PRACTICA Nº 3

Juan Sandoval
Jader de Jesus Benavides

DOCENTE.

Liliana martinez

BIOLOGIA

UNIVERSIDAD DE SUCRE

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

DEPARTAMENTO DE ZOOTECNIA

LABORATORIO DE BIOLOGIA

SINCELEJO – COLOMBIA

13 - MARZO- 2013
INTRODUCCION
Una sustancia es una forma específica de materia. El agua, el yodo el azúcar son
sustancias. Estas se clasifican en dos grandes grupos: los elementos y los
compuestos. Los elementos son las sustancias formadas por el mismo tipo de
átomos. Los compuestos son sustancias formadas por diferentes clases de
átomos.
Existen características que permiten identificar una sustancia, estas son las
propiedades que son: físicas y químicas. Las físicas son aquellas características
específicas de cada elemento, es decir no depende de la manera como se
comporta frente a otro elemento o compuesto químico. Las propiedades químicas
son todas las transformaciones que llevan a que las sustancias cambien su
naturaleza, es decir, que se convierten en otra clase de sustancias.
Los organismos se distinguen de la materia inanimada por estar compuestos de
moléculas orgánicas, que incluyen carbohidratos, grasas, proteínas y ácidos
nucleicos. Estas moléculas son orgánicas porque están compuestas en gran
medida por átomos de carbono. Los átomos de carbono pueden formar una gran
diversidad de moléculas porque pueden enlazarse con hasta cuatro elementos
para formar el esqueleto de las moléculas orgánicas. Además de carbono, las
moléculas orgánicas contienen varios o todos estos elementos: hidrógeno,
oxígeno, nitrógeno, azufre y fósforo.
En biología, el concepto de inorgánica y orgánica es muy importante y vital en
temas como la nutrición de los organismos autótrofos. Estos organismos solo
utilizan sustancias inorgánicas del medio (agua, sales, minerales y dióxido de
carbono) para su nutrición. Las sales minerales y el agua son llamadas
biomoleculas inorgánicas y son moléculas que forman parte de los organismos
vivos pero que no poseen hidrocarburos en su composición molecular.de esto
trata la química de alimento, en el estudio desde el punto de vista químico, de los
procesos e interacciones de los compuestos biológicos (y no biológicos) que se
dan en la cocinan cuando se manipulan los alimentos.
Las sustancias biológicas aparecen en algunos alimentos como las carnes y las
verduras y hortalizas, y en bebidas como la leche o la cerveza, este estudio es
muy familiar al de la bioquímica desde el punto de vista de los ingredientes
principales como los carbohidratos, las proteínas, los lípidos etc.
Además incluye el estudio del agua, las vitaminas, los minerales, las enzimas, los
sabores y el color, se estudia principalmente en el proceso de alimentos y en la
nutrición.
MARCO TEORICO.
Colorimetría
La colorimetría es la ciencia que estudia la medida de los colores y que desarrolla
métodos para la cuantificación del color, es decir la obtención de valores
numéricos del color.
Reacción o prueba de Benedict identifica azúcares reductores (aquellos que
tienen su OH libre del C anomérico), como la lactosa, la glucosa, la maltosa,
y celobiosa. En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul a
Cu+, que precipita de la solución alcalina como Cu2O de color rojo-naranja.
El reactivo de Benedict consta de:

 Sulfato cúprico;
 Citrato de sodio;
 Carbonato Anhidro de Sodio.
 Además se emplea NaOH para alcalinizar el medio.
El fundamento de esta reacción radica en que en un medio alcalino, el ion cúprico
(otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse por efecto del
grupo Aldehído del azúcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se observa
como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso (Cu2O).
El Reactivo de Biuret es aquel que detecta la presencia
de proteínas, péptidos cortos y otros compuestos con dos o más enlaces
peptídicos en sustancias de composición desconocida.
Está hecho de hidróxido potásico (KOH) y sulfato cúprico (CuSO4), junto
con tartrato de sodio y potasio (KNaC4H4O6·4H2O). El reactivo, de color azul,
cambia a violeta en presencia de proteínas, y vira a rosa cuando se combina
con polipéptidos de cadena corta. El hidróxido de potasio no participa en la
reacción, pero proporciona el medio alcalinonecesario para que tenga lugar.
El nitrato de plata es una sal inorgánica. Este compuesto es muy utilizado para
detectar la presencia de cloruro en otras soluciones.
Reactivo de feheling Sirve para demostrar la presencia de glucosa, así como
para detectar derivados de ésta tales como la sacarosa o la fructosa. El licor de
Fehling consiste en dos soluciones acuosas:
Sulfato de cobre cristalizado, 35 g y agua destilad hasta 1.000 mL.
Sal de Seignette o Tartrato mixto de potasio y sodio 150 g, solución de hidróxido
de sodio al 40 %, 3 g y agua hasta 1.000 mL.
Lugol Se utiliza esta disolución como indicador en la prueba del yodo, que sirve
para identificar polisacáridos como los almidones, glucógeno y ciertas dextrinas,
formando un complejo de inclusión termolábil que se caracteriza por presentar
distintos colores según las ramificaciones que presente la molécula. El Lugol no
reacciona con azúcares simples como la glucosa o la fructosa.
La técnica del Sudán III es un método utilizado generalmente para demostrar la
presencia mediante tinción de triglicéridos, aunque también tiñe otros lípidos.
Los colorantes para grasas son más solubles en las propias grasas que en el
medio en el que van disueltos. Así, al bañar la grasa con la solución del colorante,
éste tiende a disolverse en la grasa que se va cargando del colorante. Por regla
general estos colorantes siempre van en solución alcohólica o bien en una mezcla
de alcohol/acetona o alcohol/agua.
Al ser de color rojo, cuando se disuelve tiñe las grasas de color rojo anaranjado.
Xantoproteica es un método que se puede utilizar para determinar la cantidad de
proteína soluble en una solución, empleando ácido nítrico concentrado

Carbohidratos, hidratos de carbono o glúcidos.

Se pueden encontrar casi de manera exclusiva en alimentos de origen vegetal.

Constituyen uno de los tres principales grupos químicos que forman la materia orgánica
junto con las grasas y las proteínas. Los carbohidratos son los compuestos orgánicos más
abundantes de la biosfera y a su vez los más diversos. Normalmente se los encuentra en
las partes estructurales de los vegetales y también en los tejidos animales, como glucosa
o glucógeno. Estos sirven como fuente de energía para todas las actividades celulares
vitales. Los hidratos de carbono simples son los monosacáridos, entre los cuales
podemos mencionar. Los hidratos de carbono complejos son los polisacáridos; formas
complejas de múltiples moléculas. Entre ellos se encuentran la celulosa que forma la
pared y el sostén de los vegetales; el almidón presente en tubérculos como la patata y el
glucógeno en los músculos e hígado de animales.

Lípidos.

Formaciones moleculares que sirven como reserva de energía y son la base de las
estructuras bióticas. Los lípidos, un grupo heterogéneo de sustancias orgánicas que se
encuentran en los organismos vivos, son biomoléculas orgánicas formadas básicamente
por carbono e hidrógeno y generalmente también oxígeno; pero en porcentajes mucho
más bajos. Además pueden contener también fósforo, nitrógeno y azufre. Entre los lípidos
más importantes se hallan los fosfolípidos, componentes mayoritarios de la membrana de
la célula. Los fosfolípidos limitan el paso de agua y compuestos hidrosolubles a través de
la membrana celular, permitiendo así a la célula mantener un reparto desigual de estas
sustancias entre el exterior y el interior.

Son la principal reserva energética del organismo.

Proteínas

Estas son macromoléculas compuestas por carbono, hidrógeno, oxígeno y nitrógeno. Las
mismas están formadas por la unión de varios aminoácidos, unidos mediante enlaces
peptídicos.

Las proteínas constituyen alrededor del 50% del peso seco de los tejidos y no existe
proceso biológico alguno que no dependa de la participación de este tipo de sustancias
OBJETIVO GENERAL

 Comprender la relación existente entre los fenómenos biológicos y las

reacciones químicas que ocurren en los seres vivos.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

 Conocer una técnica analítica simple pero efectiva para la cualificación de

una sustancia.
 Aportar elementos para la comprensión del fundamento de los métodos
colorimétricos.
 Identificar las diferentes clases de carbohidratos.
 Identificar la propiedad reductora de los carbohidratos en cuestión.
 Reconocer componentes orgánicos básicos (carbohidratos, lípidos,
proteínas, etc.) Por medio de métodos sencillos y algunas reacciones
químicas.
 Comprobar la presencia de estos compuestos en productos de origen animal y
vegetal.
METERIALES.

