FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

PROCESO DE DISEÑO CURRICULAR

LABORATORIO DE PARASITOLOGÍA
Código: FCQ-P05-F06; Revisión: 01; 11 de marzo de 2016
Practica Título de la Diagnóstico directo de Leishmania spp. y Tripanosoma spp.
Nº9 Práctica:
Integrantes: Grupo Nº 2
Eliana Celi Horario:
Antony Paucar 15:00-17:00
Claudia Quilca Fecha: 03/07/2018

INFORME DE LABORATORIO

1. Objetivos:
 Reconocer al microscopio protozoos tisulares del género Leishmania spp. Y
Tripanosoma spp.
 Familiarizarse con las pruebas diagnósticas de laboratorio para la investigación de
Leishmania spp. y Tripanosoma spp.

2. Resultados:

100x 100x
Tripomastigote metacíclico Tripomastigote sanguíneo
de Trypanosoma cruzi circulante en frotis
sanguíneo

100x
Amastigote de Leishmania

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3. Discusión de resultados:

En la práctica se examinaron los protozoos tisulares del género Leishmania spp y

Tripanosoma spp, estos son flagelados, tienen como vectores a los insectos y su ciclo de
vida involucran un huésped invertebrado y uno vertebrado. Según (Larrea, 2007)
Leishmania spp es un parásito heteroxénico que infecta al hombre y a otros mamíferos, se
transmite indirectamente por la picadura de dípteros del género Lutzomyia que actúan como
vectores y tiene como reservorio a múltiples especies de animales tanto domesticas como
silvestres. En el ciclo de vida los parásitos en forma de promastigotes son fagocitados en
piel por macrófagos del sistema fagocítico mononuclear en donde más tarde pierden el
flagelo y se transforman en amastigotes que se reproducen por división binaria. Cuando
moscas se alimentan de individuos infectados, ingieren las células con amastigotes que
sufren cambios en el intestino medio del insecto, se multiplican y finalmente migran a la
probóscide como promastigotes metacíclicos, altamente infectantes. (Uribarren, 2018).

Por otro lado el género Tripanosoma spp causante de la enfermedad de Chagas. Según la
(OMS, 2018) es más frecuente América Latina. Tiene como vectores a los insectos de la
subfamilia Triatominae (chinches). Trypanosoma cruzi está formado por una sola célula
eucariota, con un ciclo de vida que alterna entre insectos vectores y huéspedes vertebrados.
En el insecto, el ciclo de vida inica cuando este pica un huésped infectado e ingresan
tripomastigotes por via hematógena del insecto llegando al intestino donde se vuelven
epimastigotes y se reproducen mediante mitosis pasando al recto donde se convierten en
tripomastigotes metacíclicos que serán eliminados por las heces. En el humano, el ciclo
inicia cuando el vector se alimenta de sangre y libera tripomastigotes metacíclicos en sus
heces, estos ingresan a la mucosa por la picadura del insecto, una vez dentro los
tripomastigotes se separan y se transforman en amastigotes que infectan las células de
tejidos, se reproducen por división binaria y finalmente salen de la célula e ingresan al
torrente sanguíneo, el periodo de incubación va de 5 a 14 días después de la picadura del
insecto vector (Cobelli, 2017).

Microscopicamente se observó, la forma infectiva tripomastigote metacíclico de

Trypanosoma cruzi. Tiene forma fusiforme, mide de 12 a 30 µm presenta un gran núcleo
central con el cinetoplasto ubicado posterior al núcleo. Además tiene un flagelo que emerge
desde el extremo apical posterior distinguiéndose una membrana ondulante característica.
(Uribarren, 2018). También se visualizó un tripomastigote sanguíneo, encontrado en la
sangre del mamífero infectado, es responsable para establecer la infección intracelular en el
mamífero. La forma tripomastigote no se divide y es la que ayuda en el diagnóstico de la
enfermedad de Chagas. (López, 2001)

Además se pudo observar un amastigote de Leishmania, el cual presenta las características

mencionadas por (Botero, 2012) tiene forma ovalada o redondeada, no tiene flagelo, tiene
un tamaño de 2 a 5 µm de longitud, se localiza en los macrófagos y tiene núcleo grande con
cariosoma central.

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4. Conclusiones:
 Se reconoció los protozoos tisulares tripanosoma cruzi y se observó unas de sus
formas evolutivas como fue el tripomastigote meta cíclico que es la forma infectante
del parasito además se conoció los vectores de esta parasitosis como fueron:
Rhodnius prolixus,Triatoma dimidiata y Panstrongylus geniculatus. También se
reconoció al parasito Leishmania en una de sus formas evolutivas (amastigote).

