ASOCIACION CIENTIFICA COLOMBIANA DE MEDICINA ESTETICA

EMBLICA AGENTE INNOVADOR EN DERMOCOSMETICA

AUTOR:
DRA. SANDRA TIBYSAY SUAREZ ACEVEDO
MEDICO CIRUJANO UNIVERSIDAD EL BOSQUE
MEDICO ESTETICO UNIVERSIDAD ISLAS BALEARES
BOGOTÁ- COLOMBIA

ASESORES:
DR. JUAN CARLOS GAVIRIA
DR. JOSÉ RICARDO CABO SOLER

MAYO DE 2006

1
A DIOS, MI ESPOSO Y MIS PADRES

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 INDICE
Pág.

RESUMEN 1
OBJETIVO 3
INTRODUCCIÓN 4
1. DEFINICION 5
2. RADICALES LIBRES 5
3. PROPIEDADES DE LA EMBLICA 10
3.1 Propiedad quelante 10
3.2 Propiedad antioxidante 11
3.3 Propiedad antioxidante tipo cascada 12
4. ESTUDIOS BIOLOGICOS Y BIOQUIMICOS IN VITRO 14
4.1 Citotoxicidad 14
4.2 Proliferación celular 14
4.3 Inhibición de la liberación de colagenasa 15
4.4 Inhibición de la actividad de colagenasa 15
4.5 Estimulación de las proteínas no colagenicas 15
4.6 Estimulación de glicosaminoglicanos 16
4.7 Protección de las células contra el estrés oxidativo 16
4.8 Inhibición de la síntesis de melanina 16
5. ESTUDIOS CLINICOS 18
5.1 Reducción de la pigmentación inducida por RUV 18
5.2 Estudio en la aclaración de la piel 19
6. SEGURIDAD DEL PRODUCTO 21
CONCLUSIONES 23
BIBLIOGRAFIA 24

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 RESUMEN

Objetivo: Revisión bibliográfica sobre Emblica un agente innovador en

dermocosmética.

Introducción: Phyllanthus emblica también conocida como Grosella espinosa de la

India es la fruta de un árbol considerada la fuente más rica de vitamina C y
bioflavonoides que se produce en forma natural. es una planta con características
curativas importantes y se ha utilizado por generaciones para este propósito en la
medicina Ayuruveda, para el tratamiento de numerosas enfermedades.

La emblica es una molécula joven en dermocosmética, fue introducida en el

mercado por laboratorios Merck KGaA en el año 2001. Es utilizada en Países
como Alemania, India, estados Unidos, Japón y Colombia entre otros; como
producto coadyudante en tratamientos antiedad; gracias a su propiedad como
antioxidante libre de prooxidación a largo termino por su efecto cascada.

La emblica es un prometedor producto, que brinda una alternativa eficaz y segura

no solo en el tratamiento del envejecimiento y pigmentaciones de la piel, sino que
también en su prevención contra los efectos dañinos de la radiación ultravioleta,
cada día más acentuados.

Conclusiones:
Podría asegurarse que la literatura revisada coincide en la importancia de emblica
como producto innovador en dermocosmética, por su efecto antioxidante en
cascada libre de prooxidación; antiedad y aclarante de la piel.

Gracias a su atributo como antioxidante de cascada no prooxidante, emblica

puede ser utilizado en combinación con otros productos del cuidado de la piel,
tales como filtros solares, productos hidratantes, antiedad y despigmentantes entre
otros.

4
Emblica es un agente que a bajas concentraciones aclara naturalmente la piel,
reduce la pigmentación inducida por radiación ultravioleta; convirtiéndose en una
alternativa segura y eficaz que podría llegar a reemplazar a la hidroquinona y así
mismo evitar sus efectos secundarios.

Emblica puede ser utilizada por el médico estético en su consultorio, como agente
postpeeling, beneficiándose de su capacidad antiradicallibre, disminuyendo los
efectos agresivos de dicho procedimiento.

Emblica es una molécula joven en Dermocosmética, que por sus atributos,

convendría continuar investigaciones científicas para el aprovechamiento de sus
componentes.

Gráficas relacionadas:

Figura 1 - Figura 2 - Figura 3 - Figura 4 - Figura 5 - Figura 6 - Figura 7 - Figura 8 -

Figura 9 - Figura 10 - Figura 11 - Figura 12 - Figura 13 - Figura 14 - Figura 17 -
Figura 18 - Figura 19 - Tabla 1- Tabla 2 - Otra -

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 OBJETIVO

REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA SOBRE EMBLICA UN AGENTE INNOVADOR EN

DERMOCOSMÉTICA

6
 INTRODUCCION

Phyllanthus emblica también conocida como Grosella espinosa de la India es la

fruta de un árbol considerada la fuente más rica de vitamina C y bioflavonoides
que se produce en forma natural. es una planta con características curativas
importantes y se ha utilizado por generaciones para este propósito en la medicina
Ayurveda, para el tratamiento de numerosas enfermedades.
La mayoría de estudios realizados hasta el momento describen la emblica como
potente antioxidante suministrado de forma oral. Dando resultados en diferentes
patologías como dislipidemias, enfermedad coronaria, anticarcinogénico entre
otros.

