2, este resultado se puede interpretar como positivo para HIV-1.
 Si la intensidad de color de la línea de prueba 2 es más oscura que la línea de
prueba 1, este resultado se puede interpretar como positivo para HIV-2.
8. REPORTE:
POSITIVO = REACTIVO

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001




AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
PRUEBA RÁPIDA SÍFILIS
1. MARCADOR:
SIFILIS
2. MÉTODO:
INMUNOCROMATOGRAFICO
3. FUNDAMENTO:
Cuando un volumen adecuado de espécimen de prueba es dispensado dentro del pocillo de

muestra del cassette, el espécimen migra por la acción de los capilares a través del cassette. Si
presenta el anticuerpo Anti – Tp, en el espécimen se unirá a los conjugados del Tp. El
inmunocomplejo es entonces capturado sobre la membrana por el pre recubierta del antígeno
Tp, formando una banda T coloreada Borgoña, indicando un resultado positivo al anticuerpo
Tp.
4. TIPO DE MUESTRA:
Suero o Plasma
5. MATERIALES:

Cronometro.
Dispositivo de prueba (cassette)
Micropipeta de 20 - 200 ul.
Gradilla
Guantes
6. PROCEDIMIENTO:
1. Retirar el dispositivo de prueba de la bolsa que contiene el papel de aluminio y colocarla

2. Llene el gotero cin la muestra, sosteniendo verticalmente, distribuya 1 gota
(aproximadamente 30 – 45 ul) del espécimen en el pocillo de muestra
3. Seguidamente adicionar 2 gotas (cerca de 35-50 ul ) de diluyente a la muestra
inmediatamente.
4. Interpretar los resultados a los 15 minutos.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
7. Interpretación:
RESULTADO NEGATIVO: Si solamente la banda C desarrolla color, la prueba indica que no hay
anticuerpos detectables anti-Tp presentes en el espécimen. El resultado es negativo.
RESULTADOS POSITIVOS: Si ambas bandas C y T desarrollan color, la prueba indica la

presencia de anticuerpos anti-Tp en el espécimen. El resultado es positivo.
8. REPORTE:
POSITIVO = REACTIVO



AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
PRUEBA RÁPIDA CLAMYDIA
1. ANALITO:
 CHLAMYDIA
2. MÉTODO:
 Inmunocromatografía
3. FUNDAMENTO:
La prueba Chlamydia es un inmunoensayo de cromatografía de flujo lateral basado en el

principio del doble anticuerpo (sandwich), la cual utiliza un único par de anticuerpos
monoclonales de ratón que identifican selectivamente el antígeno de la C. trachomatis en la
muestra.
La prueba de casete consiste en:
1) un conjugado coloreado de borgoña que contiene los anticuerpos monoclonales anti-C.
trachomatis de ratón conjugados con oro coloidal (conjugados de anticuerpos),
2) una membrana de nitrocelulosa que contiene la banda de prueba (banda T) y la banda de
control C (banda C). la banda T está pre recubierta con otro anticuerpo de ratón anti-C.
trachomatis y la banda C está pre-recubierta con anticuerpo de cabra anti IgG de ratón.
4. TIPO DE MUESTRA:
 Suero o Plasma
5. MATERIALES:
1. Contenedor para desechos peligrosos desde el punto de vista biológico.

2. Puntas estériles
3. Cronometro.
4. Dispositivo de prueba (cassette)
5. Micropipeta de 20 - 200 ul.
6. Gradilla
7. Guantes

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
6. PROCEDIMIENTO:
1º. Retirar el dispositivo de prueba de la bolsa que contiene el papel de aluminio y colocarla
2º. Llene el gotero con la muestra, sosteniendo verticalmente, distribuya 1 gota
(aproximadamente 30 – 45 ul) del espécimen en el pocillo de muestra
3º. Seguidamente adicionar 2 gotas (cerca de 35-50ul) de diluyente a la muestra
inmediatamente.
7. Interpretación:
RESULTADO NEGATIVO: Si solamente la banda C desarrolla color, la prueba indica que no hay
anticuerpos detectables anti-Tp presentes en el espécimen. El resultado es negativo.
RESULTADOS POSITIVOS: Si ambas bandas C y T desarrollan color, la prueba indica la

presencia de anticuerpos anti-Tp en el espécimen. El resultado es positivo.
8. REPORTE:
POSITIVO = REACTIVO




AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
PRUEBA RÁPIDA PARA DENGUE
1. MARCADOR:
 Dengue Duo (antígeno NS1 y IgG/IgM
2. MÉTODO:
INMUNOCROMATOGRAFIA 
3. FUNDAMENTO:
Esta prueba rápida SD BIOLINE Dengue Duo contiene dos dispositivos de prueba (lado
izquierdo; prueba del Ag NS1 del dengue, lado derecho; prueba de IgG/IgM para dengue). La
prueba rápida de Ag NS1 para dengue en el lado izquierdo es una prueba de un paso in Vitro
inmunocromatográfica diseñada para la determinación cualitativa del antígeno NS1 del virus
del dengue en suero humano, o plasma para el diagnóstico de la infección inicial aguda del
dengue. Este dispositivo de prueba contiene una tira con membrana, la cual está precubierta
con Ag de captura NS1 anti-dengue en la región de la banda de prueba.
El conjugado de coloide de oro con Ag NS1 anti-dengue y la muestra de suero o plasma se

mueven a los largo de la membrana cromatográficamente hacia la región de prueba (T) y
forma una línea visible como el complejo anticuerpo-antígeno-anticuerpo partícula de oro. La
prueba rápida de IgG/IgM para dengue en el lado derecho es un ensayo
inmunocromatográfico de fase sólida para la detección rápida, cualitativa y diferencial de los
anticuerpos IgG e IgM para el dengue de virus en suero, plasma o sangre total humano. Esta
prueba rápida provee solamente un resultado preliminar.
4. TIPO DE MUESTRA:
Suero o Plasma
5. MATERIALES:
Cronometro.
Dispositivo de prueba combo (casete)
Micropipetas de 0.5 - 20 ul.
Diluyente del ensayo dengue.
Gotero

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
Gradilla
Guantes
6. PROCEDIMIENTO:
ANTÍGENO NS1 DEL DENGUE

2. Añada 3 gotas (alrededor de 100 μl) de suero, plasma o sangre completa en el pocillo para
muestras (S).
PARA IGG/IGM DEL DENGUE.

2. Añada 10 μl de suero, plasma o sangre completa en la línea negra dibujada dentro del
pozo de muestra cuadrado marcado con “S”.
3. Colocar 4 gotas (aproximadamente 120 ul) de diluyente.
7. INTERPRETACIÓN:
DENGUE NS1 AG
1. Resultado negativo: La presencia de una línea de color dentro de la ventana de resultados

indica un resultado negativo.
2. Resultado positivo: La presencia de dos líneas de color (banda “T” y “C”) dentro de la
ventana de resultados, no importa cual línea aparezca
DENGUE IgG / IgM
Negativo Solamente es visible la línea de control en el dispositivo de prueba. No se detectaron

anticuerpos IgG/IgM. Repita la prueba en 3-5 días si se sospecha de infección por dengue.
IgM positivo La línea de control (C) y la línea IgM (M) están visibles en el dispositivo de
prueba. Esto es indicativo de una infección primaria de dengue.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
IgG positivo La línea de control (C) y la línea IgG (G) están visibles en el dispositivo de prueba.
Esto es indicativo de una infección secundaria o anterior de dengue.
IgG e IgM positivo La línea de control (C), la línea IgM (M) e IgG (G) están visibles en el
dispositivo de prueba.
8. REPORTE:
POSITIVO
NEGATIVO

g) Cuando un Nuevo operador utiliza el kit, antes de que procese muestras.
h) Cuando se inicia un nuevo kit.
i) Un nuevo envió de kits es utilizado.
j) Cuando la Temperatura de almacenamiento se sale del rango de 2°C – 30°C
k) Las temperatura del sitio de procesamiento esta por fuera de 15 °C- 30°C
l) Investigar la causa de resultados no válidos repetidos.


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
PROTEÍNA C REACTIVA
1. ANALITO:
 Proteína C reactiva
2. MÉTODO:
 AGLUTINACION
3. FUNDAMENTO:
EL reactivo de látex PCR directo está constituido por una suspensión de partículas de
poliestireno sensibilizadas con gamma-globulina anti-PCR humana. Al enfrentar el reactivo con
el suero tiene lugar una reacción antígeno-anticuerpo que se pone de manifiesto por la
aglutinación de las partículas de látex que forma agregados fácilmente visibles.
4. TIPO DE MUESTRA:
 Suero
5. MATERIALES:
 Cronometro.
 Reactivo de latex
 Placa de reacción
 Agitadores desechables.
 Micropipeta de 20 - 200 ul.
 Gradilla
 Guantes
6. PROCEDIMIENTO:
1. Llevar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente.

2. Colocar una gota (40ul) de suero sin diluir sobre la placa.
3. Mezclar bien el reactivo de látex y añadir una gota del mismo sobre la gota de suero.
4. Mezclar las gotas con la ayuda del agitador y balancear la placa
5. Observar la presencia o ausencia de aglutinación antes de los 3 minutos.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
7. Interpretación:
La aglutinación del látex indica un nivel de proteína C – Reactiva en suero superior a 7,5 mg/L.
a) Técnica semicuantitativa
Realizar diluciones seriadas de la muestra en (NaCl 0,9 %) y realizar la prueba en cada una de
ellas. El nivel aproximado de Proteína C-Reactiva en la muestra sérica puede calcularse por la
siguiente formula:
 PCR (mg/L)= Máxima dilución con reacción positiva x sensibilidad (7,5 mg/L).
8. REPORTE:
AGLUTINA = POSITIVO
NO AGLUTINA = NEGATIVO
Control Interno: se aconseja incluir en cada serie de test los controles positivo y negativo que
acompañan al reactivo.

m) Cuando un Nuevo operador utiliza el kit, antes de que procese muestras.
n) Cuando se inicia un nuevo kit.
o) Un nuevo envió de kits es utilizado.
p) Cuando la Temperatura de almacenamiento se sale del rango de 2°C – 30°C
q) Las temperatura del sitio de procesamiento esta por fuera de 15 °C- 30°C
r) Investigar la causa de resultados no válidos repetidos.


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
FACTOR REUMATOIDEO
1. ANALITO:
Factor Reumatoideo
2. MÉTODO:
AGLUTINACION
3. FUNDAMENTO:
EL reactivo de látex FR directo está constituido por una suspensión de partículas de
poliestireno sensibilizadas con gamma-globulina humana. Al enfrentar el reactivo con los
factores reumatoides del suero tiene lugar una reacción antígeno-anticuerpo que se pone de
manifiesto por la aglutinación de las partículas de látex que forma agregados fácilmente
visibles.
4. TIPO DE MUESTRA:
Suero
5. MATERIALES:
Cronometro.
 Reactivo de látex
 Placa de reacción
Agitadores desechables.
Gradilla
Guantes
6. PROCEDIMIENTO:
2. Colocar una gota (40ul) de suero sin diluir, sobre el círculo negro de la placa de reacción.
3. Homogenizar bien el reactivo de látex y añadir una gota (40 ul) sobre la gota de suero.
4. Mezclar con la ayuda del agitador y balancear la placa

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
7. Interpretación:
La aglutinación del látex indica un nivel de Factores Reumatoides en suero superior a 20 UI/ml.
a) Técnica semicuantitativa
Realizar diluciones seriadas de la muestra en disolución salina (NaCl 0,9 %) y realizar la prueba
en cada una de ellas.
El nivel aproximado de Factores Reumatoides en la muestra sérica puede calcularse por la
siguiente formula:
 Titulo FR (UI/ml)= Máxima dilución con reacción positiva x Sensibilidad (20 UI/ml).
8. REPORTE:
AGLUTINA = POSITIVO


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ANTIGENOS FEBRILES
1. ANALITO:
ANTIGENOS FEBRILES
2. MÉTODO:
AGLUTINACION
3. FUNDAMENTO:
El principio de la prueba se basa en la reacción inmunológica entre los anticuerpos producidos con
las bacterias viables (aglutininas) y sus antígenos febriles correspondientes.
4. TIPO DE MUESTRA:
Suero
5. MATERIALES:
 Punteras estériles
Cronometro.
 Antígenos febriles
Sueros de control
Vidrio transparente con divisiones
 Rotador mecánico
Gradilla
Guantes
6. PROCEDIMIENTO:
I. TECNICA RAPIDA EN PLACA

2. Colocar una gota (50ul) de suero sin diluir sobre la placa.
3. Mezclar bien los reactivos y añadir una gota del mismo sobre la gota de suero.
4. Mezclar las gotas con la ayuda del agitador y balancear la placa

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
II. TITULACION RAPIDA EN PLACA
1. Dividir una placa de vidrio en sectores de 4 cm2 aproximadamente.

2. Empleando las micropipetas apropiadas colocar en estos sectores 80 ul, 40 ul, 20 ul,
10ul y 5 ul de suero. Repetir el procedimiento para un control negativo y uno positivo.
3. Colocar 1 gota de Antígeno previamente agitado sobre cada gota de suero.
4. Mezclar el suero y el Antígeno utilizando una varilla abarcando un área de 2 cm de
diámetro aproximadamente. Debe emplearse una varilla distinta para cada dilución de
suero.
5. Agitar la placa durante 3 minutos en forma circular.
6. Observar la aglutinación utilizando luz indirecta sobre fondo oscuro.
7. INTERPRETACION:
Técnica I: se indica solamente positivo o negativo.
 4+: todos los microorganismos aglutinan.

 3+: aglutinan aproximadamente el 75%.
Negativo: no aparece aglutinación.
Técnica II: el título se considerará la última dilución que da aglutinación del 50% (++).
Los resultados obtenidos en la titulación en placa se aproximan a los de la prueba en tubo,

considerando las diluciones como se muestra a continuación:
Volumen de Suero Dilución aproximada en (ml) la prueba en tubo
0,08 1:20
0,04 1:40
0,02 1:80
0,01 1:160
0,005 1:320

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
8. REPORTE:
AGLUTINA = POSITIVO (indicando la dilución aproximada que se obtiene).

Control Interno: se aconseja incluir en cada serie de test los controles positivo y negativo de
Antígenos Febriles.

g) Cuando un Nuevo operador utiliza el kit, antes de que procese muestras.
h) Cuando se inicia un nuevo kit.
i) Un nuevo envió de kits es utilizado.
j) Cuando la Temperatura de almacenamiento se sale del rango de 2°C – 30°C
k) Las temperatura del sitio de procesamiento esta por fuera de 15 °C- 30°C
l) Investigar la causa de resultados no válidos repetidos.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
RPR CARBON
1. ANALITO:
 Antígeno RPR
2. MÉTODO:
FLOCULACION
3. FUNDAMENTO:
Las "reaginas" presentes en el suero de individuos infectados con Treponema pallidum, se

detectan por acción de las mismas con antígeno de cardiolipina, lecitina y colesterol adsorbido
sobre partículas de carbón. La reacción produce una aglutinación visible macroscópicamente,
favorecida por las partículas de carbón.
4. TIPO DE MUESTRA:
Suero
5. MATERIALES:
Cronometro.
Reactivo
 Tarjetas de reacción
Gradilla
Guantes
6. PROCEDIMIENTO:
2. En cada uno de los círculos de la tarjeta de reacción colocar con un gotero la muestra
(suero).
3. Homogenizar bien el reactivo y añadir una gota (20 ul) sobre la gota de suero.
4. Mezclar con la ayuda del agitador y balancear la tarjeta

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
7. Interpretación:
REACCION POSITIVA: grumos gruesos en el pocillo.

