Tinción de Papanicolaou

La tinción de Papanicolaou es un examen basado en la coloración de smears* en

general (vaginal, cervical, prostático) o para fluídos corporales (peritoneal, pleural,
gástrico, urinario, espinal,etc)
Colorantes empleados: Existen varias soluciones de Papanicolaous, pero todas son
variantes de los siguientes colorantes
Hematoxilina de Harris (EA50, EA65,EA36)
Naranja G
Eosina
Resultado de las tinciones celulares:
núcleos---------------------------------------en azul
células acidófilas--------------------------rojo a naranja
células basófilas---------------------------verde o azul verdoso
células o fragmentos
de tejido impregnados de sangre----naranja o naranja verdoso
Como prueba para la detección del cáncer cervico-uterino, se toma una muestra de células
del epitelio del cuello uterino y se extienden en una lámina de vidrio que es la que se
colorea con Papanicolaou.

Tinción negativa--------------------------resultados normales

Tinción positiva---------------------------resultados alterados
Una tinción positiva puede ser índice de:
• Inflamación ( por diferentes causas)
• Signos tempranos de cáncer (displasia)
• Signos de cáncer más avanzado que se extiende más allá del cuello
• Cáncer avanzado
La tinción de Papanicolaou es una prueba fiable. Requiere de experiencia en la
interpretación de los resultados, pero en los smears cervicales, el porcentaje de aciertos es
muy elevado. Esta prueba ha ayudado a disminuir drásticamente el número de mujeres que
mueren por causa de cáncer cervical. En nuestro país el Programa de detección de cáncer
cervico-uterino con las pruebas citológicas periódicas ha ayudado extraordinariamente a
reducir esta enfermedad.
Otros métodos computarizados, utilizados en conjunción con el Papanicolaou,
ayudan a la fiabilidad de la prueba, pero aumentan el costo de su utilización.
 Células normales Células cancerosas
En la actualidad la Organización Panamericana de la Salud (OPS) está
proponiedo la utilización de otra prueba, para América Latina, que afirman que es
más segura que el Papanicolaou y menos costosa, se denomina "Tamizaje y
tratamiento" y utiliza la inspección visual con ácido acético, para detectar células
anormales en el cuello del útero y luego suministra tratamiento inmediato con
crioterapia, para los pacientes que tienen células precancerosas. Los estudios
fueron realizados por la Alianza para la Prevención del Cáncer Cervicouterino, del
cúal es miembro la OPS, con apoyo de otras organizaciones.
Qué son los Coilocitos?
Con la tinción de Papanicolaou en los smears y también en los cortes
histologicos con HE aparecen células con determinadas caracteristicas, (célula
grande, con núcleo rechazado a la periferia, de bordes irregulares, citoplasma
claro, con una vacuola central, que generalmente es de glucógeno) que se les
denominó, desde hace tiempo, Coilocitos, cuyo significado se desconocia y que
hoy se sabe están infectadas por papilomavirus en diferentes tipos. Algunos tipos
de ese virus, se saben están relacionados con las lesiones precancerosas de las
mucosas cubiertas por epitelios estratificados planos, como es el caso del cervix.

Kit de tinción PAS

para la detección de aldehído y mucosustancia
Principio
 La tinción PAS (periodic acid-Schiff) es uno de los métodos químicos mâs
empleados en histología.
En la tinción PAS se trata el material con ácido peryódico, que oxida los
1,2-glicoles formándose grupos aldehído. Con el reactivo de Schiff, los aldehídos
reaccionan dando un color rojo luminoso.
Con polisacáridos no substituidos, mucopolisacáridos neutros,
mucoproteínas y glucoproteínas, glucolípidos y fosfolípidos, la tinción PAS da una
reacción de color específica.
Combinando la tinción PAS con azul alcián pueden identificarse además
mucosustancias ácidas (glucosaminoglicanos).

