基因毒性杂质限度指南问与答

问题 1：该指南并不要求对已批准销售的产品进行基因毒性杂质再评估，
除非有一个特别的“引起忧虑的原因”（cause-for-concern）。请问什么是“引起忧
虑的原因”？

回答：如果原料药的生产过程基本上没有改变，就不需要对基因毒性杂质
进行重新评价。但是，如果新知识表明有新原因时，例如几年前发现的甲磺酸盐
药物可能形成甲磺酸烷基的基因毒性杂质，这需要进行基因毒性杂质的再评估，
包括 EP 药典中收载的所有甲磺酸盐类产品，并出示“生产声明”。

问题 2：该指南指出：即使按决策树程序其水平低于毒理学关注阈值
(threshold of toxicological concern, TTC)，也要尽可能地减少已知或未知的诱变
杂质（mutagenic impurity）。如果已知其诱变杂质的水平低于 TTC（TTC 是一
个非常保守的值），为什么还要进一步降低呢？实际上这还涉及定量限在 1ppm
左右的分析方法，可以这样做但可能没结果，这是否有必要呢？

回答：如果一个诱变杂质的水平低于毒理学关注阈值（相当于临床剂量
≤1.5 微克/天），就没有必要这样做。除非它具有一个高度关注的风险结构：如
N -亚硝基，黄曲霉毒素类和氧化偶氮物就需要这样做。

问题 3：该指南规定：“当一个潜在的杂质包含有“警示结构时，应考虑用
细菌复原突变试验对其杂质进行基因毒性分析”。

i）如果一个杂质能诱发“警示结构”，该杂质的致突变试验（Ames）结果为
阴性时，是否就足以得出结论：该化合物不属于关注的遗传毒性杂质？是否还
需要进一步的确认研究？

ii）“警示结构”不存在就足以说明该杂质没有疑问了呢？

iii）假设某杂质属于“警报结构”，但只要加以控制确保其杂质水平低于
TTC，不进行常规检测是否可以接受？

回答：

i）是的。只要按 Q3A/B 的要求做 Ames 试验显示阴性时，即可认定该杂质

不属于“警报结构”，就不需要进一步确认研究。

ii）是的。通过仔细评估，如果“警报结构”不存在，即可认定“疑似杂质”不
存在。通常这种评估常用构效关系的评估软件，如 DEREK 或 MCASE 软件。

iii）是的。当一个潜在的基因毒性杂质水平控制在 TTC 的水平时，就不强

制要求进行基因毒性的常规检测，除非它具有非常强的基因毒性物质类（N -亚
硝基化合物及偶氮化合物或黄曲霉毒类化合物）。
 问题 4：什么是限定新杂质出现的适当战略（在三期临床阶段或商业批生
产阶段？），例如，下列战略是否可以接受？当发现一个新未知杂质在 0.05-
0.09％的范围就不需采取行动，在 0.10 至 0.15％范围，即使它会诱导出“警示结
构”，只要对含有这种杂质的成分进行 Ames 试验即可？

回答：出现新的低于鉴别阈值（identification threshold）的未知杂质时，
ICH 指南没有要求有任何行动；但是当高于鉴别阈值，低于确认阈
（qualification threshold）并且可能成为“警示结构”时，并且该原料药中含该杂
质的最小浓度为 250μg/板（Ames 方法的评估检测线，详见 Kenyon et 等,Reg
Tox & Pharm, 2007, 75-86），就需要对含有这种杂质的活性成分进行 Ames 实验
并成阴性。

问题 5：该指南指出，“毒理学关注阈（TTC）值高于 1.5 微克/天，在一定

条件下是可以接受的，例如短期接触….”，阶段性 TTC 与临床接触的持续时间
有关，例如抗生素。如果是这样的话，什么是短期接触的可接受水平？

回答：高于 1.5 μg /天微克以上的基因毒性杂质的要逐案处理。对于短期治

疗，更高水平的接受能力原则见问题 6 的回答。

问题 6：该指南的措辞意味着它覆盖了 ICH Q3A 没有涉及的问题。ICH 指

南范围不包括 NDA 或 MAA 申请前的临床研发。然而，实践表明，临床研发阶
段涉及的基因毒性指南同样适合于注册法规要求。在研发阶段如何控制基因毒性
杂质呢？

回答：根据该指南的范围，它主要适用于“新的活性物质”中的基因毒性杂
质，包括临床申请和 MAA 申请中提到的新活性物质和临床试验申请中提到的
新活性物质。事实上，临床试验的化学品和药品质量文件要求指
（CHMP/QWP/185401/2004）已经对 IMP 中的杂质对志愿者和患者的安全性提
出过要求。要基于安全和毒性数据提供杂质的规格与接受标准。

