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DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD
ANTIMICROBIANA IN VITRO DE LOS
EXTRACTOS ETANÓLICO E HIDROALCOHÓLICO
DE LAS SEMILLAS DE Carica papaya L. “PAPAYA”
Presentado por:
Asesores:
Q.F. CHANG CANALES, Artemio
Q.F. KLINAR BARBUZA, Silvia
Q.F. VARGAS PONCES, Hugo
ICA – PERÚ
2007
A Dios y mi ángel por guiarme cuando
lo necesite y cuidarme siempre.
− A los asesores: Q.F. Artemio Chang Canales, Q.F. Silvia Klinar Barbuza, Q.F.
trabajo: Blgo. Cartagena Siguas, Q.F. Rocío Córdova, Blgo. Andrés Herrera.
experiencia investigadora.
ÍNDICE
RESUMEN
SUMARY
INTRODUCCIÓN 1
1. GENERALIDADES 3
1.1.1 Historia 3
1.1.3 Hábitat 6
1.1.4 Descripción 6
1.1.5 Cultivo 11
1.2.1 Definición 24
1.2.3 Antibiograma 24
2. MATERIALES Y MÉTODOS 25
2.1 Materiales 25
2.2 Métodos 29
2.2.2.3 Controles 47
y bacteriostática (CMB) 54
3. RESULTADOS 59
4. DISCUSIÓN 66
CONCLUSIONES 68
RECOMENDACIONES 69
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 70
ANEXOS 77
SUMARY
papaya L, “papaya” seeds. These were obtained through the percolation of ethanolic
and hydroalcoholic (2:3) extracts of dry and fat-free dry seeds, and their
The hydroalcoholic extracts of the dry and fat-free dry seeds displayed
ethanolic extracts of dry and fat-free dry seeds showed activity in presence of
albicans ATCC 10231, Escherichia coli ATCC 25922, Enterococcus faecalis ATCC
confrontados, mientras que los etanólicos de las semillas secas y semillas secas
aureus.
INTRODUCCIÓN
Se sabe que las plantas han sido usadas por muchos cientos de años con una
amplia variedad de propósitos. Así mismo se puede afirmar que presentan una
las semillas, además de su buena acción ya conocida contra los parásitos intestinales.
hidroalcohólico de las semillas de Carica papaya L., para llegar a probar su eficacia
carne de los animales que se cazaban con el objeto de hacerla mas suave y
empresarios industriales.
Reino: Plantae.
División: Magnoliophyta.
Clase: Magnoliopsida.
Orden: Violales.
Familia: Caricaceae.
Género: Carica.
comprendido entre los 22° latitud norte y 32° latitud sur. En condiciones
altura. Es una planta frutal perennifolia, dioica con tallo único raras veces
hermafroditas.
raicillas.
• Flores.- Las flores emergen de las axilas de las hojas, son solitarias,
cm. de largo; tiene una piel delgada, savia lechosa, posee una pulpa
alargados.
El peso varia desde 0.2 a 7.0 Kg.; el color de la pulpa puede ser de
cavidad está casi vacía con las abundantes semillas cubriendo las
paredes.
especialidad gastronómica.
Canadá, Suiza.
rendimiento de papaya.
encontradas entre los numerosos tipos son muy amplias dependiendo del
materia orgánica y con un buen abono; pH 5,5 - 6,7. Se propaga bien con
de la fruta, este puede tenerse por fisuras en el fruto verde, que luego se
del fruto.
licuada con miel o el látex disuelto en agua (una cuchara grande para un
tumores. Por vía oral se usa para tratar esplenomegalia, catarro intestinal
paludismo y dispepsia.
las flores, el jarabe también se usa por vía oral contra afecciones
mismo fin también usan las flores masculinas en infusión (1 taza de flores
carne. Las hojas usadas como substituto del jabón son muy útiles para
remover manchas.
El fruto contiene:
Agua 90%
Azúcares (levulosa, sacarosa, glucosa) 8 - 10%
Proteínas 0,5%
Grasas 0,1%
Vit. A en carotenos activos
2000 - 3000UI
(criptoxantina, violaxantina, licapeno, zeaxantina, fitoeno, etc)
Vit. C 75mg%
Ac. no volátiles (cítrico, málico, acetogluterico)
Vit. B1 (Tiamina) 0.02 - 0.04mg
Aceite 25%
Proteínas 24%
Ac. grasos (oleico, miristico, palmítico, esteárico)
Glucosido (caricina, carposenina)
Mirosina
Derivados de isotiocianato de bencilo (tropaeolina)
Fuente: 2,7,11,12,14,15,17
Las hojas contienen:
Humedad 83.3g
Proteína 5.6g
Grasa 0.4g
Carbohidratos 8 - 11g
Fibra cruda 1g
Ceniza 1.4g
Calcio 0.406g
Hierro 0.0063g
Caroteno 28.9000UI
Ac. Ascórbico 38,6%
Magnesio 0.035g
Ac. fosfórico 0.225g
Carpaína 0,25%
Taninos 0.5 - 0.6%
Pseudocarpaína, isocarpaína, dihidrocarpaína I y II
Glicosidos cianogéneticos
Fuente: 2,7,11,12,14,15,17
más simples que son los aminoácidos los cuales están unidos entre sí por
desarticulada.7
cuerpo protegido para que no sea digerido por jugos digestivos normales,
todo el cuerpo esta recubierto por una sustancia proteica que se llama
proteínas muertas y la quitina; son así como los gusanos desnudos son
antihelmínticas.7
ancylostoma, los trichuris, etc. pero la acción más específica parece ser
sobre los ascarides. Algunos afirman que puede usarse 10g de papaína
después de los 6 años siguiendo media hora después con una dosis de
aceite de ricino.7
bronquios, del intestino y del útero, lo que explicaría la acción del humo
de las hojas sobre los síntomas del asma.7 En la Universidad Nacional San
inyecciones saponósicas.11
urinarias resistentes.11
acetato de tetradecanoilforbol.5
albicans (CL100=138µg/mL).11
de riñón con tiras del fruto, se dejaron durante 48 horas, después que los
concentración de 0.2mg/mL.11
útero.11
piel.35
1.1.10 Referencias Toxicológicas
10mL/Kg.11
1.2.1 Definición
microorganismos.
del microorganismo.
1.2.3 Antibiograma
2.1 Materiales
Material de laboratorio:
- Agitadores
- Alcoholímetro
- Aros
- Balones
- Embudos
- Espátulas
- Fiolas
- Gotero
- Gradillas
- Matraces
- Nueces
- Papel de filtro
- Papel tornasol
- Peras de bromo
- Pipetas
- Pinzas
- Probetas
- Soporte universal
- Tubos de ensayo
- Vaso de precipitación
Reactivos y solventes:
- Ácido clorhídrico
- Agua destilada
- Alcohol amílico
- Alcohol rectificado
- Anhídrido acético
- Cloruro de sodio
- Diclorometano
- Reactivo Dragendorff
- Reactivo Hager
- Hidróxido de sodio
- Limadura de magnesio
- Reactivo Mayer
- Solución de gelatina
Equipos de laboratorio:
- Balanza analítica
- Balanza de humedad
- Baño Maria
- Cocinilla eléctrica
- Equipo de agitación
- Equipo de percolación
- Estufa
- Molino manual
Nacional de Salud.
- Algodón
- Asa de platino
- Baguetas
- Espátulas
- Gradillas
- Matraces
- Papel aluminio
- Papel kraff
- Pabilo
- Pipetas
- Placas petri
- Probeta
- Sacabocado
- Viales
Equipos:
- Autoclave
- Balanza analítica
- Baño María
- Cocina eléctrica
- Estufa
- Horno de esterilización
- Mechero de Bunsen
- Refrigeradora
Reactivos y solventes:
- Agua destilada
80mg/2mL
- EtOH-Agua (3:2)
Medios de cultivo:
2.2 Métodos
Ubicación
geográfica del
distrito de
Juan Guerra,
provincia de
Tarapoto
la humedad de la muestra.
Secado en estufa de las semillas de Carica papaya L.
Droga
Semillas de Carica papaya L.
“papaya”
Recolección (*)
Inicialmente a sombra.
Secado (*)
Luego a 38ºC en estufa.
Molino manual
Fragmentación (*)
desengrasadas.
Droga
Semillas de Carica papaya L.
“papaya”
Recolección (*)
lavar.
durante 48 horas.
Obtención de Fracciones:
constituye la fracción C.
Muestra
seca y molida 20g.
Fracción A
FRACCIÓN A
2 mL de Muestra
A sequedad y disuelto con 2 mL de
agua destilada. Filtrar
Turbidez o precipitado
Coloración intensa
azul, negro o verde
FRACCIÓN B
Coloración roja
FRACCIÓN C
2 mL de Muestra
FRACCIÓN D
0.5 mL de Muestra
A sequedad y disuelto con 1 mL.
diclorometano
2 mL de Muestra
A sequedad y disuelto con 5 mL de etanol
a 50 ºC
+ 2 mL de Agua destilada
+ 2 mL de Alcohol amílico Aparece coloración
Agitación
- Primera Etapa
17 horas.
- Segunda Etapa
siguiente fórmula:
el etanólico.
Extractos secos
Fluxograma 4. Proceso de Lixiviación de semillas secas
Droga
Semillas de Carica papaya L. 100g
“papaya”
Etapas de Lixiviación
Llenado
Estabilización
48 horas.
EtOH y
Maceración
EtOH-Agua
(3:2)
Humectación
4 horas
Lixiviación
propiamente dicha
Obtención
del extracto líquido
Concentración
Droga
Semillas de Carica papaya L. 210g
“papaya”
Etapas de Lixiviación
Llenado
Estabilización
48 horas.
EtOH y
Maceración EtOH-Agua
(3:2)
Humectación
17 horas
Lixiviación
propiamente dicha
Obtención
del extracto líquido
Concentración
Extractos y Controles
porcentaje de inhibición.
a x 100
PIR =
b
Donde:
del extracto.
Cepa del
microorganismo Cultivo microbiano 0.5 Mc Farland
Agregando
extractos
Excavación con
sacabocado
Incubar a 37ºC x 24 h.
Caldo Nutritivo.
no recibió extracto.
Lectura
mínima inhibitoria.
2.2.2.7 Determinación de la Concentración Mínima Bactericida y
Bacteriostática (CMB)
microorganismos.
Bacteriostática (CMB).
Lectura
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10(CN
0.5 mL del
inoculo
Estandarizar
10 1
9 2
1 1
8 3 Incubar a 37ºC x 24 h. 9 2
7 4 8 3
5
6
Siembra en placa con Agar Müeller-Hinton
7 4
6 5
Lectura de resultados
3. RESULTADOS
Estudio Fitoquímico (Cuadros elaborados por los Autores)
Cuadro 1
Cuadro 2
Carica papaya L.
Cuadro 3
Extractos etanólicos
Aspecto: Translúcido
Color: Amarillo oscuro
Olor: Desagradable
Cuadro 5
Extractos hidroalcoholicos
Aspecto: Ligeramente opaco
Color: Marrón claro
Olor: Desagradable
Cuadro 6
CUADRO Nº 8
PIR (%)
EXTRACTOS
EXTRACTOS HIDROALCOHÓLICOS
ETANÓLICOS
Extracto Semillas
Microorganismos Extracto Semillas Extracto
Desengrasadas Extracto
Semillas
Semillas
Desengrasadas
Total 700 mg Total 700 mg
procedió a desengrasarlas con éter de petróleo. Tanto a las muestras secas como a las
(cuadro Nº 7).
se realizó bajo las mismas condiciones para ambos extractos (extracto etanólico y
extracto hidroalcohólico).
mayores para las bacterias se deben a las diferencias estructurales constitutivas entre
microorganismos donde las bacterias presentan pared celular como estructura celular
10231; siendo la parte vital mas periférica la membrana plasmática, así también estas
que no presentan un núcleo verdadero (con envoltura celular) y solo ribosoma como
organela.
CONCLUSIONES
ATCC 25923.
10.
2. Kymet Güven, Sezgin Celik, and Ismet Uysal (2005). Antimicrobial Activity
71.
3. Rangel D., García I., Velasco J., Buitrago D., Velasco E. (2001). Actividad
nítida (Ruiz et Pavon) Pers. Revista de la Facultad de Farmacia Vol. 42, 2001.
4. Tovar Cerpa, Oscar (2001). Plantas Medicinales del valle del Mantaro. Perú.
CONCYTEC. Pág. 7
6. Palacios Vaccaro, Julio (1993). Plantas Medicinales Nativas del Perú II.
246.
8. Agricultura Técnica Vol. 48 Enero – Marzo (1988) Nº 1. Universidad
Fundación para el desarrollo del agro. 1era Edición. Lima Pág. 13 – 85.
13. Alarco de Zadra, Adriana (2000). Perú. El Libro de las Plantas Mágicas.
14. Brack Egg, Antonio (1999). Diccionario Enciclopédico de Plantas Útiles del
Centro de Estudios Regionales Andinos Bartolomé de las casas. Perú. Pág. 106
–107.
77.
15, 139.
19. www.portalagrario.gob.pe.
http://frenteweb.minag.gob.pe/sisagri/index.php/agosto.2006,
http://www.portalagrario.gob.pe/estadistica.shtml/agosto.2006,
http://www.portalagrario.gob.pe/info_agri/infoagricola02.shtml/agosto.2006.
50,181.
26. http://es.wikipedia.org/wiki/Carica_papaya/agosto.2006.
30. Osato JA., Santiago LA., Remo GM, Cuadra MS, Mori A. (1993).
(17): 1383 – 9.
(2005). In vitro effects of four tropical plants on three life-cycle stages of the
activity of medicinal plants from Cameroon. Cent Afr J Med 2001 Jun; 47(6):
155 – 8.
peadiatric bumns using topical papaya. Burns 1999 Nov; 25(7): 636 – 9.
36. Bellido Berrocal, Carmen Rosa; Meza Angulo, Edith del Carmen (2000).
– Lima.
805.
42. Brooks G., Batel J., Ornston L., Jawetz E., Melinick J., Adelberg E.
46. www.atcc.org/agosto.2006
47. Charles Evans, William (1991). Farmcognosia Trease y Evans. 13º Edición.
98.
ANEXO Nº 1
ANEXO Nº 2