El nucleoide bacteriano El nucleo interfásico

El genoma bacteriano incluye un cromosoma circular Cromatina

y moléculas pequeñas circulares (plásmidos) complejo compuesto por ADN y proteínas

No existe núcleo definido Eucromatina zonas menos condensadas. Nivel de

condensación varía a través del ciclo celular.
ADN en “región nucleoide” Material genético transcripcionalmente activo

Heterocromatina zonas más condensadas, cambia

poco el grado de condensación a través del ciclo
celular. Material genético transcripcionalmente
inactivo. Dos clases de Heterocromatina:
Constitutiva (no se expresa nunca, en centrómeros y
telómeros) y Facultativa (Cromosomas enteros que
son inactivados en una línea celular)

Varios dominios de 40-80 Kb superenrrollados Toda la cromatina se condensa previamente a la

asociado a ARN y proteínas división celular

1 2

El ciclo celular
El núcleo eucariota
Durante la división se visualizan
10,000 nm
cromosomas individuales

Los cromosomas metafásicos son

El genoma nuclear humano comprende la forma más condensada de la
46 moléculas de ADN lineales cromatina

El largo sumado de este ADN es mas de

1.5 metros

El diámetro del núcleo es aprox. 10 nm

Los cromosomas son herramientas de

segregación del material hereditario

Cuáles son los pasos de compactación?

3 4

La cromatina: microscopía La cromatina: bioquímica

A partir de núcleos aislados se puede aislarse cromatina

Al microscopio electrónico se observan fibras de 30 nm y collar de cuentas de 11 nm Análisis bioquímico

A baja concentración
salina. Cantidades similares de ADN
Collar de cuentas de 11 nm y proteínas
de diámetro.
Delgado filamento que Digestión de ADN con
conecta estructuras
semejantes a perlas nucleasas:
denominadas nucleosomas

repetidos de 160-200pb
A concentraciones salinas
mas altas
Cromatina como un zigzag Proteínas básicas –
de nucleosomas. HISTONAS
Fibra de 30 nm de ancho,
Solenoide

5 6

1

Primer nivel de compactación
7 8
El octámero de histonas
Las histonas H2A y H2B forman un dímero
Dos H3 y dos H4 forman un tetrámero
Dos dímeros H2A-H2B y un tetrámero H3-H4
forman un octámero con forma de disco
aplanado
9 10
Segundo nivel de compactación
11
Las histonas H2A, H2B, H3 y H4 son las encargadas del primer nivel
de empaquetamiento (fibra de 11nm)
• Proteínas básicas pequeñas
• Altamente conservadas
• Centro globular y colas ricas en Lys y Arg
• Sitios de acetilación de Lys en colas N terminales (+)
• Sitios de fosforilación en Ser en colas de H1
El nucleosoma
Unidad repetitiva básica fundamental de
la estructura de la cromatina.
Proteínas encargadas: Histonas
Forman un núcleo o core. El ADN se
enrolla su alrededor (aproximadamente
146 pb en 1.75 vueltas de doble hélice
de 11 nm de ancho).
El núcleo es un octámero que contiene
dos dímeros H2A, H2B, y un tetrámero
de H3 y H4
La histona H1 son las encargadas de empaquetar el ADN
en la fibra de 30nm (Solenoide)
• No forma parte del
octámero
•Organiza el ADN a la
entrada y salida del
octámero
12
2
 El solenoide Correlación estructura función
•La modificación de histonas es VITAL en la expresión génica
•La acetilación y desacetilación de histonas es cíclica

• Colas cargadas + • Colas acetiladas

Se unen al ADN de NO se unen al ADN
nucleosomes adyacentes
• Bajo nivel
• Alto nivel de histona H1 de histona H1

Hélice nucleosomal
NO es posible la transcripción Existe transcripción génica
6 nucleosomas por vuelta

Fibra de 30 nm Cuentas 10 nm

13 14

Proteínas no histonas son las encargadas de formar

los bucles de cromatina

Eliminación de histonas
(Tratamiento con detergentes leves o altas
concentraciones salinas)
DNA loops
Matriz nuclear proteica y bucles de ADN
unidos a la matriz