 Tubos de ensayo.
 Beakers de 250 ml.
 Gradilla para tubos de ensayo.
 Mecheros.
 Estufa
 Pinzas.

REACTIVOS.

 Reactivos de benedict.
 Reactivo de biuret (200ml cada uno).
 Solución de glucosa al 10% (100ml).
 Solución de almidón 2%(100ml)
 Nitrato de plata 0.5 (20ml)
 Reactivo de feheling
 Lugol (50ml)
 Sudan III(100ml)
 Acido nítrico concentrado. (20ml)
 Solución de NaCl 0.1 M
 Agua destilada.

BIOLOGICO

 Huevos.
 Leche.
 Aceite de cocina.
 Tomate de árbol.
METODOLOGIA.

1. RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS.

a) Se deposito 2 ml del reactivo de benedict en un tubo de ensayo, se le

agrego 2 ml de solución de glucosa al 10%, se llevo al baño de maria y se
agito constantemente.

b) Se efectuó el mismo procedimiento anterior, pero en vez de glucosa se

agrego agua destilada.

c) En un tubo de ensayo ponga 2 ml de solución de almido añada 2 o 3 gotas

del Lugol agite y observe.

d) Se hizo el mismo procedimiento anterior pero en vez de solución de

almidon se agrego agua destilada y 2 o 3 gotas de Lugol.

2. RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS.

a) Se deposito 2 ml de aceite de cocina en un tubo de ensayo y se agrego 3

gotas de sudan III, y posterior a esto se agito.

b) Efectué el procedimiento anterior, pero en vez de aceite de cocina

adiciones agua destilada. Anote sus observaciones.

3. RECONOCIMIENTO DE CLORUROS.

a) En un tubo de ensayo se deposito 2 ml de NaCl (sal de cocina) y se

agrego 3 gotas de nitrato de plata. (AgNo3) 0.5 M

b) Efectue el procedimiento anterior pero en lugar de usar sal de cocina

emplee agua destilada. Anote sus observaciones.

4. RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS.

a) En un tubo de ensayo se deposito 2 ml de solución de clara de huevo,

luego se adiciono 3 gotas de acido nítrico concentrado

b) En un tubo de ensayo se deposito 2 ml de leche, se le agrego 2 ml del

reactivo de biuret, no fue necesario calentar pues la leche estaba bastante
concentrada.
RESULTADOS.

1. RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS

a) Al agregar el reactivo de benedict (azul) en solución de glucosa al 10% y

calentar la solución en baño de maría esta paso de un color rojo ladrillo a
rojo naranja. Positivo para presencia monosacárido.
b) Al hacer el mismo procedimiento, pero con agua destilada no hubo cambio
de color y fue negativo para presencia de monosacáridos.
c) En un tubo de ensayo se agrego 2 ml de solución de almidon y luego se
añadieron 2 o 3 gotas de Lugol y se observo que tubo un cambio de color
azul intenso que dio positivo para presencia de polisacáridos.

d) Se hizo el mismo procedimiento anterior pero en vez de solución de

almidon se agrego agua destilada y 2 o 3 gotas de Lugol y se observo la
conservación del color dando negativo para polisacáridos.

2. RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS

a) Cuando se vierten 3 gotas de sudan III (rojo intenso) en aceite de cocina, la

mezcla toma un color naranja rojizo.
b) Se realizo el procedimiento anterior, pero en vez de aceite de cocina se le
adiciono agua destilada y no hubo cambios de color dando negativo para el
reconocimiento de lípidos.

3. RECONOCIMIENTO DE CLORUROS

a) Si se introduce nitrato de plata 0.5 M en una solución de sal, la solución

final toma un color blanco lechoso.Ppositivo para presencia de cloruros.
 b) Se realizo el procedimiento anterior pero en vez de usar sal de cocina se
agrego agua destilada y fue negativo ya que no hubo presencia de cloruros.

