Faculdade de Medicina da Universidade do Porto

Biopatologia 2006/2007 11 Aula Terica: 27/11/06 Aula dada por: Dr. Raquel Almeida

Clulas estaminais e medicina regenerativa

Hoje eu vou falar de clulas estaminais e o uso para fins teraputicos numa rea da Medicina que se chama Medicina Regenerativa. A investigao em clulas estaminais somente uma das reas cientficas em maior expanso; uma rea que tem despertado muito interesse e na qual so depositadas muitas esperanas de que venha a funcionar na terapia de algumas doenas, nomeadamente nas doenas para as quais no existe actualmente cura. Atravs do conhecimento das clulas estaminais procura-se perceber como se forma um organismo a partir de uma nica clula, como que as clulas novas substituem as clulas velhas ou danificadas dos tecidos e a rea que tem interessado mais os investigadores qual a possibilidade de utilizar terapias de clulas estaminais para tratar doentes. O uso potencial de clulas estaminais para fins teraputicos, como por exemplo em doenas degenerativas e na reparao de tecidos que no tem a capacidade de se auto-reparar, uma rea da Medicina que se chama Medicina Regenerativa. Dos 3 grandes grupos de doenas, aquelas que mais beneficiariam com a teraputica de clulas estaminais so as doenas degenerativas. Doenas degenerativas porqu? Porque geralmente no tm cura ou tratamentos que sejam suficientemente bons. O que so clulas estaminais? So clulas que se diferenciam (so diferentes das clulas do organismo) da maior parte das clulas que constituem os tecidos e os rgos por 3 caractersticas fundamentais: So clulas indiferenciadas e que tm a capacidade de se manterem indiferenciadas ao longo do tempo; Tm a capacidade de se dividir de uma forma que se considera mais ou menos indefinida e, durante esse processo, tm capacidade de se auto-renovar, ou seja, dar origem a clulas indiferenciadas como elas prprias; Tm capacidade de dar origem a clulas filhas que se vo diferenciar e constituir as clulas dos tecidos.

Tm capacidade de se dividirem assimetricamente, gerando uma clula igual a ela prpria e que permanece indiferenciada e dar origem a uma clula diferente dela prpria e que constitui os tecidos e vai desempenhar uma outra funo. Estas clulas tm capacidade de proliferao infinita, tm capacidade de se auto-renovar atravs de uma diviso simtrica, dando origem a uma clula igual a ela prpria, mantendo sempre constante o pool de clulas estaminais e tm capacidade de dar origem s clulas diferenciadas que vo constituir os tecidos. Quanto sua capacidade de diferenciao, as clulas estaminais dividem-se em 3 grandes grupos: Clulas estaminais totipotentes so as primeiras clulas embrionrias, as que resultam das primeiras divises embrionrias e que tm capacidade de dar origem a um indivduo completo; Clulas pluripotentes (que se designam tambm de clulas estaminais embrionrias) so as clulas que existem no embrio no estadio de blastocisto (massa celular interna). Esta clulas tm elevado potencial de diferenciao, podem dar origem a todos os tipos celulares de um organismo adulto, menos a placenta (portanto no podem dar origem a um indivduo independente). Clulas multipotentes tm uma menor capacidade de diferenciao; so as clulas que se designam por clulas estaminais adultas ou somticas, so aquelas que existem nos tecidos adultos onde contribuem para a homeostasia desses tecidos; pensa-se que estas clulas tm uma capacidade de diferenciao menor e estas, em princpio, diferenciam-se apenas nos tecidos onde esto localizadas. A investigao em clulas estraminais embrionrias , como j disse, uma rea que est em expanso e que gera muita polmica porque uma rea que levanta certos problemas morais e ticos. Um dos passos muito importante para a investigao em clulas estaminais embrionrias e o seu potencial uso para fins teraputicos foi o estabelecimento de linhas de clulas estaminais embrionrias, ou seja, a possibilidade de cultivar essas clulas numa placa no laboratrio. A primeira linha de clulas estaminais germinativas foi obtida atravs de embries de ratinho em 1981 e a 1 linha humana foi obtida em 1998 (dois marcos histricos da investigao em clulas estaminais embrionrias). O que se fez (e se faz) tirar clulas da massa celular interna do blastocisto e colocar essas clulas em cultura, com meios adequados, no laboratrio. Este um processo difcil, moroso e, para alm disso, tem um problema fundamental em termos cientficos que as clulas estaminais embrionrias humanas tm necessariamente que crescer sobre uma camada de fibroblastos embrionrios de ratinho (essencial para manter as clulas estaminais 2

