UNIVERSIDADE FEDERAL DE UBERLÂNDIA

Laboratório de Micologia e Proteção de Plantas

Av. Amazonas s/n Bloco 2E – Sala 106 - Umuarama
Fone: 3218-2225 R. 203 CEP 38400-902

Métodos
Introdução

Prof. Dr. Fernando Cezar Juliatti

 Regras Básicas e Normas de Segurança
1. Conhecer a localização das saídas de emergência
emergência;; desinfetar as mãos e
a bancada
2. Conhecer a localização e o funcionamento de extintores de incêndio,
caixas de primeiros socorros, chuveiros e equipamento de proteção
proteção;;

3. Evite trabalhar sozinho no laboratório

laboratório;;

4. Usar sempre jaleco, que deve ser branca, de algodão, de manga

comprida;;
comprida

5. Efetuar o trabalho sempre que possível em pé

pé;;

6. Cabelos longos devem estar amarrados

amarrados;;

7. Não fumar ou comer no laboratório

laboratório;;
 Regras Básicas e Normas de Segurança
8. Utilizar os aparelhos só depois de ter lido e compreendido as
respectivas instruções de manuseamento e segurança
segurança;;

9. Todos os recipientes que contenham produtos devem estar devidamente

rotulados;;
rotulados

10.. Conhecer as propriedades físicas e a toxicidade dos reagentes antes

10
de iniciar uma experiência
experiência;;

11.. Não deixar frascos de reagentes abertos

11 abertos;;

12.. Cuidar da limpeza adequada do material utilizado para não contaminar

12
os reagentes
reagentes;;

13.. Nunca deixar frascos contendo reagentes inflamáveis próximos duma

13
chama;;
chama
 Regras Básicas e Normas de Segurança
14.. Nunca aquecer um recipiente fechado
14 fechado;;

15.. Evitar qualquer contato dos reagentes com a pele

15 pele;;

16.. Usar a exaustores para experiências em que ocorra a liberação de

16
gases ou vapores;
vapores;

17.. Sempre que for necessário diluir um ácido concentrado, devemos

17
adicionar lentamente e sob agitação o ácido sobre a água, nunca o
contrário;;
contrário

18.. No aquecimento de um tubo de ensaio contendo qualquer substância,

18
não voltar a extremidade aberta do tubo para si ou para outra pessoa
próxima;;
próxima

19.. Não atirar qualquer material sólido para dentro de pias ou lavatórios
19 lavatórios;;
 Regras Básicas e Normas de Segurança
20.. Ao testar o odor de um produto químico, desloque os vapores que se
20
desprendem do frasco com as mãos, para sua direção
direção.. Nunca coloque o
frasco sobre o nariz
nariz.. Atenção este teste nem sempre pode ser feito
feito;;

21.. Findo o trabalho experimental, verificar, se as torneiras de água e de

21
gás se encontram fechadas e se os aparelhos elétricos foram
desligados;;
desligados
22.. Em caso de acidente, por mais insignificante que pareça, comunique
22
imediatamente ao professor
professor;;
23.. Ácidos e bases (mesmo diluídos) devem ser manuseados com muito
23
cuidado.. Se tocarem a pele, lave o local demoradamente com água
cuidado
corrente e em seguida com um antídoto
antídoto:: para bases use vinagre ou
suco diluído de limão e para ácidos use solução de bicarbonato de
sódio, NaHCO3(aq).
n Parte 02
Segurança no laboratório:
n Atitudes:

u Usar o senso comum (a maioria dos

acidentes de laboratório começa com algo
simples);

u Estar consciente – conhecer os reagentes

antes de os usar. Ler os rótulos;

u Estar protegido – conhecer as práticas e

equipamentos que podem aumentar a
proteção (máscaras, luvas, etc.).
Segurança no laboratório:
n Regras gerais:

u Nunca COMER, BEBER, FUMAR, aplicar lentes de

contacto ou cosméticos!

u Nunca cheirar soluções ou reagentes

u Nunca pipetar sem proteção do algodão na

pipeta

u Lavar imediatamente a pele após contato com

culturas/químicos
Segurança no laboratório:

É especialmente perigoso
correr ou brincar em ambientes
laboratoriais
 Assepsia: ausência de
microrganismos

 Manutenção das condições de assepsia:

 limpar e desinfetar a bancada de trabalho

 lavar e desinfetar as mãos no início e fim da aula
 esterilizar o material a utilizar
 trabalhar à chama ou na câmara de fluxo laminar
Técnicas de esterilização
 Principais agentes anti-microbianos

