PRACTICA N°8

AISLAMIENTO Y CULTIVO DE BACTERIAS LACTICAS

1) Objetivos
Conocer los medios utilizados para cultivar las bacterias lácticas
Aislar bacterias lácticas
2) Revisión bibliográfica
Las bacterias lácticas tienen la capacidad de fermentar los glúcidos produciendo ácido
láctico. Son homofermentantivos (ac. Láctico), y heterofermentivas (ac. Láctica, ac.
Acético, etanol, CO2) Gram positiva, inmóviles, no esporulan, catalasa negativa,
oxidasa negativa, reductasa negativa. Son anaerobios facultativos, microaerofilos,
únicamente fermentan en aerobiosis o anaerobiosis.
Streptococcus lácticos: su reservorio natural es la leche, vegetales, y del rumen. Se
pueden aislar utilizando los medios MRS, el medio M17, que tiene un pH de 7,15; aquí
es crecimiento es rápido y las colonias son de gran tamaño.
Streptococcus thermophilus: se aísla de leche calentada a 45-50°C o leche
pasteurizada, yogurt. Se puede utilizar el medio M17 a un pH de 6,8; también el medio
TPPY de BRACQUART con ericromo como colorante.
Genero leuconoctoc: son coco o en cadenas, es heterofermentativos. Producen D (-)
láctico, etanol, CO2. El medio más utilizado es el MRS, pero pueden utilizarse el medio
KCA (NICKEL Y LEESMENT) con citrato de calcio se mejora con la adición de Mn2+
Genero lactobacillus: se aíslan del queso, kéfir, choucroute, ensilados, carnes frescas o
fermentadas y del intestino humano. El más utilizado es el MRS con acetato, citrato, y
Tween 80 como fuente de oleato; su pH está ajustado a 6,5; pero con frecuencia se
utiliza a 5,5 para seleccionar mejor este grupo.
El medio MRS con 0.2% de oxgall al 0.2% se obtiene un mejor crecimiento de L.
acidophilus.
Pedioccoccus: se desarrollan en el medio MRS con un PH de 6,2 o en presencia de
ácido sorbico o acetato de talio, no son selectivos. Otro medio es el ATP o medio
Elliker. Estas bacterias pueden liofilizarse o mejor congelarse en presencia de diversos
crioprotectores.
Bifidobacterium: B, longum se desarrolla mejor en el medio LSD con sal de tetrazoleo.
El ácido propiónico añadido en proporción de 5 g/L al medio comercial Columbia
(Pasteur production) acidificado hasta 5,0; no inhibe las distintas especias de
bifidobacterium y permite aislar en presencia de otros géneros. Las colonias aparecen
a los 3 días a una temperatura de 37°C.
Para el aislamiento de cepas a partir de material fecal es preferible el ácido propiónico
a una concentración de 10 g/L.
3) Material y equipos
- Medio MRS (de MAN ROGOSA y col; 1960)
- Cultivo de lactobacillus acidophilus
- Asa de kholle
- Mechero
4) Metodología
Realizar la coloración de Gram, para reconocer el L. acidophilus y luego sembrar en
estrías en una placa que contengan el medio MRS, colocar las placas en la
incubadora a 37°C por 48 horas.
5) Resultados
Realizar las características culturales de las colonias :
el tamaño, forma y aspecto de las colonias obtenidas por esta técnica suele ser
bastante constante y precisa para cada género y-o especie bacteriana, hecho que
se puede utilizar como característica diferencial para ello debemos considerar los
siguientes puntos a la de diferenciar bacterias, tamaño, forma, superficie,
consistencia, transparencia y coloración!
Morfología Colonial,
Las características que determinan la morfología colonial son:
1. ¡Tamaño de las colonias en milímetros!
2. color de las colonias!
3. Forma, puntiforme, circular, irregular, filamentosa
4. Superficie, lisa, rugosa, granular
5. Aspecto: húmedo, seco
 PRACTICA N°9
AISLAMIENTO Y CULTIVO DE LEVADURAS
1) Objetivos
Conocer los medios en que se cultivan las levaduras
Aislar levaduras de su medio natural
2) Revisión bibliográfica
Las levaduras son hongos unicelulares que durante siglos ha contribuido al hombre
en fermentar los jugos de las frutas, pan, quesos, etc. Algunas causan
enfermedades a plantas y animales, descomponen los alimentos o deterioran los
materiales. Estas se encuentran difundidas en la naturaleza y son diseminadas por
los insectos o el viento.
Cuando se desarrollan en medios de cultivo (agar saboraud, agar mosto, ogy)
adecuados, forman colonias que varían de aspecto, textura y margen. Algunas son
lisas, otras rugosas, algunas aplanadas elevadas con bordes bien definidos o
irregulares. Las colonias jóvenes tienen consistencia de pasta que al envejecer se
vuelvan más espesa y seca. Algunas colonias en medio liquido se desarrollan al
fondo como sedimento, otros en la superficie como una película y otras se
desarrollan uniformemente.
Las levaduras se desarrollan en un PH de 4,5; la temperatura puede variar siendo la
más común de 20-25°C.
Los métodos para conservar levaduras deben efectuarse en función del número de
cepas a conservar, de los medios disponibles y de las inversiones necesarias.
3) Materiales y equipos
- Medio OGY
- Cultivo de saccharomyse cerevisae
- Incubadora
- Asa de drigalsky
- Mechero
4) Metodología
Realizar la coloración simple para conocer a saccharomyse cerevisae, luego
sembrar en estrías en una placa que contenga el medio OGY o agar de mosto,
incubar a 25°C por 3 a 5 días.
5) Resultados
Dibujar las observaciones y el método desarrollado en la práctica:
 UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTIN

FACULTAD DE PROCESOS

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA DE INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

TRABAJO:
PRACTICA N°8 Y 9
CURSO:
MICROBIOLOGIA GENERAL
PROFESORA:
Ing. MARIEL ALVAREZ RODRIGUEZ
ALUMNO:
- HUAMANI HUACCHA JULIO CESAR

AREQUIPA – PERU