Muerte celular programada y El concepto de muerte celular programada se
acuño estudiando a un bichito llamado
Apoptosis
09/11/04 ( escrita x ) pequeñito [ el cual durante su desarrollo
Tiene simbología al final de la clase
La muerte celular programada esta muy
relacionada con ciclo celular porq una
alteración en el ciclo desencadena
fundamentalmente ¿este proceso? de hecho
hoy en día el ciclo ha cambiado porq ya no
solamente existen poblaciones ¿hábiles?
(poblaciones q están constantemente en
ciclo), poblaciones inestables (las q salen a
G0), poblaciones perennes(las q siguen vías de
diferenciación) sino q también ahora se
incluye como concepto dentro del ciclo celular
la apoptosis.
El concepto de apoptosis fue acuñado por
Kerr en 1972, describió el proceso de
apoptosis basado en cambios morfológicos q
pasare a medida q avance en esta clase, pero
no tomo importancia hasta q en el 96’ fue
publicada en la portada de la revista Science,
debido a la importancia q tiene la apoptosis
en una serie de procesos como: desarrollo de
los órganos, homeostasis de tejidos,
maduración del sistema inmune y en la
regresión de los tumores.
Muchas personas piensan q “apoptosis” es
sinónimo de “muerte celular programada”
pero no es lo mismo porq:
Muerte celular programada:
Proceso fisiológico en el cual una
cierta población de células durante el
desarrollo esta programada a morir,
para eso se activa un proceso de
muerte q lleva a las células al suicidio
(apoptosis= mecanismo de ejecución)
Apoptosis: mecanismo por el cual se
ejecuta la muerte celular programada
[ caenorhabditis elegans] q es un nematodo
experimenta una serie de divisiones celulares
y algunas de esas células se van a morir por
un mecanismo apoptotico.] Esta formado por
1090 células de las cuales 131 mueren,
siempre son las mismas. [ Lo q vemos en este
nematodo también ocurre en otros niveles de
organización como por ejemplo la cola de un
renacuajo q desaparece por un proceso de
muerte celular programada al igual q las
membranas interdigitales]
El tracto reproductor del varón depende de
la testosterona para funcionar, si quito la
fuente productora de testosterona por lo
tanto todo lo q depende de esa hormona se
van a morir por apoptosis pero eso no es
muerte celular programada. O sea durante el
desarrollo embrionario hay células q tienen un
programa genético q se activa q induce
muerte y esas células tienen q desaparece si
o si. A este concepto fisiológico le llamamos
muerte celular programada.
Toda muerte celular programada se
ejecuta por apoptosis.
No toda la apoptosis es muerte celular
programada
☺ Fases del proceso apoptotico:
La célula demora 4 hrs. en suicidarse (desde
cuando llega el estimulo hasta la retirada de
la cel q se esta muriendo) o también se podría
decir q es el tiempo desde cuando comienza la
fase efectora hasta cuando termina la fase
de resolución. (proceso relativamente rápido)
1-Fase efectora: Activación de eventos (no
consecutivos) a través de una señal, q
conducen a la célula a un estado
comprometido de muerte del cual no existe
retorno.
1
2-Fase de degradación: Masiva degradación Ahora analizaremos gradualmente los
de proteínas y ácidos nucleicos( factores relacionados con apoptosis q nombre
específicamente de ADN) y hay cambios en la anteriormente:
membrana plasmática. -Cuando Kerr plantea su trabajo y menciona
3-Fase de resolución (limpieza): Remoción el concepto de apoptosis, la muerte celular
(eliminación) de células o cuerpos apoptoticos recibía como 8 nombres (necrosis,
por macrófagos o células vecinas sin cariorecsia, autolisis, etc).En su trabajo Kerr
perturbación de la arquitectura tisular. define la muerte celular con solo 2
mecanismos: apoptosis o necrosis.
Después Jara muestra una diapositiva del ¿Cuál es la diferencia entre apoptosis y
laboratorio Roche la cual señala los eventos q necrosis?
se han ido descubierto en relación a la
apoptosis; en 1972 Kerr (ya lo vimos)
describió este proceso como una serie de
rasgos morfológicos, posteriormente se vio q
asociados a estos rasgos había una
degradación del material genético q sigue un
patrón particular(ya hablaremos de eso), en
el 95’ se vio q había una activación de
proteasas q reciben el nombre de caspasas,
después se vio q había alteraciones de la
membrana plasmática y finalmente se vieron
cambios relacionados con la mitocondria (el
potencial de membrana mitocondrial y con la
liberación de ciertos factores q tienen un rol
fundamental en el desarrollo de la apoptosis
cuando la señal es intracelular.
Necrosis apoptosis

