Universidad de las Fuerzas Armadas ESPE

Ingeniería en Biotecnología
Enzimología

Integrantes: NRC: 4807

 Coello Bryan Fecha: 16–04–19

 Fernández Eduardo

1) ¿Cuáles son los métodos no mecánicos de extracción de enzimas que usted conoce?,
describa al menos dos procedimientos.

 Shock osmótico  Disolventes orgánicos

 Descomposición de gas  Agentes quelantes
 Cavitación hidrodinámica  Detergentes
 Desecación  Tratamiento alcalino.
 pH extremos

Shock osmótico: Las células se hacen estallar al someterlas a un medio hipotónico, lo cual hace
que la membrana no resista la presión osmótica. Se realiza al suspender las células en agua
destilada para liberar las proteínas deseadas.

Agentes quelantes: Desestabilizan enzimas digestoras de otras enzimas, que pueden incluir las de
interés, al atrapar cationes por propiedades quelantes. Por ejemplo: el EDTA atrapan cationes
divalentes (Ca+2).

2) Mencione al menos 5 métodos de purificación

 Electroforesis
 Separación por retención selectiva (Cromatografía)
 Precipitación por desnaturalización selectiva
 Precipitación por fuerza iónica
 Ultrafiltración

3) Explique qué es el método de cromatografía y nombre sus tipos

La cromatografía es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención selectiva, cuyo

objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla para poder identificarlos; método
que se basa en el reparto de especies entre una fase estacionaria y una fase móvil.

 Cromatografía de exclusión molecular (filtración en gel)

 Cromatografía de intercambio iónico
 Cromatografía de interacción hidrofóbica
 Cromatografía de afinidad
 Cromatografía de partición
 Cromatografía de adsorción