4. RECONOCIMIENTO DE PRTEINAS

a) Cuando se introdujo acido nítrico concentrado (transparente) en 2 ml de

solución de clara de huevo, (amarilla) y calentar se formo un precipitado de
color blanco y la parte de arriba era amarilla.
b) Al mezclar 2 ml de leche con el reactivo de biuret la solución final tomo un
color violeta. Observar tabla.

COLOR DEL COLOR DEL COLOR DE LA MEZCLA

MUESTRA REACTIVO PRUEBA REACTIVO COMPUESO

Glucosa Benedict positiva azul transparente Rojo naranja

Almidón Lugol positiva azul blanco Azul intenso

Aceite de Sudan III

cocina positiva rojo amarrillo Naranja rojizo
Sal de Nitrato de
cocina plata positiva transparente blanco Blanco
Lechoso
Acido Amarillo
Clara de nítrico positiva transparente Amarilla intenso
huevo

Leche Biuret positiva azul blanca violeta

ANALISIS.

1.

a) El reactivo de Benedict consta de: sulfato de cobre (II), citrato de sodio,

carbonato de sodio anhidro (Na2CO3) y se le añade NaOH para alcalinizar
el medio, al mezclarse este reactivo con la glucosa la solución se torna
roja, el fundamento de esta reacción radica en que en un medio alcalino,
el ion cúprico (otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse por
efecto del grupo Aldehído del azúcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo
ion se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al óxido
cuproso (Cu2O). lo cual indica la presencia de disacáridos.
2Cu (OH) → Cu2O (precipitado rojo ladrillo) + H2O
b)
Lugol o solución de Lugol es una disolución de yodo molecular I2 y yoduro
potásico KI en agua destilada, al mezclarse con el almidón se produce una
reacción es el resultado de la formación de cadenas de poliyoduro a partir
de la reacción del almidón con el yodo. La amilosa, el componente del
almidón de cadena lineal, forma hélices donde se juntan las moléculas de
yodo, formando un color azul oscuro a negro.
Esta coloración se debe a la amilasa que absorbe Yodo en cantidad
aproximadamente igual aun 20% de su peso, formando un complejo violeta,
que es un complejo de inclusión, en el que las moléculas de Yodo se sitúan
en el espacio que queda libre en el centro, al adoptar las largas cadenas de
v,nhb amilasa una conformación en hélice

2.

a) Se trata de un colorante rojo o rojo-amarillento que tiene una alta afinidad

por lípidos, es decir, es que se une a éste tipo de sustancias químicas de
forma no covalente. grasas, triglicéridos y ceras. No hay un enlace químico
como tal entre los lípidos y el Sudán III. Sino una serie de interacciones de
tipo lipofílico (gran solubilidad) (ya que tanto el colorante como la sustancia
a la que se une son de baja polaridad)
Este resultado se debe a que el aceite y las grasas son un grupo de
compuestos orgánicos existentes en la naturaleza que consiste en ésteres
formados por tres moléculas de ácidos grasos y una molécula del alcohol
glicerina. De tal manera que el Sudan III, lo reconoce y lo tiñe de color rojo.
3.

a) Esto se da porque la plata se separa del ion NO3 en la solución al mismo

tiempo cuando la plata entra en contacto con el ion cloro se forma cloruro
de plata, un compuesto que es insoluble.
el nitrato de plata, sirve para detectar al cloro en las soluciones, de manera
cualitativa y cuantitativa.

NO3Ag + ClNa--------- ClAg + NO3Na

El nitrato de plata en solución acuosa reacciona con cloruro de sodio también en

solución acuosa para formar el precipitado de cloruro de plata, que es el que se
observa de color lechoso en el fondo del tubo de ensayo.

a) Esto se da porque el acido nítrico forma compuestos nitrados con los

grupos aromáticos, es decir, aquellas proteínas que contengan tanto
tirosina como fenilamina (aminoácidos.) La reacción xantoproteica es un
método que se puede utilizar para determinar la cantidad de proteína
soluble en una solución, empleando ácido nítrico concentrado. La prueba
da resultado positivo en aquellas proteínas con aminoácidos portadores de
grupos aromáticos, especialmente en presencia de tirosina.

b) La presencia de proteínas en una mezcla se puede determinar mediante la

reacción del Biuret. El reactivo de Biuret contiene CuSO 4 en solución
acuosa alcalina (gracias a la presencia de NaOH o KOH). La reacción se
basa en la formación de un compuesto de color violeta, debido a la
formación de un complejo de coordinación entre los iones Cu 2+ y los pares
de electrones no compartidos del nitrógeno que forma parte de los enlaces
peptídicos.
CONCLUSION.

