Metodología de trabajo

Diseño de investigación

El presente trabajo es un estudio de investigación experimental y prospectiva. Tendrá lugar en

el laboratorio de la cátedra de Bioquímica de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la
Universidad Nacional Mayor de San Marcos.

Recolección de la información

Se empleará las bases de datos PubMed, Redlalyc, Concytec, Scielo, Science Direct, entre
otros. Además como estrategia de búsqueda se usará operadores booleanos tales como “OR”
y “AND”.

Animales de experimentación

Se utilizarán ratas macho Holtzman de 200 a 240 gr de peso corporal y ratones albinos macho
de 20 a 25 de peso corporal adquiridos en la Facultad de Veterinaria de la Universidad
Nacional Mayor de San Marcos, los cuales se mantendrán en condiciones de temperatura
controladas y humedad relativa y expuestos a ciclos de luz y oscuridad de 12/12, con agua y
alimento que serán renovados dos veces al día.

Recolección de la muestra

Se adquirirá 1 kg de semillas de Salvia hispánica provenientes del norte del Cuzco.

Preparación del extracto acuoso

Se pesará de 10 g de semillas de Salvia hispánica y se dejara remojar con 200 mL de agua

destilada (1:20 p/v) a temperatura ambiente, con agitación manual por 2 horas. Se dejará
reposar de un día para otro. Se eliminará todo rastro de agua con rotavapor. Se secará la muestra
en estufa por 24 horas. Se procederá a micropuverizacion en un molino estándar. La muestra
pulveriz

Determinación de los componentes del extracto acuoso de Salvia hispánica

Se realizará la marcha fitoquímica para saber los componentes del extracto de Determinación
de los componentes del extracto acuoso de Salvia hispánica. Se realizará detección de
flavonoides usando la reacción de Shinoda, detección de compuestps fenólicos utilizando el
revelador el reactivo tricloruro férrico, detección de alcaloides con revelador de reactivo de
Draguendorff, detección de taninos usando la reacción de gelatina y detección de aminoácidos
con revelador reactivo de Ninhidrina.

Preparación de bioensayo de citotoxicidad del extracto acuoso de Salvia hispánica con Artemia
salina

Los huevos de Artemia salina se incubarán en una solución de sal marina a temperatura
ambiente durante 48 horas. Las muestras analizadas se llevarán a concentraciones de 1000, 500
y 250 ug/mL y se dejarán reposar por 48 horas. Se separarán tres tubos y a cada tubo se le
agregarán 10 organismos y se encuban por 24 horas en agua de mar, se realizará un monitoreo.
Preparación de ensayo de toxicidad en ratones

Se dividirá la población de ratones. Se divide 3 grupos de 4 ratones, 2 machos y dos hembras en

cada grupo. Se administrará el extracto a 3 diferentes concentraciones: 250, 500 y 1000 mg/mL
a los tres grupo. Se observará el comportamiento de ratones y regulación del peso diario.

Diabetización de ratas por aloxano

Se tendrá 12 horas en ayunas a las ratas antes de la aloxonación. Se inducirá a la hiperglicemia

con inyección a 3 grupos de 6 ratas vía intraperitoneal de Aloxano en buffer citrato (pH 4.75)
en 4 dosis de 75 mg/Kg de peso corporal cada 48 horas.

Preparación del ensayo de efecto hipoglicemiante del extracto de Salvia hispánica en ratas
albinas.

Se hará de división de las ratas en 4 grupos de 6.

Tabla 1. Distribución de los animales de experimentación en base al tratamiento y concentración del

extracto de las semillas de Salvia hispánica para el efecto hipoglicemiante.

Volumen a Vía #
Código Grupo Tratamiento Concentración
administrar Adm. animales

Suero
G1 Blanco 0.9% V.O 6
fisiológico

G2 Control Glibenclamida 50mg/kg V.O 6

Extracto 1mL/100 g
Concentración
acuoso de las
hallada en el
G3 Experimental semillas de V.O 6
ensayo de
Salvia
toxicidad
hispanica

Se medición la glucosa por el método de glucosa oxidasa con kit Accucheck de Roche. Se
tomaran muestras al día 1, 3, 7 y 14. Luego se procederá a realizar el análisis estadísticos de los
datos arrojados.