ANALISIS INSTRUMENTAL FQF/UES 2016

TEMA: ESPECTROSCOPÍA VISIBLE

1.1 APLICACIÓN DE LA LEY DE BEER:
La espectroscopia visible ultravioleta se emplea en el análisis cualitativo y cuantitativo de compuestos
orgánicos e inorgánicos, pues un buen número de sustancias tienen bandas de absorción en esta zona
del espectro electromagnético.

La espectroscopia Visible-Ultravioleta se basa en la absorción y emisión de radiación, la cual es debida a

una restructuración de los electrones de átomos o moléculas. En el proceso de absorción, la radiación
incidente lleva al átomo o molécula, de un estado electrónico fundamental a un estado de excitación de
mayor energía. En el proceso de emisión se produce el efecto contrario.

En cada caso, la energía absorbida o emitida es proporcional a la frecuencia (  ) de la radiación

electromagnética, de acuerdo a la Ley de Plank. (E = h); sin embargo, es más frecuente utilizar la
longitud de onda (  ) de la radiación (E=hc), a la cual se expresa en nanómetros (nm = 10-9 m). 

La intensidad de la absorción depende de la concentración de las moléculas absorbentes, del trayecto

que debe atravesar la radiación y del coeficiente de extinción molar; la cual obedece la Ley de Lambert-
Beer se expresa así:

En esta expresión, la concentración “C“ de la solución es generalmente expresada en moles por litro, por
convención, ε es el coeficiente de extinción molar, es una constante característica (correspondiente a
K/2,303 cuando se usan logaritmos comunes) de la sustancia absorbente y de la longitud de onda
particular usada. El ancho de la celda L es expresado en centímetros, es esencialmente constante en la
mayoría de trabajos experimentales.

A menudo en trabajos experimentales que tratan con métodos ópticos de análisis son usados los
términos porcentajes de transmitancia.

Donde: P = Intensidad de la luz transmitida

Po = Intensidad de la luz incidente

Las curvas de absorbancia contra concentración son conocidas como gráficas de la Ley de Beer. Se
obtienen midiendo la luz absorbida por soluciones de diferentes concentraciones. El ancho de la celda y
la longitud de onda permanecen constantes. Si se obtiene un gráfico lineal (demostrando que la relación
de la Ley de Beer se cumple para soluciones a esa longitud de onda), puede ser usado para determinar la
concentración de soluciones desconocidas.

1
 ANALISIS INSTRUMENTAL FQF/UES 2016

1.2 OBJETIVO:
Determinación del Espectro de Absorción CoCl2 .6H2O. Elaborar el espectro de Absorción de una
sustancia para conocer la longitud de onda () a la cual posee máxima absorción y posteriormente
determinar una curva de calibración con la que se puede calcular la concentración desconocida de una
solución problema.

1.3 PROCEDIMIENTO
A. Determinar del Espectro de Absorción del CoCl2.6H2O: Preparar una solución patrón de CoCl2. 6H2O
1M. De esta solución tomar una alícuota y diluirla para obtener una concentración de 0.1M, medir la
absorbancia de esta solución anterior, en el rango de longitud de onda 450 – 550 nm, con intervalos
de 10 nm; con esta información puede determinarse el espectro de Absorción y un dato muy
importante como es la longitud de onda a la cual se presenta la máxima absorción.
B. Determinación de la Curva de Calibración para CoCl2.6H2O: Utilizando la longitud de onda del
numeral 1 y varias soluciones estándar de CoCl2.6H2O de las siguientes concentraciones:

a. 0.02M
b. 0.06M
c. 0.10M Preparar 50.0mL de cada solución Estándar
d. 0.14M
e. 0.20M

Determinar las absorbancias correspondientes a dichas concentraciones. Con los datos obtenidos
elaborar la curva de calibración.
c. Determinar la concentración de la Solución Problema, usando la curva de calibración elaborada
anteriormente.
d. Determinar el coeficiente de extinción molar del CoCl2 .6H2O.

1.4 EQUIPO: Espectrofotómetro Visible HACH DR 2700

1.4.1 Generalidades:
El espectrofotómetro DR 2700 es un espectrofotómetro VIS con un rango de longitud de onda de
400 a 900 nm. El instrumento incluye un completo juego de programas de aplicaciones e interfaz en
varios idiomas.
El espectrofotómetro DR 2700 contiene los siguientes modos de aplicación: Programas almacenados
(tests previamente instalados), Programas del usuario, Programas favoritos, modo Longitud de onda
única, modo Longitud de onda múltiple y Modo Intervalo de tiempo.
El espectrofotómetro DR 2700 ofrece lecturas de salida digitales en unidades de concentración
directas, absorbancia o transmitancia (%).
Al seleccionar un método programado o creado por el usuario, los menús y mensajes dirigen al
usuario a través del test.
Este sistema de menús también puede crear informes, evaluaciones estadísticas de curvas de
calibración generadas y documentar comprobaciones de diagnóstico de instrumento.