 Métodos físicos
 Calor

 Radiações

 Filtros

 Métodos químicos
 Desinfetantes

 Anti-sépticos
Esterilização pelo calor
 Calor seco
 Oxidação e desnaturação das proteínas
 Combustão da matéria orgânica
 Aplicações:
 Materiais resistentes a altas temperaturas ( vidros não
calibrados, etc)
 Equipamento
 Estufas a 160-180ºC (2 horas)
 Equipamento de incineração ou queima direta
 Esterilização pelo calor
 Calor úmido
 Coagulação das proteínas; destruição de células vegetativas e
esporos
 Aplicações:
 Meios de cultura e soluções aquosas
 Materiais pouco resistentes ao calor (plásticos resistentes, etc.)
 Equipamento/técnicas:
 Autoclave (atmosfera de vapor de água sob pressão)
 Pasteurização (aquecimento do produto por um período de
tempo que varia com produto a pasteurizar e a temperatura
utilizada)
 Tindalização (aquecimento a 100ºC durante 30 min. em 3 dias
consecutivos, intercalado com incubação a 35ºC)
Esterilização por filtração
Prescott, Microbiology, 5th edition

n Remoção de microrganismos em membranas filtrantes com

poro nominal inferior às dimensões bacterianas (0,2 µm)

n Aplicações:
u Produtos termo lábeis, voláteis ou sensíveis a altas
pressões (ex: antibióticos e vitaminas)

n Equipamento/técnicas:
u Filtração com funil (grandes volumes)
u Filtração com seringa (pequenos volumes)
u Filtração de ar em câmaras de fluxo laminar
 Esterilização por radiações
 Raios X e :
 Poder ionizante e elevado poder de penetração - para
objetos volumosos
 Raios UV:
 Menor energia, radiação pouco penetrante usada para
esterilização de superfícies
 Ultra-sons (radiação de alta frequência)
 Destruição mecânica de células
Esterilização por agentes químicos

n Agentes bactericidas ou bacteriostáticos (só eliminam as

formas vegetativas e não as formas esporuladas)

u Sabões, sais biliares e fenóis (alteração da tensão

superficial)
u Alcoóis (desnaturação de proteínas e solubilização)
u Cloro (oxidação de compostos celulares)

n Detergentes germicidas (misturas comerciais de vários

agentes bactericidas e bacteriostáticos)
Introdução à
microscopia Prescott, Microbiology, 5th edition

n Microscópio óptico
Ocular
Tub Revólver
o
u instrumento Objectiv
usado para Coluna a
Platina
ampliar
u constituído por Diafragma
uma parte Condensador
mecânica e
Fonte de luz
uma parte Pé
óptica
Parafuso Parafuso
Micrométrico Macrométrico
Microscópio óptico - mecânica
n Pé ou Base – suporta/estabiliza o microscópio
n Braço ou Coluna – peça fixa à base, serve de suporte a outros constituintes do
microscópio.
n Tubo ou Canhão –suporta os sistemas de lentes da extremidade superior
n Platina – peça paralela à base, onde é colocada a preparação a observar, possuindo
no centro um orifício que permite a passagem dos raios luminosos concentrados pelo
condensador.
n Parafuso Macrométrico – engrenagem indispensável para fazer a focagem.
n Parafuso Micrométrico – elemento que permite movimentos de amplitude reduzida
para completar a focagem.
n Revólver – peça giratória adaptada à zona inferior do tubo que suporta as objetivas de
diferentes ampliações (ex: 10x, 40x, 100x)
Microscópio óptico -óptica

n Sistema de Oculares e Sistema de Objetivas – o conjunto de lentes que

permitem a ampliação do objeto (a ampliação dada ao microscópio é
igual ao produto da ampliação da objetiva pela ampliação da ocular)
n Fonte Luminosa
u lâmpada (iluminação artificial),
u espelho que reflita a luz solar (iluminação natural).

n Condensador – conjunto de lentes convergentes que distribui regularmente,

sobre o campo visual do microscópio, a luz emitida pela fonte luminosa.
n Diafragma – regula a intensidade luminosa no campo visual do microscópio
 Utilização do microscópio
n Ligar a lâmpada
n Ajustar distância interpupilar (oculares)
n Colocar a lâmina na platina e focar em objetiva 10x
n Ampliar a imagem, retificar focagem e observar
n Utilizar óleo de imersão (1 gota) apenas para a
objetiva 100x
n Limpar a objetiva com solução apropriada
n Quando terminar observação:
u Regular a luz para o mínimo e desligar a lâmpada
u Voltar sempre para a objetiva de menor
ampliação
u Cobrir o microscópio
Parte 03
Regras Básicas e Normas de Segurança
Muita atenção aos seguintes símbolos
Vidrarias e outros equipamentos de laboratórios
Vidrarias e outros equipamentos de laboratórios
Vidrarias e outros equipamentos de laboratórios
Vidrarias e outros equipamentos de laboratórios
Vidrarias e outros equipamentos de laboratórios
Vidrarias e outros equipamentos de laboratórios
Vidrarias e outros equipamentos de laboratórios
Vidrarias e outros equipamentos de laboratórios
Vidrarias e outros equipamentos de laboratórios
Vidrarias e outros equipamentos de laboratórios
Vidrarias e outros equipamentos de laboratórios
Vidrarias e outros equipamentos de laboratórios
Vidrarias e outros equipamentos de laboratórios
 Obrigado.
n Sucesso para todos e até a
próxima.

Juliatti@ufu.br