La emblica es una molécula joven en dermocosmética, fue introducida en el

mercado por laboratorios Merck KGaA en el año 2001. Es utilizada en Países
como Alemania, India, estados Unidos, Japón y Colombia entre otros; como
producto coadyudante en tratamientos antiedad; gracias a su propiedad como
antioxidante libre de prooxidación a largo termino por su efecto cascada.

La emblica es un prometedor producto, que brinda una alternativa eficaz y segura

no solo en el tratamiento del envejecimiento y pigmentaciones de la piel, sino que
también en su prevención contra los efectos dañinos de la radiación ultravioleta,
cada día más acentuados

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1. DEFINICION

Emblica es un material aislado de los frutos del Phyllantus emblica (sinónimo

emblica officinalis); el árbol es nativo del sureste asiático, particularmente India,
Pakistan, Bangladesh, Sri Lanka y sur de China. Uno de los frutos mas antiguos
de la India, componente de triphala, preparación ayuruvedica data del año 1.500
a.c, utilizada como formula curativa. La medicina ayurveda es un sistema antiguo
de medicina natural, ayurveda quiere decir: “ ciencia de la vida”. Nombre Botánico:
Emblica officinalis. Nombre de familia: Euphorbiaceae. Nombre común: Grosella
espinosa, phyllanthus emblica, emblica, grosella espinosa india, amla (1)

Los taninos de bajo peso molecular (< 1000), Emblicanin A y EmblicaninB, junto
con pedunculagin y punigluconin, son los ingredientes más importantes de la
emblica. Se cree que los efectos terapéuticos de los extractos de los frutos del P.
Emblica son debido a su rico volumen de vitamina C. Las estructuras de los
compuestos monoméricos son mostrados en la figura.1 (2)

2. RADICALES LIBRES

En los años 50, para explicar el envejecimiento celular y la etiología de muchas

enfermedades, el científico estadounidense Denma Hartman, propuso la teoría de
los radicales libres, en la que el oxigeno, elemento indispensable para la vida, esta
directamente involucrado con el deterioro bioquímico de los individuos.
Se sabe que hay una relación inversa entre la vida máxima de una especie de
mamífero y su consumo de oxígeno (metabolismo basal)

8
Los átomos son parte menor invisible física y químicamente, que juntos con otros
de su especie, constituyen la molécula. El átomo de oxígeno esta constituido por 8
protones (carga positiva) , 8 neutrones (carga neutra) y 8 electrones (carga
negativa).

En un enlace químico normal, ya sea iónico o covalente, un par de electrones

opuestos Comparten el mismo nivel orbital de energía y los átomos quedan
integrados en un Compuesto estable; en cambio en el radical libre el átomo tiene
un electrón desapareado en su ultima orbita, es decir, la mitad de un enlace o un
enlace abierto, que lo convierte en una partícula altamente inestable y altamente
reactiva que busca capturar al electrón perdido en otro átomo, para completar su
configuración, tornándolo en un agente oxidante, que causa toxicidad,
produciendo un "efecto domino", que ocasiona la muerte de las células afectadas.
Cuando una de estas partículas entra en contacto con moléculas que forman parte
de las membranas de la célula o de los organelos se inicia una reacción de
oxidación en cadena en la cual se producen nuevos radicales libres las que
reaccionarán con las moléculas vecinas para continuar el proceso de “efecto
domino".

Como se dijo anteriormente, los radicales libres son altamente reactivos, muy
inestables y destructivos ya que tienen que adquirir un electrón extra o deshacerse
del electrón impar, provocando una reacción en cadena que crea más radicales
libres, este proceso nunca se detiene y es llamado estrés oxidativo, causando
daño molecular a las estructuras celulares (membranas, núcleo, mitocondrias y
otros organelos), rupturas y enlaces cruzados en proteínas y ácidos nucleicos
(ADN-ARN), lipoperoxidación de los ácidos grasos, despolimerización de los
polisacáridos de la sustancia fundamental del tejido conjuntivo, alteración de los
sistemas enzimáticos, oxidación de las lipoproteínas, etc. esta lesión oxidativa por
metabolitos reactivos del oxígeno suele causar modificaciones covalentes en esas
estructuras celulares.

9
En la oxidación metabólica, en la cadena de citocromos, se produce la cascada de
electrones y se produce ATP (energía) y CO2, mientras que el O2 molecular sufre
una reducción tetravalente sin creación de productos intermedios; sin embargo, el
1,2% de este oxígeno, sufre una reducción univalente y no alcanza a unirse al H
para formar H2O, formando subproductos intermedios (radicales libres altamente
tóxicos). Hay una forma de oxígeno que no deriva de la reducción del oxígeno, se
llama oxígeno singulete (simple o soltero) y que es producido como resultado de
los procesos energéticos celulares. Tienen un efecto tóxico significativo (destruyen
lípidos de las membranas y otras moléculas estructurales de la célula). La vida
media de los radicales libres es efímera (fracciones de segundo). En condiciones
normales, sus concentraciones son mínimas.

Si el estrés oxidativo es moderado, o la cantidad de enzimas protectoras es

escasa y la adaptación está disminuida (como sucede en el envejecimiento), las
células mueren por apoptosis, lo que permite proteger al tejido sano circundante
de un mayor daño. Se pueden comentar muchos aspectos sobre los mecanismos
del envejecimiento celular y las consecuencias de la lesión oxidativa progresiva
que sobrepasa los mecanismos de defensa de la célula.

