MBLGO. LUIS ALSERTO SÁNCHEZ A¡IGULO MBLGO.

JO$É LUIS GUTIERREZAPONTE

PRAüTITA NÚI\TRO O7

tufltRosc0PIA:
"Mtc RostoPf 0 cüffi puE$To'

INTROüUCCION;

tL Oio humano puede delectar diferentes longitudes de onda {cclores} e intensidades

de la luz visible, directamente o a través de instrumentos ópticos tales corno el microscopio,

Son pocos los inventos comc el microseopio, que al servicio de la Biología y Medicina, han

sido fa causa de tanto prcgreso en la ciencia. Con el microscopio fue descubierto un mundo

nuevo, microscÓpico, qus estaba fuera del alcance de la visihilidad del ojo humano.

El inventor del primer microscopio fue el holandés Zacarias Janssen en 1590, Su

nombre deriva de los vocablas griegos: Mikros, pequeñc y skopeo, examinar, ver, y se
debe a Jean'Faber, quien en 1624 aplicó este término para designar un míroscopio
c0mpuesfo por un objetivo y un ocular, aunque actualmente en la práctica se designa
también como rnicroscopios simpfes, a las lupas o funas de aumenta. Antonio Van
Leeuwenhoek {1632 -1723}, fue el verdadero impulsar de la microscopia. Construyó
micrascopios con lentes mulr üonvexas y realizó diversas observacianes adquirienda gran

renombre como anatomista y fisiólogo,

Los diversoe elementos que existen en la naturaleza, presentan tamañcs, formas y

composiciones distintas, la mayoria de ellas pueden ver$e, algunas a simpfe visla, y atras

mediante instrumentos.

Fs*etr*s qclmtivss & lm drules y $rffi ffiffi nenles

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Guia de Prácticas de BI0LOGiA CELULAR 59 UNIVER$IDAD LOS ÁUETMS DE CI{IM8OTE

 fuIBLGO. LU¡S ALBFRTO SANCHEZ ANGULCI MBLGO, JOSE LUI$ GUTIERREZ APONTE

Por ser de un tamaño muy pequeno, las cólulas y las estructuras subcelulares necesitan

de micrcscopios para pnder s*r abservadas por el ojo humano, de fimitado poder de

resolución. Los tres tipos principales son el microscopio óptico, el microscopio electrónico

de transmisión y el rnicroscopio electrónico de barido. Se ha* desanollado además stras

tÉcnicas microscópicas. Lus sistemas ópticos especiales de contraste de fase, de

inierferencia diferen*ial y de campo CIscurc hacen posible estudiar c*lulas uivas. Un avance

tecnofógico importante fue el uso de computadoras y cámaras de vídeo integradas a los

microscopios.

El ojo humano sólo tiene un poder de re*ohtción de aproximadamente'll't0 milimetros

o 1*0 micrómetros. El poder de resolución es una medida de la capacidad para distinguir

un abjeto de otrc; es la disiancia mlnima que debe haber entre dos objetos para que $ean

percibidos como objetos separados.

La mayoria de las células euearióticas miden entre 10 y 3ü micrómetros de diámetro,

sntre 3 y 10 veces meilss que el poder de resolución del ojo humano; las células
procariéticas scn aun más pequeñas. Para distinguir cálulas individuales, y ccn mayCIr

razÓn las estructuras que fas crlrnponsn, debemos usar instrumentos que suminÍstren una

mejor resolución. La mayor parte del sonocimiento actual acerca de la eshuclura celular se

obiuvo con la ayuda de tres tipos diferentes de instrumerrtos: el microscopio óptico c

fotónico, el mícroscopio electróni*a de transmisión y el rnícroscopío electrónico de banido.

Las lentes que focalizan la luz en ef microscopio ópti*o san de vidria o de cuazo; las de

los microscopios elecirónicos scn electroimanes. Tanto en el mícroscopio óptico como en el

electrúnÍco de transmisión, el rayo de ífuminación atraviesa la muestra. Én ef microscopio

electrúnica de banido, se refleja sobre la superficie de la muesira.

Los rnejores rnicroscopios ópticos tienen un poder de resolución de ü,2 micrórnehos, o

200 nanómetros, aproximadamente 500 veces rilayor que el del ojo. Con el microscopio

Óptico podemos distinguir las estructuras más grandes dentro de ias céluias eucariéticas y

iambién células procarióticas individuales, $in embargo, n0 podemos observar fa estructura

Guia de Prá*ticas de B|OLOSiA CELULAR OO UNIVERS¡DAD LOS ANGñLIS D[ CHIMfiOTE

MBLGü. LUIS ALBERTC SANCHE¿ ANGULO IvIEILGO. JOSE LUI$ GUTIFRRFZ APONTT

interna de fas cólulas pracadóticas ni distin¡¡uir entre las estiucturas m*s f¡nas de las

células *ucarióticas.

. Elrrja milo firi*Í¡t* ¡h:

laiirrirgen
"&
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*lt:.r¡l'iute*.

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r;i itlicrc:ru¡rud¡tlco hi ¿'}

trfi"r*loop.or:lccrrdn¡cc k4i.*:*r¡iioere(lrdr¡ic(1
{c {finsff L{¡{i{r de h*rrido

Cnmparación efltre diversas tip*ri de microscopios

PARTE$ DEL MilCRO$TOPIT¡ C$MPIJf;$TS

F 0cular.
1. P¡üRTE Ópfica:
F 0bjelivos.

F Tubo óptico.
Revolver.
ts Brazo o columna,
Flalina: Carro móvll o uharriot,
2" PARTE MESANICA: Tomillo maüi"c,métricrl.
Tnrnillo mícrornétriso,
ts Pie o base.

(
t.
lF Condensadnr.
3. $IliTEffiA üÉ ILUMINAGION: 1F I
Diafragma.
l). tíltro,
,P Fuente de iluminación.

Guia d$ Frárücar: de Sl0L0G[A üILULAR 61 UNIVfiR$INAü LüS ANGTLE$ T]H TI.lIMBOTü

MHLGO. LUIS ALSf;Rl'O $ANCFIEZ AI'IGU[-O h4LILGCI. JOSÉ LUIS GUTIFRIIEZ APÜNTE

PARTii $PTICA:

a) OC;ULAR: l3e rJcnamina a*i por que vr cerca del oj* del c,bservador. Consta de un de un
sisrremn de dosi lentes planos convex{}{i, dispuesics en iln tuho cilindrico de metal, con un

diafragnra interrnedio; anibos lentes presenlan las c¿rri$ planas dirigidat; al ojo del

sb$erruador y las caras ronvexas hacia el objetc. l-a lernte que va cerm del ajo def
cb*ervador se d,*ncmina **ular prcrpiamente dicho y ta lenle inferir:r se le G{:noce con el

nombre de ler¡t* de campc. f;n la p,arte iateral o superior del fubo cilíndfico lleva una
numemr:lén {5x, 10x, 1Sx}, gue indica el número de ar"¡nnentos propic's def üiltrlal.

[:l ocular da la image,n virtual y derecha, y se icrma a la altura derl diafragma. La

resolucirin del microscopin, osea la capacidad de merjorar ios cletalles cle un objet0,

d*p*nelc derl ohjetivo, de ln longitud de onda, de lui: utilizada y de ia calidad del espej* 0

fuente de iluminacrión,

b) OEI;JF:IIVSS: ilerncminados asi por qile vün cerca dat nhjeto p*r observar. $lu sist{lma de

lenters dan una imagen real * invertida del objrrto. La lentrl de la parle inferior se denornina

"lente frsnt¿¡|". En la parte del tubo metálico lleva inscrita una nunteraciéri (1üx,40x, S0,

10{}x} que indica $l númerc' de aumenic's propics del r:bjetivrr. f;ntre las díferente cl¿lses de

objetivo*, tenemcls:

- Olrjetivo$ $ $eco: Aquellos en lcs que *n'tre la l¡*nte lnrntal y el preparad{r a observar,

no existe sustancia alguna, r;xcepic el aire, $e utiliza ¡¡eneralmente par;a c,bseruaciones

cle prepararlos en fresco. Son de trss clases, de ar:uerlo al número de aurntlrrtos.

Ftequeñr: anmrtnto : mairor de 0 y m0n0f de 10x

Medlano aumento : mayCIr de 10 y ntenor de 3üx

Gran aumentc : mayol de 30 y menür de ütlx

- $lrjeüivr¡s rl* Inrnersión: Aquellos en los que ernlrel la lente frc¡ntal y el preparado a

crbserrvar, srl interpone una sustancia liquida "ei Aer:iie de lnrnersiún". Se' utiliza para
observaciones de prepelrados en $sro (r:oloreacÍos),

CaracteristicErs¡:

Guía de Frácticas de BIOLOüIA (IELULAR ü2 UNIVII:RSiDAD Lü$ ANGELT$ DE tfjlMBOT[

MBLGO" LUIS ALBERTO SÁNCHHZANGULO MI}1GCI. JO$É LUIS GUTTftREZAPOFITE

És eide mayür aumenio: SSx,-lüD4 jÍüx, J5óx"

La hnte frontales mÉ$ pequeña.

l-lava inscrita una fracción da fr 0 ufi dsdrnül: 1.?ü, 1.3ü.

ileva una kanja o una ffiya nryra ¡)frra facilitar su identificaciún.

Dii¡tan*ia Socnl:

F¡¡ fa distancia que existe entre la parte inferisr tle la lente frontal y el objeto por

cbssruar, c$andü ss tiens un enfcque üerfesta. Eetas dis{ancias fs#}lss pfiru l0$ riiferenfes

objetivos son:

Fcqu*ñc gilmsnt*;enfre 0.5y 3,0 fiffi,

Mediana aumento : entre 3.0 mrn. y 0.5 cm.

Gnan aumento : entre 1,ü y 3,0 mm.

lnmersión : entre 0.8 y tr.2 mm.