embrionrias humanas em estado indiferenciado), o que traz srios problemas pela possibilidade de transmisso de doenas dos ratinhos para as clulas humanas. A investigao em linhas de clulas estaminais embrionrias no se faz em muitos pases, faz-se apenas em alguns pases onde possvel politicamente e legalmente os EUA o pas que tem mais linhas de clulas estaminais embrionrias humanas, embora com financiamentos muito restritos porque apenas aquelas que foram obtidas antes de 2001 recebem financiamentos do estado e as outras so financiadas por privados. Recentemente, este ano, saiu um artigo que poder contribuir para que seja facilitada a investigao em clulas estaminais embrionrias humanas, uma vez que este grupo conseguiu estabelecer uma linha de clulas estaminais humanas a partir de uma nica clula retirada de um embrio, sem a destruio deste. Este artigo tem duas vertentes: por um lado retirar uma clula de um embrio com 8 clulas um processo que j se faz na rea da Medicina Reprodutiva para diagnstico gentico pr-implantao, o que no ainda no tinha sido demonstrado que a partir desta clula retirada do embrio, era possvel estabelecer um linha de clulas estaminais embrionrias (e tal foi possvel neste trabalho). Durante o estabelecimento e manuteno das linhas de clulas estaminais embrionrias so feitos vrios testes para saber se as clulas mantm as suas caractersticas, o que fundamental para poderem ser usadas para trabalhos, no s de investigao mas eventualmente para fins teraputicos, de uma forma reprodutiva. Sempre que se trabalha com linhas de clulas estaminais embrionrias humanas, periodicamente verifica-se se estas se mantm num estado indiferenciado em cultura. Para tal, estuda-se a presena de marcadores moleculares caractersticos das clulas indiferenciadas, estuda-se periodicamente os cromossomas para verificar se as clulas se mantm normais (com um n normal de cromossomas) e verifica-se tambm se estas clulas se mantm viveis quando congeladas e repostas em cultura e verifica-se tambm se as clulas mantm as suas propriedades pluripotentes. As clulas estaminais embrionrias so indiferenciadas, mas tm capacidade de se diferenciar se as condies do meio/ambiente forem alteradas, e tm capacidade de se diferenciar em vrios tipos celulares e essa capacidade testada periodicamente: quer deixando as clulas se diferenciarem espontaneamente na placa de cultura nos trs tipos celulares embrionrios endoderme, mesoderme e ectoderme -, quer injectando as clulas em ratinhos e observando a formao de tumores benignos que so designados de teratomas estes tumores tambm tm clulas de todos os 3 tipos celulares embrionrios. Esta figura pretende mostrar isso mesmo, que as clulas estaminais embrionrias em cultura mantm-se num estado indiferenciado. 3