Entre los múltiples radicales libres que se encuentran en las reacciones biológicas,
los de oxigeno (RLO) son los mas frecuentes; el anion superoxido, el radical
hidroxilo y el oxigeno singulete son algunos de los RLO mas habituales que se
producen en nuestro organismo. El hidroxilo es el más reactivo de las especies de
oxígeno; se forma por irradiaciones de alta energía. Este se encuentra en las
diferentes capas de la piel, y afecta las cadenas de aminoácidos. Por su alta
reactividad, este radical actúa en forma inmediata afectando gravemente el
genoma celular.

Peroxido de hidrogeno: Oxida los lípidos de las membranas celulares, modificando

la composición de sus lipoproteínas, con el resultado de la destrucción y muerte

1
celular. Afecta los aminoácidos, precursores de las proteínas, presentando un
proceso de degradación, con la posterior alteración en las fibras de colágeno y
elastina.

Singulete de oxígeno: Es un oxígeno electrónicamente excitado. Es una birradical

con una orbita molecular en la cual dos electrones "sin", se sistematizan en dos
orbitas diversas; su molécula estable seria el oxígeno triple (3 02). Es una forma
mutante de alta energía, producida por la transferencia de energía luminosa de la
luz solar. Se forma a través de las reacciones de fotosensibilidad. Daña el ADN, al
romper las bases dobles de guanina.

La luz del sol también genera el superóxido en la piel e incrementa la presencia

del superóxido dismutasa, que convierte el superóxido en peróxido de hidrógeno.
El Fe2+ reacciona con el peróxido de hidrogeno para generar el destructivo radical
hidroxilo y Fe3+, que permite la continuación de la reacción en cadena. En
ausencia de antioxidantes como la vitamina C, vitamina E u otro polifenólico, la
piel es un perfecto lugar para la química oxidante.

Para controlar los procesos de oxidorreducción, y sus efectos dañinos sobre la

piel, diversos antioxidantes pueden usarse para proteger la piel de los fotodaños.
Mientras el uso general de antioxidantes es defendido, otros son a menudo
desatendidos, porque estos compuestos no solo funcionan como antioxidantes,
sino que también intrínsecamente tienen una acción pro oxidante, sobre todo en la
presencia de metales de transición como hierro y cobre. La liberación de hierro
desde su almacenamiento como la proteína ferritina por acción de la luz UV, se le
ha atribuido ser la fuente principal de estrés oxidativo.

La luz es un elemento con alto poder lesivo sobre la piel. La más deletérea es la
luz ultravioleta (UV) del espectro electromagnético. La radiación UVB tiene efecto
nocivo sobre las células, ya que por fotolisis rompe las moléculas de agua dejando
como resultado átomos de hidrógeno, electrones y radicales hidroxilo. Además, en

1
presencia de oxígeno se generan adicionalmente radicales superóxido y peróxido
de hidrógeno.

La consiguiente liberación del hierro libre potencialmente dañino dentro de la

célula exacerbará los efectos perjudiciales de fotoperoxidación y será probable el
daño importante reversible y degenerativo de la piel después de la exposición a la
luz UV. Se ha mostrado que la cantidad de hierro en la epidermis humana es tres
veces mayor en las áreas expuestas al sol, que en los sitios del cuerpo que no se
exponen. El hierro ejerce su toxicidad a través de una serie de reacciones con las
especies de oxigeno reactivo, las cuales se denominan reacción Fenton,
generándose el radical hidroxilo altamente tóxico con el daño subsiguiente a las
biomoleculas.

Existen situaciones que se pueden considerar normales o habituales, en las

cuales una situación de estrés oxidativo incide negativamente. Una de ellas es el
envejecimiento fisiológico, consustancial con cualquier forma de vida. otra
situación fisiológica que se acompaña de estrés oxidativo es la menopausia. En
esta circunstancia, la ausencia de estrógenos y progesterona (o la disminución de
las concentraciones normales) constituye una situación de riesgo, ya que estas
hormonas, a concentraciones fisiológicas, ejercen un efecto anti-RLO demostrado.

También la practica de deportes o ejercicio físico de forma intensa genera estrés

oxidativo, ya que en las mitocondrias musculares se genera una gran cantidad de
RLO. La radiación ultravioleta, el tabaquismo y la exposición o a otros agentes
químicos y físicos del ambiente, también producen estrés oxidativo que se
traducirá en manchas, eritema, edema, procesos auto inmunológicos. Alteraciones
de la queratinización y vasculitis. A esto sigue fotodaño crónico, incluyendo la
aparición de lesiones precancerosas en el tiempo.
Por ello la naturaleza nos ha dotado de sistemas no enzimáticos y enzimáticos
(antioxidantes naturales) encargados de neutralizar los efectos nocivos de los
radicales libres y equilibrar la homeostasis del medio interno al eliminar los

1
radicales libres, pues sin estos antioxidantes nos autodestruiríamos.