Matriz nuclear
+ 2M NaCl

histonas
Tercer nivel de compactación

15 16

Bucles o loops de cromatina

El andamiaje (scaffold)
Igual tratamiento en cromosomas metafásicos revela un esqueleto proteico del Existen regiones de ADN que se unen al scaffold
cromosoma (scaffold) del que salen bucles de ADN de 30 a 100 Kb SARs (scaffold attachment regions)
MARs (matrix attachment regions)
La matriz nuclear proteica es el scaffold durante la interfase SARs=MARs

Loops of 30 – 90 kb

17 18

3
 Cada dominio se transcribe
independientemente

Nivel superior de compactación

Figura - se muestra la cromatina empaquetada en una serie de dominios de loops de cromatina, cada
uno conteniendo de 20.000 a 100.000 pares de nucleótidos de ADN condensado en la fibra de 30 nm.
Los loops que debe ser transcriptos, pueden descondensarse individualmente expandiendo la fibra de 30
nm contenida en loops de cromatina para que su ADN sea accesible a las proteínas necesarias para la
replicación o transcripción. Esta descondensación es dirigida por enzimas que directamente modifican la
estructura de la cromatina, como las ARN polimerasas que actúan en el desenrollamiento del ADN. La
fibra de 30 nm se une al esqueleto cromosómico (scaffold) debido a la presencia de ADN
topoisomerasas en la base de los loops de cromatina.

19 20

El cromosoma metafásico
Forma de máxima compactación de la cromatina
Dominios condensados
Unidad estructural segregacional de la
Los bucles de ADN fijados al scaffold se pliegan formando una superhélice información hereditaria
Centrómero
radial loop Constricción primaria
chrosomosome model Sitio de unión de
proteínas que forman
cinetocoro
Brazos
Porciones del
cromosoma entre el
Cromosoma mitótico

centrómero y el
telómero
10 μm

Constricción secundaria
Región organizadora
nucleolar con genes
ribosomales
Telómeros
1μm cromátide Regiones terminales de los
cromátide cromosomas
21 22

Citogenética: técnicas de estudio de los cromosomas

Cariotipo Humano 46, XY (convencional)
La CITOGENETICA analiza la cantidad y
morfología de los cromosomas

Los cromosomas se pueden describir

en base a la posición del centromero.
(Metacéntricos, submetacéntricos,
acrocéntricos y telocéntricos).

‰Cariotipo ordenamiento de los

cromosomas segun su tamaño y la
posicion del centrómero.

23 24

4
 Bandeo cromosómico Aberraciones cromosómicas
Tratamiento desnaturalizante o enzimático del cromosoma y posterior
tinción. Mediante el cariotipado se pueden analizar anomalías numéricas y
Cada cromosoma revela un patrón específico de bandas claras y oscuras estructurales, cosa que sería muy difícil de observar mediante genética
(bandeo G) mendeliana.

Aberraciones numéricas – Alteración en el número de copia de

algún cromosoma

Aberraciones estructurales – Alteración en la constitución interna de

cada cromosoma

25 26

Idiograma
Un idiograma es la representación esquemática del tamaño, forma y patrón de
Técnicas de bandeo cromosómico
bandas de todo el complemento cromosómico, los cromosomas se sitúan alineados Revelan diferencias estructurales en la cromatina que constituye cada banda
por el centrómero, y con el brazo largo siempre hacia abajo
Tratamiento desnaturalizante o enzimático y tinción
Bandas oscuras y claras (1-10 Mb)

•Bandeo G
•tratamiento con tripsina
Bandas claras zonas activas
replicación temprana
Bandas oscuras zonas inactivas
replicación tardía
•Bandeo R
•patrón opuesto a Bandeo G

•Bandeo C
•heterocromatina constitutiva
•pericentromérica

27 28

Cariotipo Humano: Bandeo G

Cariotipo humano
Fórmula cromosómica 46, XX Fórmula cromosómica 46, XY

29 30

5
 Cariotipo humano: Bandeo G
Cariotipo humano: Bandeo G
Fórmula cromosómica: 47, XY, +21
Fórmula cromosómica: 47, XX, +18

31 32

Cariotipo humano: Bandeo G Cariotipo humano: Bandeo G

Fórmula cromosómica: 45, X0 Fórmula cromosómica: 47, XXY

33 34

Cariotipo humano: Bandeo G

Fórmula cromosómica: 46, XY, t(4;5)

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