UNIVERSIDAD DE PAMPLONA

FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS

DPTO DE BIOLOGÍA
PRÁCTICA EXPERIMENTAL
DESARROLLO EMBRIONARIO EN DROSOPHILA

Doc. Mercedes Peñaloza S.

OBJETIVO:
Seguir el desarrollo embrionario de la mosca Drosophila Melanogaster para establecer su
homología con el desarrollo embrionario en vertebrados.

ACTIVIDADES

* Observación y fijación en formol para los montajes de huevecillos y larvas de los tres estadios de
la mosca Drosophila Melanogaster
* Navegar por internet, en las páginas sugeridas y contestar el cuestionario.

MATERIALES Y MÉTODOS
ALUMNOS
- Porta objetos
- Tijeras
- Pincel
- Guantes
- Equipo de disección
- Formol

REACTIVOS:

- Éter
- Solución de Ringer para D.M.
- Colorante Giemsa

MATERIAL BIOLÓGICO

- Cultivo cepa silvestre o mutantes

- Hembras fecundadas
- Huevos con o sin corión
- Frascos con larvas de D.M. primero, segundo y tercer estadio
- Frascos de medio de cultivo

EQUIPOS
- Microscopio
- Estereoscopio
- Computadora
LOS ALUMNOS DEBERÁN TENER EN CUENTA LAS SIGUIENTES INSTRUCCIONES PARA EL
DESARROLLO DE LA PRÁCTICA EXPERIMENTAL

A. PARA LA OBSERVACION DE LOS HUEVOS Y EMBRIONES DE D.M.

1. Anestesiar y colocar una hembra en la platina de vidrio con una gota de la Solución Ringer.
2. Realizar la disección a nivel del abdomen e identificar y extraer el aparato reproductor.
3. Obtener un huevo y observarlo al microscopio. Dibujar e identificar todas sus estructuras
4. Reconocer los ejes corporales, de acuerdo a sus características morfológicas.
5. Colocar hembras en un frasco de medio de cultivo durante 30 minutos o una hora con la
finalidad de que pongan huevos.
6. Con la ayuda de un pincel tomar varios huevos y colocarlos sobre el porta objetos.
7. Determine los ejes anteroposterior y dorso-ventral del huevo.
8. Identifique y diagrame sus estructuras: acrón, telsón , micrópilo y denticulas.
9. Para quitar el corión a los huevos se requiere cortar un pedazo muy pequeño con diurex
(bisturí pequeño) y con cuidado tocar el huevo y halar el corión (consultar que es el corión)
Los huevos que se rompan durante el proceso se eliminan.
10. A los huevos que estén intactos, agregar colorante giemsa.
11. Observar al microscopio de disección y dibujar las observaciones.
12. Realizar este procedimiento cada 15 minutos ( pasos 5-8) durante 3 horas .( 2)
13. Fijar los huevos en formol.

B. PARA LA OBSERVACION DE LAS LARVAS

* De los cultivos de Drosophila con larvas, colocar en el porta objeto larvas de los tres estadios
y observar al microscopio. (Fije en formol).

* Reconozca e identifique los discos imaginales de los ojos, alas, patas y halterio. Diagrame y
describa.

C. PARA LA SECCIÓN DE COMPUTACIÓN.

* Revisar en las siguientes direcciones de Internet del desarrollo embrionario de la Drosophila

Melanogaster

Drosophila information service: www.ou.edu

Fly base: http://flybase.bio.indiana.edu

Fly move: http://move.uni-muenster.de/

The interactive Fly: http:// 77sdb.bio.purdue.edu/fly

Bukley Drosophila Genome Proyect: htt://www.fruitfly.org

NOTA. Todas sus observaciones se deben diagramar y describir.

En caso de no encontrar la página, busque otras opciones

* Hacer un resumen de cada página web, indicando lo más importante

* Entregue el reporte de la práctica y sus resultados rotulados con la fecha

*Con sus compañeros realice una pequeña discusión y saque conclusiones

Cuestionario:

1. ¿Por qué se usa Drosophila en investigación como modelo en el desarrollo embrionario?

2. Dónde se da la fecundación de la mosca D.M?
3. Cuáles son las características morfológicas de la mosca adulta?
4. Qué son los discos imaginales y como están estructurados
5. Identifique en que estadio del desarrollo embrionario de la D.M. se expresan los genes
maternos y cigóticos para el establecimiento de los ejes corporales.