 Se forem deixadas diferenciar espontaneamente, quer pelo aumento do n celular quer por alteraes do meio ambiente, elas formam corpos embriides que so focos diferenciados mas de uma forma aleatria e que apresentam tecidos das trs origens embrionrias. Se quisermos diferenciar as clulas num tipo celular especfico, que o grande objectivo da investigao em clulas estaminais embrionrias, necessrio alterar as condies do meio ou introduzir genes especficos nessas clulas. Actualmente, bastante reprodutvel a transformao de clulas estaminais embrionrias em clulas neuronais produtoras de dopamina e clulas produtoras de insulina in vitro. As doenas em que se tem muita esperana que a investigao em clulas estaminais embrionrias venham a receber uma teraputica mais eficaz no futuro, resultante do uso destas clulas so doenas neurolgicas como a Doena de Parkinson, doenas do corao como enfartes do miocrdio, diabetes, queimaduras graves e leses permanentes da espinhal medula. Para alm da utilizao das clulas estaminais embrionrias para a Medicina Regeneretiva, para fins teraputicos, tambm se tem explorado e investigado muito para perceber qual o potencial das clulas estaminais adultas. Estas teriam uma grande vantagem porque no h nenhum problema at agora levantado de ordem moral ou tica para a utilizao de clulas estaminais adultas, para fins teraputicos. No entanto, tm outras limitaes. Ento o que so clulas estaminais adultas? So as clulas indiferenciadas que existem nos tecidos, no que se designa de nicho de clulas estaminais nos tecidos; so clulas que existem em pequeno n nos tecidos. Actualmente, o grande problema das clulas estaminais adultas que no existem bons marcadores moleculares que as permitam distinguir das outras clulas dos tecidos (no se consegue isolar de forma eficaz as clulas estaminais adultas). Aquelas que se conseguem isolar de forma mais eficaz so as clulas estaminais hematopoiticas (as outras de outros tecidos no so fceis de isolar). A principal funo destas clulas manter e reparar os tecidos onde se encontram. Recentemente descobriu-se que existem mais tecidos com clulas estaminais do que se pensava era muito evidente que determinados tecidos tinham clulas estaminais (medula ssea, todos os epitlios respiratrio, gastrointestinal e pele) e era menos evidente que o crebro e o corao tinham clulas estaminais mas vrios trabalhos tm demonstrado que estes tambm tm clulas estaminais, apesar destas clulas serem mais indolentes (terem uma capacidade de reparao muito menor que as clulas dos outros tecidos). Uma caracterstica importante das clulas estaminais adultas que estas tem maior plasticidade do que se pensava inicialmente, ou seja, tm uma capacidade de se diferenciar em

mais tipos celulares do que se pensava, quando dadas as condies ambientais necessrias para tal. Um trabalho mostra isso mesmo (a maior plasticidade das clulas estaminais adultas do que se pensava) um indivduo do sexo masculino recebe um transplante de um corao de uma pessoa do sexo feminino. possvel distinguir as clulas masculinas das femininas marcando o cromossoma Y com um fluorocromo. O que aconteceu foi que, estudando este corao algum tempo aps o transplante, verificou-se que existiam clulas do msculo cardaco que foram retiradas do corao que veio de um dador do sexo feminino e algumas clulas do msculo cardaco tinham o cromossoma Y, ou seja, eram clulas do aceitador do corao. O que mostra que aqui houve clulas que migraram para o corao novo e essas clulas sofreram um processo que se designa por transdiferenciao (diferenciaram-se noutro tipo celular). As clulas que tm capacidade de migrar so as clulas estaminais hematopoiticas. Portanto, este um trabalho que mostra a plasticidade que se verifica em alguns tipos celulares. As clulas estaminais hematopoiticas tm a capacidade de se diferenciarem noutros tipos de clulas, nomeadamente em msculo cardaco. Outra prof: Vocs reparem que as duas hipteses que esto aqui postas: Uma de que as clulas masculinas tenham vindo da medula ssea e se tenham transdiferenciado no corao, fazendo a uma clula muscular (hiptese mais provvel); A hiptese menos provvel que o prprio corao que recebeu de transplante tenha clulas estaminais que possam ter migrado aqui localmente. Portanto, esta clula muscular cardaca masculina pode ser resultado de uma migrao de uma clula estaminal cardaca (achava-se que no existia, mas hoje em dia interroga-se a possibilidade de existir) que migrou para o corao que foi transplantado.