PARTE fifiECANICA:

ünmprende el armazén o soport* del micntscopio {srmtiene la parte ópticai, permitienda

los desplaramientos necesarios para el enfoque e ilunrinación del objeto par ohservar, Está

farrnado por:

F Tuho éptico, ts metálicc y de fonna cilÍndrica errnegrecído interiormente para evitar la

reflexión de la luz. En el extremo superior del tubo va el scular y en el extr*mo inferior el

revolver donde van los obietivas

ts Rovolver, Dispositivo metálico de forma circular, atornillado en la parte inferior del tubo

ópthu, gira sobre su eje central. Presenta 3 a 4 arificios a los que van atomillados los
objeiivos. Este disparitivo sirve par:a cambiar la posicién de los objetivon durants las

obserysciones,

superior se encuentra el tubo óptico, que en algunos *icroscopios es rnovible en forma

Guía de Ptáclicas de 3l0L0GlA CTLULAR 63 UNIVER$IDAD LOS ÁFIGELIS ilT CHIMAOTE

F¡i8i..ttr. L.,Jt;i Ai-HIR iü *(A¡i{]FrH¿ At,}üut.ti i.dEr L G{} jCfi ü LtJ lS GLÍ't l,iFiir.ii:Z,A,fr0NT[

veliif¿ii, Ad*n*s rs*iien* ;i ia gilaiin* 1' ll*u* a l*s tnrnillt)$ ril*tr* v ,nicti:niáirir*. F)*rmiis
mí:'.J*r [r tlar;{a,j'a' e! n¡¡r;r:s,:opio.

Le Fleltilr*: Ulr* ¡:leca cuadrada, ücn Lií¡ *rrfi*i* r*rrtrel tircul.:t, ilor,;1**cie üiirtfiil lll$ íÍileg
iuniini¡st¡* pr*caJentex dsl srstem* dr¡ iii,¡rnlriaciún. Sthi'e la ¡,ip1¡¡¡s $r) *üi{ri}* ,+i p,:rt*

cbj*1an r:crn ía ¡'nuettr* ds *huer,¡aci*ir, sutet*¡ncioirS ir*ft ciu* pleqi:itas r]'tL{v[íül, l¿¡$ ',rin¿es.

L*s ilric*ucü*pi1]$ müd*$ü$ pft)s*nta un dispe,sitiver qr"re' ¡:criliie irtfiv*r **n f;ic.ilieie¡J el

ohj+:t* "üai'r'r Mó,lil o ühürriot".

Log
"i"',lr*i!l*s y iidicrr:rrirátrigs: ${, Éini:;iJ#utrarr cn la ¡;*ri* .$tps¡iq¡t g infcricl
fr,.{;¡{:rrrrct*tr!t:e'

de i* [*iurnrra: prrrritr, iitü!,i¡í"ei tubc {rptic:a * lr piaiinx, segu:r ai :lipr; de mir:r'(rs*¡:pio, en

dor; u'*i*r;iCacl**: irn avai'jürr rá;lirjn, s;n *ll¡ggiq*$lffi, f,üffi *laJizi;ir +l pÍ¡'l*r I'rifi-rqle *el
übjrlio; ]r Lifi ürJf;ir]ce lerlo, rr:n *l &{lüip.ntr*E¡ (rmia cleii:ajrr ciel ¡n¡:cr'r¡lr*iric+J, ¡;ar;* el
*nfai¡ue de prer;i*itn, * aju:;ie vi*ual ile acu*:'rJc al obi¡*rr.'¿rdcr.

Hn loii iitiür*.g{;CIpiüs i"liüdr,lrirfis ¡¡n'iircr* t*iniil,:t ** sn*x*nli'¿ui afcicnnci*s ¡rt-tt' rjil .010

toniiiier.

F' Plgr $ Sasr, rjel rnicrssc*¡iin; pie¡a rr;rciec 1¡ p**acia c¡u* $trv* 'J* bag*, ¡t,:lrirliti*nei,t el

süpütt,l ii*f inicrc*icpia.

s$$Tgfiñe DH lt.Lf{vifi\tAclú¡ü: ,

$e encusntra ubi*adc¡ en l* part* inrerinr der la pl;,tina y si-r l*i:iió* sc c*i1t:{¡i1ti'ítr y dirigit

el haz ile ii;iniftil*s har;a el nhi*to dt¡ i:i:sr;li¡acióit. Hsta cr:nxtltuido i:cr:

F ñspr:r!* rie i'srna cir*ui*r ry¡*vibla a l,¡tl más vaiiadat; pi]$iüic'r+s. Fielgeriia. ri{rri *eras: una

rffil iitlff eti¡i*i"fii:ie plan* para reflejar la lu¿ n,*trirul, y *tffi ü n ,Jriril sLip*r"fi*ia r].]¡lr{i"Jü f}aÍa

ia iue ar1¡firiai, su funci*n cs dli'igir la lu¿ srrhre [a ah*rii¡ra del diaira¡¡tr:ia- En iol
mir:r*ricopí,:s ccn il¿riniiracíiin antifisiai e*t¡ rerrnpla;i:ad$ pfir ün iluririnad*i'.

Guia rJ* Ftiistir:al; de Bl*L*ülA {jf LUl-AR s4 {.jNtv[:its!t)Aü Lü$ Ánurffi.t i]E fll"iiit{BüT[
MBLGO. LUI$ ALSERTO $ANCHEZ ANGULO MBLGO. JOSE LUI$ GUTIERREZ APONTf;

F Diafragma, constituído por un sistema de laminillas metálicas dispuesks

concentricamenle. Permite cenar y ahrir, permiliendo de esta mansra regular la entrada de

la luz. Funcisna r0m0 el iris de ajo, pennitiendo graduar la intensidad de la luz

F" tondemendor formada por un canjunta de lenles que concentran los r:ayos luminosos

dirigióndolos hacia *l arificio centralde la plaiina.

F Ps*a filtro, dispcsitivo que permite colocar filtros de diferentes colcres, los cuales facilitan
la observación.

OBJETIVü$:

s Reconocer las diferentes partes del microscopio compuesto.

s Usar corrsstamente el microscopio compuesto.
s Aprender a calcular correctamente el aumento total de una observación mícroscópica.

Guía dg Prácticas de BIOLOGIA CFLULAR 65 UNTVERSIDAD LOS A¡¡EEMS OE CHIMBOTE

MBLGO. LUIS AL8üRTO SÁNCHEZ ANGiJLO MBLüO. JOSÉ LUIS GUTIERREZ APSNTE

II. MATERIAL Y METOüO$:

A. DESERffiIé¡{ Y ffiAruñJO SHL $.¡ITRCISCOPTO üüMPUE$TO:

A,{ ffiATERIAL*$:
1. $J1at*rial biológico:

- Hebras de algodón. {Froparcionada pnr Ía *átedra}

2. ffiateriales, instrurnentos y equipos de laboratorio:

- Gotero.

- Lamina poüaohjeto.

- Lamina cubreobjeto.

- Pinza de punta frna.

- Micrsscopiocompuesto.

3. Reactivss de laboratorio:
- Agua destilada.

- Xilol.

A,,| FROCEOIMIENTü:

Flacer uso de gráficcs y con la ayuda de las explicacicnes del prafesor,

identificaras las paúes del micmscapio.

MANF,jO:

1. Limpie bien la lámina portaobjetas ron un pedazo de tela 0 con papel lente,

manejar ia lámina únicamenie por los bcrcjes,

2. Con la ayuda de un gotero coloüar una gota de agua en ei centro de la l*mina y

luego poner una hebra de algodón. Colacar la laminilla sobre la muestra.

3. Colocar fa lámina sobre la plaiina *ujetándola con las pinzas sobre ambos
extremos.

4, Seleccionar el objetivo de paqueño aumento i4x) y observar por el ocular.

5. Regular el condensador {Mover hacia arriba o hacia abajo)
6. Mover hacia aniba o hacia abajo eltornilla mamométrico pan poder visualizar la

hebra de algodón y luego mover et tomillo micrométrico pafa obtener una

imagen más nitida. Ajustar la intensidad de la luz con el diafragma.

GUÍAdE FráCI¡CAS dC BTOLOGIA CELULAR O6 UNIVER$IDAD LOS ÁUCNTS DE CHIMBOIE

I

i.

MBLGO. LUIS ALBERTO SÁNTHEZ ANGULO MBLGO. JO$E LUIS GUTIERREZAFONTE

7. Rotar el revolver pa¡a poder cambiar a otros objetivos; con la finalidad de

ohtener imágenes de diferentes aumenios

B, üALTULO DEL AU$J¡ENTCI TOTAL NF UNA OB$ERVAGIÓN M$ROSCÓPIC¿:

El Aumento total de una observasión microscépica se obtiene al MULTIPLIüAR

el aumento del üBJETIVü porel aumento del OCULAR.

Asiporeiemplq:

$i el objetivo es de 10 aumentos ("10x) y el ocular de I aumentos {8x} la observación

realizada tendrá 10x X Bx = B0 aumentos ó BOx.

ü, EUIDADO$ DEL H¡ITR$$COPICI üOffiFUE$TO:

El microscopio es el instruments más delicado y costoso de nuestro squipo,

Debes de manejarlo con mucho cuidado, puqsio que $u eficacia depende
principalmente de Ia limpieea de sus lentes y del buen ajuste de sus diferentes paües.

Cuando lo uees ten presente en todo momento las nermas siguientes:

>' AlTranspcrtar el mieroscopio, agárralo si*mpre con ambas manos, pcniendo uno

ba,io la base y elotro scbre elasa, ilanteniéndolo en posición vertical.

topar y hacer caer.

>' Evita denamar cualquier sustancia en la platina y otras paries, si le cae agua

tlmpiala de inrnediata utili¡ando una toalla de papel o tela suave, pracurando nc

tocar la lente que está en el orificic central. Guardarlo al finatizar la práctica.

insirucciones, consulta a tu profesor. No inaies de limpiar las lentes con papel o

Guia de Prácticas de B|OLOGÍA CELULAR 67 UNIVERSIDAD LOS AI'¡GELES DE CHIMBOTE

MBLGCI. LUIS ALBIRTü SANCHTZ ANGULO MBLGO, JCISE LUIS GUTIERREZAPONTE

tela carriente, puedes rayar las lentes que cuestan casi tanto como todas las otras

partes juntas. Recuerda que las lentes solamente se limpian con papel especial

para lentes,

Cuando $e u$a el abjetivo de inmersién, procure u$ar poca cantidad de aceite de

inmersión (1 gota). Luego de finalizar la observación limpie el *bjetivo con xifol,

procurando también usarlo eil posa cantidad para evitar que se aflojen los espeios.

