Universidad distrital francisco José de caldas

Proyecto curricular licenciatura en química

Análisis químico instrumental
Laboratorio 6
Cuantificación de vainillina
Grupo 1
PERLAZA V; ARIZA Y; BELLO A;

RESUMEN

En la práctica se llevó a cabo Cuantificar vainillina en una muestra de esencia comercial por medio
de la espectrofotometría ultravioleta con 20 ml de una solución patrón y realizando disoluciones
seriadas. El método que se utilizó fue el de UV, debido a las propiedades de la sustancia. Se
emplearon celdas especiales de cuarzo para introducir los estándares y las muestras en el
espectrofotómetro. Tanto las muestras como los estándares se diluyeron con hidróxido de
sodio (NaOH). La espectroscopia visible es una de las técnicas más ampliamente y más
frecuentemente empleadas en el análisis químico. Para que una substancia sea activa en el visible
debe ser colorida: el que una substancia tenga color, es debido a que absorbe ciertas frecuencias o
longitudes de onda del espectro visible y transmite otras más. Por ejemplo: una solución es amarilla
debido a que dentro de la región visible absorbe radiación en el rango de 435 a 480 nm. En este
rango de longitud de onda se encuentra el color azul del visible, por lo que este compuesto absorbe
el color azul y transmite los colores complementarios que dan origen al color amarillo de la solución
mencionada.

Palabras claves: cuantificar, analito, espectroscopia visible

ABSTRACT

In practice it was carried out Quantifying vanillin in a sample of commercial essence by means of
ultraviolet spectrophotometry with 20 ml of a standard solution and making serial solutions. The
method used was UV, due to the properties of the substance. Special quartz cells were used to
introduce the standards and samples into the spectrophotometer. Both samples and standards
were diluted with sodium hydroxide (NaOH). Visible spectroscopy is one of the most widely and
frequently used techniques in chemical analysis. For a substance to be active in the visible, it must
be colorful: the fact that a substance has color is due to the fact that it absorbs certain frequencies
or wavelengths of the visible spectrum and transmits others. For example: a solution is yellow
because within the visible region it absorbs radiation in the range of 435 to 480 nm. In this range of
wavelength is the blue color of the visible, so this compound absorbs the blue color and transmits
the complementary colors that give rise to the yellow color of the solution mentioned

