Profesor: Diego Jaimes

PRACTICA: #4 ACTVIDAD DE LAS ENZIMAS GRUPO:

NOMBRE: CODIGO:
INTEGRANTES:
Brayan Stiven Sanchez Mora 1006419167
Kenner Doctor Rivera 1006454024
Pedro Fernandez 1007362462
Shirley Xiomara Galvis 1116553525
Inma Berenice Bonilla 1099302930

MARCO TEORICO:

Las enzimas constituyen la clase más numerosa y especializada de proteínas que catalizan toda serie
de reacción química que conforma el metabolismo celular. Todas las proteínas son elaboradas por las
células ya que tiene solo una misión dentro de este mecanismo celular actuando como catalizador
químico. Son muy específicas ya que cada enzima cataliza un tipo particular de reacción lo cual
determina una estructura espacial dada, esta especificidad varia de una enzima a otra, son
extremadamente sensibles al calor debido a la desnaturalización de sus componentes, también
afectadas por el PH mostrando mayor actividad en un PH determinado ya que puede disminuir o
aumentar dependiendo de este. Existen enzimas cuya actividad depende de su estructura como
proteínas, sin embargo están formadas por dos componentes, uno proteico llamado apoenzima y otro
orgánico llamado coenzima ya que ambos son fundamentales para la acción enzimática, su
disociación da lugar a una pérdida de actividad en este sentido.
Clasificación de enzimas.
Se clasifican en 6 grupos de acuerdo con el tipo de reacción que catalizan.
OXIDORREDUCTOSA: reacciones de óxido reducción.
TRANFERASAS: transferencia de grupo funcionales.
HIDROLASAS: reacciones de hidrolisis( reacción de descomposición de agua como uno de
los reactivo)
LIASAS: Adición a los dobles enlaces según la ecuación: la primera etapa de la reacción es la
adición del producto al alquenonucleofilo para formar el carbocatión, reaccionando en la
segunda etapa con el nucleofilo.
ISOMERASAS: Reacción de isomerización: Son las reacciones en las que se produce un
reordenamiento o la interconversion de grupos funcionales.
Ejemplo: Tautomerizacion donde cambia la posición del enlace.
LIGASAS: Formación de enlaces con ruptura del ATP (enzima que disuelve los coágulos de
sangre.

OBJETIVOS:
 Determinar la presencia de la enzima catalasa en tejidos animales y vegetales.
 Observar el efecto de diferentes factores sobre la actividad enzimática.
 Comprobar la acción hidrolítica de la amilasa.

MATERIALES Y METODOS:
MATERIALES: 2 gradillas, 15 tubos de ensayo, 1 pinza de madera, 1 beaker de 50 ml, 2 pipetas de
10 ml, 1 mechero, 1 churrusco para tubos, trozos de tomata, trozos de hígado, cinta de en mascarar,
bolsas negras.
REACTIVOS: 6 ml de agua oxigenada, 2 ml de lugol al 1%, 2 ml de buffers fosfato 0.1 m a pH de 3,
7,11, 2 ml de benedict y 20 ml de solución de almidón.
METODOS: La catalasa en tejidos animales es una oxidoreductosa de los sistemas enzimáticos
respiratorios y se encuentra en la mayoría de los tejidos vegetales y animales, al igual que en muchas
especies bacterianas. La función de esta enzima en los tejidos es necesaria porque mediante el
metabolismo celular se forma una molécula toxica que es el peróxido de hidrogeno esta se encarga de
la catalizacion del peróxido convirtiéndolo a oxigeno con la simultanea reacción de una segunda
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molécula de peróxido a agua.
1). Reconocimiento de la catalasa en tejidos animales
1.1 Coloque en un tubo de ensayo unos trozos de hígado.
1.2 Añada 2 ml de agua oxigenada
2). Reconocimiento de la catalasa en tejidos vegetales
2.1 Hacer el mismo procedimiento anterior pero en este caso con trozos de tomate.
3). Desnaturalización de la catalasa
3.1 Coloque en un tubo de ensayo unos trozos de hígado
3.2 Añada agua, hierva la muestra durante unos minutos
3.3 Después de este tiempo retire el agua sobrenadante.
3.4 Añada agua oxigenada hasta cubrir los trozos de hígado.
3.5 ¿Qué observa? compare los resultados con los de la relación 1.
4). Hidrólisis del almidón
4.1 Coloque una gradilla con 6 tubos de ensayo y agregue en cada uno las cantidades que se indican
a continuación.
Tubo #1: 2 ml de solución de almidón
Tubo #2: 2 ml de solución de almidón
Tubo #3: 2 ml de solución de almidón + 1 ml de saliva sin diluir
Tubo #4: 2 ml de solución de almidón + 1 ml de saliva sin diluir
Tubo #5: 2 ml de solución de almidón + 1 ml de saliva diluida hervida.
Tubo #6: 2 ml de solución de almidón + 1 ml de saliva diluida hervida.
4.2 Coloque los tubos a baño de maría a 37°C, durante 10 minutos.
4.3 en los tubos 1, 3 y 5 adicione 1 gota de lugol.
4.4 en los tubos 2, 4 y 6 adicione 1 ml de reactivo de benedict.
4.5 interpretar resultados.
5).influencia del pH en la actividad enzimática
5.1 recoja 6 ml de saliva en un beaker de 50 ml
5.2 coloque una gradilla con 3 tubos.
5.3 adicione en cada uno las cantidades que se presentan a continuación.
tubo#1: 2 ml de saliva + 2 ml de Buffer fosfato 0.1 M a pH 3
tubo#2: 2 ml de saliva + 2 ml de Buffer fosfato 0.1 M a pH 7
tubo#3: 2 ml de saliva + 2 ml de Buffer fosfato 0.1 M a pH 11
5.4 agite vigorosamente, adicione 2 ml de almidón al 1% en cada tubo. Agite nuevamente y agregue
una gota de lugol.
5.5 anote el tiempo de desaparición del color en cada pH. Justifique la desaparición del color.
5.6 responder las preguntas.