Antes de guardar el rnicrnscopio gira bien el revólver, de manera que quede

dirigielo hacia la platina el objetivo de menor aumento. Besconecte

cuidadosamenle los enchufes del toma sorriente, No tire del cable de la corriente
para evitar su mallrato

Guía de Prácticas de BIOLOGíA CELULAR 68 uNrvERsrDAD LOS Arue rmS D[ CHIMBOTE

i'4BtGO. L{J IS AI"BüRTü SAF{ü¡.18¿ ÁNfi U tCJ rvitL$$, J*Sg LUI$ GuTll.RI!.HZ ¡\PC)f'lTE

tll. Rtr$|.¡LTér**$:
prrtrTffi$ üEL $q{tR*$ü*ptü früewilff$Tü

üri- de-Pr'árliss- fi e Rl0L,)*Á¡f; LLJI-C $$ {J¡\¡lViln$l|},AB tQ$ ¡,i\iGEtE$ t}* tl.'lIMBOTE

ful$LGCI. I"Lii$ ALñüFITT} SA¡.JÜif ffi Ai\iGULJ] i,tBi.üü, .i{l S I l- Li lfi GUl"l üF.Frli:.i Ar*LtT*

ü.e,LtLlL* tll¡L &L¡lffiE:Í',T* TüTé,Í" nH {Jir¡A ü$$f;iQ,V,&üir-'\hl l'.Íit,q'}{it'::}pK:A

Conocie;nCr: gt s3g¡rirrfiientü at'itsricr V c{)fi i':s cint*s ri* tu mis¡*si;t}pic, i:oi}tpi#tfl i;l tigui*i'tte

isLria:

ggpg[iht'i!'il

T*TJil,.

Guia de PiiicticaE el*: BIüLOGIA *ELLJLAR 7ü LJ{\iv[ii$iDAr] L(lti ANüILilS t* r)f-lt¡i8fl|f,

I

II

[,!trI,GO.
tr¡ |JL LUIS ALBERTO SANCHFZANGULO M8LGO. JOSÉ LU¡$ GUT1HRREZAPONTE

J rv. nlscuslóru:

OU|A dC PTKIíCAS dE BIOLOfiIA TELULAR 71 UNIVTRSIDAN LO$ AruOTUES DE OHIMBOTE

Nst-co luls ¿LBrRTo sÁNcnez¡Noulo*.. _.rrgleo .JosÉ Luls üurlERR[ZAPOl{rE

v. eCINclU$roNÉ$:

VI. RHFüREruüA$ B¡ffLIOCRÁF!üA$:

GUíA dE PráSiirAS CIg BIOLOGIA CñLULAR 72 UNÍVERSIBAD LCIS A¡¡EHMS DH OHIMBOTÉ

MBLGO, LiJi$ ALSTHTCI SAI{CI{ñ¿ANGTJLO I,dBLG{i^ JO$É: LUI$ GiJTIirRiqE¿J{PüI{TE

TIJH$TIüruAftIü

1. ¿t*rn* rl$ y pau quú $¡rue el revalver?

2. ¿Quó utitridad tienen +ltsmilla Macram*lriffi v elf{licrnmétrlco?

3. $ister¡a de [ent#s que tCInfientra los rayos luminosss.dirisióndaloc hacla ia piaiina:

4. Sispil*itivo que r*gula ia intensi{fa{iqfe [uz:

5, Hl aunlenlo total de una obseruacicn con el $icroscoilio se ohtien*:

S. Unidaclde n¡edida del rnlcrmsanio:

7 " H* que cfiri$$ se hace uss del Aceite de inmeníón:

Guia de Fr**ticas de firCILüüíA CEr-ULAR Ta UNtvüRsrnAp ffi$ Ap¡exmg firti fiHtMBOTH

 MBLGü. LUIS ALBERTO SÁNCHEZ ANGULO MBLGO. JOSÉ LUIS GUTIERRFZAPOhJTE

PRACTICA NÚMIRO OS

I-A CELUTA: "PRFPARATIONFS MICRO$CéPrcAS"

I$¡TRODUCITIÓH:

La c*lula representa fa unidad biológica de todo ser vivo, el conocimiento de su

estruclura, nivel de crganización y funcionamie*to proviene por ufl lado del desanollo de la

microscopía óptica y electrónica {y las técnicas asocladas a ellas} y par el otrs de los
estudios bioquimicos que, desde los piimercs aislamientos de los componentes celulares,

llegaron en su expresión más acabada al 'conocimiento de los mecanismcs de

funcionamiento a nivel molecular derivando en lo que hoy se conoce como Biologia

Molecular.

Todas las células comparten dos caracteristicas esenciales: la primera es la presencia

de una membrana externa que separa el protoplasrna de la cálufa del media externo, la
segunda caracteristica es el material genético que regula las actividades celulares y

transmite las características a la descendencia. Exís{en dos tipos de células:

PROüARIOTA$: {"antes del n*cleo"}y fiUCARtrOTAS: eu= verdadero, karion = núciec. Las

células eucariotas presentan núcleo rodeado por una mernbrana o envoltura nuclear.

En la casi totalidad de los mícroscopios el materiat biológico debe ser examinado por

iransparencia, vale decir que la luz debe atravesar los tejidos para formar imágenes, por lo

cual es necesario estudiar células apfanadas sohre la superficie de un vÍdrio, o finos cortes

de fejidos lo suficlentemente defgados c0m0 para ser atravesados por la radiación

lumlnasa.

La mayoría de lss componentes celulares no pueden ser visualizados dirertamente pat

que son transparentes a la región visibte delespectio, con excepción de algunos pigmentos

que absorben luz de ciertas longitudes de onda {sustancias ccloreadas}" La baja absorción

de [a lu¿ de la célula viva se debe a su alto contenido de agua, pero aún después de
desecada $u$ componentes presentan muy esca$ü contraste. Un método para

Guía de Práciicas,de BIOL0GíA CELULAR 74 UT¡IVERSIDAD LOS ÁI'ICTLTS DE CHIMBOIE

 r\'|BLGü. LUIS ALBTftTO SÁNCHEZ AI,IGULO ¡J8LGO. JCISE LUIS GUTIERRTZ APÜNTE

toiltrarrestar esta lirnitación es emplear colsrantes que tiñan selectivamente los distintos

com ponentes celu lares.

Para ser cbsetvadas, las muestras deben ser sometidss a un fatamiento previo. Tanto

en el micrascopio Óptico como en el microscopic elect¡ónico de fansmisión, la formación de

una imaEen csn un conkasle perc*ntible exige quc diferenies partes de la celula difieran en

su fransparencia al haz de iluminación, ya sean rayos de luz o elecfones. Las partes del

especimen que penr:it*n el paso de la fu¿ o de los electrones aparecen brillantes, mieniras

que las partes que bloquean *l paso del haz de iluminación aparecen oscuras,

Las céluias vivas y sus paries ccmponenies $0n, no obstante, casl compleiamente
Fansparenles a la luz porque el 70% del peso de las células, aproxirnadamenle,
corresponde al agua, a b'avés de ia cual la luz pasa fácilmente. Para crear suficiente
contrasfe cuando $e usa gl microscopio éptico, las células deben ser tratadas ton

cclorantes u" ctras sustancias que se adhieran diferencialmente a componentes

subcelulares especificos, c reaccionen con ellos, produciendo regiones de opacidad
diferente,

En ia actualidad se está produciendo un rápido prcürsso en et uso de otras Écnicas

microscópicas; pCIr ejempto, acoplando cámaras de televisíón a fos microscopios apticos es

pcsible efeciuar las observaciones en la pantaila y grabarlas en una cinta de video o sn una

compuiadora personal, Se puede reducir el "ruido" de fondo, mejorar e[ cantraste e

intensilicar aspectas particulares ajustando los contrates {o ejecutando determinadas

Operaciones con soffware e*peciairnente diseñada para tal fin). Las técnicas de televisión

aplicadas al estudio de la célula uiva revelan proce$os no vistos previamenie dentro de la

célula.

f n microscopia, l*s preparados para las observacianes pueden ser de das clases:

T" PREFARAD$$ EPI FRF$üS:

$on aquellos en que ia susiancia examen n0 se encuenha fija a la lámina
portaobjeto, pero está sumergida en una sustancia líquida (agua o S$F) y se utili¿a una

laminilla cubre objetos para la cbservación, la cuai no exisle ninguna susiancia entre el

Guía de Prácticas Ce üüLüGlA CELULAR 75 UNIVFR$IDAD LOS ANGELES DE CHIMBOTE

fi,IüLüCI. TLIIS AL*EftTü SÁi{CHffi ANüULI} MFLüü. Jil$[ LU]$ üi;T1FHRE:¿ ApüN'f[

lenie frcntal clcl abj+tivo y el preparadü, excepri:r el aire, ilsta clas* d* prcparerios

cr:¡"núnmente se cbservan eon abjeitivcs a $sfs y *l mir:ra*c,*t¡l: eri poslc,i*n nr:rnt*|.

¡a
pffi ¡ll;'Affi.&üü$i H,${ $Hü*:
$on aquello$ crando la suskneia *xanlefi s* *ncue¡rlia fija al ia lánlina

p*rtaat{etc y existe u** *u¡ilancia sntre *l lenier frnnteil d*l o*ieiivc y ei pr*p:ar*d*
ll*mado a¿eite de in¡nersión. La *bseruitclór¡ iie estos prep*r;;dr:r previamei:t*

*c¡lareados se ¡eal!¿*n r,on ef *bjeiiua de Inmersión {'}0üx}. E*ie tipo de pr*p*r;idr:s se

hacen p*r exten*iún n ih:ti*, de acuerdo ai síguieni.* pr*c*dinrieni.l:

ffNfensinrn: il*nsiste en *xtender la sustancia *¡:sílisfl *rn ei portarbjehs qlslmodo mÉs

u¡"rifcr¡r¡e y fino en el centrn de la lánrina. La iánlin;¡ cieh* estar carnpf*tamcnte iimpia y

iliilizendq para fa exiensiór¡ otra lámina pcrtanbjelu, una tcrunda, mnndnrlie*ie* u una

*sa de Koll {ilsil bact*riolúgica}.

