UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

PROGRAMA DE BACTERIOLOGÍA

Código: 504130
Horas semanales: 3
Componente: Practico
Ubicación: III semestre
Número de créditos: 4
Requisitos: R504112 – R504114
Docentes: Cindy Rodiño y Yenit Sierra .

PRACTICA N° 1

DILUCIONES

1. FUNDAMENTO TEORICO

1.1DILUCIONES.

Las diluciones son mezclas homogéneas de 2 o más componentes. La sustancia disuelta se

denomina soluto y está presente generalmente en pequeña cantidad en comparación con la
sustancia donde se disuelve, denominada solvente.

Experimentalmente con frecuencia se usan soluciones concentradas para preparar a partir de ellas
soluciones diluidas. La dilución es la reducción de la concentración de una sustancia en
una disolución.

La dilución consiste en disminuir la cantidad de soluto por unidad de volumen de disolución.

Se logra adicionando más diluyente a la misma cantidad de soluto: se toma una poca porción
de una solución ( alícuota) y después esta misma se introduce en más disolvente.
Cuando la concentración se expresa en una relación volumétrica, la cantidad de soluto contenido
en un volumen determinado de la solución, es el producto del volumen por la concentración.

 Cantidad de soluto en solución=volumen X concentración

Cuando se diluye una solución, el volumen aumenta y la concentración disminuye pero la cantidad
de soluto permanece constante. Por esta razón dos soluciones de concentraciones diferentes, pe
ro que contengan las mismas cantidades de soluto pueden relacionarse así:

 Volumen 1 X concentración 1=volumen 2 Xconcentración 2

 Volumen solución concentrada X su concentración= Volumen solución diluida X su
concentración

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1.2. FACTOR DE DILUCION:

Es la relación entre la concentración de la dilución diluida y la de la solución concentrada. El factor

de dilución es el número total de volúmenes al que se lleva un volumen dado de muestra
original, o parte alícuota. En otros términos, el factor de dilución también corresponde a la
división de la concentración de la muestra original sobre la concentración de la muestra
diluida.

 Factor de dilución=volumen alicuota / volumen final

 Factor de dilución= C2 / C1

La concentración de la solución diluida puede calcularse a partir de la concentración de la solución
concentrada por el factor de dilución.

 C2= factor de dilución X C1

1.3. DILUCIONES SERIADAS

Consiste en la disminución progresiva de una solución inicial stock conocida también como
solución madre. Se lleva a cabo sirviendo una cantidad de soluto en una cantidad de solvente
determinada que dependerá de la relación soluto-solvente requerida, el factor de dilución será
determinada por la cantidad de solvente utilizado.

2. NECESIDAD

Adquirir los conocimientos necesarios para la realización de diluciones en los diferentes ensayos
de laboratorio.

3. OBJETO DE ESTUDIO

Diluciones

4. OBJETIVO DE LA PRÁCTICA

1. Mejorar las habilidades y destrezas en el manejo de equipos de laboratorio.

2. Comprender el fundamento teórico y la realización práctica de diluciones.

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5. COMPETENCIAS

Aplica las normas de bioseguridad dentro del laboratorio.

Conoce el fundamento de los cálculos para la realización de diluciones.

Realiza de forma adecuada los cálculos para la realización de diluciones.

Realiza de forma adecuada el manejo de material, equipos, y procesamiento de muestra para

realizar diluciones.

6. PRELABORATORIO

Leer la guía de laboratorio

7. MATERIALES Y REACTIVOS

 Pipetas automáticas

 Puntas

 Tubos de ensayo

 Agua destilada

 Colorante

8. PROCEDIMIENTO

Realice los siguientes cálculos:

1. Se desea preparar 1000ml de una solución 1 X de buffer TE a partir de una solución stock de
buffer TE 10X, se utilizara como diluyente agua destilada. Una vez realizados los cálculos prepare
los 1000 ml de buffer TE 1X.

2. Se tiene 20ml de una solución 100X de buffer TE. ¿Qué volumen puedo preparar de buffer TE
10X utilizando los 20 ml?

3. ¿Qué dilución debe hacerse a una solución 6 M de Ca (OH) 2 para obtener otra solución 2 M del
mismo compuesto?

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4. Se tiene una muestra de suero y a partir de este se realiza una primera dilución

 Dilución A: se toman 100ul del suero y se mezclan con 1150 ul de PBS

 Dilución B: se toman 25 ul de la solución A y se mezclan con 25 ul de PBS
¿Cuál es la dilución de la solución A y cuál de la solución B?

5. Preparar una dilución seriada a partir de un colorante hasta alcanzar una dilución 1:16. Volumen
2ml.

USO DE LA PIPETA AUTOMATICA

MANEJO DE LA PIPETA AUTOMATICA

1. Técnica de pipeteo para líquidos poco viscosos.

a. Se presiona el botón superior suavemente hasta el primer tope.

b. Se sumerge la punta, en la solución que se necesita pipetear estando seguros que la punta este
bien colocada y que no haya ningún tipo de residuos entre la punta y el cuerpo de la pipeta.

c. Mantenga la pipeta verticalmente mientras toma la solución.

d. Para descartar la solución de la punta presione el botón hasta el segundo tope.

e. Descarte las puntas utilizando el eyector que traen las pipetas.

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2. Técnica de pipeteo para líquidos con alta viscosidad:

a. Presione el botón superior hasta el segundo tope.

b. Sumerja la punta en la solución (2-3 mm) y suelte el botón despacio. La punta tiene que estar bien
llena.

c. Descarte el líquido de la punta presionando suavemente el botón superior hasta el primer tope.

9. POSTLABORATORIO

1. Realice un esquema de las diluciones realizadas en clase.

2. Mencione y explique cinco ejemplos cotidianos en los que se empleen procedimientos de dilución.

3. Dibuje una micropipeta con sus partes.

3. ¿Qué cuidados se deba tener con el manejo de las micropipetas?

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