Serie del segundo examen

1.- Relacione las columnas correctamente (Valor del problema 1 puntos)

1. La fase estacionaria en una red macromolecular que contiene sitios fijos Cromatografía de Fase Normal.
cargados (+) o (-) y únicamente se basa en atracción electrostática.
2. Es la cromatografía donde la temperatura es el parámetro responsable Cromatografía de Intercambio Iónico
de la separación, se utiliza para compuestos altamente volátiles y
térmicamente estables.
3. Recibe este nombre porque hace una separación por discriminación de Cromatografía de Exclusión o
tamaños de partícula, siempre eluyen primero los componentes de mayor Permeación por Gel
peso molecular.
4. Recibe este nombre por tener una fase estacionaria POLAR y una fase Cromatografía de Adsorción
móvil NO POLAR.
5. Recibe este nombre por tener una fase estacionaria NO POLAR y una Cromatografía de Gases
fase móvil POLAR o MEDIANTE POLAR
6. La Fase móvil es un liquido y la fase estacionaria un sólido polar o no Cromatografía de Líquidos
polar, los solutos separan por el poder de elución de la fase móvil.
7. Recibe este nombre porque los solutos tienen interacciones únicamente Cromatografía de Fase Inversa o
con la superficie de la fase estacionaria Reversa

2.- Calcule la resolución (Rs) entre dos compuestos (a) 1-Butanol y (b) 1-Pentanol inyectados en dos diferentes
columnas capilares de 10 m.; para ello complete los datos faltantes en la tabla 2 a partir de los resultados
presentados en la tabla 1
Tabla 1. Datos cromatográficos de dos alcoholes para dos diferentes columnas
Columna 1 (CARBOWAX) Columna 2 (METIL SILICON)
Componente tr (min.) Area mm2 W tr (min.) Area mm2 W
No retenido (to) 1.25 ------------ --------- 1.20 ----- ----------
1-Butanol 2.35 922 .0200 2.20 902 .0250
1-Pentanol 2.75 1570 .0234 2.23 1534 .0254

Tabla 2. Resultados sobre la eficiencia de la columna.

Columna 1 (Carbowax) Columna2 (Metilsilicon)
H(mm)
N
Rs

¿Cuál de las dos columnas es más eficiente para llevar realizar la separación de los alcoholes? y ¿por qué?
Explique ampliamente con base los cálculos de la tabla 2. Valor del problema 2 puntos.

3 Los siguientes resultados se obtienen en un equipo de HPLC para seleccionar la velocidad de flujo óptimo
para el análisis de fluoxetina, un fármaco usado en medicina en los casos de control de pacientes con depresión.
La columna utilizada es 150 mm X 4.6 mm DI con fase estacionaria C8 y 5μm

v tiempo de retención w base H (mm)

(mL/min) (min) (min)
0.9 4.5 0.415
1.3 3.0 0.236
1.5 2.9 0.218
2.0 2.8 0.212
2.2 2.7 0.206

Complete los datos de H para cada flujo de FM (v). Con los datos anteriores desarrolle una curva de Van
Deemter [H = f(v)]
¿Cuál es el flujo (v) apropiado para la mayor eficiencia de la columna?
Explique cada uno de los fenómenos presentes en la ecuación de Van Deemter, si para las columnas
empacadas, si la ecuación es
H = A + B/u + Cu
Explique porque son más eficientes las columnas capilares y ¿cuál es la ecuación de eficiencia que las
representa?. (Valor del problema 3 puntos)

4.- Se presentan los cromatogramas de la separación por HPLC de estándares de Aflatoxinas y una muestra
problema respectivamente, obtenidos en las mismas condiciones experimentales.
Con la información que proporcionan los cromatogramas llene las siguientes tablas de datos

Tabla 1. Mezcla de Estándares y sus concentraciones

Etiqueta Conc.(mg/L) tiemporetención wb Area Nombre del Compuesto
A 0.154 0.45 1550
C 0.135 0.40 1479
B 0.145 0.35 1423
Tabla 2. Muestra problema + Estandar Interno (EI)
Etiqueta Conc.(mg/L) tiempo retención wb Area Nombre del Compuesto
1 0.45 1380
2 0.40 1956
3 0.35 1873
E.I 0.135 0.40 1485
4 0.35 3065

Responda los siguientes cuestionamientos:

a) ¿Cuál es el parámetro utilizado para realizar una identificación en cromatografía?
b) Determine los tiempos de retención de los compuestos estándares.
c) De la muestra problema ¿cuáles son los compuestos que identifica usted?
d) Calcule la resolución para los compuestos y Determine si están bien resueltos
e) Calcule K’ para los estándares si el tiempo muerto es de 0.6 minutos.
(Valor del problema 2 puntos)