REACCION POSITIVA DEBIL: grumos finos, formando generalmente, una corona circular.
 REACCION NEGATIVA: suspensión homogénea.
Técnica semicuantitativa
Realizar diluciones seriadas de la muestra en disolución salina (NaCl 0,9 %) y realizar la prueba
en cada una de ellas.
8. REPORTE:
AGLUTINA = REACTIVO
NO AGLUTINA = NO REACTIVO


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
PROTEÍNA C REACTIVA CUANTITATIVA

1. ANALITO:
Proteína C reactiva
2. MÉTODO:
Inmunoturbidimetrico con látex
3. FUNDAMENTO:
La Proteína C Reactiva presente en la muestra, es capaz de aglutinar las partículas de

látex recubiertas con anticuerpos anti-PCR. La turbidez causada por la aglutinación de
las partículas de látex es proporcional a la concentración de PCR en la muestra y puede
ser medida espectrofotométricamente.
4. TIPO DE MUESTRA:
Suero o Plasma
5. MATERIALES:
 Reactivo A: solución de buffer glicina
 Reactivo B: suspensión de partículas de látex, recubiertas con anticuerpos anti-PCR.
 Puntas estériles
 Gradilla
 Guantes
 Espectrofotómetro
 Cubetas espectrofotométricas
 Baño de agua a 37°C
 Micropipeta y pipetas para medir los volúmenes indicados.
6. PROCEDIMIENTO:
Tipo de reacción dos puntos
a) Colocar en la cubeta muestra 6 ul

b) Luego añadir Reactivo A 150 ul
c) A su vez Reactivo B 150 ul
d) Incubar el Reactivo A + Muestra 300” ( 5 min) a 37°C
e) Leer la absorbancia a 570 nm
f) Tiempo de lectura - ΔT 150-200”
g) Rango de medición 0,2-100 mg/l
7. INTERPRETACIÓN:

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
Nivel de proteína C – Reactiva en suero superior a 5 mg/L, son positivas para esta
prueba.
8. VALOR DE REFERENCIA:
0 – 5 mg/L
Rango de medición: corresponde al intervalo de valores exactamente cuantificables y

se extiende de 0,2 mg/l al último punto de calibración (aproximadamente 100 mg/l
PCR).
Control Interno:
Control Inmunológico nivel 1 o Control Inmunológico nivel 2 o PCR Control N Turbitest
AA.
Los Controles son procesados de la misma manera que las muestras

Cuando un Nuevo operador utiliza el kit, antes de que procese muestras.
 Cuando se inicia un nuevo kit.
 Un nuevo envió de kits es utilizado.
 Cuando la Temperatura de almacenamiento se sale del rango de 2°C – 30°C
 Las temperatura del sitio de procesamiento esta por fuera de 15 °C- 30°C

Inserto del producto

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
COMPLEMENTO C4
1. ANALITO:
Complemento C4
2. MÉTODO:
Inmunoturbidimetrico
3. FUNDAMENTO:
La proteína C4 del complemento reacciona con el anticuerpo especifico anti-C4
formando inmunocomplejos insolubles. La turbidez provocada por estos
inmunocomplejos es proporcional a la concentración de C4 en la muestra y puede
medirse espectrofotométricamente.
4. TIPO DE MUESTRA:
Suero o plasma heparinizado.
5. MATERIALES:
 Reactivo A: solución fisiológica tamponada, pH 7,35.
 Reactivo B: Anticuerpo monoespecífico anti – C4.
 Contenedor para desechos peligrosos desde el punto de vista biológico.
 Puntas estériles
 Micropipeta y pipetas para medir los volúmenes indicados.
 Gradilla
 Guantes
 Espectrofotómetro
 Cubetas espectrofotométricas
 Tubos de vidrio.
6. PROCEDIMIENTO PARA MUESTRAS
a. Realizar dilución 1:10 de las muestras en solución fisiológica.

b. Añadir la muestra diluida en la cubeta: 150 ul
c. Luego añadir Reactivo A: 900 ul
d. Homogenizar y leer la absorbancia a 340 nm (DO1 ) llevando el aparato a cero con
agua destilada.
e. Luego agregar: Reactivo B 120 ul
f. Mezclar e incubar 30 minutos a temperatura ambiente.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
g. Leer la absorbancia a 340 nm (DO1 ) llevando el aparato a cero con agua

destilada.
7. CALCULO DE LOS RESULTADOS
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) correspondiente a cada

muestra analizada. Interpolar esta diferencia (∆A) en la curva de calibración para
determinar la concentración en mg/dl correspondiente a la muestra estudiada.
8. CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
C4 (mg/dl) x 10 = C4 (mg/l)
9. VALORES DE REFERENCIA
10 - 40 mg/dl (0,1 - 0,4 g/l).
Control Interno: Se recomienda el uso de Control Inmunológico nivel 1 o Control

Inmunológico nivel 2 Turbitest AA de Wiener lab.
El Control es procesado de la misma manera que las muestras.

 Cuando un Nuevo operador utiliza el kit, antes de que procese muestras.
 Cuando se inicia un nuevo kit.
 Un nuevo envió de kits es utilizado.
 Cuando la Temperatura de almacenamiento se sale del rango de 2°C – 30°C
 Las temperaturas del sitio de procesamiento esta por fuera de 15 °C- 30°C


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
COMPLEMENTO C3
1) ANALITO:
 Complemento C3
2) MÉTODO:
 Inmunoturbidimetrico
3) FUNDAMENTO:
La proteína C3 del complemento reacciona con el anticuerpo específico anti-C3
formando inmunocomplejos insolubles. La turbidez provocada por estos
inmunocomplejos es proporcional a la concentración de C3 en la muestra y puede
medirse espectrofotométricamente.
4) TIPO DE MUESTRA:
 Suero o plasma heparinizado.
5) MATERIALES:
 Micropipeta y pipetas para medir los volúmenes indicados.
 Gradilla
 Guantes
 Espectrofotómetro
 Cubetas espectrofotométricas
 Tubos de vidrio.
 Reactivo A: solución fisiológica tamponada, pH 7,35.
 Reactivo B: anticuerpo monoespecífico anti-C3.
6) PROCEDIMIENTO PARA MUESTRAS
a) Realizar dilución 1:10 de las muestras en solución fisiológica.

b) Añadir la muestra diluida en la cubeta: 70 ul
c) Luego añadir Reactivo A: 900 ul
d) Homogenizar y leer la absorbancia a 340 nm (DO1) llevando el aparato a cero con
agua destilada.
e) Luego agregar: Reactivo B 120 ul
f) Mezclar e incubar 30 minutos a temperatura ambiente.
g) leer la absorbancia a 340 nm (DO1) llevando el aparato a cero con agua destilada.
h)

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
7) CALCULO DE LOS RESULTADOS

determinar la concentración en mg/dl correspondiente a la muestra estudiada.
CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
C3 (mg/dl) x 10 = C3 (mg/l)
8) VALORES DE REFERENCIA
90 - 180 mg/dl (0,9 - 1,8 g/l).
9) CONTROL DE CALIDAD:
Control Interno:
 Control Inmunológico nivel 1 Turbitest AA.
 Control Inmunológico nivel 2 Turbitest AA.
El Control se procesa de la misma manera que las muestras

e) Las temperaturas del sitio de procesamiento esta por fuera de 15 °C- 30°C
10) REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Inserto del producto.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
FACTOR REUMATOIDEO CUANTITATIVO
1. ANALITO:
Factor Reumatoideo
2. MÉTODO:
3. FUNDAMENTO:
Los factores reumatoideos presentes en la muestra son capaces de aglutinar las

partículas de látex recubiertas con γ-globulina humana. La turbidez causada por la
aglutinación de las partículas de látex es proporcional a la concentración de FR en la
muestra y puede ser medida espectrofotométricamente.
4. TIPO DE MUESTRA:
5. MATERIALES:
 Gradilla
 Guantes
 Reloj o timer.
 Cubetas espectrofotométricas
 Reactivo A: solución buffer de glicina, pH 8,2.
 Reactivo B: suspensión de partículas de látex de tamaño uniforme recubiertas
con γ-globulina humana.
6. PROCEDIMIENTO:
1. Las muestras deben procesarse sin dilución previa.
2. Añadir la muestra en la cubeta: 20 ul
3. Luego añadir Reactivo A: 600 ul
4. Luego agregar: Reactivo B 200 ul
5. Homogeneizar y disparar simultáneamente el cronómetro. Leer la absorbancia a
600 nm de cada muestra, a los 30 segundos (DO1) y a los 5 minutos (DO2),
llevando en cada lectura el aparato a cero con agua destilada.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
Calcular la diferencia de absorbancia (ΔA = DO2-DO1) correspondiente a cada muestra

analizada. Interpolar esta ΔA en la curva de calibración para determinar la
concentración en UI/ml correspondiente a la muestra estudiada.
CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI

FR (UI/ml) x 1 = FR (kUI/l)
0 - 20 UI/ml
Control Interno:
Control Inmunológico nivel 1 Turbitest AA.



AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
MICROALBUMINURIA
1. ANALITO:
Microalbuminuria
2. MÉTODO:
3. FUNDAMENTO:
La albúmina reacciona con el anticuerpo específico formando inmunocomplejos
insolubles. La turbidez causada por estos inmunocomplejos es proporcional a la
concentración de albúmina en la muestra y puede ser medida espectro-
fotométricamente.
4. TIPO DE MUESTRA:
 Orina.
Recolección: obtener la muestra de la manera usual. Pueden utilizarse tanto la primera
orina de la mañana, como orinas de 3, 8, 12 ó 24 horas de recolección.
5. MATERIALES:
 Gradilla
 Guantes
 Baño de agua a 37°C
 Reloj o timer.
 Cubetas espectrofotométrica.
 Reactivo B: anticuerpos monoespecíficos (cabra) anti-albúmina humana.
6. PROCEDIMIENTO:
1. Añadir la muestra en la cubeta: 20 ul.
3. Homogeneizar e incubar 5 minutos a 37°C. Leer la absorbancia a 340 nm (DO1)
llevando el aparato a cero con agua destilada.
5. Homogeneizar. Incubar 5 minutos exactos a 37°C e inmediatamente leer la
absorbancia a 340 nm (DO2), llevando el aparato a cero con agua destilada.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
Calcular la diferencia de absorbancia (ΔA = DO2 - DO1) correspondiente a cada

muestra analizada. Interpolar esta ΔA en la curva de calibración para determinar la
concentración de MAlb (mg/l) correspondiente a la muestra estudiada
MAlb en orina (mg/24 hs) = MAlb (mg/l) x V

Siendo:
V = volumen de la diuresis expresado en litros/24 hs
Control Interno:
Microalbúmina Control 2 niveles Turbitest AA.
El Control se procesa de la misma manera que las muestras.




AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
INMUNOGLOBULINA A
1. ANALITO:
Inmunoglobulina A
2. MÉTODO:
3. FUNDAMENTO:
La inmunoglobulina A reacciona con el anticuerpo específico formando
inmunocomplejos insolubles. La turbidez provocada por estos inmunocomplejos es
proporcional a la concentración de IgA en la muestra y puede medirse
espectrofotométricamente.
4. TIPO DE MUESTRA:
5. MATERIALES:
 Tubo de vidrio
 Gradilla
 Guantes
 Cubetas espectrofotométricas.
 Reactivo B: anticuerpo monoespecífico anti-IgA.
1. Realizar dilución 1:10 de las muestras en solución fisiológica.

2. Añadir la muestra diluida en la cubeta: 50 ul
4. Homogenizar y leer la absorbancia a 340 nm (DO1 ) llevando el aparato a cero con
agua destilada.
6. Mezclar e incubar 30 minutos a temperatura ambiente.
7. Leer la absorbancia a 340 nm (DO1 ) llevando el aparato a cero con agua
destilada.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001

determinar la concentración en mg/dl (g/l) correspondiente a la muestra estudiada.
CONVERSIÓN DE UNIDADES AL SISTEMA SI
IgA (mg/dl) x 10 = IgA (mg/l)
70 - 400 mg/dl (0,7 - 4,0 g/l).
Control Interno:

e. Las temperaturas del sitio de procesamiento esta por fuera de 15 °C- 30°C


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
INMUNOGLOBULINA G
1. ANALITO:
Inmunoglobulina G
2. MÉTODO:
3. FUNDAMENTO:
La inmunoglobulina G reacciona con el anticuerpo específico formando
proporcional a la concentración de IgG en la muestra y puede medirse
espectrofotométricamente
4. TIPO DE MUESTRA:
5. MATERIALES:
 Tubo de vidrio
 Gradilla
 Guantes
 Reactivo B: anticuerpo monoespecífico anti-IgG.

4. Homogenizar y leer la absorbancia a 340 nm (DO1) llevando el aparato a cero con
agua destilada.
7. Leer la absorbancia a 340 nm (DO1) llevando el aparato a cero con agua destilada.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001


IgG (mg/dl) x 0,01 = IgG (g/l)
700 - 1600 mg/dl (7,0 - 16,0 g/l).
Control Interno:



AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
INMUNOGLOBULINA M
1. ANALITO:
Inmunoglobulina M
2. MÉTODO:
3. FUNDAMENTO:
La inmunoglobulina M reacciona con el anticuerpo específico formando
proporcional a la concentración de IgM en la muestra y puede medirse
espectrofotométricamente.
4. TIPO DE MUESTRA:
5. MATERIALES:
 Tubo de vidrio
 Gradilla
 Guantes
 Reactivo B: anticuerpo monoespecífico anti-IgM.

4. Homogenizar y leer la absorbancia a 340 nm (DO1 ) llevando el aparato a cero con
agua destilada.
7. Leer la absorbancia a 340 nm (DO1 ) llevando el aparato a cero con agua
destilada.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001

IgM (mg/dl) x 10 = IgM (mg/l)
40 - 260 mg/dl (0,40 - 2,60 g/l).
Control Interno:


 Inserto del producto.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
PRUEBAS DE
INMUNOLOGÍA
ESPECIAL

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
INMUNOANÁLISIS
QUIMIOLUMINISCENTE
DE MICROPARTÍCULAS
(CMIA)

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
CMIA (Inmunoanálisis Quimioluminiscente de Micropartículas)

PERFIL TIROIDEO- TSH
1. MARCADORES:
Hormona tiroestimulante (TSH)
2. MÉTODO:
 CMIA (Inmunoanálisis Quimioluminiscente de Micropartículas)
3. PRINCIPIO:
El ensayo ARCHITECT TSH es un inmunoanálisis de dos pasos para determinar la presencia de

la hormona tiroestimulante (TSH) en suero y plasma humanos que utiliza la tecnología CMIA
con protocolos de ensayo flexibles, denominado Chemiflex.
Se combinan la muestra, las microparticulas paramagnéticas recubiertas de anticuerpo anti-β

TSH y el diluyente del ensayo TSH. La TSH presente en la muestra se une a las micropartículas
recubiertas de anticuerpos anti-TSH.
Después del lavado, se añade el conjugado de anti-α TSH marcado con acridinio para crear una
mezcla de reacción.
Las soluciones preactivadora y activadora se añaden a la mezcla de reacción después de otro

ciclo de lavado.
La reacción quimioluminiscente resultante se mide en unidades relativas de luz (URL).Existe

una relación directamente proporcional entre la cantidad de TSH presente en la muestra y
las URL detectadas por el sistema óptimo del ARCHITECT iSystem.
4. MUESTRA:
Suero o plasma humano (recogidos con heparina de litio, heparina de sodio o EDTA de
potasio)
5. EQUIPO y MATERIALES:
Equipo Automatizado ARCHITECH i1000SR

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
 Micropipeta automática de volumen variable (20- 200 ul)

 Tips
 Control bajo, medio y alto TSH
 Calibrador TSH
 Solución pre-activadora y activadora.
 Cubetas de reacción
 Tampón de lavado
 Copas de muestra
 Tapones de protección (septos)
6. PROCEDIMIENTO
Antes de cargar el equipo de reactivos en el sistema por primera vez, mezcle el frasco de
micropartículas para resuspender las micropartículas que se hayan podido asentar durante el
envío. Una vez que haya cargado las micropartículas por primera vez no será necesario volver
a mezclarlas.
1. Invierta el frasco de micropartículas 30 veces.

2. Compruebe visualmente que las micropartículas del frasco se hayan resuspendido .Si
las micropartículas continúan adheridas al frasco, siga invirtiendo el frasco hasta que
estas estén completamente resuspendidas.
3. Si las micropartículas no se resuspenden, NO UTILICE ESTE PRODUCTO.
4. Una vez que las micropartículas se hayan resuspendido coloque un septo (tampón de
protección) en el frasco.
5. Cargue el equipo de reactivos en el ARCHITECT.
6. Si lo considera necesario, realice una calibración.
7. Solicite los ensayos en el sistema
8. El sistema calcula el volumen mínimo de la copa de muestra y lo imprime en el informe
de la lista de peticiones. Para evitar al máximo la evaporación, asegúrese de que haya el
volumen adecuado en la copa de muestra antes de realizar el ensayo .Número máximo
de replicados analizados por cada copa de muestra.
9. Cargue las muestras
10. Pulse la tecla PROCESAR
7. RESULTADOS:
El ensayo ARCHITECH TSH utiliza un método de cálculo de datos de ajuste a un curva logística de 4
parámetros (4PLC y ponderado) para generar la curva de calibración.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
8. INTERPRETACION:
Eutiroidismo 0.35– 4.94 µUI/ml
Control Interno: Los controles (control bajo, control medio y control alto) deben realizarse un
replicado único de cada uno de los controles de diferente concentración cada 24 horas, cada
día de su uso
Se debe asegurar que los valores de los controles se entren dentro de los intervalos de
concentración especificados en las instrucciones de uso de lo contrario no podrán ser
validados
Calibración: Con la ayuda de los dos calibradores, debe efectuarse en cada lote nuevo.