RESULTADOS Y ANALISIS:
PPRUEBA DE TOMATE CON 2 ML DE AGUA OXIGENADA

¿Qué observa? RTA=Se observó que al adicionarle el agua a los trozos de tomate estos empezaron
a burbujear y cambiaron de color volviéndose más claros.
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PRUEBA DE HIGADO

¿Qué observa? RTA= Se observó que se forma una espuma debido a la interacción del agua
oxigenada con el trozo del hígado.
¿Según la reacción 1 que observa? RTA=Se observa que hay liberación de oxígeno debido al
rompimiento de las células.

PRUEBA DE HIGADO CALENTADO DURANTE 10 MINUTOS:

¿Qué observa? RTA=Se observó que después de haberse expuesto en baño de maría durante 10
minutos a 37°c este tuvo un cambio físico donde cambio su color y su peso. Esto debido a la
desnaturalización de la catalasa que se da gracias a la adición de temperatura.
PRUEBA PARA HIDROLISIS DE ALMIDON:

A este se agregó 2 ml de solución de almidón más 1 ml de reactivo de benedict para saber la prueba
de azucares reductores obteniendo un color verdoso.
PRUEBA PARA HIDROLISIS DE ALMIDON:

A este se agregó 2ml de solución de almidón más 1 ml de saliva sin diluir, en donde se adiciono 1 ml
de reactivo de benedict para saber la prueba de azucares reductores obteniendo un color azul claro.
PRUEBA DE HIDROLISIS DE ALMIDON:
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A este se agregó 2 ml de solución de almidón más 1 gota de lugol obteniendo un color blanco amarillo
en las pruebas para almidones.
PRUEBA DE HIDROLISIS DE ALMIDON:

A este se agregó 2 ml de solución de almidón más 1 ml de saliva sin diluir y 1 gota de lugol obteniendo
un color blanco en la prueba de almidones.
PRUEBA DE HIDROLISIS DE ALMIDON:

A este se agregó 2 ml de solución de almidón más 1 ml de saliva diluida hervida y 1 gota de lugol para
la prueba de almidones dando color amarillo en el fondo, y en la mayor parte blanco.
PRUEBA PARA HIDROLISIS DE ALMIDONES:

A este se agregó 2 ml de solución de almidón más 1 ml de saliva diluida hervida y 1 ml de reactivo de

benedict para la prueba de azucares reductores dando un color azul en la parte inferior y en la
superficie blanco.
INFLUENCIA DE PH EN LA ACTIVIDAD ENZIMATICA:

Tubo #1: El pH en este tubo es muy ácido por lo cual no es el óptimo porque la amilasa se
desnaturaliza porque la saliva no está estimulada.

Tubo#2: este es el pH teórico optimo y en el experimento la prueba también fue optima ya que este es
el pH de la saliva y en este caso fue igual, el tiempo de desaparición del color 1:15 segundos.
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Tubo #3: En este el pH es muy básico y por ende se inactivan los lipolisacaridos que son un lípido más
un azúcar compleja. El tiempo de desaparición del color fue de 6:35 segundos.

