Revista de Ciencia y Tecnologa Direccin de Investigaciones - UNA

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RESIDUOS DE PESTICIDAS ORGANOS-CLORADOS EN POLLOS PARRILLEROS. Pedro Gustavo Castellani Rumich., Selma Ingrid Rosthoj Loenardi Facultad de Ciencias Veterinarias, Departamento de Nutricin Animal, Universidad Nacional de Asuncin, Paraguay. RESUMEN. En 1991 se demostr la existencia de residuos de pesticidas organoclorados en alimentos para animales. Los pollos consumen entre 2,2 y 2,5 Kg de alimento blanceado para producir 1 Kg. De carne, por lo tanto el tejido adiposo puede acumular residuos de pesticidas debido a la alimentacin intensiva. Hemos realizado el estudio sobre 102 muestras de grasa peritoneal de pollos. Se ha detectado que el 24% de las muestras contenan pesticidas organo-clorados, como por ejemplo HCH, HCH, DDT + metabolitos y Aldrin. Todas las muestras positivas halladas presentan una concentrcin ms baja que el L.M.R. (Lmite Mximo de Residuos) Las muestras del sector rural resultaron positivas en un 20% mientras que las del sector urbano es de 25%. Las mismas marcas de pollo se venden en el sector urbano y en el rural. Se debe seguir monitoreando este alimento debido a que el consumo de pollo ha aumentado ultimamente. INTRODUCCION La carne de pollo es otro de los productos de origen animal considerado como articulo de primera necesidad en la canasta familiar. Por los diversos usos que se le da en el arte culinario, participa como ingrediente de variados platos que acostumbra formar parte de la mesa paraguaya. El consumo de carne de pollo en nuestro pas en los ltimos aos, si bien no hay datos precisos de la existencia avcola, segn el censo de 1992, es de 13.000.000 de cabezas;ahora bien, si estimamos que el 20% de ellas representa a los pollos parrilleros, seria de 2.600.000. cabezas en un momento dado, pero teniendo en cuenta la duracin del ciclo que es de 60 das para obtener el pollo a termino, se estara vendiendo el 50% o sea 1.300.000. pollos al mes con un promedio de peso de 1.5 kg/cab, que hacen 1950 toneladas de carne por mes. De lo dicho mas arriba se desprende que anualmente se comercializan 23.400 toneladas que constituyen 5,58 kg de carne de pollo por abitante por ao, pero sabemos que el consumo es mayor en el sector urbano que en el sector rural. La contaminacin inaparente (con residuos de pesticidas rganos clorados) de los habitantes del pas, ha sido demostrados por Cardozo y colegas en 1991 habiendo hallado dichos residuos en leche humana, algunos de ellos sobrepasando el "lmite mximo permitido" (L.R.M.).

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Por otro lado Castellani y colegas (1991) demostraron la existencia de los mismos residuos en ingredientes para la fabricacin de alimentos balanceados para animales. La produccin de carne de pollo insume gran cantidad de balanceados, pues, se necesitan entre 2,2 y 2,5 kg de alimento para producir 1 kg. de carne, lo que hace que estos animales puedan acumular gran cantidad de grasa en poco tiempo y con ellas los pesticidas organoclorados que son liposolubles y bioacumulables. En los ltimos aos se ha incrementado la utilizacin de soja integral desactivada en la produccin avcola, lo que aumenta aun la posibilidad de que la carne de pollo contenga residuos de pesticidas, pues como se sabe es una oleaginosa con alto contenido en aceite y cultivado en tierras donde durante decenios se han utilizado pesticidas organoclorados. La importancia de este trabajo resalta a simple vista pues ayudar a detectar otra de las vas de intoxicacin inaparente. Por otro lado el conocimiento de nivel promedio de pesticidas en los productos de la canasta familiar ayudara a nutricionistas, dietologos y toxicologos, a elaborar recetas y as preservar la salud publica del pas.