Apoptosis: es la “muerte fisiológica”, por ej

si pensamos en el sist inmune, una vez q el
estimulo q activo linfocitos cesa, esa cantidad
de linfocitos debe perderse, estos linocitos
son retirados a través del mecanismo de
apoptosis.
es un mecanismo fisiológico muy limpio, es
decir, nunca va haber una respuesta
inflamatoria asociada.
Cuando la célula se muere por este
mecanismo, se muere ella solita (afecta a una
célula individual)
Los primeros cambios son a nivel de la
cromatina, se condensa hacia la envoltura

2
nuclear,[ formando generalmente una media
luna característica]
Los organelos conservan la normalidad
La membrana plasmática no pierde su
continuidad nunca (queda indemne)
La célula comienza con un proceso q se
llama blebbing En ingles, en donde parece q el
citoplasma empezara a hervir. Por fuera se
ven como si empezaran a salir una especie de
cototos, esos cototos son pedazos de célula q
se van a separar de la célula original y se van
a llamar cuerpos apoptoticos. Estos cuerpos
llevan solo restos de citoplasma o restos de
núcleo. Cuando se forman cuerpos apoptoticos
“nada del contenido de la célula se libera al
exterior” porq estos cuerpos siguen estando
rodeados por memb. Plasmática.
Estos cuerpos a. después serán
fagocitados por una célula de la vecindad (un
macrófago o una célula epitelial) q los van a
incorporar y finalmente a degradar con
lisosomas de la célula huésped.
Necrosis: Es la muerte patológica, q afecta a
una población de células
Tiene una respuesta inflamatoria asociada
(las razones están mas abajo)
Cuando la célula se muere por este
mecanismo, se muere ella y todas las células q
están a su alrededor (afecta a una población
de células)
La distribución de la cromatina es
diferente q en la apoptosis [ se condensa
hacia la envoltura nuclear de una manera
irregular]
Las mitocondrias se ven como hinchadas
[ prácticamente no se encuentra ningún
organelo indemne]
Hay perdida de la continuidad de la
membrana plasmática, al romperse hay
liberación del contenido de la célula hacia el
exterior (intersticio), esto genera “respuesta
inflamatoria” q no existe en el mecanismo de
apoptosis.
continuando con Apoptosis:…
Una de las cosas características de este
proceso es la degradación de material
genético especialmente de ADN, esta
degradación no es al azar (emm me recuerda
a epi) se activa un conjunto de endonucleasas
(enzimas q van a degradar ac. Nucleicos) q
van a cortar el ADN en lo q se conoce como
ADN linker (ADN de unión entre
nucleosoma). Existen 200 pares de bases de
ADN por cada nucleosoma, por lo tanto si
aislo el ADN de una célula q esta muriendo
por apoptosis, lo extraigo y lo cargo en un gel
de agarosa se encontraran bandas
¿discretas? q están a 200,400,600,800
,1000,1200 etc, de pares de bases a esto le
llaman el patrón de escalera, porq como
siempre va a cortar entre nucleosomas,
tendremos siempre múltiplos de 200.
La morfología como criterio único no se
acepta para publicar algo en apoptosis, hay q
demostrarlo por la morfología por un lado
pero además hay q demostrar el patrón de
escalera (q es particular de la apoptosis). En
necrosis también hay degradación de ADN
pero es totalmente azarosa, donde tendré
pedazos de ADN de 200, 201, 202, etc, al
correrlo en un gel de agarosa me va a dar una
sola mancha continua hacia abajo, y no la
escalera típica de la apoptosis.
Aprovechando q durante la muerte celular
por apoptosis existe rotura del ADN se ha
desarrollado la técnica de TUNEL:
Terminal
Udtp
Nick
End
Labeling
Esta técnica identifica células apoptoticas.
Durante esta técnica existen roturas en el
ADN, donde nosotros podemos pegar
nucleótidos a través de la enzima
transferasa terminal.Estos nucleótidos
pueden tener una marca, puede ser una marca
3
fluorescente (por ej: efeitesena; celular. La finalidad de este proceso q es un
fluoresceína q emite luz verde). Entonces la evento temprano en la muerte celular por
enzima pega trozos de nuevo ADN a las apoptosis es q la célula sea reconocida por los
roturas y de esa manera la célula queda fagotitos para ser comidas .Recuerden q el
marcada. Esto también es característico de canibalismo no existe entre células en
apoptosis. epitelios normales, tiene q haber una señal, y
esa señal es la traslocacion de la
fosfatidilserina al exterior. Por eso solo el
macrófago se va a comer a la célula q esta
muriendo por apoptosis y no a otra célula
normal.

