AISLAMIENTO DE PROTEINAS DE LA LECHE

1. Objetivos.y y Aislar las protenas de la leche Identificar la casena obtenida mediante el mtodo de centrifugacin

2. Fundamento Terico.Las protenas son biomolculas formadas por cadenas lineales de aminocidos. El nombre protena proviene de la palabra griega ("proteios"), que significa "primario" o del dios Proteo, por la cantidad de formas que pueden tomar. Las protenas desempean un papel fundamental para la vida y son las biomolculas ms verstiles y ms diversas. Son imprescindibles para el crecimiento del organismo. Realizan una enorme cantidad de funciones diferentes, entre las que destacan:
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Inmunolgica (anticuerpos), Enzimtica (sacarasa y pepsina), Contrctil (actina y miosina). Homeosttica: colaboran en el mantenimiento del pH, Transduccin de seales (rodopsina) Protectora o defensiva (trombina y fibringeno)

Las protenas estn formadas por aminocidos. Las protenas de todos los seres vivos estn determinadas mayoritariamente por su gentica (con excepcin de algunos pptidos antimicrobianos de sntesis no ribosomal), es decir, la informacin gentica determina en gran medida qu protenas tiene una clula, un tejido y un organismo. Las protenas se sintetizan dependiendo de cmo se encuentren regulados los genes que las codifican. Por lo tanto, son susceptibles a seales o factores externos. El conjunto de las protenas expresadas en una circunstancia determinada es denominado proteoma. Funciones: Las protenas ocupan un lugar de mxima importancia entre las molculas constituyentes de los seres vivos (biomolculas). Prcticamente todos los procesos biolgicos dependen de la presencia o la actividad de este tipo de molculas. Bastan algunos ejemplos para dar idea de la variedad y trascendencia de las funciones que desempean. Son protenas:
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Casi todas las enzimas, catalizadores de reacciones qumicas en organismos vivientes; Muchas hormonas, reguladores de actividades celulares; La hemoglobina y otras molculas con funciones de transporte en la sangre; Los anticuerpos, encargados de acciones de defensa natural contra infecciones o agentes extraos; Los receptores de las clulas, a los cuales se fijan molculas capaces de desencadenar una respuesta determinada; La actina y la miosina, responsables finales del acortamiento del msculo durante la contraccin; El colgeno, integrante de fibras altamente resistentes en tejidos de sostn.

Propiedades:
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y y

Solubilidad: Se mantiene siempre y cuando los enlaces fuertes y dbiles estn presentes. Si se aumenta la temperatura y el pH, se pierde la solubilidad. Capacidad electroltica: Se determina a travs de la electroforesis, tcnica analtica en la cual si las protenas se trasladan al polo positivo es porque su molcula tiene carga negativa y viceversa. Especificidad: Cada protena tiene una funcin especfica que est determinada por su estructura primaria. Amortiguador de pH (conocido como efecto tampn): Actan como amortiguadores de pH debido a su carcter anftero, es decir, pueden comportarse como cidos (aceptando electrones) o como bases (donando electrones).

Casena: La casena es un slido blanco amarillento sin sabor ni olor insoluble en agua se dispersa en un medio alcalino como una solucin acuosa de hidrxido de sodio formando caseinatos de sodio la casena es una protena conjugada de la leche del tipo fosfoprotena que se separa de la leche por acidificacin y forma una masa blanca. En la casena la mayora de los grupos fosfato estn unidos por los grupos hidroxilo de los aminocidos serina y treonina, la casena en la leche se encuentra en forma de sal clcica representa cerca del 77 al 82% de las protenas presentes en la leche y el 2.7% en composicin de leche lquida. Cuando coagula con renina se llama paracasena, y cuando coagula a travs de la reduccin del pH es llamada casena acida y cuando no est coagulada se llama caseingeno.

3. Fundamento Qumico.-

O 2+ Protena O OP O + Ca Protena

O 2 O OInsoluble P O Ca

4. Material y Mtodos.y y y y y y y y y Leche descremada Papel filtro Acido clorhdrico Centrifugadora Ornilla Gradilla Tubos de centifugar Vaso precipitado Sulfato de amonio al 10%

y y

Pipeta Balanza

Procedimiento:  Pesar 50g de leche descremada

Aadir H Cl

Centrifugar a 1500rpm por 5min

Hervir el sobre nadante 10 min

Debemos pesar la casena obtenida

%R casena peso casena Peso leche

Filtrar el sobre nadante a un tubo

Luego aadir sulfato de amonio al tubo ya filtrado, para luego filtrarlo al vaso con el reactivo

5. Resultados.Tubo 1 = 16.82 Tubo 2 = 16.72 Tubo 3 = 16.93 Tubo 4 = 16.53 4.82 4.72 4.93 4.53 %R Casena %R = 38 19 50

6. Discusin.En esta prctica realizada vimos que la leche descremada que utilizamos no nos dio buenos resultados para obtener casena, ya que mis compaeros obtuvieron mas casena y eso que hicimos el mismo procedimiento talves se debi a la leche utilizada pero pudimos ver que la leche si contiene casena sabemos tambin que la leche contiene calcio para los huesos. El acido clorhdrico nos ayudo a que la leche pueda cortarse ms rpido y as proseguir con el procedimiento fue muy interesante y muy prctico. 7. Conclusiones.En la prctica realizada conocimos como aislar a una protena y obtener la casena con los 50g de la leche descremada y con la ayuda del acido clorhdrico, identificamos a la casena mediante el mtodo de centrifugacin tambin pudimos observar el sobre nadante, pudimos aprender como aislar a una protena con la ayuda del papel filtro una prctica demorosa pero interesante. 8. Bibliografa. http//www.wikipedia.com  http://www.quiminet.com/ar4/ar_AAssarmadvc-caseina-una-proteina-de-laleche.htm  http://es.scribd.com/doc/3246492/Material-de-laboratorio

CIENCIAS DE SALUD BIOQUIMICA FARMACEUTICA

NOMBRE: Vernica Yesenia Valverde Cruz Materia: Bioqumica Dra. Ximena Taborga Fecha de entrega: 18 /04 /11