{:rsfi*¡: uonsishr *n expandir la sr¡:iiannia *xamnn en el prlrii*abjelo*. Hn el tercio

+xt*rnc de la lámina se colcca la suetancia examen {ej*mplfir sangre} y i;nn ei h*rcl*
de r:tra l*mina ool**acla s*br+ [a rnüsstra y *un ángulo ri* 45o cle Ia crtra láruina permitir

qu* l;r susianci;¡ se extienda en toclo et barde de ia lámina supr:ii*r y d*slízerr #sta hailia

r¡l *t''o *x.trcrno mediante un mcvirniento rápido, tr*tando de cbt*ns¡' un lir:üs finc y

uniforme,

Fijeeión: [s un prüüssü que sigue a ur]a exte¡rsirln 0 a üil frotis, mediairt* *l *ual se
ransigue arJhe¡"ir la si:staneia fuertemenfe a l* lámina portaobjeto*, La fí.leciún ti*ne par
iinalidad mantener ü r;+nssrvfff su* prc'p!*s *iem*r¡tos esfutturaies, con la ntas r¡'linina

nlteración. L*s fijadcres r*á* utíli¿ado* en los prerpar*d*s $n $eüo ean: a{*nho[, caícr

rlslmechero y la tem¡mratura delm*din amh¡ient*

r3*l,C}RAtl*&lH$:

[u nl pruces* mediante el cual uil ci]*rpr] tcrüs sci*r irajo la ac*ión ,Je oira

susrpü o eu*itancia llamado coloranie {r;ustencia capas d* tian*nlitir su c*lnr a *i¡ns

Guia de Pr*ntic*s cle BISLOSIA üTLULAR 7S Lrl'iffrFlslD,qD Lü$ Árunnrg Dü *HlhfBüir

lviBLG{}, l-ljl$ ,.qLn[RTt] $,ql'l{ll-i[J i\l¡r3l-Jl{i },4ü |..üii JCI$i: t.Uili GUI ifi{qüilZ ¡\i'üt+-i[

üilru"i)ü$i y {iir* nCI s{j Cecclnla i}üü ¡auail.u; rJe ¡:ijua ü fliiiiqi;ifr' *iia ;il;iaiicta
enrpi*e*a {;{irilc iJii;o¡iente [xishn vari*t; tipcs ii* t{r}i:'r,eü;ii:1*5, trrslirSrr ras ir*s
corn i¡nme*tr} hrmilicárJff s,

ai {l'*lcj}r-#{:iü* $irr'iple: Scrr aqt*iils *n ias ütts i)iii ri$a rii-r,¡tio ;;';ior.sri:e. ;ijerrpln: c*n

a¿¡:f de nstil**+.

itl {.lr"tl*rr¡rc,idir'¡ #r.rnpu*dc. * #ifet,nncial: ,3r.':l s':¡il*ei:iis e¡¡ i;s iir"r* $ei 0nii}tean ina.s fie
un c*ir:r*¡:ie. L+:s rnáe r{:tylüi:ri$ $ün la rr.ritracir¡n $r*m y ia iie; Zieiili.ir¡iEl**n

F É, . 'i,*$ tüg i{ :É RÁL fi $ I }E f.¡ i{ A **i-¡}ñÁc i*ir! :

)r ilxtcrnsió,n, en i*rníria purrt* cbjeri*s rcli ;n ;lyuda ds r¡i,il;iseii-r**t*riri*::gi';a i;ricroir)

u rtrcr inslrum*n{ü.

j¿.' F:ri**ló*, *oi la fin*iiCad de ;:eil¡erir firrnenient* i* pre¡:eraciún s*b.re in ii¡rrina iie
etfijp{*a pars *$ie iÍn ef r:aicr stifivf: o si .*1,:choi et*r; *sie uliim* e;r indispcnllri:le

cuando :sr; t¡ata cl* mi¡eg'tias $ef ssas,

); T'i¡tción,, ccr¡ el i:nlcr¿nt* s ilrupü d* cerl*ranie,c *ir*Sidüs.

)' L,xvar{*, a chario uiliizandc ag¡Lr;t coriente,
)' $*¡:xdo, puiJi*rrdn uirli¡ar par';: eist* pae* *l c¿ri*r suav* o el ;lire s fiiesirin.
'i/ {}hsei"r,fi*lúfi. pürs c¡b*eruar una lámi¡a **l+i'ead;¡ $ii d*u* rle *sperar rrii-r{} ss{fu$,
scrhre tqci; cusn{iü r:* v* n irtifiuar el *brieti,¡* d* ir¡n*rsi¡-in.

tüJiiTti/$fi:
s Re,cc'nc*er i*.t crllul*l* cn *l ielida vegtrtal ri.gl ci:l'cha, t**tü i"¡n áF{¡ii* al r:stiiclí* tlrs i&

*éiui;t *n su c*njunt*

+ Rsc*no*et la crrga*i;:aci*n el;ti'ucti.rral d': la ttiiui*

q ilc'rnprei-idci ia impurtancra dci c;rlnoc¡inisnirj ,ie la *éluln, a $u,,,r4s cl* iaE fuirní*as de
r:clor*cir:n.

# C*ncrcer. ís*lií*r y adi*strai'¡;e eil lÉr t*cnica rjs la cr:lc¡rec;iún ife {iiem,

& [si,*bi*c*r l;lii sem*jan;l*s y difernn*ias *n1¡* c*iillar¡ anirr¡tle:l y veg*iai*s

s [stalilecer !;ls nenrcjan;ss y riiferencias enl¡e rtiliifas ¡:rr:carictes ,+ eu,:ari;.i:ar;.

üuía de F'¡"ií*$car; de SlüLüftl1\ {;üLU|-AR 7T UI\tiViltSll}É,D LOs Al.Ji;lFL[$ ü[ CHffrlB*TÉ

 MBLGÜ. LUIS ALBIRTü $ÁIüTHHZ ANGULü N,,IilLüü. JOSE LUI*: (}LJT¡EiIftff AI]ühi"If;

Il. e{ATffi $P,ldlt'/ fifiHT0$flS:

A- f;g{.'Ltt-gF EU*rSH}ST.4S; "FAFF¡11.&etSf$ 5$$ F.,f1S:$*Li FI¡XRsi i-A {3#g{*i{1fé*tf5$f
[]t¡ pR#?s¿ül\fitt$ Y .4LGAS"
ji\.i fdATñlEl,&LES:

i. F¡letedal bini*gir;o;

- Agua estanc¡ida "|:lant&nü$ de Villa hiarix"ipropcruinnacio p*r el aft.in:nr:),

?. M*tcrrintres, !r¡Eitrurxent*s y *qui¡lc* d* i*l$s¡e{ari*.

- Gatsra.

- i_anlinapartanbjeto.

- Larnina cubr*objeto.

". Flpeia pateur,

- li.4icrascopi{i iomilues{ü.

Jr.t pffi*üHflt$Jfi[NT#:

1. [n una iámina pr:ria *i:jei*, ügfegar 1 a 2 g*ias d* la n¡ue*ira.

2" Colo*ar Ia laminilia.
3" übseruar en cl rnicroscopin, fi rnefi*r !r rfiry*r al¡rnentq.

4. fisquernatir-ar yicr rlibujar ler cl¡servada.

ffi. filil"ULA$ H[j{}ARiüT,&$: "lpHSp${ACiSiS f;ru FItHSüi} PllR-*, !-{, t}lü$ffiFt'f,S,tí{iN

üEi sEi"t lLAs vx#fiTÁi"H$,'
El.j $e'lATfiü,{Ai-H$:

1. Pslate¡iñl bicl*gi**:
- T*jltic vegetal de corci¡r: {pi"apor*itnadn par ef aiumn*).
2. &ñateriules, in*tr¡.¡msnt** ¡¡ +quip*li qie l*h*rataris;
- E¡iilete.

- üotsro.
- Navaja nueva.

- Larninaportaoirjekr,

- Larninacubre,objetn.

- Poda lámina.

Gui* de Práctir:as de LlfrSLOGlA f;ILULAR rB LtNiVER$il]Ail Lü$ ,{NüüL[$ iiÉ ül-ilMtiüTf

MBLG{}. LLil$ ALBI:F:Tfi SAf i[l"i[Z l,irlfi¡"Jr-i.¡ il4f:["Sü. ,i0.58 Li.Jlii üLrríEiiii[Z APüNT'I:

- Prp*ta ü,si*ur.

- Fiace peili.

- fuliclr:scc¡É1i{} **r.iipilei3t$

3. R*¿ic;tiv*s de l¿lü"*q¡rnt*ii*¡:

- Agu*de*tiiada.

#, t FRü*l:í t.}iF,{iHi{Tfr¡;
'Í. Cur i¡na iiavajx rc*ii¿ar r;il{c$ 'íi**u a un k,t;i(i rJc +*r*hr¡.
2. to* la ayutfu d* rin ssiik¡tet ccl*c¿ir u Cü:r ürlr,t*s Íir:tr; iJ¡l ijfliün'.i *i:bir¡ ia iámín¿¡

pcr{ar:injetr:e .

$. Agr*;ar' i a ? gota de agu;r iiesiíia'i:;.

,i. C*i*n;*r [* laminilfa scbrer *l pr*paracÍo.
5. üb*e¡lvai'cn *l mi':r*rccr¡ri*, a í¡rüír*í y m,lli¿üi au¡:t*nlc.
6. [sr¡u*meti;*r if* rjihirjar icr *hseruad*.

t, '{:frt"Ljt$' ütJ6,qR¡gn-.&,li: "Pfi:i:il;}Rstlt,il{ Hh¡ f:Rñ$t{,} l:'A$:iiq Lfi Sf;í,$*il:rr'¡lillüf,l

'il ü l.li ;.4$ Vf;i#HTAL¡,1$"
ri.l ikiñ3Hf{i,{ilüs:
1. hft*ts,riaí bi*ücgicc;

- t1 bulb* lilliu¡x ee$¡i "i;eh';iia ijc cai;rsi:;i" {pr';¡:ct*i*naci* p*r lcs ;rhrinr:ctsi:

-qe obt*;drur la **tát¡la.

2- |t*{atierrixl**, inx;tr*n¡ent*s i¡ **1r:ipos ci* ii*b*rafr¡rlr¡:

- fiistiletc.

- {:ioter*,

- Itlilvaja ilugv.i.

- F'lacas t;et..i

- F *rta l*inina,
- L;imina p*rta*bj*t*.

