Amortiguadores, Buffers o Tampones El pH de los medios biolgicos es una constante fundamental para el mantenimiento de los procesos vitales.

La accin enzimtica y las transformaciones qumicas de las clulas se realizan dentro de unos estrictos mrgenes de pH. En humanos los valores extremos compatibles con la vida y con el mantenimiento de funciones vitales oscilan entre 6,8 y 7,8; siendo el estrecho margen de 7,35 a 7,45 el de normalidad. Los sistemas encargados de evitar grandes variaciones del valor de pH son los denominados amortigua dores, buffer, o tampones. Son por lo general soluciones de cidos dbiles y de sus bases conjugadas o de bases dbiles y sus cidos conjugados. Los amortiguadores resisten tanto a la adicin de cidos como de bases. Ecuacin de Henderson -Hasselbalch. Concepto de pK
+

La concentracin de H est vinculada a la naturaleza del electrolito dbil. Considerando un cido dbil, de modo genrico como HAc, su equilibrio de disociacin sera:
+

HAc <--------------------> Ac + H Aplicando la ley de accin de masas , la constante de equilibrio K ser:

+ +

K = ( Ac ) x ( H ) / (HAc ) despejando ( H ) K x (HAc )

+

( H ) = --------------------

( Ac ) aplicando logaritmos
+ -

log ( H ) = log K + log (HAc ) - log ( Ac ) multiplicando por -1

+ -

- log (H ) = - log K - log (HAc ) + log ( Ac ) Si hacemos que

+

- log ( H ) = pH - log K = pK Se obtiene la ecuacin de Henderson -Hasselbalch pH = pK + log ( base ) / ( cido ) Si en la ecuacin la concentracin de cido es igual a la de la base, el cociente es 1, siendo el log de 1 = 0, se tiene que pH = pK por tanto, se puede definir el pK como el valor de pH de una solucin amortiguadora en el que el cido y la base se enc uentran a concentraciones equimoleculares o al 50% cada una.

Tampones fisiolgicos Son los sistemas encargados de mantener el pH de los medios biolgicos dentro de los valores compatibles con la vida. Permitiendo con ello la realizacin de funciones bioqumicas y fisiolgicas de las clulas, tejidos, rganos, aparatos y sistemas. Segn su naturaleza qumica, los amortiguadores se clasifican en orgnicos e inorgnicos y, as mismo, atendiendo a su ubicacin, se distribuyen en plasmticos y tisulares. 1. Tampones orgnicos 1.1Las protenas y aminocidos como tampn Los aminocidos y protenas son electrolitos anfteros, es decir, pueden tanto ceder protones (cidos) como captarlos (bases) y, a un determinado pH (en su pI), tener ambos comportamientos al mismo tiempo. La carga depende del pH del medio. En un medio muy bsico se cargan ne gativamente, mientras que en el fuertemente cido lo hacen positivamente. Desde el punto de vista fisiolgico este tipo de amortiguador es resulta de especial inters a nivel tisular. 1.2. Tampn hemoglobina Es un tampn fisiolgico muy eficiente debido tanto al cambio de pK que experimenta al pasar de la forma oxidada a la reducida, como a la gran abundancia de esta protena en la sangre (15 % del volumen total sanguneo). La oxihemoglobina (pK= 7,16) es un cido ms fuerte que la desoxihemoglobina (pK = 7,71). Los valores de pK son tales que determinan que en la disociacin siguiente, el valor x sea, aproximadamente, 0,7.
+ + x 2

HbH + O

HbO

2+

xH

Esta propiedad de la hemoglobina, de cambiar su valor de pK, demuestra el efecto tampn, permite el transpor te de una determinada cantidad de CO liberada en los
2

tejidos. La hemoglobina oxigenada que llega a los tejidos se disocia liberando O , un

2

proceso que est favorecido por el estado de los tejidos (baja pO , menor pH y alta
2

pCO ).
2 + + 2

0,7H + HbO 2. Tampones inorgnicos 2.1. Tampn carbnico/bicarbonato

-

HbH

0,7

+O 6
2

Est constituido por H CO y HCO . Aunque su valor de pK (6,1) est algo alejado del
2 3 3

pH fisiolgico de la sangre (7,4), es un sistema muy eficaz debido a que: 1) La relacin

-

HCO / H CO es muy alta (20/1), lo que le proporciona una alta capacidad tampn
3 2 3

frente a los cidos; 2) es un sistema abierto, con lo que el exceso de CO puede ser
2 -

eliminado por ventilacin pulmonar de manera rpida; y 3) adems, el HCO

puede ser

eliminado por lo s riones mediante un sistema de intercambio con solutos. Respecto al origen y formacin de este sistema carbnico/bicarbonato, resaltaremos lo siguiente: En el plasma el CO , procedente del metabolismo celular, se encuentra como:
2

-CO disuelto, que seg n la ley de Henry es directamente proporcional a la presin

2

parcial del gas (P

3

CO2

-HCO , que es la fraccin ms importante, y

-Formando compuestos carbamnicos con los grupos NH de la hemoglobina.