Keywords: quantify, analyte, visible spectroscopy

INTRODUCCIÓN Conceptos previos Radiación

electromagnética: es la propagación de
energía a través del espacio sin soporte de (380-200nm)
materia, es decir, a través de ondas
producidas por la oscilación o aceleración de
una carga eléctrica (dualidad onda-partícula).
Naturaleza ondulatoria: caracterizada por su
frecuencia (ν) o longitud de onda (λ). ν =
número de ondas que pasan por un punto en
la unidad de tiempo. λ = distancia que hay
ente dos puntos iguales de la onda, máximos,
mínimos, etc. Naturaleza corpuscular,
partícula: formada por fotones con energía (E)
E = h·ν, donde h es la constante de Plank. La Esta radiación puede ser emitida por
radiación electromagnética se puede ordenar sustancias bajo condiciones de gran
en un espectro que se extiende desde ondas excitación, como, por ejemplo, altas
de frecuencias muy elevadas (longitudes de temperaturas o descargas eléctricas. La ν λ c =
onda pequeñas; rayos gamma) hasta radiación electromagnética al incidir sobre la
frecuencias muy bajas (longitudes de onda materia puede sufrir los siguientes procesos:
altas; ondas de radio). La luz UV-visible es sólo 1. Absorción 2. Transmisión 3. Reflexión 4.
una pequeña parte del espectro Refracción 5. Dispersión
electromagnético, visible
Para que la radiación electromagnética
incidente, interaccione con la materia tiene
que tener una λ del mismo tamaño o menor
que las dimensiones del cuerpo irradiado. Es
por ello que la radiación de la región del
ultravioleta (≈ 1-400 nm) nos permite obtener
información de las transiciones electrónicas
de las moléculas. La espectroscopia UV-Vis se
basa en el análisis de la cantidad de radiación
electromagnética (en el rango de longitudes
de onda del ultravioleta y visible) que puede
absorber o transmitir una muestra en función
de la cantidad de sustancia presente. Todas
Naturaleza corpuscular, partícula: formada
las técnicas de absorción suponen que
por fotones con energía (E) E = h·ν, donde h
cuando una radiación incide sobre una
es la constante de Plank. La radiación
muestra se produce una absorción parcial de
electromagnética se puede ordenar en un
esta radiación, lo que hace que se produzca
espectro que se extiende desde ondas de
una transición entre los niveles energéticos
frecuencias muy elevadas (longitudes de
de la sustancia: átomo, molécula o ion, X,
onda pequeñas; rayos gamma) hasta
pasando esta al estado excitado, X, el resto de
frecuencias muy bajas (longitudes de onda
radiación es transmitida. Así analizando una u
altas; ondas de radio). La luz UV-visible es
otra podemos relacionar la cantidad de
sólo una pequeña parte del espectro
especie activa presente en la muestra.
electromagnético, visible (780-380nm); UV
Es el resumen de dos leyes que nos permiten
relacionar la fracción de radiación absorbida
con la concentración del analito y el espesor
del medio. Se cumple para cualquier proceso
de absorción en cualquier zona del espectro y
se basa en que cada unidad de longitud a
través de la cual pasa la radiación absorbe la
misma fracción de radiación. Si tenemos un
haz de luz monocromática, “I0” , que pasa a
través de un material de espesor, “l”, la
disminución de la intensidad de luz
transmitida, “It”, será proporcional al camino
recorrido y a la concentración de la sustancia
absorbente, “c”. l c o I I e −ε .. = El factor de
proporcionalidad, “ε”, se denomina
absortividad molar y está relacionado con la
probabilidad de absorción de radiación por
parte de la sustancia en análisis. Tomando
logaritmos y reorganizando la ecuación
tenemos: lc I I = ε 0 log donde “log I0/I” se
denomina absorbancia (A). Si tenemos una
sustancia cualquiera, X, que absorbe en el
rango ultravioleta visible, debido a su
configuración electrónica no lo hará a una
única energía sino que podrá absorber en un
rango de energías con distinta eficiencia en
cada una de ellas, esto da lugar al espectro de
absorción de esta sustancia que indica la
intensidad de luz absorbida de cada longitud
de onda o energía
Es el equipo que utilizamos para medir la
absorción o transmisión de luz por parte de
una muestra. Consta de los siguientes partes:
Fuente de luz: suele ser una lámpara que
emite una luz (por incandescencia de un
filamento) poli cromática, es decir que
contiene distintas longitudes de onda con
distintas intensidades, I0. Sistema óptico: a
través de filtros, lentes y redes de difracción
se focaliza el haz de luz y se selecciona una
longitud de onda fija. Compartimiento
muestra: es donde se coloca la muestra, con
un espesor conocido, normalmente disuelta y
en una cubeta de 1cm de paso óptico, sobre
la que se hace incidir el haz de luz
monocromática Sistema óptico: recibe la luz
transmitida por la muestra, la focaliza y
selecciona por longitudes de onda Detector:
recibe la señal de la intensidad de la luz
transmitida a cada longitud de onda y la
transforma en señal eléctrica que un
ordenador pueda procesar

MATERIALES Y REACTIVOS
 Embudo de decantación
 Esencia
 4 vasos precipitados
 7 balones aforados de 10 ml
 3 balones aforados de 50 ml
 Pipetas
 Espectrofotómetro
la capa acuosa y colóquela en un balón
aforado de 50 mL. Extraiga dos veces más la
capa orgánica con porciones de 15 mL
de NaOH 0.1M. Transfiera las soluciones
acuosas extraídas al balón aforado y
complete a volumen con NaOH 0.1M. Tome
una alícuota de 0.5 mL de esta solución y
diluya a 25 mL con NaOH 0.1M en balón
aforado.
PARTE II

REACTIVOS A partir de una solución patrón de vainillina

 Muestra esencia
 Cloroformo 150 ml
 Solución 2 L de NaOH de 0.1 M
 Solución patrón de vainillina 200 ml
en NaOH 0.1 M
 Agua destilada
 Etanol comercial 50 ml
 Celdas
en NaOH 0.1 M (40 ug/mL), prepare
diluciones de la solución patrón de
vainilla en balones aforados de 50 mL
diluyendo con NaOH 0.1 M (tabla 1). Y luego
prepare las otras diluciones, a partir de la
solución patrón de vainillina en NaOH 0.1 M
(10 ug/mL), en balones aforados de 10 mL
diluyendo con NaOH 0.1 M (tabla 1).

PROCEDIMIENTO Usando como blanco la solución de NaOH

0.1M, medir la absorbancia de 308, 340, 350
PARTE I
y 380 nm en su espectrofotómetro de
En un embudo de decantación agregamos 5
la dilución 8 (ver tabla 1). Seleccionar la
mL de agua destilada y 0.5 mL de esencia
longitud de onda de análisis, y repetir la
exactamente medida. Añada 5 mL de
medición para todas las diluciones, incluido
cloroformo y agite suavemente (recuerde
el blanco.
liberar presión del embudo de decantación),
repetir extracción con 2.5 mL. Permita

que se separen las dos capas y drene la capa

orgánica en un erlenmeyer. Repita el proceso
de extracción de la solución

acuosa dos veces más con porciones de 5 mL

de cloroformo y combine todos los extractos
orgánicos en el erlenmeyer.