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Revista de Ciencia y Tecnologa Direccin de Investigaciones - UNA Objetivos: A-Generales. Conocer las diferentes vas de intoxicacin humana inaparente con pesticidas organoclorados, en vista de colaborar en el mejoramiento de la Salud Publica del pas. B-Especficos. 1-Determinar que tipos de pesticidas organoclorados se encuentran en la carne de pollo. 2-Cuantificar cada uno de ellos y compararlos al limite mximo de residuos establecidos en el codex internacional. 3-Establecer el porcentaje de muestras positivas y la incidencia de cada tipo de organoclorados. MATERIALES Y METODOS. A-Muestreo Se ha tomado muestra de grasa peritoneal de pollos terminados, de granjas productoras de pollo, mensualmente, durante tres meses. Se ha comprado de mercados de la capital y del interior del pas, pollos con marca o sin marca, durante el mismo lapso ya citado. Las muestras han sido convenientemente identificadas mediante cdigos y envasadas en frascos de plsticos hermticamente cerrados y transportados en fri hasta el laboratorio. Luego estas eran almacenadas en un congelador a -18C, esperando su procesamiento. B-Extraccin de lpidos. La grasa peritoneal extrada durante el muestreo ha sido sometida a filtrado a un filtrado en caliente en vista a obtener una grasa limpia de otras impurezas y libre de agua. Para el efecto se

107 ha ubicado un embudo de vidrio sobre un frasco de precipitado, la grasa fue envuelta en un filtro N 5, de 12,5 cm. de dimetro, tipo Whatman y puesta sobre el embudo; a continuacin se introdujo por 4 horas en una estufa graduada en 80C. Las grasas as obtenidas han sido transvasadas en caliente en tubos de ensayo con tapas rosca y luego de ser bien identificadas, han sido almacenadas en un congelador. C-Metodologa Analtica. Se ha empleado el "Micrometodo de la Alumina" que a continuacin se describe. C-1.Materiales de Vidrio y aparatos: -Concentracin Kudernas de DANISH de 500ml dotadas de tubos colectores graduados de 10ml. -Columna cromatograficas de 300mm x 12mm dotadas de bochas superior de 50ml, con robinete de tefln y placa de vidrio poroso. -Bao maria. -Aire comprimido. -Cromatografo shimatsu e integrador Cromatopack CR3. C-2.Reactivos. -Alumina neutra grado de actividad Brockman I, malla 80/200. Calentar a 600C por 4 horas en mufla. Almacenar a 130C el recipiente abierto, desactivar la cantidad a usar al 5% (p/p) con agua destilada. Luego de enfriar a temperatura ambiente en recipiente cerrado, agitar vigorosamente, equilibrar durante la noche o como mnimo 4 horas, antes de usar. -p-metoxiazobenzeno, diluir 0,3 g eb 100ml de hexano. -Hexano destilado sobre vidrio. -Acetona destilada sobre vidrio.

Revista de Ciencia y Tecnologa Direccin de Investigaciones - UNA -Ether de petrleo 30-60 destilado sobre vidrio. -Grasa libre de plaguisidas. -Soluciones estndar de plaguisidas organoclorados de concentracin adecuada. D-Preparacin de la columna de alumina. Llenar la columna con 25 ml disolvente de elucin eter de petrleo o hexano. Agregar 10 g de alumina desactivada y dejar sedimentar. Drenar el solvente casi hasta el tope de la alumina. Recoger en el concentrador y descartar el solvente. E-Determinacin. Determinar la cantidad de solvente de elucin necesario para separar los plaguisidas de la grasa disolviendo 1ml de la solucin colorante en 0,2 g de grasa. Transferirla a la columna con pequeas porciones del solvente de la elucin, hasta totalizar 5 ml usando jeringa. Ajustar el caudal de la columna 1 gota/seg. recogiendo en una probeta. -Agregar mas solvente de elucin una vez que la siembra haya penetrado en la alumina, manteniendo el caudal. -Medir y registrar el volumen necesario para eluir la banda anaranjado brillante. A continuacin se 0,2 g de grasa en un pequeo de precipitado y luego se transfiere a la columna cromatografica, como se describi mas arriba. Se permite penetrar la muestra en la alumina y en ese momento se agrega 10ml menos del volumen, determinado de solvente de elusin. El eluato se recoge en Kuderna de Danish y se evapora en bao de agua

108 hasta 2 a 3 ml y luego a casi sequedad con corriente de nitrgeno, en ese momento se agrega 1 ml de isooctano y luego se engrasa con corriente de nitrgeno 1 ml. A continuacin se inyecta 1 alicuota aproximada en el cromatografo (1ul). F-Preparacin de estandard. Las soluciones estandares individuales han sido adquiridas de Supelco, en solucin de 2 ppm en isooctano, a partir de ello se han hecho un pool de pesticidas con una concentracin de 0,02ppm para cada uno y otro de 0,02ppm. Los pesticidas utilizados para el estandard son:alfa,Beta y gamma HCH, heptacloro, aldrin, dieldrin, endosulfan, T.D.E y D.D.T. G-Indice analtico. Como indicador analtico, se ha usado el test de recuperacin. Empleando para ello una grasa de pollo de campo, previamente testado, libre de pesticidas, al cual se adicionado aldrin y D.D.T en una proporcin de 0,5 ppm. Se ha realizado un test de recuperacin cada 20 muestras H-Determinacin cuantitativa. La determinacin cuantitativa se ha realizado con un cromatografo de gases de marca shimatzu dotado de un detector de captura electrnica, dos columnas de vidrios de 2,10 m x 3,2 mm empaquetadas con silicona OV1 al 2% sobre cromosorb WAW-DMCS,60 a 80 mesh y un integrador cromatopack CR3. Las condiciones de operacin fueron:Temperatura del detector250C, temperatura del horno

Revista de Ciencia y Tecnologa Direccin de Investigaciones - UNA 220C, temperatura de inyeccin 300C, flujo de nitrgeno 1ml/min y el volumen de inyeccin 2 ul. I-Anlisis cualitativo. Las muestras que resultaron positivas en el cromatografo se sembraron en placas de alumina, 60, G, neutra de tipo E;para confirmar. El reactivo de desarrollo Nhexano:acetona (98:2). El agente revelador, se obtuvo con la siguiente formula: 0,1 g de nitrato de plata, diluido en 1cc de agua destilada, al que se le agrega 20 cc de 2-fenoxyetanol y acetona en cantidad suficiente para llenar a volumen de 200cc. La siembra se hace con jeringa de Hamilton de 10 ul, entre 30 y 100 ul, corriendo la muestra con estandares puros de 2 ppm. RESULTADOS Para los efectos de la siguiente investigacin se considero como limite mximo admisibles (L.M.A) para los plaguisidas en estudios, las concentraciones que se detallan a continuacin: Alfa-HCH:0,100 ppm. Beta-HCH:0,100 ppm. Gamma-HCH:0,200 ppm. Aldrin:0,030 ppm. Dieldrin:0,300 ppm. Heptacloro:0,300 ppm. DDT + met:5,0 ppm. Los test de recuperacin que han sido realizados se mantuvieron por arriba de los 80%. El siguiente cuadro nos muestra los promedio, el desvo estndar y los

109 valores mximos de concentracin de los pesticidas detectados.

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CUADRO N1: Valores promedios y mximos de concentracin de residuos de pesticidas organoclorados en pollos parrilleros. ============================================================ en ppm ----------------------------------Pesticidas--------LMA-----valorX---DesvioStd--Valor Max. Alfa-HCH 0,1 0,032 0,021 0,085 Beta-HCH 0,1 ..... ..... ...... Gamma-HCH 0,2 0,038 0,29 0,096 Aldrin 0,03 0,016 0,006 0,026 * Dieldrin 0,3 0,072 ..... 0,072 Heptacloro 0,3 0,093 0,067 0,220 Endosulfan 0,172 0,111 0,532 DDT+Met 5,0 0,023 0,019 0,040 ============================================================== *=Una sola muestra positiva. influenciadas por consumir concentrados Sobre 102 muestras analizadas se ha ricos en aceites. encontrado 24 muestras positivas, Los alimentos para pollos por lo general conteniendo casi siempre mas de un contienen tortas de sojas, tortas de girasol, pesticida orga-clorado. granos de sojas desactivados, maz, trigo, En el caso de dieldrin, se ha encontrado etc solo en una muestra que ha podido Ultimamente es muy utilizado el cuantificarse, otras muestras mostraron endosulfan aparece en 18 muestras con trazas no cuantificables. otros pesticidas, si bien aqu aun no esta Todas las muestras que tenan trazas no prohibido, en los EUA, si, por haberse cuantificables, se le ha denominado No detectado elevadas concentraciones en los DETECTABLE y por lo tanto negativa. alimentos para humanos. Las muestras tomadas en grajas pequeas En el cuadro N2 se pueden observar los familiares que manejan cantidades de hasta porcentajes de muestras positivas 500 pollos por mes, por lo general comparadas al L.M.A. resultaron negativas, creemos que se deben a alimentos fabricados por ellos mismos, o a alimentos comerciales que no adicionan aceites vegetales o soja integral desactivada. En cuanto a las muestras que han resultados positivas, pensamos que estn

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CUADRO N2 Porcentajes de muestras positivas comparadas al LIMITE MAXIMO ADMISIBLE de residuos rgano-clorados en grasa de pollos parrilleros. ============================================================== Pesticidas-Nmuestras-L.M.A-% de Mustras-% muestra--Nmuestra Analizadas-L.M.A dentro del LMA arriba del Positi %negati-%Positi L.M.A --------------------------------------------------------------Alfa-HCH 102 0,1 88,78 11,22 0 11 Beta-HCH 102 0,1 -------- -- -Gamma-HCH 102 0,2 85,72 14,28 0 14 Aldrin 102 0,03 92,86 7,14 0 7 Dieldrin 102 0,3 101,02 0,98 0 1 Heptacloro 102 0,3 91,90 8,1 0 8 Endosulfan 102 -*- 88,35 17,65 -* 18 DDT + Met 102 5,0 94,90 5,10 0 5 ==============================================================* Sin datos. Todas las muestras que resultaron positivas estn dentro del L.M.A. De las 102 muestras, 30 correspondian al sector rural y 72 al sector urbano; Las muestras que se tomaron en pequeas granjas (total 18) estn consideradas del sector urbano, por estar ubicada dentro del cinturn y por comercializar sus productos en pequeos comercios en mercados municipales, generalmente sin marca. En el cuadro N3 se pueden observar los resultados por sectores.

CUADRO N3.Por porcentaje de muestras positivas segn sector. ==============================================================Sector --NMuestra-NPositiva-Nnegativa-% Positi-% Positiva sector del Total -----------------------------------------------------------Rural 30 6 24 20 5,9 URBANO 72 18 56 25 17,7 -----------------------------------------------------------TOTAL: 102 24 80 ---- 23,6

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Nos muestra que existe 5% de diferencia a favor del sector urbano, sin embargo debemos decir que las mismas marcas que se venden en la capital se venden tambin en Ciudad del Este, Encarnacin, Concepcin, Coronel Oviedo, Villarrica y San Ignacio. cabe entonces, pensar que los pollos vendidos sin marca, provenientes de pequeas granjas, as como los pollos de origen brasilero, podran marcar la pequea diferencia, aun tambin podra estar influenciada por el tamao de la muestra. Por otro lado, los resultados demuestra que el perodo de alimentacin de estos animales de 40 a 60 das, no son suficiente para acumular cantidades importantes de pesticidas, que pueden sobre pasar los alimentos admisibles; Estos adems concuerdan con la concentraciones de pesticidas encontradas en los alimentos para animales (Castellani y Col. 1991). CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES A pesar de observar niveles tolerables de pesticidas en carne de pollos, se debe tener cuidado en cuanto el habito alimentario del campesino y del hombre que vive en el sector urbano. No obstante los autores recomiendan, en base a resultados obtenidos, que una entidad de control se encargue de realizar un monitoreo constante sobre carne de consumo interno como de exportacin. Este estudio deber proseguir en otros productos de consumo masivos, para as obtener los niveles de pesticidas en los diferentes artculos de canasta familiar.

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