- L.!¡mina*.uhreobj*to

- lriicro*c*pioccmpu*s;tn.

riuia de Fráctic,:s dB lli$LrxiiA üf;1UtAR lü i;Nll,i[:fi$'lüh'J 1'0$ liiqgflts i]f; f;i4yll*Tg

h¡BLGCI. LUIS ALBERTC SÁNffiT¿ ANGULO MBLGO. JO$É LUI$ GUTIÉRREZ APONTE

3, Reaetivos de labsratoria:

- Agua desiitad*,

- Azulde metileno.

- Aloohol960.

ü.? PR0tñDtffitE$rr0:
1. $atar, con una pinza, Ia epidermis de la caiáfila de la cebolla; corfar en lrocitos
y colccarlos sobre una pla*a petri.

2. Agregar 5 mL, de alcohol (para desengrasa$ y reposar por unos 3 * 5 minutos.

3, Eliminar el alcoholy luego enjuagar los fscitos *0n agua destilada

4. Agregar 5 mL. a¿ul de rnetilena y repo$ar por {Jnos 2 - 4 minutos.
5. Con la ayuda de un eetilete sacar un trocito y extenderlo ert una fámina poúa
objetos. Sifuera necesario agregar 1 gota de agua destilada.

6. tubrir el preparado con una laminilla.

7. ühswar en el microscopio a menor y mayor aumento.
8, Esquematizar y/* dibujar lo observado.

D. eEtULA$ FUCARIüTA$: *FRHPRAü¡OF¡

EN SEC0 PARA LA 08$ERVAC[OÍ{
CELULA$ Aft{¡ruALES"

0.1 MATERIALÉ$:

1. R{aterial biológico:

- Mucosa bucal {proporcianada por fos alumnos}.

2. Materieles, instrumentos y equip*s de labcratorio:

- Hisopo.

- Lamina portaobjeto.

- Porta lámina.

- Mechero de alcohoi.

- Microscopiocompuesto.

3. Reactivos de laboratsrio:
- Agua desülada isolución hipotónica).

- Azul de metileno y Aceite de inmersiún.

Guia de Prácricas de ü|OLOGIA CFLULAn, $0 uNfvqftslDAp LOs Arucrtrs DE CH¡MBOTE

 M8LGCI. LUIS ALSERTO SANTHüZ ANGULü MBLGO. JOSE LUIS GUTÍ IRREZ APONTI

ü.* PRSTFüÍS{IFNTCI: -TOLüRÁTÚN $IMPLE''

1. Cbtencién de la muestra. Con la ayuda de un hisapo realizar un raspada de la

muüo$a bucal.

2, Realizar una extensión o frotis de la muestra sobre una lámina pcrta objeio.
3. Con mucha cuidado, fijar la muestra a la llama del mechero.
4. Agregar 1 * 5 goias de a¿ul de metileno "colorsción" y poner sn repg$o Ce 3 -
5 rninutos.

5. Lavar con rgua desiilada,

6. Secar al medio ambiente o alcalor moderado del mechera.

7 , Observar en el microsccpic gran aumento y luego con el objetiva de inmersión.

8. Esquematizar ylo dibujar fo abservado.

E. üfiLULA$ pRütARloTA$: "PREPRAC|ON Ef{ sECo PARA LA oBSFRVAt¡óh¡

ffiATTERIAS"

F.1 ffiATf;RIALE$:

1. Material biológico;

- $arro dentario {proporcionado por los alumnos},

2. flliateriales, instrumenios y equipos de laboratorio:

- Mondadientes c palitos de fósicro.

- Lamina portaobjeto.

- Porta lámina.

- Mechero de aicohol.

- Microscopiocompuesto.

3, Reactivss de lal¡sratoria:

- Agua destilada.

- Set de Gram: Violeta de genciana, Lugol, Alcohol aceiona y $afranina,

- Aceite de inmersión.

Cuia t#i*t¡*r O*
ilTITLGü. LUI$ ALüTRTü $ÁNCHEZANGULÜ L48LGil" JÜSF LUI$ GUT|IRfITZAFSNTE

ü.* ñrffi{-]tü st ffi tÉi*Ts : üüL#rui# *zu g*nqpi¡ *sTA $ $¡ Fffi ñt:Nü!.&L',{iÍqÁ$$,'

1, flblención d* la muestrs: i:on la *yuda de un m*ndadient*s reafi¿ar un raspacio

rle la ¡:iaca dsntaria cnn le tinaliclau ile ahtr*n*r s{l ssrrü.

2. $obrc u*a lámilie porta *bjetn, agr*gsr 1 -- it- griias de rgi.ra de*$fad,a y luega
reulirar la ext*ncisn o f¡ati¡; de iu mu*sÍra.

3. Ccn mucho euidado, fijar la ¡luestra a la llam* delmechero"

4. Agregar 1 * 5 g*tas de Vinl*ta ct* genci*na y dej*r actuar por 1 minutr:.
5, Launr üsn agua desfilsqJa, ¡xevia inclinaci{rn de ln lümina.
6. Agregar 1 * S goias de Lug*ly dejar aciu¿¡r pui ? nrinuia.
7 " Lavar eon agua desiiiada, previa inclinaclfrn de ler iámina"
S. Ágregar 1 - 5 g*tas de Ahshcl *c#t#na peruidecofarar (dejar a*tuar h*sta que
ya {m $e desprcnda más colilrantei.
g. L.av*r eon sgua destilada, pr*via inclinaci(rn ds la l*nii*a.

10, Agregar 1 - 5 gotes de $afnrnina y d*jar *rctr.¡ar por 3il - üü.segtincir:ri.

11. Lavsr con agua destilaeja, prevla inclinaciirn d* la nár*irra.

't2. $*urr slmedio ambiente er *icalor moder*du del mech*i"a,
13. *bservar *n *l rnicrcs*opio üran ailm*fit* y luego con eloiljeiiva d€ ifiriiersi*n,
14. üsquemalszeryl* dibujar lo cbseryaC*.

Guia de Prilaricas cle Bl0Lü#iACELULAR 8? U¡JlV*t,1$lttAD L0$ Á¡$nrg ü[: f,HiMB*TÉ

MBLüCr. LLll;$ ¿¡-er¡tT$ $Ál$Ci-lr¿ AhIGULü ¡!;t8 Lff {} iO$li !- Ul-} ff Ul'!i:ldi:? i:; i\P*itTÉ

III. RHSULTAil*S:

."".'..."."'--*'--r
M*tr;iialbiaiógir:r :
.at'" '-.rra,
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ilolor¡rción ;
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Clisurvaci'5n :
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Aumeni* tolal ,/ ,/
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Matf;'ilal hi*lúgixr

Tip,r ci* prflpfffirciün:

Colori'¡ciún
l
,

0bs*r¡acién
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I

Au*ten$ toiai \
\
-\-*.-.-- .-/- n-"-

Guía de Í]rácticas de üiüLüGiA ilELUt-AR S.? LjililVER$l L]$,0 Li)fi Al'l(ifltEÍi ni:i (;i'li['IDOTH
 MBLGO. LUIS ALBERTO SÁNCHE¿ ANGI-JLO lvtHlt0. JüSH LUI$ GUTIERREZ APONTE

Materialbiológico :

Tipo de preparación:

Coloración :

Observación :

Aumento toial

Materialbiológico :

Tipo de preparacíón:

Coloración :

Obseruación l

Aumento total

Guia de Prácticas ds Bl0LOcfA CELULAR

 MBLGO. LUIS ALBERTCI SÁNCHEZANGULO MBLGO. JOSF LUIS GUTIEfiREZAPONTE

Materialbiológico :

Tipo de preparación:

Coloracién

0bservación

Aumento total

Material biolégico

Tipo de preparación:

Coloracién

0bservación :

Aumento iotal

Guia de Prácticas de BIOLOGÍA CELULAR 85 UNIVERSIDAD LOS ÁI'ICNTS DE CHIMBOTE

MBLSO, LUIS AL$HRTO $ÁI'ICHF¿ ANSUL(} MBL*ü, JO$* LUI$ GUTTfiRHZ APüNTF

lv. st$ru$iüht:

üuia de Frá*tic*s d* Í}iQlcsiA CILULAR $ü ui\ilvfiR$inAD i-Qs Á.irlcars t[ t]-ilft,1süTE

iidüLü0. Ltil,? AL3[FiT{] SÁhilii{:ZANüilLt MALü*. Jü,q¡: t"Uit;GUTIE,-(R[:ZAi]ül'¡T[

V. tüír*{:i"u" ii}f{il$:

Vl. RH Fü:AüF{,ü¡AS *tB{jt}#fiJri:ii}AS:

Guia de Fr¡í¡c$cas de Bl{iLCGiA üil-iJLAR B] iji\Ji\if;fitiii]l\D l,üi; Ániefieu üf: üf"ilri¡l80T[

 MBLGO. LUI$ ALBERTO SANTHEZANGULO MBLGO, JO$É LUIS GUTIERREZAFOhÍIE

CUÉ$TIONARIO

1. ¿Qué entiende ud. por preparado en fresco?

2, ¿Qué precaución se debe tener presente antes de colccar el aceite de inmersión sohre la
Íámina cnloreada?

3. ¿üuál es la verdadera posición del candensador y el diafragma en una observación en

lresco y en una obseryación en seco?.

4. [structuralmente, ¿Cuál es la principal diferencia enire una célula animaly una vegetal?

5. Mencione diferencias entre una célula eucariota y una cÉ;lu[a procariota:

üuia de Prác{icas de BtoLOGi¿ 0ELULAR $g UFfiVERSIDAD LOS ÁUer¡-rS DE CHilUAOTE

 MBLCO. LUIS ALBERTO SÁNTHEZ ANGULO MBLGO. JOSÉ LUIS GUTIERREZ APONTE

PRACTICA NÚMTRO OS

MTMBRAÍ{A PLA$MÁTIEA: "PH RMEABILI DAI} CE t UI-,4.R"

INTROBT,ICCÚN:

La pemeabifidad es fundamental para la fisiologia de la célula y para el mantenimiento

de condiciones fisiolégicas intracelulares adecuadas, pues condiciona la entrada de ciefias

sustancias, n¡uchas de las cuales son necesarias para mantener los procesos vitales y Ia

sintesis de nuevas sustancias vivas, y regula la salida de agua y de prcductos de

excreción, que deben ser eliminados de la célula"

l-a presencia de una membrana establece una clara diferencia entre el líquido

inlracelular y el exlracelular, en fa cual la célula esia inmersa. En los organisrnos

unicelulares que creren sn las lagunas o en el mar, el líquidc exlracelular es el agua dulce

o la salada, ráspectivamente. Sn fas organismos multicelulares existe un fíquido interno

representada por la sangre, la linfa y, sn especial, el liquido inter$ticial, que se halla en

cantacto con la superfÍcie externa de la membrana celular.