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001

PERFIL TIROIDEO- FT3
1. MARCADORES:
 Hormona triyodotironina libre (FT3)
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
El ensayo ARCHITECT Free T3 es un inmunoanálisis de dos pasos para determinar la presencia

de T3 libre (no unida) en suero y plasma humanos que utiliza la tecnología CMIA con
protocolos de ensayo flexibles, denominado Chemiflex.
Se combinan la muestra y las micropartículas paramagnéticas recubiertas de anticuerpo anti-

T3. La T3 libre (no unida) presente en la muestra se une a las micropartículas recubiertas de
anti-T3.
Después del lavado, se añade el conjugado de T3 marcado con acridinio.

ciclo de lavado.

una relación directamente proporcional entre la cantidad de T3 libre presente en la muestra y
4. MUESTRA:
 Suero o plasma humano (recogidos con heparina de litio, heparina de sodio o

EDTA de potasio)
 Equipo Automatizado ARCHITECH i1000SR


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001


 Tips
 Control bajo, medio y alto T3
 Calibrador T3
 Tapones de protección (septos)

6. PROCEDIMIENTO
a mezclarlas.

2. Compruebe visualmente que las micropartículas del frasco se hayan resuspendido .Si
las micropartículas continúan adheridas al frasco, siga invirtiendo el frasco hasta que
estas estén completamente resuspendidas.
7. El sistema calcula el volumen mínimo de la copa de muestra y lo imprime en el informe
de la lista de peticiones. Para evitar al máximo la evaporación, asegúrese de que haya el
volumen adecuado en la copa de muestra antes de realizar el ensayo .Número máximo
de replicados analizados por cada copa de muestra.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
7. RESULTADOS:
El ensayo ARCHITECH Free T3 utiliza un método de cálculo de datos de ajuste a un curva

logística de 4 parámetros (4PLC y ponderado) para generar la curva de calibración.
8. INTERPRETACIÓN:
6.27 – 13.61 pmol/l
Control Interno: Los controles (control bajo, control medio y control alto) deben realizarse un
replicado único de cada uno de los controles de diferente concentración cada 24 horas, cada
día de su uso.
validados

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001

PERFIL TIROIDEO- FT4
1. MARCADORES:
 Hormona tiroxina o tetrayodotironina (T4)
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
El ensayo ARCHITECT Free T4 es un inmunoanálisis de dos pasos para determinar la presencia

de T4 libre (no unida) en suero y plasma humanos que utiliza la tecnología CMIA con
protocolos de ensayo flexibles, denominado Chemiflex.
Se combinan la muestra y las micropartículas paramagnéticas recubiertas de anticuerpo anti-

T4. La T4 libre (no ligada) presente en la muestra se une a las micropartículas recubiertas
de anti-T4.
Después del lavado, se añade el conjugado de T4 marcado con acridinio.

ciclo de lavado.

una relación directamente proporcional entre la cantidad de T4 libre presente en la muestra y
4. MUESTRA:
 Suero o plasma humano (recogidos con heparina de litio, heparina de sodio o

EDTA de potasio)
 Equipo Automatizado ARCHITECH i1000SR


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001


 Tips
 Control bajo, medio y alto T4
 Calibrador T4
11. PROCEDIMIENTO
a mezclarlas.
a. Invierta el frasco de micropartículas 30 veces.

b. Compruebe visualmente que las micropartículas del frasco se hayan resuspendido .Si las
micropartículas continúan adheridas al frasco, siga invirtiendo el frasco hasta que estas
estén completamente resuspendidas.
c. Si las micropartículas no se resuspenden, NO UTILICE ESTE PRODUCTO.
d. Una vez que las micropartículas se hayan resuspendido coloque un septo (tampón de
e. Si lo considera necesario, realice una calibración.
f. Solicite los ensayos en el sistema
g. El sistema calcula el volumen mínimo de la copa de muestra y lo imprime en el informe de la
lista de peticiones. Para evitar al máximo la evaporación, asegúrese de que haya el volumen
adecuado en la copa de muestra antes de realizar el ensayo .Número máximo de replicados
analizados por cada copa de muestra.
h. Cargue las muestras
i. Pulse la tecla PROCESAR
6. RESULTADOS:
El ensayo ARCHITECH TSH utiliza un método de cálculo de datos de ajuste a un curva logística
de 4 parámetros (4PLC y ponderado) para generar la curva de calibración.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001

MARCADOR INFECCIOSOS- HBsAg
1. MARCADORES:
Hepatitis B Antígeno de Superficie (HBsAg)
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
a. El ensayo ARCHITECT HBsAg Qualitative II es un inmunoanálisis de un paso para determinar

la presencia cualitativa de HBsAg en suero y plasma humanos que utiliza la tecnología
CMIA con protocolos de ensayo flexibles, denominado Chemiflex.
b. Se combinan la muestra y las micropartículas paramagnéticas recubiertas de anticuerpo anti-
HBsAg y el conjugado de anticuerpos anti-HBsAg marcado con acridino se combinan
para formar una mezcla de reacción.
c. El HBsAg presente en la muestra se une a las microparticulas recubiertas de anti-
HBsAg y el conjugado de anti-HBsAg marcado con acridino.
d. Después del lavado, el tampón de lavado complementario se añade a la mezcla de
reacción.
e. Las soluciones preactivadora y activadora se añaden a la mezcla de reacción después de otro
ciclo de lavado.
f. La reacción quimioluminiscente resultante se mide en unidades relativas de luz (URL).Existe
una relación directamente proporcional entre la cantidad de HBsAg presente en la muestra
y las URL detectadas por el sistema óptimo del ARCHITECT iSystem.
4. MUESTRA:
 Suero humano
 plasma humano (recogidos con heparina de litio, EDTA dipotásico, EDTA tripotásico, citrato
de sodio)

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
5. EQUIPO Y MATERIALES:
 Equipo Automatizado ARCHITECH i1000SR

 Micropipeta automática de volumen variable (20- 200 ul)
 Tips
 Control positivo, negativo HBsAg
 Calibrador de HBsAg
 Solución pre-activadora y activadora.
 Cubetas de reacción
 Tampón de lavado
 Tapones de protección (septos)
6. PROCEDIMIENTO
envío. Una vez que haya cargado las micropartículas por primera vez no será necesario volver a
mezclarlas.

2. Compruebe visualmente que las micropartículas del frasco se hayan resuspendido .Si las
7. El sistema calcula el volumen mínimo de la copa de muestra y lo imprime en el informe de la
7. RESULTADOS:
VALOR DE LA PRUEBA INTERPRETACION

< 1.00 NO REACTIVO
≥ 1.00 REACTIVO

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
Control Interno: Los controles (control negativo, positivo) deben realizarse un replicado único
de cada uno de los controles de diferente concentración cada 24 horas, cada día de su uso.
validados
 Inserto del producto.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001

MARCADOR INFECCIOSOS- Anti-HBc
1. MARCADORES:
Anticuerpos contra Hepatitis B core
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
a. El ensayo ARCHITECT Anti-HBc es un inmunoanálisis de dos pasos para determinar la

presencia cualitativa de HBsAg en suero y plasma humanos que utiliza la tecnología
CMIA con protocolos de ensayo flexibles, denominado Chemiflex.
b. Se combinan la muestra, el diluyente del ensayo, el diluyente de muestras y las
microparticulas paramagnéticas recubiertas de rHBcAg. El anti-HBc presente en la muestra
se une a las microparticulas recubiertas de rHBcAg.
c. Se lava la mezcla de reaccion y se añade el conjugado de anticuerpo antihumano
marcado con acridino.
d. Las soluciones preactivadora y activadora se añaden a la mezcla de reacción después de otro
ciclo de lavado.
e. La reacción quimioluminiscente resultante se mide en unidades relativas de luz (URL).Existe
una relación directamente proporcional entre la cantidad de Anti-HBc presente en la
muestra y las URL detectadas por el sistema óptimo del ARCHITECT iSystem.
4. MUESTRA:
 Suero humano
 plasma humano (recogidos con heparina de litio, EDTA dipotásico,citrato de sodio, heparina
de litio)

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001

 Tips
 Control positivo, negativo Anti-HBc
 Calibrador de Anti-HBc
6. PROCEDIMIENTO
mezclarlas.

7. RESULTADOS:

< 1.00 NO REACTIVO
≥ 1.00 REACTIVO

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
validados
a. Inserto del producto.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
CMIA (Inmunoanálisis Quimioluminiscente de Micropartículas

MARCADOR INFECCIOSOS- Anti-HCV
1. MARCADORES:
Anticuerpos contra Hepatitis C
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
a. El ensayo ARCHITECT Anti-HCV es un inmunoanálisis de dos pasos para determinar la

presencia cualitativa de Anti-HCV en suero y plasma humanos que utiliza la
tecnología CMIA con protocolos de ensayo flexibles, denominado Chemiflex.
b. Se combinan la muestra y las microparticulas paramagnéticas recubiertas de antígeno
recombinante de VHC y el diluyente del ensayo. Los anticuerpos anti-HCV presentes en la
muestra se unen a las microparticulas recubiertas de VHC.
c. Después del lavado se añade el conjugado de anticuerpo antihumano marcado con
acridino para crear una mezcla de reacción.
d. Las soluciones preactivadora y activadora se añaden a la mezcla de reacción después de otro
ciclo de lavado.
e. La reacción quimioluminiscente resultante se mide en unidades relativas de luz (URL).Existe
una relación directamente proporcional entre la cantidad de Anti-HBc presente en la
muestra y las URL detectadas por el sistema óptimo del ARCHITECT iSystem.
4. MUESTRA:
 Suero humano
 plasma humano (recogidos con heparina de litio,
 EDTA dipotásico,citrato de sodio, heparina de litio)

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001

 Tips
6. PROCEDIMIENTO
mezclarlas.

7. INTERPRETACIÓN:

< 1.00 NO REACTIVO
≥ 1.00 REACTIVO

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
validados

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001

MARCADOR INFECCIOSOS- Anti-HBs
1. MARCADORES:
Anticuerpos contra Hepatitis B
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
a. El ensayo ARCHITECT Anti-HBs es un inmunoanalisis de dos pasos que utiliza la tecnología
de inmunoanalisis quimilumiscente de micropartículas (CMIA) para la determinación
cuantitativa de anti-HBs en suero y plasma humanos.
b. En el primer paso se combinan la muestra y las micropartículas paramagnéticas recubiertas
de HBsAg recombinante (rHBsAg). El anti-HBs presente en la muestra se une a las
micropartículas recubiertas de rHBsAg. Después del lavado, ya en el segundo paso, se
añade el conjugado de rHBsAg marcado con acridino. Las soluciones pre activadora y
activadora se añaden a la mezcla de reacción después de otro ciclo de lavado y la reacción
quimioluminiscente resultantes se mide en unidades relativas de luz (URL). Existe una
relación directamente proporcional entre la cantidad de anti-HBs presente en la muestra y
las URL detectadas por el conjunto óptico del ARCHITECT.
c. La concentración de anti-HBs presente en la muestra se determina mediante una curva de
calibración de ensayo ARCHITECT anti-HBs generada previamente. Si la concentración de
muestra es igual o superior a 10 mIU/ml, la muestra se considera reactiva para el anti-HBs.
d. Si desea más información sobre el sistema y la tecnología del ensayo, cosulte el capítulo 3
del Manual de Operaciones del Sistema Architect.
4. MUESTRA:
 Suero humano

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001

 Tips
6. PROCEDIMIENTO
mezclarlas.

7. INTERPRETACIÓN:

< 10.00 NO REACTIVO
≥ 10.00 REACTIVO

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
validados

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001

MARCADOR DE ANEMIA- Folate
1. MARCADORES:
Folate
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
El ensayo ARCHITECT Folate es un ensayo de dos pasos para la determinación

cuantitativa de folato en suero, plasma y eritrocitos humanos que utiliza la tecnología
CMIA con protocolos de ensayos flexibles, denominados Chemiflex.
Dos pasos de pretratamiento producen la liberación del folato de la proteína folato-ligante
endógena.
b. En el primer paso de pretratamiento, la muestra y el reactivo 2 de pretratamiento

(ditriotreitol o DTT) se aspiran y se dispensan en una cubeta de reacción (CR).
c. En el segundo paso de pretratamiento, una alícuota de la mezcla muestra/reactivo 2 de pre
tratamiento se aspira y se dispensa en otra CR.
d. A continuación se añade el reactivo 1 de pretratamiento (hidróxido de potasio o KOH).
e. Una alícuota de la muestra pretratada se transfiere a una tercera CR a la que se le añade
microparticulas paramagnéticas recubiertas de proteínas folato-ligante (FBP) y diluyente de
ensayo especifico. El folato presente en la muestra se une a las microparticulas recubiertas
de FBP.
f. Despues del lavado, se añaden las soluciones de preactivadora y activadora a la mezcla de
reacción.
g. La reacción quimioluminiscente resultante se mide en unidades relativas de luz (URL).
Existe una relación inversamente proporcional entre la cantidad de folato presente en la
muestra y las URL detectadas por el sistema óptico de ARCHITECT.
En el ensayo Folate RBC (folato de eritrocitos), un proceso manual inicial de pretratamiento
convierte el folato unido a los eritrocitos en folato medible. Después, estas muestras se
procesan tal y como se ha descrito anteriormente.
Si desea más información sobre el sistema y la tecnología del ensayo, cosulte el capítulo 3 del
Manual de Operaciones del Sistema Architect.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
4. MUESTRA:
 Suero humano

 Tips
 Control positivo, negativo folate
 Calibrador de Folate
6. PROCEDIMIENTO
mezclarlas.
1. Invierta el frasco de micropartículas 30 veces


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
7. VALORES ESPERADOS:
 1.5 – 20 ng/mL
validados

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
MARCADOR DE ANEMIA- B12
1. MARCADORES:
B12
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
El ensayo ARCHITECT B12 es un ensayo de dos pasos con un pre tratamiento de

muestras automático para determinar la presencia de vitamina B12 en suero y plasma
humanos que utiliza la tecnología CMIA con protocolos de ensayos flexibles,
denominados Chemiflex.
a. La muestra y los reactivos de pretratamiento 1, 2 y 3 se combinan.

b. Se aspira un alícuota de la muestra pretratada y se transfiere a una cubeta de reacción
(CR) nueva. Se combinan la muestra pretratada, el diluyente del ensayo y las
microparticulas para-magnéticas recubiertas de factor intrínseco. La B12 presente en la
muestra se une a las microparticulas recubiertas de factor intrínseco.
c. Después del lavado, se añade el conjugado de B12 marcada con acridinio para crear una
d. Las soluciones preactivadora y activadora se añaden a la mezcla de reacción después
de otro ciclo de lavado.
e. La mreaccion quimioluminiscente resultante se miden en unidades relativas de luz
(URL). Existe una relación inversamente proporcional entre la cantidad de B!” presente
en la muestra y las URL detectadas por el sistema óptico del ARCHITECT.
Manual de Operaciones del Sistema Architect.
4. MUESTRA:
 Suero humano

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001

 Tips
 Control positivo, negativo B12
 Calibrador de B12
6. PROCEDIMIENTO
mezclarlas.

 187 – 883 pg/mL

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
validados

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
HORMONAS FEMENINAS- PROLACTINA
1. HORMONA:
Prolactina
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
El ensayo ARCHITECT Prolactina es un inmunoanalisis de dos pasos que utiliza la

tecnología de inmunoanalisis quimiolumiscente de microparticulas (CMIA) con protocolos
de ensayos flexibles, denominados Chemiflex para determinar la presencia de prolactina
en suero y plasma humanos.
b. Se combinan la muestra y las microparticulas paramagnéticas recubiertas de anticuerpo

(monoclonal, de ratón) antiprolactina. La prolactina presente en la muestra se une a las
microparticulas recubiertas de anticuerpo antiprolactina (monoclonal, de ratón)
c. Después del lavado, se añade el conjugado (monoclonal, de ratón) de antiprolactina
marcado con acridinio para crear la mezcla de reacción.
d. Las soluciones preactivadora y activadora se añaden a la mezcla de reacción después de
otro ciclo de lavado.
e. La reacción quimioluminiscente resultante se mide en unidades relativas de luz (URL).
Existe una relación directamente proporcional entre la cantidad de prolactina presente en la
Manual de Operaciones del Sistema ARCHITECT.
4. MUESTRA:
 Suero humano

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001

 Tips
 Control positivo, negativo Prolactina
 Calibrador de Prolactina
6. PROCEDIMIENTO
mezclarlas.

 Hombres 3.46 – 19.40 ng/mL

 Mujeres 10.29 – 26.53 mg/mL

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
validados

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
HORMONAS FEMENINAS- FSH
1. HORMONA:
FSH
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
El ensayo ARCHITECT FSH es un inmunoanalisis de dos pasos que utiliza la tecnología de

inmunoanalisis quimiolumiscente de microparticulas (CMIA) con protocolos de ensayos
flexibles, denominados Chemiflex para determinar la presencia de prolactina en suero y
plasma humanos.
a. Se combinan la muestra y las microparticulas paramagnéticas recubiertas de anticuerpo

anti-B FSH. La FSH presente en la muestra se une a las microparticulas recubiertas de
anticuerpo anti-B FSH.
b. Después del lavado, se añade el conjugado de anti-B FSH marcado con acridinio para
crear la mezcla de reacción.
c. Las soluciones preactivadora y activadora se añaden a la mezcla de reacción después de
d. La reacción quimioluminiscente resultante se mide en unidades relativas de luz (URL).
Existe una relación directamente proporcional entre la cantidad de prolactina presente en la
4. MUESTRA:
 Suero humano

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001

 Tips
 Control positivo, negativo FSH
 Calibrador de FSH
6. PROCEDIMIENTO
mezclarlas.

 Hombres 0.95 – 11.95 mUI/mL

 Mujeres con menstruación normal
 Fase folicular 3.03 – 8.08 mUI/mL
 Pico de la mitad del ciclo menstrual 2.55 – 16.69 mUI/mL
 Fase luteinica 1.38 – 5.47 mUI/mL
 Postmenopausicas 26.72 – 133.41 mUI/mL

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
validados

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
IgM anti - CMV
1. PRUEBA:
IgM anti - CMV
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
El ensayo ARCHITECT CMV IgM es un inmunoanalisis de dos pasos para la detección

cualitativa de anticuerpos IgM en suero y plasma humanos con protocolos de ensayos
flexibles, denominados Chemiflex.
a. Se combinan la muestra, el diluyente del ensayo y las microparticulas paramagnéticas

recubiertas. El anticuerpo IgM anti-CMV (cepa AD169) y de antígeno CMV recombinante.
b. Después del lavado, se añade el conjugado de anti-IgM marcado con acridinio para crear la
Existe una relación directamente proporcional entre la cantidad de IgM anti-CMV presente
en la muestra y las URL detectadas por el sistema óptico de ARCHITECT.
La presencia o ausencia de IgM anti-CMV en el espécimen se determina comparando la señal

quimioluminiscente de la reacción con la señal del punto de corte determinada a partir de una
calibración activa. Si la señal quimioluminiscente en el espécimen es mayor o igual a la señal
del punto de corte, la muestra se considera reactiva para los anticuerpos IgM anti-CMV.
4. MUESTRA:
 Suero humano

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001

 Tips
 Control positivo, negativo IgM anti-CMV
 Calibrador de IgM anti-CMV
6. PROCEDIMIENTO
mezclarlas.


< 0.85 NO REACTIVO
≥ 1.00 REACTIVO

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
validados

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
IgG anti - CMV
1. PRUEBA:
IgG anti - CMV
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
El ensayo ARCHITECT CMV IgG es un inmunoanalisis de dos pasos para la detección

cualitativa y la determinación semicuantitativa de anticuerpos IgG frente al
citomegalovirus en suero y plasma humanos que utiliza la tecnología CMIA con
protocolos de ensayos flexibles, denominados Chemiflex.
a. Se combinan la muestra, el diluyente del ensayo y las microparticulas paramagnéticas

recubiertas de lisado del virus CMV (cepa AD169). El anticuerpo IgG anti-CMV presente en
la muestra se une a las microparticulas recubiertas de lisado del virus CMV (cepa AD169).
b. Después del lavado, se añade el conjugado de anticuerpo (de raton) anti-IgG marcado con
acridinio para crear la mezcla de reacción.
Existe una relación directamente proporcional entre la cantidad de IgG anti-CMV presente
en la muestra y las URL detectadas por el sistema óptico de ARCHITECT.
La presencia o ausencia de IgG anti-CMV en el espécimen se determina comparando la señal

quimioluminiscente de la reacción con la señal del punto de corte determinada a partir de una
calibración activa. Si la señal quimioluminiscente en el espécimen es mayor o igual a la señal
del punto de corte, la muestra se considera reactiva para los anticuerpos IgG anti-CMV.
1. MUESTRA:
 Suero humano

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001

 Tips
 Control positivo, negativo IgG anti-CMV
 Calibrador de IgM anti-CMV
3. PROCEDIMIENTO
mezclarlas.


< 6.00 NO REACTIVO
≥ 6.00 REACTIVO

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
.-:_
e. CONTROL DE CALIDAD:
validados
f. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ELFA (Ensayo de fluorescencia ligado a enzima) para HIV (Virus de la

Inmunodeficiencia Humana)
1. MARCADORES:
p24
ANTICUERPO anti VIH 1 y/o VIH 2
2. MÉTODO:
ELFA (Ensayo de fluorescencia ligado a enzima)
3. PRINCIPIO:
La parte superior del cono permite la detección de Ag p24, gracias a una sensibilización por
anticuerpos monoclonales anti-p24.La parte inferior del cono permite la detección de los
anticuerpos anti- VIH1 y anti-VIH2: está sensibilizada por una proteína gp160 de VIH-1 y por
péptidos de síntesis específicos del VIH-1 grupo O y del VIH-2.
Durante una primera incubación, la muestra, los anticuerpos de conejo anti-p24 biotinilados
presentes en el cartucho son aspirados y expulsados del cono.
Las etapas de lavado eliminan los compuestos no unidos.
Una segunda incubación con los antígenos biotinalados presentes en el cartucho (los mismos
utilizados para la sensibilización) se realiza en la parte inferior del cono. Estos antígenos
biotinilados se unen a los anticuerpos anti-VIH eventualmente presentes en la parte inferior
del cono. Las etapas de lavado eliminan los compuestos no unidos.
Una tercera incubación se efectúa con la estreptavidina marcada con la fosfatasa alcalina. En
esta etapa la estreptavidina se fija a los anticuerpos anti-p24 biotinilados si están presentes en
la parte superior del cono y a los antígenos biotinilados si están presentes en la parte inferior
del cono. Las etapas de lavado eliminan los compuestos no unidos.
El sustrato (4-Metil-umbeliferil fosfato) es en un primer momento incubado en la parte inferior

del cono y se hace una primera medida de la fluorescencia a 450nm.
La intensidad de la fluorescencia es proporcional a la presencia de anticuerpos anti-VIH.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
A continuación, el sustrato se incuba en la totalidad del cono y se efectúa una segunda

medida de fluorescencia.
El instrumento calcula la intensidad de la fluorescencia ligada a la parte superior del cono. Esta
intensidad es proporcional a la concentración de antígeno p24 del VIH 1 presente en la
muestra.
4. MUESTRA:
Suero o plasma humano (recogidos con heparina de litio o EDTA)
Equipo Automatizado VIDAS

Tips
Cartuchos
Conos
Control positivo de anticuerpo HIV5
Control negativo HIV5
 Estándar anticuerpos HIV5
6. PROCEDIMIENTO
1º. Sacar únicamente los reactivos necesarios, dejarlos 30 minutos a temperatura

ambiente antes de su utilización.
2º. Utilizar el cartucho “HIV5” y un cono “HIV5”para cada muestra, control o
estándar a analizar. Verificar que la bolsa de conos ha sido correctamente
cerrada después de cada utilización.
3º. La prueba se identifica con el código “HIV5” en el sistema. El estándar
identificado por “S1” y “S2”obligatoriamente deben ser utilizados en doble. Si
deben analizarse los controles positivos, se identificarán por “C1” y “C3”. Si
debe analizarse el control negativo, se identificará por C2.
4º. Colocar en el sistema los conos “HIV5” y los cartuchos “HIV5”.Verificar la
correcta concordancia de los códigos (colores y letras) entre el cono y el
cartucho.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
5º. Para esta prueba el volumen de muestra es exactamente 200 µl.Este volumen
debe pipetearse en el pocillo de la muestra que en el caso de la prueba sirve de
cubeta de reacción. Cerrar los compartimientos.
6º. Iniciar el análisis. Todas las etapas son creadas automáticamente por el sistema.
7º. Los resultados se obtienen en aproximadamente 2 horas. Al finalizar el análisis,
retirar los conos y los cartuchos del sistema.
8º. Eliminar los conos y cartuchos utilizados en un recipiente apropiado.
7. RESULTADOS:
Los resultados se analizan automáticamente por el sistema informático. El sistema efectúa varias
medidas de fluorescencia en la cubeta de lectura.
1º. La primera lectura tiene en cuenta el ruido de fondo debido a la cubeta y al sustrato
antes de ponerse en contacto el sustrato con el cono.
2º. La segunda lectura se efectúa para la detección de los anticuerpos anti-VIH después de
incubar el substrato con la enzima presente en la parte inferior del cono.
3º. La tercera lectura se efectúa para la detección del antígeno p24 de VIH-1 después de
incubar el substrato con el enzima presente con la totalidad del cono.
4º. Los valores de la prueba se calculan para cada respuesta de anticuerpos (AB en la hoja
de resultados) y antígeno (AG en la hoja de resultados)
RFV =Valor Relativo de Fluorescencia)
8. INTERPRETACION:
VALOR DE LA PRUEBA INTERPRETACIÓN

<0.25 (para la detección antígeno y Negativo
anticuerpo)
≥0.25 (para la detección antígeno o Positivo
anticuerpo)

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
Control Interno: Los controles (control positivo de anticuerpos, control positivo de antígeno y
control negativo) deben ser utilizados cuando se abra una caja nueva que tenga el mismo lote
con el fin de verificar la usencia de alteración de los reactivos.
Calibración: Con la ayuda de los estándares S1 y S2, debe efectuarse con cada nuevo lote que
se abra después de introducir las especificaciones del lote y después cada 14 días.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ELFA (Ensayo de fluorescencia ligado a enzima) para Anti-HBc Total
1. MARCADORES:
Ig M
Ig G
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
Tras dilución, la muestra es incubada en el cono. Este último, previamente sensibilizado por
antígeno recombinante HBc, fija entonces los anticuerpos anti HBc (Ig M y IgG) presentes en la
muestra. Los componentes no ligados de la muestra son eliminados mediante lavados.
La fase sólida es incubada a continuación con el conjugado: anticuerpo monoclonal anti-HBC
marcada con la fosfatasa alcalina. Este conjugado entrara en competencia con los anticuerpos
del suero fijados en la fase sólida por el antígeno HBc.El conjugado no fijado es eliminado
mediante lavado.
Durante la etapa final de revelación, el subtrato (4- Metil- umbeliferil fostato) es aspirado y
luego expulsado del cono; la enzima del conjugado cataliza la reacción de hidrólisis de este
substrato en un producto (4-Metil-umbeliferona) cuya fluorescencia emitida se mide a
450nm.El valor de la señal de fluorescencia es inversamente proporcional a la cantidad de
anticuerpos anti HBc presentes en la muestra. Al final de la prueba, los resultados son
automáticamente analizados por el instrumento y expresado en índice con respecto a un
estándar.
4. MUESTRA:
Suero o plasma humano (recogidos con heparina de litio o EDTA)

Tips
Cartuchos
Conos

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
Control positivo de anticuerpo HBCT

Control negativo HBCT
 Estándar HBCT
6. PROCEDIMIENTO
1. Sacar únicamente los reactivos necesarios, dejarlos 30 minutos a temperatura

2. Utilizar el cartucho “HBCT” y un cono “HBCT” para cada muestra, control o estándar a
analizar. Verificar que la bolsa de conos ha sido correctamente cerrada después de cada
utilización.
3. La prueba se identifica con el código “HBCT” en el sistema. El estándar identificado por
“S1” obligatoriamente deben ser utilizado en triple. Si deben analizarse los controles
positivos, se identificarán por “C1”. Si debe analizarse el control negativo, se
identificará por C2.
4. Colocar en el sistema los conos “HBCT” y los cartuchos “HBCT”. Verificar la correcta
concordancia de los códigos (colores y letras) entre el cono y el cartucho.
5. Para esta prueba el volumen de muestra es exactamente 150ul. Este volumen debe
pipetearse en el pocillo de la muestra que en el caso de la prueba sirve de cubeta de
reacción. Cerrar los compartimientos.
6. Iniciar el análisis. Todas las etapas son creadas automáticamente por el sistema.
7. Los resultados se obtienen en aproximadamente 90 minutos. Al finalizar el análisis,
8. Eliminar los conos y cartuchos utilizados en un recipiente apropiado.
7. RESULTADOS:
Los resultados se analizan automáticamente por el sistema informático. El sistema efectúa dos
lecturas de fluorescencia en la cubeta de lectura.
1. La primera lectura tiene en cuenta el ruido de fondo debido a la cubeta y al sustrato

2. La segunda lectura se efectúa después de la incubación del substrato con la enzima
presente en el cono.
3. El cálculo del RFV resulta de la diferencia de las dos lecturas.


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
8. INTERPRETACION:

i <1 Presencia de anticuerpos anti-HBC
1≤ i < 1.4 *Resultado dudoso
i ≥ 1.4 Ausencia de anticuerpos anti -HBC
*Todo resultado dudoso debe ser confirmado con una segunda toma de muestra.
Control Interno: Los controles (control positivo, control negativo) deben ser utilizados cuando
se abra una caja nueva que tenga el mismo lote con el fin de verificar la usencia de alteración
de los reactivos.
Calibración: Con la ayuda de los estándares S1, debe efectuarse con cada nuevo lote que se
abra después de introducir las especificaciones del lote y después cada 14 días.


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ELFA (Ensayo de fluorescencia ligado a enzima) para Antígeno de Superficie
1. MARCADORES:
 Antígeno de superficie
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
Después de una etapa preliminar de lavado los antígenos de las muestra se unen
simultáneamente a los anticuerpos monoclonales fijados sobre el cono y a los anticuerpos
conjugados con biotina. Los componentes no unidos de la muestra se eliminan por lavado.
El antígeno capturado por la fase sólida y que han formado un complejo con los anticuerpos
biotinilados se pone en contacto con la estreptavidina conjugada con la fosfatasa alcalina que
se liga con la biotina. Una nueva etapa de lavado elimina los componentes no unidos.
Durante la etapa final de revelado, el substrato (4-Metil- umbeliferil fosfato) es aspirado

después expulsado del cono; la enzima del conjugado cataliza la reacción de hidrólisis de este
substrato en un producto (4-Metil-umbeliferona9cuya fluorescencia emitida se mide a 450nm.
El valor de la señal fluorescencia es proporcional a la concentración del antígeno presente en
la muestra.
4. MUESTRA:
Suero o plasma humano (recogidos con heparina de litio)
Equipo Automatizado VIDAS/ MINI VIDAS

Tips
Cartuchos
Conos
Control positivo de anticuerpo HBS
Control negativo HBS
Calibrador HBS

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
6. PROCEDIMIENTO

2. Utilizar el cartucho “HBS” y un cono “HBS” para cada muestra, control o estándar a
utilización.
3. La prueba se identifica con el código “HBS” en el sistema. El calibrador r identificado
por “S1” obligatoriamente deben ser utilizado en doble. Si deben analizarse los
controles positivos, se identificarán por “C1”. Si debe analizarse el control negativo, se
identificará por C2.
4. Colocar en el sistema los conos “HBS” y los cartuchos “HBS”. Verificar la correcta
7. RESULTADOS:
Los resultados se analizan automáticamente por el sistema informático. El sistema efectúa
dos lecturas de fluorescencia en la cubeta de lectura.
1. La primera lectura tiene en cuenta el ruido de fondo debido a la cubeta y al

sustrato antes de ponerse en contacto el sustrato con el cono.
2. La segunda lectura se efectúa después de la incubación del substrato con la
enzima presente en el cono.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
8. INTERPRETACION:

i < 0.13 NEGATIVO
i ≥ 0.13 POSITIVO
de los reactivos.
Si el valor de uno de los controles se desvía de los valores esperados, los resultados no pueden
ser validados
Calibración: Con la ayuda del calibrador S1, debe efectuarse con cada nuevo lote que se abra
después de introducir las especificaciones del lote y después cada 14 días.


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ELFA (Ensayo de fluorescencia ligado a enzima) Hepatitis C
1. MARCADORES:
 Anticuerpos anti – HVC (Hepatitis C)
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
En la primera etapa la muestra es diluida, después se aspira y expulsa del interior del cono. Los
anticuerpos anti HCV se fijan en los antígenos que representan las proteínas del core, N23 y
N24 fijados en el interior del cono. Las etapas de lavado eliminan los compuestos no fijados.
Durante la segunda etapa las IgG monoclonales (ratón) anti-inmunoglobulinas (anti-IgG)

humanas en forma de Fab conjugadas con la fosfatasa alcalina recombinante (levaduras) son
aspiradas y expulsadas del interior del cono y se ligan a las Ig humanas fijadas en las moléculas
de la fase sólida. Unas nuevas etapas de lavado eliminan los compuestos no fijados.
Durante la etapa final de revelado, el sustrato (4-Metil-umbeliferil fosfato)es expulsado del

cono; la enzima del conjugado cataliza la reacción de hidrólisis de este substrato en un
producto (4-Metil-umbeliferona) cuya fluorescencia emitida se mide a 450nm. El valor de la
señal de fluorescencia es proporcional a la concentración de anticuerpos presentes en la
muestra.
4. MUESTRA:
Tips
Cartuchos
Conos
Control positivo HCV
Control negativo HCV
 Estándar/ Calibrador HCV

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
6. PROCEDIMIENTO

2. Utilizar el cartucho “HCV” y un cono “HCV” para cada muestra, control o estándar a
utilización.
3. La prueba se identifica con el código “HCV” en el sistema. El estándar identificado por
“S1” obligatoriamente deben ser utilizado en doble. Si deben analizarse el control
positivo, se identificara por “C1”. Si debe analizarse el control negativo, se identificará
por C2.
4. Colocar en el sistema los conos “HCV” y los cartuchos “HCV”. Verificar la correcta
7. RESULTADOS:
Los resultados se analizan automáticamente por el sistema informático. El sistema efectúa dos
lecturas de fluorescencia en la cubeta de lectura.


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
8. INTERPRETACION:

< 1.00 NEGATIVO
≥ 1.00 POSITIVO
de los reactivos.
ser validados
Calibración: Con la ayuda del calibrador S1, debe efectuarse con cada nuevo lote que se abra
después de introducir las especificaciones del lote y después cada 28 días.


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ELFA (Ensayo de fluorescencia ligado a enzima) PERFIL HORMONAL FEMENINO – Prolactina
1. MARCADORES:
Hormona Prolactina
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
El principio de la prueba asocia el método inmunoenzimático sándwich con una detección final
por fluorescencia (ELFA).
Se toma la muestra y se transfiere al pocillo que contiene el anticuerpos antiprolactina

marcado con fosfatasa alcalina (conjugado).la muestra mezcla muestra/ conjugado es aspirada
y expulsada varias veces por el cono con el fin de aumentar la velocidad de reacción .Esta
operación permite al antígeno ligarse por una parte a las inmunoglobulinas fijadas sobre el
cono por otra parte al conjugado formando así un sandwich. Las etapas de lavado eliminan los
componentes no fijados.
Durante la etapa final de revelado, el substrato (4-Metil-umbeliferil fosfato) es aspirado y

luego expulsado en el cono; la enzima del conjugado cataliza la reacción de hidrólisis de este
substrato en un producto (4- Metil- umbeliferona) cuya fluorescencia emitida se mide a
405mn. El valor de la señal de fluorescencia es proporcional a la concentración de prolactina
presente en la muestra.
4. MUESTRA:

Tips
Cartuchos

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
Conos
Control 1 PRL
Calibrador PRL
6. PROCEDIMIENTO

2. Utilizar el cartucho “PRL” y un cono “PRL” para cada muestra, control o estándar a
utilización.
3. La prueba se identifica con el código “PRL” en el sistema. El calibrador, identificados
obligatoriamente como S1, debe utilizarse en triple. Si deben probarse los controles se
identificara por “C1”.
4. Colocar los cartuchos “PRL”. Verificar la correcta concordancia de los códigos (colores y
letras) entre el cono y el cartucho.
7. RESULTADOS:
El equipo dos lecturas de fluorescencia en la cubeta de lectura para cada una de las pruebas.


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
8. INTERPRETACION:
5 – 35 ng/ml
*Los sueros con concentraciones en prolactina superiores a 200 ng/ml deben ser repetidas
después de diluir en el diluyente PRL.
Control Interno: El control debe ser utilizado cuando se abra una caja nueva que tenga
el mismo lote con el fin de verificar la usencia de alteración de los reactivos.
Si el valor de uno de los controles se desvía de los valores esperados, los resultados no
pueden ser validados
Calibración: Con la ayuda de los dos calibradores, debe efectuarse en cada nuevo lote
y luego de casa 14 días.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ELFA (Ensayo de fluorescencia ligado a enzima) PERFIL HORMONAL FEMENINO – FSH

(Hormona Folículo Estimulante)
1. MARCADORES:
 Hormona Folículo Estimulante(FSH)
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
Se toma la muestra y se transfiere al pocillo que contiene el anticuerpos anti- FSH marcado
con fosfatasa alcalina (conjugado).la muestra mezcla muestra/ conjugado es aspirada y
expulsada varias veces por el cono con el fin de aumentar la velocidad de reacción .Esta
operación permite al antígeno ligarse por una parte a las inmunoglobulinas fijadas sobre el
cono por otra parte al conjugado formando así un sandwich. Las etapas de lavado eliminan los

405mn. El valor de la señal de fluorescencia es proporcional a la concentración del antígeno
4. MUESTRA:

Tips

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
Cartuchos
Conos
Control 1 FSH
Calibrador FSH
6. PROCEDIMIENTO

2. Utilizar el cartucho “FSH” y un cono “FSH” para cada muestra, control o estándar a
utilización.
3. La prueba se identifica con el código “PRL” en el sistema. El calibrador, identificados
4. Colocar los cartuchos “FSH”. Verificar la correcta concordancia de los códigos (colores y
7. RESULTADOS:


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
8. INTERPRETACION:
VARONES: 1.7 – 12.0 mlU/ml

MUJERES:
Pico ovulatorio 6.3 – 24.0 mlU/ml
Fase folicular
 Primera fase 3.9– 12.0 mlU/ml
 Segunda fase 2.9 – 9.0 mlU/ml
Fase lútea 1.5 – 7.0 mlU/ml
Menopausia 17.0 – 95.0 mlU/ml
*Los sueros con concentraciones en prolactina superiores a 110 mlU/ml deben ser repetidas
después de diluir en el diluyente FSH
Control Interno: El control debe ser utilizados cuando se abra una caja nueva que tenga el
mismo lote con el fin de verificar la usencia de alteración de los reactivos.
ser validados
Calibración: Con la ayuda de los dos calibradores, debe efectuarse en cada nuevo lote y luego
de casa 14 días.


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ELFA (Ensayo de fluorescencia ligado a enzima) PERFIL HORMONAL FEMENINO – LH

(Hormona Luteinizante)
1. MARCADORES:
Hormona Luteinizante (LH)
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
Se toma la muestra y se transfiere al pocillo que contiene el anticuerpos anti-L

H marcado con fosfatasa alcalina (conjugado).la muestra mezcla muestra/ conjugado es
aspirada y expulsada varias veces por el cono con el fin de aumentar la velocidad de reacción
.Esta operación permite al antígeno ligarse por una parte a las inmunoglobulinas fijadas sobre
el cono por otra parte al conjugado formando así un sandwich. Las etapas de lavado eliminan
los componentes no fijados.

4. MUESTRA:

Tips
Cartuchos
Conos

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
Control 1 LH
Calibrador LH
6. PROCEDIMIENTO

2. Utilizar el cartucho “LH” y un cono “LH” para cada muestra, control o estándar a
utilización.
3. La prueba se identifica con el código “LH” en el sistema. El calibrador, identificados
obligatoriamente como S1, debe utilizarse en doble. Si deben probarse los controles se
4. Colocar los cartuchos “LH”. Verificar la correcta concordancia de los códigos (colores y
7. RESULTADOS:


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
8. INTERPRETACION:
VARONES: 1.1 – 7.0 mlU/ml

MUJERES:
Pico ovulatorio 9.6 – 80.0 mlU/ml
Fase folicular
 Primera fase 1.5 – 8.0 mlU/ml
 Segunda fase 2.0 – 9.0 mlU/ml
Fase lútea 0.2 – 6.5 mlU/ml
Menopausia 8.0 – 33.0 mlU/ml
*Los sueros con concentraciones en prolactina superiores a 100 mlU/ml deben ser repetidas
después de diluir en el diluyente LH.
Control Interno: El control debe ser utilizado cuando se abra una caja nueva que tenga el
ser validados
de casa 14 días.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ELFA (Ensayo de fluorescencia ligado a enzima) PERFIL HORMONAL FEMENINO – Estradiol
1. MARCADORES:
Hormona Estradiol
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
El principio de la prueba asocia el método inmunoenzimático sandwich con una detección final
Se toma la muestra y se transfiere al pocillo que contiene el conjugado, el cual es un derivado

de estradiol marcado con la fosfatasa alcalina. Se efectúa una competencia entre el estradiol
presente en el suero y el derivado de estradiol del conjugado frente a los sitios de unión del
anticuerpo específico anti- estradiol fijado sobre el cono.Las etapas de lavado eliminan los

405mn. El valor de la señal de fluorescencia es inversamente proporcional a la concentración
del antígeno presente en la muestra.
4. MUESTRA:

Tips

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
Cartuchos
Conos
Control 1 LH
Calibrador LH
6. PROCEDIMIENTO

2. Utilizar el cartucho “E2II” y un cono “E2II” para cada muestra, control o estándar a
utilización.
3. La prueba se identifica con el código “E2II” en el sistema. El calibrador, identificados
4. Colocar los cartuchos “E2II”. Verificar la correcta concordancia de los códigos (colores y
7. RESULTADOS:


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
8. INTERPRETACION:
VARONES: < 62 pg/ml

MUJERES:
 Fase folicular 18 – 147 pg/ml
 Pico preovulario 93 – 575 pg/ml
 Fase lútea 43 – 214 pg/ml
 Menopausia < 58 pg/ml
*Los sueros con concentraciones en prolactina superiores a 3000 pg/ml deben ser repetidas
después de diluir en el diluyente E2II.
ser validados
de casa 14 días.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ELFA (Ensayo de fluorescencia ligado a enzima) MARCADORES TUMORALES –TPSA (Antígeno

Prostático Específico Total)
1. MARCADORES:
 Antígeno Prostático Específico (PSA)
2. MÉTODO:
 ELFA (Ensayo de fluorescencia ligado a enzima)
3. PRINCIPIO:
El principio de la prueba asocia el método inmunoenzimático de tipo sandwich en 2 etapas con

una detección final por fluorescencia (ELFA).
La muestra se aspira y expulsan varias veces a través del interior del cono. Está operación
permite a los anticuerpos fijados sobre el mismo capturar el antígeno específico de la próstata,
presente en la muestra. Las etapas de lavado eliminan los componentes no fijados.
El anticuerpo conjugado con la fosfatasa alcalina se incuba en el cono en el que se fija al
antígeno específico de la próstata. Sucesivas etapas de lavado eliminan el conjugado sin fijar.

4. MUESTRA:
 Suero o plasma humano (recogidos con heparina de litio)
 Equipo Automatizado VIDAS

 Tips
 Cartuchos
 Conos
 Control 1 TPSA
 Calibrador TPSA

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
6. PROCEDIMIENTO

2. Utilizar el cartucho “TPSA” y un cono “TPSA” para cada muestra, control o estándar a
utilización.
3. La prueba se identifica con el código “TPSA” en el sistema. El calibrador, identificados
4. Colocar los cartuchos “TPSA”. Verificar la correcta concordancia de los códigos (colores
y letras) entre el cono y el cartucho.
7. RESULTADOS:

8. INTERPRETACION:
4 – 10 ng/ml
después de diluir en el diluyente TPSA.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ser validados
de casa 14 días.
Control Externo:

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ELFA (Ensayo de fluorescencia ligado a enzima) MARCADORES TUMORALES –FPSA (Antígeno

Prostático Específico Libre)
1. MARCADORES:
 Antígeno Prostático Específico (PSA)
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:

La muestra se aspira y expulsan varias veces a través del interior del cono. Está operación
permite a los anticuerpos fijados sobre el mismo capturar la fracción libre del antígeno
específico de la próstata, presente en la muestra. Las etapas de lavado eliminan los
El anticuerpo conjugado con la fosfatasa alcalina se incuba en el cono en el que se fija al
antígeno específico de la próstata. Sucesivas etapas de lavado eliminan el conjugado sin fijar.

4. MUESTRA:

Tips
Cartuchos
Conos

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
Control 1 FPSA
Calibrador FPSA
6. PROCEDIMIENTO

2. Utilizar el cartucho “FPSA” y un cono “FPSA” para cada muestra, control o estándar a
utilización.
3. La prueba se identifica con el código “FPSA” en el sistema. El calibrador, identificados
4. Colocar los cartuchos “FPSA”. Verificar la correcta concordancia de los códigos (colores
7. RESULTADOS:

4. Con el fin de determinar el porcentaje de PSA libre
Concentración TPSA

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
8. INTERPRETACION:
Relación FPSA y TPSA < 18 %
después de diluir en el diluyente FPSA.
ser validados
de casa 14 días.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ELFA (Ensayo de fluorescencia ligado a enzima) MARCADORES TUMORALES –CEA (Antígeno

Carcino Embrionario)
1. MARCADORES:
 Antígeno Prostático Específico (PSA)
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:

La muestra está diluida, después es incubada con el cono. Entonces el antígeno CEA presente
en la muestra se fija al cono. Una primera etapa de lavado permite eliminar los compuestos no
unidos de la muestra.
A continuación se realiza una segunda etapa de incubación con los anticuerpos policlonales de
cabra anti-CEA conjugados con la fosfatasa alcalina .Las etapas de lavado eliminan el
conjugado no fijado.

4. MUESTRA:

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001

Tips
Cartuchos
Conos
Control 1 CEAS
Calibrador CEAS
6. PROCEDIMIENTO

2. Utilizar el cartucho “CEAS” y un cono “CEAS” para cada muestra, control o estándar a
utilización.
3. La prueba se identifica con el código “CEAS” en el sistema. El calibrador, identificados
4. Colocar los cartuchos “CEAS”. Verificar la correcta concordancia de los códigos (colores
7. RESULTADOS:


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
8. INTERPRETACION:
0 - 3 ng/ml
después de diluir en el diluyente CEAS.
ser validados
de casa 14 días.


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ELFA (Ensayo de fluorescencia ligado a enzima) MARCADORES TUMORALES –CA 125
1. MARCADORES:
 Antigeno OC 125 (CA 125)
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:

La muestra es aspirada y expulsada varias veces del interior del cono. Esta operación permite a
los anticuerpos M11 fijados sobre el cono capturar los determinantes antigénicos reactivos
presentes en la muestra. Los componentes no unidos se eliminan por lavados. El anticuerpo
OC 125 conjugado con la fosfatasa alcalina se incuba entonces en el cono donde se fija a los
determinantes antigénicos OC 125 reactivos.Las etapas de lavado eliminan el conjugado no
fijado.

4. MUESTRA:

 Tips
 Cartuchos
 Conos

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
 Control 1 CA 125
 Calibrador CA 125
6. PROCEDIMIENTO

2. Utilizar el cartucho “CA125” y un cono “CA125” para cada muestra, control o estándar
a analizar. Verificar que la bolsa de conos ha sido correctamente cerrada después de
cada utilización.
3. La prueba se identifica con el código “CA125” en el sistema. El calibrador, identificados
4. Colocar los cartuchos “CA125”. Verificar la correcta concordancia de los códigos
(colores y letras) entre el cono y el cartucho.
7. RESULTADOS:

8. INTERPRETACION:
0 – 35 U/ml

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
*Los sueros con concentraciones en prolactina superiores a 600 U/ml deben ser repetidas
después de diluir en el diluyente CA 125II.
ser validados
de casa 14 días.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ELFA (Ensayo de fluorescencia ligado a enzima) HCG –β (Hormona Gonadotropina Coriónica

Humana)
1. MARCADORES:
 Hormona Gonadotropina Coriónica Humana (HCG -β)
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
El principio de la prueba asocia el método inmunoenzimático de tipo sandwich en una etapa

con una detección final por fluorescencia (ELFA).
En una primera etapa la muestra es tomada y luego transferida a las cubetas que contienen
los anticuerpos anti- HCG marcados con fosfatasa alcalina (conjugado).La mezcla
muestra/conjugado es aspirada y expulsada varias veces del interior del cono para aumentar
velocidad de la reacción.
En una segunda etapa, se saturan los sitios de la hCG aún libres por aspiración y expulsión del
conjugado contenido en el quinto pocillo del cartucho. Las etapas de lavado eliminan el
conjugado no fijados.
Durante la etapa final de detección, el substrato (4-Metil-umbeliferil fosfato) es aspirado y

después es expulsado del cono; la enzima del conjugado cataliza la reacción de hidrólisis de
este subtrato en un producto fluorescente (4- Metil- umbeliferona) cuya fluorescencia
emitida se mide a 450 mn. El valor de la señal de fluorescencia es proporcional a la
concentración del antígeno presente en la muestra.
4. MUESTRA:

 Tips

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
 Cartuchos
 Conos
 Control 1 HCG
 Calibrador 1 HCG
6. PROCEDIMIENTO

2. Utilizar el cartucho “HCG” y un cono “HCG” para cada muestra, control o estándar a
utilización.
3. La prueba se identifica con el código “HCG” en el sistema. El calibrador, identificado
obligatoriamente como S1, debe utilizarse en doble. Si debe probarse el control se
4. Colocar los cartuchos “HCG”. Verificar la correcta concordancia de los códigos (colores y
7. RESULTADOS:

8. NTERPRETACION:
Hombres < 3 mlU/ml

Mujeres cíclicas < 4 mlU/ml
Mujeres menopausicas < 13 mlU/ml

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
MUJERES EMBARAZADAS
Semana de Amenorrea Media (mlU/ml) Límites(mlU/ml)
4-5 7 400 1500 - 23000
5-6 32 800 3400 - 135300
6-7 52 000 10500 - 161000
7-8 74 000 18000 - 209000
8-9 100 000 37 500 - 219 000
9-10 105 000 42 800 - 218000
10-11 96 000 33 700 - 218 700
11-12 75 300 21 800 - 193 200
12-13 66 700 20 300 - 166 100
13-14 65 900 15 400 - 190 000
2° Trimestre (14 - 26) 26 150 2800 - 176 100
3 er Trimestre (26-39) 27 200 2800 - 144 400
*Los sueros con concentraciones en prolactina superiores a 1.500 mlU/ml deben ser repetidas
después de diluir en el diluyente HCG.
Control Interno: Los controles deben ser utilizados cuando se abra una caja nueva que tenga el
ser validados
de cada 14 días.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ELFA (Ensayo de fluorescencia ligado a enzima) PROCALCITONINA (PCT)
1. MARCADORES:
Procalcitonina
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
El principio de la prueba asocia el método inmunoenzimático de tipo sandwich en un solo paso

La muestra es tomada y luego transferida a las cubetas que contienen los anticuerpos anti-
procalcitonina marcados con fosfatasa alcalina (conjugado). La mezcla muestra/conjugado es
aspirada y expulsada varias veces del interior del cono.
Esta operación permite se fije el antígeno a la inmunoglobulina adherida en la pared interior
del cono y el conjugado hasta formar un sándwich .Las etapas de lavado eliminan el conjugado
no fijados.
Se efectúan a continuación dos etapas de revelado sucesivamente .En cada etapa el substrato
(4-Metil-umbeliferil fosfato) es aspirado y después es expulsado del cono; la enzima del
conjugado cataliza la reacción de hidrólisis de este substrato en un producto (4- Metil-
umbeliferona) cuya fluorescencia emitida se mide a 450 mn. El valor de la señal de
fluorescencia es proporcional a la concentración del antígeno presente en la muestra.
4. MUESTRA:

Tips
Cartuchos
Conos

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
Control 1 PCT
Control 2 PCT
Calibrador 1 PCT
Calibrador 2 PCT
6. PROCEDIMIENTO

2. Utilizar el cartucho “PCT” y un cono “PCT” para cada muestra, control o estándar a
utilización.
3. La prueba se identifica con el código “PCT” en el sistema. El calibrador, identificados
obligatoriamente como S1 Y S2, debe utilizarse en doble. Si deben probarse los
controles se identificara por “C1” y “C2”.
4. Colocar los cartuchos “PCT”. Verificar la correcta concordancia de los códigos (colores y
7. RESULTADOS:
Los resultados son analizados automáticamente por el sistema informático mediante el uso de
dos curvas de calibración memorizadas en el equipo; las concentraciones se expresan ng/ml.
8. INTERPRETACION:
 Una concentración de < 0.5 ng/ml representa un riesgo bajo de sepsis severa y/o shock
séptico.
 Una concentración de > 2 ng/ml representa un riesgo alto de sepsis severa y/o shock
séptico
después de diluir en el diluyente PCT.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ser validados
de cada 28 días.
Control Externo:


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ELFA (Ensayo de fluorescencia ligado a enzima) MARCADOR CARDIACO –TROPONINA I
1. MARCADORES:
Troponina I
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
El principio de la prueba asocia el método inmunoenzimático de tipo sándwich en una etapa

La muestra es tomada y luego transferida a las cubetas que contienen los anticuerpos anti-
troponina cardiaca marcados con fosfatasa alcalina (conjugado).La mezcla muestra/conjugado
es aspirada y expulsada varias veces del interior del cono.
Esta operación permite a la troponina I unirse por una parte a las inmunoglobulinas fijadas en
el cono y por otra parte a las inmunoglobulinas fijados en el cono y por otra al conjugado,
formando así un “sandwich”. Las etapas de lavado eliminan el conjugado no fijados.
Se efectúan a continuación dos etapas de revelado sucesivamente .En cada etapa el substrato
(4-Metil-umbeliferil fosfato) es aspirado y después es expulsado del cono; la enzima del
conjugado cataliza la reacción de hidrólisis de este sustrato en un producto (4- Metil-
umbeliferona) cuya fluorescencia emitida se mide a 450 mn. El valor de la señal de
fluorescencia es proporcional a la concentración del antígeno presente en la muestra.
4. MUESTRA:

Tips
Cartuchos
Conos
Control 1 TROPONINA
Control 2 TROPONINA

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
Calibrador 1 TROPONINA
Calibrador 2 TROPONINA
6. PROCEDIMIENTO

2. Utilizar el cartucho “TNIU” y un cono “TNIU” para cada muestra, control o estándar a
utilización.
3. La prueba se identifica con el código “TNIU” en el sistema. El calibrador, identificados
obligatoriamente como S1 Y S2, debe utilizarse en doble. Si deben probarse los
controles se identificara por “C1” y “C2”.
4. Colocar los cartuchos “TNIU”. Verificar la correcta concordancia de los códigos (colores
7. RESULTADOS:
El equipo tres lecturas de fluorescencia en la cubeta de lectura para cada una de las pruebas.
8. INTERPRETACION:
0.01 µg/L
*Los sueros con concentraciones en prolactina superiores a 30 µg/L deben ser repetidas
después de diluir en el diluyente TNI Ultra.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ser validados
de cada 28 días.


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
INMUNOENSAYO
LINEAL
(LIA)

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
LIA (Inmunoensayo Lineal) TORCH IgG y TORCH IgM
1. MARCADORES:
 Detección de anticuerpos IgG y IgM contra el Toxoplasma Gondii, el virus de la

rubeola, el citomegalovirus (CMV) y los virus del herpes simple tipo 1 y 2 (VHS-1/2)
2. MÉTODO:
 LIA (Inmunoensayo Lineal)
3. PRINCIPIO:
Unos antígenos recombinantes y lisados de célula entera altamente purificados se fijan en
tiras de ensayo con membrana de nitrocelulosa.
1. Las tiras de ensayo se incuban con la muestra diluida del suero o plasma, y los
anticuerpos específicos se ligan con los antígenos patógenos en las tiras de ensayo.
2. A continuación se enjuagan los anticuerpos no ligados.
3. En una segunda fase, las tiras se incuban con anticuerpos de inmunoglobulinas de tipo
IgG y IgM antihumanos que se han conjugado con peroxidasa de rábano.
4. A continuación, se enjuagan los anticuerpos conjugados no ligados.
5. Los anticuerpos ligados de manera específica se detectan con una reacción antígeno-
anticuerpo, aparecerá una banda oscura en el lugar correspondiente de la tira.
En el extremo superior de las tiras de ensayo hay unas bandas de control:

a) El control de reacción, situado bajo el número de la tira, debe mostrar una reacción en
cada suero o muestra de plasma.
b) Los controles de conjugado (específicos para la clase Ig). Si se utiliza la tira de ensayo
específica para IgG para la detección de anticuerpos IgG, la banda de control de
conjugado IgG muestra una reacción clara. En el caso de una prueba específica para
IgM, la banda de control de IgM debe mostrar una reactividad positiva.
c) “Control de corte”; La intensidad de esta banda permite evaluar la reactividad de cada
una de las bandas de antígeno.
4. MUESTRA:
 Suero o plasma humano(citrato, ácido etilendiaminotetraacético,heparina,CPD)

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
 Bandejas de incubación
 Agua desionizada
 Pinzas de plástico
 Mesa mezcladora
 Mezclador vortex u otro tipo de rotador
 Bomba de vacío u otro dispositivo correspondiente
 Probetas graduadas de 50 ml y 100 ml
 Micropipeta automática de volumen variable (20- 200 ul y 100 – 1000 ul)
 Temporizador
 Papel absorbente
 Reactivos provisto en el kit.
6. PROCEDIMIENTO
Antes de comenzar la prueba, deje temperar todos los reactivos a una temperatura de entre
18°C y 25°C (temperatura ambiente) durante 30 minutos como mínimo.
1. Preparación de las tiras de ensayo.
a) Moje las tiras en 2 ml de buffer de lavado A (la leche desnatada en polvo se disuelve
en primer lugar en el concentrado de solución A. Después se completa con agua
desionizada hasta el volumen final. Dilución 1 + 9)
No toque la tira con las manos sin protección; use unas pinzas. El número de la tira
queda hacia arriba. Coloque cada tira en un pocillo separado en la bandeja de
incubación. Las tiras deben sumergirse por completo.
2. Incubación de muestras
a) Se pipetean 20 ul de una muestra no diluida (suero humano o plasma) por cada
mezcla de incubación en la tira de ensayo (dilución 1 + 100)
b) Pipetee la muestra en un extremo de la tira sumergida en el buffer de lavado A y
mezcle cuanto antes, agitando cuidadosamente la bandeja de incubación. Cubra la
bandeja de incubación con una tapa de plástico y colóquela en el mezclador.
c) Incube durante 1 hora agitando suavemente.
3. Lavado
a) Retire cuidadosamente la tapa de plástico de las bandejas de incubación.
b) Succione cuidadosamente la dilución de suero de cada pocillo.
c) Pipetee 2 ml de buffer de lavado A listo para su uso en cada pocillo, lave durante 5
minutos agitando suavemente y a continuación succione la solución de lavado A.
4. Incubación con conjugado
a) Añada 2 ml de solución de conjugado lista para su uso (2000 ml buffer A + 20 ul de
conjugado) e incube durante 45 minutos agitando suavemente.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
b) Cubra la bandeja de incubación con una tapa de plástico y colóquela en el

mezclador.
5. Lavado
6. Reacción de sustrato
a) Añada 1.5 ml de solución de sustrato lista para su uso e incube durante 8 minutos
agitano durante 8 minutos agitando suavemente.
7. Detener la reacción
a) Retire la solución de sustrato.
b) Lave al menos tres veces, de forma breve, con agua desionizada.
8. Secar las tiras
a) Seque las tiras entre dos capas de papel absorbente durante 2 horas antes del
análisis.
b) Retire las tiras cuidadosamente del agua con unas pinzas de plástico. Guarde las
tiras protegiéndolas de la luz.
7. CRITERIOS DE VALIDACIÓN DEL ENSAYO:
No utilice la interpretación automática sin seguir las indicaciones descritas a continuación en

cuanto a la interpretación.
Se puede proceder al análisis de la prueba siempre que se cumplan los siguientes criterios:
a) Banda de control de reacción claramente teñida, banda oscura.
b) Categoría de anticuerpos (segunda banda); la banda de control de conjugado IgG o
IgM debe mostrar una coloración débil e indefinida.
c) Control de corte (tercera banda) teñida en un color más débil pero visible.
8. CALCULO DE RESULTADOS:
El análisis de las tiras de ensayo se puede realizar de forma visual o informatizada, usando el
software de análisis de tiras de ensayo recomScan. El software recomScan está diseñado para
respaldar la evaluación de las tiras de ensayo. Para obtener más información y unas
instrucciones adecuadas acerca de la evaluación asistida por ordenador, consulte con
MIKROGEN .Las instrucciones siguientes hacen referencia a la evaluación visual.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
VALORACIÓN DE LAINTENSIDAD DE LA BANDA
a. Anote en el formulario de evaluación adjunto la fecha y el número de lote, así como las
categorías de anticuerpos detectadas.
b. Introduzca los números de identificación de las muestras en el formulario de evaluación.
c. Peque con pegamento las tiras de ensayo correspondiente en los campos del formulario
de evaluación adecuados. Ajuste la tira de ensayo con las bandas de control de reacción en
las líneas marcadas. A continuación fije con una cinta adhesiva transparente las tiras de
ensayo a la izquierda de las líneas marcadas (no pegue sobre la banda de control de
reacción). Pegar toda la tira de ensayo de manera inadecuada puede modificar la
coloración.
d. A continuación, identifique las bandas de las tiras de ensayo que se han desarrollado
mediante la cinta de control impresa del formulario de evaluación y anote en él esta
información. Para ello, evalúe la intensidad de las bandas que se presentan, siguiendo los
datos de las tablas del inserto por separado para cada categoría de inmunoglobulina
correspondiente .La evaluación de las intensidades de banda específicas para T.gondii,
CMV y VHS ½ se describe en las tablas del inserto.
La evaluación de la banda principal de la rubeola se lleva a cabo comparando con la
intensidad de la banda de vacunación de la rubeola (es decir, Ru-co).La evaluación de la
banda principal de la rubeola se valúa de acuerdo con el esquema de interpretación
general que se puede visualizar en el inserto. (ver inserto.)
9. INTERPRETACION:
Ver inserto de prueba.
Control Interno: Se corren junto con las muestras controles con concentraciones conocidas,
estos deben estar dentro de los valores ya establecidos de acuerdo a la concentración que
tenga.


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
LIA (Inmunoensayo Lineal) ANA / ENA

1. MARCADORES:
Detección de anticuerpos IgG contra antígenos nucleares y citoplasmáticos en enfermedades

reumáticas autoinmunes (conectivopatías)
2. MÉTODO:
LIA (Inmunoensayo Lineal)

3. PRINCIPIO:
Las tiras de ensayo de membrana de nitrocelulosa hay fijadas proteínas recombinantes (rnp68,
rnpa,rnpc,sMb,SmD,Ro/SSA60,Ro/SSA52,La/SSB,Rib-P,PCNA,CENPB,Scl70,Jo-1),histona nativa,
ADN bicatenario humano y una mezcla de SmD de fabricación sintética.
a) Las tiras de ensayo se incuban con la muestra diluida del suero o plasma, y los anticuerpos
específicos se ligan con los antígenos patógenos en las tiras de ensayo.
b) A continuación se enjuagan los anticuerpos no ligados.
c) En una segunda fase, las tiras se incuban con anticuerpos de inmunoglobulinas de tipo IgG
y IgM antihumanos que se han conjugado con peroxidasa de rábano.
d) A continuación, se enjuagan los anticuerpos conjugados no ligados.
e) Con la reacción de color catalizado por la peroxidasa se comprueban los anticuerpos

específicos ligados. Si ocurre una reacción antígeno – anticuerpo, aparecerá una barra
oscura en el lugar correspondiente en la tira.

b) Los controles de conjugado (específicos para la clase Ig). Si se utiliza la tira de ensayo
específica para IgG para la detección de anticuerpos IgG, la banda de control de conjugado
IgG muestra una reacción clara. En el caso de una prueba específica para IgM, la banda de
control de IgM debe mostrar una reactividad positiva.
c) “Control de corte”; La intensidad de esta banda permite evaluar la reactividad de cada una
de las bandas de antígeno.
4. MUESTRA:

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
 Mesa mezcladora
 Temporizador
6. PROCEDIMIENTO
a. Moje las tiras en 2 ml de buffer de lavado A (la leche desnatada en polvo se disuelve en
primer lugar en el concentrado de solución A. Después se completa con agua desionizada
hasta el volumen final. Dilución 1 + 9)
No toque la tira con las manos sin protección; use unas pinzas. El número de la tira queda hacia
arriba. Coloque cada tira en un pocillo separado en la bandeja de incubación. Las tiras deben
sumergirse por completo.
a) Se pipetean 20 ul de una muestra no diluida (suero humano o plasma) por cada mezcla de
incubación en la tira de ensayo (dilución 1 + 100)
b) Pipetee la muestra en un extremo de la tira sumergida en el buffer de lavado A y mezcle
cuanto antes, agitando cuidadosamente la bandeja de incubación. Cubra la bandeja de
incubación con una tapa de plástico y colóquela en el mezclador.
3. Lavado

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001

b) Cubra la bandeja de incubación con una tapa de plástico y colóquela en el mezclador.
5. Lavado
a) Añada 1.5 ml de solución de sustrato lista para su uso e incube durante 8 minutos agitano
durante 8 minutos agitando suavemente.
8. Secar las tiras
a) Seque las tiras entre dos capas de papel absorbente durante 2 horas antes del análisis.
b) Retire las tiras cuidadosamente del agua con unas pinzas de plástico. Guarde las tiras
protegiéndolas de la luz.

b) Categoría de anticuerpos (segunda banda); la banda de control de conjugado IgG o IgM
debe mostrar una coloración débil e indefinida.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
a) Anote en el formulario de evaluación adjunto la fecha y el número de lote, así como

las categorías de anticuerpos detectadas.
b) Introduzca los números de identificación de las muestras en el formulario de
evaluación.
c) Peque con pegamento las tiras de ensayo correspondiente en los campos del
formulario de evaluación adecuados. Ajuste la tira de ensayo con las bandas de control
de reacción en las líneas marcadas. A continuación fije con una cinta adhesiva
transparente las tiras de ensayo a la izquierda de las líneas marcadas (no pegue sobre
la banda de control de reacción). Pegar toda la tira de ensayo de manera inadecuada
puede modificar la coloración.
d) A continuación, identifique las bandas de las tiras de ensayo que se han desarrollado
información. Para ello, evalúe la intensidad de las bandas que se presentan, siguiendo
los datos de las tablas del inserto por separado para cada categoría de
inmunoglobulina correspondiente .La evaluación de las intensidades de banda
específicas para T.gondii, CMV y VHS ½ se describe en las tablas del inserto.
intensidad de la banda de vacunación de la rubeola (es decir, Ru-co).La evaluación de
la banda principal de la rubeola se valúa de acuerdo con el esquema de
interpretación general que se puede visualizar en el inserto. (ver inserto.)
9. INTERPRETACION:
tenga.


