DETERMINACION DE LA MATERIA
ORGANICA-METODO WALKLEY
BLACK
Nayib S. Califa G., Julián C. Campos, Laura
T. García R., Oscar F. González C., Jorge E.
Henao M., Ángela P. Pacheco
11 de septiembre de 2015
Resumen
El siguiente informe se determinó el carbono
orgánico a través del método Walkley Black
modificado y así mismo se calculó el porcentaje
de nitrógeno total y de materia orgánica de una
muestra de suelo tomada del parque castilla de
Bogotá. El análisis se realizó mediante el método
de Walkley Black que consiste en una oxidación
con K2Cr2O7 en medio de H2SO4, tomando el
calor de la disolución del ácido lo que eleva la
temperatura y logra la oxidación del carbono
orgánico.Obteniendo como resultado 4,2%,
7,24% y 0,36% de carbono orgánico, materia
orgánica nitrógeno total, respectivamente. Los
intentos por establecer una relación entre la
mineralización y los contenidos de materia
orgánica del suelo no han sido exitosos debido a
que solo una pequeña parte de M.O se mineraliza
y a medida que se descompone presenta una
mayor resistencia a la mineralización. Se
concluyó que se pudo determinar de forma
analítica, clara y concisa en que porcentaje se
encontraban la materia orgánica de la muestra
tomada, así poder analizar y observar los
parámetros químicos, en los cuales reaccionaron
ciertas sustancias con determinados reactivos.
Introducción
Según el IGAC (2006), estudiar la materia
orgánica del suelo permite profundizar el
conocimiento de su dinámica y la importancia
que ésta tiene en la productividad y fertilidad del
suelo, y de esta manera establecer herramientas
de soporte que permitan dar recomendaciones
sobre el uso y manejo de este recurso. Por otro
lado, el carbono orgánico del suelo, COS, afecta
la mayoría de las propiedades químicas, físicas y
biológicas del suelo vinculadas con su: calidad,
sustentabilidad y capacidad productiva, por lo
que en un manejo sustentable, el COS debe
mantenerse o aumentarse (Aguilera, 2000). Sin
embargo, establecer una clara relación de
dependencia entre el COS y la productividad del
suelo es complejo, debido a la existencia de
abundante literatura que documenta los efectos
del COS sobre las propiedades del suelo que
favorecen el desarrollo de los cultivos, existe
poca información sobre la contribución directa de
un aumento de COS en la productividad del suelo.
Por consiguiente, este informe tiene como
finalidad determinar el carbono orgánico a través
del método Walkley Black modificado y así
mismo calcular el porcentaje de nitrógeno total y
de materia orgánica.
Acción de los reactivos en la descomposición de
la materia orgánica
La concentración de dicromato empleada asegura
una intensidad oxidativa constante, siempre y
cuando la muestra no consuma más del 80% del
dicromato añadido. En cuanto al potencial redox
del sistema éste se encuentra fuertemente
asociado a la concentración de H2SO4 y a la
temperatura de reacción. La relación ácido:
dicromato, resulta ser la óptima para alcanzar
temperaturas cercanas a los 120-140 ºC sin
necesidad de calentar (Carreira, 2011). El ácido
sulfúrico no es un material combustible en sí
mismo, pero por ser altamente reactivo es capaz
de iniciar la ignición de sustancias combustibles
cuando entra en contacto con ellas (materia
orgánica y compuestos tales como nitratos,
carburos, cloratos, etc.). También reacciona de
forma exotérmica con el agua; tiene mayor
desprendimiento de calor cuando la proporción es
de dos moléculas gramo de agua por molécula
gramo de ácido sulfúrico. El sulfato ferroso
utilizado para la titulación de la muestra y el
blanco, calculando para obtener normalidad real
del sulfato ferroso (FeSO4), obteniendo el
porcentaje de materia orgánica en la muestra que
se pudo analizar en el laboratorio.
Métodos para la identificación de la materia
orgánica
El método de pérdida por ignición se basa en
determinar la pérdida de peso de una muestra de