Transfiera la capa orgánica al embudo de

decantación y agregue cuidadosamente 15
mL de NaOH 0.1 M y agite bien. Separe
 Sln Vainillina Solución
(40 NaOH
ug/mL) Solución 0.1M
monitor PATRÓN para Volumen
stock (mL) diluir final abs abs
(mL) (mL) _354_____ tramitansa _408___ tramitansa
0 (blanco) 10 0 100 0 100
1 0.25 ug/mL 0,5 ml 1,5 ml 10 0,003 99,6 0,03 99,6
2 0.5 ug/mL 1 ml 9 ML 10 0,007 98,4 0,07 98,4
3 1 ug/mL 2 ml 8 ML 10 0,01 97,8 0,1 97,8
4 2 ug/mL 4 ml 6 ml 10 0,017 96,2 0,17 96,2
5 3 ug/mL 6 ml 4 ml 10 0,022 95 0,22 95
6 4 ug/mL 8 ml 2 ml 10 0,029 93 0,29 93
5 ug/mL
7 (2°patrón) 10 ml 0 ml 50 0,035 92,2 0,35 92,2
8 10 ug/mL 10ml 0 ml 50 0,06 87,3 0,6 87,3
9 20 ug/mL 10 ml 0 ml 50 0,113 77,2 0,1 77,2

0.15
grafica 1
0.113
0.1

0.06
0.05
0.035
0.029
0.022
0.017
0.01
0.007
0 00.003
-5 0 5 10
-0.05
Resultados y discusión muestra el pico con mayor absorbancia
obteniéndose para la solución vainillina en
una longitud de onda de 348 nm

La tabla 1 muestra el promedio de las

absorbancias de las dos replicas obtenidas
para las diluciones de cada uno de los
solventes utilizados. Nota: cabe mencionar
que se repitió el ensayo de la concentración
grafica 2 de 20gr de la solución de NaOH ya que daba
0.7 absorbancias raras. Para la gráfica 1 se
0.6 0.6 decidió graficar solamente aquellas
0.5 absorbancias que fueran menor a uno ya que
0.4 mayores a esta absorbancia se va llegando al
0.35
0.3 0.29 límite de detección y por consecuente se va
0.2 0.22 perdiendo el rango lineal que interesa de
0.17
0.1 0.1 0.1 nuestro estudio. Concentración muestra: La
0.07
0 0
0.03 absorbancia dada por la muestra que se
-5 -0.1 0 5 10 15 analizo fue de 0.658 en la longitud de onda
de 600 nm y con ayuda de la y = 0.1238x -
analisis de resultados 0.0078 R² = 0.9974 ABSORBANCIA
CONCENTRACION
Se logró determinar la concentración en
partes por millón (mg/L) de vainillina en
una muestra comercial de vainilla Conclusiones
siguiendo el método de espectroscopia
 Logrando el objetivo se encontró
UV empleando NaOH como disolvente y
la concentración que se espera
celdas de cuarzo para introducirlas al
sea la real a partir de las dos
espectrofotómetro con las soluciones. Los
curvas siendo prácticamente
resultados fueron confiables debido a que iguales para cada una. El
el coeficiente de correlación de los disolvente NaOH fue el que
estándares fue satisfactorio con un valor presento comparado con el del
de 0.9989 los resultados se pueden agua mayor absorbancia a la
observar en las graficas no se dio misma concentración (debido a
correctamente la curva de ringbom la interacción del analito con el
porque las dilusiones quedaron a muy solvente), su aplicación es que
baja concentración las graficas las realice utilizando este solvente tienes
más amplitud de conocer la
en círculos porque era la manera mas
concentración desconocida o
sencilla de interpretarlas
conocer alguna otra y de tener
se programó el espectrofotómetro en una un mayor rango lineal. Cabe
longitud de onda de 350 a 420 nm para mencionar que el solvente y
observar la longitud de onda donde se algunas condiciones de la
 solución como el pH, la fuerza
iónica y la temperatura deben
ser optimizados y controlados
para minimizar las interferencias
y mantener la linealidad (para
prevenir la descomposición por
oxidación, foto descomposición
u otros mecanismos). Por otro
lado, se debe de mantener el
equilibrio y maximizar el tiempo
de estabilidad de la forma
absorbente.
 REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
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Calibración de
Espectrofotómetro Ultravioleta-
Visible. CASMET. Querétaro, Qro.
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