En el primer grupo destacan el glutation reducido (GSH), tripeptido fundamental en

la detoxificación de compuestos electrofilicos, ya sea directamente o a través de la
glutation S- transferasa (GST), y como sustrato de la glutation peroxidasa (GPx)
en la detoxificacion de los hidroperoxidos; los tocoferoles, el ácido ascórbico, la
ubiquinona (coenzima Q), el ácido úrico, el B-caroteno entre otros. Entre los
sistemas enzimáticos, aparte de la GST y GPx mencionadas, destacan la catalasa
(CAT), que descompone el peroxido de hidrogeno en agua y oxigeno molecular, la
superoxido dismutasa (SOD), que transforma el anion superoxido en peroxido de
hidrogeno y la glutation reductasa (GR) que regenera el glutation (GSSG)
proporcionando nuevas moleculas de GSH disponibles. Es bien conocido que
antioxidantes como la vitamina C, vitamina E, las proantocianidinas (del pino y
uva), el súper óxido dismutasa y el glutatión, tienen actividad prooxidativa. (2,3,4)

3. PROPIEDADES DE LA EMBLICA

3.1 Propiedad Quelante

Alterando el potencial de reducción del hierro en contra de la reacción con el

peroxido de hidrogeno o bloqueando los sitios disponibles en el hierro al que el
peroxido de hidrogeno podrían atacar, puede proporcionar una solución para
detener la transición de la oxidación inducida por el metal. Estos dos principios
son importantes en el desarrollo de quelantes con función antioxidante en el
cuidado de la piel. La emblica tiene todos los atributos de un antioxidante ideal,
pero ninguna actividad pro-oxidante inducida por la transición metálica debido a su
excelente propiedad queladora para Fe+3 y CU+2 que eliminan la generación del
radical hidroxilo y su efecto negativo sobre la piel. (1)

La formación del radical hidroxilo catalizador por hierro desde el radical anión de
superóxido y el peróxido de hidrogeno requiere la disponibilidad de por lo menos
un sitio de coordinación férrico que esté vacío u ocupado por un ligante

1
prontamente disociable, como el agua. Esta coordinación con el agua puede ser
completamente cambiada de sitio por un ligante mas fuerte como el anión azida
(N3-). Se aplicó este principio y se determinó el sitio de coordinación libre
(cualquiera) en el Fe3+ (0 Cu2+), el complejo del antioxidante, usando el método
espectrofotometrito UV. Los resultados son mostrados en las tablas 1 y 2

De todos los quelantes probados de Fe3+ (y Cu2), solo la emblica mostró la

ausencia (Fig. 2) de cualquier coordinación de agua (es decir, el complejo es total
y firmemente saturado y no hay ningún lugar para cualquier actividad prooxidante
en vía de formación de un radical de oxo-ferril u oxo-cupril). Todos los otros
antioxidantes / los quelantes mostraron un sitio de coordinación dispar que permite
la formación de radicales de oxo-ferril u oxocupril y la manifestación de un efecto
prooxidante, particularmente en concentraciones bajas.
La emblica es el quelante más eficaz de hierro libre y cobre, que puede prevenir el
daño causado por estrés oxidativo inducido por los radicales y los iones de metal
de transición sueltos.

3.2 Propiedad antioxidante

Hay docenas métodos de test in Vitro disponibles para determinar la actividad

antioxidante de una sustancia. Se ha usado tres métodos para determinar
actividad antioxidante comparativa de la emblica y otros
antioxidantes disponibles comercialmente. (2,3)

Test con Desoxirribosa (Radicales de Hidroxilo)

El radical del hidroxilo que neutraliza la eficacia de productos fue obtenido en las
concentraciones respectivas de 0,3 nM de FeCl3, 1,2 nM de EDTA, 33,6 nM de
H202, 33,6 nM de desoxirribosa en un pH 7,4 buffer de fosfato (20 nM) y 0,2 - 10
nM del quelante.
La cantidad de radicales hidroxilo determinados en el test con

1
desoxirribosa fue usando 1% w iv de óxido tiobarbitúrico (TBA) y 2,8% w iv de
óxido tricloroacetico (TCA). Se demostró que la emblica posee más fuerte
habilidad para neutralizar el radical hidroxilo, significativamente mejor que los
antioxidantes del pino, de la uva y Trolox C (la vitamina E con la cadena de alquil
sustituida por un grupo carboxilo) figura3. La vitamina C y el te verde son
antioxidantes pro-oxidantes.

Test de polimerización con metilmetacrilato (Radicales de sulfuro)

La inhibición de la eficacia de polimerización con metilmetacrilato de los
productos fue obtenida en concentraciones diferentes que usan como iniciadores
el sulfato ferroso / peróxido de hidrógeno (reacción de Fenton). La realización de
polimerización requirió 24 horas a 35 :t 2°C. La cantidad de polímero formado
(PMMA) en presencia de antioxidantes diferentes fue determinado por un método
gravimetrico. Estos datos demuestran lo contrario de otros antioxidantes usados
en el estudio. La emblica inhibió significativamente (a concentración baja) o
previno totalmente (la concentración alta) la polimerización de MMA a PMMA.
Figura.4

Test con difenilpicrilhidrozide (DPPH) (Radicales de Nitrógeno)

El método de DPPH es un ensayo calorimétrico simple basado en la disminución

en la absorbancia a 517 nm del radical DPPH (púrpura profunda) después de la
adición de un compuesto antioxidante en la solución. La adición de un antioxidante
determina el debilitamiento de este color, y la proporción se relaciona con la
eficacia neutralizadora del radical.

