UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR

DE SAN MARCOS
(Universidad del Perú, Decana de América)
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
E.P FARMACIA Y BIOQUÍMICA

QUIMICA ANALITICA INSTRUMENTAL

INFORME N° 10

Docente: Dra. Norma Angélica Carlos Casas

Alumna:
➢ Bravo Becerra Eliana Rocío 16040043

2018
 I. Práctica de Cromatografía de Gases (GC) Uso, manejo y cuidados.
Del equipo

II. OBJETIVOS
 Reconocer un equipo GC y sus partes
 Aprender acerca del uso, cuidado y la forma de análisis de un
analito en la cromatografía de gases.

III. Fundamento teórico

La técnica de cromatografía de gases, al igual que las otras técnicas

cromatograficas, sirve para separar componentes de una mezcla a
resolver. A diferencia de las otras técnicas la elución, se produce por el
flujo de una fase móvil de un gas inerte y a diferencia de las otras técnicas
de cromatografía, este gas no interactúa con el analito sino que sirve para
transportar a analito a través de la fase estacionaria que sería una
columna.1
Existen dos tipos de cromatografía de gases: la cromatografía de gas-
solido, la cual se basa en una fase estacionaria solida donde se produce
la retención de los analitos como consecuencia de la adsorción física. Y
la cromatografía gas-liquido la cual se basa en una distribución del analito
entre una fase móvil gaseosa y una fase liquida que estaría inmovilizada
sobre la superficie de un sólido inerte.1

IV. Parte Experimental

 VISITA A CEMPROFARMA

EQUIPO CROMATOGRAFO DE
GASES DISPONIBLE EN
CEMPROFARMA:

Marca: Agilent technologies

Modelo: 7890A GC system

Partes del equipo

 Área de la muestra:


 Inyector: a cual le damos determinados volúmenes de muestras que va
a inyectar y luego volatilizar.
  Capacidad máxima de la jeringa que se usa 10 uL pero
generalmente se usa 2 uL y lo ideal sería hasta 5uL máximo, ya
que si se agrega más saldrán picos más altos en el cromatograma.
 En relación a la temperatura de ebullición de la muestra, el inyector
debe estar a 50 o 20 C más que la temperatura de ebullición de la
muestra.
 El equipo posee 2 opciones de inyectado:
1. Splitless: Toda la muestra pasa por la columna
2. Split: Yo puedo elegir la proporción que quiero que pase por
la columna.

 Horno: Ahí se va a encontrar la columna.

 Como aquí se va a encontrar la columna el horno debe estar a una
temperatura de 20 °C a 50°C por encima de la muestra.
 Fase móvil: La fase móvil del equipo de CEMPROFARMA es un gas
inerte de Helio al 99,9%

 Columna: Las columnas del cromatografo de gases miden entre 30m –

60 metros. Está compuesta por un material de silica fundida y vidrio y el
tipo de columna varia bastante de acuerdo a la bibliografía con la cual se
requiera trabajar. La disponible en CEMRPOFARMA generalmente

Columna
 Modelo

 Modelo: DB- 5
 Largo: 30 metros.
 Diámetro: 0,530 m

 Detector: El detector que posee el equipo de CEMPROFARMA es un

detector por ionización a la flama.
El detector se debe encontrar a 20 o 50 C por encima de la temperatura
de la columna
 Gases que generan la flama: Hidrogeno y aire

 Sofwares del equipo: Utiliza el software Agilent's OpenLAB CDS

ChemStation Edition
- Online: Es utilizado para el manejo del equipo
- Offline: Se utiliza cuando las muestra ya han sido analizadas
 Análisis de una muestra
 No se realiza mucho tratamiento como en el HPLC, si es una muestra
solida se diluye primero.
Ejemplo se analiza una muestra de aceite de orégano con acetonitrilo de
solvente. Generalmente allí se trabaja con 10mg de muestra 10 mg del
solvente.
El primer pico el más grande, es del solvente el cual utilizamos, ejemplo
el de acetonitrilo y el segundo pico será de la muestra que se analizó, en
este caso aceite de orégano.

 Por comparación de estándares: El estándar se debe hacer por

duplicado al igual que la muestra
 Por curva de calibración: se realiza una curva de calibración se
utiliza 5 estándares de diferentes concentraciones.

Obtención de resultados: Se obtienen los resultados y se compara con

un estándar para hallar la concentración de la muestra problema

Manejo y cuidados del equipo:

 Se apagan los gases primer, luego el equipo y al final el software.