suelo al someterla a una temperatura de 430 °C en
horno-mufla durante 24h. Con temperaturas de
430 °C se lograría una completa oxidación de la
MO. Así este método permite la determinación de
la MO total del suelo, incluyendo las formas
condensadas, humus y residuos orgánicos poco
alterados. El método de pérdida por ignición
resulta un método económico dado que no se
utilizan reactivos químicos y requiere pocas horas
hombre para su realización. Este método resulta
razonablemente preciso en la estimación de MO
del suelo si se consideran precauciones para
evitar errores por higroscopicidad y contenido de
sales (Buduba, Alonso, & Puentes, 2007). El
método de combustión húmeda de Walkley-
Black consiste en una oxidación con dicromato de
potasio en medio de ácido sulfúrico. La reacción
toma el calor de la disolución del ácido, lo que
eleva la temperatura y logra la oxidación del
carbono orgánico. El dicromato residual es
posteriormente titulado con una sal ferrosa. El
método de combustión húmeda determina sólo
una parte del carbono orgánico, discriminando las
formas condensadas y excluyendo en un 90 a 95%
el carbono elemental. Dado que la oxidación de
la MO que se logra es incompleta se utiliza un
factor de corrección que puede variar de acuerdo
al tipo de suelo y al horizonte considerado. Factor
que se utiliza es para convertir la determinación
de carbono orgánico en valores de MO. Este
factor también puede variar de acuerdo al tipo de
suelo; Distintas interferencias pueden afectar la
cuantificación de MO por el método de Walkley-
Black, por ejemplo, presencia de iones cloruro o
ferroso y óxidos de manganeso. A pesar de estas
dificultades este método es ampliamente utilizado
porque requiere un equipamiento mínimo, puede
adaptarse para la manipulación de gran número
de muestras y no es muy costoso. (Buduba,
Alonso, & Puentes, 2007). Por otro lado los
Instrumentos para determinar el carbono de las
muestras por cromatografía o gasométricamente
Como CO2. De éstas, la última ha sido la más
usada, de tal forma que el analizador LECO ha
sido definido el procedimiento estándar para los
análisis de los materiales obtenidos por el Deep
Sea Drilling Project. En este equipo la muestra es
calentada en un horno de inducción bajo una
corriente de oxígeno purificado el cual transporta
los gases producidos a varias trampas; una de
polvos, otra de sulfuros y a un convertidor
catalítico (para pasar el CO a CO2),
posteriormente los gases entran al analizador de
CO2, donde desplazan un volumen H2SO4
diluido, cuando la combustión termina los gases
colectados pasan a un recipiente con KOH en
solución, la cual absorbe el CO2 y entonces
regresan a la bureta original, la diferencia de
volumen de H2SO4obtenida es usada como
medida del CO, producido desde la muestra.
Ciclo de la materia orgánica
Inicialmente, el elemento inorgánico se encuentra
abundantemente en un depósito de donde es
tomado para la síntesis orgánica. Este depósito
puede ser la atmosfera, para elementos gaseosos
(nitrógeno, oxigeno, carbono), el agua, la corteza
terrestre, en especial las rocas sedimentarias y los
suelos (fosforo, potasio, magnesio, boro, azufre).
Luego, en el proceso de síntesis lo lleva al estado
orgánico; síntesis de carbohidratos que usan
carbono, hidrogeno y oxigeno; de proteínas; de
ácidos nucleicos y fosfolípidos. Posteriormente,
en el proceso de remineralización devuelve el
elemento a su estado inorgánico. Los principales
procesos biológicos son la respiración y la
descomposición; también hay procesos físicos y
químicos, es especial la combustión; de esta
manera, hay momentos en los cuales se puede
cerrar el ciclo y varias vías de circulación de un
elemento dado por el ecosistema. El ciclo implica
el retorno del elemento en cuestión en cuestión al
depósito original. Por otro lado, se presentan
depósitos de materia orgánica muerta que
permanecen mucho tiempo y pueden llegar a un