Outros trabalhos tm demonstrado outras possibilidades das clulas estaminais hematopoiticas se diferenciarem em vrios tipos celulares. In vitro, em trabalhos experimentais, tem sido possvel observar essa diferenciao em msculo cardaco, em clulas neuronais e em algumas clulas epiteliais. De facto, estes estudos experimentais tm demonstrado que as clulas estaminais adultas e em particular as hematopoiticas tm uma maior plasticidade do que se pensava. Atravs de um processo que se designa por transdiferenciao tm capacidade de dar origem a um tipo celular para o qual no estavam inicialmente programadas. Este um processo interessante do ponto de vista da Medicina Regenerativa porque permitiria, a partir de clulas do 5

mesmo indivduo, clulas que se iriam transdiferenciar e serem utilizadas no mesmo indivduo de onde essas clulas foram retiradas. A grande vantagem disto que as clulas so do prprio indivduo e ultrapassam-se problemas de rejeio. As terapias do futuro visam manipular as clulas estaminais adultas, de forma a que estas se transformem noutro tecido que no aquele de onde foram extradas. H vantagens e desvantagens no uso de clulas estaminais embrionrias e adultas em terapias regenerativas. As principais vantagens das clulas estaminais embrionrias so bastante evidentes: A pluripotncia (a capacidade que estas clulas tm de dar a origem a todos os tipos celulares de um indivduo adulto); Actualmente j possvel obter grande n de clulas estaminais embrionrias em cultura (o que no o caso para as clulas estaminais adultas). As vantagens de utilizar clulas estaminais adultas que: No traz nenhum problema de natureza tica H uma possibilidade de se usar clulas do prprio indivduo, evitando a rejeio pelo sistema imune. Portanto o transplante seria utilizando clulas do prprio indivduo e no haveria rejeio desse transplante. Um dos problemas que ainda se estuda, em relao ao uso de clulas estaminais embrionrias em Medicina Regenerativa, o facto de no se saber como o indivduo vai reagir ao receber essas clulas. Os grandes desafios em relao s clulas estaminais so: Perceber como se mantm as clulas em cultura em estado indiferenciado; Como se diferenciam nos vrios tipos celulares de uma forma dirigida e organizada; preciso perceber qual o comportamento das clulas depois de transplantadas; preciso ultrapassar o elevado risco dessas clulas gerarem teratomas. J existem alguns trabalhos experimentais em ratinhos, onde foi possvel observar que nas clulas estaminais embrionrias diferenciadas em clulas que produzem dopamina, se uma clula em 100 no estiver num estado diferenciado, essa clula tem capacidade de gerar um teratoma quando transplantada num ratinho (risco muito elevado de gerar tumores). Portanto, muito necessrio perceber em relao ao comportamento das clulas estaminais embrionrias e adultas tambm.

Actualmente, no existe nenhuma terapia utilizando clulas estaminais embrionrias (todo o processo ainda est muito no inicio); utilizando clulas estaminais adultas faz-se o transplante de medula ssea. Este transplante de medula ssea faz-se como terapia adjuvante em indivduos que sofrem de leucemia ou outras doenas sangunease que passam por processos de radioterapia ou quimioterapia muito forte (em que todas as suas clulas estaminais hematopoiticas so destrudas, para destruir o cancro de uma forma mais eficaz). Depois necessrio repor essas clulas estaminais hematopoiticas atravs de transplante de medula ssea a partir de um dador compatvel. Este processo, no tendo sido designado de terapia de clulas estaminais, no fundo o que ( uma terapia de clulas estaminais porque o que necessrio repor naquele indivduo so as suas clulas estaminais hematopoiticas). As clulas estaminais hematopoiticas so clulas da medula ssea que tm a capacidade de se diferenciar em todos os tipos de clulas sanguneas; podem ser obtidas a partir da medula ssea e tambm podem ser encontradas no sangue perifrico e no cordo umbilical. Antes do transplante de medula ssea, houve um tratamento muito agressivo de quimioterapia e/ou radioterapia, que destruiu as suas clulas estaminais hematopoiticas e necessrio repor essas clulas atravs do transplante de clulas da medula ssea de um dador compatvel. Estas clulas transplantadas migram para o local onde deviam existir (medula ssea) e vo repor o pool de clulas estaminais hematopoiticas nesse indivduo.