Todas las actividades del antioxidante fueron derivadas de las medidas de la

densidad óptica a 517 nm de etanol- agua con concentraciones como sigue:
DPPH a 100 m cM/ ml; todos los antioxidantes a 31 mcg/ ml excepto el
antioxidante Rosemary (RosemaryAntiox) a 61 mcg/ml. Figura.5 (5)

1
3.3 Propiedad antioxidante tipo cascada

Mientras la mayoría de los antioxidantes van de un rol activo a uno inactivo, la

emblica utiliza un efecto cascada multinivel de compuestos antioxidantes,
produciendo una prolongación de sus capacidades antioxidantes. La actividad
inhibitoria de los constituyentes de la emblica y sus metabolitos sobre la
peroxidación lipidica, fue demostrado por el "efecto de cascada". Los otros dos
taninos hidrosolubles de bajo peso molecular, el Pedunculogin y el Punigluconin
actúan como antioxidantes secundarios.

La cascada ilustra la transformación química de Emblicanin A que tiene lugar

a nivel celular o en la piel durante su actividad antioxidante. Emblicanin A ataca a
los radicales libres, neutralizándolos y luego es transformado en Emblicanin B,
otro antioxidante. Emblicanin B a su vez también neutraliza los radicales libres y
se transforma en oligómeros de Emblicanin.

Los antioxidantes son capaces de reciclarse a fin de poder utilizarse

repetidamente para combatir la oxidación de las estructuras celulares, por lo tanto,
dependen entre si de muchas maneras y trabajan perfectamente sincronizados de
manera interrelacionada, para neutralizar el daño del estrés oxidativo.
La actividad antioxidante multinivel es único y es responsable del poder de la
emblica; la mayoría de los antioxidantes simplemente van a un estado inerte para
luchar contra los radicales libres, Sin embargo, la emblica tiene una actividad
antioxidante prolongada, por este único "efecto de cascada". (1,7)

La emblica esta constituida por Emblicanin A y Emblicanin B que han sido

ilustrados tridimensionalmente para determinar las afinidades quelantes
de sus unidades con varios iones metálicos. Los cálculos se realizaron usando el
programa Gaussian 98, con Hartree Fock en un set básico 6 - 31 G * . Modelando
las estructuras de Emblicanin Ay B en el espacio, y colocadas en presencia de

1
iones metálicos como Fe3+, Fe2+ 0 Cu2+, mostraron una fuerte atracción de su
conformación espacial tridimensional para atrapar los iones metálicos
en los enlaces orbitales (Figura 6).

Emblicanin A mostró una fuerte afinidad para enlazarse con el oxígeno de los dos
grupos ácidos del ácido gálico. El Fe3+ quelado, en la estructura muestra una
apertura de los grupos carboxilo del ácido galico para acomodar cuatro de los
metales coordinados y también proporcionar el espacio de libre acceso para el
hierro remanente en el sitio 3. Igualmente, las estructuras de los quelante de Cu2+
muestran una apertura de los grupos del ácido galico al acomodarse en dos sitios
coordinados y también proporciona el acceso libre sin impedimento al remanente
del cobre que permanece en el sitio 11.

Los dos sitios de coordinación restantes pueden fácilmente ligarse a un quelante

secundario como Emblicanin B, Pedunculagin o Punigluconin. Esta flexibilidad
estructural del Emblicanin A proporciona las propiedades quelantes fuertes a la
emblica, siendo este su mayor ingrediente activo.

4. ESTUDIOS BIOLÓGICOS Y BIOQUÍMICAS IN VITRO

4.1 Citotoxicidad

No hay citotoxicidad entre 1 a 100 mcg/ ml. La supervivencia celular en presencia

de la emblica fue determinada por método del colorimetría rápida XTT
( absorbancia a 450 nm). El XTT (2,3-bis(2-metoxi-4-nitro-5-sulfenil)- 2H-
tetraso\ium-5-carboxianilida) es una sal tetrasolium, la cual es transformada a
formazan anaranjada por la acción de la deshidrogenasa en la mitocondria activa.
Los resultados son expresados como la actividad mitocondrial de las células
viables determinadas midiendo la densidad óptica a 450 nm (Fig. 7)

4.2 Proliferación celular

1
No hay proliferación celular entre 1 a 50 mcg/ml;(inhibición ligera a 100 mcg/ml).
La proliferación celular en la presencia de la emblica fue determinada por un
ensayo neutral rojo, por la medición de la densidad óptica a 540 nm o la lectura del
estándar ELISA.

4.3 Inhibición de la liberación de colagenaza

Aproximadamente decreció el 40% de la liberación de colagenasa usando 50

mcg/ml de la emblica. La cuantificación de liberación de colagenasa se hizo
usando el MMP-l ELISA para productos oncogénicos. Este es un inmunoensayo
no isotópico para la cuantificación in Vitro de metaloproteinas de la matriz
humana-l (MMP-l ; colagenasa intersticial) (Fig. 9).