CONSULTA:
 ¿Qué SON LIASAS?:
Una liasa es una enzima que cataliza la ruptura de enlaces químicos en compuestos orgánicos
por un mecanismo distinto a la hidrólisis o la oxidación, reacciones
que son realizadas por enzimas específicas llamadas hidrolasas y deshidrogenasas
respectivamente. Resultado del proceso de ruptura se forman frecuentemente nuevos dobles
enlaces o nuevas estructuras en anillo.

 ¿QUE SON LIGASAS?:

Es una enzima capaz de catalizar la unión entre dos moléculas de gran tamaño, dando lugar a
un nuevo enlace químico; generalmente, sucede junto con la hidrólisis de un compuesto de alta
energía, como el ATP, que proporciona energía para que dicha reacción tenga lugar.

EJEMPLOS:
 LIASAS.
Catalizan reacciones de ruptura o soldadura de sustratos:

A-B A+B
Un ejemplo es la acetacetato descarboxilasa, que cataliza la reacción:

ácido acetacético CO2 + acetona

 LIGASAS.
Catalizan la unión de dos sustratos con hidrólisis simultánea de un nucleótido trifosfato
(ATP, GTP, etc.):
A + B + XTP A-B + XDP + Pi

Un ejemplo es la piruvato carboxilasa, que cataliza la reacción:

piruvato + CO2 + oxaloacetato + ADP
ATP + Pi
Profesor: Diego Jaimes

CONCLUSIONES:
-La temperatura es un factor determinante en las reacciones enzimáticas porque acelera o retarda la
acción de las enzimas, lo que se evidencia con la producción de burbujas.
-Para que la catalasa funcione correctamente debe tener un PH neutro y una temperatura ambiente.

FUNDAMENTACION:
1. Describa el efecto de la temperatura en la acción enzimática.
RTA=En general los aumentos de temperatura aceleran las reacciones químicas: por cada
10°c de incremento, la velocidad de reacción se duplica. Las reacciones catalizadas por
enzimas siguen esta ley general. Sin embargo al ser proteínas, a partir de cierta temperatura
se empiezan a desnaturalizar por el calor.
2. ¿A que valores de pH y temperatura es estable la actividad enzimática de la catalasa?
RTA= El valor del PH ideal esta entre los 4 y 5 esto dependiendo del tejido y una temperatura
alrededor de 35,5 dependiendo de las condiciones
3. ¿A que pH teórico es más activa la amilasa? Compare este valor con el obtenido en el
laboratorio.
RTA= El PH óptimo es 7 pero puede estar activa de 4 a 11.
4. Qué diferencia hay entre una coenzima y una apoenzima.
RTA= La coenzima es un factor no proteico que forma parte de la enzima y la apoenzima es
una parte proteica de la etima.
5. ¿La pepsina es una enzima secretada por el estómago?
R: si por el estómago, también por el páncreas y el intestino delgado
6. ¿Qué otros factores además del PH y la temperatura influyen en la actividad de una encima?
R: Concentración de sustrato, concentración de enzima, factores alostericos.
7. ¿Cite 5 enzimas y los sustratos respectivos sobre los que actúan?
R/ ENZIMAS SUSTRATO
Maltasa Maltosa
Lactosa Lactosa
Piruvato cinasa Fosfoenol piruvato
Citrato cintetaso Acetil Co A y Oxalacetato (ATC)
Glumato descarboxlasa
Glumato para formar GABA

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
LINK:http://www.biologiasur.org/index.php/la-celula/base/enzimas
https://www.google.com.co/search?q=ejm+de+reacciones+de+isomerización&oq=ejm+de+reac
ciones+de+isomerización&aqs=chrome..69i57j0l2.27773j0j4&client=ms-android-
samsung&sourceid=chrome-mobile&ie=UTF-8.
https://www.google.com.co/search?client=msandroidsamsung&q=adicción+a+los+dobles+enla
ces+ejemplos&spell=1&sa=X&ved=0ahUKEwiXrt37lMHWAhUHTSYKHeC_C5UQBQgeKAA&biw=
360&bih=560.
https://www.google.com.co/search?q=de.que+depende+la+capacidad+de+las+hormona%3F&o
q=de.que+depende+la+capacidad+de+las+hormona%3F&aqs=chrome..69i57j33l3.24688j0j4&cli
ent=ms-android-samsung&sourceid=chrome-mobile&ie=UTF-8
http://www.ehu.eus/biomoleculas/enzimas/enz13.htm
http://www.ehu.eus/biomoleculas/enzimas/enz13.htm
https://esacademic.com/dic.nsf/eswiki/726257