Material
Como material de partida se emplean cortes de tejido fijado en formalina e
incluido en parafina o bien extensiones celulares.
Cortes parafínicos de 3-5 μm de espesor

Reactivos
Componentes en el kit de tinción PAS, Merck art. nro. 1.01646.
Solución 1: Ácido peryódico 0,5 %, acuoso 500 ml
Solución 2: Reactivo de Schiff 500 ml

Preparación
1. Solución de azul alcián al 1%
Se disuelven, revolviendo, 5 g de azul alcián 8 GX Certistain® en 500 ml de
ácido acético al 3%. El valor del pH es aprox. 2,5.
2. Solución de ácido acético al 3%
Mezclar cuidadosamente 485 ml de agua destilada con 15 ml de ácido
acético del 100%.
Técnica
Tinción PAS
Etapa Tiempo
Desparafinar en forma típica los cortes y rehidratar.
Enjuagar en agua destilada.
Ácido peryódico 5 min.
Agua corriente del grifo, fluente 3 min.
Enjuagar en agua destilada.
Reactivo de Schiff 15 min.
Agua corriente del grifo, fluente 3 min.
Enjuagar en agua destilada.
Solución de hematoxilina modificada según Gill III 2 min.
Agua corriente del grifo, fluente 3 min.
Serie creciente de alcoholes, 2 x Neo-Clear® o xileno
Montar con Neo-Mount® o Entellan® Nuevo
Cubrir con Entellan® Nuevo los preparados humedecidos con xileno, o con
Neo-Mount® y cubreobjetos los preparados humedecidos con Neo-Clear®.

Resultado
Núcleos azul
 Polisacáridos, glucógeno, mucopolisacáridos neutros, mucoproteínas y
glucoproteínas, glucolípidos, fosfolípidos, membrana basal, colágeno púrpura

Tinción azul alcián PAS

Etapa Tiempo
Desparafinar en forma típica los cortes y rehidratar.
Solución de azul alcián 5 min.
Agua corriente del grifo, fluente 3 min.
Enjuagar en agua destilada.
Ácido peryódico 10 min.
Agua corriente del grifo, fluente 3 min.
Enjuagar en agua destilada.
Reactivo de Schiff 15 min.
Agua corriente del grifo, fluente 3 min.
Enjuagar en agua destilada.
Solución de hematoxilina modificada según Gill III 20 segundos
Agua corriente del grifo, fluente 3 min.
Serie creciente de alcoholes, 2 x Neo-Clear® o xileno
Montar con Neo-Mount® o Entellan® Nuevo
Cubrir con Entellan® Nuevo los preparados humedecidos con xileno, o con
Neo-Mount® y cubreobjetos los preparados humedecidos con Neo-Clear®.

Resultado
Núcleos azul
Mucosustancias ácidas azul claro
Polisacáridos, mucopolisacáridos neutros púrpura

Nota técnica
El microscopio usado debería corresponder a los requisitos de un
laboratorio de diagnóstico médico.
Seguir las indicaciones de empleo del fijador.
Deben seguirse las indicaciones de empleo del histoprocesamiento y las
instrucciones de empleo del fabricante del aparato y del software.
Si se utiliza un aparato automático de tinción, deben tenerse en cuenta las
instrucciones de empleo del fabricante del aparato y del software.

Preparación de las muestras

Todas las muestras deben tratarse de acuerdo con el estado de la
tecnología.
Todas las muestras deben estar rotuladas inequívocamente.
Deben usarse instrumentos adecuados para la toma de muestras y en la
preparación, y deben seguirse las instrucciones del fabricante para la aplicación/el
empleo.

Diagnóstico
Los diagnósticos deberán ser establecidos solamente por personas
autorizadas y cualificadas.
Deberán emplearse terminologías vigentes.
 Deberán elegirse y realizarse ensayos ulteriores según métodos
reconocidos.

Almacenamiento
El kit de tinción debe almacenarse entre +15°C y +25°C
Las soluciones pueden usarse hasta la fecha de caducidad indicada.

Estabilidad
Después de abrir el frasco por primera vez, el contenido almacenado entre
+15°C y +25°C es utilizable hasta la fecha de caducidad indicada.
Los frascos deben mantenerse siempre bien cerrados.

Notas sobre el empleo

Para evitar errores, la tinción debería ser realizada por personal
especializado.
Solamente para uso profesional.
Deben cumplirse las directivas nacionales sobre seguridad en el trabajo y
aseguramiento de la calidad.
Deben emplearse microscopios equipados de acuerdo con el estándar.

Protección contra infecciones

Debe observarse a toda costa una protección eficaz contra infecciones de
acuerdo con las directivas de laboratorio.