4.4 Inhibición de la actividad de la colagenaza

40% a 75% de decrecimiento (dosis dependiente 150 a 300 mcg/ml) en la

actividad gelatinasa / colagenasa. Un inhibidor de tejidos como la metaloproteasa
(TIMP) y la colagenasa sin la emblica fueron usados como controles positivos y
negativos, respectivamente.
La cuantificación de la actividad de la gelatinasa / colagenasa se hizo usando el kit
gelatinasa / colagenasa EnzCheck (E-12055) de la prueba molecular por la
medición de la emisión de la fluorescencia del substrato a 515 nm (Figura 10).
La colagenasa es la responsable de la degradación de las fibras de colágeno
de la piel, particularmente durante el fotodaño. La disminución en la actividad
de la colagenasa reduce el arrugamiento y perdida de elasticidad de la piel.

4.5 Estimulación de las proteínas no colagénicas

Aproximadamente se incrementa en un 40% las proteínas no colagénicas usando

50 mcg/ ml de la emblica; no se identificó la naturaleza de las proteínas no
colagénicas; prácticamente no hay ningún efecto sobre proteínas colagénicas.

1
La cuantificación de las proteínas colagénicas y no colagénicas se hizo con
el método de inmunocolorimetria al medir la absorción a 605 nm. El promedio de
los resultados de los dos experimentos separados se muestra en la Fig. 11.
La estimulación de las proteínas no colagénicas, como la elastina, apoya el
mantenimiento de la elasticidad de la piel.

4.6 Estimulación de glicosaminoglicanos

Aproximadamente se incrementa en un 15% en glicosaminoglicanos usando 50

mcg/ ml de la emblica.
La cuantificación de proteoglicano se hizo siguiendo el ensayo Blyscan Bicolor Ltd,
Catalogo # B1000). Este ensayo está basado la unión especifica del tinte catiónico
1,9-dimetilmetileno azul a glicosaminoglicano sulfatado. Los glicosaminoglicanos
contenidos (en la prueba simple) se determina por la curva de calibración (Fig. 12)
Los glicosaminoglicanos son un componente dérmico clave que ayudan a
mantener el balance hídrico en la dermis. También ayudan a otros
componentes dérmicos y actúa como una matriz para la migración celular,
metabolismo y crecimiento.

4.7 Protección de las células contra el estrés oxidativo

Aproximadamente hay un 90% de protección de las células contra el daño del

superóxido usando 20 mcg/ ml de la emblica.
Los estudios de células con fibroblastos de piel humana, determinan la
viabilidad celular bajo el superóxido (generado por el uso del sistema de la
hipoxantina y la xantina oxidasa (HX-XO) y la eficacia de la emblica al proteger las
células bajo esta condición. La supervivencia celular fue determinada con el
método modificado colorimétrico Mn (3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2-5-difeniltetrazolium
bromuro). La prueba es una indicación de las células vivas, las cuales son
determinadas por la medición de la densidad óptica a 570 nm (Fig. 13). (5)

1
4.8 INHIBICIÓN DE LA SÍNTESIS DE MELANINA

Los melanocitos son las células encargadas de la síntesis de melanina. Se

originan en la cresta neural a partir de la octava semana de vida intrauterina en
forma de melanoblastos. En la piel los melanocitos se localizan en la capa basal
de la epidermis distribuyéndose en una proporción de 1/4 a 1/10 en relación a los
queratinocitos según las zonas.
La melanina es sintetizada en unas organelas citoplasmáticas, propia de los
melanocitos, denominadas melanososmas que posteriormente son transferidos a
los queratinocitos para proteger su núcleo frente a la radiación ultravioleta. Cada
melanocito cede sus melanosomas a una media de 37 queratinocitos, con los que
forma la llamada unidad epidérmica de melanización.

El proceso de síntesis y transferencia de la melanina a los queratinocitos se

denomina melanogenesis. Este proceso se inicia en los ribosomas de los
melanocitos que sintetizan la tirosinasa. la cual es transferida posteriormente al
retículo endoplasmico rugoso y al aparato de Golgi, donde tras acoplarse a una
proteína de soporte es incluida en una vesícula esférica rodeada de membrana
denominada melanosoma. El aminoácido tirosina es modificado por la enzima
tirosinasa a DOPA y esta, a su vez, a DOPA quinona. A partir de esta sustancia
pueden ser sintetizados dos tipos de melanina: las eumelaninas (pardo-
negruzcas) y las feomelaninas(pardo -rojizas), estas ultimas por la adición de
cisteina, en tanto que las eumelaninas lo hacen por la formación y polimerización
de quinonas. Este polímero se acumula en los melanosomas, que se agrupan en
las dendritas , que poseen actina, v- miosina que favorecen el movimiento de los
melanosomas, para ser finalmente fagocitados a los queratinocitos adyacentes. La
migración, colonización, proliferación y supervivencia de los melanocitos depende
del receptor de superficie tirosina - kinasa, c-kit y sus ligandos: el factor de las
células madre. El melanocito responde a la acción de la hormona estimulante de
melanocitos (MSH), incrementando el paso de melanosomas a los queratinocitos.