La fractura del ADN es un evento

temprano en apoptosis, los cambios
morfológicos de la célula, son eventos
tardíos. Al usar técnica de TUNEL se teñirán
TUNEL+ aquellas células q tienen morfología
de apoptosis y aquellas en q ha comenzado la
fragmentación del ADN pero q aun no tienen
cambios morfológicos.
Otro evento temprano es la traslocacion
de la fosfatidilserina pero acuérdense q
estamos hablando de la fase efectora donde
hay cambios no consecutivos, todos ocurren a
la par.

☺ Regulación del proceso apoptotico

-También hay cambios a nivel de la membrana

plasmática, relacionados con un fosfolipido
llamado fosfatidilserina q se encuentra en
todas las células normales en la hoja interna
de la membrana y nunca por la hoja externa.
En las células q se están muriendo por
apoptosis, las fosfatidilserina(q en el dibujo
están de color rojo) trastocan hacia la cara
externa, apareciendo ahora en la superficie
4
una señal de muerte tiene q actuar sobre un
conjunto de proteínas reguladoras a través
de un receptor y este conjunto de proteínas
van a activar un conjunto de proteasas
(caspasas) las cuales son proteínas efectoras
q van a ser responsables de llevar adelante el
proceso de muerte celular.
Aquí va otra Diapo q cambiare el prox año, es
lo mismo, lo único nuevo q señala son nuevas
cosas q se conocen:
ejemplos de señal para inducir el proceso:
agentes citotóxicos por ejm el mismo calcio q
esta adentro de la célula induce apoptosis si
se queda afuera del citoplasma, la hipoxia, el
calor, receptores: fas, TNF, acción de
glucocorticoides, la carencia de factores de
crecimiento.
Proteínas reguladoras: p53, Bcl2, citocromo
c, algunos oncogenes, y nuestras amigas las
quinasas.
Aun no se sabe quien integra la señal porq
depende de la vía q queramos estudiar, pero
lo importante de todo esto es q siempre llega
a lo mismo; a la activación de proteasas q se
denominan caspasas
Las CASPASAS (Cistein-aspartato-
proteasas) fueron preliminarmente
descubiertas en procesos inflamatorios.
Existen 3 grupos:
1- Iniciadoras: (n° 8,9,2,10 y 12)
2- Efectoras o ejecutoras: (n° 8,9,2,10 y 12)
3- Inflamatorias: (n° 1,4,5,11)
los dos primeros grupos participan en el
proceso de apoptosis.
Las caspasas existen de manera normal en
todas las células, pero existen como zimogeno
(enzima inactiva) llamada procaspasa. Ésta al
activarse, se corta el segmento “pro” y se
convierte en caspasa activa. El mecanismo de
apoptosis q se ejecuta a través de la
activación de estas caspasas evolutivamente
esta muy conservado, existe en todos los
organismos multicelulares. Las caspasas
5
tienen diferentes nombres dependiendo del
organismo q estemos estudiando, tienen
siempre el mismo principio. En mamíferos se
han descubierto 14 de las cuales 11 existen
en humanos de ellas 7 tienen q ver con el
proceso apoptotico y de esas 7, 4 son
iniciadoras (n° 8,9,10 y 12) [ no nombró la
n°2] y 3 ejecutoras (n° 3,6 y 7).
¿Cuál es la diferencia entre estos 2 grupos
de caspasas?
La caspasa iniciadora es una enzima q esta en
el inicio de la vía de señalización y q tiene
como único blanco la activación de una
caspasa efectora o ejecutora. Recuerden q
las caspasas son proteasas (degradan
proteínas).
Cuando una iniciadora se activa por ejm la
caspasa 8, va a tomar a la caspasa 3
(ejecutora) y le va a cortar el segmento “pro”
dejándola como caspasa activa. Lo q quiero q
entiendan es q una caspasa iniciadora no va a
degradar microtubulos, va activar a la
caspasa ejecutora la cual degrada todo el
resto de los componentes de la célula.
El proceso de apoptosis tiene q partir de una
señal q puede ser: externa o interna.
☺ Vía externa:
Donde la señal de muerte es del exterior la
cual actúa sobre un receptor de muerte q