Prof. Sobrinho Simes Reparem que esta uma das teraputicas mais antigas, em termos de eficincia, para a leucemia a leucemia mieloide crnica tem taxas de sucesso, h muitos anos, muito boas com esta teraputica e esta teraputica que est a ser progressivamente substituda pela utilizao do glivec?????(aquela droga que tem actividade anti-tirosina-quinsica). Na leucemia mieloide crnica conhece-se o mecanismo da leucemia e acredita-se que pode ser possvel substituir o transplante pelo glivec????. Porque que h esta vantagem se a teraputica pelo transplante era to boa? Porque apesar de tudo, h morbilidade e mortalidade associada ao transplante de Medula ssea. A morbilidade que vocs conhecem , por exemplo, a doena do enxerto contra o hospedeiro. Isto , quando vocs transplantam linfcitos de um dador, eles podem passar a ser agressivos para o receptor. Portanto o ideal seria terem sempre transplantes de um irmo gmeo univitelino. (uma prof. fala no fundo do anfiteatro , mas no se consegue perceber)

O professor Carlos Tavares estava a dizer outra coisa que muito importante. Um autotransplante tambm uma forma de transplante, como evidente, portanto o que vocs tm que ter a certeza de que quando voltam a por o transplante na pessoa, se viram livres dos clones leucmicos. Isto , se vocs tm uma pessoa que tm uma leucemia, portanto que tm clones leucmicos, se vocs vo usar um auto-transplante, tm que ter a certeza, e isto s vezes um problema porque h clones leucmicos em quantidades to pequenas que no so detectados. Outra coisa que o professor est a dizer que verdade que nas neoplasias slidas, se vocs tratarem as pessoas de tal maneira que lhes dem cabo da medula ssea, o auto-transplante uma condio indispensvel para que a pessoa sobreviva. Mas agora deixem-me s voltar atrs porque h sempre esta dvida. Teoricamente ns quando queremos fazer transplantes de dadores compatveis, o ideal seria ento termos gmeos univitelinos, porque so imunologicamente iguais, portanto nem haveria reaco contra o transplante nem haveria reaco do transplante contra o hospedeiro. Est a fazer sentido? Mas vocs sabem, primeiro nem todos temos gmeos univitelinos, e depois, quando se comeou a fazer estudos de eficincia do transplante na leucemia verificou-se que se tinha melhores resultados quando se usava dadores compatveis, mas que no eram gmeos nem univitelinos nem bidivitelinos. Agora porque ser? Esto a perceber o que eu estou a dizer? Ateno que j h a milhares de pessoas com leucemia tratadas, e bem. Quando se foi ver a eficincia da resposta teraputica, isto , a desapario dos clones leucmicos, persistentemente ao fim de dez, quinze, vinte anos, tiveram melhores resultados os tratamentos de transplantes com dadores compatveis que no eram gmeos das pessoas que estavam doentes. Porqu? (uma colega d uma hiptese) Essa era uma hiptese boa. A vossa colega est a dizer assim: - " A pessoa se tm uma leucemia, j tm ali um defeitozinho qualquer. E portanto se receber sangue de um irmo gmeo, quem sabe ele tm o mesmo defeito e passados uns tempos vm a fazer a mesma leucemia. " Boa explicao. Por acaso parece que no verdade, mas uma excelente explicao. Tiro o meu chapu! Qual a outra hiptese Sra, Doutora, ora pense. A outra hiptese os Srs. Drs. pensarem que parte destes clones leucmicos so mantidos em nveis muito baixos devido a alguma resposta imunolgica de surveilence por parte do receptor, e ento, se vocs tiverem dado pessoa um transplante de um dador compatvel, mas que no um gmeo, vocs tm l alguns linfcitos que vo reagir contra as coisas do receptor. Esses linfcitos, h alguma resposta imunolgica boa, para manter os clones leucmicos baixinhos, ou inexistentes. No sei se esto a ver o que eu quero dizer. 8

