OBJETIVOS

GENERAL:

“Conocer e identificar las técnicas de cromatografía”

ESPECIFICOS:

- Ensayar las técnicas de separación e identificación de pigmentos

naturales por cromatografía.
- Conocer los fundamentos físico - químicos implicados en los procesos de
separación por cromatografía.
- Realizar comparaciones de la cromatografía respecto a su reacion con
diferentes reactivos utilizados en el proceso d ela experimentación.
 PRESENTACION
Presentamos el siguiente informe sobre las técnicas de separación e
identificación por cromatografía, que se llevo a cabo en el laboratorio de química
de la Universidad Nacional Santiago Antúnez de Mayolo.

En el primer apartado analizamos la cromatografía de capa fina que trata sobre

capa fina se realiza normalmente por el método ascendente, esto es, al permitir
que un eluyente ascienda por una placa casi en vertical, en una cubeta, por la
acción de la capilaridad. Para conseguir la máxima saturación posible de la
atmósfera de la cámara. Generalmente el eluyente se introduce en la cámara
una hora antes del desarrollo y se impregnan las paredes para permitir la
saturación de la atmósfera. El tiempo de desarrollo, por lo general, no llega a los
30 minutos. El tiempo de una cromatografía cualitativa suele ser de un par de
minutos, mientras que el tiempo de una cromatografía preparativa puede llegar
a un par de horas.

A continuación, seguimos desarrollando sobre la cromatografía de columna, en

este tipo de cromatografía, la fase estacionaria utilizada, es decir, el absorbente,
se coloca en el interior de una columna de vidrio, la cual finaliza con una llave
para controlar el paso de sustancias al exterior de la columna. La fase
estacionaria se impregna con el eluyente o fase móvil. Seguidamente la mezcla
orgánica que nos interesa separar la depositamos por la parte superior de la fase
estacionaria, y así la fase móvil podrá ir atravesando el sistema. Los compuestos
que se encuentran disueltos en la fase móvil, poco a poco saldrán de la columna
cromatográfica, y se recogen en fracciones. Las fracciones menos polares, que
son por lo general las que se retienen poco o nada en el absorbente, serán las
primeras en salir de la columna. En cambio, las sustancias más polares, quedan
retenidas por más tiempo en el absorbente, y a menudo es necesario el uso de
diferentes disolventes con la finalidad de incrementar su polaridad para que sean
arrastradas por estos.

Finalmente, la cromatografía de papel que consiste que la fase estacionaria está

constituida simplemente por una tira de papel filtro. La muestra se deposita en
un extremo colocando pequeñas gotas de la solución y evaporando el disolvente.
Luego el disolvente empleado como fase móvil se hace ascender
por capilaridad. Luego se coloca la tira de papel verticalmente y con la muestra
de abajo dentro de un recipiente que contiene fase móvil en el fondo.
Después de unos minutos cuando el disolvente deja de ascender o ha llegado al
extremo se retira el papel y se deja secar. Si el disolvente elegido fue adecuado
y las sustancias tienen color propio se verán las manchas de distinto color
separadas. Cuando los componentes no tienen color propio el papel se somete
a procesos de revelado.