esta en la membrana plasmática .A ese
receptor tiene q unirse un ligando, el cual
depende del receptor, una vez q el receptor
se ha activado va a reclutar un conjunto de
proteínas q van a llevar finalmente a la
activación de una caspasa iniciadora la
caspasa 8 la cual va a activar a la procaspasa
3 dejándola como caspasa 3 y de esa manera
se lleva adelante el proceso [ La caspasa 3
es la responsable de comerse todo lo q esta
adentro del citoplasma celular]
☺ Vía interna:
Participa la familia Bcl2 (linfoma de células B)
q actúa directamente sobre la mitocondria,
produciéndose una liberación desde la
mitocondria de citocromo c (q es parte de la
cadena transportadora de electrones) el cual
se asocia con otra proteína q existe en el
citoplasma q es el Apaf1 formando una
estructura q se llama apostosoma y q recluta
a la caspasa9 , la activación de la caspasa 9
llevara a la activación de la caspasa 3 y de
nuevo apoptosis. [ el año pasado dijo q el
apoptosoma era el complejo q se formaba por
la unión del citocromo c, apaf1 y procaspasa9]
En esta Diapo se ve el receptor de color
amarillo y la señal de color rojo. Cuando se
une el ligando con el receptor, este trimeriza
la memb. plasmática se recluta un conjunto
de proteínas (a este grupo se le denomina
Disc[complejo inductor de señalización de
caspasa]) entonces cuando se forma este
complejo proteico por el lado interno de la
memb, se recluta la procaspasa 8,
convirtiéndose en caspasa 8 activa, la cual
actúa sobre la procaspasa 3 activándola.
6
[Esta era la forma didáctica ☺ de
mostrar la vía extracelular]
En la vía intracelular podría ser una
señal por ejm daño a nivel del ADN,
activándose la vía de p53 el cual va a
llevar a la expresión de proteínas de
la familia de Bcl2 particularmente
Bax.Esta ultima viaja a la memb.
mitocondrial, forma un agujero en la
memb. mitocondrial por el cual se
escapa citocromo c, el cual se une
con el apaf1 y con la procaspasa 9
para formar este complejo q se
denomina apoptosoma, en este
complejo la procaspasa 9 se activa la
cual va a actuar sobre la procaspasa
3, activándola.
(En esta otra Diapo se muestra también la vía
En estas 2 vías la señal puede venir desde externa (el profe no estaba seguro, pero cree
afuera o de adentro pero el mecanismo va a q es el mecanismo de muerte q usan los
ser siempre llegar a la activación de una linfocitos para destruir a las células q tienen
caspasa ejecutora. q matar)Donde el linfocito expone en la memb
No existe solamente un receptor, los plasmática de su célula el FASL ….de ahí en
receptores de muerte corresponden a una adelante es igual q lo q dije en la Diapo
gran familia, el mas estudiado de todos es el anterior……..la caspasa 8 activa la
q se ve en esta Diapo q tiene varios nombres: procaspasa3. La caspasa 3 se encarga de
apu1, cd95 o el q mas le gusta al profe q es degradar el inhibidor de una enzima q se
fAS.El q se une a este receptor es FASL (es llama desoxiribonucleasa activada por
el ligando de FAS) Este receptor existe en la caspasa (CAD), el inhibidor se llama ICAD.
superficie de casi todas las células, esta Cuando la CAD queda sin inhibidor va al
siempre como monómeros, es decir, como núcleo y ahí degrada el material genético.
unidades sueltas en la membrana, cuando
llega el ligando, obliga a q FAS trimerize la
memb .Los dominios de muerte (DD) q están
por el lado citoplasmático se unen, al unirse
se comienzan a reclutar por el lado interno
proteínas q tienen dominios de muerte
asociados a FAS y dominios efectores de
muerte, entre las proteínas q se reclutan
esta la procaspasa 8, cuando esta se recluta
al Disc, la caspasa se activa.
El FASL puede estar soluble o unido a
membrana.

