TALLER DE GENÉTICICA MICROBIANA

1. composición del material genético:

DNA: polímero de alto PM, formado por dos monómeros de nucleótidos.
Nucleótidos ----- bases nitrogenadas, grupo fosfato y un hidrato de carbono
(desoxirribosa)

Célula eucariota Célula procariota

- Núcleo rodeado por una
membrana. Material genético
fragmentado en cromosomas
formados por ADN y proteínas.
- Grandes, división celular por
mitosis
- Información discontinua
- Orgánulos
- DNA localizado en una región:
Nucleoide
- Células pequeñas 1-10um
- División celular directa. No tiene
centriolos, huso mitótico ni
microtúbulos.
- No—intrones ni exones
- Operones

2. Replicación del material genético

El proceso de replicación de ADN es el mecanismo que permite al ADN duplicarse. Es
un proceso semiconservativo ---- las dos cadenas complementarias del ADN original, al
separarse, sirven de molde cada una para la síntesis de una nueva cadena
complementaria de la cadena molde.
La replicación siempre se produce en sentido 5' → 3', siendo el extremo 3'-OH libre el
punto a partir del cual se produce la elongación del ADN. La cadena que se sintetiza en
el mismo sentido que avanza la horquilla de replicación se denomina hebra mientras
que la que se sintetiza en sentido contrario al avance se denomina hebra rezagada.
La replicación en las procariotas tiene un único origen, mientras que en las eucariotas
tienen diversos orígenes. En las procariotas hay tres ADN polimerasas, mientras que en
las eucariotas hay cinco.

3. TRANSCRIPCIÓN Y TRADUCCIÓN

Transcripción Traducción

Eucariotas: Núcleo Eucariotas: Hialoplasma

Procariotas: Citoplasma Procariotas: Citoplasma

La transcripción es el primer paso para la expresión genética, consiste en copiar la

