Misión del programa: “La formación de profesionales químicos que lideren el desarrollo, potencien la

investigación y apoyen el aprovechamiento de los recursos naturales del entorno mediante procesos científicos
y tecnológicos”.
UNIVERSIDAD PEDAGÓGICA Y TECNOLÓGICA DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS, Escuela de Ciencias Químicas

Laboratorio de Bioquímica I

Compilador: Angélica María García T.

13. DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ASCÓRBICO (vitamina C)

Material a traer por parte del estudiante: Muestra de orina de una persona que haya tomado
vitamina C el día anterior a la prueba, Limón, naranja, una tableta de vitamina C, guantes y
tapabocas, gafas de protección, cinta o marcador para rotular, toalla (2, una para uso personal y
otra para el trabajo práctico), jabón personal y jabón para lavado de material de vidrio, gotero.

INTRODUCCION
El ácido ascórbico o vitamina C, es uno de los componentes en gran variedad de frutas, además es
uno de los nutrientes necesarios para el hombre y los demás animales. Se caracteriza por su
hidrosolubilidad, y acción fundamental en un amplio rango de reacciones metabólicas. En general,
las vitaminas hidrosolubles no son sintetizadas ni almacenadas en el organismo siendo necesario un
suministro constante. Existen varios procedimientos para determinar la vitamina C, entre ellos está el
método de titulación de oxidación-reducción con 2,6 diclorofenol indofenol y el método de Morh,
utilizando 2-nitroanilina dando lugar a un derivado 2-nitrofenilhudrazida del ácido oxálico, el cual en
presencia de un exceso de NaOH forma una sal sódica de color violeta cuya absorbancia se mide a
540 nm.

CONSULTA PREVIA A LA PRÁCTICA

1. Qué se entiende por vitaminas?
2. Cómo se clasifican las vitaminas?, cite ejemplos
3. Qué es un antagonista vitamínico?, cite ejemplos
4. Cómo se pueden inactivar las vitaminas?
5. Cuál es la importancia de la vitamina C en el organismo?.

MATERIALES Y REACTIVOS
Colorante 2,6 diclorofenol-indofenol al 0.5M, Ácido Ascórbico 1mg/mL, Ácido Acético al 5%,
Cloroformo, Agua destilada, Bureta, 2 Erlemeyer de 100 y 250 mL, Agitador, Balanza, Pipetas, Pinzas
para bureta, Soporte, Matraz volumétrico de 100 mL, Embudo.

PROCEDIMIENTO

PARA MUESTRAS INCOLORAS. (muestra orina, limón, naranja o vitC)

 En un vaso coloque un volumen exacto de 3 mL de muestra, agregue 2 mL de ácido acético
1mg/mL y titule con una solución de 2.6- diclorofenol-indofenol hasta obtener un color rosa
estable. Registre el volumen utilizado para titular (V1).
 Tome luego 3 mL de agua como blanco, adiciónele ácido acético como en el paso anterior y
titúlelo con 2,6 diclorofenol.indofenol ( B1).
 Titule la solución patrón de ácido ascórbico siguiendo exactamente el procedimiento anterior (P).
 Si creé que alguna de sus muestras contiene una alta concentración de vitamina C, puede diluirla
con agua destilada y proceder a titularla. Hay que tener en cuenta este factor de dilución para
hacer los cálculos.

CALCULOS

La concentración de la vitamina C en su muestra, se calcula como sigue:

PARA MUESTRAS COLOREADAS (muestra orina, limón, naranja o vitC)
Puesto que es difícil ver el punto final de la titulación cuando las muestras son muy coloreadas, tome
las muestras como en el caso anterior y agrégueles 1 mL de ácido acético y adicione luego 2 mL de
cloroformo y titule con el 2,6-diclorofenol-indofenol, hasta obtener el color rosa estable en la fase
clorofórmica (fase inferior orgánica). Los cálculos son los mismos que en el caso anterior.

RESULTADOS
Presente sus resultados de la forma más clara posible apoyándose en el uso de tablas, gráficos, etc.
Responda las preguntas planteadas.

NO OLVIDE ENTREGAR COPIA DE LA HOJA DE RESULTADOS AL PROFESOR.

BIBLIOGRAFÍA

La presente práctica fue diseñada tomando como pauta base:

VARIOS AUTORES. 2010. Prácticas de Laboratorio de Bioquímica para Ingeniería Agronómica.

Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia, Facultad de Ciencias, escuela de Química, Tunja,
Colombia.
MIGUEZ, J.B.1997. Prácticas de bioquímica. Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia,
Facultad de Ciencias, escuela de Química, Tunja, Colombia.
VARIOS AUTORES. 2010. Prácticas de Laboratorio de Bioquímica. Universidad Jorge Tadeo Lozano.

Textos de apoyo:

LEHNINGER, A., NELSON; D.; COX, M. 2004. Lehninger Principles of Biochemistry. Macmillan
Higher Education, 4a ed.
VOET, D., VOET, J. 2002. Biochemistry. Wiley & Sons. 2ª ed. Canada.
BOHINSKI, R.C. 1991. Bioquímica. Addison-Wesley-Longman, 5ª ed. México D.F. México.
CAMPBELL, M. y FARREL, S. 2004. Bioquímica. Editorial Thomson. México.
PACHECO, D. 2005. Bioquímica Medica. Editorial Limusa. México.

Visión del programa: “El programa de química de la UPTC para el año 2019 se proyecta en el ámbito nacional
como uno de los líderes en la gestión y desarrollo de procesos de investigación, apropiación, adaptación e
innovación de ciencia y tecnología en química”.
UNIVERSIDAD PEDAGÓGICA Y TECNOLÓGICA DE COLOMBIA
PROGRAMA DE QUÍMICA
LABORATORIO BIOQUÍMICA I
HOJA DE RESULTADOS

13. DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ASCÓRBICO (VITAMINA C)

Nombres:___________________________________________________________________

Sección/grupo: ________________

1. Determinación

Muestra V1 (mL) B1 (mL) P (mL)

2. Observaciones adicionales: