Diploma en Ciencias de la Actividad Física

Curso de Bioquímica Energética

“ENZIMAS”

Dra. Nevenka Juretić D.

6 de Mayo del 2010

Temario

1. Características químicas y rol de las enzimas

2. Mecanismos de acción enzimática

3. Cinética enzimática

- Ecuaciones de Michaelis-Menten y Lineweaver-Burk

4. Inhibidores competitivos y no competitivos

5. Regulación de la actividad enzimática

Características químicas y rol de las enzimas
 CATALIZADORES

• Las células poseen compuestos químicos que controlan las

reacciones que ocurren en su interior.

• La sustancia que controlan la velocidad a la que ocurre una

reacción química sin que la célula sufra daño alguno ni se
destruya se conoce como catalizador.

• Las enzimas son proteínas que actúan como catalizadores.

 ENZIMAS

CATALIZADOR BIOLÓGICO

• Especificidad

• Poder catalítico

E+S ES E+P

donde: S : sustrato
E: enzima
ES: complejo enzima - sustrato
P: producto
 ENZIMAS

Sitio activo : lugar en la enzima donde ocurre la catálisis

• Sitio catalítico

• Sitio de unión
E-S

Sitio activo
Formación del complejo enzima - sustrato

Enzima Sustrato Complejo

Formación de producto
 Modelos del complejo Enzima - sustrato

• La llave y la cerradura
(Fisher, 1890)

• Ajuste inducido
(Koshland, 1958)
Algunas enzimas actúan con la ayuda de estructuras no proteicas.
En función de su naturaleza se denominan:

1.- Cofactor.
Cuando se trata de iones
o moléculas inorgánicas.

2.- Coenzima.
Cuando es una molécula orgánica.
 ROL DE LAS ENZIMAS

• Hacen posible las reacciones disminuyendo la cantidad de

energía de activación que se necesita.

• Controlan la velocidad a la que ocurre la reacción.

• Permiten que las reacciones ocurran a temperaturas que no

hagan daño al organismo.
Mecanismos de acción enzimática
Diagrama de la coordenada de reacción de una reacción química

Sustrato (S) Producto (P)

Estado de transición
Energía libre, G

Estado
basal
Estado
basal
Coordenada de reacción
 Energía de activación

Es la barrera energética que debe superase antes que los reaccionantes se

conviertan en productos.

Energía EA = Energía de
activación

Reactantes

Productos

Coordenada de reacción
 Reacción con catalizador y sin catalizador

sin catalizador
con catalizador
Barrera de activación
Energía libre, G
(estado de transición

Reactantes

Productos

Coordenada de reacción
 Características de un catalizador

•Aceleran la velocidad de una reacción

• Una pequeña cantidad es suficiente para acelerar en magnitud importante
• No afectan el equilibrio.

Energía de activación
de la reacción
catalizada es menor

Reactantes

Productos

Coordenada de reacción
Cinética enzimática
 VELOCIDAD DE REACCIÓN (v)

"Es el cambio de la concentración de un

reaccionante o de un producto de la reacción,
por unidad de tiempo (t)".
Para la reacción química A B, se tiene:

v = ∆[B] = [B2] - [B1]

Concentración
P
∆t (t2-t1)

R
v = - ∆[A] = ([A2] - [A1])
∆t (t2-t1)
Tiempo

dónde:
t1 y t2: tiempo 1 y 2, respectivamente
[A] y [B]: concentraciones molares de A y B, respectivamente

Unidades: M/seg o M/min

Las enzimas incrementan la velocidad de una reacción química

Cantidad de producto (B) formado

Con enzima

Reacción:

Sin enzima (sin catalizar)

Tiempo
Cinética enzimática

k1 k2
E+S ES E+P
k-1
Efecto de la concentración de sustrato sobre la velocidad inicial
de una reacción catalizada por una enzima

Velocidad inicial,

Concentración de Sustrato,
 La relación entre la concentración de sustrato y la velocidad
de reacción enzimática se puede expresar de manera cuantitativa

Ecuación de Michaelis – Menten

Dependencia de la velocidad inicial con respecto a la
concentración de sustrato
Si [S]] << Km Si [S]] >> Km

Si [S]] = Km, V0=Vmáx

2
Gráfica de los dobles recíprocos o de Lineweaver - Burk

Pendiente
Ecuación de Lineweaver-Burk
Inhibición enzimática
Inhibición competitiva
Sin inhibidor
Pendiente
Inhibición no competitiva
 Sin inhibidor
Pendiente
 Ejercicio (tarea):

Con los resultados experimentales que se exponen a continuación, obtenidos del

estudio de la cinética del estado estacionario de una enzima que cataliza una etapa del
metabolismo de la glucosa, en ausencia y presencia de un fármaco que actúa como
inhibidor:

Velocidad [(mmol/L)/min)]
[S] (mmol/L) Sin inhibidor Con inhibidor

2,50 3,44 1,96

3,35 4,08 2,34
5,00 5,26 2,94
10,00 6,66 3,92
20,00 8,34 4,76
Calcule y diga:

Vmáx (sin inhibidor) :

Vmáx (con inhibidor) :

KM (sin inhibidor) :

KM (con inhibidor) :

¿Qué tipo de inhibidor es? :

Regulación de la actividad enzimática

a.- Aumento de la cantidad de enzima

b.- Regulación Alostérica

c.- Modificación covalente reversible

a.- Regulación de la actividad enzimática por incremento
en la cantidad de enzima
b.- Regulación alostérica
Sustrato
Modulador positivo

Enzima menos activa

Enzima más activa

Complejo
enzima-sustrato
activo
c.- Regulación de la actividad enzimática
mediante modificación covalente reversible
Contacto:

E-mail: njuretic@med.uchile.cl