secuencia de ADN de un gen para sintetizar un fragmento de ARNm, esta síntesis se da
a través de una enzima llamada ARN-POLIMERASA su función es unir nucleótidos para
formar la cadena de ARN usando la cadena de ADN como molde; La transcripción está
constituida por 3 etapas la iniciación, alargamiento, finalización, y maduración.
Traducción: Consiste en la síntesis de una proteína a partir de la información contenida
en el ARNm. Se trata de un proceso que se produce en el hialoplasma. Activación de
los AA, iniciación, elongación y terminación.
LA TRANSCRIPCIÓN EN PROCARIOTAS-DIFERENCIAS CON EUCARIOTAS
1) En los procariotas el ARNm no tiene ni caperuza ni cola.
2) Tampoco tiene intrones y por lo tanto no requiere de un mecanismo de
maduración.
3) Al mismo tiempo que el ARNm se transcribe se está ya traduciendo.
4) Los genes son policistrónicos, esto es, un ARNm contiene información para
varias proteínas.
4. REGULACIÓN DE LA EXPRESIÓN GÉNICA
Es el proceso que controla qué genes en el ADN de una célula se expresan (se utilizan
para hacer un producto funcional como una proteína).
Regulación mediante: Accesibilidad de la cromatina.
Transcripción (Grupos de proteínas del factor de transcripción se fijan a secuencias
específicas del ADN en o cerca de un gen y promueven o reprimen su transcripción en
un ARN)
Procesamiento del ARN. El proceso de corte y empalme.
4. OPRERÓN: Se define como una unidad genética funcional formada por un
grupo o complejo de genes capaces de ejercer una regulación de su propia
expresión por medio de los sustratos con los que interaccionan las proteínas
codificadas por sus genes. Está formado por genes estructurales que codifican
para la síntesis de proteínas (generalmente enzimas), participan en rutas
metabólicas. Expresión regulada por --- factores de control (promotor y
operador)
TIPOS:
Control positivo: La transcripción no se produce hasta que la molécula reguladora
estimule la producción de ARN.
Control negativo: La expresión genética se produce hasta que es desconectada por
algún tipo de regulador.
5. RNA
ARNm: función-- llevar la información sobre la secuencia de aminoácidos para la
síntesis de una proteína desde el ADN, hasta el ribosoma, lugar en el que se
 sintetizan las proteínas de la célula. Es por tanto una molécula intermediaria entre
el ADN y la proteína.
ARNt: función --- transferir un aminoácido específico al polipéptido en crecimiento; se
une primero en la región aminoacil como lectura del codón para unir el anticodón,
después se forma el enlace peptídico y pasa a la región péptido haciendo la elongación
del péptido, por último, cuando se lee el codón de parada pasa a la región final y se
separan los ribosomas y se finaliza la traducción.
MicroRNA: son ARN pequeños de aproximadamente 22 nucleótidos de longitud, no
codificantes para proteínas--- conforman una gran familia de genes reguladores
postranscripcionales que controlan muchos procesos celulares y del desarrollo en
eucariotas. La mayoría de los genes de microRNA se ubican en regiones intergénicas y
tienen su propio promotor y elementos regulatorio.
RNAi: Es una molécula de ARN que suprime la expresión de genes específicos mediante
mecanismos conocidos globalmente como ribo interferencia. (es un sistema que
utilizan las células de los organismos vivos para controlar los genes que están activos
en un momento o un tipo celular, y su grado de activación)
6. MUTACIONES EN EL DNA
Molecular (génicas o puntuales): Son mutaciones a nivel molecular y afectan la
constitución química de los genes, es decir a la base o “letras” del DNA.
Mutaciones silenciosas
Polimorfismo: cambio de una de las bases de ADN, de tal manera que el triplete de
nucleótidos que es una parte se cambia--- pueden incluso conducir a una reducción de
la función de la proteína en cuestión.
Inserción: se añade una o más bases al DNA original. De esta forma se puede alterar el
marco de lectura para formar la proteína o insertar aminoácidos extra que son
inadecuados.
Cambio de marco de lectura: por inserción o por deleción. --- cambia la forma de
agrupar esas tres bases y se colocaran aminoácidos erróneos habiendo la posibilidad
de un triplete STOP prematuro.
Deleción: se pierden una o más bases, es decir, se pierde un trozo de DNA alterando la
cadena proteica que debería formarse y su función.
7. CONCEPTOS:
ADN recombinante: Hace referencia a la creación de nuevas combinaciones de
segmentos o de moléculas de DNA que no se encuentran juntas de manera natural.
La tecnología del DNA recombinante utiliza técnicas que provienen de la
bioquímica de los ácidos nucleicos unidas a metodologías genéricas
 desarrolladas originalmente para la investigación de bacterias y de virus. La
utilización del DNA recombinante es una herramienta poderosa para el aislamiento
de poblaciones puras de secuencias específicas de DNA a partir de una población
de secuencias mezcladas.
INGENIERÍA GENÉTICA: La ingeniería genética es la manipulación directa de los genes
de un organismo usando la biotecnología para modificar los genes, eliminarlos o
duplicarlos. La Ingeniería Genética es una rama de la genética que se concentra en el
estudio del ADN, pero con el fin su manipulación. En otras palabras, es la manipulación
genética de organismos con un propósito predeterminado
CLONACIÓN: El término clonación describe una variedad de procesos que pueden
usarse para producir copias genéticamente idénticas de un ente biológico. El material
copiado, que tiene la misma composición genética que el original, se conoce como
clon.
PLÁSMIDOS: Los plásmidos son moléculas de DNA de doble cadena extra
cromosómicas de origen natural que tienen un origen de replicación (ori+) y que se
replican autónomamente en las células bacterianas. Para poder utilizarlos en
ingeniería genética.
VECTORES: Es un agente que transfiere información genética, por algún medio, de un
organismo a otro. Los vectores de clonación o vector molecular son moléculas
transportadoras que transfieren y replican fragmentos de ADN que llevan insertados
mediante técnicas de ADN recombinante. Para que sirva de vector, una molécula debe
ser capaz de replicarse junto con el fragmento de ADN que transporta. También tiene
que tener secuencias de reconocimiento que permitan la inserción del fragmento de
ADN a clonar.
ENZIMAS DE RESTRICCIÓN: es un tipo de enzimas denominadas endonucleasas de
restricción que reconocen una secuencia específica de nucleótidos (denominada sitio
de restricción) de una molécula de DNA de doble cadena, y cortan el DNA por esa
secuencia
Tipo I cortan las dos cadenas del DNA en una posición aleatoria a cierta distancia del
sitio de restricción. No se utilizan normalmente en la investigación de DNA
recombinante ya que el sitio de corte no es preciso.
TIPO II reconocen una secuencia específica y cortan las dos cadenas de la molécula de
DNA con absoluta precisión dentro de la secuencia reconocida. Se usan ampliamente
en investigación de DNA recombinante puesto que cortan en sitios específicos. Las
secuencias reconocidas por las enzimas de Tipo II son simétricas (“palindrómicas”), es
decir, la secuencia de una de las cadenas leída en dirección 5' 􀃖 3' es la misma que la
secuencia de la cadena complementaria leída también en dirección 5' 􀃖 3'.