Ns estamos a apesar de tudo, a ter melhores resultados se tivermos alguma resposta do xenograft contra o hospedeiro. No pode ser muito! Mas se for um bocadinho, os linfcitos que l so metidos no reconhecem totalmente as estruturas do hospedeiro, vo manter as coisas baixinhas. T a fazer sentido ou no? Portanto no se esqueam, h aqui uma evoluo muito engraada, da fase em que se queria sempre gmeos, para a fase em que hoje em dia o que a gente quer ter coisas que sejam compatveis. Vocs vo ver, o que a Raquel vai agora falar quando falar das clulas embrionrias do cordo. Prof. Raquel Portanto, um dos problemas que vai aparecer num transplante de medula ssea, num tratamento que ainda traz problemas de morbilidade e mortalidade associados, o principal problema a obteno de dadores de medula ssea. E portanto, tm-se procurado, sendo um tratamento que muito eficaz, muito bom, tm-se procurado pontos de alternativa, clulas estaminais hematopoticas. E por isso ultimamente tm-se feito muitos trabalhos, e j se utilizam as clulas estaminais do sangue do cordo umbilical. No entanto, as clulas estaminais do sangue do cordo umbilical constituem uma alternativa s da medula ssea, mas com vantagens e desvantagens. As vantagens que a obteno dessas clulas um processo seguro e indolor, e a vantagem que, a utilizao dessas clulas para transplantar no prprio individuo resultam em 100% da compatibilidade com o dador (o dador e o receptor seriam a mesma pessoa) mas, tal como o Prof. Sobrinho disse, no recomendado, os transplantes no so recomendados precisamente porque actualmente se pensa, ou sabe, que alguma reaco do xenograft contra o hospedeiro vantajosa para o prprio processo curativo da leucemia, ou da doena hematolgica que est a ser tratada. Tm grande margem de compatibilidade com familiares directos, tm menor risco de rejeio, apesar de tudo, mesmo sendo utilizadas em transplantes heteromeros tm vantagens, porque estas clulas por serem imaturas, porque so obtidas nascena tm um menor risco de rejeio por parte do receptor, mesmo no sendo o mesmo individuo, so clulas que esto imediatamente disponveis para transplantao e que tm menor risco de estar infectadas com agentes infecciosos, tambm pelo facto de serem recolhidas nascena. As desvantagens, que, o transplante clulas estaminais do cordo umbilical, o sucesso desse transplante muito inferior ao sucesso de transplantes utilizando clulas estaminais da medula ssea, quer em indivduos adultos quer em crianas, mas sobretudo em indivduos adultos porque o numero de clulas estaminais que se consegue obter a partir do sangue do cordo umbilical muito inferior ao numero de clulas estaminais que se obtm a partir da medula ssea. Portanto actualmente apenas recomendado transplantes utilizando clulas do sangue do cordo umbilical em transplantes peditrico. O tempo de restabelecimento tambm por o nmero de clulas 9

estaminais ser menor, tambm mais lento, e h um risco associado da transmisso de doenas genticas, ou da manuteno da doena gentica nos transplantes. Porque tal como estava a dizer a vossa colega, se as clulas so transplantadas no prprio individuo, so transplantadas, em indivduos jovens, crianas ou adolescentes, a possibilidade de ele ter desenvolvido a doena por factores genticos que j existiam nascena, muito elevada, e portanto a possibilidade de as clulas estarem a ser transplantadas tambm com a mesma mutao ou a mesma alterao que deu origem doena inicial. Portanto tambm por esse motivo os transplantes autologos no so recomendados.