CHMP 同意，在临床研发时段，TTC 进行分阶处理。允许的日摄入与接触

时间关系见下表。对于单次服用来讲，每日摄入量达 120 微克也是可以接受的。
与 MUELLER 表格中的分阶的提议，下面这些值都是考虑了单次校正因子为 2
后通过线性外推的模式来计算偏差得来的。

接触时间（Duration of exposure）
允许的日摄入量 单次剂量 ≤1 个月 ≤3 个月 ≤6 个月 ≤12 月
120µg 60µg 20µg 10µg 5µg

问题 7：按指南条款要求，意味着 1.5 微克/天的 TTC 值可适用于原料药中

的单个基因毒性杂质，请问这样的理解是否确切？

回答：在原料药中存在一个以上的基因毒性杂质时，1.5 微克/天 TTC 值对

每一个结构不相关的杂质是适用的。在结构相似的情况下，基因毒性杂质的作用
模式一致，并具有相同的分子靶向，在这种情况下，建议基因毒性杂质的总和
为 1.5 微克/天。这可能不符合实际，特别是最大日剂量很高而且又要求按低限要
求申报时。此时应根据下列因素逐案考虑：
• 原料药的每日最高剂量；
• 治疗适应症;
• 产生基因毒性杂质的合成步骤；
• 消除这些杂质的生产纯化能力；
• 控制这些杂质的分析方法能力。

在这种情况下将这种检测方法能力强的分析方法作为常规检测将是困难的，人
们可以在开发过程或首次商业批生产中考虑使用这种分析方法，以充分证明其
实际值低于 TTC 值。在这种情况下，使用风险评估的方法，定期检测而不是常
规检测是可以接受的。

问题 8：2008 年 3 月欧洲药典委员会对具有潜在基因毒性杂质颁发过一个
政策。这项政策将在制定和修订药典中得到应用。它提供了非常务实的一个政策
来指导如何处理现行药典中收载的活性物质中存在的潜在基因毒性杂质。这些政
策是否适用于没有收载到药典中的 API 吗？

回答：是的。在这个指南执行前已批准的 API 是适用的。在注册申报文件中

应递交相关的规格要求。只有当研究数据表明存在遗传毒性杂质时才需要采取行
动，仅存在“警示结构”时不足以引发的后续措施，除非在出现一个高度关注的
风险结构，例如：N -亚硝基，黄曲霉毒素类和氧化偶氮化合物。如果似使用新
的合成路线，该合成路线可能引起潜在基因遗传毒性杂质出现或先前确认的潜
在基因毒性杂质水平提高，这种情况应与主管机构进行讨论。

问题 9：在原料药生产过程中，对于理论推测存在或实际存在的潜在基因
毒性杂质质量标准的设定依据是什么？

回答：各种不同情形时的潜在基因毒性杂质质量标准可以依据下面的情况
来进行设定：

例 1：一个潜在基因毒性杂质

潜在基因毒性杂质的定义是基于“潜在杂质”的定义得来的。潜在杂质是指按
照理论推测在生产或储存过程中可能产生的杂质。它可能在(新)原料药中存在，
也可能不存在（ICH Q3A，术语）。

如果一个潜在基因毒性杂质仅仅是理论上推测存在，也就是说基于理论推
测存在但生产中并未实际检测到（由生产工艺开发阶段的研究证实），则不需
要将其列入到原料药的质量标准中。

例 2：合成最后一步前，实际生成或引入了一个（潜在）基因毒性杂质
 如果在最后一步合成前，实际生成或引入了一个（潜在）基因毒性杂质，
可以不将其纳入原料药质量标准中，但是必须保证该杂质在合成中间体中有合
理的控制限度并且在原料药检测结果中明确其含量不超过来源于 TTC 或其他认
可标准的 30%（推荐使用标准加入法检测原料药）。但是如果不能满足这些要
求，就必须在原料药质量标准中进行日常检测。如果一个基因毒性杂质不可在中
间阶段控制，那么适用例 3 情况。

例 3：最后一步合成中，实际生成或引入了一个（潜在）基因毒性杂质

如果在最后一步合成中实际生成或引入了一个（潜在）基因毒性杂质，必
须在原料药质量标准中控制该杂质。如果在原料药中该杂质的含量不超过 TTC
或其他认可标准的 30%，可实行定期检测。至少要提交 6 批中试批或 3 批大生产
的数据。如果不能满足这个要求，就必须在原料药质量标准中进行日常检测。

定义：
基因毒性杂质：在一个适当的遗传毒性试验模型中已被证明存在基因毒性的杂
质。例如，细菌的基因突变(Ames)试验。
潜在基因毒性杂质：没有在试验模型中证明过，但是拥有致基因毒性的警戒结
构的杂质。潜在是指是否拥有基因毒性，而不是该杂质存在与否。