 Se conoció las pruebas para el diagnóstico de tripanosoma que se dividen en

parasitológicos directos ;examen en fresco, extendido de frotis sanguíneo coloreados,
gota gruesa método de concentración de Strout biopsia , PCR ;parasitológicos
indirectos :cultivos en el medio LIT,xenodiagnóstico, inoculaciones en animales
(ratones generalmente) y serológicos: Inmunofluorescencia indirecta, prueba de
ELISA, hemaglutinación indirecta, fijación del complemento, prueba de látex
,aglutinación directa (es poco especifica)

5. Cuestionario:
Leishmania

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Técnica Fundamento
Los amastigotes de
Leishmania se localizan
dentro de los macrófagos
de los huéspedes
Examen
vertebrados, en este caso
directo
el hombre. Por tal el
examen directo permite
hallar amastigotes en el
frotis coloreado
Los amastigotes de
Leishmania se localizan
dentro de los macrófagos
de los huéspedes
Biopsia vertebrados, en este caso
el hombre. Por tal motivo la
biopsia permite observar la
presencia de los
amastigotes intracelulares
Se basa en la amplificación
de segmentos específicos
Prueba
de ADN de los parásitos
del PCR
permitiendo identificar su
presencia en la muestra.
Se fundamenta en el
crecimiento de Leishmania
en medios adecuados como
Novy-MacNeal-Nicolle o
Cultivos NNN. Lo cual permite a
partir del material obtenido
en condiciones asépticas
realizar siembras en medios
de cultivo.
Método indirecto basado en
una reacción de
Intraderm
hipersensibilidad tardía. La
orreacció
cual consiste en la
n de
aplicación de un antígeno
Monteneg
compuesto por suspensión
ro
de promastigotes
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procedentes de cultivo
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Elemento o
Muestras empleadas mecanismo
identificado
Amastigotes de
Células de la lesión en
Leishmania ovales
la parte profunda, la
o redondeados,
cual se extiende en un
con la tinción se
portaobjetos para
observa el núcleo
hacer extendidos, los
rojizo, el
cuales se colorean con
citoplasma y el
Giemsa o Wright
cinetoplasto azul
Tejidos lesionados
Amastigotes de
cercanos al borde de
Leishmania
la úlcera
Tejidos lesionados
cercanos al borde de
la úlcera e incluso
tejidos en donde no ha
sido posible detectar Amastigotes de
parásitos por otros Leishmania
métodos
parasitológicos,
especialmente en
lesiones de mucosas
Promastigotes
aglomerados y
Tejidos lesionados
entrelazados por
cercanos al borde de
los flagelos,
la úlcera
formando algunas
rosetas.
Un antígeno
compuesto por
suspensión de Es positiva si se
promastigotes palpa un nódulo
procedentes de cultivo inflamatorio de
el cual se aplica 5mm o más
intradérmicamente al
paciente
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Trypanosoma

Elemento o
Técnica Fundamento Muestras empleadas mecanismo
identificado
En la fase aguda se puede
encontrar el parasito hasta Gota de sangre obtenida
Examen
en un 90%. Siendo el por punción digital con Tripomastigote
en fresco
movimiento de los parásitos lanceta
el que ayuda a su detección
Los extendidos delgados o
frotis de sangre o plasma Tripomastigote cuyo
Gota de sangre obtenida
Extendido en lámina, se pueden núcleo se ve de color
por punción digital con
coloreado colorear con Giemsa, lo rojo, el cinetoplasto de
lanceta
cual es importante para la color rojo púrpura
identificación morfológica
Permite visualizar mayor
Gota de sangre obtenida
Gota número de parásitos, por la
por punción digital con Tripomastigotes
gruesa mayor cantidad de sangre
lanceta
que se estudia
Se pueden ver en los
Biopsia de ganglio
Biopsia tejidos los llamados nidos Nidos de amastigotes
linfático y de miocardio
de amastigotes.
Partiendo de una muestra
de sangre venosa sin
anticoagulante, los
Métodos Sangre venosa la cual se
tripomastigotes salen hacia
de coloca en tubo de
el suero, el cual se Tripomastigotes
concentra ensayo sin
ción
centrifuga para obtener una
anticoagulante
mayor concentración y
observarlos en fresco o
colorearlos.

6. Bibliografía:

o Botero, D & Restrepo,M. (2012). “Parasitosis humana” 5ta edición. Pág.316

o Cobelli, C. (2017). Ciclo de Vida del Trypanosoma Cruzi: Las 8 Fases Principales.
Recuperado el (08/07/2018) de: www.lifeder.com/ciclo-vida-trypanosoma-cruzi
o Larrea,H. (2007). Parásitos flagelados tisulares y hemáticos. Recuperado el
(08/07/2018) de: es.slideshare.net
o OMS. (1 de febrero de 2018). La enfermedad de Chagas (tripanosomiasis americana).
Recuperado el (08/07/2018) de: www.who.int/es/news
o López, N. (2001). LABORATORIO DE BIOLOGIA DE PROTOZOARIOS. Recuperado
el (08/07/2018) de: www.ciencias.ula.ve

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o Uribarren, T. (2018). Departamento de Microbiología y Parasitología, Facultad de
Medicina, UNAM. Recuperado el (08/07/2018) de: www.facmed.unam.mx

7. Anexos:

Vector de Trypanosoma cruzi:

triatoma maculata
Tripomastigote metacíclico de
Trypanosoma cruzi en cultivo
100x

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Amastigote de Leishmania
100x

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