Prof. Sobrinho Simes Portanto Srs. Drs. aquilo que os Srs. Drs. tm lido, h pra umas empresas privadas a fazer, uma aldrabice total, portanto por amor de Deus, vocs no conservem clulas do cordo embrionrio quando tiverem crianas, porque um disparate! Primeira coisa, no queiram saber o sexo do bb, s oito semanas. Esperem pelas dez, e vem com a eco-cardiografia, no precisam percebem? Querer saber o sexo s oito semanas um disparate, tpico da oferta das coisas que no so precisas. Pior ainda agora esta coisa de vocs guardarem as celulazinhas das vossas crianas, s garantido por quinze, vinte anos no ? Prof. Raquel: Reparem que agora existem vrias empresas, que criopreservam as clulas do sangue do cordo umbilical a menos 196graus, atravs de um processo muito sofisticado de preservao das clulas, durante quinze a vinte anos essas clulas esto disponveis num banco de clulas estaminais onde podem ser, se necessrio, depois ressuscitadas digamos, e utilizadas para terapias de um conjunto de doenas no prprio dador ou em pessoas que revelem compatibilidade.

Prof Sobrinho Simes Isto propaganda porque mentira! Esta coisa de um vasto... no nada. A nica coisa onde isto pode ser utilizado, teoricamente, era se a criana tivesse uma leucemia. Mas como a Raquel j disse se a criana tiver uma leucemia e vocs fizerem o transplante das suas prprias clulas do cordo umbilical, arriscam-se a que a criana volte a ter a leucemia. Portanto isto das maiores aldrabices que h. Primeira coisa, por isso preciso aceitar, uma aldrabice! Portugal est cheio destas "empresas vo-de-escada" a fazer isto. Agora segunda coisa. Isto no quer dizer que ns no devamos, e vocs como mdicos tm que fazer um esforo muito grande de presso sobre o governo, para ns termos bancos pblicos de 10

clulas do cordo umbilical para transplantes heterologos. Isso que importante! Aquilo que a gente vai ter que fazer que est a ser feito em todo o mundo, como dizia a Raquel, o grande problema do transplante terem poucas clulas, portanto o que esto a desenvolver tcnicas de expanso in vitro do numero de clulas, tiram-se as clulas do cordo umbilical e h processos in vitro de expanso daquelas clulas, de modo a aumentar o seu numero e assim permitir o transplante. Os mdicos em Portugal tem que ter um esprito crtico e o que est acontecer no comrcio de gentica vergonhoso. Prof. Raquel: A criao de um banco pblico de clulas do cordo umbilical teria de ser acompanhada de pesquisa e investigao em tcnicas de expanso dessas clulas. A Parte final da aula, sobre outro tipo de clulas estaminais, que no boas, so ms. So as clulas estaminais do cancro. um conceito que tem surgido nos ltimos anos com estudos que sugerem a presena destas clulas no cancro (estabelecendo semelhanas entre as clulas estaminais e as clulas do cancro). O cancro tem uma grande heterogeneidade de clulas, o que sugere que essas clulas deveriam resultar de uma clula estaminal, que depois poderia diferenciar-se em vrios tipos de clulas cancerosas, no fundo, o cancro seria um "tecido" anormal ao lado de um tecido normal. O facto de as clulas cancergenas acumularem mutaes tambm uma semelhana em relao as clulas estaminais, porque as clulas estaminais so as clulas dos tecidos que duram mais tempo. A maior parte das clulas adultas dos tecidos, morrem aps um tempo limitado, e portanto para essas clulas acumularem mutaes teriam que durar mais tempo. Da surge a ideia que o cancro poderia resultar de uma clula estaminal alterada e que as mutaes que so origem ao cancro ocorreriam nessas clulas estaminais, que depois se diferenciariam nos vrios tipos celulares que ocorrem no cancro. As experincias realizadas em ratinhos na dcada de 90, vieram demonstrar que realmente em alguns tecidos (cancro) resultariam de uma clula estaminal. O que se fez foi a partir de um tumor humano, dissociaram-se todas as clulas, obtiveram-se suspenses celulares em que a clula est isolada das restantes. Inocularam-se essas clulas em ratinhos e verificou-se que todos os ratinhos (quando as clulas no so seleccionadas) desenvolveram cancro. Agora, se essas clulas forem seleccionadas, se forem separadas umas das outras atravs da presena ou ausncia de determinados marcadores moleculares, foi possvel verificar que apenas algumas clulas, que produzem alguns marcadores que tm capacidade de originar cancro em ratinhos. Isto sugeriu fortemente, que apenas algumas clulas dentro de todas as clulas que existem num cancro que 11