Datos extras:
  Si el inyector llega a fallar, la variación seria en las concentraciones de la
muestra, como se realiza por duplicado una muestra saldría con un área
de 100 y el otro de 50 por ejemplo.
 Cada vez que se desgasta la columna se realiza un corte en el Inlet
(primera parte del horno que se conecta con el inyector) 5-8 mm.
En cambio para la parte que se conecta con el detector se corta entre 45-
inlet 49mm.

V. Comparación entre Cromatografía de Gases y Cromatografia

liquida.
La cromatografía de gases es una técnica analítica que se ha ido usando
desde hace 40 años para resolver una gran variedad de problemas
analíticos, y gracias a ello se ha convertido en una técnica de separación
válida para muchos compuestos.
Los parámetros que describen los cromatógrafos tanto para la GC como
para HPLC en columna se calculan del mismo modo. En las condiciones
óptimas de trabajo los tiempos o volúmenes de retención se utilizan de la
misma manera para identificar especies químicas procedentes del
proceso de elución.
En cuanto a las técnicas para medir las áreas bajo los picos
cromatograficos son las mismas.
Otro punto importante es que la cromatografía de gases requiere un
control más preciso de los caudales que la de los líquidos y las columnas
son más largas y estrechas, como las que pudimos observar en
CEMPROFARMA, que median entre 30- 60 metros en cambio las
columnas de HPLC miden alrededor de 15 cm.
Otra característica importante que se puede resaltar de la Cromatografía
de gases es que el gas portador no actúa como un disolvente ya que no
interactúa con la muestra sino que sirve para transportarla, y la
 temperatura de la columna es una variable crítica en la optimización de la
separación que debe ser estrictamente controlada.
En lo que se refiere a muestras analizables, tanto la LC como la GC
pueden utilizarse para separar compuestos orgánicos con puntos de
ebullición moderadamente altos (menor a 200 °C). Para aquellos cuyo
punto de ebullición está por encima de los 200 °C, la LC suele ser la mejor
opción.2

VI. Conclusiones:
 Se pudo reconocer las partes del Cromatógrafo de gases que se utiliza
en CEMPROFARMA y aprendimos la manera adecuada de manipular
cada parte del instrumento.
 Se pudo aprender los cuidados que hay que tener con el equipo al
momento de manipularlo.

VII. ANEXOS
 Muestras analizables en un cromatógrafo de gases:
Esta técnica de separación es indicada para compuestos orgánicos
que posean un punto de ebullición por debajo de los 250, y también
para los gases ya que ambos poseen presiones de vapor lo
suficientemente altas como para ser arrastrados en la fase móvil
gaseosa. Sin embargo lo que limita a la cromatografía gaseosa no
son las presiones de vapor bajas sino la descomposición, ya que
cuando se separan sustancias con puntos de ebullición más altos,
los compuestos pueden descomponerse en la columna a la
temperatura necesaria para obtener un cromatograma valido. Para
algunos grupos de compuestos, los análisis cromatográficos
pueden llevarse bien como GC o como LC. Por ejemplo los
azucares, ácidos grasos y los aminoácidos.
Dado que la GC requiere muestras volátiles, estos compuestos
deben ser derivatizados. En GC derivatizacion significa cambiar
compuestos químicos que originan presiones de vapor bajas en
compuestos más volátiles. 2

 Partes básicas de un cromatógrafo:

a. Gas portador puro o a presión alta: Los gases comúnmente
usados son hidrogeno, helio y nitrógeno y sus características deben
ser: químicamente inertes, capaz de minimizar la difusión gaseosa,
puro y fácil de obtener, conveniente para el uso del detector. 3
b. Sistema de inyección de muestra: El método más común de
inyección de muestra implica el uso de una microjeringa para inyectar
una muestra liquida o gaseosa a través de un diafragma o ¨septum¨
de goma de silicona en una cámara de vaporización instantánea
situada en la cabeza de columna. Un dato importante es que la
 cámara de la muestra normalmente está a unos 50 °C por encima del
punto de ebullición del componente menos volátil de la muestra.
c. Columnas: Se usan dos tipos de columnas, las empaquetadas o de
relleno y las tubulares abiertas o capilares. Hasta la fecha la mayor
parte de la cromatografía de gases se ha realizado con columnas de
relleno.
Las columnas cromatograficas varían desde menos de 2 hasta 50
metros o más. Se construyen de acero inoxidable o sílice fundida o
teflón. A fin de poder colocarse en el interior un termostato,
normalmente se configuran como helicoides con diámetros de 10
hasta 30 cm. 1
d. Fase estacionaria: La fase estacionaria puede ser un sólido
(cromatografía de gas-solido) que puede estar sencillamente
rellenando la columna o dispuesto en forma de recubrimiento sobre
otro solido que hará de soporte.
Sin embargo más frecuente es que la fase estacionaria sea un líquido
(cromatografía gas-liquido) que se encuentre dispuesto sobre un
sólido portador. En este caso el sólido portador puede ser un relleno
(columnas de relleno) o bien la propia pared en su cara interior de un
tubo más o menos capilar (columna de tubo abierto). 4
e. Temperatura: Para ser exactos uno debe describir la temperatura de
la cámara de inyección, de la columna y del detector. Debido a que
estas tres temperaturas proveen diferentes funciones.
 Temperatura del puerto de inyección debe estar lo
suficientemente caliente como para vaporizar la muestra
rápidamente a modo que no haya perdida de eficiencia en la
técnica de inyección. Por otro lado la temperatura del puerto
de inyección debe ser suficientemente baja como para evitar
descomposición o re arreglos térmicos. 3
 Temperatura de columna: Debe ser suficientemente alta como
para que el análisis se obtenga en un lapso de tiempo
razonable suficientemente baja como para obtenerla
separación deseada. La temperatura óptima de la columna
depende del punto de ebullición de la muestra y del grado de
separación requerido. En la práctica con una temperatura
ligeramente superior al punto de ebullición promedio de la
muestra se obtienen tiempos de elución razonables. 2
 Temperatura del detector: Depende del tipo de detector
usado, pero puede decirse que el detector y las conexiones de
la salida de la columna al detector deben estar
suficientemente caliente a modo que no se produzca la
condensación de la muestra o fase liquida.3
f. Detector: El detector indica la presencia y mide la cantidad de
componentes en el efluente de la columna.
 Un detector ideal posee las posee las siguientes características:
- adecuada sensibilidad
- buena estabilidad y reproducibilidad
- Alta fiabilidad
- Tiempo de respuesta corto que lo haga independiente del caudal
- No destructivo de muestra.

 Tipos de detectores
- Detector de ionización de llama: Es uno de los detectores más
extensamente utilizado y más aplicable. En un quemador el
efluente de la columna se mezcla con hidrogeno y con aire para
luego encenderse eléctricamente. La mayoría de compuestos
orgánicos cuando se pirolizan a la temperatura de una llama de
hidrogeno/aire, producen iones y electrones que pueden conducir
la electricidad a través de la llama.
- Detector de conductividad térmica: Se basa en lo cambios en la
conductividad térmica de la corriente de gas ocasionados por la
presencia de las moléculas del analito. Este dispositivo se
denomina a veces catarometro. El sensor de un catarometro
consiste en un elemento calentado eléctricamente cuya
temperatura a una potencia eléctrica constante depende de la
conductividad térmica del gas circulante.

 Aplicaciones
 En el campo de la investigación:
Determinación de datos termodinámicos como son: coeficientes de
actividad, constantes de equilibrio en absorción y adsorción;
constantes de formación de complejos, etc.
 En el campo industrial
Gracias a la eficacia en la separación de sustancias y el
perfeccionamiento alcanzado por los detectores y medios
auxiliares han hecho que este procedimiento se haya impuesto en
la industria química y a fines. El análisis de las materias primas
como de los productos obtenidos impuesto por las especificaciones
de calidad cada vez más estrictas de estas industrias requiere
métodos precisos, rápidos y económicos.5
Se utiliza para análisis de efluentes y residuos. Así como
contribuyendo a la determinación de sustancias contaminantes en
medios diversos (aire, agua, gases y liquido residuales, etc.)
Industrias como son las de pintura y barnices, colas disolvente, etc.
Hacen uso de la cromatografía de gases para el control de calidad
y de los procesos.5
VIII. Referencias bibliográficas
1. Skoog Douglas, Principios de análisis instrumental. 6ta edición.
CENGAGE LEARNING: Mexico D.F, 2007 pp:710-715

2. Rubinson K. Análisis Instrumental. 1ra edición. Madrid. Editorial Pearson.

2001. PP:679-700

3. McNair H, Bonelli E. Curso Básico de Cromatografía en fase de gas. 1ra

edición. Varian aerograph. California. 1968

4. Harris. D. Análisis Químico Cuantitativo. 4ta Ed. México. Grupo Editorial

Iberoamericana. 1992. pp: 637- 641
5. SStorch de Gracia J.M. Fundamentos de la cromatografía de gases.2da
Edicion. Editorial Alhambra. España. pp136-140
6.