5. Por último, se realiza la siguiente la determinación de aflatoxina G1 en semillas de frijol mediante HPLC.
Se prepara una serie de sistemas para construir una C. Calibración con los resultados siguientes
:
Conc. mg Aflatoxina G1/Litro Propiedad (u2)
0.513 603
1.027 1188
1.543 1825
2.057 2425
2.571 2990

Determinación de Aflatoxina G1 en semillas de frijol. Se pesan exactamente 25.9532 g de semilla de frijol

con un tratamiento adecuado se extrae la aflatoxina con un disolvente orgánico, después se lleva a un aforo de
5 mL (Problema) esta solución se inyecta al HPLC y el pico de la Aflatoxina G1 tiene un área = 1756 (u2).

f) Elabore la gráfica de calibración adecuada para la cuantificación del problema, obtenga la regresión lineal
e indique la ecuación matemática.
g) Determine los mg de Aflatoxina G1 por kg de semilla de frijol.
(Valor del problema 2 puntos)

1. Se desea separar de una solución problema los cationes Bi 3+ y Fe3+ mediante una resina de
intercambio de aniones en forma inicial de Cloruros Cl¯. Se realiza la elución de la 2 mL de solución
problema con una solución de [Cl¯ ] = 3.15 M y se lleva a un aforo de 50 mL (fraccion 1)
Consulte los diagramas de distribución de especies anexos
a) Determine las especies representativas de Bi(III) y Fe(III) al pCl impuesto.
b) Indique que especie es retenida en la resina y la especie que eluye en solución.
c) La ecuación de la recta en absorción Atómica para el metal que eluye en la fracción 1 es:
Abs = 1.315 [X] + 0.0034 ; donde la pendiente tiene unidades ppm -1 cm-1
La concentración es expresada en mg/L y la fracción 1 tienen una Abs = 1.152
d) Determinar la concentración (mg/L) del catión en la solución problema.

2- Se presenta el cromatograma de la separación por HPLC de los parabenos obtenidos en una

muestra problema (Protector Solar). Las condiciones de análisis son: flujo =1.0 mL/min, Columna
C18 (150 mm), Fase Móvil =70:30 (Metanol:H2O).

Cromatograma de la determinación de parabenos en un protector solar líquido.

Preparación de la muestra, se toman 100 microlitros de muestra se disuelvan y aforan a 5 mL de

fase móvil (Sol A). La solución se inyecta al HPLC. La tabla 1 muestra los resultados de la calibración.
La tabla 1 Datos de la calibración Etilparabeno mediante HPLC.
Conc (mg Etil parabeno/L) Area Etilparabeno
2.50 159176.5
5.00 402132.5
10.00 792806.5
15.00 1320027.5
20.00 1621330
25.00 2124277

h) Construya la curva de calibración para el Etilparabeno linealice y obetanga su regresión lineal.

i) Determine la concentración de la Sol A; si el Area es de 854,476 u2
j) Determine el % (peso) de Etillparabeno en él protector solar (densidad de la muestra =0.78 g/L).
3.- En un cromatógrafo gas‐líquido con una columna empacada de 40 cm se obtuvieron los
siguientes datos:

Compuesto tr (min) Conc. (mg/L) Área W b (min) Rs

Aire 1,9 xx xx -
Metilciclohexano 10,0 1.54 1550 0.56
Metilciclohexeno 11.5 1.35 1479 0.62
Tolueno 13,4 1.45 1423 0.86
Condiciones: Inyector: 250°C (directa); flujo N2 = 30 mL/min; Detector: 250°C (TCD); 1 µL

Calcular:
 a) A partir de los datos de la tabla dibuje el cromatograma correspondiente.
b) Calcular N, H y K para el ciclohexeno.
c) Calcular la resolución Rs para:
El metilciclohexano, metilciclohexeno y tolueno
d) Discuta el orden de elución de los compuestos si la columna tiene como fase estacionaria
polidimetilsiloxano (NO POLAR) (1 punto)

Análisis Cuantitativo: Se desea determinar la cantidad de Metilciclohexano en una muestra

problema. Se toman 5 mL de problema y se adicionan 5 mL de una solución de tolueno (estándar
interno) de concentración 2.9 mg/mL; esta solución se inyecta al cromatógrafo de gases y se
obtienen las áreas para metilciclohexano de 1853 y para tolueno de 1456.

a) Calcular la concentración de Tolueno en la mezcla.

b) Calcular el Factor de Respuesta de Metilciclohexano con respecto al Estándar Interno.

c) Determine la concentración de metilcilohexano en la muestra problema