2

Alrededor del 10% es transportado en el eritrocito e n forma de carbaminohemoglobina El CO disuelto es hidratado a H CO en una reaccin reversible y muy eficiente
2 2 3

catalizada por la anhidrasa carbnica: CO + H O

2 2

H CO
2 3

3 +

H CO
2

HCO + H
+

_______________________________ CO + H O
2 2 2

HCO + H
3

En este sistema acoplado, todo el CO disuelto es considerado como la forma cida del tampn (H CO ). La concentracin de CO disuelto (CO d) depender de su
2 3 2 2

constante de solubilidad y de la presin parcial de CO

-5 -1

2. 2

-5 CO2

solubilidad

= 3 x 10 M. mm Hg .As pues CO d = (3 x 10 ) . P
-

Aplicando la ecuacin de Henderson -Hasselbalch al tampn bicarbonato: pH = pK + log HCO / CO d

3 2

3 -5 CO2 3

pH = 6,1 + log HCO / (3 x 10 ) . P

2 2

El contenido total de CO sera igual al CO disuelto ms el HCO , esto es: 7

2 3

CO Total = CO d + HCO
2 2

Este contenido total de CO de una muestra de plasma se determina a partir de la medida del volumen de CO liberado por acidificacin con un cido fuerte. Lo que
2

ocurre al aadir cido es que desplazamos el equilibrio de disociacin hacia la izquierda, y al ser el sistema bicarbonato un sistema abierto, el CO formado se
2

desprende en forma de gas. Dado que el CO es un gas no ideal, 1 mmol ocupa 22,26
2

ml en condiciones estndar de presin y temperatura (0C y 760 mm Hg 101,33 kPa). La temperatura en el laboratorio suele ser de 22C y la presin atmosfrica de 750 mm Hg (100 kPa), por lo que corrigiendo para las condiciones estndar tendremos: V x 750/760 x 273/275 = ml CO en condiciones estndar.
CO2 2

ml CO en condiciones estndar/22 ,26 = mmol CO .

2 2

Teniendo en cuenta estas consideraciones, la ecuacin de Henderson -Hasselbalch para el tampn bicarbonato se puede escribir de la siguiente forma:
-

pH = 6,1 + log ( HCO / 0,0301 x pCO )

3 2

en donde 0,0301 hace referencia a los mmoles de CO disuelto por litro de plasma y
2

por mm de Hg. 2.2. Tampn fosfato

-

A pH fisiolgico, las especies del fosfato con capacidad de tamponar son H PO y

22 4

HPO

ya que su valor de pK es de 6,8. As pues, para el tampn fosfato:

2-

pH = 6,8 + log HPO

/ H PO
2

2-

A pH fisiolgico de 7,4, la concentracin de HPO

2 4

(un 80%) es 4 veces superior a la

de H PO (un 20%). As pues, el tampn fosfato es un sistema muy eficaz para amortiguar cidos. La concentracin de fosfato en la sangre es baja (2 mEq/L) por lo que tiene escasa capacidad de tamponar si lo comparamos con otros tampones (ej el bicarbonato). En cambio, a nivel intracelular, las concentraciones de fosfato son elevadas lo que le convierte en un tampn eficiente. Las grandes cantidades de fosfato dentro de las clulas corporales y en el hueso hacen que el fosfato sea un depsito grande y eficaz para amortiguar el pH.

Referencias

Isaac Tnez Fiana, Aurora Galvn Cejudo, Emilio Fernndez Reyes . pH y amortiguadores: Tampones fisiolgicos en pdf [En lnea] [fecha de consulta: 18 de Mayo del 2011]. Disponible en <www.uco.es/.../bioquimica.../06%20pH%20AMORTIGUADORES.pdf>. Colaboradores de Wikipedia. Tampn qumico [en lnea]. Wikipedia, La enciclopedia libre, 2011 [fecha de consulta: 27 de mayo del 2011]. Di sponible en <http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Tamp%C3%B3n_qu%C3%ADmico& oldid=46666197 >.