estado fósil, así, mucha materia se deposita en los
suelos y en forma de petróleo, gas o carbón donde
puede permanecer mucho tiempo antes de
completar su ciclo. Hay un caso especial en donde
el elemento no es devuelto al depósito sino
transferido directamente de los remineralizadores
a los productores. Es el caso de hongos que viven
en las raíces de los productores, descomponen y hojas el carbono en ellas se descompone en el
materia orgánica y transfieren a ellos los suelo. Parte de la materia descompuesta queda
elementos inorgánicos directamente. Este enterada y luego de millones de años se convierte
mecanismo evita que los elementos escasos como en combustible fósil. Y finalmente el carbono va
el fosforo puedan escapar del sistema y garantiza desde los seres vivos hasta la atmósfera. Se
un continuo abastecimiento de los mismos. pueden establecer cadenas tróficas de materia
viva (organismos depredadores) y cadenas
Relación del carbono con otros ciclos tróficas de materia muerta (detritus) en la que la
biogeoquímicos actividad de los microorganismos conduce a la
mineralización (producción de CO2) o la
Todos los organismos vivos necesitan un reinserción en el ciclo (formación de biomasa por
elemento fundamental para poder vivir, crecer y los microorganismos consumidores de detritus)
reproducirse, y son conocidos como nutrientes, biológico del material inutilizable. Los
los cuales se encuentran en diversos compuestos microorganismos son los principales
que varían según el tipo de organismo. Sin responsables de la mineralización de la materia
embargo los elementos que requieren en grandes orgánica del detritus. Los distintos productos
cantidades son los macronutrientes, encargados orgánicos tienen diferentes tasas de
de suministrar la mayor parte de la energía mineralización por los microorganismos. Así
metabólica del organismo (carbono, oxígeno, mismo, en la velocidad de mineralización
hidrógeno, fósforo, azufre, calcio, entre otros) microbiana tiene una gran influencia el pH,
(Ríos, 2010); ya que la mayor parte de las temperatura, humedad y grado de aireación del
sustancias producidas por la Tierra no son útiles suelo (Politécnica, 2008).
para los organismos, estos elementos
fundamentales para la vida en la Tierra son Materiales y métodos
ciclados continuamente a través de las plantas
(Vivas y no vivas (depósitos en la atmósfera, la
hidrósfera y la corteza de la Tierra)), es decir, la Material y reactivo Cantidad
Tierra al ser un sistema cerrado no entra ni sale Muestra de suelo 10 gr
materia, y por ello las sustancias utilizadas no se Bata 1
pierden, casi siempre la materia se reutiliza y ésta Guantes de Nitrilo 2
en constante circulación (Niño, 2013); y Tapabocas 1
posteriormente convertidas en formas útiles Erlenmeyer de 250
2
gracias a una combinación de procesos mL
biológicos, geológicos y químicos. Éste Pipeta de 10 mL 1
ciclamiento desde el amiente no vivo, hasta los Vaso de precipitado
organismos vivos y finalmente de regreso al 1
de 250 mL
ambiente no vivo, tiene lugar en los ciclo bio- Agitador de vidrio 1
geoquímicos (Politécnica, 2008). K2Cr207 1N 15 mL
En cuanto al ciclo del carbono y su relación con H2SO4 Concentrado 30 mL
los demás ciclos bio-geoquímicos es que en la FeSO4 1N 1
atmósfera, el carbono es parte del oxígeno en H3PO4 10 mL
forma de un gas (dióxido de carbono), con ayuda Ferroina 1
del Sol mediante la fotosíntesis, el dióxido de
carbono es extraído del aire y se convierte en
alimento para las plantas en forma de
carbohidratos. El carbono va desde las plantas a Métodos
los animales mediante las cadenas alimentarias
por los animales que se alimentan de ellas.
También va desde las plantas hasta el suelo
cuando una planta muere, con la ayuda de madera
 Resultados
Tabla 1
Titulación del suelo
1 gr de Muestra Blanco
Suelo seco
al aire VFeSO4 prueba 5.7 mL 1,6 mL
1
VFeSO4 prueba 2.5 mL 2,4 mL
Tamizar la 2
muestra
Promedio 8.2 mL 4,9 mL