Indicaciones para la eliminación de residuos

Las soluciones usadas y las soluciones caducadas deben eliminarse como
desechos especiales, debiéndose cumplir las directivas locales de eliminación de
residuos.
Merck, además de aceptar la devolución de productos usados o caducados
a través del servicio de retrologística, ofrece también ayuda técnica para
soluciones locales de eliminación de residuos.

Tricromico de Masson
Es una técnica para la coloración de fibras colágenas y elásticas. Se observan tres
colores distintos; tejido conjuntivo de verde, tejido muscular de verde pardo, eritrocitos de
rojizo, núcleos azul negro y citoplasma y fibras musculares rosa.
1º-Desparafinado.
Estufa durante 30 min. a 60º.
7º- Ácido fosfomolíbdico 5 min.
Sumergimos en xilol durante 10 o 15
min.
2º- Hidratación.
Alcohol absoluto-5min.
8º- Ácido fosfomolíbdico 5 min.
Alcohol 96º-5min.
Alcohol 70º-5min.
3º- Lavar en H2O destilada. 9º- Verde luz 5-7 min.
4º- Hematoxilina de Weigert 5 10º-Deshidratar.
 Alcohol de 70º
min. Alcohol de 96º.
Xilol.
5º- Lavar con agua corriente 10
11º- Montaje.
min.
6º- Fucsina de Ponceau 5 min.

El tricrómico de Masson, al igual que otros colorantes tricrómicos, es una tinción

especial que permite visualizar claramente las fibras de colágeno tipo I que forman fibras
gruesas o haces, diseñados para dar resistencia; también evidencia, aunque en menor
intensidad, las fibras reticulares. Se emplean tres colorantes para diferenciar el núcleo
celular, el citoplasma y las fibras de colágeno.
Contenido
[ocultar]
1 Fundamento
2 Tejido control y
diana
3 Reactivos
4 Procedimiento
4.1 Análisis de
resultados
4.2 Variantes
5 Véase también
6 Bibliografía
7 Enlaces externos
[editar] Fundamento
Primeramente, se tiñen las secciones con un tinte ácido tal como escarlata de
Biebrich. Todos los elementos acidófilos del tejido tales como el citoplasma, el músculo
y el colágeno se unirán a los tintes ácidos. Las secciones entonces se tratan con ácido
fosfotúngstico y/o fosfomolíbdico. Ya que el citoplasma es mucho menos permeable que
el colágeno, los ácidos fosfotúngsticos y fosfomolíbdicos permiten que la escarlata de
Biebrich difunda del colágeno pero no del citoplasma. Los ácidos fosfotúngsticos y
fosfomolíbdicos tienen numerosos grupos ácidos que probablemente actúen como medio de
unión entre el colágeno y el azul de la anilina, que es el tinte del colágeno. Probablemente,
el pH de la solución fosfotúngstico/fosfomolíbdico también aumente la coloración y ayude
al colágeno en la difusión o el retiro de los colorantes.
[editar] Tejido control y diana
Cualquier tejido con componente conjuntivo, en especial con contenido en fibras
colágenas, puede servir como control o ser un tejido diana. Cualquier fijador es válido, si
bien es de elección la solución de Bouin. El grosor de corte óptimo de las muestras es de
entre 4 y 6 micras.
[editar] Reactivos
Solución de hematoxilina férrica de Weigert.
Solución de escarlata de Biebrich – fucsina ácida:
90 cc de escarlata de Biebrich al 1% en agua destilada.
9 cc de fucsina ácida al 1% en solución acuosa.
1 cc de ácido acético glacial.
Solución acuosa de ácido fosfomolíbdico (utilizar ácido fosfotúngstico en la
misma proporción, si se va a teñir con verde luz):
 5 g de ácido fosfomolíbdico.
200 cc de agua destilada.
Solución de azul de anilina:
2,5 g de azul de anilina.
2 cc de ácido acético glacial.
98 cc de agua destilada.
Solución de verde luz al 2% (alternativa al azul):
2 g de verde luz SF amarillento.
99 cc de agua destilada.
1 cc de ácido acético glacial.
Solución diferenciadora: solución acuosa de ácido acético glacial al 1%.
[editar] Procedimiento
Desparafinar e hidratar hasta el agua destilada de manera habitual.
En material fijado en soluciones de formaldehído o alcohólicas se recomienda
hacer un mordentaje previo con líquido de Bouin durante 1 hora a 56-60 ºC o toda la noche
a temperatura ambiente.
Enfriar y lavar en agua destilada hasta que desaparezca el color amarillo.
Teñir con hematoxilina férrica durante 10 minutos. Lavar en agua corriente durante
10 minutos.
Lavar en agua destilada.
Teñir con la solución de escarlata-fucsina ácida durante 2-5 minutos.
Lavar en agua destilada.
Tratar con la solución de ácido fosfomolíbdico-fosfotúngstico durante 10-15
minutos si se va a colorear con la solución de azul de anilina, o en la solución acuosa de
ácido fosfotúngstico al 5% durante 15 minutos si se desea teñir con verde luz.
Teñir con solución de azul de anilina 15 minutos o con solución de verde luz 5
minutos.
Lavar en agua destilada.
Diferenciar en la solución de ácido acético al 1% durante 3-5 minutos.
Deshidratar, aclarar y montar.
[editar] Análisis de resultados
Fibras de colágeno = Azul.
Por tanto, el tejido conjuntivo se teñirá de dicho color.
Estructuras oxidadas + Citoplasma = Rojo.
Se teñirán de rojo la queratina, los glóbulos rojos y el tejido muscular.
Núcleo celular = Lila, marrón.
[editar] Variantes
La técnica presenta multitud de variantes, pero las principales modificaciones hacen
referencia al uso de un diferenciador después de la hematoxilina (por ejemplo, ácido
pícrico), el tiempo de las soluciones, la temperatura, etc.