2
 ANALISIS INSTRUMENTAL FQF/UES 2016

1.4.2 Paneles de control

A. Vista Posterior

B. Vista Frontal
Compartimiento de celdas

1.4.3 Autocomprobación
Cada vez que se enciende el instrumento, se ejecuta automáticamente una serie de pruebas de
autodiagnóstico para asegurar el correcto funcionamiento de los principales componentes del
sistema.

3
 ANALISIS INSTRUMENTAL FQF/UES 2016

Este procedimiento, que dura unos dos minutos, comprueba el sistema, la lámpara, el ajuste de los
filtros, la calibración de las longitudes de onda y la tensión eléctrica. Cada elemento que funciona
correctamente se confirma con una marca de verificación.
Una vez completados los diagnósticos de puesta en marcha, aparece el Menú principal.

La pantalla es del tipo táctil (se activa por contacto). Para realizar una selección, pulse la pantalla
con la uña, la yema del dedo, la goma de un lápiz o la punta de un lápiz óptico.
Para seleccionar teclas, palabras o iconos pulse los mismos en la pantalla.
Utilice la barra de desplazamiento para moverse rápidamente por la lista. Pulse y mantenga pulsada
la barra de desplazamiento y después mueva la punta del dedo hacia arriba o hacia abajo para
moverse por la lista. Para seleccionar un elemento en una lista, pulse ese elemento una vez. Cuando
lo haya seleccionado correctamente, se visualizará como texto inverso (texto claro sobre fondo
oscuro).

NOTAS:
- No toque la pantalla con un objeto puntiagudo como, por ejemplo, la punta de un bolígrafo.
- No coloque nada encima de la pantalla, pues se podría rayar.

1.4.4 Menú Principal

En el Menú principal pueden seleccionarse diversos modos operativos. En la siguiente tabla se
describe brevemente cada opción del menú.

4
 ANALISIS INSTRUMENTAL FQF/UES 2016

OPCIONES DEL MENU PRINCIPAL

1.4.5 LECTURAS DIRECTAS

Pasos a seguir para realizar lectura directas, ubicados en la pantalla del menú principal, se
selecciona el modo Longitud de onda única, el cual se puede utilizar de tres formas.
Para medidas de muestra a una longitud de onda única, el instrumento se puede programar para
medir la absorbancia, la transmitancia (%) o la concentración del analito.
La absorbancia mide la cantidad de luz absorbida por la muestra en unidades de absorbancia.
La transmitancia (%) mide el porcentaje de luz original que atraviesa la muestra y alcanza el
detector.
Encienda el factor de concentración para seleccionar un multiplicador específico para convertir las
lecturas de absorbancia en concentración. En un gráfico de concentración en función de la
absorbancia, el factor de concentración es la parte descendente de la línea.

5
 ANALISIS INSTRUMENTAL FQF/UES 2016

Para su uso se prosigue como sigue:

a) Seleccionar el modo de trabajo “Longitud de onda única” (para medidas de absorbancia, concentración
y transmitancia)
b) Pulsar la esquina superior derecha, en la cantidad de longitud de onda directamente, Para introducir la
longitud de onda de medición. Utilice el teclado alfanumérico para introducir la longitud de onda de
medición. La longitud de onda introducida debe estar en el rango que abarca de 400–900 nm y darle
entrada.
c) Introduzca la celda de blanco en el porta celdas y Pulse Cero.
Nota: La tecla Medición sólo estará activa después de haber
d) Posteriormente se retira la celda con el blando y se sustituye con muestra y presionar medición, la
lectura se realizara en las unidades seleccionadas al principio

1.4.6 Especificaciones

6
 ANALISIS INSTRUMENTAL FQF/UES 2016

HOJA DE RESULTADOS: LABORATORIO DE ESPECTROSCOPIA VISIBLE

Determinación del Espectro de Absorción del CoCl2.6H2O 0.1 M

Longitud de
Abs Grupo A Abs Grupo B Abs Grupo C
onda (nm)
550
540
530
520
510
500
490
480
470
460
450

Determinación de la Curva de Calibración para CoCl2.6H2O

λ Máxima: ___________nm
Concentración de
Abs Grupo A Abs Grupo B Abs Grupo C
Estándar (M)
0.02
0.06
0.10
0.14
0.20

Peso de Muestra: _____________________

Absorbancia de la solución problema: _______________

7
 ANALISIS INSTRUMENTAL FQF/UES 2016

UNIVERSIDAD DE EL SALVADOR
FACULTAD DE QUIMICA Y FARMACIA
DEPARTAMENTO DE ANALSIS QUIMICO E INSTRUMENTAL
SECCION DE QUIMICA ANALITICA III

HOJA DE RESULTADOS

Nombres: No. De grupo:

Docente responsable:
Nombre de la Práctica: Fecha:

Datos de Estándar: Datos de Muestra:

Peso de Estándar: Peso de Muestra:

Esquema de Dilución de los Estándares: Esquema de Dilución de Muestra:

Concentración de los Estándares: Factor de Dilución de Muestra:

Resultados obtenidos: (10 %)

Cálculos: (30 %)

Observaciones: (10 %)

Conclusiones: (15%)

Dictamen: (15 %)

Bibliografía: (10%)