1 Erlenmeyer Ecuaciones
1 Erlenmeyer
de 250 mL
de 250 mL
(muestra) (Blanco) 𝐾2+1 𝐶𝑟2+6 𝑂7−2 + 6𝐹𝑒 +2 𝑆 +6 𝑂4−2 +
7𝐻2+1 𝑆 +6 𝑂4−2 → 𝐾2+1 𝑆 +6 𝑂4−2 +
Añadir
Añadir 3𝐹𝑒2+3 (𝑆𝑂4 )−2 +3 −2
3 + 𝐶𝑟2 (𝑆𝑂4 )3 + 7𝐻2 𝑂
+1 −2

10 mL K2Cr207
5 mL K2Cr207 Ecuación 1
10 mL H2SO4
20 mL H2SO4
𝐶𝑟2+6 + 3𝑒 − → 𝐶𝑟2+3 Se reduce

Ecuación 2
Agitar Por 1 Agitar
minuto
𝐹𝑒 +2 → 𝐹𝑒2+3 + 1𝑒 −1 Se Oxida

𝐸𝑐𝑢𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 3
Enfriar Enfriar

Agente Reductor 𝐹𝑒𝑆𝑂4

Agregar
agua
destilada Agente Oxidante 𝐶𝑟2 𝑂7
Añadir

5 ml Cálculos
H3PO4

Determinación del porcentaje de Carbono

Reposar
orgánico
Agregar 3
gotas de (𝑉𝑏 − 𝑉𝑚 ) ∗ 𝑁 ∗ 0,003 ∗ 100
ferroina %𝐶. 𝑂 =
𝑃𝑚

