Laboratorio de microbiología.

COLORACIONES
semana 2
PEDRO MENGOLÉ AMAYA
 Procedimiento general de Fijación al calor y observación

MUESTRA

LÍQUIDA SÓLIDA

Colocar “asada” en el portaobjetos Diluir en solución salina o en gota de agua

Realizar el extendido secar al aire

Fijar al calor

colorear

Observar al microscopio 10x > 100x

(sin laminilla y con aceite de inmersión)
 Coloración simple: Procedimiento
AZUL DE METILENO

Lavado a
Dejar actuar el chorro de
Hisopo con la colorante sobre agua
muestra la muestra por 1
biológica minuto
1´

Cubrir toda la
muestra con el
colorante.
(azul de
metileno) Secar a T° ambiente o
Fijar al calor
ligeramente con el calor

Observar al microscopio 100x

(sin laminilla y con aceite de inmersión)
METODO DE COLORACIÓN DE GRAM

Fijación de la Muestra Preparación de colorantes

METODO DE COLORACIÓN DE GRAM

Cristal Violeta: solución de trabajo Solución de Lugol

METODO DE COLORACIÓN DE GRAM

Alcohol - Acetona Safranina

METODO DE COLORACIÓN DE GRAM
Procedimiento
 Coloración Gram: Procedimiento

1. Cristal violeta 2. Mordiente: 3. Decoloración: 4. Safranina

Lugol Alcohol acetona

1´ 1´ 15´´ 1´

Lavado Lavado Lavado

Lavado

Secado al
aire o calor

Observar al microscopio 100x

(sin laminilla y con aceite de inmersión)
Coloración Gram, fundamento
 Coloración Ziehl Neelsen: Procedimiento
3. Decoloración:
2. Flamear hasta la Alcohol Ácido 4. Contraste: azul
emisión de 3 vapores Hasta que frotis quede de Metileno
1. Cubrir con fucsina
transparente!!
Básica No hervir!!!!

30´´

Lavado
Lavado Lavado
Secado al
aire o calor
BAAR de color fucsia con fondo azul que
incluye bacterias comunes

Observar al microscopio 100x

(sin laminilla y con aceite de inmersión)
Medios de cultivo

https://www.youtube.com/watch?v=HnRbriYrHHw https://www.youtube.com/watch?v=YGoPu0cn9ms
BACTERIAS: Características generales
Bacterias patógenas y beneficiosas
Clasificación
TIPOS DE BACTERIAS SEGÚN SU FORMA

Coco (del griego kókkos, grano): de forma

esférica.

Diplococo: cocos en grupos de dos

esferas.
Tetracoco: cocos en grupos de cuatro
esferas.
Estreptococo: cocos en cadenas.
Estafilococo: cocos en agrupaciones
irregulares o en racimo.
Bacilos :

se caracteriza por su forma de bastón, puede

ser G+ o G-, produce enfermedades (
Mycobacterium)
TIPOS DE BACTERIAS SEGÚN SU FORMA
• Espirilos: Forma de espiral o tirabuzón. Estas son bacterias
Gram Negativas y muy patógenas. (treponema).

• Vibrios: Son curvas más o menos alargadas, algunas

retorcidas (genero Vibrio)
Bacterias según su forma
Estructura bacteriana
Estructura bacteriana interna
Bacterias según su pared celular

• Bacterias Gram positivas: La

pared está formada por varias capas
superpuestas de peptidoglicano, y en su
cara externa se encuentran
polisacáridos y otras moléculas
denominadas ácidos teicoico Se
reconocen porque con la tinción de
Gram adquieren color violeta oscuro.
• Bacterias Gram negativas: La
pared está formada por una sola capa
de peptidoglicano, sobre la que se halla
una bicapa de lípidos y proteínas
conocida como membrana externa,
similar a la membrana plasmática. Se
distinguen porque con la tinción de
Gram adquieren color rojo.
 FLAGELOS:

Estructuras proteicas, de mayor

longitud que los Pili. De estructura
helicoidal y locomotores
(responsables de la motilidad
bacteriana).
A-Monotrico;
B-Lofotrico;
C-Anfitrico;
D-Peritrico
 FIMBRIAS O PILI :
 Son estructuras cortas parecidas a GLICOCALIX:
pelos. Visibles solo al Microscopio
Electrónico. Carentes de motilidad.  Entramado de fibrillas polisacaridas situadas en
Los poseen fundamentalmente las posición extracelular Facilita la adherencia
Gramnegativas.
 Intervienen en la adherencia de las
bacterias al huésped.
 Facilitan el intercambio de ADN
durante la conjunción bacteriana.
Tiene capacidad antigénica.
Reproducción asexual bacteriana
Crecimiento bactriano
Clasificación de las bacterias
Morfología de las colonias
Morfología de las colonias

Proteus
vulgaris

Escherichia coli
Klebsiella
pneumoniae

Yersinia Pseudomona
enterocolitica aeruginosa
Agar Mac Conkey
Medios diferenciales bioquímicos