FILTRACIÓN POR MEMBRANA

NELLY YAZMIN AGUDELO ROZO – 1611303

DAYRON ELIECER ALMEYDA PIMIENTA – 1611323

ELIANA SOTO MENDEZ – 1611324

DANIELA ANDREA VARGAS ORTEGA – 1611329

BIOTECNOLOGIA AMBIENTAL

UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS Y DEL AMBIENTE

PROGRAMA DE INGENIERIA BIOTECNOLOGICA

CUCUTA

2019
 TABLA DE CONTENIDO

1. INTRODUCCIÓN
2. Materiales y Reactivos
3. Metodología
4. Resultados
5. Análisis de resultados
6. CONCLUSIONES
7. BIBLIOGRAFÍAS
METODOLOGIA

PREPARACIÓN DEL MATERIAL

AGAR: Se lavo con agua y jabón las cajas Petri pequeñas. Se enjuago con agua + cloro
por 10 minutos, y se envolvió en papel Kraft, se metió en una bolsa plástica y se esterilizo
en autoclave.

Preparación del medio Chomocult: Se esterilizo el agua destilada requerida en un

frasco sellado con aluminio y cinta tirro en la autoclave. Después se calculó los gramos
necesarios de agar chromocult a utilizar y se pesó en la balanza, se agregaron al agua
destilada estéril y se puso a calentar en la estufa hasta ebullición. Se dejo reposar y se
sirvió en las cajas de Petri dentro de una cabina de flujo laminar. Se envolvió bien con
envoplast cada caja, se marcó con cinta tirro y se guardó en la nevera.

Frasco para toma de muestra microbiológica: Se lavo con agua y jabón el frasco, y se
enjuago con agua + cloro por 10 minutos. Se rotulo antes de envolver con el papel Kraft.
Se esterilizo en el horno por 4 horas a 125°C.

Pipetas: Se lavo con agua y jabón pipetas de 10 ml. Se enjuago con agua + cloro por 10
minutos. Se envolvió con papel Kraft, se marcaron y se llevaron a esterilizar en el horno
durante 4 horas a 125°C.

Agua destilada estéril: se lavó con agua y jabón 1 frasco de vidrio. Se enjuago con agua
+ cloro por 10 minutos. Se adiciono 400 ml de agua destilada, se selló con aluminio y
cinta tirro. Se autoclavo, se dejó reposar y se refrigero.

Paño estéril: Se envolvió en papel Kraft dos paños de limpieza, se sellaron con cinta
tirro, se marcaron y se esterilizaron en el horno por 4 horas a 125°C.

PROCEDIMIENTO

1. Una vez se tiene la muestra a analizar en este caso agua de grifo, se procedió a
entrar al cuarto de siembra.
2. Se procedió a realizar la filtración: bajo condiciones de esterilidad con los
mecheros encendidos, se armó el equipo de filtración y se colocó un filtro de
nitrocelulosa en la unidad de filtración.
 3. Con una pinza estéril, se sujetó el filtro de membrana por uno de sus bordes, y se
colocó sobre la superficie de la caja Petri con Agar Chromocult (siembra en
superficie).
4. Se cerro la caja Petri, se rotulo y se envolvió.
5. Se incubo a 36°C por 24 horas, se realizó el conteo de colonias y se reportó
UFC/100 ml.

RESULTADOS

I II

III IV

Coliformes Fecales (Moradas) = CF+ Colonias de Se dividió la caja de Petri en 4

Salmonella (Azul) cuadrantes para una mejor lectura
de los Coliformes Totales. (Se hizo
Coliformes totales (Rojo)= CT+CF
recuento en el cuadrante número 2)

CF: 4 COLONIAS MORADAS; sin presencia de Colonias

de Salmonella
CT: 32 COLONIAS ROJAS*4(#de cuadrantes)
*CT: 32 COLONIAS ROJAS*4(#de cuadrantes)+ 4
COLONIAS MORADAS

CF: 4 UFC/100ml CE
CT: 128 UFC/100ml
*CT: 128 UFC/100mlCT + 4UFC/100mlCF=
*CT = 132 UFC/100ml
CONCLUSIONES
La importancia de esta técnica se ve reflejada en la rapidez en que se obtienen los
resultados, pues a comparación de otras como el método del NMP, en el cual se lleva más
tiempo y más desperdicios de material.

En la mayoría de las enfermedades agudas de transmisión hídrica, los criterios

microbiológicos juegan un papel muy importante. Sin embargo, es recomendable realizar
análisis fisicoquímicos para evaluar el riesgo de enfermedades crónicas, y así hacer una
interpretación sanitaria completa.