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
LIA (Inmunoensayo Lineal) ANCA
1. MARCADORES:
Detección de anticuerpos IgG contra la mieloperoxidasa, la proteinasa 3 y la membrana basal

glomerular .
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
Durante el primer paso de incubación de 30 minutos (TA, agitación), los anticuerpos fijados
reaccionan específicamente con anticuerpos IgG –anti- humana, conjugados con fosfatasa
alcalina. Terminando el tiempo de incubación, el conjugado en exceso es separado de los
complejos inmunes de la fase sólida por un paso adicional de lavado.
La fosfatasa alcalina toma la solución incolora de incubación en una solución violeta, que a su
vez precipita sobre los dots tiñéndolos diferencialmente de púrpura. Luego de 10-12 minutos
de incubación bajo agitación, la reacción es detenida mediante un paso de lavado.
Las tiras se dejan secar durante por lo menos 30 minutos, presionando suavemente el lado
reactivo sobre papel absorbente. Los resultados son considerados positivos si la coloración del
dot prueba es más intensa que la coloración del control negativo.
4. MUESTRA:
 Mesa mezcladora
 Temporizador

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
6. PROCEDIMIENTO:
1. Colocar tiras (A) en la canaleta respectiva con el lado reactivo hacia arriba. Dispensar 2 ml
de solución buffer (Dilución 1 + 9) en cada canaleta.
2. Cubrir la bandeja e incubar bajo agitación durante 10 minutos a temperatura ambiente.
3. Descartar la solución de lavado invirtiendo cuidadosamente la bandeja de incubación.
Secar los borde de la bandeja con papel absorbente para retirar la humedad remanente.
4. Agregar 1.5 ml de diluyente de muestra (C) y 10 ul de suero o plasma del paciente en las
canaletas respectivas.
5. Cubrir la bandeja e incubar bajo agitación durante 30 minutos a temperatura ambiente.
6. Repetir el paso de lavado. (PASO 3)
7. Agregar 1.5 ml de sustrato a cada canaleta.
8. Cubrir la bandeja, incubar bajo agitación a Temperatura ambiente durante 10-12 minutos.
9. Repetir el paso de lavado. (PASO 3)
10. Secar las tiras de bandeja y secar la membrana presionando suavemente el lado respectivo
de la tira sobre papel absorbente. Luego de por lo menos 30 minutos las tiras pueden ser
leídas e interpretadas.
Los resultados deben ser interpretados luego de que las tiras se hayan secado durante por lo
menos 30 minutos.
El dot del control positivo debe ser positivo en todos los casos. La coloración del dot asegura
que le test corrió correctamente y que los componentes del kit no están degradados. Si el
control positivo no muestra coloración los resultados no pueden ser interpretados.
El dot del control negativo demuestra el grado de unión a anticuerpos no específicos de la

muestra. La coloración del dot corresponde a la mínima intensidad por encima de la cual la
muestra se considera positiva.
Los dots de la prueba están cubiertos con antígenos específicos y el grado de coloración
resultante provee información sobre el grado de unión de los anticuerpos presentes en la
muestra. Así pues, la intensidad en la coloración depende del título de anticuerpos de la
muestra.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
La muestra del paciente es positiva respecto a determinados anticuerpos si la coloración del

dot en consideración es más intensa que la del control negativo.
9. INTERPRETACIÓN:
tenga.


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
LIA (Inmunoensayo Lineal) VIH

1. MARCADORES:
Detección de anticuerpos IgG contra el virus de la inmunodeficiencia humana 1 (VIH Tipo 1)

así como VIH tipo 2.
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
Unos antígenos recombinantes VIH altamente purificados se fijan en tiras de ensayo con una
membrana de nitrocelulosa.
a) Las tiras de ensayo se incuban con la muestra diluida del suero o plasma. Se añaden
anticuerpos específicos en los antígenos del agente en la tira de ensayo.
b) Los anticuerpos no ligados se aclaran a continuación
c) En un segundo paso, las tiras se incuban con anticuerpos de inmunoglobulinas (IgG) anti-
humanos que se han conjugado con peroxidasa de rábano.
d) Con la reacción de color catalizado por la peroxidasa se comprueban los anticuerpos

d) El control de reacción, situado bajo el número de la tira, debe mostrar una reacción en
e) El control de conjugado (específicos para la clase IgG), que sirve para comprobar la clase
de anticuerpos detectada. Si se utiliza la tira de ensayo para la detección de anticuerpos
IgG, la barra de control de conjugado IgG muestra claramente una barra.
f) “Control de corte”; La intensidad de esta banda permite evaluar la reactividad de cada
una de las bandas de antígeno.
4. MUESTRA:

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
 Mesa mezcladora
 Temporizador
6. PROCEDIMIENTO
a. Moje las tiras en 2 ml de buffer de lavado A (la leche desnatada en polvo se disuelve en
c) Incube durante 4 horas agitando suavemente.
11. Lavado


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
13. Lavado
16. Secar las tiras

a) Anote en el formulario de evaluación adjunto la fecha y el número de lote, así como las
b) Introduzca los números de identificación de las muestras en el formulario de evaluación.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
c) Peque con pegamento las tiras de ensayo correspondiente en los campos del formulario
de evaluación adecuados. Ajuste la tira de ensayo con las bandas de control de reacción
en las líneas marcadas. A continuación fije con una cinta adhesiva transparente las tiras
de ensayo a la izquierda de las líneas marcadas (no pegue sobre la banda de control de
coloración.
intensidad de la banda de vacunación de la rubeola (es decir, Ru-co).La evaluación de
la banda principal de la rubeola se valúa de acuerdo con el esquema de interpretación
9. INTERPRETACIÓN:
tenga.


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
LIA (Inmunoensayo Lineal) TREPONEMA IgG /IgM
1. MARCADORES:
Detección de anticuerpos IgG e IgM contra el Treponema pallidum.
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
Unos antígenos recombinantes VIH altamente purificados se fijan en tiras de ensayo con una
membrana de nitrocelulosa.
a) Las tiras de ensayo se incuban con la muestra diluida del suero o plasma. Se añaden
anticuerpos específicos en los antígenos del agente en la tira de ensayo.
b) Los anticuerpos no ligados se aclaran a continuación
c) En un segundo paso, las tiras se incuban con anticuerpos de inmunoglobulinas (IgG o IgM)
antihumanos que se han conjugado con peroxidasa de rábano.
d) Con la reacción de color catalizado por la peroxidasa se comprueban los anticuerpos

b) Los controles de conjugado (IgG o IgM), permiten comprobar el tipo de tira y de conjugado
utilizados (clases específicas de Ig). Si se Utiliza la tira de ensayo específica de IgG para la
detección de un reacción clara.En el caso de una prueba específica de IgM debe mostrar
una reactividad positiva.
c) “Control de corte”; La intensidad de esta banda permite evaluar la reactividad de cada una
de las bandas de antígeno.
4. MUESTRA:

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
 Mesa mezcladora
 Temporizador
6. PROCEDIMIENTO:
a) Moje las tiras en 2 ml de buffer de lavado A (la leche desnatada en polvo se disuelve en
3. Lavado


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
5. Lavado
8. Secar las tiras

a) Anote en el formulario de evaluación adjunto la fecha y el número de lote, así como las
b) Introduzca los números de identificación de las muestras en el formulario de evaluación.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
c) Peque con pegamento las tiras de ensayo correspondiente en los campos del formulario
de evaluación adecuados. Ajuste la tira de ensayo con las bandas de control de reacción
en las líneas marcadas. A continuación fije con una cinta adhesiva transparente las tiras
de ensayo a la izquierda de las líneas marcadas (no pegue sobre la banda de control de
coloración.
intensidad de la banda de vacunación de la rubeola (es decir, Ru-co).La evaluación de la
banda principal de la rubeola se valúa de acuerdo con el esquema de interpretación
9. INTERPRETACIÓN:
tenga.


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ENSAYO POR
INMUNOABSORCIÓN
LIGADO A ENZIMAS
(ELISA)

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ELISA (Ensayo de fluorescencia ligado a enzima) TORCH IgG
1. MARCADORES:
 Anticuerpos IgG anti – Toxoplasma gondii

 Anticuerpos IgG anti – Citomegalovirus
 Anticuerpos IgG anti – Rubeola
 Anticuerpos IgG anti – Herpes de tipo 1 y 2.
2. MÉTODO:
ELISA (Ensayo de fluorescencia ligado a enzima)
3. PRINCIPIO:
Las paredes de los micropocillos son como la fase sólida y están recubierta de antígeno soluble
inactivo de Toxoplasma gondii, Citomegalovirus, Rubeola y Herpes de tipo I y II.
Los pocillos de microtitulación son la fase sólida los cueles están recubiertos con el antígeno
Herpes Simplex Virus tipo 1.
Las muestras de pacientes diluidas y los controles listos para usar se pipetean en estos pocillos.
Durante la incubación los Anticuerpos de Toxoplasma gondii, Citomegalovirus, Rubeola y
Herpes de tipo I y II de especímenes positivos y controles se unen a los antígenos inmovilizado.
Después de una etapa de lavado para eliminar la muestra no unida y el material de control, se
dispensan anticuerpos IgG antihumanos conjugados con peroxidasa de rábano picante en los
pocillos. Durante una segunda incubación, este conjugado anti-IgG se une específicamente a
los anticuerpos IgG dando como resultado la formación de complejos inmunes ligados a
enzimas.
Después de una segunda etapa de lavado para eliminar el conjugado no unido, los
inmunocomplejos formados (en caso de resultados positivos) se detectan por incubación con
sustrato de TMB y desarrollo de un color azul. El color azul se vuelve amarillo al detener la
reacción del indicador enzimático con ácido sulfúrico.
La intensidad de este color es directamente proporcional a la cantidad de anticuerpos IgG
específicos contra los virus de Toxoplasma gondii, Citomegalovirus, Rubeola y Herpes de tipo I
y II en la muestra del paciente. La absorbancia a 450 nm se lee usando un lector de placas de
microtitulación ELISA.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
4. MUESTRA:
 Sistema de lavado de policubetas (manual o automático)
Tips
Microplaca con pocillos
Calibradores Toxoplasma gondii, Citomegalovirus, Rubeola y Herpes de tipo I y II.
Controles Toxoplasma gondii, Citomegalovirus, Rubeola y Herpes de tipo I y II.
Reactivos provisto en el kit.
Lector de ELISA
6. PROCEDIMIENTO
Antes de comenzar el ensayo, diluya la solución de lavado (dilución: 1+19), prepare las
muestras del paciente (10 ul de muestra + 1 ml de diluyente de muestra) y establezca
cuidadosamente el plan de distribución e identificación incluido en el kit para todas las
muestras y controles.
1. Seleccione el número requerido de tiras de microtitulación o pocillos e insértelos en el

soporte. Por favor, asigne al menos:
 1 pocillo para blanco.
 1 pozo para el Control negativo.
 4 pocillos para el Estándar 1-3.
 1 pozo para la Control positivo.
NOTA: Para Herpes tipo I y II

Por favor, asigne al menos:
 1 pocillo Blanco.
 1 pozo Control Negativo.
 2 pozos para el CUT-OFF.
 1 pozo Control Positivo.
2. Dispensar
 100 μL de Control negativo
 100 μL de Estándar 1
 100 μL del Estándar 3
 100 μL de Control positivo

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
 100 μL de cada muestra con nuevas puntas desechables en pozos apropiados.

NOTA: Para herpes tipo I y II se coloca 100 ul en cada uno de los pocillos de acuerdo al orden
asignado.
3. Cubra los pocillos con papel de aluminio suministrado en el kit. Incubar durante 60 minutos a
37 ° C.
4. Sacuda rápidamente el contenido de los pozos.
Enjuague los pocillos 5 veces con solución de lavado diluida (300 μL por pocillo). Golpea los
pozos bruscamente sobre papel absorbente para eliminar las gotas residuales.
Nota IMPORTANTE:
La sensibilidad y precisión de este ensayo está marcadamente influenciada por el correcto
funcionamiento del lavado ¡procedimiento!
5. Distribuya 100 μL de Conjugado enzimático en cada pocillo, excepto A1.

6. Incube durante 30 minutos a temperatura ambiente (20 ° C a 25 ° C).
¡No exponga a la luz solar directa!
8. Agregue 100 μL de solución de sustrato en todos los pocillos.
9. Incube durante exactamente 15 minutos a temperatura ambiente (20 ° C a 25 ° C) en la

oscuridad.
10. Detenga la reacción enzimática agregando 100 μL de solución de parada a cada pocillo.
11. Cualquier color azul desarrollado durante la incubación se vuelve amarillo.

Nota: ¡Las muestras de pacientes altamente positivas pueden causar precipitados oscuros del
cromógeno!
12. Leer las absorbancias de cada pocillo a 450nm.
La ejecución de la prueba puede considerarse válida siempre que se cumplan los siguientes
criterios:
 Blanco del sustrato en: valor de absorbancia inferior a 0.10
 Control Negativo: valor de absorbancia inferior a 0.20
 Estándar 1 : valor de absorbancia entre 0.35 - 0.85
 Control Positivo: valor de absorbancia entre 0.65 - 3.00

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
Para obtener resultados cuantitativos en IU / mL, grafique los valores de absorbancia (media)
de Control Negativo y Estándar 1, 2 y 3 en papel cuadriculado (lineal / lineal) en un sistema de
coordenadas contra sus concentraciones correspondientes (0, 50, 100 y 200 UI / mL) y dibujar
una curva de calibración estándar (valores de absorbancia en la vertical eje y, concentraciones
en el eje x horizontal).
Lea los resultados de esta curva estándar empleando los valores de absorbancia (media) de
cada espécimen y control de paciente.
Todos los programas de computadora adecuados disponibles se pueden usar para la lectura y
el cálculo automáticos de resultados. Se pueden utilizar las siguientes funciones matemáticas:
ajuste de la curva de 4 PL (Logística de 4 parámetros), regresión lineal o cálculo de punto a
punto de la curva estándar. Utilizamos el programa de regresión DRG para Windows (regresión
de 4 parámetros de Rodbart). Si se usa otro software de regresión, los valores obtenidos
deben ser validados por el usuario.
Nota: Para Herpes tipo I y II:

Valor medio de absorbancia del control de corte [CO]
Calcule el valor medio de absorbancia de las dos (2) determinaciones de control de corte (por
ejemplo, en C1 / D1). Ejemplo: (0.44 + 0.46): 2 = 0.45 = CO
9. INTERPRETACION:
< 45 IU/ml NO REACTIVO

Toxoplasma gondii IgG 45 - 55 IU/ml INDETERMINADO
> 55 IU/ml REACTIVO
< 9 DU/ml NO REACTIVO
Citomegalovirus IgG
9 - 11 DU/ml INDETERMINADO
> 11 DU/ml REACTIVO
< 10 IU/ml NO REACTIVO
Rubeola IgG
10 - 15 IU/ml INDETERMINADO
> 15 IU/ml REACTIVO
> 0.812 REACTIVO
Herpes II IgG 0.665 - 0.812 INDETERMINADO
< 0.665 NO REACTIVO
> 0.935 REACTIVO
Herpes I IgG
0.765 - 0.935 INDETERMINADO
< 0.765 NO REACTIVO

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
Se recomienda usar muestras de control de acuerdo con las regulaciones estatales y federales.
Se recomienda el uso de muestras de control para asegurar la validez diaria de los resultados.
Use controles en niveles normales y patológicos.
También se recomienda utilizar los programas de evaluación de calidad nacionales o
internacionales para garantizar la precisión de los resultados.
Si los resultados del ensayo no se ajustan a los rangos aceptables establecidos de materiales de
control, los resultados del paciente deben considerarse no válidos.
En este caso, verifique las siguientes áreas técnicas: dispositivos de medición y temporización;
fotómetro, fechas de caducidad de los reactivos, condiciones de almacenamiento e incubación,
métodos de aspiración y lavado.


