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METODOLOGÍA
Reconocimiento del almidón Detección de Celulosa Detección de granos de Detección de Lipidos y aceites
en agua. Aleurona esenciales
5g de material seco y molido se Primero colocamos de 2 a Colocamos de 2 a 10mg de Colocamos 2mg de la droga en
extrae con 10ml de agua. 3mg de la droga la drogaen polvo sobre un polvo sobre el portaobjeto, vertimos
polverizada sobre el portaobjetos. Luego vertimos de 2 a 3 gotas de solución de Sudan
Se toma una gota de la solución portaobjeto, agregamos 1 o de 2 a 3 gotas de solución de III y dejamos actuar unos minutos (2
filtrada y se observa con el 2 gotas de solución de yodo/etanol. a 3).
microscopio. Cloruro de Zinc yodado.
Observamos granulos de Escurrimos el liquito y lavamos bien
Observar cada muestra de Dejamos reposar 2 min y Aleurona en un color con alcohol al 70%, poesteriormente
almidón preparada. agregamos 1 gota de Yodo amarillo-café. colocamos el cubreobjeto y
(Maíz, yuca, papa y arroz). (0.1mol/L), dejamos reposar observamos en el microscopio con
nuevamente. Agregar luego 2 a 3 gotas de los objetivos de 10x y 40x.
Reconocimiento del almidón trinitrofenol en etanol y los
en Lugol. Luego removemos el granulos se colocan de color Los lipidos se muestran como gotas
exceso de reactivo con amarillo. de color rojo.
Se toma 1 gota de la solución papel filtro, agregamos 1
filtrada de cada una de las gota de Acido Sulfurico al
muestras de almidón preparada. 60% y colocamos el
cubreobjeto para
Posteriormente agregar una gota posteriormente observar en
de Lugol, colocar el cubreobjetos. el microscopio.
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Luego agitar con una varrila de vidrio para realizar una mejor
2. prueba cualitativa de alcaloides: Colocamos en dos tubos extracción para poesteriormente filtar sobre sulfato de Sodio
de ensayo aproximadamente 0.5ml del filtrado ácido y anhidro.
agregamos a uno de los tubos 2 gotas de reactivo de
Dragendorff y al otro tubo gotas del reactivo de Mayer. 2. prueba cualitativa de esteroides: Tomamos 1 ml del
filtrado orgánico en un tubo de ensayo, luego agregamos por
Observamos si se presenta turbidez o precipitaciones en
la pared del tubo 1 ml (10 gotas) de anhídrido acético, con
ambos tubos, se concidera como prueba presuntiva de la
mucha precaución agregamos de 1 a 2 gotas de ácido
presencia de alcaloides.
sulfúrico concentrado.
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2. Prueba cualitativa para leucoantocianidinas: En un tubo de ensayo tomamos 2. Prueba cualitativa para cardiotónicos y lactonas α, β insaturadas: En
2 ml del filtrado y adicionamos 10 gotas de ácido (0.5 mL) clorhídrico concentrado un tubo de ensayo adicionamos 1 ml de filtrado y agregamos 0.5 ml (20
(37%), procedemos a mezclar suavemente. Calentamos en baño maría durante 10 gotas) de reactivo de Kedde A al igual que adicionamos 0.5 ml (20 gotas) del
minutos a 100°c, posteriormente dejamos enfriar miestras observamos. reactivo de Kedde B.
Añadimos de 10 a 20 gotas (0.4 -1.0 mL de alcohol amílico y agitamos. Dejamos Es prueba presuntiva de la existencia de cardiotónicos la aparición de
separar las fases. Consideramos la prueba positiva al observar y se nota una coloraciones violetas o púrpuras en la muestra.
coloración en la fase amílica que vaya desde el carmesí oscuro al rosado débil, la
aparición de coloraciones rojas es prueba presuntiva de la presencia de a. Disposición de residuos prueba de cardiotónicos: La prueba
leucoantocianidinas en la muestra. se debe desechar en el recipiente de residuos básicos. El
sobrante del extracto (etanolico) que se obtubo para realizar la
a. Disposición de residuos prueba de leucoantocianidinas: Con ayuda prueba, se desecha en el recipiente rotulado con el nombre
de la pipeta pasteur, la fase orgánica del alcohol amílico (superior) se EXTRACTOS ETANOLICOS PARA RECUPERAR.
desecha en el recipiente de residuos orgánicos no clorados. La fase
acuosa (inferior) se desecha en el recipiente de residuos ácidos.
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Con ayuda de un embudo de separación, se debe separar la fase acuosa acida inferior de la fase orgánica
superior y rotular cada una.
5. Prueba cualitativa para antraquinonas: En un segundo tubo de ensayo tomamos 2 ml de la fase orgánica (acetato de etilo: fase superior) y adicionamos 1 ml de
la solución previamente preparada de hidróxido de sodio al 5% en amoníaco al 2%, agitamos suavente. Con la aparición de un color rojo cereza en la capa acuosa
(fase inferior) se indica presencia de quinonas en la muestra.
6. Disposición de residuos prueba de antraquinonas: La fase acuosa acida de la prueba (ácido H2SO4 10%:) se deposita en el recipiente de residuos ácidos, (Para su
disposición final las dos fases de la prueba se deben separar con ayuda de una pipeta Pasteur o embudo de separación). La fase orgánica (acetato de etilo) de la prueba se
desecha en el recipiente de residuos no clorados, la fase acuosa (básica) de la prueba se desecha en el recipiente de residuos básicos. El sobrante del extracto (etanolico)
obtenido para realizar la prueba, se desecha en el recipiente rotulado con el nombre EXTRACTOS ETANOLICOS PARA RECUPERAR
IDENTIFICACIÓN DE METABOLITOS SECUNDARIOS
METODOLOGÍA
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Reconocimiento de cumarinas en
cascaras de limón
1. Obtención del extracto y prueba: Tomamos un tubo de ensayo grande al cual adicionamos 1 g de material vegetal fresco y
finamente picado (cascara de limón) y agregamos etanol comercial hasta cubrir la muestra. Cubrimos la boca del tubo de
ensayo con un trozo de papel filtro blanco y mientras se sujeta con pinzas o una banda elástica. Se le agrega 5 gotas de NaOH
10% en el papel filtro y calentamos hasta ebullición durante 5 minutos, posteriormente enfriamos y retiramos el papel filtro.
2. Disposición de residuos prueba de cumarinas: El papel de filtro se deposita en el recipiente de residuos de placas, papel
filtro y algodones, el extracto (etanolico) liquido se desecha en el recipiente de residuos no clorados. El sobrante del extracto
(etanolico) obtenido para realizar la prueba, se desecha en el recipiente EXTRACTO ETANOLICOS PARA RECUPERAR.
ANALISIS MICROSCOPICO DE MATERIA VEGETAL
METODOLOGÍA
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