13/04/2010

UNIVERSIDAD DE EL SALVADOR
FACULTAD DE MEDICINA
DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA
BIOQUIMICA I CICLO I/2010

LICDA. EMMA DE ALVARADO

LA CINETICA ENZIMATICA

ESTUDIA LA VELOCIDAD DE LAS REACCIONES
QUIMICAS QUE SON CATALIZADAS POR ENZIMAS

EL ESTUDIO DE LA CINÉTICA DE UNA ENZIMA

PERMITE:

Explicar los detalles de su mecanismo catalítico

Conocer su papel en el metabolismo

Describir como es regulada su actividad en la

célula

Como puede ser inhibida su actividad por
fármacos

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CONOCER DE LOS FACTORES QUE

AFECTAN LA VELOCIDAD DE LAS
REACCIONES ENZIMATICAS

TAMBIEN REPRESENTA EL MODO PRINCIPAL

PARA

IDENTIFICAR POSIBLES AGENTES TERAPEUTICOS

QUE DE MANERA SELECTIVA INCREMENTAN O

INHIBEN LAS VELOCIDADES DE LOS PROCESOS

CATALIZADOS POR ENZIMAS

LA VELOCIDAD DE UNA REACCIÓN VIENE DADA

POR LA CONCENTRACIÓN DE SUSTRATO QUE SE
TRANSFORMA EN LA UNIDAD DE TIEMPO.

La reacción catalizada por una enzima

utiliza la misma cantidad de SUSTRATO y genera la
misma cantidad de producto que una reacción no
catalizada.

Al igual que ocurre en otros tipos de catálisis, las

enzimas no alteran en absoluto LA CONSTANTE DE
EQUILIBRIO de la reacción entre sustrato y
producto

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SE ESTABLECE QUE CADA

REACCIÓN TIENE UN ORDEN:

Primer orden se debe a un
solo reactante

Segundo orden se debe a

dos reactantes

Orden cero cuando no

depende de ningún reactante

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LA TEORIA DE LA CINETICA ,CONOCIDA

COMO TEORIA DE LAS COLISIONES
ESTABLECE QUE :

PARA QUE DOS MOLECULAS REACCIONES
DEBEN DE :

1. Aproximarse entre sí a la distancia de

formación del enlace ó bien , “chocar “
2. Deben poseer suficiente energía cinética
para superar la barrera de energía y
alcanzar el estado de transición.

POR LO TANTO SE DEDUCE QUE : CUALQUIER COSA

QUE INCREMENTE LA FRECUENCIA Ó ENERGIA DE
COLISIÓN ENTRE LOS SUSTRATOS AUMENTA LA
VELOCIDAD DE LA REACCIÓN EN LA QUE PARTICIPAN

FACTORES QUE MODIFICAN LA VELOCIDAD

DE LAS REACCIONES ENZIMÁTICAS

Cambios en el pH

Cambios en la temperatura

Concentración de cofactores

Concentración enzimática

Concentración de sustratos

Presencia de inhibidores

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TEMPERATURA

El número total de moléculas cuya
energía cinética excede LA
Barrera
Energética BARRERA DE ENERGÍA para la
formación de productos se
incrementa desde la
TEMPERATURA BAJA A pasando
por la TEMPERATURA
INTERMEDIA B A LA ALTA C
Energía
cinética

Al aumentar la temperatura
aumenta la energía cinética de
las reacciones químicas

TEMPERATURA
Las reacciones enzimáticas

son sensibles a los
cambios de temperatura
debido a la naturaleza
proteíca de las enzimas y
puede causar :

LA DESNATURALIZACIÓN
TÉRMICA de éstas con una
rápida pérdida de la actividad
catalítica por interrumpir las
interacciones covalentes que
mantienen la estructura
tridimensional de la Enzima,
luego la cadena polipeptídica
comienza a desdoblarse y así se
DESNATURALIZARSE

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El intervalo de Temperatura en el que

una enzima mantiene una conformación
estable depende de la temperatura
normal de las células en que se encuentra

Las enzimas del hombre son estables por

lo general a T0 de hasta 45 – 55 0C

Los microorganismos termófilos 100 0C ó

arriba de este valor

Temperatura óptima : es a la cual la

enzima ejerce su máxima acción catalítica

CONCENTRACIÓN DEL ION H O PH

La mayor parte de las enzimas
intracelulares muestra actividad

optima a valores de pH entre 5 y 9

Las enzimas son proteínas que

tienen
grupos ionizables que se pueden cargar
dependiendo del pH en que se
encuentran.

El grupo carboxilo de las proteínas a

pH alcalino puede ceder su protón
quedando con carga –
PH ÓPTIMO: Es aquel
donde se transforma
El grupo amino de las proteínas a pH
mayor número de moléculas ácido puede ganar un protón
por segundo quedando con carga +

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LA GANANCIA Ó PERDIDA DE
GRUPOS IMPORTANTES CON
CARGA AFECTA DE MANERA
ADVERSA LA UNIÓN DEL
SUSTRATO Y POR
CONSIGUIENTE RETARDA O
ANULA LA CATALISIS
PH ÓPTIMO: Es aquel donde se transforma
mayor número de moléculas por segundo

CONCENTRACIÓN ENZIMÁTICA

LA VELOCIDAD DE LA REACCION ENZIMA ES DIRECTAMENTE

PROPORCIONAL A LA CONCENTRACION DE ENZIMAS

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EFECTO DE LA CONCENTRACION DE SUSTRATO EN LA V0 DE UNA

REACCION ENZIMATICA

Desarrollaron esta teoría y

y propusieron una ecuación de velocidad
que explica el comportamiento cinético de
los enzimas.

Para explicar la relación observada entre

la velocidad inicial (v0) y la concentración
inicial de sustrato ([S]0 propusieron que las
reacciones catalizadas enzimáticamente
ocurren en dos etapas:

En la primera etapa se forma el complejo
enzima-sustrato

segunda, el complejo enzima-sustrato da
lugar a la formación del producto,
liberando la enzima libre
Maud Menten

ECUACIÓN DE MICHAELIS MENTEN

Es la expresión matemática que define la

reacción cuantitativa entre la velocidad inicial
V0 de una reacción enzimática y la [ S ]

V = Vmax. [ S ]
Km + [ S ]

V = Velocidad inicial de la reacción

Vmax = Velocidad máxima al punto de saturación

[ S ] = Concentración de sustrato

Km = Constante de Michaelis – Menten.

Se expresa en Moles/Litro

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EFECTO DE LA CONCENTRACION DE SUSTRATO

EN LA V0 DE UNA REACCION ENZIMATICA
Si varía la concentración de
SUSTRATO y se mantiene
fija la concentración de
enzima se grafica así :eje X
la concentración de sustrato
Y en la y la velocidad de la
reacción se obtiene un
gráfico de HIPERBOLA
RECTANGULAR
LA KM ES LA
CONCENTRACIÓN DE
SUSTRATO A LA CUAL LA
Vi ES LA MITAD DE LA
VELOCIDAD MAXIMA

EFECTO DE LA CONCENTRACION DE SUSTRATO EN LA V0

DE UNA REACCION ENZIMATICA

A B C

La importancia de una reacción enzimática es el tiempo

que tarda en saturarse con un sustrato en particular y la
máxima velocidad de reacción que pueda alcanzar

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LA VELOCIDAD DE LA REACCIÓN VA AUMENTANDO A MEDIDA

QUE AUMENTA LA CONCENTRACIÓN DE SUSTRATO HASTA QUE
LA ENZIMA SE SATURA

La importancia de una reacción enzimática es el tiempo que

tarda en saturarse con un sustrato en particular y la máxima
velocidad de reacción que pueda alcanzar

A B C

PUNTO A
V = Vmax. [ S ] V = Vmax. [ S ]
Km + [ S ] Km

V = Vmax = K V = Km [ S ]
Km PUNTO A : Cuando la [ S ]
es mucho menor que Km
éste se elimina.

La Vmax. y la Km son
constantes por lo tanto la
Velocidad de la reacción es
directamente proporcional a
la [ S ]
con lo cual la reacción es un
proceso cinético de PRIMER
ORDEN.

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PUNTO C
V = Vmax. [ S ] V = Vmax. [ S ]
Km + [ S ] [ S ]
V = Vmax
PUNTO C : Cuando la [ S ] es
mucho mayor que Km el término Km +
la [ S ] = la [ S ] y la ecuación se
reduce
Al sustituir Km + [ S ] por [ S ] la
ecuación se reduce a : V = Vmax

LA REACCION ES UN PROCESO CINETICO DE ORDEN CERO.

La velocidad máxima de la reacción se alcanza cuando toda la enzima
se encuentra unida al sustrato

PUNTO B
V = Vmax. [ S ] V = Vmax
Km + [ S ] 2

Cuando [ S ] = Km

Vi = 1/2 Vmax

EL SUSTRATO NATURAL DE UNA

ENZIMA ES EL QUE TIENE MENOR
KM

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EFECTO DE LA CONCENTRACION DE SUSTRATO EN LA V0

DE UNA REACCION ENZIMATICA

Una Km alta indica una

baja afinidad entre la enzima
y el sustrato y Viceversa .

La Vmax. indica el número

de recambio de una enzima.

Número de recambio: Es
la cantidad de sustrato que
se transforma por minuto y
por centro catalítico

CONCLUSIONES IMPORTANTES SOBRE LA

CINETICA DE MICHAELIS-
MICHAELIS-MENTEN

CARACTERÍSTICAS DE Km

Es característica de una

enzima y su sustrato en
particular, y refleja la
AFINIDAD DE LA ENZIMA
POR SU SUSTRATO.

Km es numéricamente
igual a la concentración de
sustrato con la que la
velocidad inicial de la
reacción es igual a ½ de la
Vmax

Km no varía con la

concentración de enzima

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FORMAS DE MEDIR LA ACTIVIDAD

ENZIMATICA EN MUESTRAS
BIOLOGICAS
LAS DIMINUTAS CANTIDADES DE ENZIMAS PRESENTES
EN LAS CELULAS HACEN COMPLICADO DETERMINAR SU
PRESENCIA Y CONCENTRACION DE LA SIGUIENTE
REACCION:

E + S ES P + E

1.Midiendo la disminución en la cantidad de

sustrato transformado
2.Midiendo el aumento en la cantidad de
producto obtenido
3.Midiendo el índice de cambio en la cantidad
de coenzima

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