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ELISA (Ensayo de fluorescencia ligado a enzima) TORCH IgM
1. MARCADORES:
 Anticuerpos IgM anti – Toxoplasma gondii

 Anticuerpos IgM anti – Citomegalovirus
 Anticuerpos IgM anti – Rubeola
 Anticuerpos IgM anti – Herpes de tipo 1 y 2.
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
Las muestras se diluyen con diluyente de muestra y se incuban adicionalmente con IgG-RF-
Sorbent, que contiene anticuerpos anti-humanos de clase IgG hiperinmunes para eliminar
inhibición competitiva de IgG específica y para eliminar los factores reumatoides. Este
pretratamiento evita resultados falsos negativos o falsos positivos.
Las paredes de los micropocillos son como la fase sólida y están recubierta de antígeno soluble
inactivo de Toxoplasma gondii, Citomegalovirus, Rubeola y Herpes de tipo I y II.
Las muestras pretratadas, las normas listas para usar y el control listo para usar se pipetean en
estos pozos. Durante la incubación, anticuerpos específicos de Toxoplasma gondii de
especímenes positivos y estándares se unen a los antígenos inmovilizados.
Después de una etapa de lavado para eliminar la muestra no unida, se dispensan en los
pocillos anticuerpos IgM antihumano conjugados con peroxidasa de rábano picante estándar y
de control. Durante una segunda incubación, este conjugado anti-IgM se une específicamente
a Anticuerpos IgM que resultan en la formación de complejos inmunes ligados a enzimas.
Después de una segunda etapa de lavado para eliminar el conjugado no unido, los
inmunocomplejos formados (en caso de resultados positivos) se detectan por incubación con
sustrato de TMB y desarrollo de un color azul. El color azul se vuelve amarillo al detenerse
la reacción del indicador enzimático con ácido sulfúrico.
La intensidad de este color es directamente proporcional a la cantidad de anticuerpo IgM
específico de Toxoplasma gondii en la muestra. La absorbancia a 450 nm se lee usando un
lector de placas de microtitulación ELISA.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
4. MUESTRA:
Tips
Microplaca con pocillos
Calibradores Toxoplasma gondii, Citomegalovirus, Rubeola y Herpes de tipo I y II.
Controles Toxoplasma gondii, Citomegalovirus, Rubeola y Herpes de tipo I y II.
Reactivos provisto en el kit.
Lector de ELISA
6. PROCEDIMIENTO
Antes de comenzar el ensayo, diluya la solución de lavado (dilución: 1+19), prepare las
muestras del paciente (10 ul de muestra + 1 ml de diluyente de muestra) y establezca
cuidadosamente el plan de distribución e identificación incluido en el kit para todas las
muestras y controles.
Preparación de muestra:
 Diluir cada muestra 1 + 50 con diluyente de muestra;
p.ej. 10 μL de muestra + 0.5 mL de Diluyente de Muestra. Mezclar bien.
 Diluir esta muestra prediluida 1 + 1 con IgG-RF-Sorbent
p.ej. 60 μL de muestra prediluida + 60 μL de IgG-RF-Sorbente. Mezclar bien
 Deje reposar durante al menos 15 minutos a temperatura ambiente, mezcle bien o
durante la noche a 2 ° C - 8 ° C y mezcle bien de nuevo.
 Tome 100 μL de estas muestras pretratadas para el ELISA.
1. Seleccione el número requerido de tiras de microtitulación o pocillos e insértelos en el
soporte. Por favor, asigne al menos:
 1 pocillo para blanco.
 1 pozo para el Control negativo.
 4 pocillos para el Estándar 1-3.
 1 pozo para la Control positivo.
NOTA: Para Herpes tipo I y II. Por favor, asigne al menos:
 1 pocillo Blanco.
 1 pozo Control Negativo.
 2 pozos para el CUT-OFF.
 1 pozo Control Positivo.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
2. Dispensar
 100 μL de Control negativo
 100 μL del Estándar 3
 100 μL de Control positivo
 100 μL de cada muestra con predilución descrito líneas arriba.
NOTA: Para herpes tipo I y II se coloca 100 ul en cada uno de los pocillos de acuerdo al orden
asignado.
3. Cubra los pocillos con papel de aluminio suministrado en el kit. Incubar durante 60
minutos a 37 ° C.
Nota IMPORTANTE:
La sensibilidad y precisión de este ensayo está marcadamente influenciada por el correcto
funcionamiento del lavado ¡procedimiento!
5. Distribuya 100 μL de Conjugado enzimático en cada pocillo, excepto A1.
6. Incube durante 30 minutos a temperatura ambiente (20 ° C a 25 ° C).
¡No exponga a la luz solar directa!
8. Agregue 100 μL de solución de sustrato en todos los pocillos.
9. Incube durante exactamente 15 minutos a temperatura ambiente (20 ° C a 25 ° C) en la
oscuridad.
10. Detenga la reacción enzimática agregando 100 μL de solución de parada a cada pocillo.
11. Cualquier color azul desarrollado durante la incubación se vuelve amarillo.
Nota: ¡Las muestras de pacientes altamente positivas pueden causar precipitados oscuros del
cromógeno!
La ejecución de la prueba puede considerarse válida siempre que se cumplan los siguientes
criterios:
 Blanco del sustrato en: valor de absorbancia inferior a 0.10
 Control Negativo: valor de absorbancia inferior a 0.20
 Control Positivo: valor de absorbancia entre 0.65 - 3.00

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
Para obtener resultados cuantitativos en IU / mL, grafique los valores de absorbancia (media)
de Control Negativo y Estándar 1, 2 y 3 en papel cuadriculado (lineal / lineal) en un sistema de
coordenadas contra sus concentraciones correspondientes (0, 50, 100 y 200 UI / mL) y dibujar
una curva de calibración estándar (valores de absorbancia en la vertical eje y, concentraciones
en el eje x horizontal).
Lea los resultados de esta curva estándar empleando los valores de absorbancia (media) de
cada espécimen y control de paciente.
Todos los programas de computadora adecuados disponibles se pueden usar para la lectura y
el cálculo automáticos de resultados. Se pueden utilizar las siguientes funciones matemáticas:
ajuste de la curva de 4 PL (Logística de 4 parámetros), regresión lineal o cálculo de punto a
punto de la curva estándar. Utilizamos el programa de regresión DRG para Windows (regresión
de 4 parámetros de Rodbart). Si se usa otro software de regresión, los valores obtenidos
deben ser validados por el usuario.
Nota: Para Herpes tipo I y II:

Valor medio de absorbancia del control de corte [CO]
Calcule el valor medio de absorbancia de las dos (2) determinaciones de control de corte (por
ejemplo, en C1 / D1). Ejemplo: (0.44 + 0.46): 2 = 0.45 = CO
9. INTERPRETACION:

Toxoplasma gondii IgM 23 -28 DU/ml INDETERMINADO
> 28 DU/ml REACTIVO
Citomegalovirus IgM 45 - 55 DU/ml INDETERMINADO
> 55 DU/ml REACTIVO
Rubeola IgM
68 - 83 IU/ml INDETERMINADO
> 83 IU/ml REACTIVO
> 0.954 REACTIVO
Herpes II IgM 0.867 - 0.954 INDETERMINADO
< 0.867 NO REACTIVO

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
Se recomienda usar muestras de control de acuerdo con las regulaciones estatales y federales.
Se recomienda el uso de muestras de control para asegurar la validez diaria de los resultados.
Use controles en niveles normales y patológicos.
También se recomienda utilizar los programas de evaluación de calidad nacionales o
internacionales para garantizar la precisión de los resultados.
Si los resultados del ensayo no se ajustan a los rangos aceptables establecidos de materiales de
control, los resultados del paciente deben considerarse no válidos.
En este caso, verifique las siguientes áreas técnicas: dispositivos de medición y temporización;
fotómetro, fechas de caducidad de los reactivos, condiciones de almacenamiento e incubación,
métodos de aspiración y lavado.


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ELISA (Ensayo de fluorescencia ligado a enzima) Helicobacter Pylori
12. MARCADORES:
 Anticuerpos anti – H.Pylori IgG

 Anticuerpos anti – H.Pylori IgM
13. MÉTODO:
 ELISA (Ensayo de fluorescencia ligado a enzima)
14. PRINCIPIO:
Los reactivos requeridos para un análisis secuencial de ELISA incluyen el antígeno inmovilizado,
el anticuerpo circulante y el anticuerpo de enzima-ligada especies-específicos.
En este procedimiento la inmovilización toma lugar durante el ensayo de la superficie del pozo
y el antígeno de H.pylori biotinilado exógeno es agregado.
Simultáneamente, el complejo es depositado en el pozo a través de la reacción de alta afinidad

de estreptavidina y el antígeno biotinilado.
Después del periodo de incubación, el pozo se lava para separar los componentes no unidos
por la aspiración o la decantación. La enzima ligada al anticuerpo específico de la especie (anti-
H IgG o M) se agrega entonces al pozo. Este conjugado se une al complejo inmune que se
formó.
La enzima conjugada de anti IgG, IgM o IgA humana que se une al complejo inmune en una
segunda incubación es separada del material sin reacción por un paso de lavado. La actividad
de la enzima en esta fracción es directamente proporcional a la concentración de anticuerpo
en el espécimen.
15. MUESTRA:
 Sistema de lavado de policubetas (manual o automático)

 Tips
 Microplaca con pocillos
 Calibradores anti H.Pylori

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
17. PROCEDIMIENTO

2. Marque los pozos de la microplaca para cada suero de referencia, control y muestra de
paciente.
3. Pipetear 25 µl del suero de referencia apropiado, control o muestra de paciente diluida
1/100 (5 µl de suero + 495 µl de diluyente de muestra ) para la determinación de IgG,
pipetear 50 µl del suero de referencia apropiado, control o muestra de paciente diluida.
4. Agitar la microplaca suavemente por 20-30 segundos para mezclar y cubrir.
5. Incubar 60 minutos a temperatura ambiente.
6. Realizar 3 lavados usando el lavador
7. Añadir 100µl de reactivo de enzima de H.pylori a todos los pocillos. Agregue siempre los
reactivos en el mismo orden para minimizar las diferencias de tiempo de reacción
entre los pozos.
8. Cubrir e incubar durante 30 minutos a temperatura ambiente.
9. Realizar 3 lavados usando el lavador
10. Adicionar 100 µl de solución de sustrato de trabajo a todos los pozos.
11. Incubar a temperatura ambiente 15 minutos.
12. Agregue 50 µl de la solución de parada a cada pocillo y agitar la microplaca suavemente
por 15 – 20 segundos para mezclar.
Para que los resultados del análisis sean considerados válidos deben ser considerados los
siguientes criterios.
1. Absorbancia máxima (100U/ml calibrador) = >1.3

2. La curva dosis-respuesta (intercepta 80% 50%, 20%) debe estar dentro de los
parámetros establecidos.
3. Cuatro de los seis grupos de control de calidad deben estar dentro de los rangos
establecidos.

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
Una curva de referencia se utiliza para comprobar la concentración de anti-H.Pylori en

muestras desconocidas. Usar el Excel ya programado para los cálculos.
20. INTERPRETACION:

Ig G > 20 U/ml
Ig M >40 U/ml
tenga.


AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
ELISA (Ensayo de por inmunoabsorción ligado a enzimas) HTLV I –II (Virus

Linfotrópico Humano)
1. MARCADORES:
 Anticuerpos anti – HTLV I - II
2. MÉTODO:
3. PRINCIPIO:
Los pocillos de la policubeta están recubiertas con antígenos recombinantes de los virus HTLV I
y II. La muestra diluida se incuba en los pocillos. Si los anticuerpos contra uno de los virus
están presentes en la muestra, esto se une a los antígenos del pocillo. El material no unido es
removido por lavado.
En el paso siguiente se agrega el conjugado, que consiste en antígenos de HTLV I y HTLV II

conjugados con peroxidasa. Este se une a los complejos antígenos - anticuerpo, formados
previamente. El conjugado no unido se remueve por lavado. Posteriormente, se agrega una
solución conteniendo tetrametilbencidina y peróxido de hidrógeno.
Las muestras reactivas desarrollan color celeste que vira al amarillo cuando se detiene la
reacción con ácido sulfúrico (Stopper).
4. MUESTRA:

Tips
Cartuchos
Conos
Control positivo HTLV

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
Control negativo HTLV

 Cronómetro
Reactivos provistos en el kit
6. PROCEDIMIENTO
1. Llevar a temperatura ambiente los reactivos y las muestras antes de iniciar la prueba.
2. Preparar el volumen necesario de buffer de lavado.
3. Colocar en el soporte de tiras, el número de pocillos requeridos para la cantidad de
determinaciones a realizar incluyendo 2 pocillos para el control positivo (CP) y 3 para el
control negativo (CN).
4. Dispensar el diluyente de muestra, luego la muestra (M) y los controles según el
siguiente esquema.
MUESTRA CONTROL POSITIVO CONTROL NEGATIVO
Diluyente de Muestra 50 ul 50 ul 50 ul
Control Positivo 50 ul
Control Negativo 50 ul
Muestra 50 ul
5. Para evitar la evaporación, cubrir la placa con la cinta autoadhesiva provista e incubar
30± 2 minutos a 37° ± 1°C.
6. Después de la incubación eliminar por completo el líquido de cada pocillo. Lavar 5 veces
usando 350 µl de buffer de lavado.
7. Agregar 100 µl de conjugado.
8. Incubar 30± 2 minutos a 37°C ± 1°C.
9. Lavar 5 veces usando 350 µl de buffer de lavado.
10. Colocar 100 µl del revelador (preparado en relación 1/10 entre el TAM y el diluyente)
11. Incubar 30 ± 2 minutos a temperatura ambiente (18- 25°C) protegido de la luz.
12. Agregar 100 µl de Stopper a cada pocillo.
13. Leer absorbancia en espectrofotómetro a 450 nm.
*El color de la reacción es estable durante 10 minutos, por los que los resultados deben
leerse dentro de ese lapso.
El ensayo se considera válido si se cumple simultáneamente las siguientes condiciones:

AREA DE INMUNOLOGIA
VERSIÓN: 001
1. El promedio de las absorbancias de los controles negativos debe ser menor o igual a
0.150
2. Eliminar cualquier control negativo con absorbancias mayor a 0.150
3. Si se ha eliminado algún Control Negativo, calculara nuevamente el promedio de los
Controles Negativos. Un ensaya es válido si se aceptan al menos dos de los Controles
Negativos.
4. El promedio de las absorbancias de los controles positivos debe ser mayor a 0.900
5. La diferencia entre el promedio de las absorbancias de los controles positivos y controles
negativos debe ser mayor o igual a 0.750.
8. RESULTADOS:
La presencia o ausencia de anticuerpos anti HTLV I y/o II se determina relacionando la absorbancia
de la muestra respecto al valor del cutt-off
9. INTERPRETACION:

Aquellas con absorbancia mayores al cutt-off REACTIVAS
Aquellas con absorbancia menores al cutt-off NO REACTIVAS
Control Interno: en cada corrida se procesan controles negativos y positivos para luego poder
validar la corrida de acuerdo a los criterios de validación ya antes menciona dos.


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HOSPITAL REGIONAL DOCENTE CLINICO QUIRURGICO

CODIGO: DPCYAP-AI / MTI-001

HOSPITAL REGIONAL DOCENTE CLINICO

DEPARTAMENTO DE PATOLOGIA CLINICA Y

MANUAL DE TECNICAS INMUNOLOGICAS

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Coordinador de Inmunología Coordinadora del SGC Jefe de Laboratorio

 Ley N° 27444, Ley del Procedimiento Administrativo General.

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Prueba Rápida Antígeno de Superficie (Hepatitis B) 8

Análisis de Inmunología Especial

CMIA Perfil de Hormonas Tiroideas - TSH 52

Coordinador de Inmunología Coordinadora del SGC Jefe de Departamento

LIA TORCH IgM/ IgG 108

ELISA TORCH IgG 130

Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:

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El área de Inmunología es responsable de las pruebas asistenciales para la prevención, diagnóstico y

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CRITERIOS DE PRE VALIDACIÓN

Verificar y cumplir con los controles de los reactivos.

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Coordinador de Inmunología Coordinadora del SGC Jefe de Departamento

PRUEBA RÁPIDA PARA ANTIGENO DE SUPERFICIE (Hepatitis B)

1º. Remueva el dispositivo de prueba de la bolsa de papel de aluminio y colóquelo sobre

1. Una banda de color aparecerá en la sección izquierda de la ventana de resultados

Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:

Coordinador de Inmunología Coordinadora del SGC Jefe de Departamento

Esta banda es la banda de control.

Control Interno: Esta prueba contiene un control incluido, la banda C, esta se

Control Externo: las buenas prácticas de laboratorio recomiendan el uso de controles

10. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

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PRUEBA RÁPIDA ANTI CORE (HEPATITIS B)

La membrana es pre-recubierta con anticuerpos anti-HBc en la zona de la prueba (T). Durante

1º. Remueva el dispositivo de prueba de la bolsa de papel de aluminio y colóquelo sobre

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a) RESULTADO NEGATIVO: dos bandas de colores aparecen tanto en la prueba (T) y en la

10. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

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PRUEBA RÁPIDA PARA HEPATITIS C

Este dispositivo de ´prueba tiene la letra T y C como “línea de control” en la superficie de su

 Contenedor para desechos peligrosos desde el punto de vista biológico.

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1º. Remueva el dispositivo de prueba de la bolsa de papel de aluminio y colóquelo sobre

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Control Externo: Las buenas prácticas de laboratorio recomiendan el uso de controles

10. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

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PRUEBA RAPIDA PARA HIV (VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA)

 Contenedor para desechos peligrosos desde el punto de vista biológico.

Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:

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