É uma técnica amplamente utilizada para detecção ou localização de
antígenos em tecidos ou células a partir de uma marcação com anticorpos conjugados a uma molécula fluorescente, de modo que a localização do antígeno se torne visível ao microscópio de fluorescência. Fluorocromo Fluorocromos são substâncias que absorvem luz ultravioleta e emite luz visível, ou seja, fica fluorescente. Existem vários tipos de fluorocromo, porem os mais utilizados para a conjugação com anticorpos são Fluresceína e Rodamina. Imunofluorescência Direta
• É colocado apenas um anticorpo e esse é conjugado ao fluorocromo,
ou seja, o antígeno é detectado diretamente pelo anticorpo primário. Se o Ac é específico para o Ag, ocorre a formação do complexo que é visualizado pela fluorescência. • Utilização da técnica: muito usada para a detecção direta de microrganismos em secreções, na urina, nas fezes, em cortes de tecidos etc. Também bastante utilizada na fenotipagem de células tumorais. Imunofluorescência Indireta A reação da imunofluorescência indireta, ou técnica de dupla camada, é realizada por antígenos fixados em uma lâmina, onde se aplica primeiro um anticorpo específico não fluorescente. E por último coloca-se um anticorpo fluorescente com especificidade marcada contra determinantes antigênicos do primeiro anticorpo utilizado para reagir com o antígeno. Esta técnica apresenta como vantagem à possibilidade de se ter uma fluorescência mais evidente, pelo fato do anticorpo fluorescente se ligar apenas aos anticorpos primários. Utilização da técnica: a imunofluorescência indireta é muito usada para o diagnóstico sorológico de várias doenças infecciosas Métodos Imunológicos
São técnicas utilizadas para a detecção ou quantificação de antígenos ou
anticorpos, tem sido amplamente utilizados devido a rapidez, simplicidade de execução, possibilidade de automação e baixo custo operacional. Podem fornecer informações importantes para o diagnóstico e cuidado clínico de pacientes, sendo de extrema importância no diagnóstico de doenças relacionadas com o envolvimento direto do sistema imune. Os imunoensaios são técnicas para a detecção ou quantificação de antígenos ou anticorpos. Nas últimas décadas os imunoensaios se tornaram a tecnologia padrão em medicina laboratorial. Os métodos imunológicos diretos ou indiretos têm sido amplamente utilizados devido a rapidez, simplicidade de execução, possibilidade de automação e baixo custo operacional. Podem fornecer informações importantes para o diagnóstico e cuidado clínico de pacientes, sendo de extrema importância no diagnóstico de doenças relacionadas com o envolvimento direto do sistema imune.