Definición de Tinción de mallory

 Una técnica para el estudio del tejido conjuntico. Los cortes se tiñen con fucsina
ácida,solución de azul-naranja G de anilina y ácido fosfotungstico. Las fibras de colágeno
aparecen en azul, la fibroglia, neuroglia y fibras musculares aparecen en rojo y las fibrillas
de elastina en naranja. También llamada tinción tricrómica de Mallory
microfotografía

Ciclo de Krebs

Esquema didáctico del ciclo del ácido cítrico.

El ciclo de Krebs (también llamado ciclo del ácido cítrico o ciclo de los
ácidos tricarboxílicos) es una ruta metabólica, es decir, una sucesión de
reacciones químicas, que forma parte de la respiración celular en todas las células
aeróbicas.En células eucariontas, se realiza en la mitocondria.En procariotas,el
ciclo de Krebs se realiza en el citoplasma, específicamente en el citosol.
En organismos aeróbicos, el ciclo de Krebs es parte de la vía catabólica que
realiza la oxidación de glúcidos, ácidos grasos y aminoácidos hasta producir CO2,
liberando energía en forma utilizable (poder reductor y GTP).
El metabolismo oxidativo de glúcidos, grasas y proteínas frecuentemente se
divide en tres etapas, de las cuales, el ciclo de Krebs supone la tercera. En la
primera etapa, los carbonos de estas macromoléculas dan lugar a moléculas de
acetil-CoA de dos carbonos, e incluye las vías catabólicas de aminoácidos (p. ej.
desaminación oxidativa), la beta oxidación de ácidos grasos y la glucólisis. La
tercera etapa es la fosforilación oxidativa, en la cual el poder reductor (NADH y
FADH2) generado se emplea para la síntesis de ATP según la teoría del
acomplamiento quimiosmótico.
El ciclo de Krebs también proporciona precursores para muchas
biomoléculas, como ciertos aminoácidos. Por ello se considera una vía anfibólica,
es decir, catabólica y anabólica al mismo tiempo.
 Contenido[editar] Historia
El ciclo Krebs recibe su nombre en honor a su descubridor Sir Hans Adolf
Krebs, quien propuso los elementos clave del consumo de O2, en cantidad
desproporcionada respecto a las cantidades añadidas. En segundo lugar,
empleando malonato (inhibidor de la succinato deshidrogenasa), lograba bloquear
la oxidación del piruvato, lo que indicaba su participación en la vía. Además,
observó que las células tratadas con malonato acumulaban citrato, succinato y α-
cetoglutarato, lo cual sugería que citrato y α-cetoglutarato eran precursores del
succinato. En tercer lugar, la administración al tejido de piruvato y oxaloacetato
provocaba la acumulación de citrato en el músculo, lo que indicaba que son
precursores del citrato. Con base en estas observaciones experimentales Hans
Krebs propuso una ruta cíclica y su secuencia de reacciones. Este esquema
inicial, con ciertas modificaciones, dio lugar al ciclo de Krebs tal y como hoy lo
conocemos.