7

Cuando la señal viene del interior dijimos q
participan la familia Bcl2 , al haber una señal
de muerte se activa esta familia, donde
existen moléculas q son antiapoptoticas y
moléculas proapoptoticas. Los nombres es lo
de menos, pero normalmente trabajo con
Bax(primero q se descubrió como agente
activador de apoptosis) y con Bcl2 (fue el
primero q se descubrió como agente
antiapoptotico)
cuando se activa la señal de muerte,
miembros proapoptoticos migran a la
mitocondria y generan un agujero en la memb
mitocondrial por el cual se va a escapar
citocromo C. Estas proteínas trabajan como
dimeros y puede haber homodimeros
(Bcl2-Bcl2) y es antiapoptotico, también hay
heterodimeros (Bcl2-Bax) el cual es
antiapoptotico porq Bcl2 inhibe la porción de
Bax. La única posibilidad de q se estimule la
apoptosis es q 2 proapoptoticos se junten en
un dimero, o sea un homodimero (Bax-Bax)
seria un inductor de apoptosis. Cuando se
juntan entre si solamente compuestos
apoptoticos el citocromo c sale de la
mitocondria, no solo sale citocromo c, pero
por ahora solo nos interesa este.
Entonces los miembros proapoptoticos de la
familia Bcl2 se unen a la memb, se escapa el
citocromo c q se junta con la procaspasa 9 y
con afap1 forman el apoptosoma, se activa la
procaspasa 9 q activa posteriormente la
procaspasa 3.

Moléculas antiapoptoticas
Bcl2
Bcl-xL
Bcl-w
Mcl-1
A1
moléculas proapoptoticas:
Bax
Bak
Bok
Bik
Bad
Bid

De manera normal estas proteínas de la

familia Bcl2 están asociadas a la mitocondria,

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En esta otra Diapo se muestra lo mismo, esta
vía es un poco peor porq no solamente se ha
degradado el ADN a través de la privación de
la CAD sino q el hecho q se formen poros en
la memb. mitocondrial hace q se pierda
capacidad de producir ATP porq la gradiente
de protones no existe, o sea por esta vía la
célula esta condenada rápido a morir. De la
mitocondria salen factores q promueven la
apoptosis y factores q la inhiben: citocromo
c, DIABLO, ¿AIF? ( proteínas inhibidoras de
apoptosis) Esto forma un verdadero balance
entre ellas para ver cual secreta.
Las 2 vías están relacionadas
La apoptosis regula de manera opuesta a la
mitosis el n° de células del tejido. El n°
pueden aumentar por mitosis pero también
pueden aumentar porq no se mueren.
La p53 puede inducir apoptosis y frenar la
proliferación.

9
En condición de cáncer, bax disminuye ☺ Enfermedades asociadas con incremento
considerablemente (q es proapoptotico) de la apoptosis:
entonces ganan los antiapoptoticos, y lo q 1.- SIDA
ocurre en realidad ahí es q las células no se 2.-ENFERMEDADES
mueren . NEURODEGENERATIVAS
Enfermedad de Alzheimer
Enfermedad de Parkinson
Esclerosis lateral amiotrópica
Retinitis pigmentosa
Degeneración cerebral
3.- SINDROMES MIELODISPLASTICOS
Anemia aplástica
4.- INJURIA ISQUEMICA
Infarto al miocardio
Apoplejía
Injuria por reperfusión
5.- ENFERMEDADES HEPATICAS POR
TOXINAS
Daño hepático por Alcohol

Por fin termine, con esta clase termina la

materia para la 3° prueba (por suerte) trate de
hacerla lo mejor q pude, como dicen por ahí, la
☺Enfermedades asociadas con la inhibición practica hace al maestro (o algo así). Yap ……q
de la apoptosis: estén bien.
1.- CANCER
-Linfomas foliculares RoSsAnA
-Carcinomas con mutaciones de p53 (si
p53 no existe la célula no se va a morir, porq
él induce apoptosis)
-Tumores dependientes de hormonas
(tumores en los cuales las células no se
mueren)
Cáncer de mama
Cáncer de próstata
Cáncer de ovario
2.- DESORDENES AUTOINMUNES
-Lupus eritematoso sistémico
-Glomerulonefritis de origen inmune
3.- INFECCIONES VIRALES (porq el virus
necesita la célula para replicarse)
-Virus herpes
-Poxvirus
-Adenovirus
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