tm capacidade de dar origem a esse mesmo cancro. Esta teoria foi inicialmente aplicada a leucemias, nomeadamente leucemia mieloide crnica, portanto sabe-se hoje que o modelo que est melhor caracterizado, que a leucemia mieloide crnica resulta de uma clula estaminal do cancro (ou clula estaminal leucmica) que uma clula rara na totalidade de clulas que constituem o cancro. E este modelo tem sido aplicado em tumores slidos, para verificar se o crescimento desses tumores se processa de acordo com a teoria da clula estaminal. Para que o modelo se confirme necessrio que uma minoria das clulas do cancro originado que d origem ao cancro nos ratinhos, portanto, as clulas estaminais do cancro tal como as clulas estaminais adultas de um tecido existem em baixo nmero, essas clulas tem de se conseguido distinguir atravs de molculas de superfcie, consegue-se actualmente separar grupos de clulas que produzem ou no produzem determinadas molculas de superfcie e dentro de um desses grupos caem as clulas estaminais, este um dos principais problemas actualmente, que no se consegue determinar quais os marcadores celulares especficos que vo permitir isolar essas clulas, e os tumores que se observam nos ratinhos tem de ser heterogneos tal como o tumor original, porqu? Porque s isso que vai demonstrar que est l uma clula estaminal que tem a capacidade de dar origem a todos os tipos celulares que existem num cancro, portanto aplicando esta metodologia a alguns tipos de tumores slidos (mama, crebro e mais recentemente colon-rectais) tem-se verificado que parecem ser originados a partir de clulas estaminais do cancro. O problema que ainda no existe um marcador molecular que distinga essas clulas estaminais. Um dos grandes objectivos perceber como que so essas clulas estaminais no cancro para o seu tratamento. Actualmente, a maior parte das terapias, so terapias que visam diminuir muito o tamanho do tumor, so terapias que diminuem a massa tumoral e que so mais ou menos inespecficas, que atacam vrias clulas, particularmente as clulas em proliferao. Diminuem muito a massa tumoral inicial mas depois esta volta a aparecer. Para perceber se um cancro resulta de uma clula estaminal e perceber qual essa clula, permite desenvolver alvos teraputicos especficos da clula estaminal do cancro, e que alteraria as terapias no sentido de apenas essas clulas, uma minoria das clulas ser atacada pela terapia. Inicialmente no haveria diminuio da massa tumoral mas a longo prazo seria um processo mais eficaz. Prof. Sobrinho Simes: Isto muito importante... Ns sabemos que o comportamento das clulas que provocam o cancro do tipo de uma clula estaminal, isto ns sabamos, e tambm sabamos que h duas hipteses, ou as clulas esto l (as clulas que do origem, so clulas estaminais que esto nos rgos desde que nascemos e que sofreram uma mutao), ou so clulas um pouco mais evoludas que sofrem uma regresso, voltam a ser stem-like e seriam essas que teriam agora a propriedade de 12

originar o cancro. Mas o outro exemplo mais interessante do ponto de vista prtico, porque as pessoas esto-se um bocado nas tintas para saber se as clulas estaminais que do origem ao cancro esto l desde que ns nascemos ou se so clulas adultas que regrediram, muito interessante do ponto de vista intelectual mas no nos resolve o problema prtico! Agora, isto sim! Se ns consegussemos tratar o cancro, atacando s as clulas progenitoras do cancro, ganharamos uma eficincia muito maior. Fim Pedimos imensas desculpas pelo atraso! Mas j c est mais uma aulinha de biopaologia! Ns optamos por fazer um desgravao integral da aula. Esperamos que vos faa muito jeito! Bom estudo! As partes da aula que esto a verde correspondem aos momentos em que o Prof. Sobrinho Simes falou! Sofia Castro Brbara Sousa

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