2
(8)
La inhibición significativa de la formación de melanina se observa usando la
emblica (-22%) e hidroquinona (-30% del control positivo) a 50 mcg/ml del agente
usado (Fig. 14). Los materiales de la prueba fueron incubados en un medio de
cultivo (McCoy, Gibco) separadamente por 48 horas .

Después de la incubación , el sobrenadante se descartó y se trató con NaOH 1 N

(10% dimetilsulfoxido) para la lisis celular, seguida por centrifugación y recolección
del sobrenadante (conteniendo melanina). leída la absorción a A max 470 nm. La
concentración de la melanina fue calculada comparando densidad óptica
del producto frente al control. (5)

5. ESTUDIOS CLINICOS

5.1 Reducción de la pigmentación inducida por RUV

Sujetos para el test: Once/ diez voluntarios humanos con fototipo II(siempre
broncea fácilmente / oscurece mínimamente), III (broncea moderadamente /
oscurece gradualmente) y IV (broncea mínimamente / siempre oscurece bien).

Sitios de los test: Atrás de los sujetos, en un área de 4x2.5 centímetros.

Sustancias para el test: Cremas que contienen la emblica o.2%, fosfato de

ascorbilo magnésico 0.5% (MAP), ó vitamina E o.5%.

Aplicación y frecuencia: 2mg7cm2 una vez por día.

Protocolo del estudio: Protocolo A (Prevención) se Aplicó el producto durante 8

días y entonces se indujo la pigmentación por luz UV; se comparó el sitio control
irradiado que no fue tratado con el producto.
Protocolo B (Reversión) Se indujo la pigmentación por luz UV; se comparó el sitio

2
control irradiado que no fue tratado con el producto.

Definición de ITAº : ITAº ={Tangente del arco (L*-507b+)] 180 / 3.1416 (L*valor del
aclaración; b*-color en el eje azul- amarillo; método COLIPA para prueba del SPF).
La piel aclarada tiene un ITAº alto, la piel más oscura ITAº bajo o negativo (Fig.15)

Evaluación: La determinación del ángulo de la topología individual (ITAº), y delta

ITAº por sustracción del medio ITAº del sitio tratado desde la línea media del fondo
(primer día del estudio). (Fig.16). Un ITAº >3 puede distinguirse visualmente.

Instituto de la prueba: Consumer Product Testing Co., New York, USA.

Conclusión: Basado en este estudio, la diferencia estadísticamente significativa (p

<0,05) en la reducción de pigmentación versus el control, fue observada con
la emblica 0,2% así como con vitamina E 0,5% (Protocolo A). Sin embargo,
con el Protocolo B, la emblica 0,2% ha mostrado diferencia estadísticamente
significativa (p < 0,05) en la reducción de pigmentación. Estos datos
muestran que la emblica tiene ambos efectos, previene y, además, revierte
la pigmentación de la piel.

5.2 ESTUDIO EN LA ACLARACIÓN DE LA PIEL

Sujetos para el test: Voluntarios humanos – Hispánicos de piel tipo III (siempre
broncea fácilmente / oscurece mínimamente) y piel tipo IV (broncea
mínimamente / siempre oscurece bien).
Definidos por la escala de fototipos de Fitzpatrick.

Sitios de los test: parte superior de los brazos, izquierdo y derecho.

Sustancias para el test: Cremas que contienen emblica, hidroquinona ó fosfato de

ascorbilo magnésico (MAP).

2
Aplicación y frecuencia: 0.5 ml por cm2 dos veces al día.

Duración del estudio: 9 semanas.

Evaluación: La determinación del ángulo de la topología individual (ITAº), y delta

ITAº por sustracción de la media del ITAº del sitio tratado desde la línea media del
fondo (primer día del estudio). Un delta ITAº >3 puede distinguirse visualmente.
Definición de ITAº: ITAº ={Tangente del arco (L*-507b+)] 180 / 3.1416 (L*valor del
aclaración; b*-color en el eje azul- amarillo; método COLIPA para prueba del SPF).
La piel aclarada tiene un ITAº alto, la piel más oscura ITAº bajo o negativo (Fig.15)

Instituto de la prueba: Consumer Product Testing Co., New York, USA.

Conclusión:
I. Estudio comparativo entre la emblica e hidroquinona. El estudio a) fue realizado
con 13 voluntarios hispánicos. Resultado figura 17. El estudio b) fue realizado con
13 voluntarios asiáticos. Resultado figura 18.
La piel de los sujetos hispánicos y asiáticos tratados con la emblica 2%, muestran
un significativo incremento en el ITAº (Ios dos estuvieron detrás de p < 0,01),
indicando un visible aclaramiento de la piel después de 6 y 9 semanas de
aplicación respectivamente. El tratamiento con la emblica 2% fue tan efectivo
como con hidroquinona 2%.
Fotografías tomadas al final del estudio demuestran el efecto del aclaramiento de
la piel con la emblica.

II. Estudio comparativo entre la emblica y el fosfato de ascorbilo magnesico (MAP)

El estudio fue realizado con 16 voluntarios asiáticos. Resultado Figura 19.
Ambos, la emblica (1 %) y fosfato de ascorbilo magnesio (MAP, 3%) se mostraron
estadísticamente significativos (Ios dos por debajo de p < 0,01 ) aumentando
elITAº. Una formulación con solo la emblica 1% fue más eficaz para aclarar la piel

2
asiática que con MAP 3%.
El efecto del aclaramiento era mucho más pronunciado en sujetos que tiene la piel
más oscura (ITAº < + 20) que con los de piel más clara (datos no mostrados).