Una de las funcisnes de la mernhrana celular consiste en mantener en equifihrio la

preoión osmótíca del líquido intracelular con la del liquido intersticíal,

Para comprender mejor coms pasan las substancias a través de la membrana celular,

se requlere saber y comprender más a rerpecto a las moléculas y sus movimientos. En

cualquier sustancía, las moléculas están en consta*ie movimiento, debido a la energla
cinética existente dentrc de las moléculas mismas y no a fueuas externas. ñl movimienio

molecular es ligero en los sélidos. pero mucho mejor en liquidos y ga$es. Él rnavimiento de

las molécufas es aieatoria; es decir las moléculas se mueven en lÍnea recla hasta que

chocan con otras molóculas, de tal manera como se puede imaginar al final tendrá una

distribucíón uniforme en cualquier espacio dado. A esta distribución gradual uniforme de las

moléculas en el seno de otra se le denomina Difusión.

Guia de Prácticas de BIOLCGIA CELULAR 89 UNIVIRSIDAD LOS ANGELES DE CHIMBOTE

 MBLGO LUI$ ALBERTO SANüHTZANGULO il4BLüO, JOSE LUIS GUTIERRFZ APONTf;

Las sustancias se difunden desde las áreas de n:ayor csncentración hacia la de menor

csncentración generalmenie. La rapidez de una difusión también depende de ciertos

factores ccmc la concentración, iemperatura y presión,

Se llama Osmosis a la difusién del agua a través de una membrana seleciivamente

permeable desde un área de mayor concent¡'ación hacia una de menor concentración.

Debe natarse que la palabra ésmosis salo se reflere a la difusión del agua. Por lo tanto en

la definición antericr, la palabra concentración solo se refiere a la concenfación de las

moléculas de agua,

Ahora se estudiaran [os efectos de la ósmasis de otro tipa de difusion en las cslulas
vivas. Al hacerlc, hay que recordar que la difusién $s un proceso meramente físico. Por fo

generai, no interviene la energía celular. Las molécuias se muevsn por su propia energía

cinética (caior), Par esios se dice que la ciifusión es una forma de transporte pasivo,

En muchos casos, ciertas moláculas eniran o safen de ias céiulas en confa de la

presión de difusión, Es evirj*nte que alguna fuerza distini¿ a la dífusion actúa en estos

üa$os. A esta fuerza se [e denomina transporte activo.

La menrbrana de los e¡"itrocitos es de tipo semipermeable. Cuando estos son colocados

en una solución hipertonica pierden liquido {se enjutan y destruyen} hasta que se establece

et equilibrio osmótico con ei iíquído circundante. Sin embargo, cuando los eritrocitos son

colocados en solución hipotónica, captan liquido {hinchándose) hasta q.ie se alcan¿a el

equilibria osmótico o hasta que se rompen. Por la tanto, existen un limite a la hipotanicidad

de una sclución, soportable por los erifocitos. La ruptura de los eritrocitos resulta de la
alteración de su forma y disminución de su resistencia a las fuerzas osmúticas, má$ que a

un cambÍo en la composición de la célula o su nsmolaridad, de ahi que $e emplea el

tármino "frágil",

OBJETIVOS:

s Demostrar las propiedades fisicas y químicas que presentan las proleínas.

4 Determinar la presencia de proteínas mediante la reacción de biuret.

Guía de Prácticas de 8lOLOGIA CfLULAR 90 UNIVHRSIDAD LO$ ANGELES DE CHIMBOTT

r!IgLG*, I.IJI$ &fiFm'i} -Síh.NCHEZ ANGilLü IUiB!-Si}, JCSÉ LUü:i GUT|EITT Z APON*Tf;

fi, iwArH¡qffiL Y ffiE1'$ü*f$:

&. #gf#S$'ftriF\tlüru FH Le FHRidtFpiffi¡LlffiÉql3 flE tüS HRITFi*üIT#$ ,Fi:t.EffiTg Á

l3l$iTi$;Ts.$ $$L{Jü!ü&ñ,$ $AL$}riA*}:

e.t ¡tl1ATüRl¡tl-E$:

t. ftfi*t*ri*l bicl$gic*:
- $angr* v*nü$a abtenicla ien un fiascc r:rn anticoaguliinte) ds u¡i alx¡nno,

2. fi$stqiri$1**, ins$ru¡nemias y' equipos ds l¿nb*¡afr¡ris':

- ltlgodón.

- F,guja 21ü'tte-.
- f:rasco d* penirilinn **téiil,
- $radilla para tubcs de ensayo.
- Lanrina po*aobjetn.

- L,aniinacubreobjeio.

- Ligadura,

- Pip*ta paste*i'.
- Pipeta s*rulirgira x 5 mL.

- Tubas de e*eayo 13 x 1*0 rnm,

- Micrasccp!**ompuesln,

3. Rn*etlves ris lsbciatarlc:

- FJcohalyedado.

- Ánticoagulante,

- $oiu*ión safina al 0,?9d {solu*iún hip**3nicai,

- $olución safina al0.9% {*nlución isoiónica}.

- $olución talina al 5.001' {noluci*n hiperlónica),

,e.H FRStHilrtultEST*:
'1. Agregar $ mL, de ia solución is*túnise ¡¡ un ti:bc de ensayr:

2, Agregar 3 gotas de sangre.

3. i-lorn:geneizat" $rJEVeffi entil invirliend* el tubo.

4. $ecar 1 gata clel pr*parado )i cofocarto en un lamina portenbjeto; sui¡rir tün ufia
laminilla.

Guia d* Pr;ictiias de sifiL*GiA CTLULAR 91 Ul'ilvtf{$lü¡\t} LOs Á¡lerms r[: cl-llF.rlBüTE

¡,,1 8Lü{} " i. i
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¡ A.t,. B[R]-ü sA¡iii i"l i:; Ai{G Li L í; ¡..l3LGü" Jü$ñ l-UiS üL'TiüHRI¿ liFf]it']'i[

ñ {ibsi*rvar sil rfliciül'cnpit. a ffi*fi(ri"y n#ycr $utnsitiü.

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l:sqir**taiizar vlr ciibuj*r ir: citiseri,ac': ^

irl*ali¿ar gi ni¡gmo pl,.tcetlimi,:nit ir:ri i$s ni¡"ac s+lHr:icilgs 4hip*t*:uln;* '*

hipe*;i!ni*a)

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t:i.r, 5.1:.. i'¡!íls ¡:il /iu9 lE! C+¡r"ai
,*i9"¡q"an il ;¡r".5i'eit:Biijrs .fr' pres¡¡"
r u) cttu'x¡.' s; a¡l:¿:
i r'i¡ ;é:rrl¡ c¡r
il-¿ü,Álics,
rl¡¡r: vi1.c /¡;r lgqfc ' ltr'-i, 1; s r'9!ilt:!i'i:l ¡ie iig!¡'1
ii,rnu*,.t,,rrt y *¿li iji: li:é'uia' si lál*ta
biar] 'rl
i,'r.rii.tar" ,.*t" t,'! r'r"iú ' ó) cL¡':<ir]:-r ttrrJ-
:ie sr!rírfjtQÚ *;: tlllc 5ülrj(rirñ Q!¡)!)flc'll¿3'
,iL-r,.u u¿'¡.,'t 'i¡]i* 41¡r eCrA rtr? l'- t:+htlá í¡4
;i,¡)- t+o lia 'rf,s'¡l'l:^:a :'ql1401c t: arllr¡l¡ l ll¡l
,"re. ¿ t c, c-'f,1.Jc {i, Jri": : ürr'c :í
"t {'*
*¿¡1,q'¡¡i i,il..uln,':x. ¡^e. {ill il'rliiirt:"1': ¡€lú
lo
*i:ri¡,.r:i*u',:e aSt,a ¡ ili'il € cslui¿r ¡ íi¿r'l''ri'
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iiu* hac* rir 3;4 ¿i( 4i:f,fé_ ':ti li(¡iif-lo '1
'!t t!Úi"tnrs-
i" o";r,'u rsriÁt lo !i'c"-t:!rj'
fiskti 'r\t':
grrl 1Cl Sclullriil ;f,r,'ét-.,.t .tt; ;". ¡i ¡: tt tr:t"r'¡ "¡
iil! ri,!'n rlivJfrli 5f1 i'Ji l
it!:¡.r óNlri :;:¡¡¡t&c? S(ju'lt!:r-, C,tilos,,]

s. nFip*üs'fF-diiiltéN t,f; LÁ iFÉR[.-lHABILitbtril üü i..,¡\l$ ü*,LilLA$ vf;{is'tÉ,il.#$i A

ü !$¡Tift¡T .&$ *q{}LUül#&{H$ $'AL Iitifr$:

*,'Í flfiAl'HRlisiE-E$:

1. friiattprial hi*i*gicu;
- [i1 biiib* de ÁfiFsm l;{:}F¿? "c*i]r,}ll;E de üffb*¿i¡'' ipri:rp*rci'ln*da pcri ir:s

aluinnce); iis ühtefidr*¡ la catáfila.

2. ft.{mirirriales, instif ur'fi g nto*i y,$qilip*s de l¡lt¡$¡'i¡i*ri'$:

- ilurhillo.
- E:isfilete.

- l-loja dc tli.rfurríú nauajas, esiórikls.

,- Flacas peiri
* l,a¡iiine porfulr":bje1s.

Gria de Fiáciic** de BIOLOü}A CfLULÁR ñf¡

UfiUfft$lilr\n Lü$ All{}Etüíi iiil Cf i¡f'¡BOTE
MBLGO. LUIS ALBERTO $ANCFIffiANGULO MBLGO, JOSÉ LUIS GUTIERREZ APONIE

- Lamina eubreobjeto,

- Pip*ta serológica x 5 m[-.

* Microscopiocompuesto.

3, Rea¿tivss de laborstor*u:

- Solución salina al 0.2% {sotución hipotónica).

- Solución safina al0.9Yo isolución isotanica).

- Solución salina al5.ü% {solución hiperiónica}.