Titular %𝐶. 𝑂

Anotar el (8.2𝑚𝐿 − 4𝑚𝐿) ∗ 1𝑁 ∗ 0,003 ∗ 100

volúmen
=
0,3𝑔
de FeSO4
gastado
%𝐶. 𝑂 = 4,2%
Determinación del porcentaje de materia
orgánica
%𝑀. 𝑂 = %𝐶. 𝑂 ∗ 1,724
%𝑀. 𝑂 = 4,2% ∗ 1,724
%𝑀. 𝑂 = 7,24%
Determinación del porcentaje de Nitrógeno total
%𝑀. 𝑂
%𝑁. 𝑇 =
20
7,24%
%𝑁. 𝑇 =
20
%𝑁. 𝑇 = 0,36%
Análisis de resultados
El método de Walkley Black consiste en una
oxidación con K2Cr2O7 en medio de H2SO4,
tomando el calor de la disolución del ácido lo que
eleva la temperatura y logra la oxidación del
carbono orgánico. La heterogeneidad de la
muestra es un serio problema en la distribución
de M.O, por lo cual las muestras se deben
disgregar y mezclar muy bien antes de hacer el
análisis. Los porcentajes aparentes de contenidos
de carbono en la materia orgánica del suelo son
aproximaciones, ya que puede haber variaciones
en distintos tipos de suelos y a distintas
profundidades (Carreira, 2005). Distintas
interferencias pueden afectar la cuantificación de
M.O por el método de Walkley Black, como por
presencia de iones cloruro o ferroso y óxidos de
manganeso (Rosell et al, 2001). A pesar de ello,
este método es muy utilizado porque requiere de
un equipamiento mínimo, se puede adaptar a la
manipulación de un gran número de muestras y
no es costoso.
El método de combustión húmeda determina
sólo una parte del carbono orgánico,
discriminando las formas condensadas y
excluyendo en un 90 a 95% el carbono elemental
(Jackson, 1976). Lo cual indica que los datos
obtenidos en el laboratorio tienen un margen de
error alto y pueden llegar a afectar en el cálculo.
El contenido de materia orgánica del suelo es un
indicador de salud de este mismo y tiene un efecto
en la sostenibilidad del sistema productivo del
suelo. Cuando los suelos son cultivados el
contenido de materia orgánica cae, por lo cual
depende del clima, del suelo y del manejo que se
le dé a este (Hernán René Sainz Rozas, 2011). Se
sabe que aproximadamente el 50% de la materia
orgánica está constituida de carbono orgánico, es
importante en el ciclo del carbono y se liga al
flujo de energía ya que este se fija por medio del
CO2 atmosférico, ya sea dado por fotosíntesis o
por quimio síntesis. El carbono orgánico del suelo
afecta las propiedades físicas, químicas y
biológicas como es la calidad, sustentabilidad y
capacidad de producción (Eduardo Martínez H.,
2008). En la tabla 1 se encuentran los datos
obtenidos en el laboratorio de carbono orgánico
del suelo, que según con lo mencionado
anteriormente es congruente ya que con la
muestra que se realizó el procedimiento el
porcentaje de carbono orgánico es de 4,2% y el
porcentaje de materia orgánica es de 7,24%.
Teniendo el porcentaje de materia orgánico se
puede obtener el porcentaje de nitrógeno total y
el nitrógeno disponible con la siguiente formula
N (nitrógeno total = %MO/20 por lo que en
nuestro suelo este es de 0,36%.
La materia orgánica tiene, en promedio, 5% de
nitrógeno se puede aceptar que el porcentaje de la
materia orgánica dividido por 20 es igual al
porcentaje de nitrógeno total del suelo. Estudios
realizados en Colombia demuestran que el
aumento de la materia orgánica se debe a la
disminución de la temperatura, esto se da ya que
la tasa de mineralización es más baja, por lo cual,
existe una relación positiva entre el contenido de
materia orgánica del suelo y la altura sobre el
nivel del mar. El Nitrógeno del suelo proviene de
la descomposición y mineralización de la materia
orgánica, por lo cual, se considera que el
contenido de Nitrógeno mineral en el suelo que es
asimilado por las plantas es muy bajo. Se acepta
que cada porcentaje de M.O. aporta, en promedio,
2 meq/100 gr de suelo, a la C.I.C (SANDOVAL,
2003).
Gran parte de los componentes de la materia
orgánica son los responsables de la formación y
estabilización de los agregados del suelo, la M.O
actúa como una reserva de nutrientes de
liberación lenta, principalmente para el nitrógeno,
azufre y fosforo, a través de los procesos
mineralización (Alfredo Silva), este proceso es
generalmente realizado por microorganismos del
suelo como bacterias, hongos y actinomicetos,
quienes utilizan los compuestos orgánicos como
fuente de energía para suplir sus necesidades,
degradándolos a formas más simples
(SANDOVAL, 2003). Los intentos por establecer
una relación entre la mineralización y los
contenidos de materia orgánica del suelo no han
sido exitosos debido a que solo una pequeña parte
de M.O se mineraliza y a medida que se
descompone presenta una mayor resistencia a la
mineralización (Francisco Matus, 2001).
Según la tabla 2, se puede observar que la muestra
de suelo es orgánica, ya que nos dio un porcentaje
de materia orgánica del 7,24%
Tabla 2. Tipo de suelo dependiendo del
porcentaje de Materia Orgánica (Bocanegra).
Porcentaje de M.O Tipo de suelo
Menos del 1% Muy mineralizado
Entre 1-1,5% Mineralizado
Entre 1,5-2% Mineral Orgánico
Más del 2% Orgánico
Conclusiones
En la práctica pudimos determinar de forma
analítica, clara y concisa en que porcentaje se
encontraban materia orgánica del horizonte
tomado, así poder analizar y observar los
parámetros químicos, en los cuales reaccionan
ciertas sustancias con determinados reactivos.
El exceso de reactivo dicromato asegura que se
haya oxidado todo el carbono fácilmente
oxidable, que es lo que reacciona en este método.
El nivel de oxidación dependerá no sólo de la
temperatura máxima alcanzada, sino también de
la persistencia del calor generado
Causas de error
El método que usamos de Walkley Black solo
determina la materia orgánica activa, lo que hace
que no sea un método exacto en la
determinación.
La presencia significativa de iones cloruros o
iones ferrosos sobreestimarían el CO mientras
que los nitratos provocarían el efecto inverso
dando valores bajos de CO.
La ferroina se debe añadir en cantidades
adecuadas para que marque adecuadamente el
cambio.
El principal error de esta técnica es que se
relaciona con la presencia de componentes
inorgánicos que consumen dicromato de potasio
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