El mecanismo de acción de la emblica en el aclaramiento de la piel no es aún

preciso. Se sabe que la emblica tiene muy baja actividad inhibitoria de tirosinasa,
pero posiblemente inhibe su expresión; o inhibe la transferencia del melanosoma
de los melanocitos al queratinocito o inhibe la protein Kinasa C o es inhibidor de
peroxidasa/ H2O2, responsable de la conversión de DOPA a Melanina.
Posiblemente la emblica tiene efecto inhibitorio sobre MSH.

6. SEGURIDAD DEL PRODUCTO

La emblica es un producto seguro para el uso cosmético como se evidencia en los

siguientes estudios:

Estudio en ratas sobre la toxicidad aguda oral- limite del test

La sustancia de la prueba se dio en una sola dosis a ratas macho y hembra por
vía oral. Ningún animal se murió a la dosis de 5.000 mg/kg

Estudio de irritación primaria en el ojo de los conejos

Un test de irritación primaria de ojo se hizo con conejos para determinar el

potencial vía ocular de la emblica para producir irritación. Bajo
las condiciones de este estudio (instilación de 0.05 - 0.06 gramos de la sustancia
probada en el ojo), la sustancia del test es clasificada como minimamente irritante.

Evaluación de fototoxicidad potencial por irradiación UVA en sujetos

humanos

2
Cuando la emblica se probó en veinte sujetos, a una dilución en agua destilada al
2%, puede considerarse que no es fototóxica. Se probaron dos lotes. No se
observaron efectos adversos o reacciones inesperadas.

Test de parche de daño repetido en sujetos humanos / Irritación en piel y

evaluación de sensibilización en piel

Un test de parche de daño repetido sobre la piel se hizo con 100 sujetos humanos.
La emblica (0.5% en agua destilada) se probó bajo oclusión durante 24 horas
( una serie de ocho exposiciones en 24 horas consecutivas). La emblica es
considerado como un no irritante primario y como un no sensibilizador primario en
la piel humana. Ningún sujeto mostró efecto adverso alguno.

Test de mutagenicidad bacterial

Un ensayo de mutagenicidad bacteriana ( Test Ames) con Salmonella typhimurium

y Escherichia coli se hizo con la emblica. La emblica no fue mutagénico bajo las
condiciones experimentales de este test con y sin la adición de la mezcla S9 como
sistema de metabolización externa. (6)

2
 CONCLUSIONES

1- Podría asegurarse que la literatura revisada coincide en la importancia de

emblica como producto innovador en dermocosmética, por su efecto
antioxidante en cascada, libre de prooxidación, antiedad y aclarante de la
piel.

2- Gracias a su propiedad como antioxidante de cascada no prooxidante,

emblica puede ser utilizado en combinación con otros productos del
cuidado de la piel, tales como filtros solares, productos hidratantes,
antiedad y despigmentantes entre otros.

3- Emblica es un agente que a bajas concentraciones aclara naturalmente la

piel, reduce la pigmentación inducida por radiación ultravioleta;
convirtiéndose en una alternativa segura y eficaz que podría llegar a
reemplazar a la hidroquinona y así mismo evitar sus efectos secundarios.

4- Emblica puede ser utilizada por el médico estético en su consultorio, como

agente postpeeling, beneficiándose de su capacidad antiradicallibre,
disminuyendo los efectos agresivos de dicho procedimiento.

5- Emblica es una molécula joven en Dermocosmética, que por sus

2
 propiedades, convendría continuar investigaciones científicas para conocer
y aprovechar sus diferentes componentes.

BIBLIOGRAFÍA

1. Chaudhuri, Rattan K. Bearing Fruti ( Emblica cascading antioxidant used in

cosmetics). Soap perfumery & cosmetics; 8/1/2001.

2. Bhattacharya SK, Bhattacharya A, Sairam K, Ghosal S. Effect of bioactive

tannoid principles of Emblica officinalis on ischemia-reperfusion-induced
oxidative stress in rat heart. Phytomedicine, 2002 Mar; 9(2): 171-4.

3. Bhattacharya A, Ghosal S, Bhattacharya SK. Antioxidant activity of tannoid

principles of Emblica officinialis (amla) in chronic stress induced changes in
rat brain. Indian J Exp. Biol. 2000 Sep; 38(9): 877-80.

4. Salvador-Carulla, L. y Cabo-Soler, J.R. y Cano-Sánchez, A. Longevidad:

Tratado integral sobre salud en la segunda mitad de la vida. Edición médica
Panamericana. 2004.

5. Monografía Merck KGaA, Darmastadt, Germany: Ingrediente activo

2
 multifuncional derivado de una planta. Julio 2002.

6. Murray R, Granner D, Mayes P; Bioquímica de Harper México 1994.

7. C.E.orfanos, Berlin; B.tebe. Emblica cascading antioxidant: A novel natural

skin care ingredient. Skin pharmacology and physiology vol 15 374 – 380,
2002.

8. Thomas FitzPatrick, et al : Dermatología en medicina general. México.

1994.

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2