B.? PROTFDIhIIENTO:

1. Sacar, con una pinza, la epidermis de la catáfila de la ceholla; cortar el lroci{os

y colccarlos scbre una plata pefri,

2. Agregar 5 mL. de la solución isatónica.

3. Con la ayuda de un estilete sacar un irocito y extenderio en una lámina porta
objefos.

4" Cubrir *l pre par*do con una laminilfa.

5, 0bservar en el microscopio a menor y mayor aumentc.

S. fsquemaiizar y/o dibujar lo observado.

P Reali¿ar el mismo procedimÍento can las okas solucio*es {hipotónica e
hipertónica).

ISffiTüFüI** r'4iF*TrJFdf*13 F¡!pffireT#f{¡**

i fir##n#rffi Flxmm*lisis

Guia de Prácficas de BlOLü{;lA CELULAR 93 UNIVERSTDAD LOS AT'ICEMS DE CHMAOTE

MBLGO. LUI$ ALBERTO SÁNCHEZ AI{GULO MBLGO, JO$E LUIS GUT}ERREZAPOIlITT

c. üEffüsTRACtsS nE FLAS$VIüL|S|$ {pERnls,A nE TURGFf{üA üñLULAR} Eru

TÉLULAS VFG€TALF$:

C.f MATÉRIALE$:
1. ffaterialbiológico:
- ü1 buiba de Solanum fuberos¿"rm "papa" iproporcionada por los ah:mnas).

2. $¡lateriales, instrumsntas y equipos de labo¡'atorio:

- Cuchilto y Estilete.

- Hoja de bisturíS navajas, estériles.

- Larnina pcüaobjeta,

- Lamina cubreobjeto.

- Vaso de precipitación x 250 mL,

- Micrascopiocompuesto.

3. üeactivo* de Inbcra{orie:
- Agua destilada {solución hipotóníca)"

- $olución salina al2A% {solución hiperténica}.

t.? PRüCFDlffirEl{T0:
1. 0ortar en trczos pequeñcs la papa y colocarlos sobre un vaso de precipitación,

2, Agregar 50 mL, de agua destilada.

3. Poner en reposo durante 1ü minuios.
4. Hacer un cade fino de los b'ozos y colncarlo en una lámina portaobjetos.

5. tuhrir el preparado flon una laminilla,

6. Observar en el microsccpio a menor y máyor aumento.

7. Esquematizar ylo dibujar Io observado.

.> Realizar *i mismo procedimiento con la solucién hipertóni*a.

GUiA dE PráCüCAS dE BIOLOGÍA üÉLULAR 94 UNIVTR$IDAD LOS ANGELES DT CHIMBOTT

MBLGO. LUI$ ALBERTO SAI{CFIFZ ANGULO MSLSCI. JOSÉ LUI$ GUT RRTZAPONIF

- Lamina cubreobjeto.

- Pipeta serológica x 5 mL.

- Microscopiocompuesto,

3" Reaetivos de labor*toris:

- $olución salina alü,?% {soluclón hipctónicai.

- $olución salina al 0.9% isotucién isoiónica).

- Solución salina al 5.ü% isolucion hiperténica).

g.? pR0cFDttuftENTü:

1. $acar, coil una pinza, la epidenrris de la catáfila de la ceboila; csrtar en trocitos

y col*carlos scbr* una placa pefri,

2. Agregar 5 mL. de la solución isatónica.

S. tln la ayuda de un estifeie sacar un focito y extenderlo en una iámina porta

objetos.

4" Cubrir el preparada con una laminilla.

Observar en el microscopio a menor y maysr aurnentc.

o, Esquemati:ar ylo dibujar lo observado.

Realizar el mísmo procedimiento con las ofas scluciones (hipoténica e

hipertónica).

ls*T#F#{:* HtFtTfJruÍ*{-} F{!pffiruTr:r*i**

T*ng*ncñn Fl*ssir¡*Íisls

Guía de Prácücas de 8t010ülA CELULAR 93 UNIVERSIDAD LOS AruETMS DE THIMBOTÉ

MBLGü. I-UI$ ALBHRTO SÁNCHTZ ANGULO MI}I-GO.JO$E LUIS üUTIFRRE¿ APONTE

III. RÉ$TJLTADO$:
DH r-A FFRMHABILTSAD DH LOS EnmRGfiTOSFnFNTF A
: :FHMOSIfiACTüI{
DI$TINTAS $OLUüIOIU É$ SAL{F¡A$

GUIA dC PráCfiCAS dE BIOLOG¡A CELULAR 95 UhIIVHR$IT}AD LOS AruCNTS DE CI-IIMBOTE

 M[jLG(]. LUIS AttsERl'ü $Af'{tHEZ /{$GL|LC, L{iil.Gü. JCsÉ Lirf$.i üUT¡ÉRFIHa ApüNTr

nEflsü$Tftri\üi*i{ *fr LA PfiRhtfi¡qH$L¡*Ail Srx LÉrii f;ffi,.LtltrÍt lfHüf;Tlrlgs A

nr $T! N TA$ $üLtlt;¡*${É ji¡ sALtN.es

t)fr$#üilTf{4,$lü$d r}# FlAfitr?tt,t$r$ iFHHü*i}¡, *E'}'ufi{iñ¡\ifirA tf,t"iJt-$.i,i} [:tll

f, E't,t¡ J-Ali W:Sf;'trJ,1f; :j

*LjrurVHR-¡]Aü
euiü 0* F;ñctica* d* B]']LüCIA (:fj-rjr-An-*- ffirLuS
ú¿' LüS nr=ti,
IdBLGO. LUIS ALBERTO SANCHEZ ANGULO MBLGO. JOSÉ LUIS GUTIERREZ APONTE

IV, DISTU$IÓN:

Guia do Pr*ciica* de slüL$GiA cEtuLAR $7 uNlvtrRslDAD t0$ Á¡¡errñg DE frHtMBOTñ

MBLGO. LUIS ALBERTO SÁNCHEZ ANGULO MBLGO. JOSE LUIS GUTIERREZ APONTT

v, toruelUsro${Es:

VI. REFEREfüCIAS BI8LIOGRAFIüA$:

GUíA dE PráCtiCAS dE BIOLOüIA CELULAR gB UN'VERSIDAD LOS ÁUCTIES DE CHIMBOTE

 MBLSO. LUi$ ALBERTO SÁNCilEZANGULO MBLGO, JOSE LUIS GUTIERREZAPONTE

cuE$Ttüf{ARlo

1, ¿Qué características estruciurales presentan la membrana plasmática?

2. ¿Qué eniiende usted por permeabilidad cefular?

3. ¿Qué entiende Ud. par transporte pasivo y lransporte activo?

4. ¿8uó similitudes yio diferencias se observó en la membrana de las células vegetafes y

animales, fiente a una solución Hipobnica?

""""'""'¡i;"'

5. Esquemaiizar ylo dibujar la membrana citaplasmática e indiear sus parks.

Guía de Prácticas de sloL0GiA 0ELULAR gg uNtvrR$ilAD LOs Án¡enms DE CH|MBOTE

M$LG*. LL¡iS AI.SERTü S/ii.lCHil;l AN{;ULü MBIGü. .J'}$É LUI$ üUT¡SRREI* APüNTE

FKATITiCA h¡UtultrRü 1{}

EL ¡\iU0L$:ti

"F*RSl&$ NH ruUüLHü NN TüLiltÁ$ SANffUíruE&Í*"

I
¡$¡Tllif,}FlI*Stti{;
ñl nüclso íue descrito prr pdmera vez pür Rnbed Erown (1831], eorni: una parte

c*nstante: d* la eálula eucaricta. fis u* üilerpc grand*, frecuenternenh esférico y, por lo

ccrnún, '*¡s la **trrr*tura niás vc{urninosa deniro de l¿¡s cóll¡las eucariéticas. Cnnliene el
mat*rial genéiicr: e* eí ADN, y er; allí dond+ esl¡* te r*pli*a y tr*nsr:ribe. Es el csniio de
regukrcién ds la *ú{uia, Regula las aciividades metab*licas y reprnciuciivas. Durants la
Civisión *eiui*r defi*n* ersta función s* de*organi¿a.
"u

$u f*nn* guarda rlr:rrnalmenl.s relxeid:n ccn ias divsrsas formas que presentan las
céiul*s. [ie una rfian*ra Sen*rai iierrc f**na entre esfórica u c¡voide. i\riernd¡s. C;¡da c*iuia
pCI$e* un soio nurrfe$, aunElrs se dan exoepci*ne* a esla r*gla; a*Í tener¡ros qu* las

üélulae hepática,t p*ed*n lenr;r" ons núclecs, las céiulas muscularss *squel*ticas tien*n

varios nu*le*s.

mrbiürf,a

üuía r.le Prác¡icas de Bi*LOG{A CELULAR 10{l iJNlVrR$lDAü L0$ AN$FL[$ DF CHirvtBOTE
luiB t.*,i. Lu | {; Ai-3fiilf'i $Á.t']c Ft [i Af,i 3uL* r'i BL s ü. "r fJf,É t- ii $ ütiTt t
¡ Fi R [,r,¡,p0 l-,lTr

1!r la *:ayaria d* ioli ti¡rrs *ei::l*¡es, ei núcisa ini*rfásic* *ri una ¡ls{ruclura rtxlc,ndeacja

u nvai qu* ti*ne varir;s inir;i;nes de di*rn*1r*. [i:; iina *striictriig Cefr:rrnaf,ie ir ¡;c,r lo tantn

pt-i*de ¡resign;rrs* hasia a,J,,¡r.lirir forri¡a renif*rme c en helradulii, [n ei mi,li¡c;ulc iis*

ccnirairi*, *{ nucl*r: pu*de üniosi}ai"sü cürnrl i¡r lilehu¿ón. iln lcs leun*citcs cie la sangrc y

tejiccs c*iie¡ciiv¿;s, el rtú*lc'l ::r; htlla icrbui*cio y ¡rcr *lk;r se c*ncnin,? "pi;iii-rrodc""

i-r:s ¡¡rariruk:cifu:rs :i*utrófikr;,'fi.iaiJns y ieñítlos can el c,:i+:tante wrigiir"r. iienen iorrna

reiJ*n{i$itdfi. pre*r*ntr *l nricieo lctirul;ido f rs:pfe$srttan ia i,*riedaci de ieüci.¡fiif.os nás

abundant* d+ !* sringre . $il prüp{rrtión e¡s ele 45 * $5% rj* ios krucociios. Fri el f¡'r¡iis tien*n,

por l* ,qrin*r;:|, L;¡i tiigr¡e*¡* te 12 *'i? u, en los iejidos fijl:tlcs flp¡tfiicefr ni;ls treqirefrcs

ijehirln * ia r*{raccién dcl citüuias¡n*.