 A través de este informe pudimos ver como se identifican los tipos de

carbohidratos de diferentes sustancias las cuales son mezcladas con
reactivos químicos que ayudan a identificar estos tipos de glúcidos.
 Se puede concluir que colorimetría es un método que sirve para identificar la
presencia de ciertas sustancias en otras.
 Se pudo reconocer componentes orgánicos básicos como carbohidratos,
lípidos, proteínas, Por medio de métodos de colorimetría usando algunos
reactivos químicos.
BIBLIOGRAFIA.

http://es.wikipedia.org/wiki/Reacci%C3%B3n_de_Benedict

http://www.uam.es/personal_pdi/ciencias/bolarios/BiologiaCCAA/Guiones/Practica1.htm

http://academic.uprm.edu/~jvelezg/labmoleculas.pdf

http://es.wikipedia.org/wiki/Reactivo_de_Fehling
CUES TIONARIO.

1. Defina: glucosuria, proteinuria, fenilcetonuria, albuminuria.

2. ¿Como están constituidos los reactivos de benedict, fehling, biuret?

SOLUCION DEL CUETIONARIO.

1) Se llama glucosuria a la presencia de glucosa en la orina a niveles elevados.

La glucosa se reabsorbe en su totalidad a nivel de las nefronas, las unidades
funcionales del riñón donde se produce la depuración de la sangre. La
glucosuria renal es la consecuencia de un defecto hereditario de reabsorción
de glucosa en el túbulo renal, y viene definida por los siguientes criterios:
glucosuria constante, glucemia normal, utilización normal de hidratos de
carbono y ausencia de otras anomalías tubulares.

La proteinuria es la presencia de proteína en la orina en cuantía superior a

300 mg en la orina de 24 horas, esta puede ser transitoria, permanente,
ortostática, monoclonal o de sobrecarga. La proteinuria en pequeñas
cantidades (30 a 300) suele estar casi siempre a expensas de la albumina
denominándose microalbuminuria, dato que adquiere un especial interés en la
patología diabética.

La fenilcetonuria, también conocida como PKU, es un error congénito del

metabolismo causado por la carencia de la enzima fenilalanina hidroxilasa, lo
que se traduce en la incapacidad de metabolizar el aminoácido tirosina a partir
de fenilalaninaen el hígado. Es una enfermedad congénita con un patrón de
herencia recesivo.
La fenilcetonuria (del inglés phenylketonuria = PKU) es un trastorno del
metabolismo; el cuerpo no metaboliza adecuadamente un aminoácido,
la fenilalanina, por la deficiencia o ausencia de una enzima llamada fenilalanina
hidroxilasa. Como consecuencia, la fenilalanina se acumula y resulta tóxica
para el sistema nervioso central, ocasionando daño cerebral.

Albuminuria es un proceso patológico manifestado por la presencia

de albúmina en la orina.
La albuminuria indica un fallo renal, por fracaso en el filtrado de moléculas
grandes, como es el caso de la albúmina. Se presenta con cierta frecuencia en
pacientes aquejados de diabetes crónica
2) El reactivo benedict está constituido por:
• Sulfato cúprico;
• Citrato de sodio;
• Carbonato Anhidro de Sodio.
• Además se emplea NaOH para alcalinizar el medio.

El reactivo de feheling ó El licor de Fehling consiste en dos soluciones

acuosas:
Sulfato de cobre cristalizado, 35 g y agua destilad hasta 1.000 mL.
Sal de Seignette o Tartrato mixto de potasio y sodio 150 g, solución de
hidróxido de sodio al 40 %, 3 g y agua hasta 1.000 mL.

El reactivo de biuret está hecho de hidróxido potásico (KOH) y sulfato

cúprico (CuSO4), junto con tartrato de sodio y potasio
(KNaC4H4O6•4H2O).

Formula química del biuret