[editar] Reacciones del ciclo de Krebs

El ciclo de Krebs tiene lugar en la matriz mitocondrial en eucariota
 El acetil-CoA (Acetil Coenzima A) es el principal precursor del ciclo. El ácido
cítrico (6 carbonos) o citrato se regenera en cada ciclo por condensación de un
acetil-CoA (2 carbonos) con una molécula de oxaloacetato (4 carbonos). El citrato
produce en cada ciclo una molécula de oxaloacetato y dos CO2, por lo que el
balance neto del ciclo es:
Acetil-CoA + 3 NAD+ + FAD + GDP + Pi + 2 H2O → CoA-SH + 3 (NADH + H+) +
FADH2 + GTP + 2 CO2
Los dos carbonos del Acetil-CoA son oxidados a CO2, y la energía que
estaba acumulada es liberada en forma de energía química: GTP y poder reductor
(electrones de alto potencial): NADH y FADH2. NADH y FADH2 son coenzimas
(moléculas que se unen a enzimas) capaces de acumular la energía en forma de
poder reductor para su conversión en energía química en la fosforilación oxidativa.
El FADH2 de la succinato deshidrogenasa, al no poder desprenderse de la
enzima, debe oxidarse nuevamente in situ. El FADH2 cede sus dos hidrógenos a la
ubiquinona (coenzima Q), que se reduce a ubiquinol (QH2) y abandona la enzima.
Las reacciones son:
 Reactivos/ Productos/
Molécula Enzima Tipo de reacción
Coenzimas Coenzima
I.1. Aconitasa Deshidratación H2O
II.2. Aconitasa Hidratación H2O
3. Isocitrato
III. Oxidación NAD+ NADH + H+
deshidrogenasa
4. Isocitrato
IV. Descarboxilación
deshidrogenasa
5. α-cetoglutarato Descarboxilación NAD+ + NADH + H+
V. α-
deshidrogenasa oxidativa CoA-SH + CO2
6. Succinil-CoA GDP GTP +
VI. Hidrólisis
sintetasa + Pi CoA-SH
7. Succinato
VII. Oxidación FAD FADH2
deshidrogenasa
VIII.
8. Fumarato Hidratasa Adición (H2O) H2O
9. Malato
IX. Oxidación NAD+ NADH + H+
deshidrogenasa
CondX. Oxaloacetato
ensa
ción
10. Citrato
sintasa
NOTA: El cis-aconitato es un intermedio de reacción muy inestable que
rápidamente se transforma en citrato, antes de comenzar la tercera reacción.

