METODOS DE SEPARACION Y PURIFICACION
DE COMPUESTOS ORGANICOS POR
CROMATOGRAFIA
OBJETIVOS
 Aprendizaje de diferentes tecnicas
cromatograficas
 Conocimiento de conceptos
cromatograficos: polaridad, fase
movil, fase estacionaria, factor de
retencion etc.
 Separacion y determinacion de los
compuestos organicos presentes en
una muestra usando sustancias
patron
RESULTADOS y ANALISIS
grabado 1. Cromatogograma de un
extracto de espinaca.capa: silicagel.
Eluyente:acetona.
De acuerdo con lo observado en
la placa cromatografica y teniendo
en cuenta los colores vistos
podemos afirmar lo siguiente. En
la placa tratada con la fase movil
(acetona) podemos encontrar 4
franjas de diferentes colores las
cuales ascienden, amarillo
verdoso claro, amarillo,verde
amarillento y verde claro.
Teniendo encuenta que en el
beaker donde se deposito la
muestra, hay mayor proporcion de
un solvente apolar (acetona), y
que la capa de silice es polar, por
lo tanto el solvente asciende por
fuerzas de capilaridad arrastrando
con el los pigmentos que tienen
una mayor apolaridad, el hecho de
que se logren reconocer cuatro
colores diferentes en el recorrido
que tubo el solvente durante
nuestra practica, nos indica que
hay compuestos dentro de la
muestra con una polaridad baja y
que son retenidos progresivamente
por la silicagel. Teniendo
encuenta el grabado 1 los
componentes que se encuentran en
el origen de la placa son polares y
las siguientes ya son menos
polares a medida que la distancia
de estas aumentan con respecto al
origen.
Teniendo encuenta lo anterior y la
formacion de coloides en la placa
se puede deducir con la literatura
encontrada. Fig1.1. De las
estructuras de los compuestos
podemos decir que el componente
ubicado en el primer color
corresponde a la clorofila, la
segunda franja a xantofilas, la
tercera a clorofila A y la cuarta y
ultima a un caroteno.

Fig 1.1.estructuras moleculares de los
componentes del extracto de la espinaca.
Se presentan acontinuacion los Rf
para cada una de los compuestos
separados.
Clorofila a.
fig 2.1. cromatografia en
columna.componentes separado
RESULTADOS
CROMATOGRAFIA EN
COLUMNA.
Respecto a los resultados obtenidos
en la cromatografia de columna se
obtuvieron 2 tubos de ensayo. En el
primer tubo se observo una sustancia
de color amarillo verdoso y el
segundo un color verde mas oscuro
como se muestra en la fig 2.1. para
este metodo se utiliza mucho mas
tiempo en lo que es la preparacion y
el la separacion de los componentes
comparado con la cromatografia de
capa fina. Con este metodo
ocurreocurre lo mismo que con el
metodo de cromatografia en capa fina
ya que las bandas tambien se separan
gradualmente atraves de la fase
estacionaria que tambien estaba
compuesta con silicagel. Las bandas
se van revelando según su polaridad
de los pigmentos que contiene el
extracto de espinaca, y los 2
sustancias primeras en salir de la
columna fueron las menos polares en
este caso los carotenos que se
identifican en el tubo de ensayo con
coloracion amarilla verdosa y la
clorofila que se observa en el tubo de
color verde.

CONCLUSION
Se pudo realizar una practica con
resultados buenos de las dos tecnicas
de separacion cromatografica, en
columna y capa fina ademas se logro
identificar la separacion de los
componentes del extracto de
espinaca, los cuales dependiedo de su
polaridad se observo que se fueron
separando gradualmente, Viendo asi
tseparacion de los componentes por
cromatografia en capa fina es mucho
mas rapida que la cromatografia en
columna.