!:l ni'clec d*l neuil*iilo se carat:teriz* por *u polinr*,fism':. ilsla ,;*nsiituirio ¡icr varir:s
ióhLiir:s rfe íarins redilnda u cval, unid*s siem¡ri'e ent'e si pm iilamerrkis firuy d*ig:ldos rie

crurnali¡:a. fl ¡"¡*nlerü de iúbuir* nscil¿ er:tre ? y 5, predi:niinandc' ios núcis¡::i de ues

lóhr,'!r;9.

L:n fu:s [.'¡"*sararJi:s r:*intetiJr.¡s n*;* disiirigr.ii]n r"iila nr*mbrar:a nucl*ar L¡isn clefinida. La

lrnmalina ,tpür*c{i bnida d* un ünl,rr violeia ri:jiz* y *e ilispcn* cie giijej;o,:i ii'cr*s
*ep*i;rrit.rr* p*r *,,;pari*s ciarol; :;ir¡ cohtación *¡i ios que se *nc¡.lri;i'i:r;¡ *l llaniacin "jugo

r')utjfear".

iln3,i*"fi\¡*$:
e lt*e¡:nnr:*i la ittput*ncia rjel s¡úciecl +r iruestr;¡s e*iulas"

's ident,f"car ias riifereilies furna,; de ni;cklr¡ en *tiula* sanfluiness.

üui* d'* F¡üfticas de Frlc!¡_clclA üFl"uLAR 1üi rjFitvERstDAD t_üs Át{fir:lfs üH {:i.ilt,{BoTr
 MBLG0. Luls ALBTRTO sÁNtHEZAf\iGuLo MBLG0. JosE Lus GuT¡IRREZ Aponrr
II, MATER¡AL Y MÉTODos:

A. RHSü¡vOct&{tFNTCI DF FoRMAS ne n¡úClEO EN cÉrums sal¡cuirurn$:

ÁI{ MATFRIALF$:
'1. Msterial biologica:

- Sangre periférica cbtenida de un alurnno.

2. ltjlateriales, instrumentos y equipos de laboraforis:

- Afgodón.

- Aguja 21 G 1,/;'ó lanceta No 10.

- l_amína portaobjeto.

- Pipeta serclégica x 5 mL.

- Microscopioccrnpuesto.

3, R*activos de lahsratorio;
- Alcohoiyodado.

- Agua destilada,

- Agua iamponada pH Z.l

- Aceite de inmersión.

- Colorante Wright's.

4.1 PROTEDIMIFNTü:
1. CIbtención de la muestra:

La sangre humana se obtiene realizando una puncién ccn una lanceta, a

un costado del pufpejo del deda anular izquierdo, previamente desinfectado,

Generalnente la prinrera gota de la muestra se descarta,

2. Preparación de la muestra:
- Colocar una pequeña gota de sangre en el primer tercÍo de ta lámina porta

ob.ietos .

- colocar sobre la gota de sangre, el borde hiserado de ofa lámina

poriaohjeto, figeramente inclinada, formando un ángulo de 45o con la lámina

anterior.

GuiadePráctjcasde8l0Lo$íAC[LULAR102UhllVFRs|DADL0sm
 MBLOO, LUIS ALBTRTO sÁNüHE¿AI\IGULO MBLGO, JO$É L|.^JI$ GUTIIRRHZ APONTE

- Realizar un froüs, desplazando la segunda lámina alextrems opuesto, de tal

manera que la muesfa sea uniformemenie distribuida y lo más fina pcsible.

3. Coloración:
- $ecar lámina a meciio ambiente por 1 minuto.

- Colocar Ia lámina encima del soparte de linciones y éste sobre la cubeta.

- Dejar caer sobre la extensión unas gotas de metanal y esperar que el

alcchn]$c evapore, con fo que se consigue elfijacia.

- Agregar, cubriendo toda ia extensión, unas gotas de Wrighi's, evitar ia

desecación y dejar actuar el colorante uncs 5 a '10 minutos.

- L*var la preparación con agua iampanada, hasta que arrasfe ioda el

coloranle,

- Tomando el porta par los cantos secar aíreando el pcrta, a bie n al calor muy
lento de la llama delmechera.

4. Observación al Microcopio:

- A rnenor aumento explorar la preparación para localizar la ¿cna en ia que ei

frotis es más perfecto, Los fugares más aptos son aquelloe en tcs que la

extensión de los glóbulos se ha ccnseguido en una sala capa, esl*n hien

teñidos y no se han producido precipitadas de los colorantes.

- Cuanda se observe una zona apta, pasar a mayor aumento y luego a

objetivn de inmersión ipreviamenie se colocará una gcta de aceite de
inmersión sobre la lámina),

- En el campa del micrascopio, se verán con un dominio predominante los

glóbulos rojos, hematíes o critrocitos , teñidos en color rojo, No tienen

núcleo y son máa delgados por el centro qus por los bardes.

- Los glóbulas blancas o leucocitos de identifican fácilmente por la presencia

de núcleo. Hay varias clases de glóbirlos blancos:

s los linfociias algo mayores que los glóbulns rojos, con un núcleo muy
voluminoso que otupa casi todo el glóbulo, aparece fuerternente teñido en

color violeta oscuro,

Guía de Prácücas de BIÜLOGIA CELULAR 1ü3 UNIVHfi$IDAD LOS ÁruErIrs D[ CHIMBOTE

MBLGO. LUIS ALBERTO SÁNCHEZ ANGULO MBLü0, JOSE LUIS GUTIFRREZAFONTE

los monocitos son los leucocitss mayore$, poco fecuentes normalmente,

hay que desplazarse por la preparación para encontrar alguno, Tienen un

núcleo muy grande y redondeado que aparece ieñido en color violeta.{Es

bueno que recuerdes su funcíón que e$ la de fagocitcsis],

los polinucleares pressntan el núcleo como íragmentado 0 ü0n aspecto

arrosariado.

los easínófilos, con granulaciones abundantes de color ro.lizo y el núcleo

teñido de color azul marino" Estss glóbulos aumenlan su número en caso de

parasitasis o procesos alérgicos,

lss basúf¡los presentan un núcleo teñido de rojo y las granulaciones del

citopfasrha de color muy oscuro.

Las plaquetas aparecen cCImo pequefrcs fragrnentos teñidas de color

víoleta. Estas cÉlulas interviencn en elprCIseso de coagulacién sangulnea,

Ef número promedio de glébulos rojos en el hombre es de 5.ü00,000 por

mm¡ de sangre" La cífra media de glóbufos blancos es de 7.ü00 a 8.0CI0 por

mmr, Hay por tanto un glóbulo blanco por cada 600 ó 7ü0 gióbulos rojos.

Por lo tanto para ver todos los tipos de glóbulos blancos debes buscarlos en

distintos tampüs de la preparación. El número de plaqueias es de unas

250,00ü por mmr,

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Guía de Prácücas de BIOLOGIA CELULAR 1Ü4 UNIVERSIDAS tOS ÁNGELES DE CHIMBOTf;
 MBLGO. LUI$ ALBERTO SÁNffiTZ ANGULO MBLGO. JOSE LUIS GUTIERREZAPONTE

III. RE$ULTAOOS:

Materialbiológico :

Coloración :

Observación :

Aumento

Materialbiológico :

Coloración :

Observación :

Aumento

GuÍa de Prácticas de Bí0LOGÍA CELULAR 105 UNIVER$IDAD LO$ ÁI'ICEMS NE ffiIMBOTE

 MBLGO, LUIS ALBERTü SANCHEZ ANGULO IIJBLGü. JOSE LUIS GUTIERREZ AFONTH

MaierialbÍológico :

Csloracíón :

übservación :

Aumento

Materialbiológico :

Coloración :

0bservación :

Aumenio

Guía de Prácücas de Bl0LOüiA CELULAR 106 UNUrR$DAD L0$ Áh¡eelEs nE CHtMBOrr

MBLGO, LUI$ ALBf;RTO SÁNCHIZ ANGULO MBLGO. JüSÉ LUIS GUTIERREZAPONTT

rv. ilt$cu$t0N:

GUiA dE PráCiJCAS dE BIOLOGIA CFLULAR 107 UNIVERSÍ DAD LOS ÁruETXS DE CHIMBOTT
MBLGü. LUI$ ALBüR TO $ÁI'ICHEZ AI{GLIL{] MLILGO. JÜST LUIS GUTIERÍ{EZ APüNTE

v. t$h¡i:LUs[0NEs:

vr. RgFHttnNüiA$ f;ilSLt*üFiAFtüA$;

Guía de Prácücas de $IOLOGIA cf;LUtAR 1üfi ut{tv[:RSTFAD lss AH¡ertrs ilE cHIMB0TE
 Mtllüo, Ll.¡i$ ALErt:il'$ $AFil:Hi:z Ai-itult iviül.GC¡ J{)st: LUt,t} GtiT¡ilRFrh:{ ¡,püf\iTÉ

tU[:$T¡i3Í4Anl{}

i, ¿QuÉ f*nc!ón cunq:i* ei núrie*'i

f" i;TorJal; ia.s c*ir.il;:¿* ije nu**hn *ust'llo p{ise*il i¡i¡ci,*c?. ilxpllca tr.r iespri"*sti: rne$innt*

ejstí¡,t¡lrr$.

3, ¿Cuáie,s s*it la¡i l'*rrnas i¡iir; aCcpió el fiúciei: e¡l ies célr¡ia's $arrguíft#¿t$. irhugi'r¡nd*l$ *n
prácrti*¿?

4. ¿üe qiie üolci s'ii tibseiv*r*n ei r;it*pia:wa y *l núcle,: rlE: l*s ieuccc,it*s ai **r jeliieJas can
el cüi*ranie rtrigiri'l;?

5, flsquc,rnaiizarg,ir.r ilibujar un nuclea * inelicar su;; parte$.

*-101
Guía de I'taitiiái ¡e rfijloeLq-_- cr'lur¡\R Lr'tlt'Jf=n,$iüAü trJt,ñüEL[$ ,]ñ ü-tii,4rt$f[