[editar] Visión simplificada y rendimiento del proceso

El paso final es la oxidación del ciclo de Krebs, produciendo un
oxaloacetato y dos CO2.
El acetil-CoA reacciona con una molécula de oxaloacetato (4 carbonos)
para formar citrato (6 carbonos), mediante una reacción de condensación.
A través de una serie de reacciones, el citrato se convierte de nuevo en
oxaloacetato.
Durante estas reacciones, se substraen 2 átomos de carbono del citrato
(6C) para dar oxalacetato (4C); dichos átomos de carbono se liberan en forma de
CO2
El ciclo consume netamente 1 acetil-CoA y produce 2 CO2. También
consume 3 NAD+ y 1 FAD, produciendo 3 NADH + 3 H+ y 1 FADH2.
El rendimiento de un ciclo es (por cada molécula de piruvato): 1 ATP, 3
NADH +3H+, 1 FADH2, 2CO2.
Cada NADH, cuando se oxide en la cadena respiratoria, originará 2,5
moléculas de ATP (3 x 2,5 = 7,5), mientras que el FADH2 dará lugar a 1,5 ATP.
Por tanto, 7,5 + 1,5 + 1 GTP = 10 ATP por cada acetil-CoA que ingresa en el ciclo
de Krebs.
Cada molécula de glucosa produce (vía glucólisis) dos moléculas de
piruvato, que a su vez producen dos acetil-CoA, por lo que por cada molécula de
glucosa en el ciclo de Krebs se produce: 4CO2, 2 GTP, 6 NADH + 6H + , 2 FADH2;
total 32 ATP.
[editar] Regulación
Muchas de las enzimas del ciclo de Krebs son reguladas por
retroalimentación negativa, por unión alostérica del ATP, que es un producto de la
vía y un indicador del nivel energético de la célula. Entre estas enzimas, se incluye
el complejo de la piruvato deshidrogenasa que sintetiza el acetil-CoA necesario
para la primera reacción del ciclo a partir de piruvato, procedente de la glucólisis o
del catabolismo de aminoácidos. También las enzimas citrato sintasa, isocitrato
deshidrogenasa y α-cetoglutarato deshidrogenasa, que catalizan las tres primeras
reacciones del ciclo de Krebs, son inhibidas por altas concentraciones de ATP.
Esta regulación frena este ciclo degradativo cuando el nivel energético de la célula
es bueno.
Algunas enzimas son también reguladas negativamente cuando el nivel de
poder reductor de la célula es elevado. El mecanismo que se realiza es una
inhibición competitiva por producto (por NADH) de las enzimas que emplean NAD+
como sustrato. Así se regulan, entre otros, los complejos piruvato deshidrogenasa
y citrato sintasa.
[editar] Principales vías que convergen en el ciclo de Krebs
La mayoría de las vías catabólicas convergen en el ciclo de Krebs, como
muestra el diagrama. Las reacciones que forman intermediarios del ciclo se
conocen como reacciones anapleróticas.
El ciclo de Krebs constituye la segunda etapa del catabolismo de
carbohidratos. La glucólisis rompe la glucosa (6 carbonos) generando dos
moléculas de piruvato (3 carbonos). En eucariotas, el piruvato se desplaza al
interior de la mitocondria (gracias a un transportador específico de membrana
interna). En la matriz mitocondrial, produce acetil-CoA que entra en el ciclo de
Krebs.
En el catabolismo de proteínas, los enlaces peptídicos de las proteínas son
degradados por acción de enzimas proteasas en el tubo digestivo liberando sus
constituyentes aminoacídicos. Estos aminoácidos penetran en las células, donde
pueden ser empleados para la síntesis de proteínas o ser degradados para
producir energía en el ciclo de Krebs. Para su entrada al ciclo deben eliminarse
sus grupos amino (terminales y laterales) por acción de enzimas
aminotransferasas y desaminasas, principalmente.
En el catabolismo de lípidos, los triglicéridos son hidrolizados liberando
ácidos grasos y glicerol. En el hígado, el glicerol puede ser convertido en glucosa
vía dihidroxiacetona fosfato y gliceraldehído-3-fosfato, por la gluconeogénesis
(ruta anabólica). En muy diversos tejidos, especialmente en músculo cardíaco, los
ácidos grasos son degradados en la matriz mitocondrial mediante sucesivos ciclos
de beta oxidación que liberan unidades de acetil-CoA, que pueden incorporarse al
ciclo de Krebs. En ocasiones, el ciclo de Krebs puede rendir propionil-CoA (3
carbonos), que puede emplearse para la síntesis de glucosa en la
gluconeogénesis hepática.
El ciclo de Krebs siempre es seguido por la fosforilación oxidativa. Este
proceso extrae la energía en forma de electrones de alto potencial de las
moléculas (Cofactores reducidos) que son el NADH y FADH2, regenerando NAD+ y
FAD, gracias a lo cual el ciclo de Krebs puede continuar. Los electrones son
transferidos a moléculas de O2, rindiendo H2O. Pero esta transferencia se realiza a
través de una cadena transportadora de electrones capaz de aprovechar la
energía potencial de los electrones para bombear protones al espacio
intermembrana de la mitocondria. Esto genera un gradiente electroquímico de H+,
que es utilizado para la síntesis de ATP mediante la enzima ATP sintetasa. De
este modo, el ciclo de Krebs no utiliza directamente O2, pero lo requiere al estar
acoplado a la fosforilación oxidativa.
Por cada molécula de glucosa, la energía obtenida mediante el
metabolismo oxidativo, es decir, glucólisis seguida del ciclo de Krebs, equivale a
30/32 moléculas de ATP dependiendo del tipo de lanzadera para introducir el
poder reductor dentro de la mitocondria, si es la lanzadera de malato-aspartato
son 32 y si es la de glicerol 3 fosfato, son 30.

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1 Historia
2 Reacciones del ciclo de Krebs
2.1 Visión simplificada y rendimiento del proceso
3 Regulación
4 Principales vías que convergen en el ciclo de Krebs
5 Véase también
6 Enlaces externos